專(zhuān)利名稱(chēng)：：波棱酮的醫(yī)藥用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及化合物波棱酮的醫(yī)藥用途，屬于化學(xué)藥物領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：波棱瓜子系葫蘆科植物波棱瓜丑e/pW仍;;eivw"/Mcflrf/germWall.的干燥成熟種子，是一種常用藏藥，已被《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》藏藥(第一冊(cè))收載。波棱瓜子味苦，性寒，能清腑熱，膽熱，具有清熱解毒、去火降熱、助消化作用，用于治療肝熱、黃疸型傳染型肝炎等。對(duì)波棱瓜子化學(xué)成分的研究有，國(guó)外KaouadjiMourad等人研究報(bào)道其中含有苯呋喃類(lèi)化合物波棱醛(Herpetal)，波棱醇(Herpetoriol);木脂素類(lèi)化合物木脂素二聚物(Herpetol)，木脂素三聚物(Herpetrione),木脂素四聚物(Herpetetradione，Herpetetrone)，木脂素五聚物(Herpepentol)等。國(guó)內(nèi)袁海龍等從波棱瓜子中分離得波棱素，張梅等從波棱瓜子中分離得波棱酮，去氫雙松柏醇藏藥波棱瓜子中一個(gè)新的倍半降木脂素.藥學(xué)學(xué)報(bào)(ActaPha腦ceuticaSinica).2006，41(7):659-661。目前尚未見(jiàn)波棱酮的醫(yī)藥用途的報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供波棱酮在制備抗肝損傷、抗肝癌等藥物中的用途。尤其是在制備治療化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的肝損傷藥物中的用途。本發(fā)明還提供了一種抗肝損傷或抗肝癌的藥物，其特征在于它是由波棱酮為活性成分加上藥學(xué)上可接受的輔料制備而成的制劑。本發(fā)明從波棱瓜子的乙酸乙酯提取物中分離得到了波棱酮，根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和光譜數(shù)據(jù)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。通過(guò)體外細(xì)胞試驗(yàn)，研究波棱酮對(duì)二甲基亞砜(DMSO)和四氯化碳(CCl4)引起的肝細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。結(jié)果顯示，受試藥物波棱酮對(duì)DMSO和CCl4所造成的肝損傷有細(xì)胞保護(hù)作用，細(xì)胞存活率和造模空白組有顯著性差異。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1波棱酮的制備取波棱瓜子干燥粉碎樣品10kg，用石油醚脫脂后，再用95V。乙醇于水浴中加熱回流提取(3xlOL)，每次2小時(shí)，減壓蒸餾除去乙醇得流浸膏約614g。將此流浸膏加適量石英沙拌勻后，置于索氏提取器中，依次用石油醚(沸程609(TC)、氯仿、乙酸乙酯、95。/。乙醇加熱提取，提取液減壓回收后得氯仿提取物27g，乙酸乙酯提取物32g,乙醇提取物195g。取乙酸乙酯提取物20g經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-甲醇梯度洗脫。氯仿-甲醇(99:1)洗脫部分再經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-丙酮(1:1)洗脫部分經(jīng)過(guò)重結(jié)晶得波棱酮。分子式C29H3()09，分子量為522;淡黃色針晶，紫外光下觀察無(wú)熒光，mpl36.5138°C;EI-MSm/z:522(6.8)，504(2.4)，151(100)，137(5.8)，28(33.5);高分辨質(zhì)i普(HRESI-MS)m/z:545.1794(M+Na+，計(jì)算值545.1782);UV(CH3OH)lmaxnm:226，278，308;IR(KBr)vcm3367(OH)，1669(C=0),1601-1428(ArC=C)，1277(Ar-OH),1027-1335(C-O)，872-708(Ar-C);^NMR(600MHz,DMSO)Sppm:9.98(IH，s,4-OH),8.93(IH，s,4'隱OH)，8,69(1H，s，4'-OH)，7.59(1H，dd，J=8.2，1.8Hz，H-6)，7.51(IH，d，J=1.8Hz，H2)，6.88(1H，d，J=1.6Hz，H-2〃)，6.85(IH，d，J=8.2Hz，H-5)，6.82(IH，d,J=1.5Hz，H-2')，6.75(IH，dd，J=8.2，1.6Hz，H-6')，6.72(1H，d，J=8.2，H-5〃)，6.71(1H，d，J=1.6Hz，H-6')，4.60(IH，d，J=4.4Hz，H扁7')，4.58(1H，d,J=4.4Hz，H-7')，4.16(2H,s，H-8)，4.10(2H,m,H-9'aandH-9'a)，3.81and3.80(each3H，s，3-OCH3and3'-OCH3),3.76(3H，s，3-OCH3)，3.70(2H,m，H-9'bandH-9'b)，3.02(2H，m，H-8'andH-8');l3CNMR(150MHz,DMSO)Sppm:196.1(C-7)，152.0(C-4),147.98(C-3〃)，147.87(C-3),147.79(C-3),146.4(C-4')，143.8(C-4')，132.7(C-l')，131.9(C-l')，128.8(C-l)，123.5(C-6)，122.8(C-5),121.0(C-6')，119.0(C-6')，115.6