專利名稱：：Fgfr結合肽的制作方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及新的肽化合物，其來自神經細胞黏著分子(neuralcelladhesionmolecule，NCAM)的纖連蛋白III型構件(module)1(F3，1)的序列，其能結合成纖維細胞生長因子受體(FGFR)。本發(fā)明還涉及包括該化合物的藥物組合物和它們用于治療和/或預防FGFR和/或NCAM在病理和疾病恢復中起作用的不同病理狀況的用途。
背景技術：
：腦可塑性(brainplasticity)和控制可塑性的機制，對學習和記憶，以及腦損傷后的功能恢復有主要意義。人們清楚神經營養(yǎng)因子是在成人中樞神經系統(tǒng)(CNS)中持續(xù)調控腦可塑性的分子類群之一，但細胞黏著分子(CAMs)在例如長時程增強效應、神經元的保存以及再生中扮演著較少為人理解卻同樣深刻的角色。但諷刺的是，在例如阿爾茨海默病(Alzheimer’sdisease)和多發(fā)性硬化等病癥中，CAMs也可以重新組織(reorganise)細胞外空間，并導致促使腦病理發(fā)生的紊亂。候選分子包括淀粉狀蛋白前體蛋白(amyloidprecursorprotein)，其與經典的CAM和B-淀粉狀蛋白有許多共同的性質，可以偽裝成偽(pseudo)CAM。β-淀粉狀蛋白在阿爾茨海默病中充當老年斑形成的病灶(nidus)，并像CAM一樣，為神經營養(yǎng)因子和其他CAMs的組織提供環(huán)境。炎癥應答在該環(huán)境中發(fā)展，且可能引發(fā)由小膠質、補體和其他因子介導的永久性神經元損害的惡性循環(huán)(Cotman等人(1998)ProgNeurobiol.55659-69)。在早期發(fā)育中和成體中，免疫球蛋白超家族的神經細胞黏著分子(CAMs)在關鍵部位集結(nucleate)并維持細胞群。除了它們的黏著性之外，CAMs的同源(homophylic)和異源(heterophylic)相互作用可能影響細胞內信號傳導。因此它們影響發(fā)育事件包括細胞遷移、擴增和分化的能力，可能是它們的黏著和信號傳導性質二者的結果。神經細胞黏著分子，NCAM，是第一種被發(fā)現的神經CAM。自從被發(fā)現后NCAM已經受到深入的研究，現在它的性質已經得到了充分的描述(Ronn等人，(2000)IntJDevNeurosci18193-9)。NCAM屬于免疫球蛋白(Ig)超家族。它的胞外部分由5個Ig樣和2個纖連蛋白III型(F3)構件(module)構成。NCAM協助細胞-細胞和細胞-基質的相互作用。NCAM結合多種細胞外基質組分例如肝素/硫酸乙酰肝素、硫酸軟骨素蛋白聚糖，和不同種類的膠原。細胞-細胞相互作用大多被NCAM同源作用所協助。已經證明不同的NCAM分子執(zhí)行不同的功能。因此，目前認為NCAM同源作用依賴于最先的3個Ig構件。肝素結合序列定位于Ig2構件。NCAM還結合神經細胞黏著分子L1。該相互作用被認為發(fā)生在NCAM的第4個Ig構件和L1上表達的寡聚甘露糖苷部分之間。NCAM的兩個近膜(membrane-proximal)F3構件已被證明參與了成纖維細胞生長因子受體(FGFR)結合。數個研究組已經積累了大量證據，顯示作為NCAM介導的軸突長出(outgrowth)的基礎的細胞內信號傳導級聯類似于由FGFR刺激而活化的信號轉導級聯(Povlsen等人，(2003)NeurochernRes1127-41)。成纖維細胞生長因子受體(FGFRs)是四種密切相關的受體蛋白酪氨酸激酶的家族，該激酶在胞外由3個Ig樣構件組成，在胞內由斷裂的(split)酪氨酸激酶構件組成(Powers等人(2000)EndorRelatCancer7165-97)。已知所述受體是形態(tài)發(fā)生、發(fā)育、血管發(fā)生和創(chuàng)傷愈合的關鍵調控者。FGFR的活化和信號傳導依賴于該受體的二聚體化(dimerization)，這是由其配體-成纖維細胞生長因子的高親和結合所誘導的，而且還需要細胞表面的肝素或硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的參與。成纖維細胞生長因子在周圍和中樞神經系統(tǒng)的功能行使中起著突出的作用(Jungnickel等人(2004)MolCellNeurosci.2521-9；Reuss和vonBohlenundHalbach(2003)，CellTissueRes.313139-57)。NCAM被看作是一類新的假設的FGFR替代配體的一個成員，而且最近獲得了NCAM與受體的直接相互作用的證據(Kiselyov等人(2003)Structure(Camb)11691-701；WO04/056865)。被鑒定的直接參與和FGFR相互作用的NCAM片段具有序列EVYVVAENQQGKSKA，并且源自NCAM的第2個纖連蛋白III型(F3，2)構件。近來，還有人提出NCAM的其他片段也可能參與NCAM-FGFR相互作用。這類肽片段是源自NCAM的第1個纖連蛋白III型(F3，1)構件。由此，WO01/96364公開了13個氨基酸殘基的序列SIDRVEPYSSTAQ，其中基序(motif)DRVE據稱對刺激神經突長出是必需的，而基序PYSSTA負責該序列刺激細胞生存的能力。包含后者基序的序列和其肽片段被提出用來治療與創(chuàng)傷或疾病所致的神經細胞損失相關的疾病和作為刺激神經細胞分化和存活的藥物。最近，另一專利申請WO05/014623描述了NCAMF31的14氨基酸殘基的片段，其具有序列TIMGLKPETRYAVR。該序列已被證明是神經突長出的刺激物。上述兩個申請都沒有顯示所述序列與FGFR的直接結合和受體的活化。發(fā)明概述本發(fā)明的作者在此顯示，WO01/96364的13氨基酸殘基的序列被延伸為17氨基酸殘基，其中4個附加的氨基酸殘基被添加到該序列的C末端后，這樣的序列不再具有刺激神經突長出或神經元細胞存活的能力，但是，令人驚訝的是，這樣的17個氨基酸殘基的序列能夠刺激學習和記憶。另外，該17個氨基酸殘基的序列還可以直接結合和活化FGFR。本發(fā)明的作者將后者序列的這些新特征與附加的C末端4個氨基酸殘基的存在聯系起來，這四個氨基酸殘基包含了氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-X0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp的關鍵(essential)氨基酸殘基，上述基序中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基。本發(fā)明的作者在此聲稱，該基序對于肽序列刺激與學習和記憶相關的神經可塑性的能力是必需的。據此，本發(fā)明的第一個方面涉及11到18個氨基酸殘基的連續(xù)(contigous)的肽片段，包含式(I)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基。包含所述基序的序列可以用來制造刺激學習和記憶的藥物。式(I)的基序對于肽序列直接結合FGFR并活化該受體也是重要的，但是，令人驚奇的是，本發(fā)明的作者發(fā)現，該基序中的疏水性殘基的選擇決定了包含該基序的肽序列所具有的諸生物活性。因此，在該基序的任何xp位置上脯氨酸(P)殘基的存在將該序列的能力限制為僅有刺激學習和記憶的能力，而xp位置上的其他任何疏水性氨基酸賦予該序列刺激學習和記憶的能力、刺激神經突長出的能力和刺激神經元細胞存活的能力。由此，本發(fā)明在另一個方面涉及包含11到18個氨基酸殘基的連續(xù)的肽序列，其包含式(II)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是除了P以外的任何疏水性氨基酸，x0是K，R或Y，且x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基。根據本發(fā)明，包含后者基序的肽序列能夠刺激神經突長出，刺激神經細胞存活，刺激與學習和記憶相關的神經可塑性，并能夠結合和活化FGFR。這樣的序列根據本發(fā)明可以有利地用于制造藥物來治療多種NCAM和/或FGFR在其中起主要作用的疾病。本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明的肽序列的藥物組合物和藥物。另外，本發(fā)明特別描述了包含施用根據本發(fā)明的肽序列和/或藥物組合物和/或藥物的步驟的治療方法。另外，本發(fā)明涉及抗體，其能夠識別和結合包含本文所公開的通式的氨基酸序列的表位，以及該抗體用于調節(jié)NCAM和/或FGFR介導的生物活性的用途。附圖描述圖1A顯示了CDL(SEQIDNO1)、ABL(SEQIDNO2)和EFL(SEQIDNO5)肽對培養(yǎng)中的大鼠小腦顆粒神經元(cerebellargranularneurons，CGNs)的神經突長出的作用。CDL和EFL刺激CGN的神經突長出。B.EFL刺激的神經突長出被成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)抑制劑SU5402所抑制。四個獨立實驗的結果都表示為百分比±SEM，其中未處理的對照細胞設為100％。*P＜0.05，**P＜0.01，****P＜0.001，與對照比較。配對student’st檢驗。實驗如下進行用所述肽處理來自7日齡(7-old-day)大鼠的CGNs24小時。用4％多聚甲醛固定培養(yǎng)物，再用1％BSA封閉，然后先用兔抗大鼠GAP-43第一抗體，再用AlexaFluor488山羊抗兔第二抗體進行免疫染色。圖2A顯示了樹狀聚體(dendrimeric)形式的CDL(SEQIDNO1)(CDLd)和ABL(SEQIDNO2)(CDLd)肽對培養(yǎng)中的大鼠小腦顆粒神經元存活的作用。將該肽的作用與源自神經膠質的神經營養(yǎng)因子(GDNF)和樹狀聚體形式的C3肽(C3d)的作用相比較。B顯示EFL(SEQIDNO5)的樹狀聚體(dendrimer)(EFLd)對培養(yǎng)中的大鼠小腦顆粒神經元存活的作用。*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，與對照相比。配對student’st檢驗。圖3顯示了單體形式的CDL(SEQIDNO1)(A)(CDloop)和EFL(SEQIDNO5)(B)(EFloop)對于培養(yǎng)基中的低濃度KCl(5mM)和高濃度KCl(40mM)中的大鼠小腦顆粒神經元培養(yǎng)物中的胱天蛋白酶3(caspase-3)樣活性的作用。*P＜0.05，**P＜0.01，配對student’st檢驗。圖4顯示了具有“鏈-環(huán)-鏈”(strand-loop-strand)結構的NCAMFn-III，1構件的4種不同的片段與重組FGFR1的結合，其是通過表面等離子體共振(SPR)分析研究的。結合表示為與固定了FGFR1構件的傳感芯片的結合和與空白傳感芯片的結合(非特異性結合)之間的響應差異(responsedifference，Resp.Diff.)?？s寫AB-A鏈-環(huán)-B鏈(相應于SEQIDNO2的ABL肽)；CD-C鏈-環(huán)-D鏈(相應于SEQIDNO1的CDL肽)；EF-E鏈-環(huán)-F鏈(相應于SEQIDNO5的EFL肽)；BC-NCAM的F3，1構件的B鏈-環(huán)-C鏈；DE-NCAM的F3，1構件的D鏈-環(huán)-E鏈；FG-NCAM的F3，1構件的F鏈-環(huán)-G鏈。圖5顯示了ABL、CDL和EFL肽對FGFR-1的磷酸化的定量分析結果。至少4次獨立實驗的結果表示為FGFR1磷酸化百分率±SEM。實驗如下進行轉染了含C末端Strepll標簽的FGFR的TREX-293細胞用不同濃度的肽刺激30min。刺激后，活化的FGFR用抗磷酸酪氨酸(phosphtyrosine)的抗體免疫純化，然后用抗StrepII標簽的抗體進行western印跡來分析。用處理過的細胞所得的結果與用未處理的細胞(對照，設為100％)所得的結果比較，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001，配對student’st檢驗。圖6顯示了體內施用CDL(Cdl)和EFL肽對大鼠社交行為(socialbihavior)的作用(社交識別試驗(socialrecognitiontest))。A施用肽/載體1小時后，第一次遇見(T1)和第二次遇見(T2)時社交性探察行為(socialinvestigation)所用的時間。結果來自8-9只大鼠，表示為百分率±SEM。配對student’st檢驗(*P＜0.05且***P＜0.001)。B施用肽/載體24小時后，第一次遇見(T1)和第二次遇見(T2)時社交探察所用的時間。結果來自9只大鼠，表示為百分率±SEM。配對student’st檢驗(*P＜0.05)。發(fā)明詳述從發(fā)展治療多種疾病和病理狀況的有效藥物的角度看，能夠調節(jié)成纖維細胞生長因子受體(FGFR)和/或神經細胞黏著分子(NCAM)的功能的化合物具有最重要的意義。因此，本發(fā)明的目的是提供可以結合并由此活化FGFR的新化合物。1.肽序列本發(fā)明中對氨基酸殘基使用標準的單字母代碼和標準的三字母代碼。氨基酸的縮寫是根據IUPAC-IUB生物化學命名聯合委員會Eur.J.Biochem，1984，vol.184，pp9-37的推薦。在整個說明書和權利要求中三字母代碼或單字母代碼都被使用。未指明L或D型之處，應當理解為所述氨基酸具有天然的L型，參見Pure&Appl.Chem.Vol.(56(5)pp595-624(1984)，或D型，以使得所形成的肽由L型氨基酸，D型氨基酸，或L型和D型混合的序列所構成。在未指明之處應當理解，本發(fā)明的肽的C末端氨基酸作為游離的羧酸存在，其也可以指明為“-OH”。但是，本發(fā)明的化合物的C末端氨基酸可以是酰胺化的衍生物，其表示為“-NH2”。在未另外說明之處，多肽的N末端包含游離的氨基，其也可表示為“H-”。在未另外指明之處，氨基酸可以選自任何氨基酸，不管是否是天然的，例如α氨基酸.β氨基酸，和/或γ氨基酸。因此，該類群包含但不限于Ala，Val，Leu，Ile，Pro，Phe，Trp，Met，Gly，Ser，Thr，Cys，Tyr，Asn，Gln，Asp，Glu，Lys，Arg，HisAib，Nal，Sar，Orn，賴氨酸類似物，DAP，DAPA和4Hyp。同樣，根據本發(fā)明，可以對所述化合物/肽進行修飾，例如氨基酸的糖基化和/或乙?；?。堿性氨基酸殘基根據本發(fā)明由Arg，Lys和His氨基酸殘基代表，酸性氨基酸-由Glu和Asp氨基酸殘基代表，疏水性氨基酸殘基-由Leu，Ile，Val，Phe，Trp，Pro和Ala氨基酸殘基代表，極性不帶電氨基酸殘基-由Tyr，The，Ser，Gln和Asn氨基酸殘基代表。本發(fā)明在第一個方面中提供11到18個氨基酸殘基的肽序列，其包含式(I)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基?！叭魏问杷詺埢钡囊馑际菤埢x自A，I，L，P，V，F或W氨基酸的殘基。因此，在一個實施方案中，殘基xp可以獨立地選自任何疏水性殘基。在另一個實施方案中，殘基殘基xp可以獨立地選自A，P，V或W。術語“獨立地”在本文的語境中指沒有對任何指定的位置上的氨基酸殘基的選擇作任何特定的要求。另外，在另一實施方案中xp氨基酸殘基可以選自A，V或W，氨基酸基序優(yōu)選為K/R-V/A-D/E/N/Q-W-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A，其中x0是K，R或Y，且x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基。在另一實施方案中xp氨基酸殘基可以選自A，V或P，氨基酸基序優(yōu)選為K/R-V/A-D/E/N/Q-P-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A其中x0是K，R或Y，且x1，x2，x3獨立地為任何氨基酸殘基。根據本發(fā)明，上述基序中的殘基x1，x2，x3對于包含上述基序的肽序列的生物活性沒有顯著的重要性，因此該殘基可以獨立地選自任何氨基酸殘基。但是，在一些實施方案中，殘基A，G，L，I，S，T和E可能是優(yōu)選的。序列x1-x2-x3可以是由連續(xù)地互相連接的后者殘基所組成的任何序列，例如序列I-G-L，L-G-I，A-G-L，A-T-L，L-G-E，I-G-E，A-G-I，S-T-A或S-G-A中的任何序列。