專利名稱：：一種超聲強化提取吳茱萸生物堿的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及以吳茱萸為原料，超聲提取的方法。具體地涉及到超聲技術(shù)提取吳茱萸生物堿的方法。
背景技術(shù)：
：吳茱萸為2005年版藥典一部收載，是一種在臨床上應(yīng)用已有數(shù)百年歷史的傳統(tǒng)中藥材。吳茱萸含有多種化學(xué)成分，其中吳茱萸生物堿為其主要藥效成分，吳茱萸生物堿中，又以吳茱萸堿和次堿為主要生物堿。吳茱萸生物堿的藥用價值已有很多文獻報道，如《中國中醫(yī)藥信息雜志》2005年第12巻第6期的論文"吳茱萸堿藥理作用研究進展"闡述吳茱萸藥材中的吳茱萸堿具有抗腫瘤、抗傷害感受、減肥、強心、降血壓、對支氣管平滑肌等的作用。《中國藥理學(xué)通報》2003年第19巻第10期的論文"吳茱萸堿和吳茱萸次堿的藥理學(xué)研究進展"中闡明了吳茱萸次堿有降血壓'和松弛血管的作用，可引起血管平滑肌細胞中一些非電壓依賴性的鈣通道開放血管內(nèi)皮細胞中L-型電壓依賴性鈣通道的開啟，此外，吳茱萸次堿還有抗血小板、抗血栓、松弛兔和人肛門內(nèi)括約肌、減輕體重等作用。從吳茱萸藥材提取吳茱萸生物堿的方法有水提法和醇提法?！吨谐伤帯?005年第27巻第11期的論文"均勻設(shè)計優(yōu)選吳茱萸提取工藝的研究"用70%乙醇或者90%乙醇作為提取溶劑，優(yōu)化的工藝條件是20倍量70。X乙醇回流提取3次，每次1.2小時，采用分光光度法測得吳茱萸總生物堿提取收率為1.6369%(總生物堿提取收率=總生物堿重量/吳茱萸重量)。該方法溶劑耗用量達60倍，生產(chǎn)成本高?！吨袊t(yī)院藥學(xué)雜志》2003年第23巻第8期"超臨界流體萃取吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿"公開了一種采用95%乙醇作夾帶劑進行超臨界C02提取的方法制備吳茱萸生物堿，用超臨界C02提取存在設(shè)備一次性投資大、維護費用高的缺陷?！吨袊帉W(xué)雜志》2005年第40巻第2期的論文"吳茱萸中吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取條件研究"，公開了一種超聲提取吳茱萸生物堿的方法，是用45倍乙酸乙酯于3(TC超聲提取40min。但是該工藝僅僅是一種分析方法的提取工藝，考察的也只是不同溶劑的冷浸效果，僅公開了用沒乙酸乙酯作溶劑的超聲工藝，它采用高達45倍的醋酸乙酯進行提取，溶劑耗用量大，操作煩瑣。為了提高吳茱萸總生物堿、吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率，有必要改進吳茱萸生物堿的制備方法。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種從吳茱萸藥材超聲提取制備吳茱萸生物堿的方法，使能達到高效快速提取，提取效率高，能耗低，工藝過程簡便適合工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明所釆用的技術(shù)方案是將吳茱萸藥材粉碎成粗粉，置于超聲提取器中，用乙醇溶液作溶劑，吳茱萸藥材與溶劑的重量體積比為1:101:30，浸泡時間30min60min后在超聲頻率2070kHz、溫度207CTC下，提取30min120min后出料、濾過、取濾液經(jīng)減壓過濾或離心，清液濃縮回收溶劑得稠膏再干燥即得吳茱萸總生物堿。在提取過程中，實施超聲波強化提取，利用超聲波的空化效應(yīng)、機械效應(yīng)及熱效應(yīng)等增強溶劑對藥材的穿透力，有助于藥材中有效成分的溶出，提高有效成分的提取率，相應(yīng)縮短提取時間，降低提取溫度，降低能耗，提高生產(chǎn)率。在超聲場中，因為提取過程短，且提取溫度低，所以有必要對藥材進行粉碎，增加藥材受超聲作用的表面積。藥材要有一定的粒度，但也不能過細。藥材的粒度細，雖然提取速度快，有效成分得率高，但雜質(zhì)多，抽濾或離心工藝麻煩，且提取后的成分進行繁瑣的除雜過程。本專利藥材粒度選擇經(jīng)1060目篩。