專利名稱：：煙酸受體激動劑、含有這樣化合物的組合物和治療方法煙酸受體激動劑、含有這才羊化合物的組合物和治療方法發(fā)明背景本發(fā)明涉及化合物、組合物和在哺乳動物中治療或預(yù)防異常脂肪血癥方法。異常脂肪血癥是其中血清脂質(zhì)異常的疾病。高膽固醇和高密度脂蛋白(HDL)的低水平與動脈粥樣硬化和心血管病的高于正常的危險相關(guān)聯(lián)。已知影響血清膽固醇的因素包括遺傳素質(zhì)、飲食、體重、身體活動的程度、年齡和性別。盡管正常量的膽固醇對于細胞膜和必需有機分子例如類固醇和膽汁酸是極為重要的構(gòu)件，但是過量的膽固醇已知是心血管病的原因之一。例如，膽固醇是聚集在冠狀動脈中的斑塊的主要成分，其導(dǎo)致被稱作動脈粥樣石更化的心血管病。減少膽固醇的常規(guī)治療法包括像他汀類(statins)(其減少由身體產(chǎn)生的膽固醇)一類的藥物治療。最近，營養(yǎng)物和營養(yǎng)添加劑在減少血液膽固醇中的價值已廣受注意。例如，食用化合物例如纖維、維生素E、大豆、大蒜、co-3脂肪酸和煙酸皆廣受注意并得到研究資助。煙酸或尼克酸0比啶-3-曱酸)在臨床試驗中是減少冠狀事件(coronaryevents)的藥物。其對于提升高密度質(zhì)蛋白(HDL)的血清水平的作用是眾所周知的。重要的是，煙酸還對其它脂質(zhì)輪廓(lipidprofiles)具有有益的作用。特別是，煙酸能夠減少低密度質(zhì)蛋白(LDL)、極低密度質(zhì)蛋白(VLDL)和甘油三酯(TG)。然而，煙酸的臨床應(yīng)用受到包括皮膚血管舒張-有時稱作潮紅-在內(nèi)的若干不利副作用的限制。盡管注意力集中在控制血清膽固醇、血清甘油三酯等的常規(guī)和其它方法上面，但是相當大部分的人口具有高于約200mg/dL的總膽固醇水平，因此需要用于異常脂肪血癥治療的另外的藥物。因此在本領(lǐng)域里對于減少總膽固醇、血清甘油三酯等并提高HDL的化合物、組合物和其它方法仍然存在著需要。.本發(fā)明涉及已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對改善血清脂質(zhì)水平具有作用的化合物。因此，按照所描述的方法，本發(fā)明提供引起總膽固醇和甘油三酯濃度降低并提高HDL的組合物。因此，本發(fā)明的一個目的是提供能夠用來治療異常脂肪血癥、動脈粥樣力更化、糖尿病、代i射綜合征和相關(guān)疾病，同時將與煙酸治療有關(guān)的不利副作用最小化的尼克酸受體激動劑。還另一個目的是提供口服使用的藥物組合物。這些或其他目的通過本文提供的描述將會顯而易見發(fā)明概述本發(fā)明涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中n代表1或2;Ri選自環(huán)己基、苯基和含有5-6個原子的雜芳基，所述雜芳基5元環(huán)含有1-4雜原子，所述雜原子的0-1個是O或S,所述雜原子的0-4個是N,并且所述雜芳基6元環(huán)含有1-3個N原子，所述環(huán)己基、苯基和雜芳基任選被1-4個選自下列的基團取代鹵素、OH、SH、CN、硝基、Cw卣代烷基、氨基、Cw烷基氨基、C2-8二烷基氨基、C"烷基、C"烷氧基、C2—4烯基、C2—4炔基、C3—6環(huán)烷基、Cw卣代烷氧基、d-4烷硫基、Cw烷基亞磺?；蚫-4烷基磺?；?，并且R2是N、hf'0h或C02Ra,其中Ra是H或d-4烷基。發(fā)明詳述"烷基"，以及具有前綴"烷"的其它基團，例如烷氧基、烷?；?，是指含有指定數(shù)目碳原子的碳鏈，所述碳鏈可以是直鏈、支鏈，或環(huán)狀，或其組合。如果未指定數(shù)目，對于直鏈意指1-6個碳原子，對于支鏈烷基意指3-7個碳原子。烷基的實例包括曱基、乙基、丙基、異丙基、丁基、仲和叔丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基等。環(huán)烷基是烷基除非另外規(guī)定,的子集；如果未指定原子的數(shù)目，意指3-7個碳原子，形成稠合的1-3個碳環(huán)。"環(huán)烷基"還包括與芳基稠合的單環(huán)，其中連接點是在非芳族部分上。環(huán)烷基的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、四氫化萘基、十氳化萘基、茚滿基等。"鏈烯基"是指含有至少一個碳-碳雙鍵的碳鏈，所述碳鏈可以是直鏈或支鏈或其組合。鏈烯基的實例包括乙烯基、烯丙基、異丙烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、l-丙烯基、2-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基等。"炔基"是指含有至少一個碳-碳三鍵的碳鏈，所述碳鏈可以是直鏈、支鏈或其組合。炔基的實例包括乙炔基、炔丙基、3-甲基-l-戊炔基、2-庚炔基等。"雜芳基"(HAR),除非另外規(guī)定，是指單芳環(huán)或環(huán)系統(tǒng)，所述芳環(huán)或環(huán)系統(tǒng)含有至少一個選自O(shè)、S和N的雜原子，含有5至6個原子。實例包括，但不限于，吡咯基、異嘈、唑基、異噻唑基、吡唑基、吡。定基、嚅哇基、《二哇基、噻二唑基、噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、三。秦基、噻吩基、嘧啶基、噠。秦基、吡。秦基等。雜芳基還包括帶電荷形式，例如吡啶镥。"鹵素"(鹵代)包括氟、氯、溴和碘。短語"不存在實質(zhì)性潮紅"是指消除了可測定的皮膚潮紅，例如以治療量給藥煙酸時通?？吹降母弊饔?。當患者對治療劑量的藥物逐漸具有耐受性時，煙酸的潮紅作用通常較少發(fā)生且較不嚴重，但是潮紅作用在某些程度上仍然發(fā)生并且是短暫的。因此，"不存在實質(zhì)性潮紅"是指當潮紅發(fā)生時減輕潮紅的嚴重程度，或者較少的潮紅事件發(fā)生。優(yōu)選地，潮紅(相對于煙酸)的發(fā)生率降低三分之一，更優(yōu)選潮紅發(fā)生率降低一半，最優(yōu)選潮紅發(fā)生率降低約三分之二或更多。同樣，嚴重性(相對于煙酸)優(yōu)選減輕至少約三分之一，更優(yōu)選至少約一半，最優(yōu)選至少約三分之二。顯然，潮紅發(fā)生率和嚴重性的百分之百降低是最優(yōu)選的，但不是必需的。本發(fā)明的一個方面涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中n代表1或2;W選自環(huán)己基、苯基和含有5-6個原子的雜芳基，所述雜芳基5元環(huán)含有1-4個雜原子，所述雜原子的0-1個是O或S,所述雜原子的0-4個是N，并且所述雜芳基6元環(huán)含有l(wèi)-3個N原子，所述環(huán)己基、苯基和雜芳基任選被1-4個選自下列的基團取代卣素、OH、SH、CN、硝基、Cw卣代烷基、氨基、Cw烷基氨基、C2-8二烷基氨基、C"烷基、C!-4烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、C;5-6環(huán)烷基、Cw卣代烷氧基、d-4烷硫基、d-4烷基亞磺?；蚎-4烷基磺?；⑶襌2是N、j，0h或C02Ra,其中Ra是H或d—4烷基。有意義的化合物的一個子集涉及其中n是1的式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。有意義的化合物的另一子集涉及其中n是2的式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的苯基或雜芳基，所述基團的1-4個基團是鹵代基，所述基團的1-2個基團選自O(shè)H、SH、CN、硝基、Cw卣代烷基、氨基、C"烷基氨基、C2-8二烷基氨基、d-4烷基、CV4烷氧基、C2-4烯基、C2—4炔基、03-6環(huán)烷基、d-4卣代烷氧基、C"烷硫基、C^烷基亞硫酰基和C!-4烷基磺?；?。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。特別有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中R'代表任選被1-4個基團取代的苯基，所述基團的1-4個基團是鹵代基，所述基團的1-2基團選自O(shè)H、SH、CN、硝基、Cw卣代烷基、氨基、d-4烷基氨基、C2.8二烷基氨基、C]-4烷基、d-4烷氧基、C2—4烯基、C2-4炔基、Cw環(huán)烷基、Cl4閨代烷氧基、C"烷硫基、C"烷基亞硫?；蚫-4烷基磺酰基。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。特別有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的雜芳基，所述基團的1-4個基團是鹵代基，所述基團的1-2個基團選自O(shè)H、SH、CN、硝基、d—4卣代烷基、氨基、Cw烷基氨基、<32-8二烷基氨基、Cw烷基、Cw烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6環(huán)烷基、d-4鹵代烷氧基、C"烷硫基、C!-4烷基亞磺酰基和Cw烷基磺?；Ｔ谠撟蛹瘍?nèi)，所有其它變量如最初所定義。特別有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的雜芳基，所述基團的1-4個基團是卣代基，所述基團的1-2個基團是d-4卣代烷基或d-4烷基。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中W代表任選被1-4個閨代基取代的苯基。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中！^代表C02Ra和Ra代表H。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。有意義的化合物的另一子集涉及式I化合物或者其可藥用鹽或溶劑合物，其中R代表四唑基。在該子集內(nèi)，所有其它變量如最初所定義。特別有意義的化合物的實例包括下表的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>及其可藥用鹽和溶劑合物。表D<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>及其可藥用鹽和溶劑合物。給藥信息式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物的劑量可以在很廣的范圍內(nèi)變化。對于任何特定患者來說，具體用藥方案和用量將取決于各種因素，包括年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、給藥途徑、排泄速度、藥物組合和患者疾病的嚴重性。這些因素的考慮完全屬于普通熟練的臨床醫(yī)生的范圍之內(nèi)，目的在于確定預(yù)防、4氐抗或阻止疾病的發(fā)展所需要的治療有效或預(yù)防有效劑量。通常，可以將本發(fā)明化合物以低至約0.01mg/天-高至約2000mg/天的量，以單一或分開的劑量方式給藥。典型的劑量為約0.1mg/天-約1g/天。開始可以使用較低的劑量，然后增加劑量以便將任何不利的作用最小化。預(yù)計本發(fā)明化合物將在每天的基礎(chǔ)上、給藥適當?shù)闹委熁蝾A(yù)防患者內(nèi)科疾病的時間，包括持續(xù)數(shù)月、數(shù)年或患者一生的治療過程。聯(lián)合治療可以將一種或多種另外的活性藥劑與本文描述的化合物共同給藥。所述另外的活性藥劑可以是調(diào)節(jié)脂質(zhì)的化合物或具有其它藥物活性的藥劑或既具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)的作用又具有其它藥物活性的藥劑?？梢允褂玫牧硗獾幕钚运巹┑膶嵗ǖ幌抻贖MG-CoA還原酶抑制劑，其包括以其內(nèi)酯化或二羥基開環(huán)酸形式的他汀類(statins)及其可藥用鹽和酯，包括但不限于洛伐他汀(參見US專利4,342,767),辛伐他汀(參見US專利4,444,784),二羥基開環(huán)酸辛伐他汀，特別是其銨或釣鹽，普伐他汀，特別是其鈉鹽(參見US專利4,346,227),氟伐他汀，特別是其鈉鹽(參見US專利5,354,772)，阿托伐他汀，特別是其鉤鹽(參見US專利5,273,995)，匹伐他汀，也稱作NK-104(參見PCT國際專利申請WO97/23200)和羅蘇伐他汀，也稱作CRESTOR;參見US專利5,260,440);HMG-CoA合酶抑制劑；角堇烯環(huán)氧酶抑制劑；角鯊烯合成酶抑制劑(也稱作角鯊烯合酶抑制劑)，脂酰輔酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶(ACAT)抑制劑，包括ACAT-I或ACAT-2的選4奪性抑制劑以及ACAT-I和-2的雙重抑制劑；微粒體甘油三酯轉(zhuǎn)移蛋白(MTP)抑制劑；內(nèi)皮脂肪酶抑制劑；膽汁酸多價螯合劑；LDL受體誘導(dǎo)劑；血小板聚集抑制劑，例如糖蛋白Hb/IIIa纖維蛋白原受體拮抗劑和阿司匹林；人過氧化物酶體增殖激活的受體y(PPAR-y》敫動劑，包4舌通常牙爾訐乍glitazones例^口pioglitazone禾口rosiglitazone的化合物并且，包括稱作遙哇烷二酮的結(jié)構(gòu)類型內(nèi)的以及PPAR-a激動劑噻唑烷二酮結(jié)構(gòu)類型之外的那些化合物；PPAR-a激動劑例如氯貝丁酯，非諾貝特，包括微粉化的非諾貝特，和吉非貝齊；PPAR雙重a"激動劑；維生素B6(也稱作吡。多醇)及其可藥用鹽例如HC1鹽；維生素B12(也稱作氰鈷胺)；葉酸或其可藥用鹽或酯例如鈉鹽和甲基葡糖胺鹽；抗氧化劑維生素例如維生素C和E和P胡蘿卜素；卩-阻斷劑；血管緊張素n拮抗劑例如氯沙坦；血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑例如依那普利和卡托普利；腎素抑制劑，釣通道阻斷劑例如硝苯地平和地爾硫罩；內(nèi)皮素拮抗劑；提供ABCA1基因表達的藥劑；膽甾醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)抑制化合物，5-脂加氧酶活化蛋白(FLAP)抑制化合物，5-脂加氧酶(5-LO)抑制化合物，farnesoidX受體(FXR)配體包括拮抗劑和激動劑；LiverX受體(LXR)-a配體，LXR-P配體，二膦酸鹽化合物例如阿侖膦酸鈉；環(huán)加氧酶-2抑制劑例如羅非考昔和塞來考昔；以及減弱血管發(fā)炎的化合物。膽固醇吸收抑制劑也可以用于本發(fā)明。這樣的化合物阻斷膽固醇從腸腔進入小腸壁的腸上皮細胞，由此降低血清膽固醇水平。膽固醇吸收抑制劑公開于U.S.專利5,846,966、5,631,365、5,767,115、6,133,001、5,886,171、5,856,473、5,756,470、5,739,321、5,919,672，和PCT申請WO00/63703、WO00/60107、WO00/38725、WO00/34240、WO00/20623、WO97/45406、WO97/16424、WO97/16455和WO95/08532。最著名的膽固醇吸收抑制劑是依澤替米貝，也稱作1-(4-氟苯基)-3(11)-[3(S)-(4-氟苯基)-3-羥基丙基)]-4(S)-(4-羥基苯基)-2-吖丁啶酮，其被描述于U.S.專利5J67，U5和5,846,966之中。膽固醇吸收抑制劑的治療有效量包括約0.01mg/kg-約30mg/kg體重/天、優(yōu)選約0.1mg/kg-約15mg/kg/天的劑量。對于糖尿病患者，本發(fā)明中使用的化合物可以與常規(guī)糖尿病藥物共同給藥。例如，接受本文描述治療的糖尿病患者也可以服用胰島素或口服抗糖尿病藥物。本文使用的口服抗糖尿病藥物的一個實例是二曱雙胍。即使這些煙酸受體激動劑導(dǎo)致一定程度的血管舒張，人們理解式I化合物可以與血管舒張抑制劑共同給藥。因此，本發(fā)明所述方法的一個方面涉及式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物與減少潮紅的化合物的聯(lián)合使用。關(guān)于這一點，常規(guī)化合物例如阿司匹林、布洛芬、萘普生、卩引哚美辛、其它NSAIDs、COX-2選擇性抑制劑等是可以常規(guī)劑量使用的?；蛘撸珼P拮抗劑也是有用的。不同亞型的受體與前列腺素D2相互作用。一種前列腺素D2受體被稱作"DP"，另一種前列腺素D2受體被稱作"CRTH2"。本發(fā)明利用DP受體拮抗劑來預(yù)防、最小化或減輕原本可以發(fā)生的潮紅。DP受體拮抗劑的劑量和選擇性是DP拮抗劑選擇性地調(diào)節(jié)DP受體而基本上不調(diào)節(jié)CRTH2受體。特別是，DP受體拮抗劑理想地對DP受體親和力(即K,)較之對CRTH2受體親和力具有至少高10倍(數(shù)字上較低的IQ值)。按照這些準則選擇性地與DP相互作用的任何化合物都被認為是"DP選擇性"。如本文所述，在哺乳動物特別是人中用于減少或預(yù)防潮紅作用的DP拮抗劑的劑量，包括劑量低至約0.01mg/天-高至約100mg/天，以單一或分開的日劑量給藥。優(yōu)選的劑量為約0.1mg/天-高約1.0g/天，以單一或分開的日劑量給藥。對于選擇性拮抗DP受體并抑制潮紅作用特別有用的化合物的實例包括以下<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>及其可藥用鹽和溶劑合物。在不背離本發(fā)明的情況下，可以將式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物與DP拮抗劑，以每日單次或多次給藥方式，例如每日兩次、每曰三次或每日四次，共同或相繼給藥。如果需要持續(xù)釋放，例如表現(xiàn)持續(xù)超過24小時釋放特性的持續(xù)釋放產(chǎn)品，每隔一天給藥一次。然而，每曰單次給藥是優(yōu)選的。同樣，早上或晚上給藥是可以使用的。鹽和溶劑合物式I化合物的鹽和溶劑化物也包括在本發(fā)明之中，在這方面，煙酸的若干可藥用鹽和溶劑化物是可以使用的。堿金屬鹽，特別是，鈉和鉀，形成本文所述的有用的鹽。同樣，堿土金屬，特別是鈣和鎂，形成本文描述的有用的鹽。胺的各種鹽，例如銨和取代了的銨化合物也形成本文所述的有用的鹽。同樣，式I化合物的溶劑化形式，包括水合物，例如半水合物、一、二、三和倍半水合物，是特別有用的。用于本發(fā)明的化合物可以通過任何常規(guī)給藥途徑給藥。優(yōu)選的給藥途徑是口服給藥。藥物組合物本文描述的藥物組合物通常由式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物以及可藥用載體組成。適宜的口服組合物的實例包括片劑、膠嚢劑、糖錠、錠劑、混懸劑、可分散的散劑或顆粒劑、乳劑、糖漿劑和酏劑。載體組分的實例包括稀釋劑、結(jié)合劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調(diào)味劑、著色劑、防腐劑等。稀牙爭劑的實例包括例如碳酸锏、碳酸鈉、乳糖、磷酸鍋和磷酸鈉。?；捅澜鈩┑膶嵗ㄓ衩椎矸酆驮逅?。結(jié)合劑的實例包括淀粉、凝膠和阿拉伯膠。潤滑劑的實例包括硬脂酸鎂、硬脂酸4丐、硬脂酸和滑石粉。片劑可以是無包衣的或者是通過已知的技術(shù)包衣的。這樣的包衣可以延遲崩解從而延遲胃腸道中的吸收，因此提供較長時間的持續(xù)作用。在本發(fā)明的一個實施方案中，將式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物與另外的治療藥劑和載體混合來形成固定的混合產(chǎn)品。這種固定混合產(chǎn)品可以是口服片劑或膠嚢。更特別地，在本發(fā)明另外的實施方案中，將式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物(約1-約1000mg)和第二種治療藥劑(約1-約500mg)與可藥用載體混合，提供用于口服的片劑或膠嚢劑。