在一些實施方案中序列S-T-A和L-G-E是優(yōu)選的。因此，本發(fā)明的肽序列是11到18個氨基酸殘基的連續(xù)序列，包含像任何上述的基序那樣的基序。本發(fā)明涉及序列，其是分離的肽序列。在本文的語境中，這意味著肽序列作為單個化學實體存在，并且作為單個化學實體用于本文的目的。本發(fā)明并不涉及這樣的包含上述基序的肽序列它們天然或重組多肽的整合的部分，例如神經細胞黏著分子(NCAM)的多肽或片段的整合的部分。在一個實施方案中，肽序列可能具有11到14個氨基酸殘基的長度；在另一個實施方案中，該序列可能具有15到18個氨基酸殘基的長度。依賴于實施方案，例如11，12，13，14，15，16，17或18個氨基酸殘基的序列長度可能是優(yōu)選的。本發(fā)明將上面描述的結構特征，與肽序列的結合和活化FGFR、以及刺激學習和記憶、神經突長出和/或神經元細胞存活的能力聯系起來。本發(fā)明在本文中公開了能夠刺激記憶和學習的具體序列，即序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)，SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)和SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)。在一些實施方案中序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)可能是優(yōu)選的，而在另外的實施方案中序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)或序列SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)可能是優(yōu)選的。序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)，SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)和SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)全都能夠直接結合FGFR并刺激該受體，而且它們都能夠刺激學習和記憶。但是，序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)與序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)和SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)相比具有一些額外的生物活性，即它能夠刺激神經突長出和神經細胞存活，而序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)和序列SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)不具有這樣的能力。發(fā)明人在此鑒定了這樣的結構特征，其賦予序列結合和活化FGFR、刺激學習和記憶、刺激神經突長出和神經細胞存活的能力。該特征是能夠結合和活化FGFR、刺激學習和記憶、刺激神經突長出和神經細胞存活的肽序列包含式(II)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp，其中xp位置上的P(脯氨酸殘基)被排除在疏水性氨基酸殘基的選擇之外。因此，定義為如下式(II)的基序K/R-xp-D/E/N/Q-xP-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是除P以外的任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1-x2-x3獨立地為任何氨基酸殘基，是這樣的結構基序，它賦予含有該基序的序列以結合和活化FGFR、刺激學習和記憶、刺激神經突長出和神經細胞存活的能力。在一些實施方案中，這樣的序列可能具有位置x0上的殘基Y。但是，在這個位置上殘基K或R是優(yōu)選的。上面討論了殘基x1，x2和x3的不同的實施方案。位置x1，x2和x3的殘基的優(yōu)選的實施方案是殘基G，V，L或E，其中在位置x1上更優(yōu)選L或V，位置x2上更優(yōu)選G，位置x3上更優(yōu)選E。根據本發(fā)明，位置xp上殘基P的存在可能將包含上述基序的肽序列的能力限制為結合和活化FGFR和刺激學習和記憶的能力，例如序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)和SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)的能力。本發(fā)明涉及包含式(II)的基序的肽序列的片段、變體和同源物K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是除P以外的任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1-x2-x3獨立地為任何氨基酸殘基，其已詳述如上。在本文的語境中，本發(fā)明定義了i)片段，其是這樣的序列，該序列具有包含上述基序特別是SEQIDNO1的序列的長度的至少40％，更優(yōu)選至少50％，更優(yōu)選至少60％，更優(yōu)選至少70％，更優(yōu)選至少80％，更優(yōu)選至少90％，更優(yōu)選至少95％；ii)變體，其是與包含上述基序特別是SEQIDNO1的序列具有至少60％，更優(yōu)選至少70％，更優(yōu)選至少80％，更優(yōu)選至少90％，更優(yōu)選至少95％的同源性的氨基酸序列，或者其是這樣的氨基酸序列與包含上述基序特別是SEQIDNO1的序列相比，該氨基酸序列具有至少60％，更優(yōu)選至少70％，更優(yōu)選至少80％，更優(yōu)選至少90％，更優(yōu)選至少95％的正氨基酸匹配(positiveaminoacidmatches)?！罢被崞ヅ洹痹诒疚闹卸x為在被比較的兩個序列中具有相同位置的氨基酸殘基之間物理和/或化學性質的同一性或相似性。本發(fā)明的優(yōu)選的正氨基酸匹配為K對R，E對D，L對M，Q對E，I對V，I對L，A對S，Y對W，K對Q，S對T，N對S和Q對R。一個氨基酸序列和另一個氨基酸的同源性在本文中定義為在兩個被比較的(collated)序列中同樣的氨基酸的百分比。序列的同源性可以用熟知的算法例如BLOSUM30，BLOSUM40，BLOSUM45，BLOSUM50，BLOSUM55，BLOSUM60，BLOSUM62，BLOSUM65，BLOSUM70，BLOSUM75，BLOSUM80，BLOSUM85，或BLOSUM90來計算；3)同源物，其是這樣的氨基酸序列該序列與包含上述的基序特別是SEQIDNO1的序列具有少于60％但多于30％，如50-59％，例如55％，如40-49％，例如45％，如30-39％，例如35％的同源性。設想如上定義的片段、變體和同源物保持原來的序列的至少某些生物活性，例如刺激神經細胞分化、記憶和學習、神經細胞存活，和/或結合和活化FGFR的能力。本發(fā)明的優(yōu)選的同源物是這樣的同源物，其與SEQIDNO1的序列具有至少40％的同源性，如40-44％的同源性，更優(yōu)選至少45％的同源性，如45-49％的同源性，更優(yōu)選至少50％的同源性，如51-54％的同源性，更優(yōu)選至少55％的同源性，如56-59％的同源性。本發(fā)明的優(yōu)選的片段是這樣的片段，其由SEQIDNO1的序列的至少3個連續(xù)的氨基酸殘基組成，更優(yōu)選由4個氨基酸殘基，更優(yōu)選5個氨基酸殘基，更優(yōu)選6個氨基酸殘基，更優(yōu)選7個氨基酸殘基，更優(yōu)選8-11個氨基酸殘基組成。本發(fā)明的優(yōu)選的變體是這樣的肽序列，其與SEQIDNO1的序列具有至少70％的同源性，如71-74％的同源性，更優(yōu)選75％的同源性，如76-79％的同源性，更優(yōu)選至少80％的同源性，如81-84％的同源性，更優(yōu)選至少85％的同源性，如86-89％的同源性，更優(yōu)選至少90％的同源性，如91-94％的同源性，更優(yōu)選至少95％的同源性，如96-99％的同源性。根據本發(fā)明，如上所述的分離的肽序列可以制為化合物，化合物可以含有選自上述任一的單個氨基酸序列的單一拷貝，或者其可含有這樣的氨基酸序列的兩個或多個拷貝。這意味著本發(fā)明的化合物可以被制為肽序列的單體(單體化合物)，例如含有單個單獨肽序列，或者其可以被制為肽序列的多聚體(多聚體化合物)，即含有兩個或多個單獨的肽序列，其中所述單獨的肽序列可以體現為相同序列的兩個或多個拷貝，或兩個或更多不同的單獨肽序列。多聚體也可以包含全長序列和其一或多個片段的組合。在一個實施方案中，化合物可包含兩個氨基酸序列，這樣的化合物在本文中定義為二聚體(dimer)，在另一個實施方案中，化合物可以含有多于兩個氨基酸序列，例如3個，4個或更多的序列。本發(fā)明優(yōu)選地涉及含有2個或4個肽序列的化合物。但是含有3、5、6、7、8或更多序列的化合物也在本發(fā)明的范圍內。如上面所述的，多聚體化合物可以含有同樣的肽序列，或者所述序列可以是不同的。其中序列不同的化合物的例子可以是含有SEQIDNO1和SEQIDNO2的化合物，另一例子可以是含有SEQIDNO1和SEQIDNO3的化合物。根據本發(fā)明不同的實施方案，可以對本發(fā)明的序列作任意組合。所述序列可以通過鍵，例如肽鍵彼此連接，或通過接頭分子或集聚(grouping)彼此連接。肽序列通過接頭分子或集聚彼此連接的化合物是優(yōu)選的。在另一實施方案中，化合物可以含有序列的兩個或多個同樣的拷貝，例如選自SEQIDNO1，2或3的序列的兩個拷貝，其中所述兩個拷貝通過接頭集聚(linkergrouping)彼此連接。優(yōu)選序列通過接頭集聚而連接的化合物。這樣的接頭集聚的例如可以有非手性的二-，三-或四羧酸。在本發(fā)明的說明書中進一步詳述了合適的二-，三-或四羧酸、生產這樣的化合物的方法，和配體呈遞組裝(ligandpresentationassembly)(LPA)方法?？赡艿慕宇^的另一個例子可能是氨基酸賴氨酸。單獨的肽序列可以附著到核心分子例如賴氨酸上，從而形成單獨的肽序列的樹枝狀多聚體(樹狀聚體)。樹狀聚體的生產是本領域熟知的(PCT/US90/02039，Lu等人，(1991)MolImmunol.28623-630；Defoort等人，(1992)IntJPeptProtRes.40214-221；Drijfhoutetal.(1991)IntJPeptProtRes.3727-32)，而且目前樹狀聚體在研究和醫(yī)療用途有廣泛的應用。本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案提供樹狀聚體化合物，其包含附著于賴氨酸核心分子的4個不同的單獨氨基酸序列。同樣優(yōu)選的是，所述4個單獨的氨基酸序列中至少一個包含如上定義的通式的氨基酸序列。更優(yōu)選的是，樹狀聚體化合物的4個單獨的氨基酸序列各自單獨地包含選自上面討論的那些基序的氨基酸基序。本發(fā)明的多聚體化合物，如LPA-二-聚體或溶素(lysin)樹狀聚體，是本發(fā)明的優(yōu)選化合物。但是，取決于實施方案，含有兩個或多個單獨的本發(fā)明的序列的其他種類的多聚體化合物可以是優(yōu)選的。本發(fā)明的范圍中還有這樣的化合物其包含單獨的本發(fā)明的序列或其片段、變體或同源物的一個或多個拷貝，以及另一生物活性的實體，例如另一肽序列。這樣的化合物中，最優(yōu)選的是如下那些它們包含至少一個本發(fā)明的肽序列，以及能夠刺激成纖維細胞生長因子受體的肽序列，例如肽序列EVYVVAENQQGKSKA(SEQIDNO4)或肽序列TIMGLKPETRYAVR(SEQIDNO5)。因此，在一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明的多聚體化合物是包含單獨的肽序列的兩個同樣的拷貝的二聚體，所述肽序列包含本發(fā)明的基序。在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的多聚體化合物是包含單獨的肽序列的兩個同樣的拷貝的二聚體，所述肽序列包含本發(fā)明的基序。另外，在另一個優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的多聚體化合物是包含兩個不同肽序列的二聚體，所述肽序列包含本發(fā)明的基序。優(yōu)選的多聚體化合物還可能是包含包括本發(fā)明的基序的序列和選自TIMGLKPETRYAVR(SEQIDNO5)或EVYVVAENQQGKSKA(SEQIDNO4)的化合物。而且，本發(fā)明的優(yōu)選的多聚體化合物中還有這樣的多聚體化合物它是樹狀聚體，包含與3個賴氨酸殘基的骨架結構相連接的4個同樣拷貝的肽序列，其中該肽序列包含本發(fā)明的基序。多聚體化合物中的肽序列的方向可以是N到C，C到N，或混合的。術語“N到C方向”是指兩個預先確定的序列通過它們的N末端氨基酸殘基連接到接頭，例如(COOH)肽序列(NH2)-接頭-(NH2)肽序列(COOH)類型的化合物。術語“C到N方向”是指兩個預先確定的序列通過它們的N末端氨基酸殘基與接頭連接，例如(NH2)肽序列(COOH)-接頭-(COOH)肽序列(NH2)類型的化合物。術語“混合方向”指兩個預先確定的序列通過它們的C末端或N末端氨基酸殘基與接頭連接，例如一個肽序列通過其N末端氨基酸殘基而另一肽序列通過其C末端氨基酸殘基，例如下面的類型(NH2)肽序列(COOH)-接頭-(NH2)肽序列(COOH)的化合物。根據本發(fā)明，如上定義的肽序列和包含所述序列的化合物能夠結合并活化FGFR。2.生物活性由此，本發(fā)明的肽序列能夠結合和活化功能性的細胞表面受體，它是成纖維細胞生長因子受體(FGFR)家族的受體，包括成纖維細胞生長因子受體-1(FGFR-1)、成纖維細胞生長因子受體-2(FGFR-2)、成纖維細胞生長因子受體-3(FGFR-3)、成纖維細胞生長因子受體-4(FGFR-4)和成纖維細胞生長因子受體-5(FGFR-5)，優(yōu)選為FGFR-1。配體在胞外結合受體，導致受體的活化，其意味著受體變得能夠活化至少一條細胞內信號轉導途徑，造成一種或其他的細胞應答。術語“結合”在本文中指本發(fā)明的肽序列與FGFR的直接相互作用。術語“相互作用”意味著肽序列與FGFR有暫時的或永久的直接接觸。用語“受體的活化”意味著受體變得能夠將“配體結合”的效應傳遞到細胞內總稱為“受體信號傳導”或“信號轉導”的生物反應的級聯，結果產生細胞的生理應答。因此，能夠結合和活化細胞受體的本發(fā)明的肽序列就可以模仿天然受體配體的作用，而且，在本文的語境中，它們應理解為受體配體，特別是FGFR配體的模擬物(mimics)。已知的是，受體可能具有數種不同的配體，這些配體與受體的結合活化不同的信號轉導途徑，結果產生不同的細胞應答。本發(fā)明優(yōu)選地涉及FGFR-1相關的信號轉導途徑。在本文中FGFR-1的活化由FGFR-1酪氨酸磷酸化的程度來定義，根據本發(fā)明，該程度由于本發(fā)明的序列的結合而增加。在本文中，FGFR-1相關的信號轉導途徑的活化定義為參與FGFR-1相關信號轉導途徑的一種或多種細胞內蛋白質的活化分子，例如蛋白質STAT1、JNK、PLCγ、ERK、STATS、PI3K、PKC、FRS2和/或GRB2的活化分子的存在。在本文中，參與FGFR-1相關信號轉導途徑的一種或多種細胞內蛋白質的分子的活化狀態(tài)定義為所述分子的磷酸化程度，該程度由于本發(fā)明的序列結合FGFR而增加或減少。磷酸化程度估計為比對照值高/低至少20％，如至少20-200％，例如至少50-200％。對照值估計為細胞環(huán)境中不存在能夠結合和活化FGFR的化合物時，目標蛋白質的磷酸化程度。涉及依賴FGFR-1信號傳導的細胞應答時，本發(fā)明特別地涉及選自但不限于下列的細胞應答1)細胞分化的誘導，例如神經元細胞、干細胞或癌細胞的分化，神經再生，神經突長出和分枝(branching)，細胞擴增的抑制；2)細胞存活的增加，例如由于身體創(chuàng)傷性損傷(bodytraumaticdamage)或疾病的神經元細胞存活，抑制凋亡；3)細胞可塑性的增加，例如形態(tài)可塑性，例如與記憶和學習相關的神經細胞可塑性。