專利名稱：：青藤堿或其鹽的緩釋微球及其制備方法和緩釋注射制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及制藥領(lǐng)域，特別涉及一種青藤堿或其鹽的緩釋微球及其制備方法，以及含有該緩釋微球的青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑。
背景技術(shù)：
：青藤堿(sinomenine)是從傳統(tǒng)中藥青風藤(Si'wowem.wmscwfw柳Rehd.etWils.)中提取的有效成分，是治療風濕、類風濕性關(guān)節(jié)炎的有效單體，藥用多用其鹽酸鹽。1996年被正式批準為國家中藥保護品種，收載于衛(wèi)生部藥品標準(中藥成方制劑)第十八冊。由于該品種療效顯著，現(xiàn)已成為常用藥物。目前，市場上的青藤堿制劑除口服的鹽酸青藤堿片、毛青藤總堿片、青藤堿緩釋片外還有鹽酸青藤堿注射劑。常規(guī)口服制劑雖有良好的抗炎、鎮(zhèn)痛療效，但需一日服藥三次，使用不便，緩釋片可減少患者用藥次數(shù)，提高順應(yīng)性，但難以避免口服藥物所致的胃腸道不適?，F(xiàn)有注射劑需一日注射兩次，亦存在用藥順應(yīng)性問題。國內(nèi)在該藥物的新劑型開發(fā)上有不少報道，如凝膠劑(雷嘉川，中國醫(yī)院藥學雜志，2003，23(3):175—176)、噴霧劑(祝清芬，中成藥，2005，27(2):231—232)、口服緩釋微丸(CN1582931A)等。但緩釋注射劑尚無報道。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種具有良好緩釋效果、且適用于注射制劑的青藤堿或其鹽的緩釋微球及其制備方法，并提供一種含有該緩釋微球的青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑。本發(fā)明人經(jīng)過諸多試驗研究發(fā)現(xiàn)，由于青藤堿的鹽，如現(xiàn)常用的其藥用鹽一鹽酸青藤堿有極好的水溶性，故將其制成緩釋注射劑困難較大。曾經(jīng)嘗試將其制成聚合物(PLA、PLGA)納米粒和脂質(zhì)體等緩釋注射劑，但都由于其高水溶性的特點，難以提高包封率和載藥量，緩釋效果也差。本發(fā)明人最終篩選到以白蛋白為輔料，采用噴霧干燥法制備載藥微球，可使藥物與輔料一步成球，藥物損失極少，包封率高，且經(jīng)體內(nèi)外釋放試驗研究均具有明顯緩釋效果。因此，本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋微球的技術(shù)方案為一種青藤堿或其鹽的緩釋微球，其包括活性成分青藤堿或其藥用鹽，以及輔料白蛋白，其中活性成分與白蛋白的重量比為1:82:1。其中，上述活性成分與白蛋白的重量比例太小，特別是小于1:8，則載藥量太低；反之，該比例太大，則微球的突釋效應(yīng)明顯。因此，該重量比本發(fā)明更優(yōu)選1:22:1，最優(yōu)選1:2。至于本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋微球的制備方法，本發(fā)明人在研制過程中進行了一系列篩選實驗，發(fā)現(xiàn)采用傳統(tǒng)的乳化-加熱固化法制得的微球，藥物包封率低、損失大，而采用噴霧干燥法制備微球，藥物包封率高，且工藝簡單,易于放大生產(chǎn)。另外，對噴霧干燥得到的固體微球進行加熱或不加熱的干燥固化處理，可以調(diào)節(jié)所載藥物的釋放速率。因此，本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋微球的制備方法采用噴霧千燥法或噴霧干燥-加熱固化法。其中，所述的噴霧干燥-加熱固化法中，隨著溫度升高、時間延長，釋藥速度減慢。因而本發(fā)明加熱固化的溫度優(yōu)選80。C-12(TC，時間為1-24小時；更優(yōu)選的溫度為IO(TC，時間為2-12小時。而本發(fā)明的一種青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑，其包括上述的緩釋微球和溶媒。由于本發(fā)明的緩釋微球無法在注射用水中迅速分散，需采用特殊的注射溶媒。所用的可注射溶媒可以是注射用油，選自于橄欖油、玉米油、芝麻油、花生油、大豆油、杏仁油、椰子油、罌粟籽油、棉籽油、蓖麻油，或其他注射用溶劑包括液態(tài)聚乙二醇、丙二醇、甘油、肉豆蔻異丙酯、油酸乙酯、苯甲酸節(jié)酯、聚氧乙烯油酸甘油三酯等中的一種或一種以上。所用的分散方法可選用超聲法或振蕩法。本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋微球具有較好的包封率和載藥量，其體外釋放試驗表明其具有明顯的緩釋作用。該制備方法具有工藝流程短、操作簡便、重現(xiàn)性好、緩釋藥物穩(wěn)定可靠、適于工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點。而本發(fā)明緩釋注射制劑可用于肌肉或關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，治療風濕及類風濕性關(guān)節(jié)炎等，抗炎鎮(zhèn)痛作用持久、平穩(wěn)，可減少患者用藥次數(shù)，提高用藥依從性。圖1為原料藥溶液與本發(fā)明噴霧干燥緩釋微球(未加熱固化)的體外釋藥曲線。圖2為本發(fā)明不同溫度加熱固化6個小時的緩釋微球的體外釋藥曲線。-圖3為本發(fā)明IO(TC加熱固化不同時間的緩釋微球的體外釋藥曲線。