專利名稱：抗組胺藥快速降低高顱內(nèi)壓的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種新型組胺受體拮抗劑及組胺受體拮抗劑在降低顱內(nèi)壓(ICP)中的用途，特別在預(yù)防和治療特別因腦損傷造成、更特別因創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)和非創(chuàng)傷性腦損傷造成的顱內(nèi)壓升高和/或繼發(fā)性局部缺血中的用途。
背景技術(shù)：
TBI在發(fā)達(dá)國(guó)家是個(gè)嚴(yán)重的問題。在美國(guó)，每年約有500,000例頭部損傷病例因傷勢(shì)太重需住院治療。此病死亡率很高，且約有80,000名TBI患者會(huì)面臨終身衰弱性功能喪失，5,000名患者會(huì)發(fā)展成癲癇癥病人，2,000名患者變成植物人。TBI是當(dāng)今青壯年死亡和殘廢的主要原因，估計(jì)1989年一年造成的損失達(dá)250億美元以上。
腦創(chuàng)傷留下的主要的不可逆損害包括出血、挫傷、神經(jīng)元壞死和彌散性軸突損傷。這種損害與可能發(fā)生的心血管和呼吸抑制一起可誘發(fā)急性繼發(fā)性病征，包括水腫(血管性水腫和/或細(xì)胞水腫)、繼發(fā)性出血、大腦血容量(CBV)改變、大腦血流量(CBF)自我調(diào)節(jié)紊亂和局部缺血。水腫、出血和CBV增加使總腦容量增加，從而導(dǎo)致顱內(nèi)壓(ICP)增高。這反過來又能進(jìn)一步加重局部缺血、梗塞，在嚴(yán)重情況下可導(dǎo)致腦干突出并可能導(dǎo)致急性呼吸抑制和死亡。因此對(duì)TBI的治療應(yīng)著眼于切斷病理級(jí)聯(lián)，降低大腦容量及ICP。預(yù)防如在創(chuàng)傷后或心臟復(fù)蘇后的后急性期經(jīng)常出現(xiàn)的威脅生命的繼發(fā)性ICP增加，也是藥理治療的目標(biāo)。
目前，用以降低ICP的臨床手段有限。標(biāo)準(zhǔn)的治療程序包括腦室的外科引流、血壓處理、甘露醇輸注、過度換通氣和大劑量巴比妥酸鹽療法。非外科治療的副作用包括腦局部缺血、ICP的反跳效應(yīng)及細(xì)菌感染和膿毒癥危險(xiǎn)增加。具有不同作用機(jī)制(如緩激肽拮抗作用、鈣拮抗作用、氧化應(yīng)激抑制、谷氨酸受體阻滯及抗癲癇)的各種化合物已在進(jìn)行II期和III期臨床試驗(yàn)或還正在進(jìn)行研究(研究的重點(diǎn)在效果上，而不在于對(duì)ICP作用)。到目前為止，尚未批準(zhǔn)用于快速治療顱內(nèi)壓的藥物(K.K.Jain，第4章急性創(chuàng)傷中的神經(jīng)保護(hù)，‘在CNS疾病中的神經(jīng)保護(hù)商業(yè)機(jī)會(huì)’，A Jain PharmaBiotech Report65-73，2000)。很明顯，需要藥物和/或療法治療特別是因腦損傷造成的、更特別是因創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)造成的顱內(nèi)壓(ICP)升高和/或繼發(fā)性局部缺血。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)通式(I)的被取代的四環(huán)咪唑衍生物顯示組胺H1和/或H2受體拮抗活性。此外這類化合物還顯示對(duì)降低顱內(nèi)壓(ICP)特別有用，特別是對(duì)預(yù)防和治療因腦損傷造成的、更特別因創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)和非創(chuàng)傷性腦損傷造成的顱內(nèi)壓升高和/或繼發(fā)性局部缺血特別有用。
進(jìn)一步，本發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)拮抗組胺H1-和/或H2-受體的化合物(通常稱作抗組胺藥物)對(duì)降低顱內(nèi)壓(ICP)也有用，特別是對(duì)預(yù)防和治療因腦損傷造成的、更特別因創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)和非創(chuàng)傷性腦損傷造成的顱內(nèi)壓升高和/或繼發(fā)性局部缺血有用。
所有這些化合物的共同特征是，特別給藥劑到哺乳動(dòng)物的血液中時(shí)，它們能快速降低顱內(nèi)壓。有利的和非常重要的是，所述化合物能降低ICP，但對(duì)血壓有很少或沒有影響，特別是無降血壓作用，這是潛在藥物最理想的性質(zhì)。
迄今為止，組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑尚未被開發(fā)用以降低ICP，特別在創(chuàng)傷后降低ICP。Mohanty等在Journal of the NeurologicalSciences，1989，9087-97中觀察到組胺在形成創(chuàng)傷引導(dǎo)的腦水腫中起作用。預(yù)先用組胺H2-受體拮抗劑西咪替丁治療可防止腦積液容量增加、血漿和腦組胺水平升高。但是，美吡拉敏(meypyramine，組胺H1-受體拮抗劑)不能降低增加的腦積液容量，血漿核腦組胺水平仍然很高。還沒有研究過組胺拮抗劑對(duì)顱內(nèi)壓的影響，特別是在ICP升高后對(duì)快速降低增加的ICP的作用，對(duì)血壓的影響也未曾研究過。
盡管不想對(duì)其進(jìn)行限定，本發(fā)明人還是認(rèn)為，鑒于組胺受體拮抗劑在無腦水腫時(shí)也能夠降低正常ICP的事實(shí)和鑒于組胺受體拮抗劑不能或僅輕微影響血壓(血壓降低與外周血管擴(kuò)張有關(guān))，得出其作用機(jī)理不是完全作用在腦水腫的降低，也不是通過血管舒張效應(yīng)，和此前本領(lǐng)域已知的抗組胺物質(zhì)的效應(yīng)不同。
因此，本發(fā)明的目的是提供用作組胺拮抗劑、優(yōu)選用作組胺H1-受體拮抗劑、更優(yōu)選用作既有組胺H1-受體拮抗劑活性又有組胺H2-受體拮抗劑活性的拮抗劑的通式(I)的被取代的四環(huán)咪唑衍生物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物，其中 m為1或2；n為0、1或2；a、b、c獨(dú)立為單鍵或雙鍵；X為共價(jià)鍵或二價(jià)C1-6鏈烷二基，其中一個(gè)或多個(gè)-CH2-基團(tuán)可任選被-O-、-S-、-CO-、或-NR7-置換；其中R7為氫、烷基、Ar、Ar-烷基、Het、Het-烷基、羥烷基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基烷基、氨基烷基、一烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基、甲?；?、烷基羰基氨基烷基、烷基羰基氧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、烷基氨基羰基、烷基氨基羰基烷基、羥烷氧基烷基、氨基羰基、氨基羰基烷基、烷氧基羰基或烷基羰基氧基烷氧基烷基；Y為二價(jià)C1-4鏈烷二基或C2-4鏈烯二基；
Z為N，此時(shí)a為雙鍵，b為單鍵，或Z為N-R7，此時(shí)a為單鍵，b為雙鍵，而R7定義如上；R1、R2獨(dú)立為氫、羥基、烷基、烷氧基、Ar、Ar-烷基、二(Ar-)烷基、Het或Het-烷基；-A-B-獨(dú)立為下式所示的二價(jià)基團(tuán)-E-CR8＝CR8- (a-1)；-CR8＝CR8-E- (a-2)；-CR8＝CR8-CR8＝CR8-(a-3)；其中各個(gè)R8獨(dú)立為氫、鹵基、羥基、烷基或烷氧基；E為式-O-、-S-或-NR7-所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R7定義如上；-C-D-獨(dú)立為下式所示的二價(jià)基團(tuán)-CR8＝CR8-CR8＝CR8- (b-1)；-N＝CR8-CR8＝CR8-(b-2)；-CR8＝N-CR8＝CR8-(b-3)；-CR8＝CR8-N＝CR8-(b-4)；-CR8＝CR8-CR8＝N-(b-5)；其中R8定義如上；R3為氫、鹵基、羥基、烷基、烷氧基、Ar、Ar-烷基、二(Ar-)烷基、Het或Het-烷基；R4為氫、烷基、氨基、烷基氨基、Ar-氨基、Het-氨基、烷基羰基氨基、Ar-羰基氨基、Het-羰基氨基、烷基氨基羰基氨基、Ar-氨基羰基氨基、Het-氨基羰基氨基、烷氧基烷基氨基、Ar-氧基烷基氨基或Het-氧基烷基氨基；R5為氫或烷基；或R4和R5一起可形成下式所示的二價(jià)基團(tuán)-M-CR9＝CR10-(c-1)；-CR10＝CR9-M-(c-2)；