本發(fā)明的肽序列可以源自神經細胞黏著分子(NCAM)，例如源自GenBank數據庫中以Swiss-Prot登錄號P13591，P13592，P13596或P13595標識的NCAM多肽。這樣的肽序列的例子可以為序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)或序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)。這些肽序列是NCAM多肽的組成序列，當作為分離的肽序列時，根據本發(fā)明，它們能夠模擬與FGFR功能相關的NCAM活性，例如刺激NCAM-FGFR依賴的神經細胞分化、存活和可塑性。但是，本發(fā)明并不將本發(fā)明的肽序列的能力限定為模擬NCAM的功能。最近，已經描述了一類新的低親和度FGFR配體，其能夠以與NCAM結合相近的親和度，以與NCAM相同的結合位點結合到受體分子上(WO04/056865)。根據本發(fā)明，本文中所描述的NCAM的肽序列與WO04/056865中所述NCAM的肽序列代表NCAM的FGFR結合位點的不同部分。通過該結合位點，NCAM與FGFR上的結合位點相互作用，該FGFR上的結合位點與WO04/056865所述的低親和度FGFR配體是共有的。因此，本發(fā)明的肽序列可能可以模仿來自后者的FGFR配體組的低親和度配體與FGFR的結合，從而模仿所述配體的生物活性。因此，本發(fā)明的范圍包括下列與FGFR功能相關的蛋白質的任何生物活性神經細胞黏著分子L1(Swiss-Prot登錄號Q9QYQ7，Q9QY38，P11627，Q05695或P32004)，-神經細胞黏著分子-2(NCAM-2)(Swiss-Prot登錄號P36335)-神經元-膠質細胞黏著分子(Ng-CAM)(Swiss-Prot登錄號Q03696或Q90933)，-神經細胞黏著分子CALL(Swiss-Prot登錄號O00533)，-神經膠質蛋白(Swiss-Prot登錄號P91767或P20241)，-Nr-CAM(HBRAVO，NRCAM，NR-CAM12)(Swiss-Prot登錄號Q92823，O15179或Q9QVN3)，-軸突蛋白-1/TAG-1(Swiss-Prot登錄號Q02246，P22063或P28685)，-軸突相關細胞黏著分子(AxCAM)(Swiss-Prot登錄號Q8TC35或NP_031544.1)，-髓鞘相關糖蛋白(MAG)(Swiss-Prot登錄號P20917)，-神經細胞黏著分子BIG-1(Swiss-Prot登錄號Q62682)，-神經細胞黏著分子BIG-2(Swiss-Prot登錄號Q62845)，-成束蛋白(FAS-2)(Swiss-Prot登錄號P22648)，-神經細胞黏著分子HNB-3/NB-3(Swiss-Prot登錄號Q9UQ52，P97528或Q9JMB8)-神經細胞黏著分子HNB-2/NB-2(Swiss-Prot登錄號O94779，P07409或P97527)，-鈣黏著蛋白(Swiss-Prot登錄號Q9VW71)，-連接黏附分子-1(JAM-1)(Swiss-Prot登錄號Q9JKD5或O88792)，-神經細胞黏附F3/F11(接觸蛋白)(Swiss-Prot登錄號Q63198，P1260，Q12860，Q28106，P14781或O93250)，-神經束蛋白(Swiss-Prot登錄號Q90924，Q91Z60或042414)，-B淋巴細胞黏附分子CD22(Swiss-Prot登錄號Q9R094或P20273)，-Neogenin(NEO1)(Swiss-Prot登錄號Q92859，P97603，Q90610或P97798)，-細胞間細胞黏附分子-5(ICAM-5/telencephalin)(Swiss-Prot登錄號Q8TAM9，Q60625)，-結合半乳糖的凝集素-12(半乳凝素-12)(Swiss-Prot登錄號Q91VD1，Q9JKX2或Q9NZ03)，-結合半乳糖的凝集素-4(半乳凝素-4)(Swiss-Prot登錄號Q8K419；P38552)，-成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)(Swiss-Prot登錄號Q9QZM7，Q99AVV7，Q9UD50或Q63827)，-成纖維細胞生長因子受體2(FGFR2)(Swiss-Prot登錄號Q96KM2，P21802或Q63241)，-成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)(Swiss-Prot登錄號Q95M13，AF487554或Q99052)，-成纖維細胞生長因子受體4(FGFR4)(Swiss-Prot登錄號Q91742)，-神經營養(yǎng)蛋白酪氨酸激酶2型(NTRKT-2)(Swiss-Prot登錄號Q8WXJ5)，-白細胞抗原相關的蛋白質-酪氨酸磷酸酶(LAR-PTPRF)(Swiss-Prot登錄號Q9EQ17，Q64605，Q64604，Q9QW67，Q9VIS8或P10586)，-Nephrin(Swiss-Prot登錄號Q925S5，Q9JIX2，Q9ET59，Q9R044，或Q9QZS7，Q06500)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體S型(PTPRS)(Swiss-Prot登錄號Q64699，Q13332或O75870)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體κ型(R-PTP-kappa)(Swiss-Prot登錄號Q15262)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體D型(PTPRD)(Swiss-Prot登錄號Q8WX65，Q9IAJ1，P23468或Q64487)，-肝配蛋白(Ephrin)A型受體8(EPHA8/酪氨酸-蛋白質激酶受體EEK)(Swiss-Prot登錄號009127或P29322)，-肝配蛋白A型受體3(EPHA8/酪氨酸-蛋白質激酶受體ETK-1/CEK4)(Swiss-Prot登錄號P29318)，-肝配蛋白A型受體2(Swiss-Prot登錄號Q8N3Z2)-胰島素受體(IR)(Swiss-Prot登錄號Q9PWN6)-胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1)(Swiss-Prot登錄號Q9QVW4，P08069，P24062，Q60751，P15127或P15208)-胰島素相關受體(IRR)(Swiss-Prot登錄號P14616)，-酪氨酸-蛋白質激酶受體Tie-1(Swiss-Prot登錄號06805，P35590或Q06806)，-Roundabout受體-1(robo-1)(Swiss-Prot登錄號O44924，AF041082或Q9Y6N7)，-神經元煙堿性乙酰膽堿受體α3亞基(CHRNA3)(Swiss-Prot登錄號Q8VHH6，P04757，Q8R4G9或P32297)-神經元煙堿性乙酰膽堿受體α6亞基(Swiss-Prot登錄號Q15825或Q9R0W9)-血小板源性生長因子受體β(PDGFRB)(Swiss-Prot登錄號Q8R406或Q05030)，-白介素-6受體(IL-6R)(Swiss-Prot登錄號Q00560)，-白介素-23受體(IL-23R)(Swiss-Prot登錄號AF461422)，-白介素-3，白介素-5和粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GmCSF)的β-共通細胞因子受體(Beta-commoncytokinereceptor)(Swiss-Prot登錄號P32927)-細胞因子受體樣分子3(CRLF1)(Swiss-Prot登錄號Q9JM58)，-第I類細胞因子受體(ZCYTOR5)(Swiss-Prot登錄號O9UHH5)-Netrin-1受體DCC(Swiss-Prot登錄號P43146)，-白細胞Fc受體樣蛋白(IFGP2)(Swiss-Prot登錄號Q96PJ6或Q96KM2)，-巨噬細胞清除劑受體2(MSR2)(Swiss-Prot登錄號Q91YK7)，-粒細胞集落刺激因子受體(G-CSF-R)(Swiss-Prot登錄號Q99062)，-串珠蛋白聚糖(perlecan)(Swiss-Prot登錄號P98160)，-ADAM-8(Swiss-Prot登錄號Q05910)，-ADAM-19(Swiss-Prot登錄號Q9H013或O35674)，-ADAM-8(Swiss-Prot登錄號P78325)，-ADAM-12(Swiss-Prot登錄號O43184或Q61824)，-ADAM-28(Swiss-Prot登錄號Q9JLN6，Q61824，Q9XSL6或Q9UKQ2)，-ADAM-33前體(Swiss-Prot登錄號Q8R533或Q923W9)，-ADAM-9(Swiss-Prot登錄號Q13433或Q61072)，-ADAM-7(Swiss-Prot登錄號Q9H2U9，O35227或Q63180)，-ADAM-1A受精蛋白α(Swiss-Prot登錄號Q8R533)，-ADAM-15(Swiss-Prot登錄號Q9QYV0，O88839或Q13444)，-含金屬蛋白酶-desintegrin域的蛋白(TECAM)(Swiss-Prot登錄號AF163291)，-金屬蛋白酶1(Swiss-Prot登錄號O95204或Q9BS16)，-膠原蛋白VII型(Swiss-Prot登錄號Q63870)，-纖連蛋白(Swiss-Prot登錄號Q95KV4，Q95KV5，P07589，Q28377，U42594，O95609或P11276)，-生腱蛋白(Tenascin)-R(Swiss-Prot登錄號Q15568，O00531，Q90995或P10039)，-細胞因子樣因子-1(CLF-1)(Swiss-Prot登錄號O75462)兩分子間的任何相互作用都可以用相互作用的親和度來描述，相互作用的親和性是指兩個分子之間的吸引的強度。相互作用的親和度通常表示為解離平衡常數Kd的值。Kd反映兩個分子之間解離速率和結合速率的比，因此是兩個分子之間結合強度的量度。較低的Kd值反映較強的結合。上述FGFR配體具有親和度相對較低的FGFR結合。本發(fā)明的低親和度相互作用的特征是Kd值為10-3到10-10M，例如10-4到10-8M。因此，本發(fā)明涉及肽序列和FGFR之間的相互作用的親和度，其為10-3到10-10M，優(yōu)選10-4到10-8M。本發(fā)明在不同的實施方案中可以涉及本發(fā)明的肽序列的不同生物活性。因此在一個實施方案中，本發(fā)明可能涉及肽序列刺激與學習和記憶相關的神經可塑性的能力。根據本發(fā)明，這樣的肽序列可以選自本文描述的任何序列。優(yōu)選的序列可以是序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)，或序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)。在另一個實施方案中本發(fā)明可以涉及肽序列刺激神經元分化，例如神經前體細胞的分化或神經元分化，包括所述過程的神經突長出和/或分枝的能力。根據本發(fā)明，該活性與包含基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp的肽序列相關聯，其中xp是除了P以外的任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1-x2-x3相互獨立地為任何氨基酸殘基，因此，這樣的實施方案的優(yōu)選序列可以是序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)。包含上述基序的肽序列也能夠構刺激細胞存活，優(yōu)選神經元細胞存活，因此本發(fā)明的一些優(yōu)選實施方案可涉及肽序列刺激細胞，優(yōu)選神經元細胞存活的能力。這樣的實施方案的優(yōu)選序列也可以是序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)。當本發(fā)明涉及具有選自i)刺激學習和記憶，ii)刺激神經細胞存活，iii)刺激神經細胞分化的兩種或更多的生物活性時，也可以優(yōu)選包含上述基序的序列。這樣的實施方案的優(yōu)選序列也是序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)。3.肽片段的生產本發(fā)明的肽可以通過任何常規(guī)合成方法、重組DNA技術、肽序列所來源的全長蛋白的酶切割，或這些方法的組合來制備。重組制備因此，在一個實施方案中，本發(fā)明的肽是使用重組DNA技術生產的。編碼肽或該肽所來源的相應全長蛋白的DNA，可以用確立的標準方法，例如Beaucage和Caruthers，1981，TetrahedronLett.221859-1869所述的亞磷酰胺(phosphoamidine)法或Matthes等人，1984，EMBOJ.3801-805所述的方法，通過合成制備。根據亞磷酰胺法，寡核苷酸在例如自動化DNA合成儀中合成，純化，退火，連接并克隆到合適的載體中。編碼肽的DNA序列還可以通過將編碼肽來源的相應全長蛋白的DNA片段化來制備，使用DNAaseI，按照標準操作規(guī)程(Sambrook等人，MolecularcloningALaboratorymanual.2rded.，CSHLPress，ColdSpringHarbor，NY，1989)進行?；蛘撸幋a全長蛋白的DNA序列可以使用特異性的限制性內切核酸酶來片段化。DNA片段進一步使用Sambrook等人，MolecularcloningALaboratorymanual.第二版，CSHLPress，ColdSpringHarbor，NY，1989中描述的標準程序來純化。編碼全長蛋白的DNA序列還可以是基因組或cDNA來源的，例如這樣獲得制備基因組或cDNA文庫，并按照標準技術(參考Sambrook等人，MolecularCloningALaboratoryManual，2ndEd.，ColdSpringHarbor，1989))使用合成的寡核苷酸探針進行雜交，來篩選編碼所述全長蛋白的全部或部分的DNA序列。然后，將DNA序列插入重組表達載體，該載體可以是任何能夠方便地接受重組DNA操作的載體。載體的選擇經常取決于其要導入的宿主細胞。因此，載體可以是自主復制的載體，即作為染色體外的實體存在，其復制不依賴于染色體復制的載體，例如質粒?；蛘?，所述載體也可以是這樣的載體當它被導入宿主細胞后，整合到宿主細胞基因組中，并與其整合進入的染色體共同復制。在載體中，編碼肽或全長蛋白的DNA序列應當與合適的啟動子序列可操作地連接。啟動子可以是任何DNA序列，其在所選的宿主細胞中顯示轉錄活性，并可來源于編碼宿主細胞的內源或外源蛋白的基因。適于在哺乳動物細胞中指導編碼DNA序列的轉錄的啟動子的例子有SV40啟動子(Subramani等人，1981，Mol.CellBiol.1854-864)，MT-1(金屬硫蛋白基因)啟動子(Palmiter等人，1983，Science222809-814)，或腺病毒2主要晚期啟動子。適用于昆蟲細胞的啟動子有多角體蛋白啟動子(Vasuvedan等人，1992.FEBSLett.3117-11)。適用于酵母宿主細胞的啟動子包括來自酵母糖酵解基因(Hitzeman等人，1980，J.BiolChem.25512073-12080；Alber和Kawasaki，1982，J.Mol.Appl.Gen.1419-434)或醇脫氫酶基因(Young等人，1982，于GeneticEngineeringofMicroorganismsforChemicals中，Hollaender等人編，PlenumPress，NewYork)的啟動子，或TPI1(US4,599,311)或ADH2-4c(Russell等人，1983，Nature304652-654)啟動子。適用于絲狀真菌宿主細胞的啟動子有例如ADH3啟動子(McKnight等人，1985，EMBOJ.42093-2099)或tpiA啟動子。編碼DNA序列也可以可操作地連接到合適的終止子，例如人生長激素終止子(Palmiter等人，同前所引)或(對真菌宿主)TPI1(Alber和Kawasaki，同前所引)啟動子。載體還可以包含多聚腺苷酸化信號(例如來自SV40或腺病毒5的Elb區(qū))、轉錄增強子序列(例如SV40增強子)和翻譯增強序列(例如編碼腺病毒VARNA的那些)等元件。重組表達載體還可以包含使得該載體可以在所述宿主細胞中復制的DNA序列。這樣的序列的例子(當宿主細胞是哺乳動物細胞時)有SV40的復制起點。