專(zhuān)利名稱：一種用于診斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明設(shè)計(jì)一種用于診斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
伴隨著老年社會(huì)的形成，各種老年病的發(fā)生率尤其是骨關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生率在急速增加。骨性關(guān)節(jié)炎在發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)是最常見(jiàn)的肌骨骼源性致殘因素，同時(shí)關(guān)節(jié)疾病引致并發(fā)癥從而導(dǎo)致的死亡在各種疾病中發(fā)生率最高。據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前在美國(guó)僅患有骨關(guān)節(jié)炎的患者有4000萬(wàn)之眾，預(yù)計(jì)到2020年將達(dá)到6000萬(wàn)。在中國(guó)，僅骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病率亦高達(dá)4％，而在城市退休人群中更高達(dá)49％。隨著人民群眾對(duì)生活質(zhì)量的要求日益增加，關(guān)節(jié)疾病的早期診斷、治療和防治。骨關(guān)節(jié)疾病的中晚期將引起關(guān)節(jié)疼痛，變形，活動(dòng)障礙，造成患者生活和精神上的巨大痛苦。因此，早期診斷，治療和預(yù)防關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生發(fā)展，防患于未然，是臨床醫(yī)學(xué)研究急需解決的重大課題之一。
關(guān)節(jié)疾病的發(fā)生發(fā)展比較隱匿，大部分關(guān)節(jié)疾病在診斷時(shí)已達(dá)中、晚期，錯(cuò)過(guò)了治療的最佳時(shí)間。而目前已有的檢查手段主要根據(jù)臨床癥狀、體檢、X線診斷、關(guān)節(jié)軟骨核磁檢查等。但是體檢、常規(guī)關(guān)節(jié)檢查、X線攝片等均無(wú)法檢測(cè)出關(guān)節(jié)早期病理變化，也無(wú)法判斷其預(yù)后狀況。隨著科技的發(fā)展，MR檢查在關(guān)節(jié)炎的早期診斷得到了廣泛應(yīng)用，然而MR檢查對(duì)早期關(guān)節(jié)軟骨病變所致的關(guān)節(jié)內(nèi)環(huán)境的變化并不如關(guān)節(jié)液檢查，其靈敏度遠(yuǎn)低于關(guān)節(jié)液的檢查，而且MR檢查價(jià)格昂貴，不能作為普查的技術(shù)手段。故如能發(fā)展出高靈敏度和高診斷特異度，且可早期快速檢測(cè)關(guān)節(jié)有關(guān)病理變化及其預(yù)后的關(guān)節(jié)液檢測(cè)技術(shù)，則不但在臨床診斷分析上有重要意義，而且還具有良好的普查意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于診斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液檢測(cè)方法，能夠?qū)σ伤圃缙诠切躁P(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液中的納米顆粒和微米顆粒進(jìn)行綜合性定性和定量檢測(cè)。
為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下一、用于關(guān)節(jié)液中納米顆粒的測(cè)定方法采用微注射器穿刺抽液法取得關(guān)節(jié)液，并采用統(tǒng)一的稀釋(0.9％NaCL 10mL)回抽法取得關(guān)節(jié)液。將所采集的關(guān)節(jié)液于4℃時(shí)以2000轉(zhuǎn)/分的速度離心，取離心管上層，對(duì)其中納米顆粒進(jìn)行測(cè)量和分析。首先，用5％的等滲葡萄糖水溶液稀釋離心管上層的關(guān)節(jié)液，其中關(guān)節(jié)液與5％葡萄糖的體積比為3∶20。首先將兩種液體按一定比例混合后制成均勻的溶液，靜置15分鐘，除去溶液中的氣泡，用準(zhǔn)彈性激光散射技術(shù)測(cè)量溶液中納米顆粒的粒度大小，測(cè)量溫度為37℃。其次用相分析電泳光散射技術(shù)測(cè)量納米顆粒的Zeta電位，測(cè)量溫度也為37℃。
二、用于關(guān)節(jié)液中微米顆粒的測(cè)定方法將上述關(guān)節(jié)液離心后的下層，對(duì)其中微米顆粒進(jìn)行測(cè)量和分析。先利用多維顯微成像技術(shù)對(duì)關(guān)節(jié)液中的微米顆粒進(jìn)行觀察和拍攝，再利用數(shù)字處理技術(shù)和圖像分析技術(shù)相結(jié)合，對(duì)所拍攝的微米顆粒的形態(tài)和大小參數(shù)進(jìn)行分析，包括接觸面積、周長(zhǎng)、長(zhǎng)軸、短軸、形狀歸化因子、伸長(zhǎng)率、緊密度、積分光密度、單位面積中微米顆粒的個(gè)數(shù)。接觸面積(Contact area)和周長(zhǎng)(Perimeter)是微米顆粒的二維度量，其值反映了微米顆粒的大小。長(zhǎng)軸(Major axislength)和短軸(Minor axis length)是關(guān)節(jié)液微米顆粒的一維度量，可反映微米顆粒的大小。形狀歸化因子(Roundness)反映微米顆粒的幾何形態(tài)，其值越接近于1表示微米顆粒越接近圓形，其值等于1表示微米顆粒為圓形。伸長(zhǎng)率(Elongation)也是反映微米顆粒幾何形態(tài)的一個(gè)重要參數(shù)，其數(shù)值大于或等于1，當(dāng)其數(shù)值等于1時(shí)，表示微米顆粒為圓形，當(dāng)其數(shù)值大于1時(shí)，表示微米顆粒為長(zhǎng)條形或棒形。此外還有反映微米顆粒其它特性的參數(shù)如緊密度(Compactness)，表示關(guān)節(jié)液微米顆粒的致密情況，其數(shù)值越大表示微米顆粒越致密，數(shù)值越小表示微米顆粒越疏松。積分光密度(Integrated density)表示微米顆粒的透光情況，其值越小表示光線越容易透過(guò)，其值越大表示光線越不容易透過(guò)。另外，還可通過(guò)計(jì)算單位面積(每一萬(wàn)平方微米)中微米顆粒的個(gè)數(shù)來(lái)反映關(guān)節(jié)液中微米顆粒數(shù)量的變化情況。