-M-CR9R8-CR10-R8- (c-3)；-CR10R8-CR9R8-M- (c-4)；-CR8＝N-NR7-(c-5)；-NR7-N＝CR8-(c-6)；-CR8＝CR9-CR10＝CR8- (c-7)；-CR8R8-CR9R8-CR10R8-M- (c-8)；-M-CR10R8-CR9R8-CR8R8- (c-9)；-CR8R8-CR8＝N-NR7-(c-10)；-NR7-N＝CR8-CR8R8-(c-11)；其中R7和R8定義如上；R9、R10各獨(dú)立為氫、烷基、鹵基、鹵代烷基；或R9和R10一起可形成式-CR8＝CR8-CR8＝CR8-所示的二價(jià)基團(tuán)；和M為式-CH2-、-O-、-S-或-NR7-所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R7定義如上。
在本申請(qǐng)中，Ar為選自萘基和苯基的碳環(huán)，所述萘基和苯基分別可任選被1、2或3個(gè)取代基取代，所述各取代基獨(dú)立選自羥基、鹵基、氰基、硝基、氨基、一烷基氨基或二烷基氨基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羧基、烷氧基羰基、氨基羰基和一烷基氨基羰基或二烷基氨基羰基。優(yōu)選Ar為萘基或苯基，它們分別可任選被一個(gè)取代基取代，所述各取代基獨(dú)立選自鹵基或烷基。
在本申請(qǐng)中，Het為選自吡咯基、吡唑基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、唑基、異唑基、噻唑基、異噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和噠嗪基的單環(huán)雜環(huán)；或選自喹啉基、喹喔啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并呋喃基和苯并噻吩基的雙環(huán)雜環(huán)；各單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)可任選在碳上被鹵基、羥基、烷基或烷氧基取代。Het優(yōu)選為吡啶基、吡嗪基或吲哚基。
在本申請(qǐng)中，烷基為含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基；或含有3-6個(gè)碳原子的環(huán)狀飽和烴基；或與含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基連接的含有3-6碳原子的環(huán)狀飽和烴基；其中各碳原子可任選被被鹵基、羥基、烷氧基或氧代基取代。烷基優(yōu)選為甲基、乙基或環(huán)己基甲基。
在本申請(qǐng)中，鹵基為選自氟、氯、溴和碘的取代基，而鹵代烷基為含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基或?yàn)楹?-6個(gè)碳原子的環(huán)狀飽和烴基，其中一個(gè)或多個(gè)碳原子被一個(gè)或多個(gè)鹵原子取代。鹵基優(yōu)選為氟基或氯基，而鹵代烷基優(yōu)選為三氟甲基。
優(yōu)選的一類化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中-A-B-為式(a-1)或(a-3)所示的二價(jià)基團(tuán)，其中E為式-O-、-S-或-NR7-的二價(jià)基團(tuán)，其中R7為氫，R8為氫，-C-D-為式(b-1)或(b-2)所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R8為氫，而Y為式-CH2-、-CH2-CH2-或-CH＝CH-所示的二價(jià)基團(tuán)。
優(yōu)選的另一類式(I)化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中m和n都為1。
優(yōu)選的另一類式(I)化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中R1和R2各獨(dú)立為氫、烷基、Ar-烷基、Het或Het-烷基。
優(yōu)選的又一類式(I)化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中X為式-CH2CH2-或-CH2CH2CH2-所示的二價(jià)基團(tuán)。
優(yōu)選的又一類式(I)化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中R3為氫或烷基，Z為N-R7，其中R7為氫或烷基，a為單鍵而b為雙鍵，R4和R5一起形成式(c-1)、(c-3)、(c-5)、(c-7)、(c-8)或(c-10)所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R7和R8為氫。
優(yōu)選的又一類式(I)化合物為這樣的式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物其中R3為氫或烷基，Z為N-R7，其中R7為氫或烷基；a為單鍵而b為雙鍵，R4和R5一起形成式(c-1)、(c-3)、(c-5)、(c-7)、(C-8)或(c-10)所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R7和R8為氫；而R9和R10一起形成式-CR8＝CR8-CR8＝CR8-所示的二價(jià)基團(tuán)，其中R8為氫。
更具體而言，最優(yōu)選化合物3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物。
藥學(xué)上可接受的酸加成鹽定義為包括可由式(I)化合物制得的具有治療活性的無毒酸加成鹽。所述酸加成鹽可通過用適合的酸處理堿式的式(I)化合物獲得，所述酸例如無機(jī)酸如氫鹵酸、特別是鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸和磷酸；；有機(jī)酸如乙酸、羥乙酸、丙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對(duì)-甲苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對(duì)-氨基水楊酸和雙羥萘酸。
含有酸性質(zhì)子的式(I)化合物用合適的有機(jī)和無機(jī)堿處理也可轉(zhuǎn)變成具有治療活性的無毒堿加成鹽。合適的堿鹽包括例如銨鹽；堿金屬和堿土金屬鹽、特別是鋰、鈉、鉀、鎂和鈣鹽；與有機(jī)堿形成的鹽，如芐星青霉素G、N-甲基-D-葡糖胺、羥基胺鹽；以及與氨基酸如精氨酸和賴氨酸形成的鹽。
相反，所述酸或堿加成鹽用合適的堿或酸處理可轉(zhuǎn)化成游離形式。
本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“加成鹽”也包括式(I)化合物及其鹽能夠形成的溶劑合物。這樣的溶劑合物例如水合物和醇化物。
在酸加成鹽中，最優(yōu)選的化合物為化合物3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-]苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)水合物(1∶1)，包括其所有的立體異構(gòu)體。
特別優(yōu)選的化合物為化合物3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮和3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)水合物(1∶1)的(A)[(2α，4β)(A)]對(duì)映體、(B)[(2α，4β)(A)]的對(duì)映體及其混合物。
式(I)化合物的氮氧化物的含義包括其中一個(gè)或幾個(gè)氮原子被氧化成所謂的氮氧化物的那些式(I)化合物，特別是式(I)化合物哌啶基上的一個(gè)或多個(gè)氮原子被N-氧化形成的那些氮氧化物。
本文使用的術(shù)語“立體異構(gòu)體”定義為式(I)化合物所有可能存在的異構(gòu)體。除非另有指定，所述化合物的化學(xué)名稱代表所有可能存在的立體異構(gòu)體的混合物，所述混合物包括基本分子結(jié)構(gòu)所示的所有非對(duì)映體和對(duì)映體。更具體地講，立體中心可具有R-或S-構(gòu)型；二價(jià)的環(huán)狀(部分)飽和基團(tuán)上的取代基可具有順式或反式構(gòu)型。包含雙鍵的化合物在所述雙鍵上可具有E或Z-立體構(gòu)型。式(I)化合物的立體異構(gòu)體顯然規(guī)定包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