圖4為本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑的大鼠體內(nèi)藥動學曲線。圖5為本發(fā)明青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑的小鼠醋酸扭體實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計圖。具體實施方式下面用實施例來進一步說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不受其限制。實施例1取鹽酸青藤堿取1.0g，牛血清白蛋白2.0g,加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置室溫下硅膠干燥器中放置3天，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球100mg，加入注射用大豆油2ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例2取鹽酸青藤堿2.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置120""C烘箱中加熱固化4小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球75mg，加入注射用芝麻油2ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例3取鹽酸青藤堿4.0g，人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置100"C烘箱中加熱固化8小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球50mg，加入聚乙二醇2000.2ml、注射用水1.8ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例4取鹽酸青藤堿0.5g,人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置80"C烘箱中加熱固化12小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球150mg，加入丙二醇0.5ml、注射用水1.5ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例5取鹽酸青藤堿0.25§,人血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置10(TC烘箱中加熱固化24小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球200mg，加入聚氧乙烯油酸甘油三酯0.1ml、丙二醇0.1ml、注射用水1.8ml，振蕩60秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例6取鹽酸青藤堿1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置100'C烘箱中加熱固化6小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球25mg,加入注射用大豆油2ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例7取鹽酸青藤堿l.Og，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置80'C烘箱中加熱固化12小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球25mg，加入注射用大豆油2ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。實施例8取鹽酸青藤堿1.0g，牛血清白蛋白2.0g，加水100ml使其充分溶解后過濾得澄清溶液。將該溶液用噴霧干燥器進行噴霧干燥，得到的白色粉末置120'C烘箱中加熱固化4小時后放至室溫，即得載藥白蛋白緩釋微球。取微球25mg，加入注射用大豆油2ml，超聲30秒，使微球充分混懸即得本發(fā)明鹽酸青藤堿的緩釋注射制劑。上述實施例制得的本發(fā)明緩釋微球，其粒徑范圍為13pm。試驗實施例1本發(fā)明鹽酸青藤堿緩釋微球的包封率及載藥量用常規(guī)方法測定實施例1~5不同藥物(SM)湖料(BSA)比例的緩釋微球的包封率和載藥量。其中，包封率的測定方法為取噴干微球適量，加入0.01mol/LHCL溶<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>可見，本發(fā)明一定比例范圍內(nèi)的青藤堿或其鹽與輔料白蛋白制得的緩釋微球均具有較佳的包封率。且隨著藥物含量的加大，載藥量也增大，而包封率沒有下降。試驗實施例2本發(fā)明鹽酸青藤堿緩釋微球的體外釋放試驗采用動態(tài)透析法進行微球的體外釋放試驗。稱取微球適量，裝入處理好的透析袋中，兩端系緊，置于轉(zhuǎn)籃中。以pH7.3磷酸鹽緩沖液200ml為釋放介質(zhì)，在37士0.5。C，50r/min條件下進行體外釋放實驗。分別于2h、6h、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天取樣，同時補加等量新鮮介質(zhì)。將待測液進行高效液相色譜儀測定，計算藥物累積釋放量。