制劑在較長時間持續(xù)釋放是特別重要的。時間延遲材料例如硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯是可以使用的。也可以將劑型用u.s.專利4,256,108、4,166,452和4,265,874中描述的技術(shù)進行包衣，以便形成控制釋放的滲透性治療片劑。其它控制釋放技術(shù)也是可用的并且包括在本文中。用于在持續(xù)釋放的片劑中減緩煙酸釋放的典型組分包括各種纖維素化合物，例如甲基纖維素、乙基纖維素、丙基纖維素、羥基丙基纖維素、羥基乙基纖維素、羥基丙基曱基纖維素、微晶纖維素、淀粉等。各種天然和合成材料也可以用于持續(xù)釋放制劑。實例包括藻酸和各種藻酸鹽，聚乙烯吡咯烷酮，黃芪膠，刺槐豆膠，瓜爾豆膠，明膠，各種長鏈醇，例如鯨蠟醇和蜂蠟。任選且甚至更有意義的是上文描述的片劑，所述片劑由式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物組成，并且還另外含有HMGCo-A還原酶抑制劑，例如辛伐他汀或阿托伐他汀。本特別實施方案也任選含有DP拮抗劑。按照本發(fā)明，對于持續(xù)釋放片劑來說，典型的釋放時間范圍在約1-約48小時、優(yōu)選約4-約24小時、而更優(yōu)選約8-約16小時之間。硬凝膠膠嚢劑構(gòu)成口服使用的另外的固體劑型。這樣的膠嚢劑同樣包含與上述載體材料混合的活性組分。軟凝膠膠嚢劑包含與水可混溶的溶劑例如丙二醇，PEG和乙醇，或油例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合的活性組分。含有與適用于制備水混懸劑的賦形劑混合的活性材料的水混懸劑也可以考慮的。這樣的賦形劑包括混懸劑，例如羧基甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥基丙基曱基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃芪膠和阿拉伯膠；分散或濕潤劑，例如卵磷脂；防腐劑，例如對羥基苯曱酸乙酯或正丙酯，著色劑，調(diào)味劑，甜味劑等。通過加入水，適用于制備水混懸液的可分散的散劑和顆粒劑提供與分散或濕潤劑、混懸劑和一種或多種防腐劑混合的活性成分。適宜的分散或濕潤劑和混懸劑已由上文所述例示。也可以制備沖唐漿劑和酏劑。更特別地，有意義的藥物組合物是由式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物和選自化合物A-AJ的DP受體拮抗劑以及可藥用載體構(gòu)成的持續(xù)釋放片劑。更有意義的另一藥物組合物由式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物與選自化合物A、B、D、E、X、AA、AF、AG、AH、AI和AJ的DP拮抗劑以及可藥用載體構(gòu)成。更加特別有意義的另一藥物組合物涉及由式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物、選自化合物A、B、D、E、X、AA、AF、AG、AH、AI和AJ的DP受體拮抗劑和辛伐他汀或阿托伐他汀以及可藥用載體構(gòu)成的持續(xù)釋放片劑。術(shù)語"組合物"，除了包括上述藥物組合物以外，還包括直接或間接地由任何兩種或多種組分-活性劑或賦形劑-的結(jié)合、復(fù)合或聚集產(chǎn)生，或者由任何一種或多種組分的分解產(chǎn)生，或者由一種或多種組分的其它類型的反應(yīng)或相互作用產(chǎn)生的任何產(chǎn)物。因此，本發(fā)明藥物組合物包括通過混合或合并本發(fā)明化合物、任何另外的活性組分和可藥用載體構(gòu)成的4壬<可組合物。本發(fā)明的另一方面涉及式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物和DP桔抗劑在制備藥物中的應(yīng)用。所述藥物具有本文描述的用途。更特別地，本發(fā)明的另一方面涉及式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物、DP拮抗劑和HMGCo-A還原酶抑制劑例如辛伐他汀在制備藥物中的應(yīng)用。所述藥物具有本文描述的用途。本發(fā)明化合物顯示了抗高脂血癥活性，表現(xiàn)出減少LDL-C、甘油三酯、載脂蛋白和總膽固醇并且增加HDL-C的效用。因此，本發(fā)明化合物用于治療異常脂肪血癥。因此，本發(fā)明涉及通過以有效治療、預(yù)防或逆轉(zhuǎn)所述疾病的量給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，治療、預(yù)防或逆轉(zhuǎn)動脈粥樣^更化和本文描述的其它疾病和病癥。這在人類中是通過以有效治療或預(yù)防所述疾病的量給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物，同時在頻率和/或嚴重性方面預(yù)防、減輕或最小化潮紅作用來實現(xiàn)的。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中治療動脈粥樣硬化的方法，所述方法包括在沒有實質(zhì)潮紅的情況下以有效治療動脈粥樣硬化的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中提高血清HDL水平的方法，所述方法包括以有效提高血清HDL水平的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中治療異常脂肪血癥的方法，所述方法包括以有效治療異常脂肪血癥的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中降低血清VLDL或LDL水平的方法，所述方法包括在沒有實質(zhì)潮紅的情況下以有效降低患者的血清VLDL或LDL水平的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中降低血清甘油三酯水平的方法，所述方法包括以有效降低血清甘油三酯水平的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中降低血清Lp(a)水平的方法，所述方法包括以有效降低血清Lp(a)水平的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。如本文所用，Lp(a)是指脂蛋白(a)。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中治療糖尿病且特別是2型糖尿病的方法，所述方法包括以有效治療糖尿病的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中治療代謝綜合征的方法，所述方法包括以有效治療代謝綜合征的量向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物。本發(fā)明有意義的另一方面涉及在需要這樣治療的人類患者中治療動脈粥樣^更化、異常脂肪血癥、糖尿病、代謝綜合征或相關(guān)疾病的方法，所述方法包括向患者給藥式I化合物或其可藥用鹽或溶劑化物和DP受體拮抗劑，該藥物組合是在沒有實質(zhì)潮紅的情況下，以有效治療動脈粥樣硬化、異常脂肪血癥、糖尿病、代謝綜合征或相關(guān)疾病的量給藥的。本發(fā)明有意義的另一方面涉及上文描述的方法，其中DP受體拮抗劑選自化合物A-AJ及其可藥用鹽和溶劑化物。而且，煙酸受體已一皮確i人并表征于2002年10月24日/>開的WO02/084298A2和Soga,T.等人，Tunaru,S.等人和Wise,A.等人的著作(上文引用)中。許多DP受體拮抗劑化合物已經(jīng)被公開并且使用和包括在本發(fā)明方法中。例如，DP受體拮抗劑可以根據(jù)2001年10月25日公開的WO01/79169、2003年公開的5月2日公開的EP1305286、2002年11月28日公開的WO02/094830和2003年7月31日公開的WO03/062200來獲得?；衔顰B可以根據(jù)2001年9月13日公開的WO01/66520Al中的描述來合成；化合物AC可以根據(jù)2003年3月20日公開的WO03/022814A1中的描述來合成，并且化合物AD和AE可以根據(jù)2003年9月25公開的WO03/078409中的描述來合成。用于本發(fā)明的其它代表性DP拮抗劑可以根據(jù)下面提供的實例來合成。式I化合物的合成方法式I化合物是通過以下代表性反應(yīng)方案制備的。應(yīng)當理解，對于這些結(jié)構(gòu)類型來說，類似的試劑、條件或其它合成方法對于有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員來說是可以想像的。因此，這些反應(yīng)方案不應(yīng)當被理解為限制本發(fā)明的范圍。除非另外指定，所有取代基如上文所定義。方案1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage27</formula>其中n=l的式I化合物可以通過如反應(yīng)方案1中所示的獲得共通中間體2和4的方法來制得。因此，可將3-乙氧基-環(huán)戊烯酮用草酸二烷基酯?；?3-二酮被節(jié)基肼-HCl環(huán)合，伴之以烯醇醚水解，并且酯裂解，獲得酮酸?？蓪⒃撍徂D(zhuǎn)化為伯羧酰胺，脫水形成其腈，并且通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法將該酮轉(zhuǎn)化成其烯醇三氟曱磺酸酯，獲得共通中間體2?；蛘?，可以使用肼來代替千基肼-HCl，并且將所得吡唑作為其N-甲苯磺酰胺3保護起來。可以將乙基烯醇醚在酸性條件下選擇性地水解，并且通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法把所得酮轉(zhuǎn)化成其烯醇三氟曱磺酸酯，獲得普通中間體4。方案2(中間體D)其中n-2的式I化合物可以通過如反應(yīng)方案2中所示的獲得共通中間體6和8的方法來制得。因此，可將環(huán)己烷-l,4-二酮一縮酮用草酸二烷基酯酰化，所得卩-二酮被,基肼-HCl環(huán)合，并且縮酮水解，獲得酮基酯5。然后可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法將該酮轉(zhuǎn)化成其烯醇三氟甲磺酸酯，獲得共通中間體6。或者，可以使用肼來代替卡基肼-HC1，并且將所得縮酮水解，獲得酮基酯7。可將所得吡唑7作為其N-曱苯磺酰胺保護起來，并且通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法把該酮轉(zhuǎn)化成其烯醇三氟甲磺酸酯，獲得共通中間體8。方案3通過Suzuki偶聯(lián)，其裝配C5部分，繼之四唾環(huán)合成，并且同時在氫化條件下還原烯爛以脫千基，可以將普通中間體2轉(zhuǎn)化為化合物例如9(反應(yīng)方案3)。方案4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>通過Suzuki偶聯(lián)以裝配C5部分，繼之依次將甲苯石黃?；王チ呀?，并在氫化條件下還原烯烴，可以將普通中間體4轉(zhuǎn)化為化合物例如10(反應(yīng)方案4)。方案5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>化合物例如11可以如反應(yīng)方案5中所示直4妻由環(huán)戊烯酮來制得，而不4吏用共通中間體2和4。改進的Suzuki偶耳關(guān)容i午硼酸的1,4-力口成，然后形成典型的吡唑環(huán)，轉(zhuǎn)移氫化，并且皂化，獲得酸ll。如12的制備中所示，在皂化成酸11之前，可以將乙酯轉(zhuǎn)化成伯羧酰胺，脫水成其腈，進行四唑環(huán)合成。方案6通過Suzuki偶聯(lián)以裝配C5部分，繼之同時烯烴還原和千基裂解，以及乙酯的急化，可以將共通中間體6轉(zhuǎn)化為化合物例如13(反應(yīng)方案6)。或者，可以將普通中間體8用于該反應(yīng)順序中以產(chǎn)生化合物例如14。方案7反應(yīng)方案7中顯示的是在式I的C5位引入雜環(huán)的各種方法。例如，將給定的雜環(huán)例如噻唑去質(zhì)子化，可產(chǎn)生陰離子以1,2-加成到3-乙氧基-環(huán)戊烯酮上，然后重排成P-取代的烯酮。然后可以4吏用類似于這些反應(yīng)方案的轉(zhuǎn)化來生成p塞唑書f生物15。還可以將環(huán)戊烯酮與氮親核試劑反應(yīng)，以形成具有雜環(huán)例如吡唑的1,4-加成產(chǎn)物。然后可以使用類似于這些反應(yīng)方案的轉(zhuǎn)化來生成吡唑衍生物16。而且，如反應(yīng)方案7中所示，可以4吏用3-石爽-環(huán)戊烯酮與雜環(huán)硼酸酯例如N-曱基吡唑硼酸酯進^f亍Suzuki偶聯(lián)。同樣，然后可以使用類似于這些反應(yīng)方案的轉(zhuǎn)化來生成N-甲基吡唑衍生物17。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>反應(yīng)方案8顯示了制備^惡唑衍生物18的方法?？蓪⒂?-羧基環(huán)戊酮生成的炔丙基酰胺用汞鹽環(huán)合，以生成環(huán)戊酮嗜唑(J.Med.Chem.1990,33,1128),然后進行上面反應(yīng)方案中描述的轉(zhuǎn)化，獲得嗜唑衍生物18。方案9反應(yīng)方案9描述了制備p塞唑區(qū)域異構(gòu)體21的方法。將3-乙氧基環(huán)戊烯酮進行甲錫烷基化，獲得中間體19,將2,4-二浹-噻唑轉(zhuǎn)化成20能夠容許在隨后的Stille偶聯(lián)中實現(xiàn)區(qū)域控制。因此，將19與20偶聯(lián)，獲得(3-取代的環(huán)戊烯酮中間體，進行上面反應(yīng)方案中描述的轉(zhuǎn)化之后，可獲得噻唑衍生物21。各種有機基團的轉(zhuǎn)化和本文所用的保護基可以通過不同于上面描述的許多方法來進行?？梢杂糜谥苽浔疚腲^開的中間體或化合物的其它合成方法的參考文獻可參見例j口M.B.Smith,J.MarchAdvancedOrganicChemistiy,5thEdition,Wiley-Interscience(2001);R.C.LarockComprehensiveOrganicTransformations,AGuidetoFunctionalGroupPreparations,2ndEdition,VCHPublishers,Inc.(1999);T丄.GilchristHeterocyclicChemistry,3rdEdition,AddisonWesleyLongmanLtd(1997);J.A.Joule,K.Mills,G.F.SmithHeterocyclicChemistry,3rdEdition,StanleyThornesLtd.(1998);G.R.Newkome,W.W.PaudlerContemporyHeterocyclicChemistry,JohnWileyandSons(1982);orWuts,P.G.M.;Greene,T.W.;ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,3rdEdition,JohnWileyandSons,(1999),全部六篇文獻本文將其在整體上引用作為參考。式I描述的化合物的實例顯示于下表1中。應(yīng)當理解，表l中的實例是代表性的而非任何方式的限制。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage33</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>還包括其可藥用鹽和溶劑合物。式I化合物具有一個或多個不對稱中心，因此可以對映體或非對映異構(gòu)體形式存在。式I和整個本發(fā)明中描述的式意指代表所有這樣對映體、非對映體及其混合物，包括外消旋體，除非另外規(guī)定或說明。所有這樣的異構(gòu)形式皆包括在內(nèi)。而且，在手性環(huán)境存在下，使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，可以將通式I的具有一個立構(gòu)中心的手性化合物拆分為其對映體。在手性環(huán)境下，在其物理特性的基礎(chǔ)上，使用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法，可以將具有一個以上立構(gòu)中心的手性化合物分離為其非對映體。如上文所述，可以將以外消旋形式獲得的單一非對映體拆分為其對映體。如果需要，可以將化合物的外消旋混合物分離以便分離出單一的對映體。該分離可以用本領(lǐng)域已知的方法來進行，例如將式I化合物的外消旋混合物與對映體純的化合物偶聯(lián)以形成非對映混合物，然后通過標準方法例如分級結(jié)晶或色譜法將其分離為單一非對映體。偶耳關(guān)反應(yīng)通常是(但不限于)使用對映體純的酸或堿來形成鹽。然后通過從非對映體化合物上裂解掉加上去的手性殘基，可以將非對映體衍生物轉(zhuǎn)為基本上純的對映體。式I化合物的外消旋混合物也可以直接通過使用手性固定相的色譜法進行分離，所述方法在本領(lǐng)域里是眾所周知的?？梢允褂昧硗獾牟鸱中猱悩?gòu)體的方法，并且所述方法對于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員來說是顯而易見的。這才羊的方法包括，^旦不限于，由J.Jaques，A.Collet,andS.Wilenin"Enantiomers,Racemates,andResolutions",JohnWileyandSons,NewYork(1981)論述的方法?；蛘?，通式I化合物的對映體可以通過不對稱立體選擇性合成來獲得，該合成使用得自手性庫(chiralpool)或來自合成源的旋光純的原料或試劑。這樣的不對稱合成方法包括，但不卩艮于,由J.D.Morrison,Ed.AsymmetricSynthesis;AcademicPress:Orlando,Volume5,(1985)i侖述的方法。本文描述的某些化合物也可以互變異構(gòu)體的形式存在，其具有不同的氪連接點，伴隨一個或多個雙鍵位移。例如，酮與其烯醇形式是酮-烯醇互變異構(gòu)體?；蛘呃纾吝虻馁|(zhì)子可以存在于雜環(huán)內(nèi)的兩個氮中的任何一個氮上。本文描述的式I和其他結(jié)構(gòu)式意指代表所有單一互變異構(gòu)體及其混合物，除非另外規(guī)定。代表性實施例提供下面的實施例以便更加充分地說明本發(fā)明，并且不應(yīng)當以任何方式理解為限制本發(fā)明的范圍。除非另外規(guī)定(i)所有操作是在室溫或環(huán)境溫度，即，在溫度18-25。C之間進4??；(ii)溶劑的蒸發(fā)是在最高達50°C的浴溫、減壓(4.5-30mmHg)下使用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進行；(111)反應(yīng)過程之后是薄層色譜法(TLC)和/或串接的高效液相色譜法(HPLC)繼之以質(zhì)譜法(MS)，本文定義的LCMS,和任何反應(yīng)時間的給出僅是出于說明的目的；(iv)產(chǎn)率，如果給出，僅是用于說明；(v)所有最終化合物的結(jié)構(gòu)是通過至少一種以下技術(shù)測定的MS或質(zhì)子核磁共振(1HNMR)光譜法，并且純度是通過至少一種以下技術(shù)測定的TLC或HPLC;(vi)&NMR光譜是在VananUnity或VananInova儀器上以500或600MHz使用所指定的溶劑記錄的；當在線列出時，NMR呈現(xiàn)主要特征性質(zhì)子的5值的形式，以相對于殘余溶劑峰的百萬分率(ppm)表示(多重態(tài)和氫數(shù)目)；關(guān)于信號形狀的常用縮寫是s.