專利名稱：從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯c的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及從植物中提取有效成份的方法，具體涉及從銀杏葉中提取 分離銀杏內(nèi)酯C的方法。
(二)
背景技術：
銀杏樹又稱白果樹，屬裸子植物，是銀杏科銀杏屬的唯一生存的老樹 種之一，其葉和果具有重要的藥用價值。目前研究最多的是銀杏葉提取物， 它包括黃酮類化合物和銀杏內(nèi)酯類化合物。黃酮類化合物約有38種，總
含量為22-27%;銀杏內(nèi)酯類化合物包括銀杏內(nèi)酯和白果內(nèi)酯，總含量為 5.4-6.6%。銀杏內(nèi)酯主要包括銀杏內(nèi)酯A、 B、 C、 J和M單體；據(jù)文獻報 道，銀杏內(nèi)酯中各單體的藥物功能有一定差異，其中，銀杏內(nèi)酯A、 B對 治療心腦血管疾病具有顯著療效；而白果內(nèi)酯對治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病則藥效 獨特，為了提高其藥用治療效果，有時必須將各單體分離純化；由于白果 內(nèi)酯是倍半萜物質(zhì)，而銀杏內(nèi)酯A、 B、 C、 J、 M是二萜類物質(zhì)，它們的分 子結構較為相似，極性差異也很小，致使銀杏內(nèi)酯中的各單體的提取與分 離比較困難，例如申請?zhí)枮?3152921.6，名稱為《銀杏內(nèi)酯A、 B、 C提 取工藝及其制劑 >>的中國發(fā)明專利，公開了從銀杏葉或其提取物中提取 銀杏內(nèi)酯A、 B、 C單體的工藝及其制劑，其生產(chǎn)工藝為取銀杏提取物為 原料，經(jīng)聚酰胺柱吸附，提取液濃縮至小體積，析出粗品，或者以銀杏葉 為原料，以乙醇為溶劑提取2次，提取液濃縮，過濾，濾液先上聚酰胺柱， 收集流出液，聚酰胺柱用稀醇洗脫，洗脫液與流出液合并上大孔樹脂柱， 以乙醇洗脫，濃縮至小體積，析出粗品。粗品用甲醇-水進行重結晶，得 銀杏內(nèi)酯A、 B、 C。銀杏內(nèi)酯A、 B、 C可以用于制作滴丸制劑、顆粒劑、 膠囊劑。該提取方法得到的產(chǎn)品中銀杏內(nèi)酯A、 B、 C含量達70X，但實際 上，這種方法并未將銀杏內(nèi)酯A、 B、 C單體分別提取分離出來。
(三)

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明將公開一種提取所得率高、純度高的從銀杏葉中提取分離銀杏 內(nèi)酯C的方法。
本發(fā)明從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法，其步驟如下 l)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回
收乙醇，得到濃縮后的提取液；
稱取一定量的銀杏葉，可先用體積濃度為60-80%的乙醇在50-7(TC時
對銀杏葉提取卜3個小時，其中，銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量乙醇的體積=1: 8-10;將銀杏葉分離出來，再用體積濃度為30-55%的乙醇 在50-7(TC時對銀杏葉提取l-3個小時，其中，銀杏葉與乙醇的配比按銀
杏葉的重量乙醇的體積=1: 6-8;再將銀杏葉分離出來，用體積濃度為 10-2596的乙醇在50-70。C時對銀杏葉提取l-3個小時，其中，銀杏葉與乙 醇的配比按銀杏葉的重量乙醇的體積-l: 5-7;合并提取液，回收乙醇， 將提取液濃縮至銀杏葉重量的8-10倍體積；
2) 向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸
'可向濃縮液中加入等體積的乙酸乙酯萃取， 一般來說，萃取3次所達 到的效果較好；
3) 將步驟2)所得浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗 脫，所得洗脫液回收乙醇后，再用乙醇結晶得到銀杏內(nèi)酯類化合物；
所述選擇性極性無孔吸附樹脂柱的型號可為ADS-15,或ADS-17，或 ADS-F8;將步驟2)所得浸膏用50-200倍于其重量的水稀釋后上柱，可先 用水洗，直至流出液無色；然后再用體積濃度為50-70%的乙醇洗脫，所述 洗脫劑的體積用量可為上述浸膏重量的30-60倍；將收集得到的洗脫液回 收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為50-80%的乙醇為溶劑結晶，所得結 晶即為銀杏內(nèi)酯類化合物；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己垸和乙酸乙酯的混合液 洗脫，收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；
所述正己烷和乙酸乙酯的混合液中正己烷和乙酸乙酯的體積比最好 為9: 1-2: 8;在洗脫的過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待 溶劑峰出完后的第五個峰處開始收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫 液；
5) 回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用乙醇結晶，得到銀杏內(nèi) 酉旨C。
回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用體積濃度為20-40%的乙 醇對其結晶，所得結晶即為銀杏內(nèi)酯C單體。 本發(fā)明的優(yōu)點