從吳茱萸中提取生物堿屬于固液提取過程，因此，只有固相與液相充分接觸，使溶劑充分滲入植物細胞內(nèi)，才有利于傳質(zhì)過程的進行。為了保證溶劑充分滲入細胞內(nèi)，有必要在提取前對藥材進行浸泡處理。提取溶劑的乙醇溶液濃度優(yōu)選為70%-95%。吳茱萸生物堿的制備方法，其最佳的工藝條件為用95%乙醇溶液作溶劑，吳茱萸藥材與溶劑的重量體積比為1:15浸泡30min后在超聲頻率20kHz、溫度60'C下，提取40min后出料。本發(fā)明的有益效果1.本發(fā)明的制備工藝提取時間短、生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)效率高；提取溫度低，有效成分不易被破壞，提高了吳茱萸總生物堿的收率和吳茱萸堿及吳茱萸次堿的提取率；2.溶劑用量少，既節(jié)約溶劑又節(jié)約能源和生產(chǎn)成本；3.本發(fā)明所提供的超聲制備吳茱萸生物堿的方法和工藝條件適合工業(yè)化批量生產(chǎn)吳茱萸總生物堿中的質(zhì)量指標(biāo)以吳茱萸堿和吳茱萸次堿含量為基準(zhǔn)。所采用的的測定方法是2005版的《中國藥典》一部119頁HPLC法。本發(fā)明所說的吳茱萸總生物堿收率=(總生物堿質(zhì)量/投入的藥材質(zhì)量)X100%。吳茱萸堿的提取率=(吳茱萸提取物中吳茱萸堿的含量x總堿質(zhì)量/投入藥材中吳茱萸堿含量x藥材質(zhì)量)X100%。吳茱萸次堿的提取率z(吳茱萸提取物中吳茱萸次堿的含量X總堿質(zhì)量/投入藥材中吳茱萸次堿含量x藥材質(zhì)量)X100%。下面通過具體實施例進一步闡述本發(fā)明的技術(shù)方案具體實施方式以下實施例所用的吳茱萸藥材中吳茱萸堿含量為0.231%，吳茱萸次堿含量為0.207%實施例1提取工藝條件的選擇(l)提取溶劑對吳茱萸總生物堿、吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率的影響實驗方法取700克粉碎過10目篩的吳茱萸粉，置于超聲提取器中，分別加入不同的提取溶劑，藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡30min,超聲頻率26kHz，提取溫度60'C，提取時間40min，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸總生物堿。分別計算吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率。各溶劑均進行了IO批試驗，各取10批的平均值，結(jié)果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實驗結(jié)果顯示采用95%的乙醇提取時，吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率都比其他溶劑提取要高；控制提取溶劑的pH值在酸性或堿性時提取效果反而不好，95%的乙醇對吳茱萸堿和次堿提取效果與甲醇沒有太明顯的差別，但是甲醇提取的提取物比較多，提取物中吳茱萸堿和吳茱萸次堿的含量反而不高.，與乙酸乙酯作溶劑進行比較，95%乙醇提取的吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率明顯比乙酸乙酯提取的分別提高了3.2%和7.8%，同時乙酸乙酯比較容易揮發(fā)，回收時對設(shè)備要求高，不適合工業(yè)化生產(chǎn)。因此選擇95%的乙醇為提取溶劑效果最佳。(2)提取溫度對吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率的影響實驗方法取700克粉碎過10目篩的吳茱萸粉，置于超聲提取器中，加入95%乙醇為提取溶劑，藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡30min，超聲頻率26kHz，選擇不同的提取溫度，提取時間40min，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸總生物堿。分別計算吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率。