單峰；d.雙峰(表觀)；t.三重峰(表觀)；m.多重峰；br.寬的等等；(vii)MS數(shù)據(jù)是在WatersMicromass裝置上記錄的，該裝置與Hewlett-Packard(Agilent1100)HPLC儀器<|妄觸，并且在MassLynx/OpenLynx軟件上操作；使用電子噴霧電離，具有正(ES+)或負離子(ES—)檢測；關(guān)于LCMSES+的方法是1-2mL/分鐘，10-95。/。B線性梯度，在5.5分鐘內(nèi)(B二0.05%TFA-乙腈，A=0.05%TFA-水)，關(guān)于LCMSES-的方法是1-2mL/分鐘，10-95。/。B線性梯度，在5.5分鐘內(nèi)(B=0.1%甲酸-乙腈，A=0.1%甲酸-水),WatersXTerraC18-3.5拜一50x3.0mmID和二極管陣列沖企測；(viii)通過制備反相HPLC(RPHPLC)來純化化合物是在WatersSymmetryPrepC18-5|um-30x100mmID或WatersAtlantisPrepdC18-5)um-20x100mmID上進行的；20mL/分鐘，10-100%B線性梯度，15分鐘(B^0.05。/oTFA-乙腈，A=0.05%TFA—K),以及二極管陣列或254波長4全測；(ix)通過制備反相HPLC進行的化合物的自動純化，是在Gilson系統(tǒng)上，使用YMC-PackProC18柱(150x20mmi.d.),用0-50%乙腈在水(0.1%TFA)中的混合物以20mL/mm速率洗脫進行的；(x)通過制備薄層色譜法(PTLC)進行的化合物的純化，是在涂以硅膠的20x20cm玻璃制備板上進行的，或者離心色譜法是在使用涂以硅膠的玻璃轉(zhuǎn)子的chromatotron上進行的，兩者皆可以從Analtech買到；(xi)柱色譜法是在玻璃硅膠柱上，使用Kieselgel60,0.063-0.200mm(Merck)或Biotage筒系統(tǒng)上進4亍的；(xii)^鼓波照射是用SmithSynthesizer(PersonalChemistry)進行的。(xiii)化學(xué)符號具有其通常的含義；還使用了以下縮寫v(體積)，w(重量)，b.p.(沸點),m.p.(融點)，L(升),mL(毫升),g(克),mg(毫克)，mol(摩爾)，mmol(毫摩爾)，eq或eqmv(當量)，1050(產(chǎn)生50%的最大可能抑制的摩爾濃度)，EC50(產(chǎn)生50%最大可能功效的摩爾濃度)，uM(微摩爾)，nM(毫微摩爾)；(xiv)首字母縮略詞的定義如下THF是四氫呋喃；DME是1,2-二甲氧基乙烷；DMF是二曱基甲酰胺；DCM是二氯甲烷(二氯亞曱基)；TFA是三氟乙酸TBAF是氟化四丁基銨TFAA是三氟乙酸酐LDA是二異丙基氨基化鋰EDC(I)是1-乙基-3-(3-二曱基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽；NHS是N-羥基琥珀酰亞胺；TsCl是甲苯磺?；?曱苯磺酰)氯；dppf是l,l'-二(二苯基膦基)二茂鐵；UV是紫外線；(ee)是對映體過量。在氮氣下向冷卻至-7S。C的3-乙氧基環(huán)戊烯酮(2.12g,16.82mmol)在無水THF(40mL)中的溶液內(nèi)加入二異丙基氨基化鋰(12mL,24mmol，中間體A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>2.0M在THF中的溶液)。15分鐘后，加入二草酸二叔丁酯(3.73g，18.5mmol)在THF(15mL)中的溶液。反應(yīng)混合物于-78。C攪拌15分鐘，然后加溫至-20。C,并再攪拌15分鐘。將反應(yīng)用1NHC1(40mL)中止，并用乙酸乙酯萃取(3X)。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Si02),用35%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所得的產(chǎn)物，為灰白色固體。向該二酮(2.15g,8.45mmol)在乙醇(100mL)中的溶液內(nèi)加入節(jié)基肼鹽酸鹽(1.8g，9.22mmol)和HOAc(10mL)。反應(yīng)混合物于室溫攪拌16小時，然后于70。C回流30分鐘。反應(yīng)冷卻至室溫并真空濃縮。殘余物溶解于乙酸乙酯，并用水、飽和NaHC03和鹽水洗滌。有機層用無水Na2S04千燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Si02)，用30%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需產(chǎn)物，為褐色油狀物。向該叔丁基酯(1.64g,5.25mmol)在二氯甲烷(20mL)中的溶液內(nèi)加入三氟乙酸(20mL)，并將所得溶液于室溫攪拌4小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并與曱苯共沸(3X)。該材料用于下一步驟而不再進一步純化。向該酸(1.34g,5.25mmol)在CH2C12(50mL)中的溶液內(nèi)加入N-羥基琥珀酰亞胺(1.21g,10.5mmol),繼之加入EDC(2.01g,10.5mmol)。于室溫攪拌18小時后，將反應(yīng)混合物真空濃縮。殘余物用乙酸乙酯(200mL)稀釋，用飽和NaHC03溶液和鹽水洗滌。有機層用無水Na2S〇4干燥，過濾并真空濃縮。獲得了黃色固體。向該活性酯(2.0g,5.25mmol)在1，4-二嗜烷(50mL)中的溶液內(nèi)加入NH4OH(14.8N,10.0eq.,3.53mL)。立即形成沉淀物。于室溫攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物通過多孔玻璃漏斗過濾，并將沉淀物用1,4-二p惡烷洗滌。將濾液真空濃縮，獲得固體。向該羧酰胺(5.25mmol)在DMF(60mL)中的溶液內(nèi)分三批加入氰尿酰氯(3.12g,17mmol)。于室溫30分鐘，將反應(yīng)用水中止，并用乙酸乙酯萃取(2X)。有機層用水、鹽水洗滌，用無水Na2S04千燥，過濾，并真空濃縮。殘余物通過快速色i普法純化(Si02)，用30%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需產(chǎn)物，為黃色固體。于-78。C向該氰基酮(447mg，1.87mmol)在無水THF(14mL)中的溶液內(nèi)加入剛制備的二異丙基氨基化鋰(1.89mmol)在THF(6mL)中的溶液。該反應(yīng)于-WC攪拌30分鐘后，加入2-[N,N-二(三氟曱基磺酰基)胺]-S-氯吡啶(Comms試劑，1.4g,3.6mmol)。將反應(yīng)加溫至-20。C并攪拌3小時。將反應(yīng)用飽和NH4C1溶液中止，并將所得混合物用乙酸乙酯萃取，用INHC1溶液、飽和NaHC03溶液洗滌，并用無水Na2S04千燥。將溶液過濾并真空濃縮。將殘余物在使用2000-微米的轉(zhuǎn)子(SiO2)的chromatotron上純化，用5%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需產(chǎn)物，為雙鍵區(qū)域異構(gòu)體的2:1混合物。'HNMR(500MHz,CDC13):(主要異構(gòu)體)57.45-7.3(叫5H),6.06(bt,1H),5.41(s,2H)，3.56(bd,2H);(次要異構(gòu)體)S7.45-7.3(m,5H),6.63(bt'1H),5.39(s,2H)，3.18(bd，2H);LCMSm/z370(M+H).中間體B<formula>formulaseeoriginaldocumentpage39</formula>向(4-乙氧基-2-氧代環(huán)戊-3-烯-基)(氧代)乙酸叔丁酯(4.0g,15.7mmol)(中間體A,步驟1)在乙醇(90mL)中的溶液中加入肼(0.54mL,17.3mmo1)。5分鐘后，加入水醋酸(10mL)。所得溶液于70。C加熱1小時。反應(yīng)冷卻至室溫并真空濃縮。使用Biotage快速60M筒，通過快速色譜法來純化所得油狀物，用1:1的乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需化合物，為白色固體。向該游離吡唑(2.78,11mmol)在DCM(100mL)中的溶液內(nèi)加入吡啶(2.69mL,33.3mmol)，繼之加入曱苯磺酰氯(3.17g,16.51mmol)。反應(yīng)于室溫攪拌4小時，并用1NHC1中止。所得混合物用DCM萃取。有機層用飽和NaHC03溶液、鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥。將其過濾并真空濃縮。該粗材料通過快速色譜法(Sl02)純化，用25%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需化合物，為白色固體。向該烯醇醚(1.15g,2.84mmol)在DCM(19mL)中的溶液內(nèi)加入TFA(1mL)和水(0.2mL)。于室溫攪拌20分鐘后，通過加入飽和NaHCCb溶液中止反應(yīng)。所得混合物用DCM萃取(3X)。有機層用飽和NaHC〇3、鹽水洗滌，并用無水Na2S04干燥。將溶液過濾并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過快速色譜法純化，用30%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需化合物，為白色固體。在氮氣下于-78。C向該酮(595mg,1.58mmol)在無水THF(20mL)中的溶液內(nèi)加入二異丙基氨基化鋰溶液(0.79mL,1.58mmol,2.0M在THF中的溶液)。反應(yīng)于-78。C攪拌5分鐘后，加入2-[麗-二(三氟甲基磺?；?胺]-5-氯吡咬(Comins試劑，0.745g,1.89mmol)。將反應(yīng)加溫至室溫，并用1NHC1飽和溶液中止。所得混合物用乙酸乙酯萃取，用NaHC03飽和溶液洗滌，并用無水Na2S04干燥。將溶液過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Si02),用15%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需產(chǎn)物，LCMSm/z509(M+H)。向環(huán)己烷-1,4-二酮單乙二醇縮酮(5g,32mmol)和草酸二乙酯(5.6g,38.4mmol)在乙醇(100mL)中的溶液內(nèi)，加入叔丁醇鐘(38mL,1.0M在THF中的溶液)。l小時后,加入千基肼鹽酸鹽(6.9g，35.2mmol)，并將所得反應(yīng)混合物于室溫攪拌16小時。反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并用乙酸乙酯稀釋。有機層用水、鹽水洗滌，并用無水Na2S04干燥。將反應(yīng)混合物過濾，真空濃縮，并通過快速色譜法純化，獲得了所需化合物。向該縮酮(3.0g,8.76mmol)在THF(30mL)中的溶液內(nèi)加入乙醇(50mL),繼之加入3NHCl(20mL)。于50。C攪拌過夜后，將反應(yīng)真空濃縮。殘余物用乙酸乙酯稀釋，并用飽和NaHC03洗滌。將有機層真空濃縮并通過快速色語法純化(Horizon),用0-60%乙酸乙酯-己烷梯度洗脫。按照與對于中間體A和B描述的相似方法，將該酮轉(zhuǎn)化為其烯醇三氟曱磺酸酯。LCMSm/z231(M+H).中間體C中間體DTs在氮氣下向冷卻至-78。C的環(huán)己烷-l,4-二酮單乙二醇縮酮(10.75g,68.83mmol)在無水THF中的溶液內(nèi)加入LDA(37mL,2.0Msolution)。攪拌15分鐘后，加入草酸二乙酯(10.3mL,74mmol)。反應(yīng)加溫至室溫并攪拌16小時。反應(yīng)混合物用1NHC1中止，并將所得混合物用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，并用無水Na2S04干燥。將溶液過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Biotage-Horizon),用0-100%乙酸乙酯己烷梯度洗脫。向該二酮(10.5g,40.98mmol)在乙醇(300mL)中的溶液內(nèi)，加入水合肼(1.4mL,45.07mmol)和冰醋酸(30mL)。將所得反應(yīng)混合物加熱至65。C1.5小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物溶解在乙酸乙酯中，用飽和NaHC03、鹽水洗滌，并用無水Na2S04千燥。將溶液過濾并真空濃縮。將殘余物通過快速色譜法純化(Biotage40M),用60%乙酸乙酯-己烷作為溶劑，獲得了所需化合物，為黃色泡沫狀物。向該縮酮(6.76g,26.8mmol)在2:1EtOH/THF中的溶液內(nèi)加入3NHC1(50mL)。將所得反應(yīng)混合物加熱至60°C48小時。通過加入NaHC〇3飽和溶液將反應(yīng)中止。真空中除去有4幾溶劑。殘余物用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮，獲得橙色油狀物。該材料通過快速色譜法純化(Biotageflash40M),用5%乙酸乙酉旨-己烷洗脫，獲得了所需產(chǎn)物，為白色固體。向冷卻至0'C的該游離吡唑(0.47g,2.26mmol)在無水THF中的溶液內(nèi)加入氫化鈉(0.108g,2.7mmo1)。30分鐘后，加入曱苯磺酰氯(0.452g,2.37mmol)。將反應(yīng)于室溫攪拌l小時，然后通過加入INHC1中止。所得混合物用水稀釋，并用乙酸乙酯萃取(2X)。將有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過PrepTLC純化，用50%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需混合物，為白色固體。在N2氣下向冷卻至-70。C的該酮(0.941mg,2.6mmol)在無水THF(20mL)中的溶液內(nèi)加入LDA(1.3mL,2.0M溶液)。于-78。C攪拌30分鐘后，加入2-[N,N-二(三氟曱基磺?；?胺]-5-氯吡啶(Comins試劑，1.55g,3.9mmol)。將反應(yīng)緩慢加溫至室溫并攪拌4小時。通過加入1NHC1將其中止。所得混合物用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S〇4干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Biotage40M),用15%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需化合物，為白色固體。LCMSm/z494.9(M+H).中間體A(50mg,0.14mmol)與1.1當量4-氟苯基硼酸、三乙胺(28mg,0.28mmol)和Pd(Ph3P)4(15mg，10%催化劑)在二伊惡烷(lmL)中混合。將反應(yīng)混合物在^:波反應(yīng)器中于IO(TC(100Watts)加熱10分鐘，用1MNaOH、鹽水分配，有機層用無水^L酸鈉干燥，并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過制備離心色譜法純化(Si02,己烷-EtOAc),獲得了氰基千基烯中間體。將該材泮牛(25mg,0.079mmol)溶解到水(lmL)和異丙醇(2mL)中，并將該渾濁的化合物用疊氮化鈉(10mg,0.16mmol)和ZnBr2(26mg,0.12mmol)處理。將該不均勻反應(yīng)混合物回流16小時，冷卻至室溫，用濃HCl酸化至pH2，用EtOAc萃取，有機相用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。然后將該千基保護的烯中間體(17mg,0.047mmol)稀釋到曱醇中(2mL),并用滴加濃HC1將該渾濁的化合物均勻化。加入催化劑Pd-C(10%重量)，并在1個大氣壓的氫氣(氣嚢)下將反應(yīng)混合物劇烈攪拌48小時。將反應(yīng)混合物過濾并真空濃縮，獲得了所需產(chǎn)物。'HNMR(CD3OD,500MHz)57.37(m,2H),7.05(m,2H),4.28(to，1H)，3.33(m,2H),2.94(m,2H);LCMSm/z271(M+H).實施例1實施例2-19下列化合物是在與實施例1中描述和反應(yīng)方案3中圖解說明的類似條件下制備的。除了實施例2以外，所有實施例皆使用微波反應(yīng)器來促進鈀偶聯(lián)反應(yīng)。實施例2是在熱狀況(85。C,2小時)下進行的，并用磷酸鉀作為堿。<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>選才奪的實施例的1HNMR:實施例2(500MH2,CD3OD)S2.95(m,2H),3.40(m,2H),4.27機1H),7.20-7.40(m,5H).實施例3(500MHz,CD3OD)S2.95(m'2H),3.40(m,2H)'4.45(bd,1H),7.05-7.40(m,4H).實施例4(500MHz,CD3OD)52.29(s,3H),2.95(ra,2H),3.30(m,2H),4.25(ra,1H),7.05(m,1H)，7.20(m,3H).實施例5(500MHz，CD3OD)52.99(m,2H),3.36(m,2H),4.35(m,1H)'7.55(d,2H),7.65(d'2H).實施例6(500MHz,CD3OD)53.00(m,2H),3.40(m，2H),4.70(bm,1H),7.20-7.60(m,4H).實施例7(500MHz,CD3OD)S2.90(bm,2H)，3.40(ra，2H),4.30(m,1H)，7.40(m,3H).實施例8(500MHz'CD3OD)S2,90(bm,2H)'3.40(bm,2H),4.30(bs,1H)'6.81(bt,1H),6.96(bd,2H).實施例9(500MHz,CD3OD)S2.95(m,2H),3.40(m，2H),4.40(m,1H),7.00(m,IH),7.10(m,2H).實施例10〔500MHz,CDjOD)S3.05(m,2H),3.20(m'2H),4.64(m>1H),6.99(t,2H),7.31(m'1H).實施例11(500顧z，CD3OD)S3.05(m,2H),3.21(m，2H),4.64(m,1H),6.99(bt,2H),7.31(m，1H).實施例12(500MHz,CD3OD)53.00(m，2H)，3.15(s,3H),3.40(m,2H)，4.43(bm，1H),7.65(t,1H),7.76(d,1H),7.87(d'1H),7.96(s,1H).實施例13(500MHz,CD3OD)53.00(m,2H),3.40(m,2H)'4.70(bm,1H),7.40(叫1H)，7.60-7.70(m，3H).實施例15(500MHz,CD3OD)2明顯旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體52.95(m,2H),3.40(m,2H),4.42(m,1H),6.卯-7.77(m,3H).實施例16(500MHz,CD3OD)51.25(d,6H),2.95(m,3H),3.40(m,2H)，4.20(m'1H)，7.18(d,2H)'7.26(d,2H).