專利名稱：組織蛋白酶半胱氨酸蛋白酶抑制劑的制作方法
背景技術(shù)：
人類和其他哺乳動物中有多種疾患涉及或與異常骨吸收有關(guān)。這種疾患包括但不限于骨質(zhì)疏松癥、糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、骨周轉(zhuǎn)異常增加、牙周病、牙齒缺失、骨折、動脈粥樣硬化、肥胖癥、寄生蟲感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍骨質(zhì)溶解、成骨不全、轉(zhuǎn)移性骨病、惡性腫瘤的高鈣血癥和多發(fā)性骨髓瘤。這些病患中最常見的一種是骨質(zhì)疏松癥，其以其最常見形式出現(xiàn)在絕經(jīng)后婦女。骨質(zhì)疏松癥是全身性骨骼疾病，其特征是骨密度低，骨組織微結(jié)構(gòu)退化，結(jié)果骨易碎性增加，易發(fā)生骨折。骨質(zhì)疏松性骨折是老齡人口的主要致病和死亡原因。由于骨質(zhì)疏松癥及其他與骨損失有關(guān)的病患通常是慢性病癥，因此據(jù)認(rèn)為適當(dāng)療法通常需要進(jìn)行長期治療。
骨吸收主要由破骨細(xì)胞(為多核巨細(xì)胞)進(jìn)行。破骨細(xì)胞通過首先形成對骨組織的細(xì)胞附著，然后形成胞外區(qū)室或陷窩來吸收骨。陷窩通過質(zhì)子-ATP泵維持在低pH。陷窩中的酸化環(huán)境使得骨首先失礦質(zhì)，接著蛋白酶如半胱氨酸蛋白酶降解骨蛋白質(zhì)或膠原。參見Delaisse，J.M.等，1980，Biochem J192365-368；Delaisse，J.等，1984，BiochemBiophys Res Commun441-447；Delaisse，J.M.等，1987，Bone8305-313，這些文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。膠原構(gòu)成95％的骨有機(jī)基質(zhì)。因此，參與膠原降解的蛋白酶是骨周轉(zhuǎn)及其導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生和發(fā)展的必要成分。
組織蛋白酶屬半胱氨酸蛋白酶的木瓜蛋白酶超家族。這些蛋白酶在結(jié)締組織的正常生理及病理降解中發(fā)揮作用。組織蛋白酶在胞外蛋白降解和周轉(zhuǎn)及重塑中起主要的作用。到目前為止，已鑒定并測序了多種來源的多種組織蛋白酶。這些組織蛋白酶天然發(fā)現(xiàn)于多種組織中。例如，組織蛋白酶B、C、F、H、L、K、O、S、V、W和Z已被克隆。組織蛋白酶K(縮寫為cat K)也稱為組織蛋白酶O和組織蛋白酶O2。參見1996年5月9日出版的Khepri Pharmaceuticals，Inc.的PCT申請WO 96/13523，所述申請通過引用整體結(jié)合到本文中。組織蛋白酶L涉及正常溶菌體蛋白酶解及疾病狀態(tài)，包括但不限于黑素瘤的轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶S涉及阿爾茨海默癥、哮喘、動脈粥樣硬化、慢性阻塞性肺病和某些自身免疫病，包括但不限于青少年糖尿病、多發(fā)性硬化、尋常性天皰瘡、格雷夫斯氏病、重癥肌無力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和橋本甲狀腺炎；變應(yīng)性病，包括但不限于哮喘；及同種異體免疫反應(yīng)，包括但不限于器官移植物或組織移植物的排斥。在腫瘤中發(fā)現(xiàn)組織蛋白酶B水平提高并重新分布，提示其在腫瘤侵入和轉(zhuǎn)移中的作用。此外，異常組織蛋白酶B活性涉及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、卡氏肺囊蟲病、急性胰腺炎、炎性氣道疾病及骨和關(guān)節(jié)病患等疾病狀態(tài)。
哺乳動物組織蛋白酶與木瓜蛋白酶樣半胱氨酸蛋白酶相關(guān)，所述半胱氨酸蛋白酶由致病性寄生蟲表達(dá)，其包括原生動物科、扁形動物、線蟲和節(jié)肢動物的寄生蟲。這些半胱氨酸蛋白酶在這些生物體的生命史中起到重要的作用。
已知半胱氨酸蛋白酶抑制劑如E-64(反-環(huán)氧琥珀酰-L-亮氨酰胺-(4-胍基)丁烷)能有效抑制骨吸收。參見Delaisse，J.M.等，1987，Bone8305-313，此文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。最近，已克隆了組織蛋白酶K，并發(fā)現(xiàn)其在破骨細(xì)胞中特異性表達(dá)。參見Tezuka，K.等，1994，J Biol Chem2691106-1109；Shi，G.P.等，1995，F(xiàn)EBS Lett357129-134；Bromme，D.和Okamoto，K.，1995，Biol Chem Hoppe Seyler376379-384；Bromme，D.等，1996，J Biol Chem2712126-2132；Drake，F(xiàn).H.等，1996，JBiol Chem27112511-12516，這些文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。在克隆的同時，以骨硬化表型伴骨吸收減少為特征的常染色體隱性疾病——致密性成骨不全癥經(jīng)作圖發(fā)現(xiàn)，突變存在于組織蛋白酶K基因中。到目前為止，已知組織蛋白酶K基因中所有鑒定出的突變均使膠原酶活性消除。參見Gelb，B.D.等，1996，Science2731236-1238；Johnson，M.R.等，1996，Genome Res61050-1055；Hou，W.-S.等，1999 J.Clin.Invest.103，731-738，這些文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。因此，似乎組織蛋白酶K參與破骨細(xì)胞介導(dǎo)的骨吸收。
人I型膠原(骨中的主要膠原)是組織蛋白酶K良好底物。參見Kafienah，W.等，1998，Biochent J331727-732，此文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。因此，組織蛋白酶K的抑制劑可降低骨吸收。這種抑制劑可用于治療涉及骨吸收的病患如骨質(zhì)疏松癥。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及能夠治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中組織蛋白酶依賴性病癥或疾病狀態(tài)的化合物。本發(fā)明的一個實(shí)施方案的例證是式I化合物及其藥物可接受的鹽、酯、立體異構(gòu)體和N氧化物衍生物 發(fā)明詳述本發(fā)明涉及具有以下化學(xué)式的化合物或其藥物可接受的鹽、立體異構(gòu)體和N氧化物衍生物 其中R1是氫、C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被一個至六個鹵素、C3-6環(huán)烷基、-SR7、-SOR7、-SO2R7、-SO2CH(Ra)(Rb)、-OR7、-N(R7)2、芳基、雜芳基或雜環(huán)基取代，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、羥基烷基、羥基、烷氧基或酮基的取代基取代；R2是氫、C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被一個至六個鹵素、C3-6環(huán)烷基、-SR7、-SOR7、-SO2R7、-SO2CH(Ra)(Rb)、-OR7、-N(R7)2、芳基、雜芳基或雜環(huán)基取代，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、羥基烷基、羥基、烷氧基或酮基的取代基取代；或者R1和R2可與它們所連接的碳原子一起形成C3-8環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)基環(huán)，其中所述環(huán)系統(tǒng)任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、羥基烷基、鹵代烷基或鹵素的取代基取代；R3是C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被C3-6環(huán)烷基或一個至六個鹵素取代；R4是被1-6個鹵素取代的C1-6烷基；R5選自氫或C1-3烷基；D是芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基可以是單環(huán)或雙環(huán)，任選在碳上或雜原子上被一個至五個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵代烷基、鹵素、酮基、烷氧基、-SR7、-OR7、-N(R7)2、-SO2R7或-SO2Ra的取代基取代；E是芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基可以是單環(huán)或雙環(huán)，任選在碳上或雜原子上被一個至五個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵代烷基、鹵素、酮基、烷氧基、-SR7、-OR7、-N(R7)2或-SO2R7的取代基取代；X是CRaRb或C3-8環(huán)烷基；R7選自氫、C1-6烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基、雜芳基(C1-4)烷基、C3-8環(huán)烷基、C3-8環(huán)烷基(C1-4)烷基和雜環(huán)基(C1-4)烷基，其中所述基團(tuán)可任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素、烷氧基、氰基、-NRaRb、-SRa或-SOmRa的取代基取代；R6選自氫、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、氰基、鹵素、烷氧基、-ORa、-NRa、-SRa或-SOmR5；其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基可任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素、氰基或-ORa的取代基取代；Ra是氫或任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素或-OR5的取代基取代的C1-6烷基；Rb是氫或任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素或-OR5的取代基取代的C1-6烷基；m是0-2的整數(shù)。
在本發(fā)明的一個類別中，R1和R2可與它們所連接的碳原子一起形成C3-8環(huán)烷基環(huán)。