結(jié)果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實驗結(jié)果顯示隨著溫度的升高，吳茱萸總生物堿、吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率都升高，但到6(TC時提取率不再升，甚至有點下降的趨勢，因此，我們將提取溫度選擇在6(TC為最佳。(3)提取時間對吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率的影響實驗方法取700克粉碎過10目篩的吳茱萸粉，置于超聲提取器中，加入95%乙醇為提取溶劑，藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡30min，超聲頻率26kHz，提取溫度6(TC，選擇不同的提取時間，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸提取物。分別計算吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率。結(jié)果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實驗結(jié)果顯示提取時間對吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取也有較大的影響，提取時間太短，吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率較低，當(dāng)提取時間為40min時，吳茱萸堿和次堿的提取率隨提取時間的延長變化不大，綜合考慮生產(chǎn)成本，選定提取時間為40min為最佳。(4)超聲頻率對吳茱萸堿和吳茱萸次堿提取率的影響實驗方法取700克粉碎過10目篩的吳茱萸粉，置于超聲提取器中，加入95%乙醇為提取溶劑，藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡30min，分別設(shè)定不同的超聲頻率進行提取，提取溫度為6(TC，提取時間40min，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸總生物堿。分別計算吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率。結(jié)果如下表所示<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實驗結(jié)果顯示超聲頻率不同，對吳茱萸堿和吳茱萸次堿的提取率的影響不大，綜合考慮，我們選擇超聲頻率為26kHz。結(jié)論本發(fā)明超聲提取過程中最佳工藝為將吳茱萸粉碎成粗粉，提取溶劑為乙醇溶液，置于超聲提取器中，藥材與溶劑的重量體積比為1:51:25,浸泡時間30min60min，超聲頻率2070kHz，提取溫度2070°C，提取時間30min120min，超聲提取后的提取液抽濾或離心，清液減壓濃縮回收溶劑得稠膏，減壓干燥即得吳茱萸總生物堿。實施例2取700克粉碎過10目篩的吳茱萸粉，置于超聲提取器中，乙醇濃度為95%,藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡30min，超聲頻率26kHz，提取溫度60°C，提取時間40min，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸總生物堿為138.6g,收率為19.8%;吳茱萸堿的含量為0.88%,提取率是78.9%;吳茱萸次堿的含量為0.84%，提取率是79.9%。實施例3同實施例2所示，所不同的是實施例2中藥材粒度為10目，而實施例3中藥材粒度為30目，此時，吳茱萸總生物堿為162.4g，得率是23.2%;吳茱萸堿的含量為0.80%,提取率是80.1%;吳茱萸次堿的含量為0.73%，提取率是81.3%。實施例4同實施例2所示，所不同的是實施例2中藥材粒度為10目，而實施例4中藥材粒度為60目，此時，吳茱萸總生物堿為158.2g，得率是22.6%，吳茱萸堿的含量為0.83%，提取率是81.5%，吳茱萸次堿的含量為0.74%，提取率是80.4%。