實施例17(500MHz,CD3OD)S2.卯(m,2H),3.40(m,2H)，4.25(m^1H),7.40(bq,4H).實施例18(500MHz,CD3OD)S2.40(s,3H)2.90(m,2H),3.30(m,2H),4,51(m,1H)，7.20(m,3H),7.30(d,1H).實施例19(500MHz,CD3OD)52.95(叫2H),3.40(m,2H),4.30(bm,1H),7.40(m，4H).實施例20向中間體B(0.05g,0.1mmol)在DME(1.5mL)中的溶液內(nèi)加入3-吹喃基硼酸(13.4mg,0.12mmol)、三乙胺(42^L,0.2mmol)和四(三苯基膦)4巴(0)(0.01mmol,11mg)。所得混合物用孩i波于100。C加熱10分鐘。將反應(yīng)混合物直接負載到BiotageQuad312M柱上，并用15%乙酸乙酯己烷洗脫，獲得了所需化合物(36mg)。向該曱苯磺酰胺(36mg,0.13mmo1)在THF(1mL)中的溶液內(nèi)加入TBAF(100|iL,1.0M溶液)，并將所得混合物在密封管中加熱至8crcl小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并直4妻裝載到BiotageQuad312M柱上，用30%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需化合物。向該叔丁酯在DCM(3mL)中的溶液內(nèi)加入TFA(3mL),并將所得反應(yīng)于室溫攪拌3小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并在BiotageQuad3上純化，用50%乙酸乙酯己烷、然后用15%曱醇/乙酸乙酯/0.2%HOAc洗脫，獲得了所需化合物。向該烯烴混合物(12mg,0.05mmol)在MeOH(5mL)中的溶液內(nèi)加入濃HCl(2滴)，繼之加入Pd/C。所得混合物在H2氣嚢下攪拌l6小時。將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，將濾液真空濃縮，并通過反相HPLC(Gilson)純化，獲得了所需化合物。LCMSm/z219(M+H).實施例21-31下列化合物是在與實施例20中所描述和反應(yīng)方案4中圖解說明的類似的條件下制備的。在烯烴還原和叔丁酯裂解方面，反應(yīng)步驟的順序可以變換。N-曱苯磺酰胺保護基的TBAF脫保護也可以用LiOH水溶液進行，并且氫化步驟可以用Pd-C或氫氧化鈀(Pearlman's催化劑)催化。嘧啶實施例28是在沒有N-曱笨磺酰胺保護基的情況下合成的。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage48</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>選4奪的實施例的1HNMR:實施例21(500MHz,DMSO-dfi)52.90(m,2H),3.10(m,2H),4.10(m,IH),7.20-7.30(m,5H).實施例25(500MHz,CD3OD)62.20(s,3H),2.90(m,2H)>3.20(m,2H),4.15(m,IH),6.95(s，IH),7.15(s,IH).實施例26(500MHz,DMSO-A)S2.15(s,3H),2.85(m,2H),3.20(m,2H)，4.20(m,IH),6.80(s,IH),6.95(s,IH).實施例27(500MHz,DMSO-d6)52.40(s,3H),2.70(m,2H),3.20(m,2H),4.10(m,IH),6.60(s,IH),6.70(s,m).實施例28(500MHz,CD3OD)52.卯(m,2H),3.40(m,2H),4.10(m,IH),8.80(s,2H),9,05(s,IH).實施例29(500MHz,DMSO-d6)S2.S0(m,2H),3.20(m,2H),4.20(m,IH),730(t,IH)，7.95(t,IH),8.10(d，IH).實施例30(500MHz,DMSO-d6)S2.80(to,2H),3.20(m,2H)，4.10(m,IH)，7.10(dd,IH),7.98(t,IH),8.20(s'IH).實施例31(500MHz,DMSO-d6)52.75(m,2H),3.052H),3.91(s,3H),4.10(m,1H),6.卯(dd,IH)，7.60(d,IH)，8.05(d,IH).實施例32H將市場上買到的環(huán)戊烯酮(lmL,12.3mmol)與2,3,5-三氟苯基硼酸(2.6g,14.8mmol)、乙酉菱4內(nèi)(2g,24.6mmol)、乙f復(fù)4巴(276mg,1.23mmol)和SbCl2(280mg,1.23mmol)在HOAc(123mL)中混合。將反應(yīng)混合物攪拌18小時，真空濃縮，稀釋到二氯曱烷中，用硅藻土過濾，并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過制備離心色譜法純化(SiO2,20。/。EtOAc-己烷)，獲得了p-取代的烯酮中間體。將該材料(1.5g,4.8mmol)稀釋到乙醇(IOOmL)中,用叔丁醇鉀(1Mt-BuOH,5.3mL,5.3mmol)和草酸二乙酯(778mg,5.3mmol)處理，處理之后無色反應(yīng)混合物變成紅色。將反應(yīng)混合物放置1小時，用LCMS監(jiān)測，然后用鹽酸肼(361mg,5.3mmol)處理。將反應(yīng)混合物放置15小時，真空濃縮，用(l:1)EtOAc-水稀釋，將有機相分離，用無水硫酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物通過制備離心色i普法純化(Sl02,50。/。EtOAc-己烷)，獲得了烯烴吡唑乙基酯。通過用曱酸銨(5當量)、曱酸(4當量)和Pd-C(1當量)在乙醇-水(7:l，0.1M)中的混合物處理，將該烯爛中間體還原。將反應(yīng)混合物在可再密封的壓力管中于85。C加熱12小時，然后冷卻，過濾，真空濃縮，在水和EtOAc之間分配，將有機相分離，用無水石克酸鈉干燥，并真空濃縮。把該粗制酯(63mg,0.203mmol)稀釋到水-THF(l:l,2mL)中，并用LiOH(14.5mg,0.609mmol)處理。將反應(yīng)混合物放置18小時，真空濃縮至少量體積的水，酸化至pH2，用EtOAc萃取，并將有機成分用無水^L酸鈉干燥，并真空濃縮。殘余物通過在Gilson系統(tǒng)上用制備反相HPLC純化，獲得了所需產(chǎn)物。NMR(CD3OD,500MHz)2明顯旋光異構(gòu)體，(主要)57.03(m，1H),6.97(m,1H),4.37(m,1H),3.25(m,2H),2.89(m,2H)和(次要)56.97(m,1H),6.52(to,1H),4.69(dd，1H)，3.25(m,2H),2.89(m,2H);LCMSm/z265(M+H).<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>實施例33將上面實施例32獲得的乙基酯中間體(1.5g,4.87mmol)稀釋到氳氧化銨(0.05M)和二嚅烷(0.:30M)中，并將反應(yīng)混合物在可再密封的壓力管中攪拌12小時。反應(yīng)混合物真空濃縮，獲得了清澈粗制酰胺中間體。將該酰胺(400mg,1.51mmol)稀釋到THF(10mL)中，與三乙胺(0.5mL,3.5mmol)混合，將混合物冷卻至-5。C，然后用三氟乙酸酐(0.5mL,3.5mmol)處理。反應(yīng)混合物與室溫放置2小時，用飽和碳酸氫鈉水溶液中止，濃縮，在水和二氯甲烷之間分配，并將有機成分用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。將該腈中間體(67mg,0.25mmol)與疊氮化鈉(33mg，0.51mmol)和ZnBr2(57mg,0.25mmol)混合，并用(10:l)異丙醇-水(l.lmL)稀釋。將反應(yīng)混合物在可再密封的壓力管中于85。C加熱24小時，冷卻，濃縮，過濾，并在Gilson系統(tǒng)上通過制備反相HPLC純化，獲得了所需的產(chǎn)物。'HNMR(CD3OD,500MHz)2明顯旋光異構(gòu)體，(主要)S7.04(m,1H),6.96(m,1H),4.53(m,IH),3.37(m,2H)，2.99(m,2H)和(次要)S6.96(m,1H),6.45(m'IH)，4.83(叫1H),3.27(m,2H),2.92(m,2H);LCMSm/z307(M+H).實施例34<formula>formulaseeoriginaldocumentpage51</formula>向中間體C(100mg,0.232mmol)在DME(1.5mL)中的溶液內(nèi)，加入苯基硼酸(34mg,0.279mmol)、三乙胺(97muL,0.70mmol)和四(三苯基膦)釔(O)(13mg,0.012mmol)。所得混合物用微波于100攝氏度加熱10分鐘將反應(yīng)混合物真空濃縮，并通過PrepTLC板純化，用40%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需化合物，為黃色油狀物。向該乙基酯(62mg,0.172mmol)在二哺烷(3mL)中的溶液內(nèi)加入1NNaOH(1.74mL)。在將該反應(yīng)于室溫攪拌過夜后，將其真空濃縮以除去二嗜烷。殘余物用1NHC1酸化。所得混合物用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，用無水Na2S〇4干燥。將溶液過濾并真空濃縮，獲得固體。向該烯烴(34mg,0.102mmol)在曱醇(1.5mL)中的溶液內(nèi)加入濃HCl(300)iL)和Pd/C。所得混合物在氫氣嚢下攪拌4小時。通過硅藻土過濾去催化劑。將濾液真空濃縮，并通過反相HPLC(Gilson)純化，獲得了所需的化合物，為黃色固體。LCMSm/z243(M+H).實施例35向中間體D(75mg,0.152mmol)在DME(1.5mL)中的溶液內(nèi)加入3,5-二氟-苯基硼酸(29mg,0.182mmol)、三乙胺(640.46mmol)和四(三苯基膦)把(O)(9mg,0.008mmol)。所得混合物在微波中于IOO"C加熱IO分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮，并通過PrepTLC板純化，用20%乙酸乙酯-己烷為洗脫劑，獲得了所需產(chǎn)物。向該烯烴(55mg,0.12mmol)在2:1THF/MeOH(3mL)中的溶液內(nèi)加入曱酸銨(87mg,1.2mmo1)、甲酸(300]iL)和Pd/C,并將該反應(yīng)在壓力管中于80。C加熱48小時。反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾。將濾液真空濃縮，并再溶解在乙酸乙酯中。將有機層用水、NaHC03飽和溶液和鹽水洗滌。有機層用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。該材料用于下一步驟而不再進一步純化。向該乙基酯在1:1THF/MeOH(2mL)中的溶液內(nèi)加入1NLiOH(2mL)。所得溶液于室溫攪拌18小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮以除去有機溶劑。殘余物用1NHC1酸化并用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過反相HPLC(Gilson)純化，獲得了所需化合物。'HNMR(500MHz,CD3OD)51.95(m，1H),2.1(bd，1H),2.67(dd,1H),2,90(m，2H),3.10(m,1H),3.30(dd,1H)，6.78(t,1H),6.93(d,2H);LCMSm/z279(M+H).實施例36-44下列化合物是在與實施例34和35中所述和反應(yīng)方案6中圖解說明的類似的條件下制備的。實施例結(jié)構(gòu)MSm/z(M+H)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage54</formula>實施例36(500MHz,CD3OD)52.10(ra,2H),2.80(m,3H),3.16(dd,1H),3.20(m,1H),7.10(m,3H).實施例37(500MHz,CD3OD)S2.05(m,2H),2.60(d'1H)2.90(m,2H),3.20(dd,1H),3.46(bm'1H),7.19(t,IH)'7.28(t,1H),7.40(t,2H).實施例39(500MHz,CD3OD)52.07(m，2H),2.78(m,3H),3.10(dd,1H),3.25(m,〗H),7.04(t'1H),7.14(t,1H),7.23(q,1H),7.32(t,III).實施例40(500MHz,CD3OD)52.05(m,2H),2.90(m,3H),3.20(d,2H),7.00(dd,2H).實施例41(500MHz,CD3OD)58.06(d,1H),7.89(t,1H),7.28(t,1H),3.19(m,2H),2.78(m,3H),2.09(m,2H).實施例42(500MHz,CD3OD)57.20(d,IH)，6.92(m,2H),3.25(m,1H),2.80(m,4H),2.28(m，1H),1.%(m,1H).實施例43(500MHz,CD3OD)52.00(m,2H),2.68(dd,1H),2.80(m'2H),3.10(dd,IH)，3.20(m,]H),6.95(m,lH),7.10(m,2H).實施例44(500MHzJ)MSO-d6)52.07(m,2H),2.72-2.84(m3H),3.12(m,IH)，3.27(m,1H),7.00(t,1H),7.16(d,2H),7.35(q,1H).實施例45向攪拌著的nBuLi(3.44mL,1.6M,5.5mmol)在無水Et20(20mL)中的溶液內(nèi)于-78。C用5分鐘滴加噻唑(425mg,5mmol)在Et20(12.5mL)中的溶液。在反應(yīng)混合物于-78。C攪拌1小時后，用15分鐘滴加3-乙氧基環(huán)戊烯酮(630mg，5mmol)在Et2〇中的溶液。將該反應(yīng)緩慢加溫至室溫，并用1:1MeOH/2NHCl中止。所得混合物用乙酸乙酯萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Biotageflash40M),用40%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需化合物，為白色固體(400mg)。在N2氣下向冷卻至-78'C的該環(huán)戊烯酮(400mg,2.42mmol)在無水THF(20mL)中的溶液內(nèi)加入LDA(1.27mL,2.0M)。15分鐘后，加入二草酸二叔丁酯(0.538g,2.66mmol)。將該反應(yīng)緩慢加溫至室溫，攪拌l小時，并用1NHC1中止。所得混合物用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Biotage40M),用30%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需化合物。向該二酮(250mg,0.86mmol)在乙醇(10mL)中的溶液內(nèi)加入肼(29)iL)和水醋酸(lmL)。于室溫攪拌過夜后，將反應(yīng)混合物真空濃縮，并通過快速色譜法純化(Biotage40M),獲得了所需化合物。向該烯烴(55mg,0.19mmol)在EtOAc(9mL)中的溶液內(nèi)加入EtOH(5mL),繼之加入催化量的Pt2〇。將反應(yīng)在氫氣嚢下攪拌48小時。該反應(yīng)通過硅藻土過濾，并通過快速色譜法純化(Biotage20M)，用40%乙酸乙酯-己烷洗脫。然后將該材料用50%TFA/DCM(2mL)處理for2小時。將反應(yīng)混合物真空濃縮，獲得了所需化合物。'HNMR(500MHz,CD3OD)S3.05(m，2H),3.40(m，2H),4.50(m,1H)，7.50(s,1H),7.80(s'1H);LCMSm/z236(M+H).實施例46-50下列化合物是在與上述實施例45所描述和反應(yīng)方案7中圖解說明的類似的條件下制備的。環(huán)己基實施例46是通過將環(huán)己基氯化鎂Gngnard加成到3-乙氧基-環(huán)戊烯酮上制備的。將該3-(環(huán)己基)-環(huán)戊烯酮進行反應(yīng)方案7中所示的類似轉(zhuǎn)化，包括草酸二乙酯?；?，吡唑形成，乙基酯的LiOH急化，以及烯烴的最終氫化。實施例47和49分別是通過以下鋰-鹵化物交換合成的正丁基鋰與2-溴吡啶交換，以及四甲基哌啶基氨基化鋰與2-氯吡嗪交換。將實施例49的3-(吡嗪基)-環(huán)戊烯酮中間體進4亍反應(yīng)方案7中所示的類似轉(zhuǎn)化，包括草酸二乙酯?；?，吡唑形成，氫化，和最終乙基酯的LiOH皂化。關(guān)于N-曱基吡唑的a-鋰化以產(chǎn)生實施例48,參見Tetrahedron1983,39(12),2023。實施例50是通過間-溴吡啶與異丙基氯化鎂交換產(chǎn)生3-吡啶基Grignard試劑來合成的。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage57</formula>選才奪的實施例的HNMR:實施例47(500MHz,DMSO"d6)S2.90(m，2H),3.00(m,2H),4.10(m,IH),7.20(dd>m),7.35(d,IH),7.70(t,IH),8.50(d,IH).實施例48(500MHz,D20)majorrotamer,S7.94(s，IH),6.55(s,IH),4.39(m,IH),4.05(s'3H)'3.37(m,2H)，2.94(m,2H).實施例49(500MHz,CD3OD)S3.05(m,2H),3.20(m,IH)，3.40(m,IH)，4.35(叫IH),8.45(d,IH),8.57(t,IH),8,61(d,IH).實施例50(500MHz,CD3OD)58.55(s,].H),8.40(d,IH),7.81(d,IH),7.40(叫IH)，4.10(m,IH),3.35(dd,IH),3.20(dd,IH),2.90(dd,IH),2.80(dd,IH).實施例51<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>將市場上買到的環(huán)戊烯酮(2mL,24.7mmol)與吡唑(3.3g,49.4mmol)在氯仿(IOmL)中混合，并加到可再密封的壓力管中。反應(yīng)混合物于50。C加溫24小時，冷卻，濃縮，并通過制備離心色譜法純化(Si02,EtOAo己烷)，獲得了(3-取代的環(huán)戊酮中間體。如反應(yīng)方案5中所示，用類似于實施例32的方法，將該材料用^又丁醇鉀和草酸二乙酯在乙醇中的混合物、繼之用鹽酸肼處理。還將該乙基酯中間體用類似的方法皂化，只是用NaOH替代LiOH,并且殘余物通過在Gilson系統(tǒng)上進行制備反相HPLC纟屯化，獲得了所需產(chǎn)物。'HNMR(CD3OD,500MHz)S8.14(m,1H),8.02(m，1H),6.61(m，1H),5.85K〗H)'3.59(m'2H),3.28(m,2H);LCMSm/z219(M+H).實施例52<formula>formulaseeoriginaldocumentpage58</formula>實施例52是在類似于上面實施例51中所描述和反應(yīng)方案7中圖解說明的條件下，由1,2，3-三唑制備的。'