在本發(fā)明的另一個類別中，R3是任選被一個至六個鹵素取代的C1-6烷基。
在本發(fā)明的另一個類別中，D是芳基。在本發(fā)明的一個亞類中，D是苯基。
在本發(fā)明的另一個類別中，X是C3-8環(huán)烷基。在本發(fā)明的一個亞類中，D是環(huán)丙基。
對上述優(yōu)選實(shí)施方案的提及意在包括具體的和優(yōu)選的基團(tuán)的所有組合，除非另有規(guī)定。
本發(fā)明的具體實(shí)施方案包括但不限于1)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；2)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氮雜環(huán)丁烷-1-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N′-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；3)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；4)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；5)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(異丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；
6)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(吡啶-3-基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；7)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-羥乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；8)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(1-甲基環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；9)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；10)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-氟環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；11)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(1，3-噻唑-2-基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；12)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1，1-二氟-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；13)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；14)N1-(氰基甲基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；15)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；16)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-L-亮氨酰胺；17)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；18)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-L-亮氨酰胺；19)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丁基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；
20)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丁基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；21)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丁基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；22)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-L-亮氨酰胺；23)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(甲氧基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-L-亮氨酰胺；24)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；25)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-羥乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；26)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(二甲基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；27)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丁基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；28)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-2，2-二氟-1-{4′-[1-(吡咯烷-1-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；29)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；30)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-甲氧基乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；31)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-2，2-二氟-1-{4′-[1-(嗎啉-4-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；32)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(甲基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；33)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(環(huán)丙基甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；
34)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；35)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；36)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(氰基甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；37)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4′-(1-{[(甲磺?；?氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；38)N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(叔丁基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；39)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-1，1-二甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；40)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-3′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；41)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-L-亮氨酰胺；42)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-3′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；43)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-1，1-二甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；44)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；45)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4′-(1-{[(2-氟環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；46)N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]-2-氯吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；47)N2-{(1S)-1-[4-(3-氯-5-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；