本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)是本發(fā)明利用多維顯微成像與圖像分析技術(shù)、準(zhǔn)彈性激光散射技術(shù)和相分析電泳光散射技術(shù)，測(cè)定關(guān)節(jié)液中的微米顆粒和納米顆粒的粒度大小和Zeta電位，具有檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、可靠、檢測(cè)費(fèi)用低、容易普及等優(yōu)點(diǎn)，是一種膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎臨床早期診斷和治療預(yù)后評(píng)估的方法，也可用于其它關(guān)節(jié)疾病的早期檢測(cè)于治療效果評(píng)價(jià)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明在獲得關(guān)節(jié)液中納米顆粒的粒度大小和Zeta電位分布、微米顆粒的粒度大小分布。將納米顆粒的粒度范圍分為平均粒徑小于200納米、大于300納米、介于200納米和300納米之間三組。將微米顆粒的粒度范圍分為小于10微米、大于100微米、介于10微米與100微米之間共三組。將納米顆粒的Zeta電位范圍分為小于15毫伏、大于20毫伏、介于15毫伏和20毫伏之間。如果按照上述方法抽得某病人的關(guān)節(jié)液，并按上述方法進(jìn)行處理和測(cè)定，得到關(guān)節(jié)液中納米顆粒的粒度分布在小于200納米組所占的百分比高于其它兩組，納米顆粒的Zeta電位分布在小于15毫伏組所占的百分比高于其它兩組，并且微米顆粒的粒度分布在小于10微米組所占的百分比也高于其它兩組，可初步判斷此關(guān)節(jié)可能患有早期骨性關(guān)節(jié)炎。
權(quán)利要求
1.一種用于診斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液檢測(cè)方法，其特征在于先把疑似關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液離心分離成兩層，分別對(duì)上層所含的納米顆粒和下層所含的微米顆粒進(jìn)行檢測(cè)，并結(jié)合所有關(guān)節(jié)液納米和微米顆粒的檢測(cè)結(jié)果綜合判斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的可能性。
2.權(quán)利要求1中含納米顆粒的上層溶液用5％的等滲葡萄糖水溶液稀釋?zhuān)渲猩蠈尤芤号c5％葡萄糖的體積比為3∶20。然后分別用準(zhǔn)彈性激光散射技術(shù)和相分析電泳光散射技術(shù)測(cè)量其中納米顆粒的粒度大小和Zeta電位，測(cè)量溫度均為37℃。
3.權(quán)利要求1中含微米顆粒的下層，直接利用多維顯微成像技術(shù)對(duì)其中的微米顆粒進(jìn)行觀察和拍攝，再利用數(shù)字處理技術(shù)和圖像分析技術(shù)相結(jié)合，對(duì)所拍攝的微米顆粒的形態(tài)和大小參數(shù)進(jìn)行分析，包括接觸面積、周長(zhǎng)、長(zhǎng)軸、短軸、形狀歸化因子、伸長(zhǎng)率、緊密度、積分光密度、單位面積中微米顆粒的個(gè)數(shù)。
4.按照權(quán)利要求2和3中的納米顆粒的粒度和Zeta電位分布，結(jié)合權(quán)利要求3中的微米顆粒的粒度分布情況，判斷所檢查關(guān)節(jié)液是否屬于早期骨性關(guān)節(jié)炎。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用于診斷早期骨性關(guān)節(jié)炎的關(guān)節(jié)液檢測(cè)方法。先把疑似關(guān)節(jié)炎患者的關(guān)節(jié)液離心分離成兩層，對(duì)上層溶液用等滲葡萄糖水溶液稀釋?zhuān)謩e用準(zhǔn)彈性激光散射技術(shù)和相分析電泳光散射技術(shù)測(cè)量其中納米顆粒的粒度大小和Zeta電位，對(duì)離心下層，直接利用多維顯微成像技術(shù)、數(shù)字處理技術(shù)和圖像分析技術(shù)，測(cè)定微米顆粒的形態(tài)和大小參數(shù)進(jìn)行分析，包括接觸面積、周長(zhǎng)、長(zhǎng)軸、短軸、形狀歸化因子、伸長(zhǎng)率、緊密度、積分光密度、單位面積中微米顆粒的個(gè)數(shù)。按照納米顆粒的粒度和Zeta電位分布，結(jié)合微米顆粒的粒度分布情況，綜合判斷所檢查關(guān)節(jié)液是否屬于早期骨性關(guān)節(jié)炎。本發(fā)明也可用于其它關(guān)節(jié)疾病的早期檢測(cè)于治療效果評(píng)價(jià)。
文檔編號(hào)A61B5/00GK101021523SQ200610033628
公開(kāi)日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2006年2月16日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月16日
發(fā)明者查振剛, 姚成燦, 屠美, 姚平, 吳昊, 黃耀熊 申請(qǐng)人:暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院