HNMR(500MHz,CD3OD)S3.20(m,2H),3.50(m,2H),5.90(m,1H),7.72(d，2H);LCMSm/z220(M+H).實施例53將文獻(Can.J.Chem.1982,60,210)中描述的3-碘-環(huán)戊烯酮(50mg,0.16mmol)與反應(yīng)方案7中所示的市場上買到的硼酸酯(65mg，0.31mmol)和磷酸鉀(166mg,0.78mmol)在DME(10mL)中混合。反應(yīng)混合物用Pd(dppf)Cl2(0.031mmol)處理，并于IO(TC加熱14小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻，濃縮，并通過制備離心色語法純化(Si02,EtOAc-己烷)，獲得了P-取代的環(huán)戊烯酮中間體。在與實施例32類似的方法中，如反應(yīng)方案5中所示，將該材料用叔丁醇鉀和草酸二乙酯、繼之用鹽酸肼處理，獲得了烯烴吡唑乙基酯。將該烯烴酯中間體通過用甲酸銨、曱酸、Pd-C處理進行還原，并且采用類似的方法用NaOH水溶液進^f亍皂化。殘余物通過在Gilson系統(tǒng)上進行制備反相HPLC純化，獲得了所需產(chǎn)物'HNMR(CD3OD>500MHz)S7.59(s,1H)，7.51(s,1H)'4.03(m,1H),3.88(s'3H),3.25(dd,1H),3.17(dd,1H),2.77(m,2H);LCMSm/z233(M+H).實施例54將市場上買到的3-象基-環(huán)戊酮(100mg,0.78mmol)稀釋到苯(20mL)中，用亞硫酰氯(0.093mL,0.78mmol)處理，并將反應(yīng)混合物回流下加熱2小時。然后將混合物濃縮，用二氯甲烷(20mL)稀釋，冷卻至0。C,加入炔丙基胺(78mg,0.86mmol),繼之加入三乙胺(0.33mL,2.3mmol)。將反應(yīng)混合物老化12小時，然后用碳酸氫鈉々包和水溶液分配，有機層用無水硫酸鈉干燥并真空濃縮。殘余物通過制備離心色譜法純化(Sl02,N'HEtOAc-己烷)，獲得了P-酰胺中間體。將該炔丙基酰胺(594mg,3.6mmol)稀釋到HOAc(10mL)中,用Hg(OAc)2(37mg,0.12mmol)處理，在回流下加熱2小時。然后將反應(yīng)混合物冷卻，過濾，濃縮，并在碳酸氫鈉飽和水溶液和二氯甲烷之間分配。有機成分用無水硫酸鈉千燥，真空濃縮，并且殘余物通過制備離心色譜法純化(Si02,EtOAc-己烷)，獲得了卩-夢惡唑中間體(90mg)。以類似實施例32的方法，如反應(yīng)方案5所示，將該材料用叔丁醇鉀和草酸二乙酯在乙醇中的混合物、繼之用鹽酸肼處理，獲得了吡唑乙基酯。將該酯中間體以類似的方法用NaOH水溶液急化。殘余物通過在Gilson系統(tǒng)上進行制備反相HPLC純化，獲得了所需產(chǎn)物。HNMR(CD3OD,500MHz)S6.71(s,1H),4.26(m,1H),3.25(m，2H),3.10(dd,2H),2.32(s,3H);LCMSm/z234(M+H).實施例55H在氮氣下向冷卻至-78。C的六丁基-二錫烷(5.8g,10mmol)在無水THF中的溶液內(nèi)加入nBuLi(6.25mL,1.6M,10mmol)。l小時后，滴加3-乙氧基-環(huán)戊烯酮(1.26g,10mmol)在THF(5mL)中的溶液。該反應(yīng)于-78。C攪拌l小時，然后通過倒入氯化銨飽和溶液中來中止反應(yīng)。所得混合物用乙酸乙酯萃取，用鹽水洗滌，并用無水Na2S〇4干燥。將有機層過濾并真空濃縮，獲得了黃色油狀物。該材料通過快速色譜法(Sl02)純化，用10%乙酸乙酯己烷洗脫，獲得了所需錫烷，為油狀物。在氮氣下向冷卻至-78。C的2,4-二溴噻唑(1.0g,4.11mmol)在無7jc乙醚(50mL)中的溶液內(nèi)加入nBuLi(3.08mL,4.94mmol,1.6M溶液)。于-78°(:攪拌1小時后，加入氯三曱基硅烷(0.57mL,4.52mmo1)。將反應(yīng)于78。C再攪拌l小時，然后通過加入飽和NaHC03溶液中止。所得混合物用乙酸乙酯萃取。有才幾層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Sl02),用10%乙酸乙酯-己烷洗脫，獲得了所需的TMS-溴噻唑，為無色油狀物。如下所述，如反應(yīng)方案9中所圖解說明，將兩個錫烷和淡化物中間體合并。向環(huán)戊烯酮錫烷(390mg,1.05mmol)和TMS-溴噻唑(206mg,0.87mmol)在曱苯(5mL)中的溶液內(nèi)，加入二氯化鈀(二-三苯基膦)。所得混合物加熱至回流18小時。將反應(yīng)冷卻至室溫。加入KF飽和溶液(5mL)，并將所得混合物劇烈攪拌1小時。反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾。濾液用水、鹽水洗滌，用無水Na2S04千燥，過濾并真空濃縮。殘余物通過快速色譜法純化(Si02),40%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需產(chǎn)物。向該P-取代的環(huán)戊烯酮(67mg，0.28mmol)在無水乙醇(5mL)中的溶液內(nèi)，加入草酸二乙酯(38^L,0.28mmol)和叔丁醇鉀(282^L,0.28mmol,1.0M在THF中的溶液)。于室溫攪拌2小時后，加入鹽酸肼(23mg,0.338mmol)在7jc(0.5mL)中的溶液。將反應(yīng)于室溫攪拌16小時，然后加熱至回流15分鐘。將反應(yīng)混合物真空濃縮。殘余物用乙酸乙酯稀釋，用水、飽和NaHC03溶液洗滌，過濾并真空濃縮，獲得了所需產(chǎn)物，為單一雙4建異構(gòu)體。向該烯烴(]2mg，0.045mmol)在EtOAc/EtOH(2.8:1,2mL)中的溶液內(nèi)加入Pd(OH)2(5mg)，并將反應(yīng)在氫氣嚢下攪拌4小時。反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾。將濾液真空濃縮，并通過快速色譜法純化(Si02)，用60%乙酸乙酯-己烷作為洗脫劑，獲得了所需產(chǎn)物。向該乙基酯在1:1THF/MeOH(2mL)中的溶液內(nèi)，加入1NNaOH(0.5mL)。將反應(yīng)于室溫攪拌16小時后，通過加入1NHCl(0.5mL)將其酸化。所得殘余物通過反相HPLC純化，獲得了所需產(chǎn)物。'HNMR(500MHz,CD3OD)§3.00(m,2H),3.30(m,2H)，4.40(m'1H),7.40(s,1H),9.10(s,1H);LCMSm/z236(M+H).DP實施例1r5-r(4-氯苯基)硫基l-4-(甲基磺?；?-6,7,8，9-四氫吡啶并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物G)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage61</formula>歩驟14-氯煙醛本標題化合物是如F.Marsais等人，J.HeterocyclicChem.,25,81(1988)所描述那樣制備的。歩驟24-(甲硫基)煙醛往NaSMe(9.5g,135mmol)在MeOH(250mL)中的溶液中加入步驟1的4-氯煙醛(13.5g,94.4mmol)在MeOH(250mL)中的溶液。該反應(yīng)混合物于60。C放置15分鐘。把反應(yīng)混合物倒在NH4C1和EtOAc上。將有機相分離，用H20洗滌，并用Na2S04千燥。然后將化合物用硅膠純化，用50。/。EtOAc在己烷中的混合物作為洗脫劑，獲得了本標題化合物。步驟3(2Z)-2-疊氮基-3-『4-(甲硫基)吡梵-3-基l丙-2-烯酸甲酯把4-(曱硫基)煙醛(4.8g,31mmol)和疊氮基乙酸甲酯(9.0g，78mmol)在MeOH(50mL)中的溶液加到25%NaOMe在MeOH(16.9mL,78mmol)中-12。C的溶液內(nèi)。在30分鐘的加入過程中，監(jiān)測內(nèi)部溫度并保持在-10。C至-12。C之間。然后所得混合物在冰浴中攪拌幾小時，繼之在冷室中的冰浴中攪拌過夜。然后把該懸浮液倒在冰和NH4C1的混合物上，攪拌10分鐘后把漿液過濾。該產(chǎn)物用冷H20洗滌，然后在真空下干燥，獲得了本標題化合物，為淺褐色固體，其含有一些鹽。然后將該化合物用硅膠純化，用EtOAc作為洗脫劑。歩驟44-(曱硫基)-lH-吡咯并f2，3-bl吡啶-2-甲酸甲酯將步驟3的化合物(0.40g,1.6mmol)在二曱苯(16mL)中的懸浮液緩慢加熱至140。C。于140°C15分鐘后，把該黃色溶液冷卻至室溫。由于形成氮氣而可能放熱，所以必須小心。然后將懸浮液冷卻至0°C,過濾并用二曱苯洗滌，獲得了本標題化合物。歩驟54-(曱硫基)-6-氧代-6,7,8,9-四氫吡咬并「3,2-bl中氮茚-7-曱酸乙酯向步驟4的化合物(0.35g,1.6mmol)在DMF(20mL)中的溶液于0。C加入NaH(1.2eq.)。5分鐘后，加入nBu4NI(0.10g)和4-溴丁酸乙酯(0.40mL)。于室溫l小時后，把反應(yīng)混合物倒在飽和NH4Cl和EtOAc上。將有機相分離，用H20洗滌并用NaS04千燥。蒸發(fā)后，將粗產(chǎn)物用快速色i普法純化。然后把該雙酯溶解在THF(7.0mL)中，并于0。C加入1.06M叔丁醇鉀在THF中的溶液(2.2mL)。于室溫l小時后，^巴反應(yīng)混合物倒在飽和NH4C1和EtOAc上。將有機相分離，用Na2S04干燥并減壓蒸發(fā)，獲得了本標題化合物，為乙基酯和曱基酯的混合物。步驟64-(曱硫基)-8.9-二氫吡啶并「3,2-bl中氮茚-6(7H)-酮向步驟5的化合物(0.32g)中加入EtOH(8.0mL)和濃HC1(2.0mL)。所得懸浮液回流5小時。該反應(yīng)混合物在EtOAc和Na2C03之間分配。將有機相分離并蒸發(fā)，獲得了本標題化合物。歩驟7(2E,2Z)-「4-(曱硫基)-8,9-二氫吡咬并「3,2-bl中氮茚-6(7H)-亞基l乙酸乙酯向膦?；宜崛阴?0.45g,2.17mmol)的DMF溶液(12mL)中加入80%NaH(0.06g,2.00mmol)和步驟6的化合物(0.22g,1.00mmole)。于55°C4小時后，把反應(yīng)混合物倒在NH4C1和EtOAc上。將有機相分離，并減壓蒸發(fā)。粗產(chǎn)物通過快速色譜法純化，獲得了本標題化合物。步驟8「4-(曱硫基)-6，7，8，9-四氫吡咬并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸乙塱把步驟7的化合物溶解在MeOH-THF中并加熱以便溶解。向該預(yù)先冷卻的溶液中于室溫加入Pt02，并將所得混合物在一個大氣壓的氫氣下放置18小時。將反應(yīng)混合物謹慎地用硅藻土過濾，用CH2Cl2作為洗脫劑。將濾液減壓蒸發(fā)，獲得了本標題化合物?；蛘撸梢詫⒉襟E7的化合物用Pd(OH)2在EtOAc中的混合物在40PSIH2下氫化18小時。步驟9「4-(曱基磺?；?-6，7,8,9-四氬吡咬并「3,2-bl中氮茚-6-基1乙酸乙酯向步驟8的化合物(0.08g,0.27mmol)在MeOH(3.0mL)中的混合物內(nèi)加入Na2WO4(0.10g)和30。/oH2O2(600)iL)。l小時后，將反應(yīng)混合物在H20和EtOAc之間分配。將有機相用H20洗滌，分離并蒸發(fā)。本標題化合物通過快速色譜法進行純化。歩驟10「5-「(4-氯苯基)硫基1-4-(曱基磺?；?6,7,8,9-四氳吡咬并「3，2-bl中氮茚-6-基1乙酸乙酯向4,4'-二氯二苯二硫(0.24g)的1,2-二氯乙烷溶液(2.0mL)中加入S02C12(50)iL)。向步驟9的化合物(0.05g)在DMF(2.0mL)中的混合物內(nèi)加入上述混合物(-180jaL)。對反應(yīng)進行^NMR跟蹤，并且在室溫保持直至沒有任何原料。把反應(yīng)混合物倒在飽和NaHC03和EtOAc上。將有機相分離，蒸發(fā)，并將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟11f5-「(4-氯笨基)硫基l-4-(甲基磺?；?6，7,8,9-四氳吡咬并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸把1NNaOH加到溶解在THF-MeOH的1/1混合物中的步驟10的化合物內(nèi)。于室溫18小時后，將反應(yīng)混合物在飽和NH4C1和EtOAc之間分配。將有機相分離，用Na2SOj干燥并蒸發(fā)，獲得了本標題化合物。lH:NMR(500MHz,丙酮-d6)511.00(bs,1H),8.60(d,1H),7.80(d,1H),7.20(d,2H),7.00(d,2H),4.65(m,1H)，4.20(m,1H),3.75(m，1H),3.35(s,3H),2.80to2.10(m,6H).DP實施例2「5-「(4-氯苯基)硫基1-4-(甲硫基)-6,7,8,9-四氫吡啶并「3,2七1中氮茚-6-基l乙酸(化合物H)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>本標題化合物可以用與實施例1、步驟10和11中描述的類似的方法，由實施例l、步驟8的化合物制備。m/z418.DP實施例3「5-「(3,4-二氯苯基)硫基l-4-(甲基磺?；?-6，7,8,9-四氫吡咬并「3，2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物I)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage64</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用步驟10中的二(3,4-二氯苯基)二硫制備的。iHNMR(500MHz，丙酮-d6)58.55(d，lH),7.85(d,1H)，7.35(d,1H),7.15(s,1H),6.95(d,1H)，4.60(m,1H),4.15(m,1H)，3.80(m，1H),3.40(s,3H),2.80to2.10(m,6H).m/z484.在ChiralecelOD柱25cmx20mm上分離對映體，使用30%異丙醇/17%乙醇/0.2%乙酸在己烷中的混合物進行洗脫，流速為8ml/min。其純度是在ChiralecelOD柱25cmx4.6mm上證實的，使用35%異丙醇/0.2%乙酸在己烷中的混合物洗脫，流速為1.0ml/min。流動較快的對映體Tr=9.7mm,流動舉交十曼的只于映體Tr=11.1min。DP實施例4「5-(4-氯苯甲?；?-4-(甲基磺?；?-6,7,8,9-四氫吡咬并「3,2-bl中氮茚-6-基1乙酸(化合物J)歩驟1「5-(4-氯苯甲?；?-4-(甲硫基)-6,7,8,9-四氫吡咬并[3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸乙酯向4-氯苯曱酰氯(0.30g，1.7mmol)在1，2-二氯乙烷(6.0mL)中的溶液內(nèi)加入A1C13(0.24g,1.8mmole)。5分鐘后，把得自實施例1步驟8的[4-(曱硫基)-6,7,8,9-四氫吡啶并[3,2-b]中氮茚-6-基]乙酸乙酯(0.15g,0.47mmole)在1,2-二氯乙烷(6.0mL)中的溶液加到上述混合物中。于80°C4小時后，將反應(yīng)混合物在EtOAc和NaHC03之間分配。將有機相分離，用Na2S04干燥并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟2f5-(4-氯苯甲?；?-4-(甲基磺?；?-6,7,8,9-四氫吡啶并「3，2-bl中氮茚-6-基l乙酸乙酯向[5-(4-氯苯甲?；?-4-(曱硫基)-6,7,8-9-四氫吡啶并[3,2-b]中氮茚-6隱基]乙酸乙酯(0.12g,0.27mmole)在MeOH(5.0mL)中的溶液內(nèi)加入Na2W04(0.1g)和30%H2〇2(300pL)。該反應(yīng)混合物于55。C攪拌1小時。然后將反應(yīng)混合物在H20和EtOAc之間分配。有機相用H20洗滌，用Na2S04干燥并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟3「5-(4-氯苯甲酰基)-4-(曱基磺?；?-6，7，8，9-四氫吡啶并「3，2-bl中氮茚-6-基l乙酸將[5-(4-氯苯曱?；?-4-(甲基磺酰基)-6,7-8,9-四氫吡啶并[3,2-1)]中氮茚-6基]乙酸乙酯如實施例1步驟11中所述進行處理，獲得了本標題化合物。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>DP實施例5-4-(甲基磺?；?-6,7,8,9-四氫吡啶并[3,2-b]中氮茚-6-基l乙酸(化合物K)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用4,4'-二溴二苯二硫制備的。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>DP實施例6方法-1-l-(甲基磺?；?-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯(pyrrolizin)-8-基]乙酸(化合物L)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage66</formula>歩驟12-(甲硫基)煙醛本標題化合物是如實施例1步驟2中所描述，只是溶液于55。C加熱2小時,由2-溴煙醛(A.NumataSynthesis1999p.306)制備的。歩驟2(2Z)-2-疊氮基-3-[2-(甲硫基)吡啶-3-基]丙-2-烯酸甲酯本標題化合物是如實施例1步驟3中所描述那樣制備的。歩驟34-(曱硫基)-lH-吡咯并「3,2-cl吡咬-2-甲酸甲酯將(2Z)-2-疊氮基-3-[2-(曱硫基)吡啶-3-基]丙-2-烯酸甲酯(1.00g,4.00mmol)在1,3,5-三甲基苯(50mL)中的溶液于16(TC加熱1小時。反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后冷卻至0。C,將沉淀物過濾并用冷的1，3,5-三曱基苯洗滌，獲得了本標題化合物。歩驟4l-(曱硫基)-8-氧代-7,8-二氫-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-7-曱酸曱酯向4-(曱硫基)-lH-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-甲酸曱酯(0.30g,1.35mmol)在THF(3mL)-甲苯(12.0mL)中的懸浮液內(nèi)加入叔丁醇鉀的1.06MTHF溶液(1.42mL/1.41mmol)和丙烯酸曱酯(300pL)。所得混合物于80。C加熱18小時。將混合物在EtOAc和NH4C1之間分配，并通過硅藻土過濾。將有機相分離，用Na2S04干燥并過濾，獲得了本標題化合物。步驟5l-(甲硫基)-6,7-二氫-8H-吡啶并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-酮如實施例1步驟6中所描述，將l-(甲硫基)-8-氧代-7，8-二氫-6H-吡咬并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-7-甲酸甲酯轉(zhuǎn)化為本標題化合物。歩驟6『8-鞋基-l-(曱硫基)-7，8-二氫-6H-吡口定并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸曱酯將l-(甲硫基)-6,7-二氫-8H-吡啶并[3，4-b]吡咯中氮吡咯-8-酮(0.15g,0.68mmo1)、溴乙酸甲酯(0.34mL)、Zn-Cu(0.226g)在THF(3.0mL)中的混合物超聲處理2小時。