48)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4-(5-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；49)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；50)N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；51)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；52)N2-((1S)-1-{4′-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；53)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；54)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；55)N2-((1S)-1-{4-[5-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；56)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；57)N2-((1S)-1-{4′-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；58)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；59)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2-溴聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；60)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-5-羥基-L-亮氨酰胺；61)1-(4′-{(1S)-1-[((1S)-1-{[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]羰基}-3，3，3-三氟丙基)氨基]-2，2，2-三氟乙基}聯(lián)苯-4-基)環(huán)丙烷甲酰胺；
62)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)乙烯基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；63)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-L-正纈氨酰胺；64)N2-((1S)-1-{4′-[1-(2-氨基-2-氧代乙基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；65)N2-{(1S)-1-[4′-(3-氨基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；66)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；67)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；或其藥物可接受的鹽、酯、立體異構(gòu)體或N氧化物衍生物。
同樣包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的是由上述式I化合物和藥物可接受載體所組成的藥物組合物。本發(fā)明還設(shè)想涵括由藥物可接受載體和本申請具體公開的任何化合物所組成的藥物組合物，該化合物單獨(dú)或與任何其他公開的化合物組合。根據(jù)本文所包含的教導(dǎo)，本發(fā)明的這些和其他方面將顯而易見。
效用本發(fā)明化合物是組織蛋白酶的抑制劑，因此可用于治療或預(yù)防哺乳動物(優(yōu)選人類)中的組織蛋白酶依賴性疾病或病癥。具體的說，本發(fā)明化合物由于對組織蛋白酶K的選擇性是對組織蛋白酶B、L、S和F的至少100倍，因此是組織蛋白酶K的選擇性抑制劑，用于治療或預(yù)防哺乳動物(優(yōu)選人類)中的組織蛋白酶K依賴性疾病或病癥。
“組織蛋白酶依賴性疾病或病癥”指依賴一種或多種組織蛋白酶的活性的病理狀況?！敖M織蛋白酶K依賴性疾病或病癥”指依賴組織蛋白酶K的活性的病理狀況。與組織蛋白酶K活性有關(guān)的疾病包括骨質(zhì)疏松癥、糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、骨周轉(zhuǎn)異常增加、牙周病、牙齒缺失、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍骨質(zhì)溶解、成骨不全、動脈粥樣硬化和癌癥，包括轉(zhuǎn)移性骨病、惡性腫瘤的高鈣血癥和多發(fā)性骨髓瘤。在用本發(fā)明要求保護(hù)的化合物治療這種病癥時，所需的治療用量根據(jù)具體的疾病而變化，可容易地由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。雖然本發(fā)明的范圍包括了治療和預(yù)防，但優(yōu)選的應(yīng)用是這些病癥的治療。
本發(fā)明的一個實(shí)施方案是抑制有需要的哺乳動物中的組織蛋白酶活性的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。
該實(shí)施方案的一個類別是其中組織蛋白酶活性為組織蛋白酶K活性的方法。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中的組織蛋白酶依賴性病癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。
該實(shí)施方案的一個類別是其中組織蛋白酶活性為組織蛋白酶K活性的方法。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是抑制有需要的哺乳動物中的骨損失的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是減少有需要的哺乳動物中的骨損失的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。組織蛋白酶K抑制劑在抑制骨吸收中的效用公知于文獻(xiàn)中，參見Stroup，G.B.，Lark，M.W.，Veber，DF.，Bhattacharrya，A.，Blake，S.，Dare，L.C.，Erhard，K.F.，Hoffman，S.J.，James，I.E.，Marquis，R.w.，Ru，Y.，Vasko-Moser，J.A.，Smith，B.R.，Tomaszek，T.和Gowen，M.Potent and selective inhibition of humancathepsin K leads to inhibition of bone resorption in vivo in a nonhumanprimate.J.Bone Miner.Res.，161739-1746；2001；及Votta，B.J.，Levy，M.A.，Badger，A.，Dodds，R.A.，James，I.E.，Thompson，S.，Bossard，M.J.，Carr，T.，Connor，J.R.，Tomaszek，T.A.，Szewczuk，L.，Drake，F(xiàn).H.，Veber，D.和Gowen，M.Peptide aldehyde inhibitors of cathepsin K inhibit boneresorption both in vivo and in vitro.J.Bone Miner.Res.121396-1406；1997。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中的骨質(zhì)疏松癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。組織蛋白酶K抑制劑在治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松癥中的效用公知于文獻(xiàn)中，參見Saftig，P.，Hunziker，E.，Wehmeyer，O.，Jones，S.，Boyde，A.，Rommerskirch，W.，Moritz，JD.，Schu，P.和Vonfigura，K.Impaired osteoclast bone resorption leads to osteopetrosis incathepsin K-deficient mice.Proc.Natl.Acad.Sci.USA 9513453-13458；1998。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎病癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，關(guān)節(jié)周骨的進(jìn)行性破壞是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者中關(guān)節(jié)機(jī)能障礙和殘廢的主要原因，參見Goldring SR，“Pathogenesis of bone erosions in rheumatoid arthritis”.Curr.Opin.Rheumatol.2002；14406-10。對來自RA患者的關(guān)節(jié)組織的分析提供了證據(jù)，即組織蛋白酶K陽性破骨細(xì)胞是介導(dǎo)與類風(fēng)濕性滑液損傷有關(guān)的病灶骨吸收的細(xì)胞類型，參見Hou，W-S，Li，W，Keyszer，G，Weber，E，Levy，R，Klein，MJ，Gravallese，EM，Goldring，SR，Bromme，D，“Comparision of Cathepsin K and S expression within the Rheumatoidand Osteoarthritic Synovium”，Arthritis Rheumatism 2002；46663-74。此外，全身性骨損失是嚴(yán)重RA發(fā)病的主要原因。慢性RA患者中臀和脊柱發(fā)生骨折的頻率大大提高，參見Gould A，Sambrook，P，Devlin J等，“Osteoclastic activation is the principal mechanism leading to secondaryosteoporosis in rheumatoid arthritis”.J.Rheumatol.1998；251282-9。組織蛋白酶K抑制劑在治療或預(yù)防關(guān)節(jié)下骨吸收和全身性骨損失中的用途代表對類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎進(jìn)展的藥理學(xué)干預(yù)的合理途徑。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中的骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，骨關(guān)節(jié)炎(OA)伴隨出現(xiàn)明確的關(guān)節(jié)變化，包括關(guān)節(jié)軟骨表面的侵蝕、關(guān)節(jié)周圍軟骨內(nèi)骨化/骨贅病及軟骨下骨硬化和囊腫形成，參見Oettmeier R，Abendroth，K，“Osteoarthritis and boneosteologic types of osteoarthritis of the hip”，Skeletal Radiol.1989；18165-74。