按照CAS命名規(guī)則，當(dāng)在一個(gè)分子中存在兩個(gè)已知絕對(duì)構(gòu)型的立體中心時(shí)，R或S描述符確定為編號(hào)最小的手性中心(按照Cahn-Ingold-Prelog排序規(guī)則)，其作為參考中心。用相對(duì)描述符[R*，R*]或[R*，S*]表示第二個(gè)立體中心的構(gòu)型，其中R*總是指定為參考中心，而[R*，R*]指具有相同手性的中心，[R*，S*]指具有不同手性的中心。例如，如果分子中編號(hào)最小的手性中心具有S構(gòu)型，而第二個(gè)手性中心具有R構(gòu)型，該立體描述符則表示為S-[R*，S*]。如果使用“α”和“β”，環(huán)系中環(huán)編號(hào)最低的不對(duì)稱碳原子上的最優(yōu)先取代基的位置總處于環(huán)系決定的平面中位的“α”位上。相對(duì)于參考碳原子上最優(yōu)先取代基的位置，環(huán)系中另外一個(gè)不對(duì)稱碳原子上最優(yōu)先取代基如果在環(huán)系決定的平面中位的同一側(cè)，其位置命名為“α”，如果在環(huán)系決定的平面中位的另一側(cè)，則其位置命名為“β”。
c上的鍵為單鍵時(shí)，式(I)化合物及其一些中間體化合物的結(jié)構(gòu)中至少有兩個(gè)立體中心。R1不為氫時(shí)，式(I)上的含氮單環(huán)具有另一個(gè)立體中心。由此可產(chǎn)生8種不同的立體結(jié)構(gòu)。
按以下介紹的步驟制備的式(I)化合物可以對(duì)映體的外消旋混合物的形式合成，所述混合物可通過本領(lǐng)域已知的拆分方法相互分開。通過與合適的手性酸反應(yīng)，式(I)的外消旋化合物可轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的非對(duì)映體的鹽。例如通過選擇性結(jié)晶或分級(jí)結(jié)晶，可隨后拆分所述非對(duì)映體的鹽，再用堿處理可使對(duì)映體從鹽中游離出來。拆分式(I)化合物的對(duì)映體另一種方法涉及使用手性固定相的液相色譜。所述純立體異構(gòu)體也可衍生自合適原料的相應(yīng)的純立體異構(gòu)體條件是反應(yīng)以立體有擇方式進(jìn)行。如果需要某一特定立體異構(gòu)體，優(yōu)選通過立體有擇制備方法合成所述化合物。這些方法使用在對(duì)映體上為純的原料較有利。
一些式(I)化合物也可能以互變異構(gòu)體形式存在。這樣的異構(gòu)體形式盡管沒有在上式中明確表示，但也規(guī)定包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。例如其中R5為H的式(I)化合物可以相應(yīng)的互變異構(gòu)式存在。
本發(fā)明還包括本發(fā)明有藥理活性的化合物的衍生化合物(通常稱作“藥物藥物前體”)，所述衍生物在體內(nèi)可降解產(chǎn)生本發(fā)明化合物。藥物藥物前體在靶受體上的效能通常(但不總是)比其降解產(chǎn)生的化合物的要低。當(dāng)需要的化合物的化學(xué)或物理性質(zhì)使得服用該化合物有困難或無效時(shí)，藥物藥物前體就特別有用。例如需要的化合物可能僅能微溶，可能很難被轉(zhuǎn)運(yùn)穿過粘膜上皮，或可能其血漿半衰期短得不合需要。關(guān)于藥物藥物前體的進(jìn)一步論述可參閱Stella，V.J.等“藥物藥物前體”，Drug Delivery Systems，1985，第112-176頁(yè)和Drugs，1985，29，第455-473頁(yè)。
有藥理活性的本發(fā)明化合物的藥物前體形式通常為式(1)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物，其中的酸基團(tuán)被酯化或被酰胺化。式-COORx的基團(tuán)包括在這類酯化的酸基團(tuán)中，其中Rx為C1-6烷基，苯基或以下基團(tuán)之一 酰胺化基團(tuán)包括式-CONRyRz的基團(tuán)，其中Ry為H、C1-6烷基、苯基或芐基，而Rz為-OH、H、C1-6烷基、苯基或芐基。
含有氨基的本發(fā)明化合物可用酮或醛如甲醛衍化形成曼尼希堿。該堿在水溶液中按一級(jí)動(dòng)力學(xué)水解。
式(I)化合物通?？砂匆幌盗胁襟E制備，其中各個(gè)步驟都為本領(lǐng)域行家所熟知。所述化合物的制備在一個(gè)共同提交的申請(qǐng)中公開，通過引用納入到本文中。式(I)化合物及其衍生物除了用以降低ICP的用途外，在治療其它組胺H1-和H2-介導(dǎo)的疾病中也有用，特別是對(duì)哺乳動(dòng)物的免疫調(diào)節(jié)，對(duì)抑制過敏和/或炎癥反應(yīng)，對(duì)預(yù)防和治療過敏性疾病如鼻炎、蕁麻疹、哮喘、過敏反應(yīng)等和對(duì)治療胃腸病癥如潰瘍、消化不良、各種回流適應(yīng)證等有用。因此，本發(fā)明還涉及式(I)及其衍生物作為組胺受體拮抗劑在制備用于哺乳動(dòng)物免疫調(diào)節(jié)、用于抑制過敏和/或炎癥反應(yīng)、用于預(yù)防和治療過敏性疾病以及胃腸病癥的藥物中的用途。
本發(fā)明的進(jìn)一方面是為組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑規(guī)定新的用途，特別用于快速降低顱內(nèi)壓(ICP)，特別是升高的ICP，更更特別是嚴(yán)重升高的ICP和/或用于預(yù)防由腦損傷導(dǎo)致的ICP升高及繼發(fā)性局部缺血。最有利的是，組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑不會(huì)或在最小程度上降低或升高血壓。
根據(jù)本發(fā)明，組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑為式(I)化合物及其衍生物或已知的作為本領(lǐng)域公認(rèn)的一組互不相關(guān)的有限藥物的組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑。
迄今為止，組胺H1-受體拮抗劑常用于哺乳動(dòng)物的免疫調(diào)節(jié)和用于抑制過敏和/或炎癥反應(yīng)。組胺H1-受體拮抗劑特別選自阿伐司汀、阿利馬嗪、安他唑啉、阿司咪唑、阿扎他定、氮司汀、溴非尼拉敏、布克力嗪、卡比沙明、卡瑞司汀、西替立嗪、氯環(huán)力嗪、氯苯那敏、桂利嗪、氯馬司汀、克立咪唑、氯西律嗪、可樂定、賽克力嗪、賽庚啶、脫羧乙氧基氯雷他定、右氯苯那敏、茶苯海明、二甲茚定、二甲力嗪、苯海拉明、二苯拉林、多西拉敏、伊巴司汀、乙氟利嗪、依匹司汀、非索非那定、羥嗪、酮替酚、左旋卡巴司汀、氯雷他定、美克洛嗪、美喹他嗪、甲地嗪、米安色林、咪唑司汀、尼普拉嗪、諾柏司汀、諾阿司咪唑、奧沙米特、奧索馬嗪、芬苯扎胺、非尼拉敏、哌香豆司特、異丙嗪、美匹拉敏、替美司汀、特非拉汀、曲敏帕明、曲吡那敏和曲普立啶及其衍生物和上述任意兩個(gè)或更多個(gè)藥物的混合物。
迄今為止，組胺H2-受體拮抗劑常用于患某些胃腸病癥如潰瘍、消化不良、各種回流適應(yīng)證等的哺乳動(dòng)物。組胺H2-受體拮抗劑特別選自雷尼替丁、西米替丁、法莫替丁、尼扎替丁、硫替丁、佐蘭替丁(zolantidine)及其衍生物和上述任意兩個(gè)或更多藥物的混合物。
也有組胺受體拮抗劑兼有組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑活性，如力坦色林或式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物。
所有的化合物都有明顯的ICP降低作用，而下列化合物還顯示出對(duì)血壓降低沒有或幾乎沒有影響酮替芬、氯環(huán)力、異丙嗪、美吡拉敏、苯海拉明、氯苯那敏和佐蘭替丁。