然后混合物于6(TC加熱5分鐘直到反應(yīng)完成為止。將反應(yīng)混合物在EtOAc和NH4C1之間分配。將有機相分離，用Na2S04干燥，過濾并減壓蒸發(fā)，獲得了本標題化合物。將化合物用快速色譜法進行純化。步驟7[l-(曱硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基乙酸曱酯向NaI(0.300g)在CHsCN(3.2mL)中的溶液內(nèi)加入TMSC1(0.266mL)。在水浴中把該混合物加到[8-羥基-l-(曱硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基]乙酸曱酯(0.15g,0.515mmol)在CH3CN(1.5mL)中的懸浮液內(nèi)。0.5小時后，將反應(yīng)混合物在EtOAc和NaHC〇3之間分配。將有機相分離，用硫代硫酸鈉洗滌，用MgS04干燥，并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟8「1-(曱基磺?；?-7,8-二氫-611-吡啶并「3，4七1吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸曱酯如實施例1步驟9中所描述，將[l-(甲硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基]乙酸曱酯轉(zhuǎn)化為本標題化合物。歩驟9『9-(3，4-二氯苯基)硫代l-l-(曱基磺?；?-7,8-二氳-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸如實施例1、步驟10和11中所描述，使用步驟10中的二(3,4-二氯苯基)二硫，將[1-(曱基磺?；?-7,8-二氳-611-吡啶并[3,4七]吡咯中氮吡咯-8-基]乙酸曱酯轉(zhuǎn)化為本標題化合物。lHNMR(500MHz,丙酮-d6)S8.35(d,1H)7.80(d,1H),7.35(d,1H),7.15(s,1H)'6.95(d，1H),4.55(m，1H)，4.35(m,1H),3.90(m,1H),3.30(s,3H),3.15(m,1H),3.05(m,1H),2.80(m,1H),2.50(m,IH).DP實施例6方法-2「9-(3,4-二氯苯基)硫代l-l-(曱基磺?；?-7,8-二氪-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸歩驟1l-(曱硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并「3，4-bl吡咯中氮吡咯-8-醇于0。C向得自實施例6、方法-1步驟5的1-(甲硫基)-6,7-二氫-8H-吡口定并[3,4-b]吡咯中氮吡略-8-酮(0.55g,2.2mmol)在EtOH(10mL)-THF(1mL)中的懸浮液內(nèi)加入NaBH4(0.10g,2.6mmo1)。于室溫30分鐘后，通過加入丙酮中止反應(yīng)。減壓蒸發(fā)去溶劑，并把EtOAC和H20加到該殘余物中。將有機相分離，用MgS04干燥并蒸發(fā)。將本標題化合物用EtOAc/己;^克洗滌并過濾。歩驟22-「1-(甲硫基)-7，8-二氫-6H-吡啶并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l丙二酸二甲酯向l-(甲硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-醇(0.54g,2.1mmol)在THF(10mL)中的于-78。C懸浮液內(nèi)加入1MNaHMDS在THF中(2.35mL,2.4mmol)和氯磷酸二苯酯(0.53mL,2.6mmol)的混合物。30分鐘后，加入丙二酸二曱酯(0.73mL,6.4mmol)和1MNaHMDS在THF(6.8mL，6.8mmol)中的混合物。使反應(yīng)混合物達到0。C,然后達到室溫。然后將混合物在ETOAc和NH4C1之間分配。將有才幾相用MgS04干燥、過濾并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟3「l-(甲硫基)-7，8-二氫-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基1-乙酸甲酯向2-[l-(甲硫基)-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基]丙二酸二曱酯(0.59g,2.17mmol)與DMSO(4mL)的混合物中加入NaCl(0.45g)在H2〇(0.45mL)中的溶液。于150°C18小時后，將反應(yīng)混合物在ETOAc和H20之間分配。將有機相分離，用Na2S04干燥并蒸發(fā)。然后將本標題化合物用快速色譜法進行純化。歩驟4f9-r(3，4-二氯苯基)硫基l-l-(甲基磺?；?-7,8-二氬-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸如實施例6、方法-1、步驟8-9中所描述，由[l-(甲石克基)-7,8-二氪-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基]乙酸曱酯獲得了本標題化合物。DP實施例7n(H(3，4-二氯苯基)硫基l-l-(甲基磺酰基)-6，7,8，9-四氳吡咬并「3,4-bl中氮茚-9-基l乙酸(化合物M)歩驟1H-(甲基磺?；?-6,7,8,9-四氫吡啶并「3,4-bl中氮茚-9-基1乙酸乙酯用與實施例l、步驟5-9所描述的相同的方法，由實施例6、步驟3的產(chǎn)物制得了本標題化合物。步驟2n0-『(3，4-二氯苯基)硫基l-l-(曱基磺?；?-6,7，8,9-四氫吡咬并「3,4-bl中氮茚-9-基l乙酉臾采用與實施例l、步驟10-11中所描述的相同方法，用步驟10中的二(3,4-二氯苯基)二硫?qū)⒉襟E1的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為本標題化合物。MSM+l=485.P實施例8(4-(曱基磺酰基)-5-{「4-(三氟曱基)苯基l硫基卜6,7,8，9-四氫吡啶并f3,2-bl中氮茚-6-基1乙酸(化合物N)本標題化合物是如實施例1中所描述，用二[4-(三氟曱基)苯基]二硫制備的。lHNMR(500MHz,丙酮,S8.55(d,1H),7.75(d,1H),7.45(d,2H),7.15(d,2H),4.55(m，1H),4.15(m,1H),3.80(m,1H),3.30(s,3H),2.80to2.10(m,6H).m/z513(M+l).DP實施例9r5-「(2-氯-4-氟笨基)硫基l-4-(曱基磺?；?-6，7,8,9-四氮吡。定并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物0)本標題化合物是如實施例1中所描述，用二(2-氯-4-氟苯基)二硫制備的。m/z469(M+l)DP實施例10「4-(曱基磺酖基)-5-(2-萘硫基)-6,7，8，9-四氬吡咬并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物P)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage71</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用二(2-萘基)二硫制備的。m/z467(M+l)DP實施例11「5-r(2，3-二氯苯基)硫基l-4-(曱基磺?；?-6，7,8,9-四氳吡咬并f3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物Q)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage71</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用二(2，3-二氯苯基)二硫制備的。lHNMR(500MHz,丙酮-d6)SOS(d,1H),7.80(d,1H),7.30(d,1H),7.00(t,1H),6.60(d,1H),4.60(m,1H),4.20(m,1H),3.80(m,1H)，3.40(s'3H)，2.80to2.10(m,6H).DP實施例12『5-「(4-甲基苯基)硫基l-4-(曱基磺?；?-6,7，8,9-四氫吡啶并「3，2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物R)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage71</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用對曱苯二硫制備的。lH畫R(500MHz,丙酮-d6)S8.55(d,1H),7.80(d,1H),6.95(m,4H),4.60(m,1H),4,15(m,1H),3.80(m,1H),3.35(s,3H),2.80to2.10(m,6H).DP實施例13「4-(曱基磺?；?-5-(苯基硫基)-6,7，8,9-四氬吡啶并「3,2-131中氮茚-6-基l乙酸(化合物S)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage72</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用二苯基二硫制備的。lHNMR(500MHz，丙酮d6)58.55(d,IH)，7.80(d,1H),7.15to6.卯(m'5H),4.60(叫IH)，4.15(m,1H),3.75(ra,IH)，3.30(s,3H),2.80to2.10(m,6H).DP實施例14「5-[(2，4-二氯苯基)硫基卜4-(曱基磺?；?-6,7,8,9-四氬吡。定并「3,2-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物T)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage72</formula>本標題化合物是如實施例1中所描述，用二(2,4-二氯苯基)二硫制備的。該二硫化物是用Br2在乙醚中的混合物由2,4-二氯疏基苯基制備的。lHNMR(500MHz'丙酮-d6)58.55(d,lH)，7.85(d，1H),7.35(s,1H),7.00(d,1H),6.65(d,1H),4.55(m,IH)，4.15(叫IH)，3.80(m,1H),3.35(s,3H),2.80to2.10(m,6H).DP實施例15[5-「(4-氯苯基)硫基l-4-(曱基磺?；?-6,7，8,9-四氫吡啶并「4,3-bl中氮茚-6-基l乙酸(化合物U)如實施例1中所描述，只是終端環(huán)化是通過在回流下向十氫化萘中加入疊氮化物進4亍的，由3-氯煙醛(Heterocyclesp.151,1993)制得本標題化合物。lHNMR(500MHz,丙酮-d6)S9.20(s,1H),8.85(s,1H),7.20(d,2H)，7.00(d,2H),4.70(m,1H),4.30(m，1H),3.75(m,1H),3.35(s,3H),2.80to2.10(m,6H).DP實施例16「9-IY4-氯苯基)硫基l-l-(甲基磺酰基)-7,8-二氫-6H-吡啶并f3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-乙酸(化合物V)本標題化合物是如實施例1、步驟10和11所描述，用步驟10中的二(4-氯苯基)二^L,由實施例6方法1步驟8的產(chǎn)物制備的。lHNMR(500MHz,丙酮-d6)S8.25-8.3(m,1H),7.71-7.75(m,1H)，7.12-7.17(m,2H),6.97-7.04(m,2H),4.45A51(m,1H),4.324.39(m，1H),3.73-3.S0(m,1H),3.29(s,3H),3.15-3.21(m,1H),2.99-3.08(m，1H),2.66-2.73(m,1H),2.46-2.54(m,1H).DP實施例17(-)-[(4-氯芐基)-7-氟-5-曱磺?；?-1,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并問吲哚-3-基]乙酸(化合物E)步驟l.'(+/-)-(7-氟-1,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「1)1吲哚-3-基)乙酸乙酉;在N2氣下，用迪安-斯達克分水器，將10.00g4-氟-2-碘苯胺、6.57g2-(2-氧代環(huán)戊基)乙酸乙酯和121mg對-甲苯磺酸在100ml苯中的溶液回流24小時。在此時間以后，在蒸餾下除去苯。然后，加入60mlDMF，將溶液脫氣，然后依次加入19mlHumg's堿和405mgPd(OAc)2。將溶液加熱至115°C3小時，然后冷卻至室溫。加入300ml1NHC1和200ml乙酸乙酯以中止反應(yīng)，并將混合物通過硅藻土過濾。把相分離，將酸性相用200ml乙酸乙酯萃取兩次。把有才幾層合并，用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，通過硅藻土過濾并濃縮。將粗產(chǎn)物通過快速色譜法進一步純化，用100%甲笨洗脫，獲得了本標題化合物。'HNMR(丙酮-d6)S9.76(brs,1H),7.34(dd,1H),7.03(d,1H)，6.78(td，1H)，4.14(q,2H),3.57(m,1H),2.85-2.55(m，5H)，2.15(m,1H),1.22(t'3H).歩驟2:(+/-)-(7-氟-1,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「1)1。引咮-3-基)乙酸H向1.24g步驟1的酯在14mL四氫呋喃(THF)中的溶液內(nèi)于室溫依次加入7mLMeOH和7mL2NNaOH。2.5小時后，把反應(yīng)混合物倒入含有乙酸乙酯(EtOAc)/lNHCl的分液漏斗中。把相分離，并將酸性相用EtOAc萃取兩次。將有機層合并，用鹽水洗滌，用無水Na2S04千燥并蒸發(fā)至干，獲得了粗油狀物，將其照此用于下一步驟(〉90%純度)。NMR(丙酮-36)S10.90(brs，1H),9.77(brs,1H),7.34(dd,1H),7.04(dd，1H),6.79(td,1H),3.56(m,1H),2.90-2.50(m，5H),2.16(m,1H).MS(-APCI)m/z232.2(M-H)-.步驟3:(+Z-M5-溴-7-氟-l,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl。引咮-3-基)乙酸向2.20g步驟2的酸(〉90%純度)在30mL吡啶中的溶液內(nèi)，于-40。C加入6.85g三溴化吡啶鏡(90。/。純度)。該懸浮液于0。C攪拌IO分鐘，并加溫至室溫30分鐘。然后，在高真空下不加熱除去溶劑。4巴該^L材料溶解在40mLAcOH中，并于0。C把2.88g鋅粉分批加到該冷溶液中。該懸浮液于15。C攪拌15分鐘，并再加溫至室溫15分鐘。此時，通過加入1NHC1中止反應(yīng)混合物，并把該混合物倒入含有鹽水/EtOAc的分液漏斗中。把層分離，并將有機層用水、鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥并濃縮。將該材料不再進一步純化用于下一步驟。'HNMR(丙酮-d6)510.77(brs,1H),9.84(brs,1H)，7.09(m，2H),3.60(m,1H)'2.95-2.65(m，4H),2.56(dd,1H),2.19(m,1H).歩驟4:(+/-)-「5-溴-4-(4-氯芐基)-7-氟-1,2，3，4-四氫環(huán)戊二烯并「1)1吲哚-3-基1-乙酸向2.13g步驟3的酸在10mLTHF中的溶液內(nèi)，過量加入重氮甲烷在乙醚中的溶液，直到TLC監(jiān)測該酸完全用盡為止。然后真空下除去溶解。向如此形成的粗甲基酯在20mLDMF中的溶液內(nèi)，于-78。C加入539mgNaH懸浮液(60。/。在油中的)。該懸浮液于0。C攪拌10分鐘，再冷卻至-78°C，并用1.70g4-氯千基溴處理。5分鐘后，把溫度加溫至0。C，并將混合物攪拌20分鐘。此時，通過加入2mLAcOH中止反應(yīng)，把該混合物倒入含有1NHCl/EtOAc的分液漏斗中。把層分離，并將有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，并濃縮。將該烷基化的材料用步驟2中描述的方法水解。將該粗材料通過用EtOAc/己烷研制進一步純化，獲得了本標題化合物。'HNMR(丙酮-d6)S10.70(brs,1H),7.31(d,2H),7.18(d,1H),7.06(d,1H),6,92(d，2H),5"0(d,1H),5.74(d,H),3.61(ra,1H),3.00-2.70(m,3H),2.65(dd,1H),2.39(dd,1H),2.26(m,1H).MS(-APCI)m/z436.3,434.5(M鄰-.歩驟5:(+)—f5-溴-4-(4-氯,基)-7-氟-l，2，3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl口引咪-3-基)乙酸向2.35g步驟4的酸在130mLEtOH中的溶液中于8(TC加入780pL(S)-(-)-l-(l-萘基)乙胺。把溶液冷卻至室溫并攪拌過夜。將回收的鹽(1.7g)用200mLEtOH再結(jié)晶。過濾后，將獲得的白色固體鹽用1NHC1中和，并將產(chǎn)物用EtOAc萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，并濃縮。將該材料用Si02墊過濾，用EtOAc洗脫，獲得了本標題對映體。兩個對映體的保留時間分別是7.5分鐘和9.4分鐘[ChiralPakAD柱，己烷/2-丙醇/乙酸(95:5:0.1)]。極性較強的對映體為98%ee。ee=98%;保持時間=9.4分鐘[ChiralPakAD柱250x4.6mm,己烷/2-丙醇/乙酸(75:25:0.1)];[a]D21=+39.2°(c1.0,MeOH)。歩驟6:(-)-「4-(4-氯芐基)-7-氟-5-(甲磧?；鵋,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl-吲哚-3-基l乙酸和鈉鹽將步驟5的酸(15.4g)首先用重氮甲烷酯化。通過將如此形成的酯與16.3g曱亞磺酸鈉鹽和30.2gCul(I)在N-曱基吡咯烷酮中混合來實現(xiàn)磺?；?。將該懸浮液在N2氣流下脫氣，加熱至150。C并攪拌3小時，然后冷卻至室溫。加入500ml乙酸乙酯和500ml己烷以中止反應(yīng)，并將混合物通過Si02墊過濾，用EtOAc洗脫。將有機相濃縮。將粗油狀物用EtOAc溶解，用水洗滌三次，用鹽水洗滌一次，用無水Na2S04干燥，過濾并濃縮。將該粗材料通過快速色譜法進一步純化，用100%甲苯-50%曱苯在EtOAc中的混合物梯度洗脫，獲得了磺化酯，將其用步驟2中描述的方法水解。連續(xù)兩次再結(jié)晶后，獲得了本標題化合物乙酸異丙酯/庚烷，然后CH2Cl2/己烷。'