最近已提出軟骨下骨硬化對OA的引發(fā)和進(jìn)展的潛在作用。骨節(jié)對反復(fù)性沖擊負(fù)荷作出反應(yīng)造成的變硬軟骨下骨較不能夠減弱和沿關(guān)節(jié)傳遞受力，使得它在關(guān)節(jié)軟骨表面上承受更大的機(jī)械應(yīng)力。這反過來加速軟骨磨損和原纖維形成，參見Radin，EL和Rose RM，“Role of subchondral bone in the initiation and progressionof cartilage damage”，Clin.Orthop.1986；21334-40。通過抗吸收劑如組織蛋白酶K抑制劑抑制過量的關(guān)節(jié)下骨吸收，可導(dǎo)致軟骨下骨周轉(zhuǎn)的抑制，從而可對OA的進(jìn)展產(chǎn)生有利的影響。除了上述假設(shè)之外，最近還在來源于得自O(shè)A患者的滑膜和關(guān)節(jié)軟骨標(biāo)本的滑液成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞樣細(xì)胞和軟骨細(xì)胞中鑒定出組織蛋白酶K蛋白表達(dá)，參見Hou，W-S，Li，W，Keyszer，G，Weber，E，Levy，R，Kein，MJ，Gravallese，EM，Goldring，SR，Bromme，D，“Comparison of Cathepsin K and Sexpression within the Rheumatoid and Osteoarthritic Synovium”，ArthritisRheumatism 2002；46663-74；及Dodd，RA，Connor，JR，Drake，F(xiàn)H，Gowen，M，“Expression of Cathepsin K messenger RNA in giant cells andtheir precursors in human osteoarthritic synovial tissues”.ArthritisRheumatism 1999；421588-93；及Konttinen，YT，Mandelin，J，Li，T-F，Salo，J，Lassus，J等，“Acidic cysteine endoproteinase cathepsin K in thedegeneration of the superficial articular hyaline cartilage in osteoarthritis”，Arthritis Rheumatism 2002；46953-60。因此這些最新研究暗示，組織蛋白酶K在與骨關(guān)節(jié)炎進(jìn)展有關(guān)的關(guān)節(jié)軟骨II型膠原破壞中的作用。因此，組織蛋白酶K抑制劑在本發(fā)明所述的骨關(guān)節(jié)炎治療或預(yù)防中的效用包含兩種機(jī)制，第一種機(jī)制在于抑制破骨細(xì)胞驅(qū)動的軟骨下骨周轉(zhuǎn)，第二種機(jī)制在于直接抑制OA患者的滑膜和軟骨中的II型膠原變性。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療有需要的哺乳動物中的癌癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，組織蛋白酶K在人乳腺癌、前列腺癌和脊索瘤中表達(dá)，具有基質(zhì)降解能力，參見Littlewood-Evans AJ，Bilbe G，Bowler WB，F(xiàn)arley D，Wlodarski B，Kokubo T，Inaoka T，Sloane J，EvansDB，Gallagher JA，“The osteoclast-associated protease cathepsin K isexpressed in human breast carcinoma.”Cancer Res 1997 Dec 1；57(23)5386-90，Brubaker KD，Vessella RL，True LD，Thomas R.，Corey E.“cathepsin K mRNA and protein expression in prostate cancerprogression.”J Bone Miner Res 2003 18，222-30，Haeckel C，Krueger S，Kuester D，Ostertag H，Samii M，Buehling F，Broemme D，Czerniak B，Roessner A.“Expression of cathepsin K in chordoma.”Hum Pathol 2000Jul；31(7)834-40.
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療有需要的哺乳動物中的動脈粥樣硬化的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，組織蛋白酶K在人粥樣斑塊中表達(dá)，具有相當(dāng)強(qiáng)的彈性蛋白酶活性，參見Sukhova GK，Shi GP，Simon DI，Chapman HA，Libby P.“Expression of the elastolytic cathepsin S and K inhuman atheroma and regulation of their production in smooth musclecells.”J Clin Invest 1998 Aug 102，576-83。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療有需要的哺乳動物中的肥胖癥的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，在某些肥胖癥小鼠模型的脂肪組織中及在肥胖男人的脂肪組織中，組織蛋白酶K mRNA增加，參見Chiellini C，Costa M，Novelli SE，Amri EZ，Benzi L，Bertacca A，Cohen P，Del Prato S，F(xiàn)riedman JM，Maffei M.“Identification of cathepsin K as a novel marker ofadiposity in white adipose tissue.”J Cell Physiol 2003，195，309-21。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療有需要的哺乳動物中的寄生蟲感染的方法，所述方法包括給予哺乳動物治療有效量的上述任何化合物或任何藥物組合物。文獻(xiàn)中公知，哺乳動物組織蛋白酶與在這些寄生蟲的生命史中起重要作用的木瓜蛋白酶樣半胱氨酸蛋白酶相關(guān)。這種寄生蟲參與瘧疾、美國錐蟲病、非洲錐蟲病、利什曼病、賈第鞭毛蟲病、毛滴蟲病、變形蟲病、血吸蟲病、片吸蟲病、并殖吸蟲病和腸內(nèi)蛔蟲等疾病，參見Lecaille F，Kaleta J，Bromme D.，Human and parasiticpapain-like cysteine proteasestheir role in physiology and pathology andrecent developments in inhibitor design.Chem Rev 2002 102，4459-88。
本發(fā)明的另一個實(shí)施方案是治療與組織蛋白酶S有關(guān)的哺乳動物疾病，所述疾病包括阿爾茨海默癥、動脈粥樣硬化、慢性阻塞性肺病、癌癥和某些自身免疫病，包括但不限于青少年糖尿病、多發(fā)性硬化、尋常性天皰瘡、格雷夫斯氏病、重癥肌無力、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和橋本甲狀腺炎；變應(yīng)性病、包括但不限于哮喘；及同種異體免疫反應(yīng)，包括但不限于器官移植物或組織移植物的排斥。文獻(xiàn)中公知，組織蛋白酶S活性伴隨上述疾病狀態(tài)而出現(xiàn)，參見Munger JS，Haass C，Lemere CA，Shi GP，Wong WS，Teplow DB，Selkoe DJ，Chapman HA.Lysosomal processing of amyloid precursor protein to A betapeptidesa distinct role for cathepsin S.Biochem J 1995 311，299-305；Sukhova GK，Zhang Y，Pan JH，Wada Y，Yamamoto T，Naito M，KodamaT，Tsimikas S，Witztum J1，1u ML，Sakara Y，Chin MT，Libby P，Shi GP.Deficiency of cathepsin S reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficientmice.J Clin Invest 2003 111，897-906；Zheng T，Zhu Z，Wang Z，HomerRJ，Ma B，Riese RJ Jr，Chapman HA Jr，Shapiro SD，Elias JA.Inducibletargeting of IL-13 to the adult lung causes matrix metalloproteinase-andcathepsin-dependent emphysema.J Clin Invest 2000 106，1081-93；Shi GP，Sukhova GK，Kuzuya M，Ye Q，Du J，Zhang Y，Pan JH，Lu ML，ChengXW，Iguchi A，Perrey S，Lee AM，Chapman HA，Libby P.Deficiency ofthe cysteine protease cathepsin S impairs microvessel growth.Circ Res2003 92，493-500；Nakagawa TY，Brissette WH，Lira PD，Griffiths RJ，Petrushova N，Stock J，McNeish JD，Eastman SE，Howard ED，Clarke SR，Rosloniec EF，Elliott EA，Rudensky AY.Impaired invariant chaindegradation and antigen presentation and diminished collagen-inducedarthritis in cathepsin S null mice.Immunity 1999 10，207-17。