利用適合的受體模型研究方法，可用體外研究評(píng)估本發(fā)明化合物的組胺拮抗劑活性。體內(nèi)研究可用于評(píng)估本發(fā)明化合物的生物活性。為此，已開發(fā)出具有臨床相關(guān)性的大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型(閉合頭部損傷模型)，并用以測(cè)試本發(fā)明化合物(K.Engelborghs等，在改進(jìn)的閉合頭部損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭酗B內(nèi)壓的短暫變化，J.Neurosurg.89796-806，1998；K.vanRossem等實(shí)驗(yàn)性閉合頭部損傷后的腦氧合作用，Adv.Exp.Med.Biol.471209-215，1999；；K.Engelborghs等，在創(chuàng)傷性腦損傷實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭惺軗p的大腦血流自體調(diào)節(jié)，J.Neurotrauma，17(8)667-677，2000)。在一項(xiàng)研究中，顱內(nèi)高壓通過兔皮質(zhì)冷凍損傷來誘發(fā)。
本發(fā)明組胺受體拮抗劑，包括式(I)化合物和目前已知的組胺H1-、H2-和H1/H2-受體拮抗劑，可配制成各種應(yīng)用的藥物制劑。通常用于系統(tǒng)用藥的所有組合物均為本發(fā)明合適組合物。為制備本發(fā)明的藥用組合物，有效量的特定化合物(任選加成鹽)作為活性成分與藥學(xué)上可接受的載體結(jié)合成緊密混合物，所述載體可根據(jù)預(yù)期服用的劑型采用多種形式。這些藥物組合物為單位劑型較理想，特別適合口服或胃腸外注射。例如在制備口服劑型的組合物時(shí)，可以使用任何平常使用的藥物介質(zhì)，在制備口服液體制劑如混懸液、糖漿、酏劑、乳劑和溶液時(shí)可使用例如水、乙二醇、油類、醇類等；；；或在制備散劑、丸、膠囊和片劑時(shí)可使用固體載體如淀粉、糖類、白陶土、稀釋劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。因?yàn)榉梅奖?，膠囊和片劑代表了最有利的口服單位劑型，此時(shí)顯然使用固體藥用載體。對(duì)胃腸外組合物而言，盡管例如為增加溶解度可能加入其它成分，其載體通常包含至少占大部分的無菌水。注射液例如可用含有鹽溶液、葡萄糖溶液或鹽溶液和葡萄糖溶液的混合物的載體來制備。注射混懸液也可用合適的液體載體、混懸劑等來制備。還包括預(yù)定為使用前可立刻轉(zhuǎn)變?yōu)橐后w制劑的固體制劑。
為服用方便和劑量均一起見，將前述藥物組合物配制成單位劑型為非常有利的。文中所述單位劑型是指適合作為單一劑量的在物理上可分離的單位，每個(gè)單位含有經(jīng)計(jì)算能產(chǎn)生需要的療效的預(yù)定量的活性成分和必需的藥物載體。此類單位劑型的實(shí)例為片劑(包括劃痕片劑和包衣片劑)、膠囊、丸劑、散劑小包、糯米紙囊劑、栓劑、可注射溶液或混懸液等，及其分隔開的多個(gè)單位劑型。為方便快速用藥起見，上述藥物組合物最優(yōu)選配制成可注射或可輸注的溶液或混懸液。


圖1示出了在10分鐘輸注期間，化合物2降低ICP作用的劑量依賴性。X軸劑量(mg/kg/min)；Y軸相對(duì)于初始值的ICP變化百分率。
圖2示出了在輸注10分鐘后的10分鐘治療后期，化合物2降低ICP作用的劑量依賴性。X軸劑量(mg/kg/min)；Y軸相對(duì)于初始值的ICP變化百分率。
圖3示出了分別用甘露醇(圖3-A)(劑量0.125g/kg/min)、化合物2(圖3-B)(劑量1mg/kg/min)和溶劑(圖3-C)(10％HP-β-CD，pH 4)間隙性治療的3個(gè)時(shí)期(10分鐘)中的大鼠ICP、MABP和CPP時(shí)程變化。嚴(yán)重頭部損傷(時(shí)間＝0)后10分鐘開始治療，30分鐘和60分鐘時(shí)重復(fù)治療。曲線連接順序時(shí)間點(diǎn)的中位值。數(shù)據(jù)數(shù)值表示為初始值的百分率。
圖4示出了分別用化合物2(圖4-A)(劑量2mg/kg/min，10分鐘)和溶劑(圖4-B)(2ml/min，10分鐘)治療的兔ICP、MABP和CPP時(shí)程變化。誘導(dǎo)皮質(zhì)冷損傷(時(shí)間＝0)后24小時(shí)開始治療。曲線連接順序時(shí)間點(diǎn)的中位值。數(shù)據(jù)數(shù)值表示為初始值的百分率。
圖5示出了用美吡拉敏(劑量5mg/kg/min，10分鐘)治療的兔ICP、BP和CPP時(shí)程變化。曲線連接順序時(shí)間點(diǎn)的中位值。數(shù)據(jù)數(shù)值表示為初始值的百分率。
具體實(shí)施例方式
以下實(shí)施例用以說明本發(fā)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制。
試驗(yàn)部分在一些化合物中，立體碳原子的絕對(duì)立體構(gòu)型未經(jīng)實(shí)驗(yàn)確證。在這些情況下，分離到的第一個(gè)立體異構(gòu)體指定為“A”，第二個(gè)指定為“B”，而沒有進(jìn)一步鑒定實(shí)際的立體構(gòu)型。但是，所述“A”和“B”異構(gòu)體可被本領(lǐng)域行家采用本領(lǐng)域共知的方法例如X-線衍射法清楚無誤地鑒定。
例如，對(duì)于化合物嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮，3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基，8種可能的立體異構(gòu)體定義如下
在上文和下文中，“DMF”定義為N，N-二甲基甲酰胺，“DIPE”定義為二異丙醚，“THF”定義為四氫呋喃，“MIBK”定義為甲基異丁酮，”DIPA”定義為二異丙胺。
A中間體化合物的制備實(shí)施例A1a)中間體1的制備 使用干躁的玻璃器皿。將(甲氧基甲基)三苯基氯化膦(0.35mol)和THF p.a.(分子篩)(21)的混合物在N2氣流下，在-50℃攪拌。滴加BuLi2.5M/己烷(0.35mol)并將所得混合物在-25℃攪拌30分鐘。在-25℃下，滴加1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶酮(0.35mol)的THF溶液。使所得混合物升溫至室溫，然后在室溫下攪拌過夜，再用水分解所述混合物。蒸去有機(jī)溶劑，所得含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 97.5/2.5)。收集純化的組分，蒸去溶劑。得到121g4-(甲氧基亞甲基)-1，2-雙(苯甲基)哌啶對(duì)映體的混合物(中間體1)(100％)。
b)中間體2的制備
攪拌中間體1(0.35mol)和THF(500ML)的混合物直至完全溶解。加入H2O(900ml)，然后再加入HCl p.a.38％(100ml)。將所得混合物攪拌回流3小時(shí)。蒸去有機(jī)溶劑，所得含水濃縮物用K2CO3堿化，再用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 97/3)。收集純化的部分，蒸去溶劑。得到81g 1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶羰醛對(duì)映體的混合物(中間體2)(79％)。
c)中間體3的制備 將DIPA(0.33mol)和THF p.a.(用分子篩預(yù)先干燥)(21)的混合物在N2氣流下在-78℃攪拌。滴加BuLi2.5M/己烷(0.276mol)。將所得混合物在-78℃攪拌15分鐘。滴加1-(2-苯乙基)-1H-苯并咪唑(0.276mol)的THF溶液。將所得混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)。滴加中間體2(0.276mol)的THF溶液，將所得混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，然后使它升溫至室溫，在室溫下攪拌過夜，再用水分解所述混合物。蒸去有機(jī)溶劑，所得含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 95/5至90/10)。收集純化的部分，蒸去溶劑。得到113gα-[1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶基]-1-(2-苯乙基)-1H-苯并咪唑-2-甲醇(中間體3)(79％)。
