專利名稱：具有降血糖活性的中藥組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種具有降血糖活性的中藥組合物。特別是一種由葛根、虎杖和桑葉提取物組成的具有降血糖活性的中藥組合物。
背景技術(shù)：
糖尿病(指非胰島素依賴型，II型糖尿病)的基本病理是體內(nèi)胰島細(xì)胞不能正常分泌胰島素，造成胰島素相對(duì)或絕對(duì)不足，從而引起碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)的代謝紊亂，不能對(duì)抗血糖升高，產(chǎn)生高血糖、糖尿和糖耐量下降等現(xiàn)象。長(zhǎng)期的高血糖，會(huì)并發(fā)嚴(yán)重的糖尿病并發(fā)癥，如致盲、腎臟衰退、神經(jīng)受損、動(dòng)脈粥樣硬化等，程度嚴(yán)重時(shí)，不但影響生活質(zhì)量，甚至致殘，致死。
高血糖的發(fā)生可能存在多種機(jī)制，普遍認(rèn)為的機(jī)制是內(nèi)分泌紊亂。但從理論上推斷，引起高血糖的最直接原因是消化系統(tǒng)對(duì)葡萄糖吸收速度大于對(duì)葡萄糖的代謝速度。遺憾的是人們往往忽視從消化系統(tǒng)的角度去研究糖尿病的發(fā)病機(jī)理，相反地只是把消化系統(tǒng)出現(xiàn)的異常改變作為糖尿病的結(jié)果去研究。對(duì)糖尿病的病因和發(fā)病機(jī)理認(rèn)識(shí)的局限性，是導(dǎo)致糖尿病至今臨床治療效果不理想及缺乏根治性措施的原因之一。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種具有降血糖活性的藥物組合物。
藥理研究發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)藥物和植物例如虎杖，桑葉的提取物具有較強(qiáng)的抑制α-糖苷酶活性的作用，而控制消化系統(tǒng)中糖苷酶的活性，可有效控制淀粉類物質(zhì)的降解速度，從而延緩機(jī)體對(duì)葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成分的吸收，使機(jī)體一天的血糖濃度平穩(wěn)，有效控制血糖濃度的波動(dòng)，防止了經(jīng)常的高血糖負(fù)荷對(duì)胰島細(xì)胞的損害。胃腸功能障礙也是糖尿病患者的一個(gè)普遍現(xiàn)象，而傳統(tǒng)藥物大黃具有增強(qiáng)胃腸運(yùn)動(dòng)和促進(jìn)膽汁分泌的作用，能有效緩解糖尿病性胃輕癱。
葛根(Radix Puerariae)為豆科植物野葛的根，主要功能解表退熱，生津、消渴、麻疹不透、熱痢、泄瀉等。葛根提取物中的有效藥物成分葛根素(puerarin)是一種黃酮苷，化學(xué)名8-C-β-D-葡萄糖基-7，4′-二羥基-異黃酮。具有改善脂肪細(xì)胞的胰島素抵抗，是一種良好的外源性氧自由基清除劑。臨床上主要用于冠心病、高血壓、高黏血癥、腦梗死、糖尿病、青光眼、缺血性視神經(jīng)病變等眼科疾病、突發(fā)性耳聾等。
桑葉(Folium Mori)為?？?Moraceae)植物桑Morus alba L.的干燥葉。落葉灌木或小喬木。功能主治疏散風(fēng)熱，清肺潤(rùn)燥，清肝明目。用于風(fēng)熱感冒，肺熱燥咳，頭暈頭痛，目赤昏花。桑葉多糖是一種有效的a-糖苷酶抑制劑。研究發(fā)現(xiàn)，桑葉的甲醇提取物和水提物對(duì)四氧嘧啶高血糖小鼠表現(xiàn)出明顯的降血糖作用。能阻止從飲食中攝人的淀粉和葡萄糖的高血糖反應(yīng)。研究證實(shí)，多糖是桑葉中主要的降血糖活性成分。桑葉總多糖在降低血糖同時(shí)，顯著提高胰島素水平，是一種有效的a-葡萄糖苷酶抑制劑。
虎杖Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.系蓼科植物，其藥用部分為根莖。功能主治祛風(fēng)利濕，散瘀定痛，止咳化痰。用于關(guān)節(jié)痹痛，濕熱黃疸，經(jīng)閉，癥瘕，咳嗽痰多，水火燙傷，跌撲損傷，癰腫瘡毒?；⒄群卸喾N藥理活性成分，其有效藥物成分大黃素可防治STZ(鏈脲菌素)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠的早期腎臟損害，其機(jī)制可能抑制ET-1(內(nèi)皮素)等的合成與釋放，達(dá)到降血糖及改善糖尿病并發(fā)癥的作用。