上述任何化合物在制備治療或預(yù)防有需要的哺乳動物中的骨質(zhì)疏松癥的藥物中的用途是本發(fā)明的例證。上述任何化合物在制備治療或預(yù)防骨損失、骨吸收、骨折、轉(zhuǎn)移性骨病或者組織蛋白酶機(jī)能相關(guān)病患的藥物中的用途是本發(fā)明進(jìn)一步的例證。
本發(fā)明化合物可單獨(dú)或優(yōu)選與藥物可接受的載體或稀釋劑組合，任選與已知的佐劑如明礬一起，按標(biāo)準(zhǔn)的制藥學(xué)規(guī)范在藥物組合物中給予哺乳動物，優(yōu)選人類。所述化合物可口服或胃腸外給予，包括靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、直腸和局部給藥途徑。
在口服用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉，且常加入潤滑劑如硬脂酸鎂。對于膠囊劑形式的口服給藥，有用的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。對于本發(fā)明治療性化合物的口服應(yīng)用，所選的化合物可例如以片劑或膠囊劑的形式或者作為含水溶液劑或混懸劑給予。對于片劑或膠囊劑形式的口服給藥，活性藥物成分可與口服用、無毒、藥物可接受的惰性載體組合，所述載體如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、硫酸鈣、甘露醇、山梨醇等；對于液體劑形式的口服給藥，口服藥物成分可與任何口服用、無毒、藥物可接受的惰性載體組合，所述載體如乙醇、甘油、水等。此外，如有需要或必要，混合物中也可摻入合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑。合適的粘合劑包括淀粉、明膠、天然糖類如葡萄糖和β-乳糖、玉米甜味料、天然與合成植物膠如阿拉伯膠、黃芪膠或海藻酸鈉、羧甲基纖維素、聚乙二醇、蠟等。用于這些劑型的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉等。崩解劑包括但不限于淀粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠等。當(dāng)需要將含水混懸劑用于口服應(yīng)用時，將活性成分與乳化劑和懸浮劑組合。如有必要，可加入某些甜味劑或矯味劑。對于肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下和靜脈內(nèi)應(yīng)用，通常制備活性成分的無菌溶液劑，并應(yīng)合適地調(diào)整和緩沖所述溶液劑的pH。對于靜脈內(nèi)應(yīng)用，應(yīng)控制溶質(zhì)的總濃度，以使制劑等滲。
本發(fā)明化合物也可以脂質(zhì)體遞送系統(tǒng)的形式給藥，如小的單層泡、大的單層泡和多層泡。脂質(zhì)體可由多種磷脂如膽甾醇、硬脂酰胺或磷脂酰膽堿形成。
本發(fā)明化合物也可通過使用單克隆抗體作為單獨(dú)的載體來遞送，化合物分子偶聯(lián)到所述載體上。本發(fā)明化合物也可與作為可靶向藥物載體的可溶性聚合物偶聯(lián)。這種聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羥乙基天冬酰胺-苯酚或棕櫚酰殘基取代的聚環(huán)氧乙烷-聚賴氨酸。此外，本發(fā)明化合物可偶聯(lián)到用于實(shí)現(xiàn)藥物控釋的一類生物可降解聚合物，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε己內(nèi)酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝膠的交聯(lián)或兩性嵌段共聚物。
本發(fā)明化合物也可與用于治療或預(yù)防以下疾病的已知藥物組合用骨質(zhì)疏松癥、糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、骨周轉(zhuǎn)異常增加、牙周病、牙齒缺失、骨折、動脈粥樣硬化、肥胖癥、寄生蟲感染、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍骨質(zhì)溶解、成骨不全、轉(zhuǎn)移性骨病、惡性腫瘤的高鈣血癥和多發(fā)性骨髓瘤。本發(fā)明公開的化合物與用于治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松癥或其他骨病的其他藥物的組合落入本發(fā)明的范圍內(nèi)。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員根據(jù)藥物的具體特性和所涉及的疾病，會能夠辨別哪種藥物組合會有用。這種藥物包括以下有機(jī)雙膦酸鹽；雌激素受體調(diào)節(jié)劑；雄激素受體調(diào)節(jié)；破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；整聯(lián)蛋白受體拮抗劑；成骨細(xì)胞合成代謝劑如PTH；以及它們的藥物可接受鹽和混合物。優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和有機(jī)雙膦酸鹽。另一種優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和雌激素受體調(diào)節(jié)劑。另一種優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和雄激素受體調(diào)節(jié)劑。另一種優(yōu)選的組合是本發(fā)明化合物和成骨細(xì)胞合成代謝劑。
“有機(jī)雙膦酸鹽”包括但不限于以下化學(xué)式所示化合物 其中n是0-7的整數(shù)，且其中A和X獨(dú)立選自H、OH、鹵素、NH2、SH、苯基、C1-C30烷基、C3-C30支鏈烷基或環(huán)烷基、含兩個或三個N的雙環(huán)結(jié)構(gòu)、C1-C30取代的烷基、C1-C10烷基取代的NH2、C3-C10支鏈烷基或環(huán)烷基取代的NH2、C1-C10二烷基取代的NH2、C1-C10烷氧基、C1-C10烷基取代的硫基、苯硫基、鹵代苯硫基、C1-C10烷基取代的苯基、吡啶基、呋喃基、吡咯烷基、咪唑基、咪唑并吡啶基和芐基，使得當(dāng)n為0時A和X不均選自H或OH；或者A和X與它們所連接的碳原子一起形成C3-C10環(huán)。
在以上化學(xué)式中，烷基可以是直鏈烷基、支鏈烷基或環(huán)烷基，條件是有足夠的原子供化學(xué)式選擇。C1-C30取代的烷基可包括多種取代基，其非限制性實(shí)例包括選自苯基、吡啶基、呋喃基、吡咯烷基、咪唑基(imidazonyl)、NH2、C1-C10烷基或二烷基取代的NH2、OH、SH和C1-C10烷氧基的取代基。
以上化學(xué)式還意在涵括A或X取代基的復(fù)雜碳環(huán)、芳族和雜原子結(jié)構(gòu)，其非限制性實(shí)例包括萘基、喹啉基、異喹啉基、金剛烷基和氯苯硫基。
雙膦酸鹽的藥物可接受鹽和衍生物在本文中也有用。鹽的非限制性實(shí)例包括選自堿金屬(alkali metal)、堿性金屬(alkaline metal)、銨和一、二、三或四個C1-C30-烷基取代的銨的鹽。優(yōu)選的鹽是選自鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽和銨鹽的鹽。更優(yōu)選的是鈉鹽。衍生物的非限制性實(shí)例包括選自酯、水合物和酰胺的衍生物。
應(yīng)注意，在本文中用來指本發(fā)明的治療性藥物的術(shù)語“雙膦酸鹽”也意在涵括二膦酸鹽(diphosphonate)、雙膦酸和二膦酸以及這些物質(zhì)的鹽和衍生物。用具體的命名法指雙膦酸鹽并不意在限制本發(fā)明的范圍，除非另有規(guī)定。由于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員目前采用混合命名法的緣故，對本發(fā)明雙膦酸鹽化合物的具體重量或百分比的提及是以酸活性重量計(jì)，除非本文中另有指明。例如，“約5mg的選自阿侖膦酸鹽、其藥物可接受鹽及混合物的骨吸收抑制性雙膦酸鹽，以阿侖膦酸活性重量計(jì)”的語句意指所選的雙膦酸鹽化合物的量基于5mg阿侖膦酸計(jì)算。
在本文中有用的雙膦酸鹽的非限制性實(shí)例包括以下阿侖膦酸，4-氨基-1-羥基亞丁基-1，1-雙膦酸。
阿侖膦酸鹽(也稱阿侖膦酸鈉或三水合阿侖膦酸一鈉)，三水合4-氨基-1-羥基亞丁基-1，1-雙膦酸一鈉。
阿侖膦酸和阿侖膦酸鹽描述于1990年5月1日授權(quán)的Kieczykowski等的美國專利第4,922,007號；1991年5月28日授權(quán)的Kieczykowski等的美國專利第5,019,651號；1996年4月23日授權(quán)的Dauer等的美國專利第5,510,517號；1997年7月15日授權(quán)的Dauer等的美國專利第5,648,491號，所有這些專利通過引用整體結(jié)合到本文中。
環(huán)庚基氨基亞甲基-1，1-雙膦酸，YM 175，Yamanouchi(英卡膦酸鹽，以前稱西馬膦酸鹽)，其描述于1990年11月13日授權(quán)的Isomura等的美國專利第4,970,335號，該專利通過引用整體結(jié)合到本文中。
1，1-二氯亞甲基-1，1-二膦酸(氯膦酸)和二鈉鹽(氯膦酸鹽，Procterand Gamble)，其描述于比利時專利672,205(1966)和J.Org.Chem 32，4111(1967)，這兩個文獻(xiàn)通過引用整體結(jié)合到本文中。
1-羥基-3-(1-吡咯烷基)-亞丙基-1，1-雙膦酸(EB-1053)。
1-羥基乙烷-1，1-二膦酸(依替膦酸)。
1-羥基-3-(N-甲基-N-戊基氨基)亞丙基-1，1-雙膦酸，也稱BM-210955，Boehringer-Mannheim(伊班膦酸鹽)，其描述于1990年5月22日授權(quán)的美國專利第4,927,814號，該專利通過引用整體結(jié)合到本文中。
1-羥基-2-咪唑并-(1，2-a)吡啶-3-基亞乙基(米諾膦酸鹽)。
6-氨基-1-羥基亞己基-1，1-雙膦酸(奈立膦酸鹽)。
3-(二甲基氨基)-1-羥基亞丙基-1，1-雙膦酸(奧帕膦酸鹽)。
3-氨基-1-羥基亞丙基-1，1-雙膦酸(帕米膦酸鹽)。-1，1-雙膦酸(吡膦酸鹽)，其描述于美國專利第4,761,406號，該專利通過引用整體結(jié)合到本文中。
1-羥基-2-(3-吡啶基)-亞乙基-1，1-雙膦酸(利塞膦酸鹽)。
(4-氯苯基)硫代甲烷-1，1-雙磷酸(替魯膦酸鹽)，其描述于1989年10月24日的Breliere等的美國專利第4,876,248號，該專利通過引用整體結(jié)合到本文中。
1-羥基-2-(1H-咪唑-1-基)亞乙基-1，1-雙膦酸(唑來膦酸鹽)。