d)中間體4的制備 將中間體3(0.22mol)和三氟甲磺酸(750ml)的混合物在110℃下攪拌7小時(shí)。將所述混合物冷卻，倒進(jìn)冰塊中，，用50％ NaOH堿化，再用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶，過濾所述混合物。沉淀和濾液分別用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98.5/1.5至95/5)。收集純化的4個(gè)部分，蒸去溶劑。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶。將所得沉淀過濾并干燥。得到16g部分1[(2α，4β)(A)]-6-[1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶基]-11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(中間體4)(14.6％)、19.5g部分2[(2α，4β(B)]-6-[1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶基]-11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(17.8％)、8.66g部分3[(2α，4α)(A)]-6-[1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶基-11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(7.9％)和7.74g部分4[(2α，4α)(B)]-6-[1，2-雙(苯甲基)-4-哌啶基]-11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(8.9％)。
e)中間體5的制備 以10％(1g)Pd/C為催化劑，將中間體4(0.0305mol)和甲醇(150ml)的混合物在50℃下氫化過夜。攝取H2(1當(dāng)量)之后，濾去催化劑并蒸發(fā)濾液。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶，將沉淀過濾并干燥。得到11.66g[(2α，4β)(A)]-11，12-二氫-6-[2-(苯甲基)-4-哌啶基]-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(中間體5)(94％)。
實(shí)施例A2a)中間體6的制備 使用干躁的玻璃器皿。DIPA(0.22mol)和THF p.a.(用分子篩預(yù)先干燥)(1400ml)的混合物在N2氣流下在-70℃攪拌。滴加BuLi2.5M(0.185mol)并將所得混合物在-70℃下攪拌15分鐘。在-70℃下滴加1-(苯甲基)-1H-苯并咪唑(0.185mol)溶于THF的溶液，并將所得混合物在-70℃下攪拌1小時(shí)。在-70℃下滴加中間體2(0.185mol)溶于THF的溶液。將所得混合物在-70℃下攪拌1小時(shí)，然后將溫度緩慢升至室溫，在室溫下攪拌過夜，再用水分解所述混合物。蒸去有機(jī)溶劑。含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 95/5)。收集純化的部分并蒸去溶劑。得到91g中間體6(98％)。
b)中間體7的制備 將中間體6(0.18mol)和三氟甲磺酸(700ml)的混合物在N2氣流下在120℃攪拌18小時(shí)。將該混合物冷卻，倒進(jìn)冰塊中，用50％ NaOH堿化，再用CH2Cl2萃取。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)99/1)。收集純化的部分并蒸去溶劑。得到40g中間體7(46％)。
c)中間體8的制備 和中間體9的制備 以10％(2g)Pd/C為催化劑，將中間體7(0.081mol)和甲醇(200ml)的混合物在50℃下氫化。攝取H2(1當(dāng)量)之后，濾去催化劑并蒸發(fā)濾液。將此組分用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集兩個(gè)純化的部分并蒸去溶劑。得到部分1和12.5g中間體9(順式異構(gòu)體)(36％)。將部分1在CH3CN中結(jié)晶，將沉淀過濾并干燥。得到4.44g的中間體8(14％)[(2α，4β)](A)-外消旋物。
實(shí)施例A3a)中間體10的制備 將DIPA(0.1mol)和THF(100ml)的混合物在N2氣流下攪拌，使所述混合物冷卻至-70℃并分批加入BuLi 2.5M/己烷(40ml)。使溫度升至-30℃，同時(shí)攪拌10分鐘。將所得混合物冷卻至-70℃。在此溫度下，滴加1-(苯乙基)-1H-苯并咪唑(0.1mol)的THF(50ml)溶液，將所得混合物在-70℃下攪拌2小時(shí)。滴加4-甲酰-1-哌啶羧酸乙酯(0.1mol)并將所得混合物在-70℃下攪拌30分鐘。將所述混合物升溫至室溫，繼續(xù)攪拌30分鐘。所述混合物用水分解，然后蒸發(fā)。將所得殘余物在水中攪拌，用CH2Cl2萃取此混合物。將有機(jī)層分離、干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)。收集純化的部分并蒸去溶劑。得到38g 4-[羥基[1-(2-苯乙基)-1H-苯并咪唑-2-基]甲基]-1-哌啶羧酸乙酯(中間體10)。
b)中間體11的制備
將中間體10(0.011mol)和MnO2(15g)于CH2Cl2(150ml)的混合物在室溫下攪拌過夜。用代卡利特(dicalite)濾去MnO2。用相同量的所述混合物將以上反應(yīng)重復(fù)一次。將所得混合物在室溫下攪拌過夜，用代卡利特(dicalite)濾去MnO2。蒸發(fā)濾液。得到4.5g 4-[[1-(2-苯乙基)-1H-苯并咪唑-2-基]羰基]-1-哌啶羧酸乙酯](中間體11)。
c)中間體12的制備 將中間體11(0.011mol)和48％HBr(水溶液，25ml)的混合物在80℃下攪拌10小時(shí)。蒸去溶劑。所得殘余物在沸騰的2-丙醇中攪拌，放冷，所得沉淀過濾并干燥。取(1g)樣品在乙醇中重結(jié)晶。過濾得到結(jié)晶并干燥。得到0.5g[1-(2-苯乙基)-1H-苯并咪唑-2-基](4-哌啶基)甲酮二氫溴化物(中間體12)(mp.261.9℃)。
d)中間體13的制備
在N2氣下攪拌三氟甲磺酸(150ml)。分批加入中間體12(0.1mol)并將所得反應(yīng)混合物在100℃下(N2氣流)攪拌20小時(shí)。機(jī)那個(gè)所述反應(yīng)混合物冷卻，倒進(jìn)冰塊(1kg)中，并用50％NaOH中和所得混合物。用CH2Cl2萃取此混合物，生成沉淀。分離有機(jī)層。將沉淀過濾并在CH3CN中重結(jié)晶。將結(jié)晶過濾并再次在CH3CN中重結(jié)晶。將結(jié)晶過濾并干躁。得到3.0g的11，12-二氫-6-(4-亞哌啶基)-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜.三氟甲磺酸鹽(2∶3)。將分離的有機(jī)層液體與結(jié)晶母液合并，干躁，過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物(37g)溶于水/乙醇，用50％NaOH堿化并用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥(MgSO4)，過濾并蒸去溶劑。所得殘余物在2-丙酮/DIPE中攪拌，然后過濾并干燥。得到16.2g 11，12-二氫-6-(4-亞哌啶基)-6H-苯咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜(中間體13)(mp.180.3℃)。
實(shí)施例A4a)中間體14的制備 使用干燥玻璃器皿。將DIPA(1.1mol)和THF p.a.(預(yù)先用分子篩干燥)(3000ml)的混合物在N2氣流下在-78℃攪拌。在-70℃下滴加BuLi 1.5M/己烷(1.05mol)，將所得混合物在-70℃下攪拌20分鐘。在-78℃下滴加1-(苯乙基)-1H-苯并咪唑(1mol)溶于THF的溶液，并將所得混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)。在-70℃下滴加4-乙基1-(1，1-二甲基)1，4-哌啶二羧酸酯(1.1mol)溶于THF的溶液。將所得混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)，然后升至室溫，在室溫下攪拌過夜，再用水分解所述混合物。蒸去有機(jī)溶劑。所得含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶。將所得沉淀過濾并干燥。得到350g中間體14(81％)。