HNMR(500MHz丙酮-d6)S10.73(brs,1H),7.57(d,2H，/=8.8Hz),7.31(m,1H),7.29(m,1H),6.84(d,2H,7=8.8Hz),6.29(d'1H,/^=17.8Hz),5.79(d,1H，J^=I7.8Hz),3.43(m,1H),2.98(s,3H)'2.94(m,1H),2.85-2.65(m,3H),2.42(dd'1H,力=16.1Hz,J產(chǎn)10.3Hz),2.27(m,1H).13CNMR(125MHz丙酮-ds)S173.0,156.5(d，/CF=237Hz),153.9，139.2,133.7,133,3,130.0(d，Jc產(chǎn)8.9Hz),129.6,128.2，127.5(d,7c產(chǎn)7.6Hz),122.2(d，/CF=4.2Hz),112.3(d，^產(chǎn)29.4Hz),111.0(d,/CF=22.6Hz),50.8,44.7,38.6,36.6,36.5,23.3.MS(-APCI)rn/z436.1,434,1(M-H)-.ee=97%;保持時間=15.3分鐘[ChiralCelOD柱250x4.6mm,己烷/2-丙醇/乙醇/乙酸(90:5:5:0.2)];[a]D21=-29.3°(c1.0,Me〇H).Mp175.0°C。通過用14.80mLINNaOH水溶液處理6.45g(14.80mmol)上述酸化合物在EtOH(100mL)中的溶液，獲得了鈉鹽。真空下除去有機溶劑，并在回流下把該粗制固體溶解在1.2L異丙醇中。通過蒸餾溶劑，將最終體積減少至500mL。通過冷卻至室溫將鈉鹽結(jié)晶。將晶體鈉鹽懸在H20中，用干冰浴冷凍，并在高真空下凍干，獲得了作為鈉鹽的本標題化合物。'HNMR(500MHzDMSO-d6)S7.63(dd,1H,/嚴8.5Hz,J^=2.6Hz),7.47(dd，1H,J產(chǎn)9.7Hz,力=2.6Hz)，7.33(d,2H'J=8.4Hz),6.70(d,2H,Hz),6.06(d,1H,力丑=17.9Hz),5.76(d,1H，4=17.9Hz),3.29(m,IH)，3.08(s,3H),2.80(m,2.69(m,1H),2.55(m'1H),2.1S(m,2H),1.93(dd，]H,力=14.4取J>9.7Hz).DP實施例17A(+/-)-「5-溴-4-(4-氯芐基)-7-氟-l,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl。引哚-3-基l乙酸(實施例17,歩驟4)的另外的制備方法步驟1:(+A)-7-氟-l,2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并rbl吲哚-3-基)乙酸二環(huán)己基胺(DCHA)鹽將2-溴-4-氟苯胺在二曱苯中的溶液與(2-氧代環(huán)戊基)乙酸乙酯(1.5eq)和磺酸(0.02eq)—起加熱至回流20小時。用迪安-斯達克4義共淬除去水。反應(yīng)后進行NMR測定，20小時后，通常觀察到向所需亞胺中間體的80-85%轉(zhuǎn)化。將反應(yīng)混合物用1M碳酸氳鈉(0.2體積)洗滌15分鐘，并將有機級分蒸發(fā)。把剩余的漿液在真空下蒸餾(0.5mmHg)。將殘余的二甲苯于3(TC蒸餾，然后在50-ll(TC回收過量的酮和未反應(yīng)的苯胺；在110-180。C級分中回收亞胺，為具有83%純度的淺褐色清澈液體。^巴該亞胺中間體加到乙酸鉀(3eq)、氯化四-正丁基4妄一水合物(1eq)、乙酸把(0.03叫)和N,N-二甲基乙酰胺的脫氣的混合物中(亞胺的最終濃度-0.365M)。將反應(yīng)混合物加熱至115°C5小時，并冷卻至室溫。然后加入3NKOH(3eq)，并將混合物于室溫攪拌1小時。反應(yīng)混合物用水(1.0體積)稀釋，用曱苯(3x0.75體積)洗滌。將水相用3NHC1酸化至pHl，并用叔丁基曱基醚(2x0.75體積)萃取。將合并的有機級分用水(0.75體積)洗滌。向該清澈的淺褐色溶液中加入二環(huán)己基胺(leq),并將溶液于室溫攪拌16小時。將鹽過濾，用乙酸乙酯、叔丁基甲基醚洗滌，并干燥，獲得了本標題化合物。分析94A%。1HNMR(500mHz,CDC13):S9.24(s,1H),7.16-7.08(m,2H),6.82(t,1H),6,2(br,2H),3.6-3.5(m,1H),3.04-2.97(m,2H),2.88-2.70(m,3H),2.66(dd,1H),2.45-2.37(m,1H),2.13-2.05(m,2.05),1.83(d,4H),1.67(cl,2H),1.55-1.43(m，4H),1.33-1.11(m,6H).步驟2:(+/-)-(5-溴-7-氟-l,2,3,4-四氳環(huán)戊二烯并fbl吲哚-3-基)乙酸將上面步驟1的DCHA鹽的漿液在二氯甲烷(0.241M溶液)中冷卻至-20--15°C。一次性加入吡p定(2eq.),并在將溫度保持在-20。C至-15。C下用30-45分鐘向該漿液中滴加溴(2.5叫.)。(在約加入l/3溴時，反應(yīng)混合物變得粘稠因此需要有效攪拌。最后，在約加入l/2溴時，混合物又變得"疏松")加入完成后，將反應(yīng)混合物于-15。C老化另外1小時。然后用5分鐘加入乙酸(3.04eq.),并分批加入鋅粉(3.04eq.)。(于畫15。C力口入一部分鋅粉，并將混合物老化約5分鐘以確保散熱(約-15。C--10。C))。用約30分鐘重復(fù)該操作。當不再觀察到放熱時，更快地加入剩余的鋅。整個操作用約30-45分鐘。加入完成后，將混合物加溫至室溫，老化l小時并濃縮。^巴反應(yīng)混合物加到甲基叔丁基醚(MTBE,0.8體積)中，并加入10%乙酸水溶液(0.8體積)。將混合物(鹽的晶體，例如吡啶鏡)于室溫攪拌1小時，并通過solka-floc過濾。將solka-floc墊用MTBE(約0.2體積)洗滌，并把濾液(雙相，MTBE/水)轉(zhuǎn)移到萃取器中。將有機相用水(0.8體積)洗滌。將MTBE萃取液濃縮并加到異丙醇(IPA,0.25體積)中以使化合物結(jié)晶。加入水(0.25體積)，并將混合物老化1小時。用1小時再加入水(0.33體積)。水加入完成后，將混合物再老化l小時，過濾，并用30/70IPA/水(0.15體積)洗滌。將結(jié)晶的渙酸在烘箱中于+45'C千燥。歩驟3:(+/-)-「5-澳-4-(4-氯芐基)-7-氟-l，2，3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl吲哚-3-基l-乙酸把步驟2的溴酸溶解在二曱基乙酰胺(0.416M溶液)中，并一次性加入石友酸銫(2.5eq.)。向該漿液中一次性加入4-氯,基氯(2.5eq.)，并將混合物加熱至50。C20小時。把混合物冷卻至室溫，用5分鐘加入氫氧化鈉5N(4.00叫.)(溫度升高至+4(TC)。將反應(yīng)混合物于5(TC老化約3小時，冷卻至室溫并轉(zhuǎn)移到L萃取器中。將溶液用乙酸異丙酯(IPAc,2體積)稀釋，并冷卻至+15。C。用5NHC1將溶液酸化至pH2。把層分離，并將有機層用水(2x2體積)洗滌。將IPAc溶液濃縮并加到IPA(0.8體積)中以使產(chǎn)物結(jié)晶。用2小時加入水(8L),并將混合物過濾，獲得了本標題化合物。將混合物在烘箱中于+4(TC干燥24小時。DP實施例18(+/-)-{4-「1-(4-氯苯基)乙基1-7-氟-5-曱磺酰基-1，2,3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl吲哚-3-基)乙酸(化合物X)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage79</formula>本標題化合物是按照2003年7月30日/>開的PCTWO03/062200中提供的描述制備的。DP實施例19(+/-)-「9-(4-氯芐基)-6-氟-曱磺?；?2,3,4,9-四氫-111-咔唑-1-基1乙酸(化合物Y)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>本標題化合物是按照2003年7月30日公開的PCTWO03/062200中提供的描述制備的。DP實施例20「4-(4-氯芐基)-7-氟-5-甲磺?；?l-氧代-l,2，3,4-四氫環(huán)戊二烯并「bl口引咮-3-基l乙酸(化合物Z)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>本標題化合物是按照2003年7月30日公開的PCTWO03/062200中提供的描述制備的。DP實施例21(9-[(3,4-二氯苯基)硫基]-l-異丙基-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-基}乙酸(對映體A和對映體B)(化合物AA)步驟12-氯煙醛向二異丙胺(l10mL,780mmol)在THF(500mL)中的溶液內(nèi)，于-40。C加入n-BuLi的2.5M己烷溶液(300mL,750mmol)。5分鐘后，把反應(yīng)混合物冷卻至-95。C,然后依次加入DMPU(15mL)和2-氯吡咬(50mL,532mmol)。然后將所得混合物加溫，并于-78。C攪拌4小時。此后，將該黃色懸浮液再冷卻至-95t:,然后加入DMF(70mL)。將最終反應(yīng)混合物加溫至-78。C,并于該溫度攪拌1.5小時。把反應(yīng)混合物倒入冷的HC1水溶液(3N,800mL)內(nèi)，并攪拌5分鐘。加入NH4OH濃水溶液以調(diào)整pH至7.5。將水層用EtOAc萃取三次。合并的有機層用NH4C1水溶液和鹽水洗滌，用無水Na2S04干燥，過濾并濃縮。粗材料用硅膠墊進一步純化，用100%己烷-100%EtOAc梯度洗脫，并將產(chǎn)物在冷的己烷結(jié)晶，獲得了本標題化合物，為淺黃色固體。步驟2(2Z)-2-疊氮基-3-(7-氯吡咬-3-基)丙-2-烯酸甲酯把2-氯煙醛(20.0g,139.9mmol)和疊氮基乙酸甲酯(32.2mL,349.7mmol)在MeOH(168mL)中的溶液，于-20。C加到25%NaOMe在MeOH(80mL,349mmol)中的溶液內(nèi)。在30分鐘過程中監(jiān)測內(nèi)部溫度并保持在J0。C。將所得混合物在冰浴中攪拌幾小時，然后在冷室中的冰浴中攪拌過夜。然后把懸浮液倒在水和NH4C1的混合物上，并在攪拌10分鐘后過濾漿液。將產(chǎn)物用冷H20洗滌，然后在真空下干燥。把粗材料溶解在CH2C12中并加入MgS04。將懸浮液通過硅膠墊過濾，用CH2Cl2洗滌。將濾液減壓濃縮，獲得了米色沉淀物的本標題產(chǎn)物(20g)。步驟34-氯-lH-吡咯并「3,2-cl吡咬-2-甲酸曱酯將(2Z)-2-疊氮基-3-[2-氯吡啶-3-基]丙-2-烯酸曱酯(21g,88mmol)在1,3,5-三曱基苯(880mL)中的溶液在回流下加熱1小時。反應(yīng)混合物冷卻至室溫然后冷卻至至。C,4巴沉淀物過濾并用冷的己烷洗滌。將該材料在l:20EtOAc/己烷中攪拌過夜，過濾后，獲得了本標題產(chǎn)物，為淺黃色固體。歩驟4l-氯-8-氣代-7,8-二氫-6H-吡啶并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-7-甲酸甲酯向4-氯-lH-吡咯并[3,2-c]吡咬-2-曱酸曱酯(12.5g,59mmol)在THF(116mL)-曱苯(460mL)中的溶液內(nèi)，加入叔丁醇鉀的1.0MTHF溶液(64mL,64mmol)和丙烯酸甲酯(55mL,611mmol)。所;彈混合物于100。C加熱18小時。此后，把該懸浮液冷卻至室溫，并將其倒入NH4C1飽和水溶液(400mL)和己烷(400mL)的混合物中。將固體傾析，過濾并用H2〇和己烷洗滌，獲得了本標題化合物。步驟51-氯-6,7-二氳-811-吡啶并口,4-bl吡咯中氮吡咯-8-酮向前一步驟的化合物中加入異丙醇(8.0mL)和濃HC1(2.0mL)，并于IOCTC加熱I小時。該反應(yīng)混合物在EtOA和Na2C03之間分配。將有機相分離，蒸發(fā)，獲得了本標題化合物。步驟6l-異丙稀基-6,7-二氫-8H-吡啶并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-酮向l-氯-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-酮(5.0g,24.3mmol)、三(二亞節(jié)基丙酮)二把(O)(1.0g,1.09mmol)和三苯基胂(2.70g,8.82mmol)在DMF(100mL)中的混合物內(nèi)，加入三丁基異丙稀基錫烷(9.60g,29.00mmol)。將所得混合物脫氣并于78。C加熱18小時。減壓蒸去溶劑。把CH2Cl2和硅藻土加到所得混合物中，然后通過硅藻土過濾。將本標題化合物用快速色譜法進一步純化(50%-100%EtOAc在己烷中的混合物)。歩驟7(2E)-(l-異丙稀基-6，7-二氫-8H-吡啶并r3，4-bl吡咯中氮吡咯-8-亞基)乙酸乙酯于-78。C向l-異丙烯基-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-酮(0.60g,2.8mmol)和膦?；宜崛阴?l.OOg,4.46mmol)在THF(24mL)中的溶液內(nèi)，加入80%NaH(0.12g,4.00mmol)。將反應(yīng)混合物加溫至0。C,然后加溫至室溫。把反應(yīng)混合物倒在飽和NH4C1和EtOAc上。將有機相分離，用Na2S04干燥并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法純化(40%EtOAc在己烷中的混合物)。步驟8(l-異丙基-7,8-二氫-6H-吡啶并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-泉)乙酸乙酯向(2E)-(l-異丙烯基-6,7-二氫-8H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8-亞基)乙酸乙酯(0.40g,1.4mmol)在MeOH(20mL)中的溶液內(nèi)加入Pd(OH)2(0.20g)。該混合物在1大氣壓H2氣下攪拌3小時。將混合物用硅藻土過濾并蒸發(fā)，獲得了本標題化合物。步驟9〖9-「a4-二氯苯基)硫基l-l-異丙基-7,8-二氫-6H-吡咬并f3，4-bl吡咯中氮吡咯-8-基l乙酸乙酯向二(3,4-二氯苯基)二硫(0.24g,0.67mmol)在CH2C12(5.6mL)中的溶液內(nèi)加入S02Cl2(0.036mL)。所得黃色混合物于室溫攪拌1小時。于0°(3把該溶液加到(1-異丙基-7,8-二氫-6^吡啶并[3,4-1)]吡咯中氮吡咯-8-基)乙酸乙酯(0.15g,0.52mmol)在DMF(5.6mL)中的溶液內(nèi)。于(TC1.5小時后，把反應(yīng)混合物倒在飽和NaHC03和EtOAc上。將有機相分離，用Na2S04干燥，過濾并蒸發(fā)。將本標題化合物用快速色譜法純化(30%-40%EtOAc在己烷中的溶液)。歩驟10(9-r(3,4-二氯苯基)硫基l-l-異丙基-7,8-二氬-6H-吡咬并「3,4-bl吡咯中氮吡咯-8-基}乙酸向(9-[(3,4-二氯苯基)硫基]-l-異丙基-7,8-二氫-6H-吡啶并[3,4-b]吡咯中氮吡咯-8基}乙酸乙酯(0.23g,0.50mmol)在THF(5mL和MeOH(2.5mL)中的溶液內(nèi)，加入1.0MNaOH(1.5mL,1.5mmol)。于室溫攪拌18小時后，加入HOAc(0.25mL),并將溶劑蒸發(fā)。把殘余物溶解在EtOAc/H20中，并將有機層用H20和鹽水洗滌。干燥(Na2S04)后，將溶液過濾并蒸發(fā)。將所得殘余物用1:1EtOAc:己烷攪拌，過濾后，獲得了本標題化合物，為白色固體。'HNMR(MeOH-d4)51.14^1.26(m,6H),2.47-2.56(m,1H)'2.56-2.64(m，1H),2.94-3.05(m，2H),3.81-3.89(m,1H),4.22-4.30(m,1H),4.334.44(m,2H),6.93-6.99(m'1H),7.14-7.19(m,1H)'7.33-7.39(m,1H),7.54-7.59(m,1H)，8.16-8.21(m,1H).用CH2N2將步驟10的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為其甲基酯，并將該酯在手性固定的混合物以6mL/mm的流速洗脫。對映體A(極性較弱)具有31.9分鐘的保留時間，對映體B(極性較強)具有35.5分鐘的保留時間。將A和B如實施例17步驟10那樣進行水解，獲得了本標題化合物的對映體A和B。DP實施例22((1RV6-氟-8-(曱基磺?；?-9-KlS)-l-「4-(三氟曱基)苯基l乙基}-2，3，4，9-四氫-lH-。卡唑-l-基)乙酸(化合物AJ)歩驟1:2-(2-淡-4-氟苯基)肼鏡氯化物向2-溴-4-氟苯胺在濃HC1(1.5M)中的懸浮液內(nèi)于-10。C緩慢加入NaN02(l.leq)的IO.OM水溶液。該混合物于0。C攪拌2.5小時。然后緩慢加入冷的(-30。C)SnCl2在濃HC1中的(3.8M)溶液，同時將內(nèi)部溫度保持在10°C以下。所得混合物于1(TC機械攪拌20分鐘，然后于室溫攪拌1小時。將該濃稠漿液過濾，并將固體空氣干燥過夜。把固體再懸在冷的HC1中并再次過濾。把干燥了的材料懸在Et20中，攪拌10分鐘，過濾，并空氣干燥過夜，獲得了本標題化合物，為米色固體。歩驟2:(+/-)-(8-溴-6-氟-2,3,4,9-四氫-lH-咔唑-l-基)乙酸乙酯向步驟l的化合物(leq)在AcOH(0.5M)中的懸浮液內(nèi)加入(2-氧代環(huán)己基)乙酸乙酯(leq)。將混合物在回流下攪拌16小時，冷卻，并通過減壓蒸發(fā)除去AcOH。將殘余物用EtOAc稀釋，并用水和飽和NaHC03水溶液洗滌。將有機層用Na2S04干燥并濃縮。然后將殘余物在硅膠墊上純化，用甲苯洗脫。將濾液濃縮并在己烷中攪拌，過濾后，獲得了本標題化合物，為白色固體。MS(+APCI)m/z354.2(M+H)+歩驟3:(+/-)46-氟-8-(曱基磺酰基)-2,3,4,9-四氫-1&咕唑-1-基1-乙酸乙酯向步驟2的化合物(1叫)在無水DMSO中的溶液(0.28M)內(nèi)加入曱亞磺酸鈉(3eq)和碘化銅(3叫)。把N2通入混合物5分鐘，然后將反應(yīng)于IO(TC在N2下攪拌。12小時后，再加入甲亞磺酸鈉(2eq)和碘化銅(2eq)。將混合物于100。C再攪拌12小時，冷卻，用EtOAc稀釋，并加入1NHC1以酸化混合物。將該懸浮液攪拌30分鐘，并通過硅藻土過濾。將濾液用水洗滌，用Na2S04干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠墊過濾，首先用甲苯洗脫以除去非極性雜質(zhì)，然后用2:1己烷/EtOAc混合物洗脫以便洗脫出所需產(chǎn)物。將用己烷/EtOAc的混合物洗脫的濾液濃縮，獲得了本標題化合物，為淺黃色固體。MS(-APCI)m/z352.1(M-H)歩驟4:r(lR)-6-氟-8-(甲基磺酰基)-2,3,4,9-四氫-lH-口卡唑-l-基l乙酸乙酯將得自步驟3的外消旋混合物在chiralpakAD制備柱上進行制備HPLC進行拆分，用15%iPrOH在己烷中的混合物洗脫?；谧罱K產(chǎn)物、歩驟'5:「(1幻-9-「(18)-1-(4-氯苯基):基1-6-氟-8-(甲基磺?；?-2,3,4,9-四氬-lH-咔唑-l-基l乙酸乙酯向步驟4的化合物(leq)、三苯基膦(1.5eq)和(lR)-l-(4-氯苯基)乙醇(1.5eq,按照參考實施例1中描述的一般方法制備)在THF中的溶液(0.175M)內(nèi)，用10分鐘加入偶氮二羧酸二叔丁酯(2.1M在THF中的溶液，1.5叫)。該混合物于室溫攪拌2小時并濃縮。殘余物通過硅膠快速色譜法純化，用7。/。EtOAc在曱苯中的混合物洗脫，獲得了所需產(chǎn)物(90%純)，將其照此用于下一步反應(yīng)。歩驟6:[(1!1)-9-「(18)-1-(4-氯苯基)乙基1-6-氟-8-(曱基磺?；?-2,3,4,9-四氫-lH-咔唑-l-基l乙酸和「(lS)-9-「nS)-l-(4-氯苯基)乙基1-6-氟-8-(甲基石黃?；?-2,3,4,9-四氳-lH-咕^k-l-基l乙酉史向步驟5的化合物在THF和甲醇2:1的混合物中的溶液(0.1M)內(nèi)加入1NLiOH水溶液(3叫)。該混合物于室溫攪拌2小時，加入AcOH并蒸發(fā)除去溶劑。把殘余物溶解在EtOAc/H20中，并將有機層用鹽水洗滌，用Na2S04干燥，過濾并濃縮。