雙膦酸鹽的非限制性實(shí)例包括阿侖膦酸鹽、西馬膦酸鹽、氯膦酸鹽、依替膦酸鹽、伊班膦酸鹽、英卡膦酸鹽、米諾膦酸鹽、奈立膦酸鹽、奧帕膦酸鹽、帕米膦酸鹽、吡膦酸鹽、利塞膦酸鹽、替魯膦酸鹽和唑來膦酸鹽，以及它們的藥物可接受的鹽和酯。特別優(yōu)選的雙膦酸鹽是阿侖膦酸鹽，尤其是阿侖膦酸的鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽和銨鹽。阿侖膦酸的鈉鹽尤其是阿侖膦酸的水合鈉鹽是優(yōu)選的雙膦酸鹽的例證。所述鹽可與整數(shù)摩爾的水或非整數(shù)摩爾的水水合。阿侖膦酸的水合鈉鹽是雙膦酸鹽進(jìn)一步的例證，尤其是當(dāng)所述水合鹽為三水合阿侖膦酸鹽一鈉時。
應(yīng)認(rèn)識到，可以利用兩種或多種雙膦酸鹽活性物質(zhì)的混合物。
有機(jī)雙膦酸鹽的準(zhǔn)確劑量將隨劑量給藥方案、所選的具體雙膦酸鹽、哺乳動物或人的年齡、大小、性別和健康狀況、待治療疾患的類型和嚴(yán)重程度以及其他相關(guān)的醫(yī)學(xué)和身體因素而變。因此準(zhǔn)確的藥物優(yōu)選量不能事先規(guī)定，但可容易地由護(hù)理人員或臨床醫(yī)生確定。可通過來自動物模型的常規(guī)實(shí)驗(yàn)及人類臨床研究，來確定適當(dāng)?shù)牧?。通常，選擇適當(dāng)量的雙膦酸鹽以獲得骨吸收抑制效果，即給予骨吸收抑制量的雙膦酸鹽。對人類來說，雙膦酸鹽的有效口服劑量通常是約1.5至約6000μg/kg體重，優(yōu)選約10至約2000μg/kg體重。對于三水合阿侖膦酸鹽一鈉來說，常給予人類的劑量通常在約2mg/天至約40mg/天的范圍內(nèi)，優(yōu)選5mg/天至約40mg/天。美國目前批準(zhǔn)的三水合阿侖膦酸鹽一鈉劑量是，5mg/天用于預(yù)防骨質(zhì)疏松癥，10mg/天用于治療骨質(zhì)疏松癥，40mg/天用于治療佩吉特病。
在另外的劑量給藥方案中，雙膦酸鹽可每隔一段時間給予而不是每天給予，例如每星期一次給藥、每星期兩次給藥、兩個星期一次給藥、每月兩次給藥。在每星期一次的劑量給藥方案中，三水合阿侖膦酸鹽一鈉可按35mg/星期或70mg/星期的劑量給予。
“選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑”指干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，而不論其機(jī)理。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于雌激素、孕激素、雌二醇、屈洛昔芬、雷洛昔芬、拉索昔芬、TSE-424、他莫昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟維司群、2，2-二甲基丙酸4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)-苯基酯、4，4′-二羥基二苯甲酮-2，4-二硝基苯腙和SH646。
“雌激素受體β調(diào)節(jié)劑”是選擇性激動或拮抗雌激素受體β(ERβ)的化合物。激動ERβ通過ERβ介導(dǎo)的事件來增加色氨酸羥化酶(TPH，5-羥色胺合成的關(guān)鍵酶)基因的轉(zhuǎn)錄。雌激素受體β激動劑的實(shí)例可見于PCT國際出版物WO 01/82923(2001年11月8日出版)和WO02/41835(2002年5月20日出版)，這兩個出版物通過引用整體結(jié)合到本文中。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”指干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物，而不論其機(jī)理。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括非那雄胺和其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和乙酸阿比特龍。
“破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶的抑制劑”指發(fā)現(xiàn)于破骨細(xì)胞的尖端膜、據(jù)報告在骨吸收過程中起到重要作用的ATP酶的抑制劑。此質(zhì)子泵代表引人注目的靶標(biāo)，以供設(shè)計(jì)可潛在地用于治療和預(yù)防骨質(zhì)疏松癥及相關(guān)代謝疾病的骨吸收抑制劑。參見C.Farina等，“Selective inhibitors ofthe osteoclast vacuolar proton ATPase as novel bone antiresorptive agents，”DDT，4163-172(1999))，其通過引用整體結(jié)合到本文中。
“HMG-CoA還原酶抑制劑”指3-羥基-3-甲基戊二酰-CoA還原酶的抑制劑?？墒褂帽绢I(lǐng)域公知的測定法容易地鑒定出對HMG-CoA還原酶具有抑制活性的化合物。例如參見美國專利第4,231,938號col.6和WO 84/02131第30-33頁所描述或引用的測定法。術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”和“HMG-CoA還原酶的抑制劑”在本文中使用時具有相同的含義。
可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實(shí)例包括但不限于洛伐他汀(MEVACOR；參見美國專利第4,231,938號、第4,294,926號和第4,319,039號)、辛伐他汀(ZOCOR；參見美國專利第4,444,784號、4,820,850號和第4,916,239號)、普伐他汀(PRAVACHOL；參見美國專利第4,346,227號、第4,537,859號、第4,410,629號、第5,030,447號和第5,180,589號)、氟伐他汀(LESCOL；參見美國專利第5,354,772號、第4,911,165號、第4,929,437號、第5,189,164號、第5,118,853號、第5,290,946號和第5,356,896號)、阿托伐他汀(LIP1TOR；參見美國專利第5,273,995號、第4,681,893號、第5,489,691號和第5,342,952號)和西立伐他汀(也稱為利伐他汀和BAYCHOL；參見美國專利第5,177,080號)?？稍诒痉椒ㄖ惺褂玫倪@些和另外的HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式描述于M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry & Industry，第85-89頁(1996年2月5日)中的第87頁以及美國專利第4,782,084號和第4,885,314號。本文所用的術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”包括具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的所有藥物可接受的內(nèi)酯和開放酸形式(即內(nèi)酯環(huán)開放形成游離酸的情況)以及鹽和酯形式，因此這種鹽、酯、開放酸和內(nèi)酯形式包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。以下結(jié)構(gòu)I和II顯示內(nèi)酯部分及其相應(yīng)的開放酸形式的例證。
內(nèi)酯 開放酸III在可存在開放酸形式的HMG-CoA還原酶抑制劑中，可優(yōu)選從開放酸形成鹽和酯形式，所有這種形式均包括在本文所用術(shù)語“HMG-CoA還原酶抑制劑”的含義范圍內(nèi)。優(yōu)選HMG-CoA還原酶抑制劑選自洛伐他汀和辛伐他汀，最優(yōu)選辛伐他汀。在本文中，術(shù)語“藥物可接受的鹽”涉及HMG-CoA還原酶抑制劑時應(yīng)意指本發(fā)明所采用的化合物的無毒鹽，通常所述無毒鹽通過使游離酸與合適的有機(jī)或無機(jī)堿反應(yīng)來制備，特別是由陽離子例如鈉、鉀、鋁、鈣、鋰、鎂、鋅和四甲基銨形成的無毒鹽，以及由例如以下的胺形成的無毒鹽氨、乙二胺、N-甲基葡糖胺、賴氨酸、精氨酸、尿氨酸、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、1-p-氯芐基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪和三(羥甲基)氨基甲烷。HMG-CoA還原酶抑制劑的鹽形式的進(jìn)一步實(shí)例可包括但不限于乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、乙二胺四乙酸鈣、樟磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、克拉維酸鹽、檸檬酸鹽、二氫氯化物、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰對氨苯基胂酸鹽、己基間苯二酚(hexylresorcinate)、海巴明、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥萘酸鹽、碘化物、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、粘液酸鹽(mucate)、萘磺酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽(pamaote)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽(panthothenate)、磷酸鹽/二磷酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、單寧酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽、甲苯磺酸鹽、三乙碘化物(triethiodide)和戊酸鹽。
本文所述的HMG-CoA還原酶抑制劑化合物的酯衍生物可當(dāng)作藥物前體，其當(dāng)吸收到溫血動物的血流中時，可裂解而釋放出藥物形式，并允許藥物提供改進(jìn)的治療功效。