b)中間體15的制備 在N2氣氛下反應(yīng)。將甲基氯化鎂(0.0165mol；8.2ml，2.0M/THF)滴加到中間體14(0.0150mol)的THF(90ml)溶液中，在室溫下攪拌。將所得反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，再加入水。蒸去有機(jī)溶劑，所得含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物(6g)在CH3CN中結(jié)晶。將所得沉淀過濾并干燥。得到4.3g中間體15(64％)。
c)中間體16的制備 室溫下，將中間體15(0.0076mol)和三氟甲磺酸(29ml)的混合物攪拌48小時(shí)。將所得反應(yīng)混合物加入水中。將所述混合物用K2CO3堿化。水層用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥、過濾并蒸去溶劑。將所得殘余物用短的、開口的硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)90/10)。收集純化的部分并蒸去溶劑。得到2.g中間體16(79％)。
實(shí)施例A5a)中間體17的制備 在N2氣氛下反應(yīng)。將苯基氯化鎂(0.0440mol)加入中間體14(0.0400mol)的THF(200ml)溶液中，在室溫下攪拌。將所得反應(yīng)混合物攪拌1小時(shí)，再加入水。蒸去有機(jī)溶劑，將所得含水濃縮物用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥、過濾并蒸去溶劑。將此殘余物與用類似方式得到的殘余物合并，將它們?nèi)?20g)在CH3CN中結(jié)晶。將所得沉淀過濾并干燥。得到20g的中間體17(98％)。
b)中間體18的制備 將中間體17(0.0360mol)和三氟甲磺酸(120ml)的混合物從0℃至室溫?cái)嚢?4小時(shí)。將所得反應(yīng)混合物加入水中。此混合物用50％NaOH堿化，然后用CH2Cl2萃取。堿分離的有機(jī)層干燥、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶，過濾，然后用短的、開口的硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)90/10)。收集純化的部分并蒸去溶劑。得到11g中間體18(78％)。(mp.270.7℃)實(shí)施例A6a)中間體19的制備 1-(2-苯基乙烯基)-1H-苯并咪唑(0.04mol)和THF(100ml)的混合物在N2氣流下攪拌并冷至-70℃。在-70℃下滴加BuLi 2.5M/己烷(0.04mol)，繼續(xù)在-70℃下攪拌30分鐘。滴加4-乙基1-(1，1-二甲基乙基)-1，4-哌啶二羧酸酯(0.04mol)的THF溶液，并將所得混合物在-70℃攪拌1小時(shí)。使溫度升至室溫，用水分解所述混合物，然后用CH2Cl2萃取。將分離的有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物用硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3CN97/3至94/6)。收集兩個(gè)洗脫部分并蒸去溶劑。將第二部分殘余物在DIPE/CH3CN中結(jié)晶。將所得結(jié)晶過濾并干燥。得到7.0g(1，1-二甲基乙基)(Z)-4-[[1-(2-苯基乙烯基)-1H-苯并咪唑-2-基]羰基]-1-哌啶羧酸酯(41％)(中間體19)。(mp.155.8℃)b)中間體20的制備 將中間體19(0.043mol)和三氟乙酸(130ml)的混合物在室溫下攪拌1/2小時(shí)。將所得反應(yīng)混合物加入乙醚中。將沉淀過濾，用乙醚洗滌并干燥。得到18g(Z)-[1-(2-苯基乙烯基)-1H-苯并咪唑-2-基](4-哌啶基)甲酮.三氟乙酸鹽(1∶1)(中間體20)(94.0％)。(mp.202.2℃)c)中間體21的制備 將中間體20(0.0276mol)、AlCl3(0.187mol)和NaCl(0.187mol)的混合物在150℃(熔化)攪拌1小時(shí)。將所得反應(yīng)混合物用冰、水和50％NaOH的混合物分解。將所述混合物用二氯甲烷萃取，將有機(jī)層分離、干燥、過濾和蒸發(fā)。所得殘余物(4.3g)通過玻璃過濾器中的硅膠純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)90/10)。收集純化部分并蒸去溶劑。將所得殘余物在乙醇中轉(zhuǎn)化為(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)。將所得鹽過濾、干燥。得到1.8g 6-(4-亞哌啶基)-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜.(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)(13.4％)(中間體21)。(mp.229.4℃)實(shí)施例A7a)中間體22的制備 將2-胺-1H-苯并咪唑(0.04mol)、3-乙?；?2(3H)-呋喃酮(0.53mol)和4-甲基苯磺酸(4g)混合物的二甲苯(930ml)溶液攪拌回流過夜，然后冷卻。將所得沉淀過濾，再在H2O(200ml)、Na2CO3(5g)和CH2Cl2(500ml)中攪拌。將所得沉淀過濾，在CH3OH中煮沸，過濾，然后干燥。得到47.4g 3-(2-羥乙基)-2-甲基-嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮(中間體22)。
b)中間體23的制備 將中間體22(0.025mol)和K2CO3p.a.(0.03mol)混合物的DMF(70ml)溶液在50℃下攪拌。滴加甲基碘(0.03mol)。將所得混合物在50℃下攪拌4小時(shí)，然后冷卻。蒸去溶劑。將所得殘余物在CH3OH中煮沸。將所得沉淀過濾并干燥。將所得殘余物用硅膠HPLC純化(洗脫液CH2Cl2/(CH3OH/NH3)97/3)。收集兩個(gè)純化的部分并蒸去溶劑。得到2.08g 3-(2-羥乙基)-2，10-二甲基-嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮(中間體23)。
c)中間體24的制備 將中間體23(0.02mol)和SOCl2(0.06mol)混合物的CHCl3(50ml)的溶液攪拌回流4小時(shí)，然后冷卻。加入H2O。所得混合物用K2CO3堿化并使其分層。水層用CH2Cl2萃取。將合并的有機(jī)層干燥(MgSO4)、過濾并蒸去溶劑。所得殘余物在CH3CN中結(jié)晶。將所得沉淀過濾、干燥。得到3.44g中間體24。
B.最終化合物的制備實(shí)施例B1化合物1的制備 和化合物2的制備 表1




表2
表3
表4
表5
表6 表7
表8 C.藥理實(shí)施例C1.組胺H1-和H2-拮抗劑活性體外檢測(cè)為了解所選擇的化合物的放射性配體結(jié)合性，利用富集特定受體即H1-或H2-受體的組織標(biāo)本進(jìn)行體外放射性受體結(jié)合性研究。對(duì)體即H1-或H2-受體的組織標(biāo)本進(jìn)行體外放射性受體結(jié)合性研究。對(duì)于組胺H1-受體，使用的組織為被人組胺H1-受體永久轉(zhuǎn)染的CHO-細(xì)胞。只用苯海拉明測(cè)試過豚鼠的大腦皮層細(xì)胞。被測(cè)化合物對(duì)[3H]吡拉敏的競(jìng)爭(zhēng)性抑制是這樣進(jìn)行研究的將低(nM)濃度放射性配體和少量組織標(biāo)本樣品(0.2-5ml；1-5mg組織)在緩沖介質(zhì)；和各種濃度的溶于DMSO所述化合物中溫育，所述化合物的濃度應(yīng)在從抑制曲線得出的pIC50值周圍跨越至少4個(gè)數(shù)量級(jí)。組胺H2-拮抗活性的測(cè)試方法與H1-拮抗劑的基本相同但使用的是豚鼠紋狀體細(xì)胞和0.1nM濃度的[125I]APT作為放射性配體。溫育在在22℃下進(jìn)行150分鐘。
本發(fā)明的所有化合物均顯示出pIC50值為5或更高的組胺H1-拮抗劑活性。其中有幾個(gè)化合物顯示出pIC50值為6或更高的組胺H1-拮抗劑活性。這些化合物列在表9中。還發(fā)現(xiàn)，市售的典型組胺H1-拮抗劑(苯海拉明)的組胺H1-拮抗活性只比本發(fā)明的大多數(shù)化合物的略高還發(fā)現(xiàn)，市售H2-拮抗劑(雷尼替丁和西米替丁)的組胺H2-活性在本發(fā)明化合物的H2-活性范圍內(nèi)(中等水平)。也選擇表9中的化合物(包括市售化合物)進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)以測(cè)試其降低ICP的能力。