1、不同固化條件制得的緩釋微球的體外釋放速率對實施例6、7、8進行體外釋放速率測定，結(jié)果如下表所示。<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>2、不同藥物/輔料比例的緩釋微球的體外釋放試驗試驗方法同上。試驗組實施例l;及將鹽酸青藤堿分別取2.0、4.0g，余同實施例l的方法噴干制得的緩釋微球。對照組:原料藥。試驗組和對照組的釋藥曲線請參見圖1。可見本發(fā)明將青藤堿或其鹽與輔料白蛋白按一定比例制成的微球可明顯延緩藥物的釋放速度，且隨著白蛋白比例的增加，突釋效應(yīng)減小。3、不同固化溫度制得的緩釋微球的體外釋放試驗試驗方法同上。試驗組實施例6;未加熱固化、余同實施例6的方法噴干制得的緩釋微球；以及加熱固化溫度分別為120°C、80°C，余同實施例6的方法噴干-加熱固化制得的緩釋微球(MPs)。對照組原料藥。試驗組和對照組的釋藥曲線請參見圖2?？梢娂訜峁袒臏囟扔绊懳⑶蛑兴幬镝尫潘俣?，且溫度越高釋藥越慢。4、不同固化時間制得的緩釋微球的體外釋放試驗試驗方法同上。試驗組實施例6，及加熱固化時間分別為4、8、10、12小時，余同實施例6的方法噴干-加熱固化制得的緩釋微球。各試驗組的釋藥曲線請參見圖3?？梢娂訜峁袒臅r間可影響微球中藥物釋放速度，且隨固化時間的延長微球釋藥速度逐漸減慢。試驗實施例3本發(fā)明鹽酸青藤堿緩釋微球的體內(nèi)藥動學試驗實驗動物Sprague-Dawley大鼠12只，體重200土20g，雌雄各半。隨機分為兩組，每組6只，分別作為試驗組和對照組。試驗組按照實施例6制備的鹽酸青藤堿緩釋注射制劑。給大鼠右腿肌注給藥(0.4ml/只，一次給藥)后分別于不同時間從大鼠尾尖取血，分離血漿，測定不同時間血漿藥物濃度，繪制大鼠體內(nèi)藥動學曲線圖。對照組給大鼠肌注同等劑量的鹽酸青藤堿普通注射劑，其余操作同試驗組。結(jié)果見圖4?？梢姳景l(fā)明較原普通注射劑明顯延長了藥物在體內(nèi)的滯留時間，具緩釋效果。試驗實施例4本發(fā)明鹽酸青藤堿緩釋微球的體內(nèi)藥效學試驗實驗動物昆明小鼠136只，體重20士2g，雄性?？瞻捉M小鼠8只。右腿肌注生理鹽水O.lml/只。0.5h后腹腔注射0.6%醋酸溶液0.21111/只，記錄15分鐘內(nèi)小鼠扭體次數(shù)，計算平均扭體次數(shù)。試驗組小鼠64只。按照實施例6制備的鹽酸青藤堿緩釋注射制劑，給小鼠肌注給藥(O.lml/只)后，隨機分為8組，每組8只，分別于給藥后0.5h、lh、2h、4h、6h、8h、10h、12h后進行醋酸扭體實驗，扭體實驗操作同空白組，計算每組平均扭體次數(shù)。對照組小鼠64只。相同劑量普通注射劑肌注給藥，其余操作同試驗組。根據(jù)試驗結(jié)果，分別計算對照組和本發(fā)明(試驗組)的鎮(zhèn)痛百分率，繪制醋酸扭體實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計圖。鎮(zhèn)痛百分率的計算方法為鎮(zhèn)痛百分率(％)=(空白組平均扭體次數(shù)一給藥組平均扭體次數(shù))/空白組平均扭體次數(shù)X100%結(jié)果普通注射液在給藥后4小時已無鎮(zhèn)痛效果,而微球注射液在給藥12小時后仍具有明顯鎮(zhèn)痛效果。結(jié)果見圖5。權(quán)利要求1.一種青藤堿或其鹽的緩釋微球，其包括活性成分青藤堿或其藥用鹽，以及輔料白蛋白，其中活性成分與白蛋白的重量比為1∶8～2∶1。2、如權(quán)利要求1所述的緩釋微球，其特征在于所述的活性成分與白蛋白的重量比為1:22:1。3、如權(quán)利要求1所述的緩釋微球，其特征在于所述的活性成分與白蛋白的重量比為1:2。4、如權(quán)利要求1所述的緩釋微球，其特征在于所述的藥用鹽為鹽酸青藤堿。5、如權(quán)利要求1~4任一項所述的緩釋微球的制備方法，其特征在于該制備方法采用噴霧干燥法或噴霧干燥-加熱固化法。6、如權(quán)利要求5所述的制備方法，其特征在于所述的噴霧干燥-加熱固化法中加熱固化的溫度為80°C-120°C，時間為1-24小時。7、如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述的加熱固化的溫度為100°C，時間為2-12小時。8、一種青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑，其包括如權(quán)利要求1^4任一項所述的緩釋微球，以及溶媒。9、如權(quán)利要求8所述的緩釋注射制劑，其特征在于所述的溶媒選自橄欖油、玉米油、芝麻油、花生油、大豆油、杏仁油、椰子油、罌粟籽油、棉籽油、蓖麻油、液態(tài)聚乙二醇、丙二醇、甘油、肉豆蔻異丙酯、油酸乙酯、苯甲酸芐酯以及聚氧乙烯油酸甘油三酯中的一種或幾種。全文摘要本發(fā)明公開了一種青藤堿或其鹽的緩釋微球及其制備方法，該緩釋微球包括活性成分青藤堿或其藥用鹽，以及輔料白蛋白，其中活性成分與白蛋白的重量比為1∶8～2∶1。本發(fā)明還公開了一種含有該緩釋微球的青藤堿或其鹽的緩釋注射制劑。該緩釋微球具有較好的包封率和載藥量，以及明顯的緩釋作用。該緩釋注射制劑可用于肌肉或關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，治療風濕及類風濕性關(guān)節(jié)炎，藥效持久且平穩(wěn)，可減少用藥次數(shù)，提高用藥依從性。文檔編號A61P19/04GK101234090SQ20071003707公開日2008年8月6日申請日期2007年2月2日優(yōu)先權(quán)日2007年2月2日發(fā)明者奉建芳,林祝,鄒凌燕,陳滿倉申請人:上海醫(yī)藥工業(yè)研究院