如上所用的“整聯(lián)蛋白受體拮抗劑”指選擇性拮抗、抑制或抵消生理配體與ανβ3整聯(lián)蛋白的結(jié)合的化合物，指選擇性拮抗、抑制或抵消生理配體與ανβ5整聯(lián)蛋白的結(jié)合的化合物，指拮抗、抑制或抵消生理配體與ανβ3整聯(lián)蛋白和ανβ5整聯(lián)蛋白兩者的結(jié)合的化合物，和指拮抗、抑制或抵消在毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的具體整聯(lián)蛋白活性的化合物。該術(shù)語也指ανβ6、ανβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語還指ανβ3、ανβ5、ανβ6、ανβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任何組合的拮抗劑。H.N.Lode和同事在PNASUSA 961591-1596(1999)中評述了在根除自發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移中抗血管生成αν整聯(lián)蛋白拮抗劑和腫瘤特異性抗體-細(xì)胞因子(白介素-2)融合蛋白之間的協(xié)同效應(yīng)。他們的結(jié)果暗示此組合對癌癥和轉(zhuǎn)移性腫瘤生長的治療具有潛力。ανβ3整聯(lián)蛋白受體拮抗劑通過與所有現(xiàn)有藥物完全不同的新機(jī)理抑制骨吸收。整聯(lián)蛋白是介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞相互作用和細(xì)胞-基質(zhì)相互作用的異型二聚跨膜黏著受體。α和β整聯(lián)蛋白亞單位以非共價方式相互作用，并以二價陽離子依賴性方式結(jié)合胞外基質(zhì)配體。破骨細(xì)胞上最豐富的整聯(lián)蛋白是ανβ3(＞107/破骨細(xì)胞)，其在對細(xì)胞遷移和極化重要的細(xì)胞骨架組構(gòu)中似乎起限速作用。ανβ3拮抗作用選自抑制骨吸收、抑制再狹窄、抑制黃斑變性、抑制關(guān)節(jié)炎及抑制癌癥和轉(zhuǎn)移性生長。
“成骨細(xì)胞合成代謝劑”指造骨的藥物，如PTH。已顯示間歇給予甲狀旁腺素(PTH)或其氨基末端片段和類似物可在動物和人類中預(yù)防、阻止、部分逆轉(zhuǎn)骨損失并刺激骨形成。有關(guān)討論參考D.W.Dempster等，“Anabolic actions of parathyroid hormone on bone，”Endocr Rev 14690-709(1993)。研究已證明甲狀旁腺素刺激骨形成從而增加骨質(zhì)量和強(qiáng)度中的臨床效果。結(jié)果由RM Neer等報告于New Eng J Med 3441434-1441(2001)。
此外，甲狀旁腺素相關(guān)蛋白片段或類似物如PTHrP-(1-36)已顯示有效的抗鈣尿作用[參見M.A.Syed等，“Parathyroid hormone-relatedprotein-(1-36)stimulates renal tubular calcium reabsorption in normalhuman volunteersimplications for the pathogenesis of humoralhypercalcemia of malignancy，”JCEM 861525-1531(2001)]，也可能具有作為合成代謝劑用于治療骨質(zhì)疏松癥的潛力。
如果配制為固定劑量，這種組合產(chǎn)物采用下述劑量范圍內(nèi)的本發(fā)明化合物和批準(zhǔn)劑量范圍內(nèi)的其他藥物活性劑。或者當(dāng)組合制劑不適合時，本發(fā)明化合物可替代性順次與已知藥物可接受的藥物一起使用。
術(shù)語“給予”或其語法變體(例如化合物的“給予”)當(dāng)涉及本發(fā)明化合物時，意指將所述化合物或所述化合物的前體藥物引入到需要治療的動物系統(tǒng)中。當(dāng)本發(fā)明化合物或其藥物前體與一種或多種其他活性劑(例如細(xì)胞毒性劑等)組合提供時，“給予”或其語法變體應(yīng)各自理解為包括同時和順次引入所述化合物或其藥物前體及其他藥物。本發(fā)明將本發(fā)明化合物的藥物前體包括在其范圍中。一般來說，這種藥物前體是本發(fā)明化合物的功能衍生物，其在體內(nèi)可容易轉(zhuǎn)化地成所需的化合物。因此，在本發(fā)明的治療方法中，術(shù)語“給予”應(yīng)涵括用具體公開的化合物或者用可能未具體公開、但在給予患者后在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為指定化合物的化合物來治療所述各種病癥。合適的前體藥物衍生物的常規(guī)選擇和制備方法描述于例如“Design of Prodrugs，”H.Bundgaard編輯，Elsevier，1985，其通過引用整體結(jié)合到本文中。這些化合物的代謝物包括本發(fā)明化合物引入到生物環(huán)境中時所產(chǎn)生的活性物質(zhì)。
本文所用的術(shù)語“組合物”意在涵括包含指定量的指定成分的產(chǎn)品，以及直接或間接由指定量的指定成分的組合產(chǎn)生的任何產(chǎn)品。
本文所用的術(shù)語“治療有效量”意指在組織、系統(tǒng)、動物或人類中引起研究者、獸醫(yī)、內(nèi)科醫(yī)生及其他臨床醫(yī)生所尋求的生物或醫(yī)療反應(yīng)的活性化合物或藥物量。
本文所用的術(shù)語“治療”疾病包括預(yù)防疾病，也就是使疾病的臨床癥狀不在可能暴露于或易患上所述疾病、但尚未經(jīng)歷或顯示所述疾病癥狀的哺乳動物中發(fā)展；抑制疾病，也就是阻止或減少所述疾病或其臨床癥狀的發(fā)展；或者減輕疾病，也就是使疾病或其臨床癥狀減退。
本文所用的術(shù)語“骨吸收”指破骨細(xì)胞降解骨的過程。
本發(fā)明還涵括可用于治療骨質(zhì)疏松癥或其他骨病的藥物組合物，所述治療包括治療有效量的本發(fā)明化合物與或不與藥物可接受的載體或稀釋劑一起給予。合適的本發(fā)明組合物包括水溶液劑，所述水溶液劑包含本發(fā)明化合物和藥理上可接受的載體如鹽水，pH水平例如為7.4。溶液劑可通過局部團(tuán)注引入到患者的血流中。
當(dāng)本發(fā)明化合物給予人類對象時，日劑量通常由處方醫(yī)師確定，所述劑量往往根據(jù)個體患者的年齡、體重和反應(yīng)以及患者癥狀的嚴(yán)重程度而變化。
在一個示例性應(yīng)用中，給予進(jìn)行組織蛋白酶依賴性病癥治療的哺乳動物合適量的化合物。本發(fā)明的口服劑量當(dāng)用以獲得所指明的效果時，往往在約0.01mg每公斤體重每天(mg/kg/天)至約100mg/kg/天的范圍內(nèi)，優(yōu)選0.01至10mg/kg/天，最優(yōu)選0.1至5.0mg/kg/天。對于口服給藥，組合物優(yōu)選以含0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100和500毫克的活性成分的片劑形式提供，以根據(jù)待治療患者的癥狀來調(diào)整劑量。藥物通常含有約0.01mg至約500mg的活性成分，優(yōu)選約1mg至約100mg的活性成分。在靜脈內(nèi)恒速輸注過程中，最優(yōu)選的劑量往往在約0.1至約10mg/kg/分鐘之間。本發(fā)明化合物可有利地以單一日劑量給予，或者可以以每天兩次、三次或四次的分劑量給予總?cè)談┝?。此外，?yōu)選用于本發(fā)明的化合物可以通過局部使用合適的鼻內(nèi)介質(zhì)以鼻內(nèi)形式給予，或者使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的透皮貼劑形式通過透皮途徑給予。以透皮遞送系統(tǒng)的形式給藥，在劑量方案中給藥量當(dāng)然是連續(xù)的而不是間歇的。
本發(fā)明化合物可與其他用于治療組織蛋白酶介導(dǎo)病癥的藥物組合使用。這種組合的單個成分可在治療過程中的不同時間單獨(dú)給予，或者以分開的或單一的組合形式同時給予。因此，本發(fā)明應(yīng)理解為包括所有這種同時或交替治療方案，而術(shù)語“治療”也應(yīng)作相應(yīng)理解。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明化合物與其他用于治療組織蛋白酶介導(dǎo)病癥的藥物的組合范圍，原則上包括與任何用于治療雌激素機(jī)能相關(guān)病患的藥物組合物的任何組合。
因此，本發(fā)明的范圍涵括本發(fā)明要求保護(hù)的化合物與選自以下的第二藥物組合的用途有機(jī)雙膦酸鹽；雌激素受體調(diào)節(jié)劑；雄激素受體調(diào)節(jié)劑；破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑；HMG-CoA還原酶抑制劑；整聯(lián)蛋白受體拮抗劑；成骨細(xì)胞合成代謝劑如PTH；及它們的藥物可接受鹽和混合物。
由本文所包含的教導(dǎo)，本發(fā)明的這些和其他方面將變得顯而易見。
定義本發(fā)明化合物可具有不對稱中心、手性軸和手性平面(見E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，John Wiley & Sons，New York，1994，第1119-1190頁的描述)，因此以外消旋物、外消旋混合物和以單個非對映異構(gòu)體形式出現(xiàn)，其所有可能的異構(gòu)體和混合物(包括旋光異構(gòu)體)均包括在本發(fā)明中。此外，本文公開的化合物可以以互變異構(gòu)體形式存在，盡管只圖示了一種互補(bǔ)異構(gòu)體結(jié)構(gòu)，但本發(fā)明范圍意在涵括兩種互變異構(gòu)體形式。例如，對以下化合物A的任何權(quán)利要求應(yīng)理解為包括互變異構(gòu)體結(jié)構(gòu)B，反之亦然，并包括它們的混合物。
當(dāng)任何變量(例如R1、R2、Ra等)在任何結(jié)構(gòu)成分中出現(xiàn)不只一次時，其每次出現(xiàn)時的定義獨(dú)立于其他每次出現(xiàn)時的定義。而且，取代基和變量的組合只有在這種組合導(dǎo)致產(chǎn)生穩(wěn)定化合物時才是允許的。從取代基畫入環(huán)狀系統(tǒng)中的線表示所示鍵可連接到任何可取代的環(huán)碳原子。如果環(huán)狀系統(tǒng)是多環(huán)，意指所述鍵只連接到最接近的環(huán)上的任何合適碳原子。
應(yīng)當(dāng)理解，可由本發(fā)明普通技術(shù)人員選擇本發(fā)明化合物上的取代基和取代模式，以提供化學(xué)上穩(wěn)定且可容易地通過本領(lǐng)域公知的技術(shù)及下文所述方法從容易獲得的原料合成的化合物。如果取代基本身被不只一個基團(tuán)取代，應(yīng)當(dāng)理解為這些多個基團(tuán)可在同一碳上或在不同的碳上，只要產(chǎn)生穩(wěn)定結(jié)構(gòu)即可。語句“任選被一個或多個取代基取代”應(yīng)被認(rèn)為等同于語句“任選被至少一個取代基取代”，在這種情況下，優(yōu)選的實(shí)施方案有零至三個取代基。
本文所用的“烷基”意指具有一個至十個碳原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴基，除非另有規(guī)定。例如，“C1-C10烷基”中的C1-C10定義為包括具有直鏈、支鏈或環(huán)狀排列的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個碳的基團(tuán)。例如，“C1-C10烷基”具體包括甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。
“烷氧基”或“烷基氧基”表示如上定義的烷基(除非另有規(guī)定)，其中所述烷基通過氧橋連接。烷氧基的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基等。