表9組胺H1-和H2-拮抗劑活性受體模型篩選結(jié)果


C2.體內(nèi)藥理學(xué)試驗(yàn)閉合頭部損傷(CHI)模型將與臨床相關(guān)的大鼠創(chuàng)傷性腦損傷模型用于測(cè)試本發(fā)明化合物和市售化合物。所述模型模擬了幾個(gè)創(chuàng)傷性腦損傷臨床特征，如增高的ICP、降低的大腦灌注壓、包括彌散性軸突損傷在內(nèi)的形態(tài)改變、神經(jīng)元壞死及挫傷、大腦血流自體調(diào)節(jié)損傷及腦氧合作用減退，用以篩選具有ICP-降低效果的藥物。在被tereotaxically放在安裝在4個(gè)彈簧上的臺(tái)面上、被插管且用異氟烷麻醉(1.5％異氟烷、30％O2和70％N2O的混合物)的Sprague-Dawley大鼠(380-400g)中引導(dǎo)創(chuàng)傷。將用直徑9mm的硅盤保護(hù)的400g鋼圓柱體從70cm或50cm(分別對(duì)應(yīng)“嚴(yán)重的”和“中等的”頭部損傷)的高度墜落到無保護(hù)的大鼠腦殼上。受撞擊部位居于前囟和lamda之間。用Codman微傳感探頭插入頂骨皮層記錄ICP。在嚴(yán)重的和中等的頭部損傷中，創(chuàng)傷產(chǎn)生后ICP立即升高并持續(xù)升高幾天。嚴(yán)重的頭部損傷模式用于評(píng)估創(chuàng)傷后即試時(shí)的藥效(篩選方法)。在觀察到大鼠存活和從麻醉中蘇醒的情況下，應(yīng)用中等的頭部損傷模式。在所述藥理研究中包括了病理ICP在12.5至35mmHg之間的動(dòng)物。ICP、平均動(dòng)脈血壓(MABP)和大腦灌注壓CPP(＝MABP-CPP)的變化以試驗(yàn)開始時(shí)的初始值的百分比表示。
本發(fā)明化合物的篩選方法以1周時(shí)間為試驗(yàn)周期，將由3只大鼠為一組組成的4個(gè)試驗(yàn)組與3只用鹽水處理的大鼠進(jìn)行比較。因?yàn)槌Ｒ?guī)統(tǒng)計(jì)方法需要較大的動(dòng)物樣本量，故使用序貫法。在不同階段使用序貫法。在每一階段，選擇的一組動(dòng)物越均一越好。把藥品或鹽水隨機(jī)分配給試驗(yàn)動(dòng)物。所述篩選方法允許不接受所述藥物，也允許接受認(rèn)為所述藥物具有活性或在下一個(gè)階段使用新的一組動(dòng)物繼續(xù)試驗(yàn)。假如已知必須檢測(cè)的活性的生物相關(guān)水平，則預(yù)期的假陽性和假陰性結(jié)果部分是已知的和確定的。應(yīng)用序貫雙樣本群秩檢驗(yàn)。在每個(gè)階段具有相對(duì)較小數(shù)量的動(dòng)物樣本的三階段序貫設(shè)計(jì)證明最佳。盡管個(gè)別數(shù)據(jù)存在變異性，該方法卻一貫接受參考試驗(yàn)如甘露醇為有活性的，而盡管對(duì)照沒有活性作用。臨床上相關(guān)的甘露醇i.v.劑量(3g 45分鐘藥程)始終降低ICP(平均降幅約20％)。
表10篩選方法的結(jié)果

(1)1分鐘內(nèi)一次性注射試驗(yàn)化合物1mg/kg，隨后輸注所述化合物，速度為0.5mg/kg/min，持續(xù)輸注時(shí)間為44分鐘；1分鐘內(nèi)注射0.4ml溶劑，其后輸注溶劑，速度為0.2ml/min，時(shí)間為44分鐘；輸注甘露醇67mg/kg/min，輸注持續(xù)時(shí)間為45分鐘。
(2)Delta％在治療期間，ICP相對(duì)于基礎(chǔ)值的平均變化率。
(3)結(jié)論基于序貫統(tǒng)計(jì)評(píng)估。
CD＝羥丙基-β-環(huán)糊精溶劑H2T＝酒石酸溶劑甘露醇1-5在單獨(dú)測(cè)試中5次評(píng)價(jià)甘露醇(陽性對(duì)照組)。每次測(cè)試的結(jié)果已作說明。
進(jìn)一步的研究表11顯示在大鼠嚴(yán)重CHI后治療期間記錄到的一些相關(guān)生理學(xué)變量的變化。從嚴(yán)重頭部損傷20分鐘后開始治療，用10分鐘藥程，速度0.5mg/kg/min給藥，然后用50分鐘藥程，速度0.1mg/kg/min給藥。
表11在大鼠嚴(yán)重CHI后治療期間相關(guān)生理學(xué)變量的變化

在整個(gè)治療期間的平均變化，以初始值的％變化表示數(shù)值為中值(95％C.I.)。
*＝與溶劑組有顯著性差異(p＜0.05，Dunnett′s檢驗(yàn))
溶劑10％羥丙基-β-環(huán)糊精、酒石酸、NaOH和無熱原的甘露醇水溶液；pH＝4；克分子滲透壓濃度為312-314mOsm/kg；化合物濃度為2mg/ml。
化合物嘧啶并[1，2-a]苯并咪唑-4(10H)-酮，3-[2-[4-(11，12-二氫-6H-苯并咪唑并[2，1-b][3]苯并氮雜-6-基)-2-(苯甲基)-1-哌啶基]乙基]-2，10-二甲基(E)-2-丁烯二酸鹽(2∶3)水合物(1∶1)化合物1(B)[(2α，4β)(A)]化合物2(A)[(2α，4β)(A)]外消旋物(化合物1和化合物2)(2α，4β)(A)，即化合物1和化合物2的外消旋混合物ICP顱內(nèi)壓MABP平均動(dòng)脈血壓CPP大腦灌注壓ETCO2呼吸末CO2當(dāng)化合物2以0.1mg/kg.min連續(xù)灌注時(shí)，其對(duì)MABP的顯著影響變的很不明顯。在這種情況下，不存在血壓的峰值，也觀察不到超過20％的MABP增高(在灌注結(jié)束時(shí)MABP增高的中值為9％，n＝6)。在此劑量下的ICP最大降幅可與灌注之前藥程超過10分鐘的5mg/kg“負(fù)荷劑量”所產(chǎn)生的降幅相比，但獲得此效果所需用的時(shí)間較長(zhǎng)(中值30分鐘)。
雷尼替丁和苯海拉明對(duì)ICP的影響給遭受嚴(yán)重頭部損傷的CHI模型大鼠以2mg/kg/min速度，6分鐘藥程灌注雷尼替丁。溶劑(NaCl+H2T)以相同速率灌注。每組中有6只大鼠參加了試驗(yàn)。觀察到雷尼替丁組產(chǎn)生出大于溶劑對(duì)照組的具統(tǒng)計(jì)顯著性的ICP降幅(降幅為7.7％對(duì)0.5％，在p＝0.013顯著)。降低的百分比以實(shí)驗(yàn)開始時(shí)和灌注結(jié)束時(shí)記錄到的ICP的％變化率計(jì)算。沒有觀察到血壓有顯著變化。
給遭受嚴(yán)重頭部損傷的CHI模型大鼠以10分鐘藥程、1mg/kg/min速度灌注苯海拉明。三只大鼠參加了試驗(yàn)。觀測(cè)到苯海拉明產(chǎn)生34％的ICP降幅，而對(duì)血壓無顯著的影響。
使用激動(dòng)劑的比較實(shí)驗(yàn)為了進(jìn)行比較，還給非創(chuàng)傷大鼠灌注兩個(gè)市售的H2-激動(dòng)劑(dimaprit和英普咪定)進(jìn)行試驗(yàn)，dimaprit以0.5mg/kg/min劑量10分鐘藥程給藥；英普咪定給藥速度增至3.75mg/kg/小時(shí)。沒有觀察到任何效果。當(dāng)dimaprit給藥速度升至2mg/kg/min 10分鐘藥程給藥，而英普咪定以0.5mg/kg食團(tuán)給藥時(shí)，觀測(cè)到血壓和ICP下降，但治療結(jié)束后又得以恢復(fù)。
因此得出結(jié)論，組胺H1-和/或H2-受體拮抗劑顯示出降低ICP的效果，與此同時(shí)對(duì)血壓幾乎沒有顯著作用。
用市售H1-和H2-拮抗劑進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)以0.5mg/kg/min速度，用10分鐘藥程給遭受嚴(yán)重頭部損傷的CHI-模型大鼠灌注多種市售H1-和H2-拮抗劑。溶劑(NaCl+H2T)以同樣速率灌注。每組有6只大鼠參加了試驗(yàn)。前15分鐘ICP和BP的表現(xiàn)結(jié)果總結(jié)于表12中。
表12市售H1-和H2-拮抗劑的效果。


0無效果；-降低；--大幅降低；+增加化合物1的劑量反應(yīng)對(duì)以10分鐘藥程給CHI模型大鼠灌注不同劑量(0.125、0.25、0.5、1和2mg/kg/min)化合物1的效果的完全隨機(jī)盲法試驗(yàn)的結(jié)果表明在治療期間，化合物1引起持續(xù)且依賴劑量的ICP降低(圖1)。從1mg/kg/min的速度起，化合物1試驗(yàn)組產(chǎn)生出比溶劑對(duì)照組大的具有統(tǒng)計(jì)顯著性的ICP降低。灌注后的10分鐘時(shí)間內(nèi)，仍保持高度顯著且依賴劑量的對(duì)ICP的影響(圖2)。