將殘余物在30%EtOAc在己烷中的混合物處理，將產(chǎn)物懸在乙醚中，超聲處理45分鐘，過濾，并在高真空下于5(TC干燥24小時，獲得了本標題化合物，為白色固體。MS(-APCI)m/z462.1CM鄰或者，將(+/-)[6-氟-8-(甲基磺?；?-2,3,4,9-四氫-111-咔唑-1-基]乙酸乙酯用于步驟5中的烷基化，獲得了2個非對映體的混合物[(1R)-9-[(13)-1-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺?；?-2,3,4,9-四氫-1&。卡唑-1-基]乙酸乙酯和[(lS)-9-[(1S)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(曱基磺?；?-2，3,4,9-四氫-lH-呼唑-l-基]乙酸乙酯。通過用以下方法進行選擇性水解來拆分該非對映體混合物，獲得了所需的[(lR)-9-[(lS)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺?；?-2,3,4，9-四氳-lH-咔唑-l-基]乙酸。拆分把[(lR)-9-[(lS)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(曱基磺?；?-2^,4,9-四氫_1^咔唑-1-基]乙酸乙酯和[(13)-9-[(18)-1-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺酰基)-2,3,4,9-四氫-lH-咔唑-l-基]乙酸乙酯的非對映體混合物(1eq)溶解在3.5/1THF/MeOH的混合物(0.25M)中，并在0。C冷卻。緩慢加入1NLiOH水溶液(leq)，并將混合物于0。C攪拌12小時或者直到[(1R)-9-[(1S)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺?；?-2，3,4,9-四氫-lH-^唑-l-基]乙酸乙酯幾乎完全水解為止，另外一個非對映體在這些條件下僅略微水解。加入AcOH,并通過蒸發(fā)除去溶劑。把該殘余物溶解在EtOAc/H2〇中，并將有機層用鹽水洗滌，用Na2SOt千燥，過濾并濃縮。將[(lS)-9-[(1S)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(曱基磺?；?-2,3,4,9-四氫-m-咔唑-l-基]乙酸乙酯和[(111)-9-[(18)-1-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺酰基)-2,3,4,9-四氫-lH-^唑-l-基]乙酸通過快速色譜法進行分離，用含有P/。AcOH的40%EtOAc在己烷中的混合物洗脫，獲得了所需的de〉90Q/。的[(lR)-9-[(1S)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(甲基磺酰基)-2,3,4,9-四氫-lH-寸唑-l-基]乙酸，將其在30。/。EtOAc在己烷中的混合物處理，獲得了所需化合物，為白色固體，de〉95%。歩驟7:「(lR)-6-氟-8-(甲基磺?；?-2,3,4,9-四氳-lH-咔唑-l-基l乙酸甲酯向[(1R)-9-[(1S)-l-(4-氯苯基)乙基]-6-氟-8-(曱基磺酰基)-2,3,4，9-四氳_1^,唑-1-基]乙酸(乙酸曱酯。步驟8:((1R)-6-氟-8-(甲基磺?；?-9-KlS)-l-[4-(三氟曱基)苯基]乙基〉-2,3,4.9-四氫-lH-^f唑-l-基)乙酸(化合物AJ)向步驟7的化合物(1eq)、三苯基膦(l.5叫)和(lR)-l-[4-(三氟甲基)苯基]乙醇(l.5eq)在THF中的溶液(0.2M)內(nèi)，用20分鐘加入二-叔-丁基偶氮二羧酸酯(1M在THF中，1.5eq)。將混合物于室溫攪拌2小時并濃縮。殘余物通過硅膠快速色譜法純化，用10。/。EtOAc在甲苯中的混合物洗脫，獲得了((lR)-6-氟-8-(甲基磺?；?-9-((lS)-l-[4-(三氟甲基)苯基]乙基}-2,3,4,9-四氳-111-呼唑-1-基)乙酸曱酯(90%純度)，將其照此用于下一步反應(yīng)。向上面的酯(leq)在3.5/1THF/MeOH的混合物中的(0.25M)溶液內(nèi)于0。C緩慢加入1NLiOH水溶液(leq)，并將混合物于0。C攪拌16小時或者直到酯幾乎完全水解為止，在此條件下，另一次要非對映體具有非常緩慢的水解速度。加入AcOH,并真空除去溶劑。把殘余物溶解在EtOAc/H2Ot，并將有機層用鹽水洗滌，用Na2S04干燥，過濾并濃縮。為了除去未反應(yīng)的甲基酯，將殘余物通過硅膠墊過濾，首先用10%EtOAc/曱苯洗脫，然后用含有l(wèi)。/。AcOH的60%EtOAc/甲苯洗脫。將殘余物在30。/oEtOAc/己烷中處理，并在高真空下于50。C干燥16小時，獲得了本標題化合物，為白色固體，de和ee>95%(通過手性HPLC測定)。MS(-APCI)m/z496.0(M-H).[a]D=-181。在MeOH中。生物學(xué)活性試驗式I化合物的活性可以用以下試驗來證明3H-煙酸競爭結(jié)合試驗使用穩(wěn)定表達煙酸受體的CHO-KI細胞來制備用于結(jié)合分析的膜。將細胞在含有腦FBS(GIBCO,#10438-026)、lmgZmlG418(GIBCO,#10131-027)和IXPen-Strep(SigmaP-0871)的生長培養(yǎng)基(F-12Kaighn，smodifiedmedium(ATCC,#30-2004)中生長至80%鋪滿，通過刮^察來收獲，以12000xg于4。C離心10分鐘。將細胞離心沉淀重懸在收獲的緩沖液(20mMHEPES,10mMEDTA,pH7.4)中，并且用設(shè)定為5的12mmPolytron勻化器通過4x10次第二沖擊(secondbursts)來進行勻化。將裂解物以2000xg于4。C離心10分鐘來除去未裂解的細月包和細胞核，并且將所得上清液以39000xg于4°C離心45分鐘以讓細胞膜沉淀。把所得沉淀重懸在洗滌緩沖液(20mMHEPES,0.1mMEDTA，pH7.4)中，用設(shè)定為4的12mmPolytron勻化器通過3x10次第二沖擊(secondbursts)來進行勻化，并且再次以39000xg于4。C離心45分鐘。將所得沉淀重懸在洗滌緩沖液中，在使用之前保存在液氮中。使用PierceBCA蛋白分析來確定該制備物中膜蛋白的濃度，采用BSA作為標準。在96-孔聚丙烯平板中進行3H-煙酸的平衡結(jié)合。反應(yīng)含有140pi在分析緩沖液中稀釋的細胞膜(20mMHEPES,pH7.4，1mMMgCl2,和0.01%CHAPS;15-30ng膜蛋白/分析)、20jal在分析緩沖液中稀釋的受試化合物(化合物貯備液是在100%DMSO中；分析中最終的DMSO濃度是0.25%)和40|ul250nM氖代煙酸([5,6-3H]—煙酸AmericanRadiolabeledChemicals,Inc.,20]uM在乙醇中的溶液;每一分析中乙醇的最終濃度為1.5%)。在250未標記的煙酸存在下測定非特異性結(jié)合。在室溫混合3-4小時后，使用PackardHarvester將反應(yīng)經(jīng)由PackardUnifilterGF/C平板過濾，用8x200pi水冷的結(jié)合緩沖液洗滌。將平板干燥過夜，并且把其背面用專門為GF/C平板設(shè)計的PerkmElmer帶密封。向每個孑L中力口入40julPerkmElmerMicroscmt-20閃爍液體，4巴頂部密封，在PackardTopCount閃爍計數(shù)器中分析平板。計算受試化合物首先以1和0.1iLiM進^于分析，然后以選一奪的一定范圍濃度進行分析，這樣使得中間的劑量將引起放射性配體結(jié)合的大約50%的抑制(即IC5Q)。在沒有受試化合物存在下的特異性結(jié)合(Bo)是總結(jié)合(BT)減去非特異性結(jié)合(NSB)的差值，類似地，特異性結(jié)合(在受試化合物存在下)(B)是置換結(jié)合(Bo)減去非特異性結(jié)合(NSB)的差值。IC50是從抑制反應(yīng)曲線中測定的，所述曲線是％B/B0對受試化合物濃度的logit-log繪制曲線。是通過ChengandPmstoff轉(zhuǎn)化計算的Ki=IC50/(l+[L]/KD)其中[L]是分析中使用的放射性配體的濃度，KD是在相同結(jié)合條件下獨立地測定的it射性配體的解離常lt。在該煙酸結(jié)合分析中，一些式I化合物的IC5o值為約0.010-50HM。在該分析中，更優(yōu)選的本發(fā)明化合物的ICso值為約0.01-10jiM。在該分析中，進一步優(yōu)選的化合物的ICsQ值為約0.010-1.0|iM。35S-GTPYS結(jié)合試驗在WallacScintistrip平板中，將由穩(wěn)定表達煙酸受體的中國倉鼠卵巢(CHO)-Kl細胞制備的膜或載體對照(7嗎/試驗)在試驗緩沖液(100mMHEPES,100mMNaCl和10mMMgCl2，pH7.4)中稀釋，并在加入35S-GTPYS至0.3nM之前，用稀釋在含有40GDP(最終的[GDP]是10jLiM)的試驗緩沖液中的試驗化合物預(yù)先培養(yǎng)10分鐘。在試驗中，為了避免可能的化合物沉淀，將所有的化合物首先在100%DMSO中配制，然后用試驗緩沖液稀釋，產(chǎn)生最終濃度的3%DMSO。將結(jié)合進行l(wèi)小時，然后在室溫將平板以4000卬m離心15分鐘，隨后用T叩Count閃爍計數(shù)器計數(shù)。在GraphPadPrism中進行結(jié)合曲線的非線性回歸分析。膜制備材料CHO-K1細胞培養(yǎng)基含有10o/()FBS、2mML-谷氨酰胺、1mM丙酮酸鈉和400pg/mlG418的F-12Kaighn's改進的細胞培養(yǎng)基月莫Scrape纟爰沖液20mMHEPES10mMEDTA，pH7.4膜洗滌緩沖液20mMHEPES0.1mMEDTA,pH7.4蛋白酶抑制劑混合物P-8340,(Sigma,St.Louis，MO)方法把細胞培養(yǎng)基從15cm2平板上抽吸出來，用5mL冷的PBS洗滌并抽吸。加入5ml膜Scrape緩沖液和scrape纟田胞。4巴scrape轉(zhuǎn)移到50mL離心管中。加入50蛋白酶抑制劑混合物。以20,000rpm于4。C旋轉(zhuǎn)17分鐘。抽吸出上清液并將離心團重懸在30mL膜洗滌緩沖液中。加入50liL蛋白酶抑制劑混合物。于4。C以20,000rpm旋轉(zhuǎn)17分鐘。從膜離心團中抽吸出上清液?？梢詫㈦x心團在-80。C冷凍以便稍后使用或者可以將其立即使用。試驗材料鳥苷5，-二磷酸鈉鹽(GDP，Sigma-AldrichCatalog#87127)鳥苦5，-[5s]硫代三磷酸鹽，三乙銨鹽(["S]GTPYS，AmershamBiosciencesCatalog#SJ1320,~lOOOCi/mmol)96孑LScmtiplates(Perkm隱Elmer#1450-501)結(jié)合緩沖液20mMHEPES，pH7.4100mMNaCl10mMMgCl2GDP緩沖液結(jié)合緩沖液加GDP,范圍0.4-40^M,試驗之前最新制備方法(總試驗體積=100p/孔)含有或不含有化合物的25GDP緩沖液(最終GDP10wM-于是使用40pMj&備液)結(jié)合緩沖液(0.4mg蛋白質(zhì)/mL)中的50pL膜結(jié)合緩沖液中的25juL[35S]GTPyS。其系通過把5pi[35S]GTPyS貯備液加到10mL結(jié)合緩沖液(該緩沖液不含有GDP)中而制備的o將欲篩選的化合物平板融化(子板含有5iiL化合物，2mM，在100%DMSO中)o在2。/oDMSO中，將2mM化合物用245GDP緩沖液進行1:50稀釋至40pM。將冷凍的膜離心團在冰上融化o使用POLYTRONPT3100(探針PT-DA3007/2,設(shè)置為7000rpm)把膜短暫勻化直至懸浮。通過Bradford分析測定膜蛋白濃度。在結(jié)合緩沖液中把膜稀釋至蛋白濃度為0.40mg/ml(注意最終的測定濃度為20貼/孔)。o向閃爍板(Scmtiplate)的每個孔中加入25|iL在GDP緩沖液中的化合物。o向Scmtiplate的每個孑L中力口入50(iL月荑。o在室溫預(yù)先培養(yǎng)5-IO分鐘o力口入25iuL稀萍奪的[35s]GTPyS。在搖動器(Lab-Lme型#1314，在設(shè)定為4進行搖動)上于室溫培養(yǎng)60分鐘。o通過將用平板蓋覆蓋的平板以2500rpm于22。C旋轉(zhuǎn)20分鐘來將該測定停止o在T叩CountNXT閃爍計數(shù)器上讀取-35S方案。某些式I化合物在該功能GTPrS結(jié)合試驗中具有約0.010-100pM的范圍內(nèi)的EC50。更有利的本發(fā)明化合物在該試驗中具有約0.010-10^M的范圍內(nèi)的EC50。還更有利的化合物在該試驗中具有小于約1|iM、約0.01-1pM的EC50。通過激光Doppler沖洗方法-用戊巴比妥鈉(Nembutalsodium10mg/ml/kg)將i^性C57B16小鼠(-25g)麻醉。當要給予拮抗劑時，將其與戊巴比妥麻醉劑一起注射。IO分鐘后，把動物置于激光下，并且將耳朵折疊以暴露出腹側(cè)。把激光器放置在耳朵中央，并且聚焦至8.4-9.0V的強度(在耳朵上方通常為4.5cm)。數(shù)據(jù)獲得是用15x15圖像格式，自動間隔，60個圖像和20秒延時，中等分辨率獲得的。在第10個圖像之后，將測試化合物注射給藥到腹膜空間內(nèi)。將圖像1-IO視為動物基準，并且把數(shù)據(jù)相對于基準中間強度的平均值進行標準化。才才津+禾口方'法—LaserDopplerPirimedPimII;步因(Sigma);戊巴比妥(Nembutal)(Abbottlabs)。在斯-道雄性大鼠中體內(nèi)抑制游離脂肪酸非酯化游離脂肪酸(NEFA)是在由自由活動的大鼠的肝獲得的血清上進行的。把導(dǎo)管手術(shù)植入股(femoral)靜-.脈(Veins)中，并且動物在到達的一周內(nèi)使用。在試驗前的約16小時，從動物中取出食物。從導(dǎo)管中抽取200^L血液并代表基準NEFA血清樣本。以不同濃度向各個體大鼠腹膜內(nèi)(IP)或口服(po)給藥，然后在指定的時間點從導(dǎo)管中抽取200血液用于進一步NEFA分析。NEFA試驗是按照廠商的i兌明書(WakoChemicals,USA;NEFAC)進^亍的，并且游離脂肪酸濃度是通過已知標準曲線(已知游離脂肪酸的范圍)的回歸分析測定的。用Excel和PnsmGraph對lt據(jù)進4于分析。本文中引用的所有專利、專利申請和出版物都全文引入本文以供參考。雖然已經(jīng)詳細描述了一些優(yōu)選的實施方案，但是眾多可代替的實施方案也在本發(fā)明范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.由式I表示的化合物或其可藥用鹽或溶劑合物其中n代表1或2；R1選自環(huán)己基、苯基和含有5-6個原子的雜芳基，所述雜芳基5元環(huán)含有1-4個雜原子，所述雜原子的0-1個是O或S，所述雜原子的0-4個是N，并且所述雜芳基6元環(huán)含有1-3個N原子，所述環(huán)己基、苯基和雜芳基任選被1-4個選自下列的基團取代鹵素、OH、SH、CN、硝基、C1-4鹵代烷基、氨基、C1-4烷基氨基、C2-8二烷基氨基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C2-4烯基、C2-4炔基、C3-6環(huán)烷基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4烷基亞磺?；虲1-4烷基磺?；?，并且R2是或CO2Ra，其中Ra是H或C1-4烷基。2.權(quán)利要求1的化合物，其中n是1。3.權(quán)利要求l的化合物，其中n是2。4.權(quán)利要求l的化合物，其中W代表苯基和雜芳基，所述基團任選被l-4個基團取代，所述基團的1-4個是面代基，所述基團的1-2個選自O(shè)H、SH、CN、硝基、d-4卣代烷基、氨基、C"烷基氨基、C2-8二烷基氨基、C!-4烷基、4烷氧基、C2-4烯基、C2—4炔基、C3-6環(huán)烷基、Cw卣代烷氧基、Cw烷硫基、C"烷基亞硫?；虲w烷基磺酰基。5.權(quán)利要求4的化合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的苯基，所述基團的1-4個是卣代基，所述基團的l-2個選自O(shè)H、SH、CN、硝基、4卣代烷基、氨基、4烷基氨基、C2.8二烷基氨基、d-4烷基、CM烷氧基、C2—4烯基、C2-4炔基、Cs-6環(huán)烷基、d-4面代烷氧基、Cm烷石克基、Cm烷基亞辟u?；虲w烷基石黃?；?。6.權(quán)利要求4的化合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的雜芳基，所述基團的1-4個是鹵代基，所述基團的l-2個選自O(shè)H、SH、CN、硝基、Cw卣代烷基、氨基、Cw烷基氨基、C2-8二烷基氨基、Cw烷基、Cw烷氧基、C2-4烯基、CM炔基、Cw環(huán)烷基、C!-4卣代烷氧基、Cw烷硫基、d-4烷基亞硫酰基和d—4烷基磺?；?。7.權(quán)利要求6的化合物，其中W代表任選被1-4個基團取代的雜芳基，所述基團的1-4個是鹵代基，所述基團的1-2個是d-4卣代烷基或C"4烷基。8.權(quán)利要求5的化合物，其中W代表任選被1-4個卣代基取代的苯基。9.權(quán)利要求l的化合物，其中I^代表C02Ra，并且Ra代表H。10.權(quán)利要求l的化合物，其中R"代表四唑基。11.選自下表之一的權(quán)利要求1的化合物表A<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>或其可藥用鹽或溶劑合物;<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>或其可藥用鹽或溶劑合物。12.包含權(quán)利要求1的化合物以及與之結(jié)合的可藥用載體的藥物組合物。13.在需要這樣治療的人類患者中治療動脈粥樣硬化的方法，所述方法包括以有效治療動脈粥樣硬化的量向該患者給藥權(quán)利要求1的化合物。14.在需要這樣治療的人類患者中治療異常脂肪血癥的方法，所述方法包括以有效治療異常脂肪血癥的量向該患者給藥權(quán)利要求1的化合物。15.在需要這樣治療的人類患者中治療糖尿病的方法，所述方法包括以有效治療糖尿病的量向該患者給藥權(quán)利要求1的化合物。16.在需要這樣治療的人類患者中治療代謝綜合征的方法，所述方法包括以有效治療代謝綜合征的量向該患者給藥權(quán)利要求1的化合物。17.在需要這樣治療的人類患者中治療動脈粥樣硬化、異常脂肪血癥、糖尿病、代謝綜合征或相關(guān)病癥的方法，所述方法包括向該患者纟會藥權(quán)利要求1的化合物和DP受體拮抗劑，所述化合物是在沒有實質(zhì)性潮紅的情況下以有效治療動脈粥樣硬化、異常脂肪血癥、糖尿病、代謝綜合征或相關(guān)病癥的量給藥的。18.在需要這樣治療的人類患者中治療動脈粥樣硬化、異常脂肪血癥、糖尿病或相關(guān)病癥的方法，所述方法包括向該患者纟會藥^又利要求1的化合物和選自化合物A-AJ的DP受體拮抗劑<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>全文摘要本發(fā)明包括用于治療異常脂肪血癥的式I化合物及其可藥用鹽和溶劑合物，還包括藥物組合物和應(yīng)用方法。文檔編號A61K31/41GK101160125SQ200680012066公開日2008年4月9日申請日期2006年4月7日優(yōu)先權(quán)日2005年4月13日發(fā)明者A·R·斯門頓,D·R·施米德特,J·E·英布里格利奧,J·R·塔塔,S·L·科萊蒂,S·Y·陳,S·拉哈文,睿梁申請人:默克公司