本發(fā)明采用由高到低不同濃度的乙醇對銀杏葉進行提取，使銀杏內(nèi)酯 C單體的提取率提高了 10%以上；本發(fā)明中還采用了特殊的選擇性極性無 孔吸附樹脂進行除雜，可除掉大部分影響硅膠柱分離的雜質(zhì)，實現(xiàn)了一次 上柱即可分離得到銀杏內(nèi)酯C單體，且其純度達到99%以上；與現(xiàn)有技術 相比，本發(fā)明提供的方法工藝簡單、生產(chǎn)成本低，所得產(chǎn)品純度高，更易 于產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)。
具體實施例方式
實施例l1) 取10千克銀杏葉，用100升體積濃度為80%的乙醇在5(TC時對銀 杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用60升體積濃 度為55%的乙醇在7(TC時對銀杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉 分離出來；再用50升體積濃度為25%的乙醇在5(TC時對銀杏葉提取1小 時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回 收乙醇，將提取液濃縮至100升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入100升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機 相，回收有機相后濃縮得到500克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加50倍體積水稀釋后上ADS-15柱，先用水洗， 直至流出液無色，再用15升體積濃度為50%的乙醇洗脫，收集洗脫液，回 收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為50%的乙醇結晶，得到70克銀杏內(nèi) 酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己垸和乙酸乙酯的混合液 進行梯度洗脫，其中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫
過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第五個峰
處開始收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；
5) 回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用體積濃度為30%的乙醇 對其結晶，得到銀杏內(nèi)酯C單體4.72克。
實施例2
1) 取50千克銀杏葉，用400升體積濃度為60%的乙醇在70'C時對銀 杏葉提取3小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用400升體積濃 度為30%的乙醇在7(TC時對銀杏葉提取3小時，用200目的濾布將銀杏葉 分離出來；再用300升體積濃度為10%的乙醇在7(TC時對銀杏葉提取3小 時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回 收乙醇，將提取液濃縮至500升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入500升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機 相，回收有機相后濃縮得到1. 5千克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加200倍體積水稀釋后上ADS-17柱，先用水 洗，直至流出液無色，再用60升體積濃度為70%的乙醇洗脫，收集洗脫液， 回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為70%的乙醇結晶，得到233克銀 杏內(nèi)酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液
進行梯度洗脫，其中，正己垸和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫
過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第五個峰 處開始收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；
5) 回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用體積濃度為25%的乙醇 對其結晶，得到銀杏內(nèi)酯C單體3.47克。實施例3
1) 取40千克銀杏葉，用280升體積濃度為70%的乙醇在7CTC時對銀 杏葉提取1小時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；再用280升體積濃 度為50%的乙醇在6(TC時對銀杏葉提取2小時，用200目的濾布將銀杏葉 分離出來；再用280升體積濃度為20%的乙醇在7(TC時對銀杏葉提取2小 時，用200目的濾布將銀杏葉分離出來；合并三次提取所得的提取液，回 收乙醇，將提取液濃縮至400升濃縮液；
2) 向濃縮液中加入400升乙酸乙酯萃取3次，合并萃取分離出的有機 相，回收有機相后濃縮得到1.2千克浸膏；