化合物2、化合物1和外消旋物(化合物1和化合物2)對(duì)腦血紅蛋白濃度和氧合作用的影響對(duì)“在活體內(nèi)”的大鼠腦進(jìn)行近紅外光譜(NIRS)檢測(cè)可以非入侵方式定量腦血紅蛋白的氧飽和(HbSat)及總腦血紅蛋白濃度([HbTot])。后者為衡量大腦血流量(CBV)的一個(gè)量度。還可監(jiān)測(cè)組織氧合作用指針即線粒體酶-細(xì)胞色素氧化酶(CytOx)氧化還原狀態(tài)的變化。
中等腦損傷24小時(shí)后，按10分鐘藥程以0.5mg/kg.min靜脈給藥，其后45分鐘藥程以0.1mg/kg.min給藥灌注化合物2、1和外消旋物(化合物1和化合物2)，結(jié)果顯示它們對(duì)[Hb Tot]沒有顯著影響。只有化合物2引起小的但具有統(tǒng)計(jì)顯著性的HbSat降低?；衔?和外消旋物(化合物1和化合物2)不影響HbSat。在所使用的劑量下，所有化合物對(duì)CytOx的氧化還原狀態(tài)均無影響。這些結(jié)果表明，在采用的實(shí)驗(yàn)條件下，對(duì)大腦血管的血管收縮作用即使存在也是有限的，而組織的氧合作用不受妨害。
麻醉對(duì)化合物2作用的影響中等創(chuàng)傷24小時(shí)后，用不同的麻醉劑(異氟烷、水合氯醛、戊巴比妥)對(duì)化合物2的治療效果(用30分鐘藥程以劑量0.1mg/kg.min靜脈灌注)進(jìn)行研究。用水合氯醛(400mg/kg i.p)作麻醉劑時(shí)，ICP減至初值的75％，而MABP逐漸增加至初值的110％(中值，n＝6)。這些效果可與用異氟烷麻醉時(shí)觀察到的效果相較。使用戊巴比妥(60mg/kgi.p.)麻醉時(shí)，化合物2灌注結(jié)束后產(chǎn)生顯著的MABP逐漸增加，最高增至初始值的141％，而ICP減至初始值的64％(中值，n＝6)。這些結(jié)果表明在不同的麻醉類型下可觀察到相同的對(duì)ICP和MABP的影響方式。所述化合物在戊巴比妥麻醉下顯著降低ICP的這個(gè)事實(shí)是很重要的，因?yàn)榘捅韧最惤?jīng)常用于創(chuàng)傷性腦損傷患者。巴比妥類也能降低ICP，因此與所述化合物一起可獲得重要的附加效果。
重復(fù)使用化合物1和甘露醇對(duì)受創(chuàng)傷大鼠的升高的ICP的影響化合物1以藥程10分鐘，1mg/kg/min靜脈注射，間隔20分鐘給藥2次，首次給藥在嚴(yán)重頭部損傷發(fā)生后20分鐘開始。
甘露醇按與化合物1相同的時(shí)間期限以0.125g/kg/min靜脈給藥，對(duì)照動(dòng)物僅給予溶劑(含10％HP-β-CD，pH 4)。
化合物1的灌注導(dǎo)致ICP快速降低(圖3)。每次灌注結(jié)束后，該效果得以增強(qiáng)?；衔?給藥期間血壓下降，但給藥結(jié)束后血壓復(fù)原。這與甘露醇形成對(duì)照，甘露醇每次灌注期間ICP降低而血壓升高，每次治療結(jié)束后血壓隨即下降。只在用化合物1治療的動(dòng)物可觀察到血壓和ICP變化明顯不相關(guān)。相反，用甘露醇治療的動(dòng)物顯示出或多或少的血壓和顱內(nèi)壓并行變化。這表明化合物1的藥理效應(yīng)與甘露醇不同。
化合物1對(duì)冷凍損傷引導(dǎo)的兔ICP升高的影響在成年兔引導(dǎo)冷凍損傷以獲得由組織水腫引發(fā)的病態(tài)ICP。將一條8mm不銹鋼棒按預(yù)定的坐標(biāo)放在被深度麻醉的兔子的暴露的腦殼上，用液氮冷凍10分鐘。一天之后，將動(dòng)物重新麻醉，按大鼠試驗(yàn)同樣的方法連續(xù)地記錄ICP和血壓。15分鐘的穩(wěn)定期后，化合物1按2mg/kg/min，10分鐘藥程灌注；溶劑按2ml/分鐘，10分鐘藥程灌注(含10％ HP-β-CD，pH4臨床前配方)。
在化合物1灌注期間，血壓下降，而盡管ICP沒有立即降低，在用溶劑治療的動(dòng)物中觀察到的ICP升高趨于被對(duì)抗(圖4)。當(dāng)藥物灌注結(jié)束后，血壓返回到初始值并可以看到明顯的ICP降低，所述降低在整個(gè)記錄期間一直持續(xù)。
這些結(jié)果表明，所述化合物也能在非嚙齒類動(dòng)物中和在非閉合頭部損傷的病理狀況下降低ICP。
化合物1對(duì)非創(chuàng)傷動(dòng)物ICP的影響。
大鼠在麻醉的無創(chuàng)傷大鼠上測(cè)試了化合物2、化合物1及外消旋戊(化合物2和化合物1)對(duì)ICP、MABP和CPP的影響。給所述大鼠靜脈注射與創(chuàng)傷大鼠相同劑量的所述化合物(0.5mg/kg/min，10分鐘藥程，隨后0.1mg/kg/min，50分鐘藥程)。其結(jié)果與創(chuàng)傷動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果相比。
結(jié)論在創(chuàng)傷動(dòng)物、冷凍損傷動(dòng)物及非創(chuàng)傷動(dòng)物中獲得的結(jié)果表明，所述化合物在各種病癥中，甚至在正常狀況下都具有活性。它們的應(yīng)用范圍可能包括其中存在顱內(nèi)高壓的各種病癥。
權(quán)利要求
1.組胺受體拮抗劑在制備用于降低哺乳動(dòng)物顱內(nèi)壓(ICP)的藥物中的用途，所述組胺受體拮抗劑選自組胺H1-受體拮抗劑、組胺H2-受體拮抗劑和具有結(jié)合的H1/H2拮抗活性的組胺受體拮抗劑。
2.組胺受體拮抗劑在制備用于降低哺乳動(dòng)物顱內(nèi)壓(ICP)升高和/或繼發(fā)性局部缺血的藥物中的用途，所述組胺受體拮抗劑選自組胺H1-受體拮抗劑、組胺H2-受體拮抗劑和具有結(jié)合的H1/H2拮抗活性的組胺受體拮抗劑。
3.組胺受體拮抗劑在制備預(yù)防哺乳動(dòng)物顱內(nèi)壓(ICP)升高和/或繼發(fā)性局部缺血的藥物中的用途，所述組胺受體拮抗劑選自組胺H1-受體拮抗劑、組胺H2-受體拮抗劑和具有結(jié)合的H1/H2拮抗活性的組胺受體拮抗劑。
4.權(quán)利要求2-3任一項(xiàng)的用途，其特征為哺乳動(dòng)物顱內(nèi)壓(ICP)升高和/或繼發(fā)性局部缺血由創(chuàng)傷性和/或非創(chuàng)傷性腦損傷引起。
5.權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的用途，其特征為所述組胺受體拮抗劑通過靜脈施用。
6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的用途，其特征為組胺受體拮抗劑選自阿司咪唑、阿扎他定、氮斯汀、溴苯那敏、氯環(huán)力嗪、氯苯那敏、氯馬司汀、克立咪唑、賽庚啶、二甲茚定、苯海拉明、二苯拉林、羥嗪、酮替芬、氯雷他定、尼普拉嗪、奧沙米特、非尼拉敏、異丙嗪、美吡拉敏、雷尼替丁、力坦色林、硫替丁、佐蘭替丁、它們的衍生物及上述任何兩種或多種藥物的混合物。
7.權(quán)利要求6的用途，其特征為組胺受體拮抗劑選自氯環(huán)力嗪、氯苯那敏、苯海拉明、酮替芬、氯雷他定、雷尼替丁、硫替丁、佐蘭替丁、它們的衍生物及上述任何兩種或多種藥物的混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新型組胺受體拮抗劑及組胺受體拮抗劑在降低顱內(nèi)壓(ICP)中的用途，特別在預(yù)防和治療特別因腦損傷造成、更特別因創(chuàng)傷性腦損傷(TBI)和非創(chuàng)傷性腦損傷造成的顱內(nèi)壓升高和/或繼發(fā)性局部缺血中的用途。所述新型化合物包括通式(I)的化合物、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物。特別是，優(yōu)選的化合物為3－[2－[4－(11，12－二氫－6H－苯并咪唑并[2，1－b][3]苯并氮雜－6－基)－2－(苯甲基)－1－哌啶基]乙基]－2，10－二甲基嘧啶并[1，2－a]苯并咪唑－4(10H)－酮、其藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽、其立體異構(gòu)體和其氮氧化物；還要求保護(hù)市售H1和H2組胺受體拮抗劑在降低顱內(nèi)壓(ICP)中的新用途。
文檔編號(hào)A61P1/04GK1895673SQ20061008414
公開日2007年1月17日 申請(qǐng)日期2002年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月23日
發(fā)明者F·特格特梅爾, F·E·揚(yáng)森斯, J·E·萊奈茨, K·A·范羅塞姆, M·J·阿爾卡扎-瓦卡, P·馬丁內(nèi)斯-斯門尼斯, J·M·巴托洛梅-涅夫雷達(dá), A·戈麥斯-桑切斯, F·J·費(fèi)爾南德斯-格德亞, J·L·H·范雷姆普茨 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司