載體還可以包含可選擇標記，例如，其產物可補償宿主細胞的缺陷的基因，如編碼二氫葉酸還原酶(DHFR)的基因，或其產物可賦予針對藥物如新霉素、潮霉素或氨甲喋呤的抗性的基因。分別連接編碼所述肽或全長蛋白、啟動子和終止子，并將它們插入合適的含有復制必需信息的載體所用的方法，對本領域的技術人員是熟知的(參考，例如，Sambrook等人，同上所引)。為了獲得本發(fā)明的重組肽，編碼DNA序列可以有用地與第二肽編碼序列和蛋白酶切割位點編碼序列融合，產生編碼融合蛋白的DNA構建體，其中蛋白酶切割位點編碼序列位于HBP片段和第二肽編碼序列之間，插入重組表達載體，并在重組宿主細胞中表達。在一個實施方案中，所述第二肽選自，但不限于谷胱甘肽-S-還原酶，小牛胸腺素，細菌硫氧還蛋白或人泛素的天然或合成變體，或其肽。在另一實施方案中，包含蛋白酶切割位點的肽序列可以是Xa因子，切割位點氨基酸序列為IEGR；腸激酶，切割位點氨基酸序列為DDDDK；凝血酶，切割位點氨基酸序列為LVPR/GS；或水解無色桿菌(Acharombacterlyticus)，切割位點氨基酸序列為XKX。表達載體所導入的宿主細胞可以是任何能夠表達所述肽或全長蛋白的細胞，優(yōu)選為真核細胞，例如無脊椎動物(昆蟲)細胞或脊椎動物細胞，例如非洲爪蟾(Xenopuslaevis)卵母細胞或哺乳動物細胞，特別是昆蟲和哺乳動物細胞。合適的哺乳動物細胞系有HEK293(ATCCCRL-1573)，COS(ATCCCRL-1650)，BHK(ATCCCRL-1632，ATCCCCL-10)或CHO(ATCCCCL-61)細胞系。轉染哺乳動物細胞并在該細胞中表達導入的DNA序列的方法在例如Kaufman和Sharp，J.Mol.Biol.159，1982，pp.601-621；Southern和Berg，1982，J.Mol.Appl.Genet.1327-341；Loyter等人，1982，Proc.Natl.Acad.Sci.USA79422-426；Wigler等人，1978，Cell14725；Corsaro和Pearson，1981，于SomaticCenGenetics7，p.603；Graham和vanderEb，1973，Virol.52456；及Neumann等人，1982，EMBOJ.1841-845中有描述?；蛘?，真菌細胞(包括酵母細胞)可以用作宿主細胞。合適的酵母細胞的例子包括糖酵母屬(Saccharomyces)的菌種或裂殖酵母屬(Schizosaccharomyces)的菌種的細胞，特別是釀酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的菌株。其他真菌細胞的例子有絲狀真菌，例如曲霉屬(Aspergillus)菌種或脈孢菌屬(Neurospora)菌種，特別是米曲霉(Aspergillusoryzae)或黑曲霉(Aspergillusniger)的細胞。曲霉屬菌種用于表達蛋白的用途在例如EP238023中有記載。用于培養(yǎng)細胞的培養(yǎng)基可以是任何適于培養(yǎng)哺乳動物細胞的常規(guī)培養(yǎng)基，例如含血清或無血清的、含合適的補充物的培養(yǎng)基，或適于培養(yǎng)昆蟲、酵母或真菌細胞的培養(yǎng)基。合適的培養(yǎng)基可從供應商獲得或者根據公開的配方(例如在美國典型培養(yǎng)物保藏中心的目錄中)制備。然后，可以通過常規(guī)程序從培養(yǎng)基中回收由所述細胞重組表達的肽或全長蛋白質，所述常規(guī)程序包括通過離心或過濾從培養(yǎng)基中分離宿主細胞，用鹽例如硫酸銨沉淀上清或濾液中的蛋白質組分，及用多種色譜程序，例如HPLC、離子交換色譜，親和色譜等等來純化。合成制備合成生產肽的方法在本領域是熟知的。生產合成肽的詳細的描述以及實踐建議可以在SyntheticPeptidesAUser′sGuide(AdvancesinMolecularBiology)，GrantG.A編輯，OxfordUniversityPress，2002，或PharmaceuticalFormulationDevel-opmentofPeptidesandProteins，Frokjaer和Hovgaard編輯，TaylorandFrancis，1999中找到?？梢岳缬肍moc化學，使用Acm保護的半胱氨酸(cysteins)來合成肽。用反相HPLC純化后，可以進一步加工肽來獲得例如環(huán)狀的或C-或N-端修飾的同種型(isoforms)。環(huán)化和末端修飾的方法在本領域是熟知的，在上面引用的手冊中有詳述。在優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明的肽序列是合成生產的，具體地，是通過上面的手冊中所描述的序列協助的肽合成(SequenceAsistedPeptideSynthesis，SAPS)來生產的?；蛘?，單獨的本發(fā)明的序列的合成可以從商業(yè)生產商例如Sigma-Genosys(美國)訂購或購買。LPA方法生產單獨的肽序列的多聚體LPA方法是WO00/18791所公開的。該方法主要包括下列步驟(a)通過固相合成或片段偶聯(fragmentcoupling)提供包含所需序列的肽片段，肽片段附著于固相；(b)如果需要，在肽片段仍附著于固相時，對任何N末端氨基脫保護；(c)將具有脫保護的N末端基團的肽片段與非手性的二-，三-或四羧酸反應以提供具有環(huán)結構的構建體；及(d)將構建體從固相上切下，以提供包含具有游離C末端基團的肽片段的LPA。在上述方法中，步驟(d)之前可以進行下列步驟(c1)如果存在任何來源步驟(c)中所用的羧酸的N-保護基團，則將其脫保護，(c2)繼續(xù)固相合成或片段偶聯，以提供包含具有至少一個N-保護的N末端氨基酸基團和/或附著的化學部分的所需序列，(c3)如果存在任何N末端氨基，則將其脫保護(在步驟(d)之前或之后)。該方法提供了，除了其他的，呈現N到C方向的所需的本發(fā)明的序列的LPA(步驟(c))。同時還有C到N方向的序列(步驟(c2))。因此，為得到本發(fā)明的化合物，附著于固相的兩條肽鏈要通過非手性的二-，三-或四羧酸來組裝。將用于本方法的合適的非手性二-，三-或四羧酸具有通式X[(A)nCOOH][(B)mCOOH]其中n和m獨立地為1到20的整數，X為HN，A和B獨立地為取代或非取代的C1-10烷基，取代或非取代的C2-10烯基，取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分，或者A和B共同形成取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分。在另一實施方案中，將用于本方法的合適的非手性二-，三-或四羧酸具有通式X[(A)nCOOH][(B)mCOOH]其中n和m為0或1-20的整數，X為H2N(CR2)pCR，RHN(CR2)pCR，p為0或1到20的整數，其中各個R獨立地為H，取代或非取代的C1-10烷基，取代或非取代的C2-10烯基，取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分，或者A和B共同形成取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分。在另一實施方案中，將用于本方法的合適的非手性二-，三-或四羧酸具有通式X[(A)nCOOH][(B)mCOOH]其中n和m為0或1-20的整數，X為HO(CR2)pCR，HS(CR2)pCR，鹵素-(CR2)pCR，HOOC(CR2)pCR，ROOC(CR2)pCR，HCO(CR2)pCR，RCO(CR2)pCR，或[HOOC(A)n][HOOC(B)m]CR(CR2)pCR，其中p為0或1到20的整數，各個R獨立地為H，取代或非取代的C1-10烷基，取代或非取代的C2-10烯基，取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分，或者A和B共同形成取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分。在另一實施方案中，將用于本方法的合適的非手性二-，三-或四羧酸具有通式X[(A)nCOOH][(B)mCOOH]其中n和m為0或1-20的整數，X為H2N(CR2)p，RHN(CR2)p，HO(CR2)p，HS(CR2)p，鹵素-(CR2)p，HOOC(CR2)p，ROOC(CR2)p，HCO(CR2)p，RCO(CR2)p，或[HOOC(A)n][HOOC(B)m]CR(CR2)p，其中p為0或1到20的整數，各個R獨立地為H，取代或非取代的C1-10烷基，取代或非取代的C2-10烯基，取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分，或者A和B共同形成取代或非取代的環(huán)部分，取代或非取代的雜環(huán)部分，取代或非取代的芳香部分。術語C1-10烷基指具有1-10個碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、異丙基、丁基和叔丁基。術語C2-10烯基指具有2-10個碳原子的直鏈或支鏈烯基，例如乙烯基、丙烯基、異丙烯基、丁烯基和叔丁烯基。術語環(huán)部分指環(huán)己烷(cyclohexan)和環(huán)戊烷。術語芳香部分指苯基?！癆和B形成環(huán)、雜環(huán)或芳香部分”指環(huán)己烷、哌啶、苯和吡啶。通過與羧酸反應，得到了X(CO-序列)2-固相型的構建物，其中X如上定義。術語“序列”在本文的內容中意指天然存在或非天然存在的氨基酸，PNA序列，或肽模擬物(peptidomimetic)。“天然存在氨基酸”的意指自然界中發(fā)現的L-和D-型的20種氨基酸(acid)。非天然存在的氨基酸是例如經過修飾的天然存在的氨基酸。術語“序列”還意圖包括一種或多種這樣的序列。合適的肽模擬物的例子在MarshallG.R.，(1993)493547-3558中有記載。術語“化學部分”(chemicalmoieties)指提高LPA的溶解性或生物活性的實體，和將LPA導向其目標或標記物的實體。這些序列的優(yōu)選的實施方式如上所述?；鶊FX使得相同序列，或者不同序列和/或部分的直接或間接連續(xù)分步合成或片段偶聯成為可能。LPA中肽片段的方向(N到C或C到N)按照需要來確定。在一個實施方案中本發(fā)明特別描述了具有N到C方向的LPA，在另一個實施方案中本發(fā)明涉及序列同時呈現N到C和C到N的化合物，在另一實施方案中，所述序列具有C到N方向。當X包含暫時被保護的氨基官能(function)時，合成或偶聯可以在保護后直接進行。使用半當量(half-equivalent)的羧酸可以保證所有含羧基基團適當活化而提供環(huán)系統(tǒng)的有效生成(于步驟(c)，見上述)。在三或四羧酸的情況下，活化的羧基還可以進一步衍生化，衍生化使用二胺例如乙二胺，或合適地官能化用于進一步反應的胺，例如巰基、氧代基團(oxy)、橋氧基(oxo)或羧基。在二胺的情況下，肽合成或片段偶聯可以根據所需的序列或化學部分直接地連續(xù)進行。在優(yōu)選的實施方案中使用Fmoc保護方案，但根據合成或偶聯策略，任何氨基保護基團都可以使用。例如Boc保護基團策略。由于所述連續(xù)分步合成或片段偶聯是用一個氨基酸，或者，在雙官能化學部分例如賴氨酸的情況下，用兩個氨基酸進行的，令人驚奇地發(fā)現，與MAP合成所得的常規(guī)的四體賴氨酸樹狀聚體相比，可以獲得好得多的效果。另外，對于附著于固相的單鏈，可以使用最優(yōu)的肽合成程序或偶聯程序，可以在形成LPA之前驗證它們的均一性。從固相上切下和同時側鏈脫保護可以按照標準的肽合成程序(如上述)進行。由此可以得到具有最優(yōu)且明確的組成的終產物。如果希望或者需要，可以容易地使用標準色譜方法例如HPLC或凝膠過濾進行純化。用于提供環(huán)結構的優(yōu)選的二-、三-和四羧酸可以選自亞氨二乙酸，2-氨基丙二酸，3-氨基戊二酸，3-甲氨基戊二酸，3-氯戊二酸，3-甲氧基-羰基戊二酸，3-乙酰戊二酸，戊二酸，丙三羧酸，3，4-雙-羧甲基己二酸，4-(2-羧乙基)-庚二酸，(3，5-雙-羧甲基-苯基)-乙酸，3，4-雙-羧甲基-己二酸(adipicacid)，苯-1，2，4，5-四羧酸，4-(3-羧基-烯丙基氨基)-丁-2-烯酸，4，4-亞氨基-二苯甲酸，1，4-二氫吡啶-3，5-二羧酸，5-氨基間苯二酸，2-氯丙二酸，3-羥基戊二酸，及苯-1，3，5-三羧酸。片段偶聯(片段偶聯或片段縮合)可以根據標準程序，如按照PeptideSynthesisprotocols，MethodsinMolecularBiologyVol.35，Chapter15，303-316，NyfelerR，PenningtonMW和DunneBM編，HumanaPress，1994所述的進行。相應地，片段可以按照上述在固相上合成、從固相上切下同時完全保持保護基團、純化和鑒定特征。合適的片段也可以通過上述其他的技術得到。本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方案使用上述的LPA方法來生產本發(fā)明的化合物。4.抗體本發(fā)明的一個目的是提供這樣的抗體，抗原結合片段或重組蛋白，其能夠識別并選擇性結合表位，該表位包含或被包含于肽序列或其片段、變體或同源物，所述肽序列包含如上所述的基序的任意基序。在一個優(yōu)選的實施方式中，所述抗體是識別并結合包含基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp的抗體，其中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1、x2和x3獨立地為任何氨基酸殘基。在另一優(yōu)選的實施方案中，抗體能夠識別和結合NCAM上的表位，所述表位包含基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp，其中是W或P，x0是K、R或Y，且x1、x2和x3獨立地為任何氨基酸殘基。更優(yōu)選識別和結合這樣的表位的抗體，所述表位包含或被包含于NCAM的序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)和/或序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)。術語“表位”是指(抗原分子上的)被(該抗原的)抗體所識別(從而導致免疫反應)的特定原子群。術語“表位”與術語“抗原決定簇”是等同的。表位可包含3個或更多氨基酸殘基，例如4，5，6，7，8個氨基酸殘基，其位置緊密靠近，例如在連續(xù)的(contiguous)氨基酸序列內，或者位于抗原的氨基酸序列中遠離的位置，但由于蛋白質折疊而相互靠近?？贵w分子屬于稱為免疫球蛋白的血漿蛋白家族，免疫球蛋白的基本結構單元(buildingblock)—免疫球蛋白折疊(fold)或結構域，被以不同的形式用于免疫系統(tǒng)或其他生物識別系統(tǒng)的許多分子中。典型的免疫球蛋白有4條多肽鏈，其包含稱為可變區(qū)的抗原結合區(qū)域和稱為恒定區(qū)的不變化的區(qū)域。天然的抗體和免疫球蛋白通常是約150,000道爾頓的異源四聚體糖蛋白，由兩條相同的輕(L)鏈和兩條相同的重(H)鏈組成。每條輕鏈由一個共價二硫鍵連接于重鏈，而不同的免疫球蛋白同種型的重鏈之間二硫鍵的數目有變化。每個重鏈和輕鏈還有規(guī)律間隔的鏈間二硫橋。每條重鏈在一端有可變區(qū)(VH)，其后隨多個恒定區(qū)。每條輕鏈在一端有可變區(qū)(VL)，在其另一端有恒定區(qū)。輕鏈的恒定區(qū)與重鏈的第一恒定區(qū)對齊，輕鏈的可變區(qū)與重鏈的可變區(qū)對齊。特定的氨基酸殘基被認為形成輕鏈和重鏈可變區(qū)之間的界面(NovotnyJ和HaberE.ProcNatlAcadSciUSA.82(14)4592-6，1985)。根據它們重鏈恒定區(qū)的氨基酸序列，免疫球蛋白可以歸于不同的類型。免疫球蛋白至少有5個主要的類型IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，上述的一些類型還可以進一步分成亞類(同種型)，例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。對應于不同類型的免疫球蛋白的重鏈恒定區(qū)分別稱為alpha(α)、delta(β)、epsilon(ε)、gamma(γ)和mu(μ)?？贵w的輕鏈根據它們的恒定區(qū)的氨基序列可以歸于兩種截然不同的類型-kappa(κ)和lambda(λ)之一。