3) 將步驟2)中所得浸膏加100倍體積水稀釋后上ADS-F8柱，先用水 洗，直至流出液無色，再用70升體積濃度為60%的乙醇洗脫，收集洗脫液， 回收乙醇，濃縮至浸膏，再用體積濃度為80%的乙醇結晶，得到225克銀 杏內(nèi)酯類化合物晶體；
4) 將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液
進行梯度洗脫，其中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8;在洗脫
過程中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，待溶劑峰出完后的第五個峰 處開始收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；
5) 回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用體積濃度為40%的乙醇 對其結晶，得到銀杏內(nèi)酯C單體17.68克。
權利要求
1、從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法，其步驟如下1)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回收乙醇，得到濃縮后的提取液；2)向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸膏；3)將步驟2)所得浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，所得洗脫液回收乙醇后，再用乙醇結晶得到銀杏內(nèi)酯類化合物；4)將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；5)回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用乙醇結晶，得到銀杏內(nèi)酯C。
2、 根據(jù)權利要求1所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法， 其特征在于步驟1)中，先用體積濃度為60-80%的乙醇對銀杏葉進行提 ??；然后用體積濃度為30-55%的乙醇對銀杏葉進行提取；再用體積濃度為 10-25%的乙醇對銀杏葉進行提取。
3、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方 法，其特征在于步驟1)中，所述提取的溫度為50-7(TC。
4、 根據(jù)權利要求2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法， 其特征在于步驟l)中，第一次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的重量乙醇的體積=1: 8-10;第二次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉的 重量乙醇的體積二l: 6-8;第三次提取時銀杏葉與乙醇的配比按銀杏葉 的重量乙醇的體積=1: 5-7。
5、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法，其特征在于步驟2)中，所述加入的乙酸乙酯的體積與濃縮后的提取 液的體積比為l: 1，萃取的次數(shù)為3次。
6、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方 法，其特征在于步驟3)中，所述選擇性極性無孔吸附樹脂型號為ADS-15， 或ADS-17，或ADS-F8。
7、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方 法，其特征在于步驟3)中，所述洗脫用乙醇的體積濃度為50-70%。
8、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方 法，其特征在于步驟3)中，所述結晶用乙醇的體積濃度為50-80%。
9、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C方法， 其特征在于步驟4)中，所述正己垸和乙酸乙酯混合液中，正己烷和乙酸乙酯的體積比為9: 1-2: 8。
10、 根據(jù)權利要求1或2所述的從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法，其特征在于步驟4)中，以蒸發(fā)光散射檢測器在線檢測定位，收集洗脫液。
全文摘要
本發(fā)明將公開一種從銀杏葉中提取分離銀杏內(nèi)酯C的方法，其步驟如下1)取銀杏葉，用由高到低不同濃度的乙醇進行提取，合并提取液，回收乙醇，得到濃縮后的提取液；2)向濃縮后的提取液中加入乙酸乙酯萃取，回收有機相后濃縮至浸膏；3)將步驟2)所得浸膏稀釋后上選擇性極性無孔吸附樹脂柱，用乙醇洗脫，所得洗脫液回收乙醇后，再用乙醇結晶得到銀杏內(nèi)酯類化合物；4)將銀杏內(nèi)酯類化合物結晶上硅膠柱，用正己烷和乙酸乙酯的混合液洗脫，收集洗脫液，得到富集銀杏內(nèi)酯C的洗脫液；5)回收步驟4)中收集的洗脫液中的溶劑，再用乙醇結晶，得到銀杏內(nèi)酯C單體。本發(fā)明提供的方法工藝簡單、生產(chǎn)成本低，所得產(chǎn)品純度高，更易于產(chǎn)業(yè)化的生產(chǎn)。
文檔編號A61K36/16GK101412722SQ200710050239
公開日2009年4月22日 申請日期2007年10月15日 優(yōu)先權日2007年10月15日
發(fā)明者唐江明, 孫莉莉, 李振志, 羅增桂 申請人:桂林市振達生物科技有限責任公司