專利名稱：從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法及其產(chǎn)品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明從富硒茶葉中制備抗肝癌組分，屬于茶葉深加工技術(shù)領(lǐng)域，用于研制開發(fā)高效安全抗肝癌藥物。
背景技術(shù)：
流行病學(xué)、實驗室和臨床等的研究均表明硒具有化學(xué)防癌的潛力，硒能顯著降低乳腺癌、皮膚癌、結(jié)腸癌、肝癌等多種癌的發(fā)生率，膳食添加硒能有效的防止各種化學(xué)或病毒誘導(dǎo)的腫瘤和癌癥的發(fā)生率。
食物中硒的化學(xué)形態(tài)的差異決定了硒的抗癌活性的高低。以硒代蛋氨酸的硒源能有效提高機(jī)體硒濃度，但其生物活性較差，抗癌活性很低。而硒代甲基半胱氨酸在體內(nèi)能生成高生物活性的甲基硒醇，而具有很高的抗癌活性。
植物性來源的硒在食品中主要以硒-甲基硒代半胱氨酸(Se-MSC)的形態(tài)存在，Se-MSC具有很高的抗癌活性。富硒甘藍(lán)、大蒜、洋蔥中的硒主要以硒代甲基半胱氨酸形式存在。富硒酵母和富硒蘑菇及肉類中以硒代蛋氨酸形式存在，硒代蛋氨酸進(jìn)入人體后能非特異性的和體蛋白結(jié)合構(gòu)成白蛋白和血紅蛋白，容易在體內(nèi)蓄積，造成毒性，其抗癌活性低。無機(jī)硒鹽具有較高的抗癌活性，但其代謝產(chǎn)物硒化氫能殺死癌細(xì)胞，也能使正常細(xì)胞壞死，容易引起炎癥。尋求一種高效和安全的膳食硒添加方式對腫瘤的化學(xué)防治是非常重要。
美國、英國學(xué)者對富硒食品方面的研究主要是富硒大蒜，富硒甘藍(lán)，富硒酵母，富硒洋蔥的抗突變作用和抗腫瘤作用。同時發(fā)現(xiàn)了維生素E與硒的協(xié)同生物效應(yīng)。茶葉為中國的特有經(jīng)濟(jì)作物，茶葉具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，特別是抗突變和抗腫瘤作用，綠茶具有抗癌功能，可以增強(qiáng)人體對癌癥的防御能力，綠茶提取物能有效遏制癌和腫瘤發(fā)展，同時不損害正常細(xì)胞。
流行病學(xué)數(shù)據(jù)表明我國人群低硒攝入量硒與肝癌的高發(fā)病率與死亡率呈負(fù)相關(guān)，抗腫瘤藥物的副作用較大。我國從上世紀(jì)80年代起開始研究膳食添加硒提高人群硒攝入量。硒強(qiáng)化鹽能有效降低肝癌的發(fā)病率，但其代謝產(chǎn)物硒化氫具有很大的毒性。有機(jī)硒食品的發(fā)展，從富硒酵母、富硒蘑菇、富硒大豆等的開發(fā)，能有效提高機(jī)體硒的濃度，但其抗癌或抗腫瘤活性較低。尋求一種安全和生物活性高的富硒食品，預(yù)防腫瘤的發(fā)生。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供一種從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法。通過該方法制得的富硒茶葉組分具有較高的抗肝癌活性。
技術(shù)方案1、從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法，其特征在于(1)使用濃度為80-120mg Se L-1富硒茶葉生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑按照用量4-10g Se畝-1噴施于茶樹老葉，噴施后7-20天采摘茶葉，所采茶葉為一芽兩葉到一芽三葉，將鮮葉加工成富硒商品綠茶；(2)將富硒茶葉粉碎，過60-100目，以重量比計，茶葉∶水為1∶8-12的比例加入沸水，在沸水浴中浸提2-3h，冷卻過濾，濾渣再次加入等量的沸水，同樣提取2-3次，合并每次提取的濾液，經(jīng)40-60℃真空濃縮后，冷凍干燥得固體粉末，即為從富硒茶葉中制備獲得的抗肝癌組分產(chǎn)品。
在富硒茶葉生產(chǎn)過程中，一次噴施后所制作的茶葉為同一批次富硒茶葉；在茶葉采收14-28周后，再次按上述方法進(jìn)行富硒茶葉的生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑的噴施，7-15天以后采收所制作的富硒茶葉，為另一批次。
有益效果
(1)富硒綠茶含茶葉有效成分，又具高的含硒量，本發(fā)明提供從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法。通過該方法制得的富硒茶葉組分具有較高的抗肝癌活性，富硒茶葉的高抗癌活性為腫瘤的化學(xué)防治提供重要的途徑。
(2)本發(fā)明的實施可以大大提高夏、秋茶的經(jīng)濟(jì)效益。