不同類型的免疫球蛋白的亞基結構和三維構型是熟知的。術語“可變”在用于抗體的多變區(qū)時，是指可變區(qū)的特定部分在抗體之間序列差異很大?？勺儏^(qū)用于結合，并決定每個特定抗體對其特定抗原的特異性。但是，可變性不是均勻分布于抗體的整個可變區(qū)的。它集中在3個片段上，這3個片段稱為互補決定區(qū)(CDRs)，而且在輕鏈和重鏈中又都被稱為高變區(qū)?？勺儏^(qū)中保守性較高的部分稱為框架(FR)。天然的重鏈和輕鏈的可變區(qū)各自包含4個FR區(qū)，其主要采取β-片層構型，由3個CDRs連接，這些CDRs形成連接該β-片層結構且在某些情況下構成其部分的環(huán)。每條鏈中的CDRs被FR區(qū)保持緊密靠近，而且與來自另一鏈的CDRs一起對抗體的抗原結合位點的形成起貢獻。恒定區(qū)并不直接涉及抗體與抗原的結合，但其顯示多種效應物(effector)功能，例如抗體參與抗體依賴性細胞毒作用。因此，本發(fā)明考慮使用的抗體可以是多種形式中的任何形式，包括完整的免疫球蛋白，抗體片段例如Fv、Fab和類似的片段，包含可變區(qū)互補決定區(qū)(CDR)的單鏈抗體，及類似的形式，所有這些都屬于如本文定義的廣義術語“抗體”。本發(fā)明考慮到多克隆或單克隆抗體的任何特異性的用途，并不限于識別特定抗原并與之免疫反應的抗體。在優(yōu)選的實施方案中，使用對本發(fā)明的抗原或表位免疫特異性的抗體或其片段。術語“抗體片段”指全長抗體的部分，一般為抗原結合區(qū)或可變區(qū)?？贵w片段的例子包括Fab、Fab’，F(ab’)2和Fv片段。用木瓜蛋白酶消化抗體產生兩個相同的抗原結合片段，稱為Fab片段，其各自具有單個抗原結合位點；以及剩余的“Fc”片段，因其易于結晶而得名。胃蛋白酶處理產生能夠交聯抗原的有兩個抗原結合片段的F(ab’)2片段，及剩余的另一片段(稱為pFc’)。其他片段可包括由抗體片段形成的雙抗體、線性抗體(linearantibody)、單鏈抗體分子和多特異性抗體(multispecificantibody)。如本文中使用的，“功能片段”用于抗體時，指Fv、F(ab)和F(ab’)2片段。術語“抗體片段”在本文中可以與術語“抗原結合片段”互換使用?？贵w片段可以小到約4個氨基酸，5個氨基酸，6個氨基酸，7個氨基酸，9個氨基酸，大約12個氨基酸，大約15個氨基酸，大約17個氨基酸，大約18個氨基酸，大約20個氨基酸，大約25個氨基酸，大約30個氨基酸或更多。一般地，本發(fā)明的抗體片段只要與特異性地結合下述表位的抗體具有相似的或相關的免疫性質，其大小的上限可以是任意的所述表位包含選自本文中表示為SEQIDNOs1-3的任一序列的肽序列。因此，在本文的語境中術語“抗體片段”和術語“抗原結合片段”是一致的?？贵w片段保留某些選擇性結合其抗原或受體的能力。幾種抗體片段如下定義(1)Fab是含有抗體分子的單價抗原結合片段的片段。Fab片段可以通過用木瓜蛋白酶消化整個抗體產生完整的輕鏈和一重鏈的一部分而嚴生。(2)Fab’是可以如下述得到的片段用胃蛋白酶處理整個抗體，然后還原，產生完整的輕鏈和部分重鏈。每個抗體分子得到兩個Fab’片段。Fab’和Fab的不同在于重鏈CH1結構域的羧基末端附加了少數殘基，包括來自抗體鉸鏈區(qū)的一個或多個半胱氨酸。(3)(Fab，)2是可以用胃蛋白酶處理整個抗體而不進行后續(xù)還原而得到的抗體片段。(4)F(ab，)2是由兩個二硫鍵連接到一起的兩個Fab’片段的二聚體。Fv是包含完整的抗原識別和結合位點的最小的抗體片段。該區(qū)域是由一條重鏈輕鏈可變區(qū)和一條輕鏈可變區(qū)緊密非共價結合的二聚體(VH-VL二聚體)構成的。正是在這樣的構型中，每個可變區(qū)的3個CDR相互作用從而在VH-VL二聚體表面定義出抗原結合位點?？傮w而言，這六個CDR賦予抗體結合抗原的特異性。但是，即使是單個可變區(qū)(或半個Fv，只包含3個抗原特異性的CDR)也具有識別和結合抗原的能力，盡管比完整的結合位點的親和力要低。(5)單鏈抗體(“SCA”)，定義為基因工程改造的分子，含有輕鏈可變區(qū)、重鏈可變區(qū)，其由合適的肽接頭連接稱為基因融合的單鏈分子。這樣的單鏈抗體又稱為“單鏈Fv”或“sFv”抗體片段。一般地，FV多肽在VH和VL區(qū)之間還包含肽接頭，其使得sFv得以形成抗體結合的所希望的結構。sFv的綜述可以參見Pluckthun，于ThePharmacologyofMonoclonalAntibodies113269-315，Rosenburg和Moore編.Springer-Verlag，NY，1994。術語“雙抗體”指具有兩個抗原結合位點的小抗體片段，該片段包含在同一多肽鏈(VH-VL)中相互連接的重鏈可變區(qū)(VH)和輕鏈可變區(qū)(VL)。通過使用太短而使得同一鏈上的兩個區(qū)域不能配對的接頭，迫使所述區(qū)域與另一鏈的互補區(qū)域配對而形成兩個抗原結合位點。更完整的關于雙抗體的描述可見，例如，EP404,097；WO93/11161，和Hollinger等人，Proc.Natl.AcadSci.USA906444-6448(1993)。本發(fā)明考慮到多克隆和單克隆抗體，抗原結合片段，和其能夠結合根據本發(fā)明的表位的重組蛋白。多克隆抗體的制備對于本領域技術人員是熟知的。參見，例如，Green等人1992.ProductionofPolyclonalAntisera，于ImmunochemicalProtocols(Manson編)，第1-5頁(HumanaPress)；Coligan等人，ProductionofPolyclonalAntiserainRabbits，RatsMiceandHamsters，于CurrentProtocolsinImmunology，第2.4.1節(jié)，在此將其通過引用并入本文。同樣，單克隆抗體的制備也是常規(guī)的。參見，例如，Kohler和Milstein，Nature，256495-7(1975)；Coligan等人，第2.5.1-2.6.7節(jié)；和Harlow等人，于AntibodiesALaboratoryManual，第726頁，ColdSpringHarborPub.(1988)。單克隆抗體可以通過多種確立的技術從雜交瘤培養(yǎng)物中分離和純化。這樣的分離技術包括Protein-ASepharose親和色譜、大小排阻色譜和離子交換色譜，參見，例如，Coligan等人，第2.7.1-2.7.12節(jié)和第2.9.1-2.9.3節(jié)；Barnes等人，PurificationoflmmunoglobulinG(IgG).于MethodsinMolecularBiology，1992，1079-104，HumanaPress，NY。體外和體內操作單克隆抗體的方法對本領域技術人員是熟知的。例如，根據本發(fā)明使用的單克隆抗體可以按照Kohler和Milstein，1975，Nature256，495-7首先描述的雜交瘤方法制備，或通過重組方法，例如US4,816,567所述制備。用于本發(fā)明的單克隆抗體還可以從噬菌體文庫中篩選，使用Clackson等人，1991，Nature352624-628及Marks等人，1991，JMolBiol222581-597所述的技術。另一種方法涉及通過重組手段將單克隆抗體人源化以產生含有人特異性和可識別序列的抗體。綜述可見例如Holmes等人，1997，JImmunol1582192-2201和Vaswani等人，1998，AnnalsAllergy，Asthma&Immunol81105-115。本文中所用的術語“單克隆抗體”是指從基本上均一的抗體群體——即除了可能以微量存在的天然突變外，構成該群體的抗體個體是相同的——中獲得的抗體。單克隆抗體是高度特異性的，針對單個抗原性位點(antigenicsite)。與通常包含針對不同決定簇(表位)的多種抗體的常規(guī)多克隆抗體制劑不同，每個單克隆抗體針對抗原上的單個決定簇。除了其特異性外，單克隆抗體的優(yōu)點在于它們是通過雜交瘤培養(yǎng)合成的，不被其他免疫球蛋白污染。修飾語“單克隆”表示抗體的特征是其得自基本上均一的抗體的群體，不能理解為要求用任何具體的方法生產該抗體。這里的單克隆抗體特別包括“嵌合”抗體(免疫球蛋白)，其中部分重鏈和/或輕鏈與來自特定物種或屬于特定抗體類型或亞類的抗體中的相應序列相同或同源，而這些鏈的其余部分與來自另一特定物種或屬于另一特定抗體類型或亞類的抗體中的相應序列相同或同源，以及這樣的抗體的片段，只要它們顯示所需的生物活性(US4,816,567)；Morrison等人，1984，ProcNatlAcadSci816851-6855。制備抗體片段的方法也是本領域已知的(參見例如Harlow和Lane，AntibodiesALaboratoryManual，ColdSpringHarborLaboratory，NY，1988，在此通過引用并入本文)。本發(fā)明的抗體片段可以通過抗體的蛋白水解或在大腸桿菌中表達編碼該片段的DNA來制備?？贵w片段可以通過常規(guī)方法用胃蛋白酶或木瓜蛋白酶消化整個抗體來獲得。例如抗體片段可以這樣制備用胃蛋白酶酶切抗體，提供表示為F(ab)2的5S片段。該片段可以進一步切割使用硫醇還原劑，或任選的用于二硫鍵切割產生的巰基的保護基團，產生3.5SFab’單價片段?；蛘?，用胃蛋白酶酶切直接產生兩個單價Fab’片段和Fc片段。這些結果在例如US4,036,945和US4,331,647及其參考文獻中有描述。在此通過引用將這些專利以全文并入本文。也可以使用其他切割抗體的方法，例如分離重鏈形成單價輕-重鏈片段，進一步切割片段，或其他酶、化學或基因技術，只要該片段結合被完整抗體所識別的抗原。例如，Fv片段包含VH和VL片段的締合(association)。該締合可以是非共價的，或者可變鏈可以通過分子間二硫鍵連接或通過戊二醛等化學物質交聯。優(yōu)選地，Fv片段包含通過肽接頭連接的VH和VL鏈。單鏈抗體結合蛋白(sFv)是通過構建包含由寡核苷酸連接的、編碼VH和VL區(qū)的DNA序列的結構基因而制備的。將結構基因插入表達載體，再將表達載體導入宿主細胞例如大腸桿菌。重組宿主細胞合成單個多肽鏈，其中接頭肽在所述兩個v區(qū)域之間架橋。制備sFv的方法在例如Whitlow等人，1991，于MethodsACompaniontoMethodsinEnzymology，297；Bird等人，1988，Science242423-426；US4,946,778；及Pack等人，1993，BioTechnology111271-77?？贵w片段的另一形式是編碼單個互補決定區(qū)(CDR)的肽。CDR肽(“最小識別單位”)經常參與抗原識別和結合。CDR肽可以通過克隆或構建編碼目的抗體的CDR的基因來獲得。這樣的基因是通過，例如，從抗體嚴生細胞的RNA使用聚合酶鏈式反應合成所述可變區(qū)而制備的。參見，例如，Larrick等人，MethodsaCompaniontoMethodsinEnzymology，Vol.2，第106頁(1991)。本發(fā)明考慮到人源抗體和人源化形式的非人(例如鼠)抗體。這樣的人源化抗體是嵌合的免疫球蛋白，免疫球蛋白鏈或其片段(例如Fv、Fab、Fab’、F(ab’)2或抗體的其他抗原結合性子序列)，其含有來源于非人免疫球蛋白的最小序列，例如表位識別序列。一般而言，人源化抗體是人免疫球蛋白(受體抗體)，其中來自受體的互補決定區(qū)(CDR)中的殘基被置換為來自非人物種例如小鼠、大鼠或兔子，且具有所希望的特異性、親和性和容量(capacity)的CDR(供體抗體)中的殘基。含有本發(fā)明的抗體的最小序列例如識別本文所述的表位的序列的人源化抗體是本發(fā)明優(yōu)選的實施方案之一。在一些情形下，人源免疫球蛋白的Fv框架殘基被相應的非人源殘基所取代。進一步地，人源化的抗體可包含在受體抗體或導入的CDR或框架序列中都不存在的殘基。進行這些修飾是為了進一步改善和優(yōu)化抗體的性能。一般地，人源化抗體可包含基本上全部的至少1個，典型為2個可變區(qū)，其中全部或基本上全部的CDR區(qū)對應于非人源免疫球蛋白的那些CDR區(qū)，且全部或基本上全部的FR區(qū)是人源免疫球蛋白共有序列的那些FR區(qū)。人源化抗體最好還包含至少部分免疫球蛋白恒定區(qū)(Fc)，典型地為人源免疫球蛋白的恒定區(qū)。進一步的細節(jié)可參見Jones等人，1986，Nature321，522-525；Reichmann等人，1988，Nature332，323-329；Presta，1992，CurrOpStructBiol2593-596；Holmes等人，1997，JImmunol1582192-2201及Vaswani等人，1998，AnnalsAllergy，Asthma&Immunol81105-115?？梢杂帽绢I域生產多克隆和單克隆抗體的任何標準方法來產生抗體，使用包含上述基序的肽片段，例如序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)和/或序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)的片段。這樣的抗體還可以使用SEQIDNO1和2的肽序列的變體或同源物來產生。在一些實施方案中，優(yōu)選使用SEQIDNO1生產抗體，在另一實施方案中優(yōu)選使用SEQIDNO2。所述抗體也可以被要受治療的個體在體內產生，例如，通過對所述個體施用根據本發(fā)明的免疫原性片段。因此，本發(fā)明還涉及包含上述的免疫原性片段的疫苗。本申請還涉及生產本發(fā)明的抗體的方法，所述方法包括提供上述的免疫原性片段的步驟。本發(fā)明涉及1)抗體，其可以調節(jié)，例如增強或減弱，本文所述的人NCAM和/或FGFR和/或FGFR配體的生物學功能，特別是與細胞分化和存活，和/或學習和記憶相關的神經可塑性相關聯的功能，和2)抗體，其可識別并特異地結合于NCAM而不調節(jié)其生物學功能。優(yōu)選地，這樣的抗體是使用上述的免疫原性肽序列生產的。本發(fā)明涉及上述的抗體用于下列的用途1)涉及調節(jié)本文所述的FGFR和/或NCAM和/或FGFR配體的活性的治療應用；2)體外和/或體內檢測和/或監(jiān)測NCAM多肽或其片段用于診斷/預后目的，4)研究目的。本發(fā)明在一個實施方案中涉及包含上述抗體的藥物組合物。5.藥物細胞死亡在正常的神經元發(fā)育中起關鍵作用，在正常的神經元發(fā)育中，50％的發(fā)育中的神經元通過細胞程序性死亡而被清除；其還在神經變性病癥如阿爾茨海默病和帕金森氏癥的病理生理中起關鍵作用。FGFR和它們的配體已被證明是發(fā)育中和成人階段中神經元存活的重要決定者(Reuss和vonBohlenundHalbach(2003)CelltissueRes，313139-57)。因此，能夠通過結合和活化FGFR促進神經元細胞存活的化合物是非常理想的。于是，本發(fā)明在一個方面中特別描述了促進神經細胞存活并能夠用作藥物治療涉及神經細胞死亡的病癥的化合物。但是，本發(fā)明的化合物也可以作為藥物用于促進其他類型的細胞，例如不同類型的肌肉細胞的存活，或者用于提高其他類型的細胞的死亡，例如癌細胞，因為在肌肉和癌細胞中FGFR信號傳導已被證明是存活因子(Ozen等人.(2001)JNatCancerInst。931783-90；Miyamoto等人.(1998)JCellPhysiol.17758-67；Detilliux等人.(2003)CardiovascRes.578-19)。在旨在實現功能性細胞的補償的策略中，另一條途徑是建立所述功能性細胞的新的庫，例如通過使祖(干)細胞分化為新的分化細胞群體，或引發(fā)受損細胞中的再生過程。FGFR在引發(fā)多種祖細胞類型(Eswarakumar等人(2005)CytokineGrowthFactorRev.16(2)139-49)、癌細胞(StBernard等人(2005)Endocrinology146(3)1145-53)和神經細胞(Sapieha等人(2003)MolCellNeurosci.24(3)656-72)的分化的機制中起重要作用。細胞表面受體的活性在健康生物中是受嚴格調控的。受體或受體配體的突變、異常表達或加工(processing)導致受體活性的異常，并因此造成受體的功能障礙。而受體的功能障礙是導致使用該受體維持多種細胞過程的細胞發(fā)生功能障礙的原因。后者即是疾病的表現。還已證明FGFR信號傳導的減弱導致多種不同病理癥狀的發(fā)生，例如糖尿病(Hart等人，Nature2000，408864-8)。