以上三種成分，均具有治療糖尿病的作用，但都有各自的局限性。而中藥的配伍或有效部位的組合往往可以產(chǎn)生互補(bǔ)和協(xié)同增效的作用。本發(fā)明從分析糖尿病病因入手，針對(duì)糖尿病發(fā)生、發(fā)展過程中消化系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的病理變化特點(diǎn)，從中藥中篩選作用特點(diǎn)明確，臨床療效顯著，經(jīng)配伍后可取長(zhǎng)補(bǔ)短、提高療效的降血糖的中藥組合藥物。
根據(jù)上述機(jī)理。本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種具有降血糖活性的中藥組合物，其特征在于該組合物的組成及質(zhì)量比為虎杖提取物∶桑葉提取物∶葛根提取物＝0.5～3∶1∶0.5～4；其中，所述的虎杖提取物，其有效藥物成分為虎杖大黃素，重量百分含量為45～55％；所述的桑葉提取物，其有效藥物成分為桑葉多糖，重量百分含量為50～70％；所述的中藥葛根提取物，其有效藥物成分為葛根素，重量百分含量為35～49％。
上述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
上述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備降低餐后血糖藥物中的應(yīng)用。
上述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用。
上述葛根提取物中的有效藥物成分葛根素，提取方法可以根據(jù)已有文獻(xiàn)報(bào)道的方式，以葛根為原料，葛根水提醇沉后，經(jīng)聚酰胺柱層析，以水洗脫、濃縮、放置、析出葛根素，所得到的葛根提取物中有效藥物成分葛根素的重量百分含量在35-49％左右。
上述虎杖提取物中的有效藥物成分為大黃素，提取方法可以根據(jù)已有文獻(xiàn)報(bào)道的方式，虎仗藥材經(jīng)粉碎加工成粗顆粒，以10％硫酸水溶液和氯仿為溶劑，對(duì)虎杖粗粉進(jìn)行熱回餾提取，提取物揮去溶劑后，用苯溶解，常壓過濾后，濾液拌以層析硅膠，風(fēng)干成均勻粉末，依次以苯(分析純)、乙酸乙酯∶苯(體積比為2∶8)為洗脫劑進(jìn)行硅膠柱層析分離，所得虎杖提取物中有效藥物成分大黃素的重量百分含量在45％-55％。
上述桑葉提取物中的有效藥物成分桑葉總多糖，提取方法可以根據(jù)已有文獻(xiàn)報(bào)道的方式，桑葉干制品經(jīng)過粉碎、過篩后，加入一定體積無水乙醇，放置過夜，然后80℃回流處理2h，去除脂溶性成分。加入去離子水使溶液中乙醇濃度達(dá)到80％，在50℃水浴中回流4h，以除去桑葉中單糖、雙糖、低聚糖、苷類、生物堿、氨基酸等物質(zhì)、回流完畢，離心分離取濾渣，然后加入去離子水，恒溫水浴中進(jìn)行浸提，過慮后取濾液，經(jīng)過減壓濃縮后加入95％乙醇醇析，離心取沉淀，無水乙醇洗滌沉淀，所得到桑葉提取物中的有效藥物成分桑葉總多糖的重量百分含量大于50％。
本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理論及中藥現(xiàn)代化特點(diǎn)，并針對(duì)糖尿病的病因和發(fā)病機(jī)理找到一種療效確切、安全可靠的中藥有效藥物成分的組合藥物，使糖尿病真正成為一種可以治愈的疾病。
本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理及糖尿病病因和發(fā)病機(jī)理，經(jīng)酶學(xué)試驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廣泛篩選，選取了以上三種中藥及其有效藥物成分，獲得了葛根提取物、虎杖提取物和桑葉提取物三者的比率為0.5～3∶1∶0.5～4的最佳科學(xué)配比和組合而成的中藥組合藥物。本藥物具有功能互補(bǔ)、協(xié)同增效的作用，其組合后的降血糖作用效果顯著優(yōu)于單一有效藥物成分。