(C-5〃)，115.4(C-5)，112.0(C-2)，110.9(C-2)，108.8(C-2')，85.65and85.60(C-7'andC-7〃)，71.40and71.33(C-9'andC-9'),56,3(3-OCH3)，56.1(3-OCH3and3〃-OCH3),54.1(C-8'andC-8〃)，39.9(C同8)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>實(shí)施例2波棱酮對(duì)DMS0損傷大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用采用體外培養(yǎng)法得到肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞用DMEM分散，細(xì)胞計(jì)數(shù)不得少于2xl0S個(gè)/ml，細(xì)胞活力大于90%。將分散的細(xì)胞加入96孔板，每空80|li1。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置3組，除空白對(duì)照組外，包括造模組和給藥組每空加入終濃度為8mmol/L的DMSO，造肝細(xì)胞損傷模型；給藥組加入波棱酮，濃度為0.6mg/ml，放入二氧化碳孵箱中孵化24h。將細(xì)胞于37°C，5%C02孵箱培養(yǎng)24小時(shí)后，加入MTT50nK0.25毫克/ml),37°C，5%002孵箱培養(yǎng)分別于4小時(shí)，吸凈培養(yǎng)液后再加入DMSO150ftl中止反應(yīng)，充分震蕩后用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值。并根據(jù)OD值計(jì)算細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率=藥物處理細(xì)胞ODl/藥物未處理細(xì)胞[ODxl00y。。表1波棱酮對(duì)DMSO損傷肝細(xì)胞存活率的影響組別均值±標(biāo)準(zhǔn)差P值存活率(100%)空白對(duì)照組0.203±0.01▲100造模空白組0.006±0.01★3.0波棱酮0.189±0.07★▲93.1與空白對(duì)照組比較，"女"表示p〈0.01;和造模空白組比較，"A"表示p《0.01。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，波棱酮能明顯提高DMSO損傷肝細(xì)胞存活率。實(shí)施例3波棱酮對(duì)CCL損傷大鼠肝細(xì)胞的保護(hù)作用采用體外培養(yǎng)法得到肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞。將肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞用DMEM分散，細(xì)胞計(jì)數(shù)不得少于2xl()s個(gè)/ml，細(xì)胞活力大于卯％。將分散的細(xì)胞加入96孔板，每空80^1。實(shí)驗(yàn)共設(shè)置6組，除空白對(duì)照組外，包括造模組和給藥組每空加入終濃度為8mmol/L的CC14，造肝細(xì)胞損傷模型；給藥組加入波棱酮，濃度為0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml，放入二氧化碳孵箱中孵化24h。將細(xì)胞于37°C，5。/oC02孵箱培養(yǎng)24小時(shí)后，加入MTT50jiK0.25毫克/ml)，37°C，5。/。C02孵箱培養(yǎng)分別于4小時(shí)，吸凈培養(yǎng)液后再加入DMSO中止反應(yīng)，充分震蕩后用酶標(biāo)儀測(cè)定OD值。并根據(jù)OD值計(jì)算細(xì)胞存活率。細(xì)胞存活率=藥物處理細(xì)胞[ODj/藥物未處理細(xì)胞[OD]xi00。/。。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>與空白對(duì)照組比較，"女"表示pO.01;和造?？瞻捉M比較，"A"表示p〈0.01.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，波棱酮能明顯提高CCl4損傷肝細(xì)胞存活率?？傊?，本發(fā)明首次報(bào)道波棱酮在制備抗肝損傷、抗肝癌等藥物中的用途，尤其是在制備治療化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的肝損傷藥物中的用途。為臨床治療肝損傷、肝癌提供了一種新的選擇。權(quán)利要求1、波棱酮在制備抗肝損傷或抗肝癌的藥物中的用途。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于所述用途是波棱酮在制備治療化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的肝損傷藥物中的用途。3、抗肝損傷或抗肝癌的藥物，其特征在于它是由波棱酮為活性成分加上藥學(xué)上可接受的輔料制備而成的制劑。全文摘要本發(fā)明涉及化合物波棱酮的醫(yī)藥用途，首次公開(kāi)了波棱酮在制備抗肝損傷、抗肝癌等藥物中的用途，尤其是在制備治療化學(xué)物質(zhì)導(dǎo)致的肝損傷藥物中的用途。本發(fā)明還提供了以波棱酮為活性成分的治療肝損傷、抗肝癌的藥物。為臨床治療肝損傷、肝癌提供了一種新的選擇。文檔編號(hào)A61P1/00GK101313901SQ20071004920公開(kāi)日2008年12月3日申請(qǐng)日期2007年5月29日優(yōu)先權(quán)日2007年5月29日發(fā)明者梅張,張洪彬,董小萍,陳思敏,陳胡蘭申請(qǐng)人:成都中醫(yī)藥大學(xué)