FGF受體的活化在正常和病理的血管發(fā)生中都有涉及(Slavin，CellBiolInt1995，19431-44)。它對于骨骼肌細胞、心肌細胞和神經元的發(fā)育、增殖、功能行使和存活都是重要的(Merle等人，JBiolChem1995，27017361-7；Cheng和Mattson，Neuron1991，71031-41；Zhu等人，MechAgeingDev1999，10877-85)。它在正常腎臟結構的位置中起作用(Cancilla等人，KidneyInt2001，60147-55)，還涉及傷口愈合和癌癥疾病(Powers等人，EndocrRelatCancer.2000，7165-97)。還報道說FGFR的活性對記憶和學習相關的神經可塑性的刺激和位置重要(Reuss等人(2003)CellTissueRes.313(2)139-57；Oomura等人(1996)AnnNYAcadSci.786337-47)本發(fā)明提供能夠調節(jié)FGFR的活性，特別是刺激FGFR的活性的化合物。因此，本發(fā)明涉及這些化合物用于制備藥物來治療疾病，其中激活依賴FGFR活性的生物學活性被認為對治療是有益的。因此，本發(fā)明的藥物可用于下列的預防和/或治療1)中樞和周圍神經系統(tǒng)，或肌肉或多種器官的疾病和病癥，和/或2)中樞和周圍神經系統(tǒng)的疾病或病癥，例如手術后神經損害(postoperativenervedamage)，外傷性神經損害(traumaticnervedamage)，神經纖維髓鞘形成障礙(impairedmyelinationofnervefibers)，缺血后損傷(postischaemicdamage)，例如中風導致的，帕金森氏癥，阿爾茨海默氏病，亨廷頓氏舞蹈病(Huntington′sdisease)，癡呆例如多發(fā)性硬化性癡呆(multiinfarctdementia)，糖尿病相關神經退變(nervedegenerationassociatedwithdiabetesmellitus)，影響晝夜節(jié)律鐘(circadianclock)或神經肌肉傳遞(neuro-musculartransmission)的障礙，及精神分裂癥，心境障礙，例如躁狂憂郁(manicdepression)；用于治療肌肉的疾病或病癥，包括神經肌肉連接(neuro-muscularconnections)功能障礙的病癥，例如器官移植后，或例如遺傳性或外傷性萎縮性肌肉功能障礙(geneticortraumaticatrophicmuscledisorders)；或用于治療多種器官的疾病或病癥，例如生殖腺變性病癥，胰腺變性病癥例如I型和II型糖尿病，腎變性病癥例如腎病，和心臟、肝臟及腸的變性病癥，和/或3)手術后神經損害，外傷性神經損害，神經纖維髓鞘形成障礙，缺血后損傷，例如中風導致的，帕金森氏癥，阿爾茨海默氏病，亨廷頓氏舞蹈病，癡呆例如多發(fā)性硬化性癡呆，硬化，糖尿病相關神經退變，影響晝夜節(jié)律鐘或神經肌肉傳遞的功能障礙，及精神分裂癥，情緒障礙，例如躁狂憂郁，和/或4)癌癥疾病，和/或5)朊病毒(prion)疾病。本發(fā)明涉及任何類型的需要新生血管發(fā)生(neoangiogenesis)的實體瘤。神經系統(tǒng)的癌癥是本發(fā)明特別感興趣的。本發(fā)明涉及選自綿羊瘋癢病(scrapie)和雅-克二氏病(Creutzfeldt-Jakobdisease)的朊病毒疾病。已經證明FGFR在朊病毒疾病中起明顯的作用(Castelnau等人(1994)ExpNeurobiol.130407-10；Ye和Carp(2002)JMolNeurosci.18179-88)。在另一實施方案中，本發(fā)明的化合物可以用來制備用于下列的藥物1)促進傷口愈合，和/或2)防止心肌細胞的細胞死亡，例如在急性心肌梗塞后，或在血管發(fā)生后，和/或3)血運重建(revascularsation)，和/或4)學習和/或短期和/或長期記憶能力的刺激在另一實施方案中，本發(fā)明的化合物可以用來制備用于下列的藥物1)防止缺血導致的細胞死亡；2)防止由酒精消耗導致的身體損傷；在另一實施方案中本發(fā)明的化合物可以用來制備治療正常、變性或損傷的細胞，這些細胞在正常情況下表達一種或多種選自下列的FGFR低親和性配體神經細胞黏著分子(NCAM)，-神經細胞黏著分子L1，-神經細胞黏著分子-2(NCAM-2)，-神經元-膠質細胞黏附分子(Ng-CAM)，-神經細胞黏著分子CALL，-神經膠質蛋白，-Nr-CAM(HBRAVO，NRCAM，NR-CAM12)，-軸突蛋白-1/TAG-1，-軸突相關細胞黏附分子(AxCAM)，-髓鞘相關糖蛋白(MAG)，-神經細胞黏著分子BIG-1，-神經細胞黏著分子BIG-2，-成束蛋白(FAS-2)，-神經細胞黏著分子HNB-3/NB-3，-神經細胞黏著分子HNB-2/NB-2，-鈣黏著蛋白，-連接黏附分子-1(JAM-1)，-神經細胞黏附F3/F11(Contactin)，-神經束蛋白，-B淋巴細胞黏附分子CD22，-Neogenin(NE01)，-細胞間細胞黏附分子-5(ICAM-5/telencephalin)，-結合半乳糖的凝集素-12(半乳凝素-12)，-結合半乳糖的凝集素-4(半乳凝素-4)，-成纖維細胞生長因子受體1(FGFR1)，-成纖維細胞生長因子受體2(FGFR2)，-成纖維細胞生長因子受體3(FGFR3)，-成纖維細胞生長因子受體4(FGFR4)，-神經營養(yǎng)蛋白酪氨酸激酶2型(NTRKT-2)，-白細胞抗原相關的蛋白質-酪氨酸磷酸酶(LAR-PTPRF)，-N肝配蛋白(Nephrin)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體S型(PTPRS)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體κ型(R-PTP-kappa)，-蛋白質-酪氨酸磷酸酶受體D型(PTPRD)，-肝配蛋白A型受體8(EPHA8/酪氨酸-蛋白質激酶受體EEK)-肝配蛋白A型受體3(EPHA8/酪氨酸-蛋白質激酶受體ETK-1/CEK4)，-肝配蛋白A型受體2，-胰島素受體(IR)，-胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1)，-胰島素相關受體(IRR)，-酪氨酸-蛋白質激酶受體Tie-1，-Roundabout受體-1(robo-1)，-神經元煙堿性乙酰膽堿受體α3亞基(CHRNA3)，-神經元煙堿性乙酰膽堿受體α6亞基，-血小板源性生長因子受體β(PDGFRB)，-白介素-6受體(IL-6R)，-白介素-23受體(IL-23R)，-白介素-3，白介素-5和GmCSF的β-共通細胞因子受體-細胞因子受體樣分子3(CRLF1)，-第I類細胞因子受體(ZCYTOR5)，-導蛋白-1受體DCC，-白細胞Fc受體樣蛋白(IFGP2)，-巨噬細胞清除劑受體2(MSR2)，-粒細胞集落刺激因子受體，-串珠蛋白聚糖，-ADAM-19，-ADAM-8，-ADAM-12，-ADAM-28，-ADAM-33，-ADAM-9，-ADAM-7，-ADAM-1A受精蛋白α，-ADAM-15，-含金屬蛋白酶-desintegrin域的蛋白(TECAM)，-金屬蛋白酶1，-膠原蛋白VII型，-纖連蛋白，-生腱蛋白-R，-細胞因子樣因子-1(CLF-1).根據本發(fā)明，上述蛋白質是FGFR的天然低親和性配體，而在上述的蛋白質的功能受障礙的條件下，包含至少一種本發(fā)明的能夠結合FGFR和活化FGFR信號傳導的肽片段的化合物可有利地用作上述任何蛋白質的模擬物。特別地，這樣的化合物可用于治療正常、變性或損傷的NCAM呈現細胞(NCAMpresentingcells)。根據本發(fā)明的藥物包含有效量的如上所定義的一種或多種肽序列或化合物，或包含一種或多種本發(fā)明的化合物和藥學上可接受的添加劑的藥物組合物。當制造藥物或制備藥物組合物，應當考慮與本發(fā)明的肽序列(如上所述)的特定結構特征相關的生物活性。在一些實施方案中，可以優(yōu)選地使用序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)制造藥物，另一實施方案中序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)可以是優(yōu)選的，在其他實施方案中優(yōu)選使用包含上述二者的化合物，或其他本申請中討論的任何類型的化合物。因此，在一個優(yōu)選的實施方案中本發(fā)明的藥物和/或藥物組合物可用于刺激學習和記憶，在另一實施方案中藥物組合物可用于刺激神經元存活，在另一實施方案中藥物組合物可用于刺激神經細胞分化，在另一實施方案中藥物組合物可用于i)刺激記憶和學習和刺激細胞存活，或ii)用于刺激記憶和學習和刺激神經突長出，或iii)用于刺激神經突長出和細胞存活。當涉及治療上述FGFR配體起作用的病癥或疾病時，優(yōu)選使用藥物組合物來增強或減弱所述配體的功能和/或生物活性，其可以與上述的生物活性不同。本發(fā)明還涉及包含如上所述的本發(fā)明的抗體的藥物和藥物組合物。本發(fā)明的另一個方面是制備藥物組合物的方法，包括將有效量的一種或多種本發(fā)明的化合物或根據本發(fā)明的藥物組合物與一種或多種藥學上可接受的添加劑或載體混合。在上述的方法的一個實施方案中，所述化合物與假體裝置(prostheticdevice)聯合使用，其中所述裝置是假體神經導管(nerveguide)。于是，在一個進一步的方面中，本發(fā)明涉及假體神經導管，其特征在于其包含一種或多種如上定義的化合物或藥物組合物。神經導管是本領域已知的。本發(fā)明涉及包含本發(fā)明的化合物的藥物和/或藥物組合物用于治療或預防任何選自下列的疾病和病癥的用途。這樣的藥物和/或藥物組合物可合適地配制為口服、經皮、肌肉內、靜脈內、顱內、鞘內、室內(intracerebroventricular)、鼻內或肺施用?；诒景l(fā)明的化合物的藥物和組合物的制劑開發(fā)策略大體上符合任何其他基于蛋白質的藥物產品的制劑策略?？赡艿膯栴}及克服這些問題的指導在多種教科書中都有涉及，例如“TherapeuticPeptidesandProteinFormulation.ProcessingandDeliverySystems”，A.K.Banga編，TechnomicPublishingAG，Basel，1995。注射劑(injectables)通常制備為液體溶液或懸液，適于在注射前溶液于或懸浮于液體中的固體形式。制劑也可以被乳化?；钚猿煞纸洺Ｅc藥學上可接受的且與活性成分相容的賦形劑混合。合適的賦形劑有，例如，水、鹽水、右旋糖、甘油、乙醇等，及其組合。另外，如果需要，制劑可包含微量的輔助物質例如潤濕或乳化劑，pH緩沖劑，或提高制劑的有效性或轉運的物質。本發(fā)明的化合物的制劑可以用本領域技術人員知道的技術來制備。制劑可含有藥學上可接受的載體和賦形劑，包括微球、脂質體、微膠囊、納米顆粒(nanoparticles)等。該制劑可以合適地通過注射施用，任選地在活性成分將要發(fā)揮作用的部位。適于其他施用模式的更多制劑包括栓劑，鼻、肺及某些情況下口服制劑。用于栓劑的傳統(tǒng)的粘合劑和載體包括聚亞烷基二醇或甘油三酸酯。這樣的栓劑可以用含有0.5-10％，優(yōu)選1-2％的活性成分的混合物來生成?？诜苿┌ǔＳ玫馁x形劑例如藥物級的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉(sodiumsaccharine)、纖維素、碳酸鎂等等。這些組合物的形式有溶液、懸液、片、丸、膠囊、緩釋制劑或粉末，且一般含有10-95％的活性成分，優(yōu)選25-70％。其他制劑有適于鼻或肺使用的制劑，例如吸入劑(inhalator)和氣霧劑?；钚缘幕衔锟梢耘渲莆⒅行缘幕螓}的形式。藥學上可接受的鹽包括酸加成鹽(與肽化合物的游離氨基形成的)和與無機酸例如鹽酸或磷酸、或有計算，例如乙酸，草酸、酒石酸、苦杏仁酸等所成的。與游離羧基所成的鹽也可以從無機堿例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨、氫氧化鈣或氫氧化鐵，或有機堿例如異丙胺、三甲胺、2-乙基氨基乙醇、組氨酸、普魯卡因等衍生得到。制劑以與劑量制劑相容的方式使用，使用治療有效的量。要施用的量依賴于要治療的受試者，包括，例如受試者的重量和年齡，要治療的疾病和疾病的狀態(tài)。合適的劑量范圍為通常每次施用每千克體重數百微克有效成分的數量級，優(yōu)選的范圍為每千克體重大約0.1μg到5000μg。使用單體形式的所述化合物時，合適的劑量經常為每千克體重0.1μg到5000μg的范圍，例如每千克體重大約0.1μg到3000μg的范圍，特別是每千克體重大約0.1μg到1000μg的范圍。使用多聚體形式的所述化合物時，合適的劑量經常為每千克體重0.1μg到1000μg的范圍，例如每千克體重大約0.1μg到750μg的范圍，特別是每千克體重大約0.1μg到500μg的范圍，例如每千克體重大約0.1μg到250μg的范圍。特別是當通過鼻施用時，施用比其他施用途徑較小的劑量。施用可以進行一次，或者可以后續(xù)施用。劑量依賴于施用途徑并隨要治療的受試者的年齡和重量而改變。多聚體形式的優(yōu)選的劑量是每70kg體重1mg到70mg之間。對于某些適應證，局部的或基本上局部的施用是優(yōu)選的。對于另一種應用，鼻內施用是優(yōu)選的。一些本發(fā)明的化合物是足夠活性的，但對于另一些，如果制劑中還包含藥學上可接受的添加劑和/或載體，效果會增強。這樣的添加劑和載體將是本領域已知的。在一些情況下，包含促進活性物質向目標送遞的化合物可以是有利的。在很多情況下，必須多次施用該制劑。施用可以是連續(xù)輸注，例如室內輸注，或施用更多劑量，例如每日更多次，每日一次，每周更多次，每周一次，等等。優(yōu)選在個體經受可能導致細胞死亡的因素之前或之后不久施用該藥物。優(yōu)選在從該因素發(fā)起8小時之內，例如從該因素發(fā)起5小時之內施用該藥物。許多所述化合物顯示長期效應，藉此可以以長的間隔施用所述化合物，例如1周或2周。與神經導管的使用相結合時，施用可以是連續(xù)的，或者分為基于活性化合物的控釋的小部分。另外，可以使用前體，以控制釋放速率和/或釋放位置。其他種類的植入物和口服施用也可以類似地基于控釋和/或前體的使用。6.治療在一個實施方案中，使用根據本發(fā)明的化合物/組合物治療，可用于誘導分化、調節(jié)增殖、刺激再生、神經元可塑性和細胞例如被植入或移植的細胞的存活。當使用具有長期效應的化合物時這是特別有用的。在進一步的實施方案中，所述治療可能是刺激因為多種因素而有死亡危險的細胞的存活，所述多種因素例如外傷或損傷，急性疾病，慢性疾病和/或功能障礙，特別是通常導致細胞死亡的變性疾病，其他外部因素，例如可能導致自由基產生或具有細胞毒作用的內科和/或外科治療和/或診斷方法，如X-射線和化療。關于化療，根據本發(fā)明的結合FGFR的化合物在針對所有呈現FGFR的癌細胞的癌癥治療中是有用的。因此，所述治療包括與中樞和周圍神經系統(tǒng)的疾病或病癥相關的細胞死亡的治療或預防，所述疾病或病癥例如手術后神經損害，外傷性神經損害，例如脊髓損傷導致的，神經纖維髓鞘形成障礙，缺血后損傷，例如中風導致的，多發(fā)性硬化性癡呆，多發(fā)性硬化，糖尿病相關神經退變，神經肌肉退變(neuro-musculardegeneration)，精神分裂癥，阿爾茨海默氏病，帕金森氏癥，或亨廷頓氏舞蹈病。另外，關于肌肉的疾病或病癥，包括神經肌肉連接功能障礙的病癥，例如遺傳性或外傷性萎縮性肌肉功能障礙；或用于治療多種器官的疾病或病癥，例如生殖腺變性病癥，胰腺變性病癥例如I型和II型糖尿病，腎變性病癥例如腎病，根據本發(fā)明的化合物可以用來誘導分化、調節(jié)增殖、刺激再生、神經元可塑性和存活，例如刺激存活。另外，所述化合物和/或藥物組合物可用于防止心肌細胞的細胞死亡，例如在急性心肌梗塞后，以誘導血管發(fā)生。另外，在一個實施方案中該化合物和/或藥物組合物用于刺激心肌細胞的存活，例如急性心肌梗塞后的存活。在另一個方面中化合物和/或藥物組合物用于血運重建，例如在損傷后。本發(fā)明的范圍還包括使用所述化合物和/或藥物組合物促進傷口愈合。所述化合物可以刺激血管發(fā)生因此促進傷口愈合過程。本發(fā)明還公開了所述化合物和/或藥物在治療癌癥中的用途。FGFR活化的調控對腫瘤血管發(fā)生、增殖和擴散是重要的。在另一個實施方案中所述化合物和/或藥物被用于刺激學習和/或短期和/或長期記憶能力，因為FGFR活性對神經細胞的分化是重要的。在另一個實施方案中本發(fā)明的化合物和/或藥物用于治療酒精消耗所致的身體損害。