對(duì)組合物的藥效研究證實(shí)組合物能有效調(diào)控小腸刷狀緣上各種α-葡萄糖苷酶的活性，阻滯多糖、寡糖和雙糖等分解成單糖的速度，使血糖波動(dòng)幅度減小，從而防止了經(jīng)常的高血糖負(fù)荷對(duì)胰島細(xì)胞的損害；組合物對(duì)健康小鼠血糖亦有影響，提示其具有刺激胰島素釋放作用或胰島素樣作用；經(jīng)對(duì)其體內(nèi)降血糖活性、超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)濃度進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)本藥物組合均能降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖和丙二醛濃度，并提高超氧化物岐化酶活性。SOD活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA的高低有間接反應(yīng)了減輕機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，兩者結(jié)合反應(yīng)了胰島β細(xì)胞損傷程度，說明本發(fā)明的中藥藥物組合不僅可以降低血糖而且可以修復(fù)受損傷的β細(xì)胞的功能或降低機(jī)體對(duì)胰島素的拮抗性，從而進(jìn)一步延緩糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生。
與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明具有如下顯而易見的特點(diǎn)和突出優(yōu)點(diǎn)1.從分析糖尿病病因入手，針對(duì)糖尿病發(fā)生、發(fā)展過程中消化系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的病理變化特點(diǎn)，從中藥中篩選有效藥物成分并根據(jù)藥理原理科學(xué)配伍而成的具有作用部位明確，療效確切，經(jīng)配伍后可取長(zhǎng)補(bǔ)短、協(xié)同增效的治療糖尿病的中藥組合藥物。
2.本發(fā)明的中藥組合藥物由天然原料提取物所含的有效藥物成分經(jīng)科學(xué)組合而成，具有組成簡(jiǎn)單、毒副作用小、成本低廉的特點(diǎn)?？朔穗p胍類和磺脲類口服降糖藥易產(chǎn)生低血糖、乳酸中毒、脂代謝紊亂、胰臟功能損害等毒副作用的缺點(diǎn)。
本發(fā)明的中藥組合物中單一提取物的有效藥物成分(即中藥有效部位)明確，因此，有效藥物成分的提取方法除上述所提到的方法外，還包括本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟知的分離和提純葛根素、虎杖大黃素和桑葉多糖的常規(guī)方法或普通技術(shù)。
將上述有效藥物成分與藥物中可以接受的常用的輔助成分按照相應(yīng)的制藥工藝，所制成的口服型藥物制劑，均具有本發(fā)明所述的降血糖生理效應(yīng)。


圖1為α-糖苷酶抑制率和抑制劑量之間的關(guān)系圖。
具體實(shí)施例方式以下將結(jié)合實(shí)施例形式，對(duì)本方明的上述內(nèi)容作進(jìn)一步說明。
實(shí)施例一糖苷酶活性試驗(yàn)藥物組合物的重量百分配比虎杖提取物(大黃素)∶桑葉提取物(桑葉多糖)∶葛根提取物(葛根素)＝1∶1∶1，其中葛根素的重量百分含量為35％，桑葉多糖和大黃素的重量百分含量均大于50％。按上述比例分別稱取虎杖提取物大黃素250mg、桑葉提取物桑葉多糖250mg、葛根提取物葛根素250mg，溶解于750mL水(加入少量二甲亞砜助溶)中，配成10mg/mL濃度的溶液。測(cè)定方法根據(jù)Tremblay等(Pierre C，Roland R Tremblay.The Journal of Clinical Chemistry，1978，24208～211)的方法，即依次加入磷酸鉀緩沖液(PH6.8)、20uL 1mg/mL還原型谷胱甘肽、10uL 0..0167U/mL α-葡萄糖苷酶和一定量抑制劑溶液(10mg/mL)，37℃保溫10min后，加入10uL 0.116M PNPG(4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷)，于400nm波長(zhǎng)下掃描6min吸光度變化。該組合物對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制率和加入抑制劑量之間關(guān)系的抑制實(shí)驗(yàn)，加入量20，40，80，120，160(uL)，測(cè)得對(duì)α-糖苷酶抑制率和抑制劑量之間的關(guān)系如圖1。