(3)富硒茶提取物具有顯著的抗肝癌作用動物實驗證明(表1)，在相同劑量2.0μg kg-1時，富硒茶葉2提取物的抑瘤率為61.79％，高于富硒茶葉1提取物的抑瘤率55.60％。在劑量1.0μg Se kg-1，三種茶葉提取物及亞硒酸鈉的抑瘤率分別為41.95％、49.43％、53.77％和36.33％。兩種富硒茶提取物的抑瘤率要高于等劑量的普通茶葉提取物和亞硒酸鈉的抑瘤率，在等攝入量時富硒茶葉的抗癌活性顯著高于普通茶葉和亞硒酸鹽，表明富硒茶葉中硒的化學(xué)形態(tài)與普通茶葉和亞硒酸鹽的差異性。同時，隨著攝入量的提高，富硒茶葉提取物的抑瘤率提高，其抗肝癌活性與抗癌藥物5-氟脲嘧啶無顯著差異。
五、發(fā)明的具體實施方式
實施示例1(夏茶)1、富硒茶葉制備按國家發(fā)明專利(
公開日2003.7.23，公開號CN1430897A)一種富硒茶葉的生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑及其用法，制備富硒肥料，葉面噴施茶樹制備富硒茶葉。
在江蘇省宜興市富坤富硒茶葉有限公司茶場，茶園面積5畝，2004年7月30日噴施富硒肥料，濃度100mg Se L-1和用量5g Se畝-1噴施于茶樹老葉，噴施后8天采摘茶葉，所采茶葉為一芽兩葉，將鮮葉加工成商品綠茶。
2、從富硒茶葉中制備抗肝癌組分(1)將富硒茶葉粉碎，過80目；(2)取1kg粉碎的茶葉，加入沸水10kg，在沸水浴中浸提3h，冷卻過濾，濾渣再次加入10kg沸水，在沸水浴中浸提2.5h，冷卻過濾，濾渣再次加入10kg沸水，在沸水浴中浸提2h，冷卻過濾，棄去濾渣；(3)合并3次提取的濾液，50℃真空濃縮至200mL以下，冷凍干燥得固體粉末288.6克，即為獲得的富硒茶葉1提取物產(chǎn)品。
實施示例2(秋茶)1、富硒茶葉制備在江蘇省南京浦橋農(nóng)業(yè)開發(fā)有限公司江浦赭落山茶場，茶園面積3畝，2004年9月5日噴施富硒肥料，濃度100mg Se L-1和用量5g Se畝-1噴施于茶樹老葉，噴施后12天采摘茶葉，所采茶葉為一芽一葉，將鮮葉加工成商品富硒綠茶。
2、從富硒茶葉中制備抗肝癌組分(1)將富硒茶葉粉碎，過100目；(2)取2kg粉碎的茶葉，加入沸水24kg，在沸水浴中浸提3h，冷卻過濾，濾渣再次加入24kg沸水，在沸水浴中浸提3h，冷卻過濾，棄去濾渣；(3)合并2次提取的濾液，55℃真空濃縮至500mL以下，冷凍干燥得固體粉末457.2克，即為獲得的富硒茶葉2提取物產(chǎn)品。
以上獲得的富硒茶提取物抗肝癌動物試驗動物實驗證明(表1)，在相同劑量2.0μg kg-1時，富硒茶葉2提取物的抑瘤率為61.79％，高于富硒茶葉1提取物的抑瘤率55.60％。在劑量1.0μg Se kg-1，三種茶葉提取物及亞硒酸鈉的抑瘤率分別為41.95％、49.43％、53.77％和36.33％。兩種富硒茶提取物的抑瘤率要高于等劑量的普通茶葉提取物和亞硒酸鈉的抑瘤率，在等攝入量時富硒茶葉的抗癌活性顯著高于普通茶葉和亞硒酸鹽，表明富硒茶葉中硒的化學(xué)形態(tài)與普通茶葉和亞硒酸鹽的差異性。同時，隨著攝入量的提高，富硒茶葉提取物的抑瘤率提高，其抗肝癌活性與抗癌藥物5-氟脲嘧啶無顯著差異。
表1富硒茶葉提取物抗小鼠移植性肝癌的作用

*同列數(shù)據(jù)值后不同字母代表在P＜0.05顯著差異。
權(quán)利要求
1.一種從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法，其特征在于(1)使用濃度為80-120mg Se L-1富硒茶葉生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑按照用量4-10g Se畝-1噴施于茶樹老葉，噴施后7-20天采摘茶葉，所采茶葉為一芽兩葉到一芽三葉，將鮮葉加工成富硒商品綠茶；(2)將富硒茶葉粉碎，過60-100目，以重量比計，茶葉∶水為1∶8-12的比例加入沸水，在沸水浴中浸提2-3h，冷卻過濾，濾渣再次加入等量的沸水，同樣提取2-3次，合并每次提取的濾液，經(jīng)40-60℃真空濃縮后，冷凍干燥得固體粉末，即為從富硒茶葉中制備獲得的抗肝癌組分產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法，其特征在于在富硒茶葉生產(chǎn)過程中，一次噴施后所制作的茶葉為同一批次富硒茶葉；在茶葉采收14-28周后，再次按上述方法進(jìn)行富硒茶葉的生產(chǎn)調(diào)節(jié)劑的噴施，7-15天以后采收所制作的富硒茶葉，為另一批次。
3.用權(quán)利要求1或2所述從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法獲得的產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明從富硒茶葉中制備抗肝癌組分的方法及其產(chǎn)品，屬于茶葉深加工技術(shù)領(lǐng)域。濃度80－120mg Se L
文檔編號A61P35/00GK1765393SQ20051009402
公開日2006年5月3日 申請日期2005年8月26日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月26日
發(fā)明者徐娟, 胡秋輝, 郭富坤, 余芳, 王飛飛 申請人:南京農(nóng)業(yè)大學(xué), 宜興市富坤富硒茶業(yè)有限公司