胎兒發(fā)育畸形，長期神經行為改變(long-termneurobehavioralalterations)，特別涉及酒精性肝病(alcoholicliverdisease)。朊病毒疾病的治療，包括使用化合物和/或藥物組合物，是本發(fā)明的另一個實施方案。具體地，本發(fā)明的化合物和/或藥物組合物可以用于治療臨床病癥，例如新生物(Neoplasms)，如惡性新生物，良性新生物，原位癌和行為不定的新生物，內分泌腺疾病，例如糖尿病，精神病，例如老年性和早老性器質性精神病癥(senileandpresenileorganicpsychoticconditions)，酒精性精神病(alcoholicpsychoses)，藥物性精神病(drugpsychoses)，暫時性器質性精神病癥(transientorganicpsychoticconditions)，阿爾茨海默氏病，腦脂質沉積(cerebrallipidoses)，癲癇，全身麻痹性癡呆(generalparesis)[梅毒]，肝豆狀核變性，亨廷頓舞蹈病(Huntington′schorea)，雅-克二氏病(Jakob-Creutzfeldt)，多發(fā)性硬化，腦皮克氏病(Pick′sdiseaseofthebrain)，梅毒，精神分裂性障礙(Schizophrenicdisorder)，情感性精神病(affectivepsychoses)，神經癥性障礙(neuroticdisorders)，人格障礙，包括性格神經癥(characterneurosis)，器質性(organic)腦病綜合征相關的非精神性人格障礙(nonpsychoticpersonalitydisorder)，偏執(zhí)型人格障礙(paranoidpersonalitydisorder)，狂信型人格(fanaticpersonality)，類偏執(zhí)性人格(paranoidpersonality)(障礙)，類偏執(zhí)性特征(paranoidtraits)，性偏離和障礙，精神發(fā)育遲緩(mentalretardation)，神經系統(tǒng)和感覺器官疾病，認知異常(cognitiveanomalies)，中樞神經系統(tǒng)炎性疾病，例如腦(脊)膜炎，腦炎，腦變性例如阿爾茨海默氏病，皮克氏(pick’s)病，腦老年性變性，交通性腦積水，梗阻性腦積水(hydrocephalus)，帕金森氏癥包括其他錐體外束(pyramidal)病和異常運動障礙，脊髓小腦疾病，小腦性共濟失調(cerebellarataxia)，馬里氏(Marie′s)、桑格-布朗氏(Sanger-Brown)肌陣攣性小腦協同失調(Dyssynergiacerebellarismyoclonica)，原發(fā)性小腦變性(primarycerebellardegeneration)，例如脊髓性肌萎縮，家族性、青少年、成人脊髓性肌萎縮，運動神經元病，肌萎縮性側索硬化(amyotrophiclateralsclerosis)，運動神經元病，進行性延髓性麻痹，假性延髓性麻痹，原發(fā)性側索硬化，其他前角細胞疾病，前角細胞疾病，未指定的，其他脊髓疾病，脊髓空洞癥和延髓空洞癥(syringomyeliaandsyringobulbia)，血管性脊髓病，急性脊髓梗塞(栓塞性)(非栓塞性)，脊髓動脈血栓形成，脊髓水腫，亞急性壞死性脊髓病(subacutenecroticmyelopathy)，其他疾病中的亞急性合并脊髓變性，脊髓病，藥物誘導的，輻射誘導的脊髓炎，自主神經系統(tǒng)功能障礙，周圍自主、交感、副交感或植物神經系統(tǒng)障礙，家族性自主神經機能異常(familialdysautonomia)[賴利-戴(Riley-Day)綜合征]，特發(fā)性周圍自主神經病(idiopathicperipheralautonomicneuropathy)，頸動脈竇暈厥或綜合征(carotidsinussyncopeorsyndrome)，頸交感神經營養(yǎng)不良(cervicalsympatheticdystrophy)或麻痹，其他障礙中的周圍自主神經病，淀粉樣變，周圍神經系統(tǒng)疾病，臂叢損傷(brachialplexuslesions)，頸肋(crevicalrib)綜合征，肋鎖(costoclavicular)綜合征，前斜角肌(scalenusanterior)綜合征，胸腔出口(thoracicoutlet)綜合征，臂叢神經炎或神經根炎(brachialneuritis)，包括新生兒中的。炎性和中毒性神經病，包括急性感染性多神經炎，吉蘭-巴雷(Guillain-Barre)綜合征，感染后多神經炎，膠原血管病中的多神經炎，影響眼多結構的障礙，化膿性眼內炎，耳和乳突的疾病，慢性風濕性心臟病，缺血性心臟病，心律失常，肺系疾病，新生兒器官和軟組織異常，包括神經系統(tǒng)中，產程和分娩中施用麻醉劑或其他鎮(zhèn)靜劑的并發(fā)癥，皮膚疾病包括感染，循環(huán)不足(insufficientcirculation)問題，損傷，包括手術后的，擠壓傷，燒傷。神經和脊髓的損傷，包括神經分開(divisionofnerve)、連續(xù)性病損(lesionincontinuity)(有或沒有開放性創(chuàng)傷)，創(chuàng)傷性神經瘤(有或沒有開放性創(chuàng)傷)，創(chuàng)傷性暫時性麻痹(有或沒有開放性創(chuàng)傷)，醫(yī)療程序中意外的刺傷或撕裂，視神經和通路的損傷，視神經損傷，第二腦(cranial)神經，視交叉損傷，視通路(opticalpathways)損傷，視皮層損傷，未特指盲(unspecifiedblindness)，其他腦神經的損傷，和其他及未指明神經的損傷。藥物，藥用物質和生物物質中毒，遺傳性或外傷性萎縮性肌肉功能障礙；或用于治療多種器官的疾病或病癥，例如生殖腺變性病癥，胰腺變性病癥例如I型和II型糖尿病，腎變性病癥例如腎病。綿羊瘋癢病(Scrapie)，雅-克二氏癥(Creutzfeldt-Jakob)、和Gerstmann-Straussler-Scheinker(GSS)病。根據本發(fā)明，上述病癥和癥狀的治療和/或預防包含對需要的個體施用有效量的本發(fā)明的化合物和/或藥物組合物的步驟。實施例這里稱為EFL肽的NCAM的肽片段NCAMTIMGLKPETRYAVR(SEQIDNO5)和這里稱為FGL肽的EVYVVAENQQGKSKA(SEQIDNO4)在下面的實驗中用作陽性對照。序列KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)在此稱為CDL肽，序列SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)在此稱為ABL肽。實施例1神經突長出的刺激基本按前人所述的(Neiiendam等人，(2004)JNeurochem.91(4)920-35)，從生后7日的Wistar大鼠制得小腦顆粒神經元(CGN)。在保持在冰上的改良的克-林二氏(Krebs-Ringer)溶液中剝離小腦組織，并按所述處理獲得上面的海馬神經元。所有細胞培養(yǎng)物都在37℃下含5％CO2的加濕的氣氛下孵育。所有的動物都遵照國家動物福利指南(nationalguidelineforanimalwelfare)來操作。解離的細胞以10,000細胞/cm2鋪在未包被的8孔permanoxLab-Tek培養(yǎng)玻片(chamberslides)上，于添加了0.4％(w/v)牛血清白蛋白(BSA；Sigma-Aldrich)、2％(v/v)B27Neurobasal添加物、1％(v/v)glutamax，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素和2％1MHEPES(都來自Gibco，BRL)的Neurobasal培養(yǎng)基中。加入有或沒有多種信號轉導途徑抑制劑的肽溶液到300μl/cm2的總體積，將玻片在37℃培養(yǎng)。24小時后，用4％甲醛固定神經元20分鐘，然后用兔抗GAP-43第一抗體和AlexaFluor山羊抗兔第二抗體免疫染色。使用如先前描述的計算機輔助的熒光顯微技術，(Ronn等人，2000同上所引)系統(tǒng)地對每個單獨實驗地每個組獲得至少200個神經元的圖像。簡單地說，帶NikonPlan20x物鏡的NikonDiaphot(Nikon，Tokyo，日本)倒置顯微鏡與攝像機(GrundigElectronics，德國)相連，用作記錄。使用與上述用于多巴胺能神經突長出測定的相同的軟件包來處理記錄的圖像。如圖1(A和B)所示，NCAMF3，1的EFL和CDL肽是沒有底物的培養(yǎng)物中生長的神經元的神經突長出的強力刺激物，而ABL肽在這些培養(yǎng)條件下沒有活性。EFL肽的作用可以被已知的FGFR抑制劑SU5402的施用所消除，這提示所述刺激是依賴于受體的活化。實施例2神經元存活的刺激存活測定將原代培養(yǎng)的CGN以100,000細胞/cm2的密度鋪在聚賴氨酸包被的8孔permanox玻片上，于添加有2％(v/v)B27，0.5％(v/v)glutamax，100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素和KCl的Neurobasal-A培養(yǎng)基(Gibco，BRL)中，使培養(yǎng)基中KCl的終濃度為40mM。鋪板后24小時，加入胞嘧啶-β-D-阿拉伯呋喃糖苷(Ara-C；Sigma-Aldrich)到終濃度10μM以避免神經膠質細胞的生長，然后讓神經元在37℃再分化6天。洗滌2次并將培養(yǎng)基換為添加有1％(v/v)谷胺酰胺，100U/ml青霉素和100μg/ml鏈霉素，3.5gD-葡萄糖/l和1％(v/v)丙酮酸鈉(GibcoBRL)以及不同濃度的肽的Eagle基本培養(yǎng)基(BME；GibcoBRL)，以誘導凋亡性細胞死亡。這樣培養(yǎng)物中的鉀濃度被降低到5mMKCl。誘導凋亡后2天，細胞用4％甲醛固定并用Hoechst33258染色，如使用海馬神經元的存活測定所述的。該測定按照D′Mello等人，(1993)(ProcNatlAcadSciUSA.9010989-93)所描述的進行。Caspase-3樣活性測定如上述制備CGN的原代培養(yǎng)物并如上述在細胞中誘導凋亡。對于Caspase-3測定，解離(dislodge)培養(yǎng)的CGN，用離心收集并裂解之。用等份的裂解細胞作測定，測定根據制造商的指示(Promega，美國)進行。結果從圖2(A和B)可見CDL和EFL肽(樹狀聚體)(相應為圖2A和2B)顯著地促進了培養(yǎng)中的CGN的存活，且其效果高于熟知的細胞存活促進劑例如C3肽(BerezinV和BockE.(2004)JMolNeurosci22(1-2)33-39)和GDNF(KrieglsteinK(2004)CellTissueRes318(1)73-80)(圖2A)的效果。ABL肽不影響培養(yǎng)中的CGN神經元的存活。圖3顯示CDL和EFL肽在保持于沒有KCl的培養(yǎng)基中的細胞中抑制凋亡相關的Caspase-3樣活性，且該效應類似于高KCl(40mM)的效應。實施例4NCAMF3，1片段結合FGFR1合成制備了表現NCAMF3，1的全部“鏈-環(huán)-鏈”結構域(AB-A鏈-環(huán)-B鏈(對應于ABL肽SEQIDNO2)；CD-C鏈-環(huán)-D鏈(對應于CDL肽SEQIDNO1)；EF-E鏈-環(huán)-F鏈(對應于EFL肽SEQIDNO5)；BC-B鏈-環(huán)-C鏈；DE-D鏈-環(huán)-E鏈；FG-F鏈-環(huán)-G鏈)的不同肽片段。在果蠅S2細胞(Invitrogen，美國)中根據制造商的指示表達了FGFRIg構件3和構件2，3。所有的蛋白用Ni2+-NTA樹脂(Qiagen，美國)親和色譜和/或離子交換色譜和凝膠過濾純化。使用BIAcoreX儀(BiosensorAB)在25℃下進行結合測定，使用10mM磷酸鈉pH7.4，150mMNaCl作為運行緩沖液。流速為5μl/min。使用制造商的軟件進行非線性曲線擬合來分析數據。FGFRIg構件2，3被固定在傳感芯片CM5上，使用胺基偶聯試劑盒(BiosensorAB)按如下進行1)用20μl活化溶液將芯片的兩半(稱為Fc1和Fc2)活化；2)使用10mM磷酸鈉緩沖液pH6.0中20μg/ml的蛋白質12μl，將蛋白質固定在Fc1上；3)用35μl封閉溶液封閉Fc1和Fc2。如下所述考察各種化合物與固定的FGFR構件的結合將化合物同時注射入Fc1(帶有固定的FGFR構件)和Fc2(無固定)。從表示蛋白質結合固定的FGFR構件和Fc1表面的曲線減去表示化合物非特異性地結合Fc2表面的曲線。用所得的曲線進行分析。結合實驗的結果如圖4所示。從圖4可見NCAMF3，1的ABL、CDL和EFL肽能夠直接結合FGFR。實施例5FGFR磷酸化TREX-293細胞(Invitrogen)被穩(wěn)定轉染具有C末端StrepII標簽的人FGFR1(IBAbiotech)，使用Flp-In系統(tǒng)(Invitrogen)。磷酸化的考察如下進行～2×107個細胞饑餓過夜后用指定的化合物刺激20min。細胞在PBS中用1％NP-40和第II組磷酸鹽抑制劑合劑(phosphataseinhibitorscocktailsetII)(Calbiochem)裂解。澄清的細胞裂解物與50μl瓊脂糖偶聯的抗磷酸酪氨酸抗體(4G10-AC，UpstateBiotechnologies)4℃下孵育3小時。注意校正所用細胞的量，使得可以檢測到磷酸化FGFR的顯著的增加。洗滌結合的蛋白，用150mM磷酸苯酯(Sigma)洗脫，12％三氯乙酸沉淀，冷丙酮洗滌，并溶解于SDS-PAGE樣品緩沖液中。用抗重組StrepII標簽的抗體(IBAbiotech)進行免疫印跡。如圖5可見，與非刺激的細胞相比，ABL，CDL和EFL肽增加(2-3倍)FGFR的磷酸化。實施例6學習和記憶范式(paradigm)關聯性條件恐懼訓練測試(TheContextualFearConditioning,CFC)在實驗的第一天之前，每天處理大鼠120秒，持續(xù)3天。在第1天(訓練)，大鼠每分鐘接受1秒的電擊(非條件刺激)，持續(xù)2天。訓練后立即給大鼠注射5μl的EFL，ABL，CDL或對照肽，或載體。每一處理組由11-14只大鼠組成?？偣苍u估了39只大鼠(animals)。在第2、7和30天測試大鼠，將它們置于條件訓練用的房間內8分鐘，但沒有電擊。使用時間采樣(time-sampling)程序，每2秒鐘將每只大鼠評定為“木僵”(freezing)或“活躍”(active)。條件訓練后第1天和第8天測試大鼠時檢測到，與接受安慰劑或對照的大鼠相比，施用所述肽以后，木僵的時間增加(第1天為從40.0％到約50.3％(EFL)，第8天為從32％到42.5％(CDL和EFL))。這提示EFL和CDL肽在訓練后施用于成年雄性Wistar大鼠后能夠促進條件化恐懼反應(conditionedfearresponse)的長期保持。社交識別測試(socialrecognitiontest，SRT)在皮下注射所述肽或載體后1小時和24小時后，用SRT評估所述大鼠。習慣化階段(habituationsession)在社交識別測試(SRT)前一天進行習慣化階段，使用于測試階段相似的條件，以適應實驗用房間、測試進行時的時間、測試籠，及與幼鼠的接觸(習慣化階段與社交識別階段使用不同的幼鼠)。習慣化階段試驗間隔為1小時。實驗階段實驗階段由初步試驗和測試試驗組成，試驗之間的間隔(保持)為2小時。初步試驗.測試前1小時將成年大鼠單獨放在測試籠里。測試如下進行將幼鼠放入籠中，并累計測量大鼠的社交性探察行為4分鐘。對身體部位的嗅探(sniffing)和梳理(grooming)，肛門生殖器嗅探(anogenitalsniffing)，及緊隨行為(closefollowing)都被記錄下來。用數字攝像機攝錄以獲得行為記錄并直接保存到數字視盤(digitalvideodisks，dvd)上。在2小時的保持時間中，大鼠保持獨處。幼鼠同樣地在測試成年鼠之前獨處1小時，在2小時的保持時間中亦保持獨處。測試試驗.延遲2小時后，在與初步試驗基本相同的實驗條件下進行再測試。用陌生的幼鼠做測試，這樣就使每只成年鼠接觸到其先前未經驗過的幼鼠。如果成年鼠用于探察先前接觸過的幼鼠的時間顯著地較少，則確定在第二次接觸中存在幼鼠的識別。若在第一和第二次接觸中探察幼鼠所用的時間缺少差異，則提示成年鼠未能識別熟悉的幼鼠。進一步地，使用識別比(recognitionratio)(RR)T2/(T1+T2)作為社交識別記憶(socialrecognitionmemory)的指標，其中T1和T2分別是第一次(初步)和第二次(測試)試驗中用于探察幼鼠的時間(Kogan等人，2000)。