實(shí)施例2正常小鼠連續(xù)給藥實(shí)驗(yàn)取正常小鼠32只，隨機(jī)分為4組，分別灌胃生理鹽水、拜糖蘋(100mg/kg)、格華止(100mg/kg)、組合物(100mg/kg，葛根、虎杖大黃素和桑葉多糖的比例為1∶1∶1，其中葛根素的重量百分含量為35％，桑葉多糖和大黃素的重量百分含量均大于50％)，連續(xù)八天，末次灌胃后禁食4h，眼球后靜脈叢取血測(cè)定血漿血糖濃度，結(jié)果見表1(以下的拜糖平和格華止為市售口服降血糖藥物，用作對(duì)照)。
表1正常小鼠連續(xù)給藥八天血糖值

注與生理鹽水組比較1P＜0.005，2P＜0.001實(shí)施例3四氧嘧啶糖尿病小鼠連續(xù)給藥實(shí)驗(yàn)取50只正常小鼠喂養(yǎng)三天后，禁食16h(飲水不限)，腹腔注射四氧嘧啶(200mg/kg)后，喂養(yǎng)72h，禁食4小時(shí)后測(cè)血糖濃度，選取血糖值在11.0mM以上者。四氧嘧啶糖尿病小鼠，分為4組，分別灌以生理鹽水、組合物(100mg/kg，葛根、虎杖大黃素和桑葉多糖的比例為1∶1∶1，其中葛根素的重量百分含量為35％，桑葉多糖和大黃素的重量百分含量均大于50％)、拜糖蘋(100mg/kg)、格華止(100mg/kg)，連續(xù)八天。末次灌胃后禁食4h，取血測(cè)定血漿血糖濃度，結(jié)果見表2。
表2四氧嘧啶糖尿病小鼠連續(xù)給藥八天血糖值

注與生理鹽水組比較1P＜0.001實(shí)施例4中藥組合物對(duì)四氧嘧啶型高血糖小鼠SOD，MDA的影響取四氧嘧啶糖尿病小鼠24只，隨機(jī)分為3組，分別灌以生理鹽水、組合物(100mg/kg，葛根、虎杖大黃素和桑葉多糖的比例為1∶1∶1，其中葛根素的重量百分含量為35％，桑葉多糖和大黃素的重量百分含量均大于50％)、格華止(100mg/kg)，另取正常小鼠8只灌以生理鹽水，連續(xù)八天。末次灌胃后，取血測(cè)定SOD和MDA。SOD的測(cè)定方法為黃嘌呤氧化酶法，MDA的測(cè)定方法為硫代巴比妥酸顯色法，測(cè)定結(jié)果見表3。
表3中藥組合物對(duì)四氧嘧啶型高血糖小鼠SOD，MDA的影響

注與生理鹽水組比較1P＜0.001。
權(quán)利要求
1.一種具有降血糖活性的中藥組合物，其特征在于該組合物的組成及質(zhì)量比為虎杖提取物∶桑葉提取物∶葛根提取物＝0.5～3∶1∶0.5～4；其中，所述的虎杖提取物，其有效藥物成分為虎杖大黃素，重量百分含量為45～55％；所述的桑葉提取物，其有效藥物成分為桑葉多糖，重量百分含量位為50～70％；所述的中藥葛根提取物，其有效藥物成分為葛根素，重量百分含量為35～49％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備治療降低餐后血糖藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血糖活性的中藥組合物在制備治療α-葡萄糖苷酶抑制劑類藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種具有降血糖活性的中藥組合物。該組合物的組成及質(zhì)量比為虎杖提取物∶桑葉提取物∶葛根提取物＝0.5～3∶1∶0.5～4；其中，所述的虎杖提取物，其有效藥物成分為虎杖大黃素，重量百分含量為45～55％；所述的桑葉提取物，其有效藥物成分為桑葉多糖，重量百分含量大于50％；所述的中藥葛根提取物，其有效藥物成分為葛根素，重量百分含量為35～49％。本發(fā)明根據(jù)中醫(yī)藥理及糖尿病病因和發(fā)病機(jī)理，經(jīng)酶學(xué)試驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廣泛篩選，選取了以上三種中藥及其有效藥物成分，獲得了葛根提取物、虎杖提取物和桑葉提取物三者的比率為0.5～3∶1∶0.5～4的最佳科學(xué)配比和組合而成的中藥組合藥物。本藥物具有功能互補(bǔ)、協(xié)同增效的作用，其組合后的降血糖作用效果顯著優(yōu)于單一有效藥物成分。
文檔編號(hào)A61P3/00GK101040917SQ20071003994
公開日2007年9月26日 申請(qǐng)日期2007年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月25日
發(fā)明者黃燕雯, 華子義, 殷建偉, 沈忠明 申請(qǐng)人:上海大學(xué)