實施例5同實施例2所示，所不同的是:實施例2中藥材與溶劑的重量體積比是1:15，而實施例6中藥材與溶劑的重量體積比是l:5，此時，吳茱萸總生物堿為105.7g，得率是15.1%，吳茱萸堿的含量為1.13%,提取率是74.1%，吳茱萸次堿的含量為0.99%，提取率是72.3%。實施例6同實施例2所示，所不同的是:實施例2中藥材與溶劑的重量體積比是1:15，實施例7中吳茱萸粉與溶劑的比例為1:25，此時，吳茱萸總生物堿為171.5g，得率是24.5%，吳茱萸堿的含量為0.75%，提取率是79.4%，吳茱萸次堿的含量為O.71%，提取率是84.0%。實施例7同實施例2所示，所不同的是實施例2中藥材浸泡30min，而實施例7中藥材浸泡30min，此時，吳茱萸總生物堿為149.8g，得率是21.4%，吳茱萸堿的含量為0.84%，提取率是78.1%，吳茱萸次堿的含量為0.77%，提取率是79.2%。實施例8同實施例2所示，所不同的是實施例2中藥材浸泡30min，而實施例8中藥材浸泡60min，此時，吳茱萸總生物堿為149.8g，得率是21.4%，吳茱萸堿的含量為0.85%,提取率是79.0%，吳茱萸次堿的含量為0.79%,提取率是81.2%。實施例9同實施例2所示，所不同的是實施例2中采用超聲提取，而實施例9中不采用超聲提取，而直接采取回流提取120min，此時，吳茱萸總生物堿為197.4g,得率是28.2%，吳茱萸堿的含量為0.61%，提取率是74.6%，吳茱萸次堿的含量為0.61%，提取率是83.7%。由以上實施例可知，超聲提取吳茱萸生物堿時，其較優(yōu)的提取條件為孔徑過10目篩的吳茱萸藥材粗粉，置于超聲提取器中，乙醇濃度為70%，藥材與溶劑的重量體積比為1:15，浸泡時間30min，超聲頻率26kHz，提取溫度6(TC，提取時間40min，超聲提取后的提取液經(jīng)過抽濾或離心，清液進行濃縮得稠膏，稠膏減壓干燥即得吳茱萸干粉。常規(guī)回流提取是在回流的高溫及120min的長時間進行提取。所以說，超聲提取具有降低提取溫度，縮短提取時間，快速高效地提取吳茱萸生物堿等優(yōu)點。權(quán)利要求1.一種吳茱萸生物堿的制備方法，其特征在于將吳茱萸藥材粉碎成粗粉，置于超聲提取器中，用乙醇溶液作溶劑，吳茱萸藥材與溶劑的重量體積比為1∶10～1∶30，浸泡時間30min～60min后在超聲頻率20～70kHz、溫度20～70℃下，提取30min～120min后出料、濾過、取濾液經(jīng)減壓過濾或離心，清液濃縮回收溶劑得稠膏再干燥即得吳茱萸生物堿。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的吳茱萸生物堿的制備方法，其特征在于所用的乙醇溶液濃度為70%-95%。3、根據(jù)權(quán)利要求1所述的吳茱萸生物堿的制備方法，其特征在于所用的粗粉粒度經(jīng)過1060目篩。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的吳茱萸生物堿的制備方法，其特征在于用95%乙醇溶液作溶劑，吳茱萸藥材與溶劑的重量體積比為l:15浸泡30min后在超聲頻率20kHz、溫度60。C下，提取40min后出料。全文摘要一種超聲強化提取吳茱萸生物堿的制備方法，涉及以吳茱萸為原料，超聲提取的方法。它是將吳茱萸藥材粉碎成粗粉，置于超聲提取器中，用乙醇溶液作溶劑，吳茱萸藥材與溶劑的重量體積比為1∶10～1∶30，浸泡時間30min～60min后在超聲頻率20～70kHz、溫度20～70℃下，提取30min～120min后出料、濾過、取濾液經(jīng)減壓過濾或離心，清液濃縮回收溶劑得稠膏再干燥即得吳茱萸生物堿。本發(fā)明的制備方法具有提取時間短、生產(chǎn)周期短，生產(chǎn)效率高；提取溫度低，吳茱萸總生物堿的收率和吳茱萸堿及吳茱萸次堿的提取率高；適合工業(yè)化批量生產(chǎn)等優(yōu)越性。文檔編號A61K36/754GK101224250SQ20071002634公開日2008年7月23日申請日期2007年1月17日優(yōu)先權(quán)日2007年1月17日發(fā)明者周錦柯,曾榮華,李金華,葛發(fā)歡,鄒小燕,裕黃申請人:廣州漢方現(xiàn)代中藥研究開發(fā)有限公司