如果成年大鼠對幼鼠表現攻擊性、消極(探察時間少于總接觸時間的25％)或性行為，則對該大鼠不予記錄。數據分析和統(tǒng)計計算仔細地將所得的數據(T1和T2)輸入計算機數據庫(GRAPHPAD第4版)。分析下面的參數1)T1和T2的持續(xù)時間a)同一大鼠的T1和T2之間的顯著差異(由配對t檢驗獲得)被作為社交記憶存在的指征；b)不同處理組的T1之間的顯著差異(對2組之間的比較用非配對t檢驗；對多于2組之間的比較用單向(one-way)ANOVA然后Neuman-Keulspost-hoc檢驗得到)被作為處理影響了大鼠探察行為的指征。2)社交識別比(RR)其估計為T2/(T1+T2)，其中T1和T2分別是第一次和第二次遇見中用于探察幼鼠的時間。RR的評估可用作均一化不同測試中得到的數據的手段。a)不同處理組的RR與理論值0.5之間的顯著差異(由單樣本t檢驗獲得)被作為社交記憶存在的指征；b)不同處理組的RR之間的顯著差異(對2組之間的比較用非配對t檢驗；對多于2組之間的比較用單向ANOVA然后Neuman-Keulspost-hoc檢驗得到)被作為處理影響了大鼠社交記憶行為的指征。c)當大鼠接觸熟悉的幼鼠時，相對于當大鼠接觸新的幼鼠時，不同處理組的RR之間的顯著差異，被認為指示了熟悉的幼鼠中觀察到的效應是對認知特異性的。測試肽(ABL和EFL)或載體(水)以4mg/kg(2mg/ml)的濃度皮下施用。SRT的結果如圖6所示。CDL和EFL肽顯示相同大鼠的T1和T2之間的顯著差異(用配對t檢驗分析得到)，顯示社交記憶的存在。統(tǒng)計分析所得結果表示為算術平均±SEM。肽的效應的統(tǒng)計評估是對不同的三組大鼠的CFC或SRT進行單向ANOVA，然后，如果ANOVA的值達到P≤0.05則進行最小顯著差異(leastsignificancedifference，LSD)檢驗。用帶重復的ANOVA評價STR程序的特異性，通過比較引見已知JR和未知JR之后大鼠組的結果作為重復手段。對CFC或社交記憶的肽效應的統(tǒng)計分析是用單向ANOVA進行的。序列表<110>恩卡姆醫(yī)藥公司(ENKAMPharmaceuticalsA/S)<120>FGFR結合肽<130>P955PC00<160>5<170>PatentInversion3.1<210>1<211>15<212>PRT<213>人工序列<220><223>CDL肽，NCAMF3，1片段<400>1LysAlaGluTrpLysSerLeuGlyGluGluAlaTrpHisSerLys151015<210>2<211>17<212>PRT<213>人工序列<220><223>ABL肽，NCAMF3，1片段<400>2SerIleAspArgValGluProTyrSerSerThrAlaGlnValGlnPhe151015Asp<210>3<211>17<212>PRT<213>人工序列<220><223>ABL肽E/N突變體<400>3SerIleAspArgValAsnProTyrSerSerThrAlaGlnValGlnPhe151015Asp<210>4<211>15<212>PRT<213>人工序列<220><223>FGL肽，NCAMF3，2片段<400>4GluValTyrValValAlaGluAsnGlnGlnGlyLysSerLysAla151015<210>5<211>15<212>PRT<213>人工序列<220><223>EFL肽，NCAMF3，1片段<400>5ThrIleMetGlyLeuLysProGluThrArgThrTyrAlaValArg15101權利要求1.11到18個氨基酸殘基的肽序列，其包含式(I)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1，x2和x3獨立地為任何氨基酸殘基。2.權利要求1的肽序列，其中xp選自A，F，I，L，P，V或W。3.權利要求2的肽序列，其中xp選自A，V或W。4.權利要求3的肽序列，其中所述氨基酸基序是K/R-V/A-D/E/N/Q-W-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A，其中x0，x1，x2和x3如權利要求1所定義。5.權利要求2的肽序列，其中xp選自A，V或P。6.權利要求5的肽序列，其中所述氨基酸基序是K/R-V/A-D/E/N/Q-P-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A，其中x0，x1，x2和x3如權利要求1所定義。7.權利要求1到6任一項的肽序列，其中x1，x2和x3獨立地選自A，G，L，S，T或E。8.權利要求7的肽序列，其中肽序列具有11到14個氨基酸殘基的長度。9.權利要求7的肽序列，其中肽序列具有15到18個氨基酸殘基的長度。10.權利要求9的肽序列，其中肽序列是KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)。11.權利要求9的肽序列，其中肽序列是SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)12.權利要求9的肽序列，其中肽序列是SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)。13.權利要求1-12中任一項的肽序列，其中所述肽序列配制為包含所述單個肽序列的兩個或多個拷貝的多聚體化合物。14.權利要求13的肽序列，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求1-12的任一項的單個肽序列的兩個相同拷貝。15.權利要求13的肽序列，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求1-12的兩個不同的肽序列。16.權利要求13的肽序列，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求1-12的任一項的序列和選自EVYVVAENQQGKSKA(SEQIDNO4)或TIMGLKPETR/TYAVR(SEQIDNO5)的序列。17.權利要求13的肽序列，其中多聚體化合物是樹狀聚體，其包含連接到3個賴氨酸殘基的骨架結構的、權利要求1-12任一項的肽序列的4個相同拷貝。18.前述任一權利要求的肽序列，其中肽片段能夠結合和活化成纖維細胞生長因子受體(FGFR)家族的受體，包括成纖維細胞生長因子受體-1(FGFR-1)，成纖維細胞生長因子受體-2(FGFR-2)，成纖維細胞生長因子受體-3(FGFR-3)，成纖維細胞生長因子受體-4(FGFR-4)和成纖維細胞生長因子受體-5(FGFR-5)。19.權利要求18的肽序列，其中受體是FGFR-1。20.前述任一權利要求的肽序列，所述序列能夠刺激學習和記憶。21.11到18個氨基酸殘基的肽序列在制備刺激記憶和學習的藥物中的用途，所述肽序列包含式(I)的氨基酸基序K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1，x2和x3獨立地為任何氨基酸殘基。22.權利要求21的用途，其中xp選自A，F，I，L，P，V或W。23.權利要求22的用途，其中xp選自A，V或W。24.權利要求23的用途，其中氨基酸基序為K/R-V/A-D/E/N/Q-W-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A，其中x0，x1，x2和x3如權利要求1所定義。25.權利要求22的用途，其中xp選自A，V或P。26.權利要求25的用途，其中氨基酸基序是K/R-V/A-D/E/N/Q-P-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-V/A，其中x0，x1，x2和x3如權利要求1所定義。27.權利要求21到26任一項的用途，其中x1，x2和x3獨立地選自A，G，L，S，T或E。28.權利要求27的用途，其中肽序列具有11到14個氨基酸殘基的長度。29.權利要求27的用途，其中肽序列具有15到18個氨基酸殘基的長度。30.權利要求29的用途，其中肽序列是KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)。31.權利要求29的用途，其中肽序列是SIDRVEPYSSTAQVQFD(SEQIDNO2)。32.權利要求29的用途，其中肽序列是SIDRVNPYSSTAQVQFD(SEQIDNO3)。33.權利要求21-32任一項的用途，其中權利要求21-32任一項的肽序列被配制為包含所述單個肽序列的兩個或多個拷貝的多聚體化合物。34.權利要求33的用途，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求21-32任一項的單個肽序列的兩個相同拷貝。35.權利要求33的用途，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求21-32的兩個不同的肽序列。36.權利要求33的用途，其中多聚體化合物是二聚體，其包含權利要求21-32任一項的序列和選自TIMGLKPETR/TYAVR(SEQIDNO4)或EVYVVAENQQGKSKA(SEQIDNO5)的序列。37.權利要求33的用途，其中多聚體化合物是樹狀聚體，其包含連接到3個賴氨酸殘基的骨架結構的、權利要求21-32任一項的肽序列的4個相同拷貝。38.權利要求21-37任一項的用途，其中肽片段能夠結合和活化成纖維細胞生長因子受體(FGFR)家族的受體，包括成纖維細胞生長因子受體-1(FGFR-1)，成纖維細胞生長因子受體-2(FGFR-2)，成纖維細胞生長因子受體-3(FGFR-3)，成纖維細胞生長因子受體-4(FGFR-4)和成纖維細胞生長因子受體-5(FGFR-5)。39.權利要求38的肽序列，其中受體是FGFR-1。40.11到18個氨基酸殘基的肽序列，其包含式(II)的氨基酸序列K/R-xp-D/E/N/Q-xp-x0-S-x1-x2-x3-D/E/N/Q-xp其中xp是除了P以外的任何疏水性氨基酸殘基，x0是K，R或Y，且x1，x2和x3獨立地為任何氨基酸殘基。41.權利要求40的肽序列，其中xp是A，V或W。42.權利要求40的肽序列，其中x0是K或R。43.權利要求40的肽序列，其中x1，x2和x3獨立地選自G，V，L或E。44.權利要求43的肽序列，其中x1是L或V，x2是G，x3是E。45.權利要求40-44任一項的肽序列，其中所述序列能夠結合和活化成纖維細胞生長因子受體(FGFR)家族的受體，包括成纖維細胞生長因子受體-1(FGFR-1)，成纖維細胞生長因子受體-2(FGFR-2)，成纖維細胞生長因子受體-3(FGFR-3)，成纖維細胞生長因子受體-4(FGFR-4)和成纖維細胞生長因子受體-5(FGFR-5)。46.權利要求45的肽序列，其中受體是FGFR-1。47.權利要求46的肽序列，其中所述序列是KAEWKSLGEEAWHSK(SEQIDNO1)，或該序列的片段，或變體或同源物。48.權利要求40-47任一項的肽序列，其中所述肽序列能刺激神經元分化，神經元存活和/或神經元可塑性。49.權利要求48的肽序列，其中所述神經元分化是神經前體細胞的分化和/或神經元的分化，例如神經突長出和/或分枝過程。50.權利要求47的肽序列，其中所述同源物是與SEQIDNO1的序列具有至少40％的同一性，且具有SEQIDNO1的序列的至少一種功能活性的肽序列，該功能活性如權利要求45、48或49所定義。51.權利要求47的肽序列，其中所述片段是SEQIDNO1的序列的至少3個連續(xù)氨基酸殘基的肽序列，具有SEQIDNO1的如權利要求45、48或49所定義的至少一種功能活性。52.權利要求47的肽序列，其中所述變體是與SEQIDNO1的序列具有至少60％的同一性且具有SEQIDNO1的至少一種功能活性的肽序列，該功能活性如權利要求45、48或49所定義。53.權利要求40-52任一項的分離的肽序列，該序列能夠刺激學習和/或記憶。54.權利要求40-53任一項的化合物在制備藥物中的用途。55.權利要求54的用途，其中所述藥物用于病癥或疾病的治療，其中刺激神經細胞分化、神經細胞存活、學習和記憶、和/或調節(jié)FGFR家族的受體的活性對所述治療是有益的。56.權利要求55的方法，其中所述病癥或疾病是中樞和周圍神經系統(tǒng)的病癥或疾病。57.權利要求56的用途，其中所述病癥或疾病選自手術后神經損害，外傷性神經損害，神經纖維髓鞘形成障礙，缺血后損傷，例如中風后，糖尿病相關神經退變，影響晝夜節(jié)律鐘或神經肌肉傳遞的障礙。58.權利要求54的用途，其中所述藥物用于治療病癥或疾病，所述病癥或疾病選自肌肉的病癥或疾病，包括神經肌肉連接功能障礙的病癥，例如器官移植后，或例如遺傳性或外傷性萎縮性肌肉功能障礙。59.權利要求54的用途，其中所述藥物用于治療與新生血管發(fā)生、組織重塑和/或細胞運動增加相關的病癥或疾病。60.權利要求59的用途，其中所述疾病是癌癥。61.權利要求60的用途，其中所述癌癥是任何涉及新生血管發(fā)生的癌癥。62.權利要求60的用途，其中所述癌癥是神經系統(tǒng)的癌癥。63.權利要求56的用途，其中所述病癥或疾病是學習能力障礙和/或記憶障礙。64.權利要求56或63的用途，其中所述病癥或疾病是帕金森氏癥，阿爾茨海默病，亨廷頓氏舞蹈病或癡呆如多發(fā)性梗塞癡呆。65.權利要求56的用途，其中所述病癥或疾病是精神病，例如思維和/或情緒(mood)障礙，神經精神障礙包括雙相型障礙(bipolar(BPD))、遺傳相關的單相型情感障礙(geneticallyrelatedunipolaraffectivedisorders)，妄想性障礙，妄想癡呆，妄想性精神病，精神分裂癥，分裂型障礙，情感分裂性精神障礙(schizoaffectivedisorder)，情感分裂性雙相型和遺傳相關的單相型情感障礙，心理性精神病(psychogenicpsychosis)，緊張癥(catatonia)，周期性雙相型和遺傳相關的單相型情感障礙，循環(huán)性精神病(cycloidpsychosis)，分裂樣人格障礙，妄想性人格障礙(paranoidpersonalitydisorder)，雙相型和遺傳相關的單相型情感障礙相關的情感障礙和單相型情感障礙的亞型。66.權利要求54的用途，其中所述藥物用于治療與酒精消耗導致的身體損害相關的病癥或疾病。67.權利要求54的用途，其中所述藥物用于治療朊病毒疾病。68.包含權利要求40-53任一項的肽序列的藥物。69.用于刺激學習和/或記憶的藥物，其包含權利要求1-20任一項的肽序列和/或權利要求40-53任一項的肽序列。70.包含有效量的權利要求68的藥物的藥物組合物。71.包含有效量的權利要求69的藥物的藥物組合物。72.用于治療與學習能力障礙和/或記憶障礙相關的病癥或疾病的方法，包括對需要的個體施用有效量的權利要求1-20的任一項的肽序列和/或權利要求40-53的任一項的肽序列，權利要求68或69的藥物，或權利要求70或71的藥物組合物。73.治療病癥的方法，該病癥中刺激神經細胞分化、神經細胞存活，神經細胞可塑性和/或調節(jié)FGFR活性對治療是有益的，所述方法包括使用權利要求40-53任一項的單個的肽序列、權利要求68的藥物或權利要求71的藥物組合物。74.權利要求1-20和/或權利要求40-53的任一項的肽序列用于制備抗體的用途。75.能夠識別和結合包含權利要求1-20和/或權利要求40-53的任一項的肽序列的表位的抗體。76.權利要求75的抗體，其中所述抗體能夠調節(jié)NCAM和/或FGFR介導的生物活性。77.權利要求75和/或76的抗體在制備藥物中的用途。78.包含權利要求75或76的抗體的藥物組合物。全文摘要本發(fā)明涉及可以直接結合成纖維細胞生長因子受體(FGFR)并活化該受體的新的肽化合物。本發(fā)明的化合物包括來自神經細胞黏著分子(neuralcelladhesionmolecule，NCAM)的纖連蛋白III型構件1(F3，1)的NCAM肽片段。本發(fā)明的肽序列可以刺激學習和記憶和/或神經突長出和/或神經細胞存活。肽序列和包含它們的化合物，根據本發(fā)明，可以有益地用于治療和/或預防FGFR和/或NCAM在病理和疾病恢復中起作用的病理狀況。因此，包含本發(fā)明的肽序列和化合物的藥物組合物也在保護范圍之內。文檔編號A61K38/17GK101027320SQ200580028412公開日2007年8月29日申請日期2005年6月17日優(yōu)先權日2004年6月18日發(fā)明者伊莎貝思·博克,弗拉迪米爾·貝雷津申請人:恩卡姆醫(yī)藥公司