術(shù)語“環(huán)烷基”或“碳環(huán)”應(yīng)指含三個至八個總碳原子(除非另有規(guī)定)或者此范圍中任何數(shù)目碳原子的烷烴的環(huán)(即環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基)。
術(shù)語“烯基”如果沒有指明碳原子數(shù)目，是指含2-10個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈非芳族烴基。優(yōu)選存在1個碳-碳雙鍵，最多可存在4個非芳族碳-碳雙鍵。因此，“C2-C6烯基”意指具有2-6個碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基和環(huán)己烯基。如上對烷基所述，烯基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可含有雙鍵，如果指明是取代烯基，則可被取代。
在某些情況下，取代基可用包括零在內(nèi)的碳范圍定義，如(C0-C6)亞烷基-芳基。如果芳基認(rèn)為是苯基，此定義將包括苯基本身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
本文所用的“芳基”意指每個環(huán)中最多有12個原子的任何穩(wěn)定單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)，其中至少一個環(huán)是芳環(huán)。這種芳基成分的實(shí)例包括苯基、萘基、四氫萘基、二氫化茚基、聯(lián)苯基、菲基、蒽基或苊基(acenaphthyl)。在其中芳基取代基是雙環(huán)且有一個環(huán)是非芳環(huán)的情況下，應(yīng)理解為通過芳環(huán)連接。
本文所用的術(shù)語“雜芳基”表示每個環(huán)中最多有10個原子的穩(wěn)定單環(huán)、雙環(huán)或三環(huán)，其中至少有一個環(huán)是芳環(huán)且含有1-4個選自O(shè)、N和S的雜原子。此定義范圍內(nèi)的雜芳基包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并噻吩基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、肉啉基、呋喃基、二氫吲哚基、吲哚基、中氮茚基(indolazinyl)、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘吡啶基、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并唑基、二氫吲哚基、二氫喹啉基、亞甲二氧基苯、苯并噻唑基、苯并噻吩基、喹啉基、異喹啉基、唑基和四氫喹啉。在雜芳基取代基是雙環(huán)且有一個環(huán)是非芳環(huán)或不含雜原子的情況下，應(yīng)理解為分別通過芳環(huán)或通過含雜原子的環(huán)連接。如果雜芳基含有氮原子，應(yīng)理解為此定義也涵括其相應(yīng)的N氧化物。
本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)識到，本文所用的“鹵代”或“鹵素”意在包括氯、氟、溴和碘。術(shù)語“酮基”意指羰基(C＝O)。
術(shù)語“鹵代烷基”意指如上定義的烷基(除非另有規(guī)定)，其被一個至五個、優(yōu)選一個至三個鹵素取代。代表性的實(shí)例包括但不限于三氟甲基、二氯乙基等。
術(shù)語“鹵代烷氧基”表示-OR基團(tuán)，其中R是如上定義的烷基，其被一個至五個、優(yōu)選一個至三個鹵素取代。代表性的實(shí)例包括但不限于三氟甲氧基、二氯乙氧基等。
術(shù)語“芳基烷基”包括其中烷基如上定義的烷基部分，包括其中芳基如上定義的芳基部分。芳基烷基的實(shí)例包括但不限于芐基、氟芐基、氯芐基、苯基乙基、苯基丙基、氟苯基乙基和氯苯基乙基。烷基芳基的實(shí)例包括但不限于甲苯基、乙基苯基和丙基苯基。
本文所用的術(shù)語“雜芳基烷基”應(yīng)指包括其中雜芳基如上定義的雜芳基部分和包含烷基部分的系統(tǒng)。雜芳基烷基的實(shí)例包括但不限于噻吩基甲基、噻吩基乙基、噻吩基丙基、吡啶基甲基、吡啶基乙基和咪唑基甲基。
術(shù)語“環(huán)烷基烷基”包括其中烷基如上定義的烷基部分，也包括其中環(huán)烷基如上定義的環(huán)烷基部分。環(huán)烷基烷基的實(shí)例包括但不限于環(huán)丙基甲基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基甲基、環(huán)丙基乙基等。
術(shù)語“雜環(huán)烷基烷基”包括其中烷基如上定義的烷基部分及包括其中雜環(huán)烷基如上定義的雜環(huán)烷基部分。雜環(huán)烷基烷基的實(shí)例包括但不限于嗎啉基甲基、哌嗪基甲基、吡咯烷基甲基等。
術(shù)語“羥基烷基”意指被一個或兩個羥基取代的含一個至六個碳原子的直鏈單價烴基或含三個至六個碳的支鏈單價烴基，條件是如果存在兩個羥基，兩者不在同一碳原子上。代表性的實(shí)例包括但不限于羥基甲基、2-羥基乙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基等。
本文所用的術(shù)語“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”意指含有1-4個選自O(shè)、N、S、SO或SO2的雜原子的5元至10元非芳環(huán)(除非另有規(guī)定)，包括雙環(huán)基團(tuán)。因此，“雜環(huán)基”包括但不限于以下哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、四氫吡喃基、二氫哌啶基、四氫噻吩基等。如果雜環(huán)含有氮，應(yīng)當(dāng)理解為此定義也涵括其相應(yīng)的N氧化物。
本發(fā)明還包括式I化合物的N氧化物衍生物和被護(hù)衍生物。例如，當(dāng)式I化合物含有可氧化的氮原子時，所述氮原子可通過本領(lǐng)域公知的方法轉(zhuǎn)化成N氧化物。同樣當(dāng)式I化合物含有諸如羥基、羧基、巰基或任何含氮原子基團(tuán)的基團(tuán)時，這些基團(tuán)可用合適的保護(hù)基保護(hù)。合適的保護(hù)基的詳盡列表可在T.W.Greene，Protective Groups inOrganic Synthesis，John Wiley & Sons，Inc.1981中找到，該文獻(xiàn)公開內(nèi)容通過引用整體結(jié)合到本文中。式I化合物的被護(hù)衍生物可通過本領(lǐng)域公知的方法制備。
每當(dāng)術(shù)語“烷基”或“芳基”或它們的前綴詞根(prefix root)的任一個在取代基名稱(例如芳基C0-8烷基)中出現(xiàn)時，其應(yīng)當(dāng)被理解為包括以上給出的對“烷基”和“芳基”的限制。碳原子的指定數(shù)目(例如C1-10)應(yīng)獨(dú)立地指烷基或環(huán)狀烷基部分中的碳原子數(shù)目，或者指其中烷基作為其前綴詞根出現(xiàn)的更大取代基的烷基部分中的碳原子數(shù)目。
本發(fā)明化合物的藥物可接受的鹽包括發(fā)明化合物與無機(jī)或有機(jī)酸形成的常規(guī)無毒鹽。例如，常規(guī)無毒鹽包括衍自無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等的鹽，以及從有機(jī)酸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、雙羥萘酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羥乙磺酸、三氟乙酸等制備的鹽。Berg等，“Pharmaceutical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977661-19更全面地描述了上述藥物可接受的鹽和其他典型的藥物可接受的鹽的制備，該文獻(xiàn)通過引用結(jié)合到本文中?？赏ㄟ^常規(guī)化學(xué)方法，從含有堿性或酸性部分的本發(fā)明化合物合成本發(fā)明化合物的藥物可接受的鹽。一般來說，堿性化合物的鹽通過離子交換色譜來制備，或者通過在合適的溶劑或各種溶劑組合中使游離堿與化學(xué)計(jì)量量的或過量的所需成鹽無機(jī)或有機(jī)酸反應(yīng)來制備。類似地，通過與適當(dāng)?shù)臒o機(jī)或有機(jī)堿反應(yīng)，形成酸性化合物的鹽。
對于本說明書的目的，以下縮寫具有指明的含義Ba(OH)2＝氫氧化鋇BuLi＝丁基鋰CDI＝羰基二咪唑CrO3＝氧化鉻DMF＝N，N-二甲基甲酰胺EDC＝乙基二乙氨基丙基碳二亞胺Et3N＝三乙胺EtOH＝乙醇HATU＝六氟磷酸 o-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基尿HCl＝鹽酸H5IO6＝高碘酸KHMDS＝六甲基硅氮烷鉀LDA＝二異丙基氨基鋰
LiCl＝氯化鋰MeOH＝甲醇NaBH4＝硼氫化鈉NaI＝碘化鈉NaCNBH3＝氰基硼氫化鈉Na2CO3＝碳酸鈉NaHCO3＝碳酸氫鈉NaOH＝氫氧化鈉Na2HPO4＝磷酸二氫鈉NaHSO3＝亞硫酸氫鈉NH4Cl＝氯化銨Pd/C＝披鈀碳PdCl2(dppf)＝[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯合鈀(II)PG＝保護(hù)基iPr2EtN＝二異丙基乙銨PyBOP＝六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷基)rt＝室溫sat.aq.＝飽和水溶液SiO2＝二氧化硅THF＝四氫呋喃TiCl4＝氯化鈦(IV)tlc＝薄層層析Me＝甲基Et＝乙基n-Pr＝正丙基i-Pr＝異丙基n-Bu＝正丁基i-Bu＝異丁基
s-Bu＝仲丁基t-Bu＝叔丁基本發(fā)明的新化合物可按以下一般方法使用適當(dāng)?shù)脑蟻碇苽?，并由以下具體實(shí)施例進(jìn)一步例證。但是，實(shí)施例中舉例說明的化合物不應(yīng)被解釋為組成只被認(rèn)為是本發(fā)明的屬類。以下實(shí)施例進(jìn)一步說明制備本發(fā)明化合物的細(xì)節(jié)。本領(lǐng)域技術(shù)人員會容易理解到，可使用以下制備方法的條件和過程的已知變化，來制備這些化合物。除非另有指明，所有溫度均為攝氏度。
方案本發(fā)明化合物可按下述方案1制備。這樣，可將α-氨基酯加入到鹵代烷基酮，形成縮醛胺，其在脫水劑如TiCl4、MgSO4或三氟乙酸異丙酯存在下可脫水成亞胺。用還原劑如氰基硼氫化鈉或硼氫化鈉還原亞胺得到胺。或者，在這個還原反應(yīng)中可使用手性催化劑，以在R4立體中心產(chǎn)生適當(dāng)?shù)氖中?。酯水解及用適當(dāng)取代的氨基乙腈形成酰胺，獲得酰胺衍生物。如果D系統(tǒng)上的取代基是鹵素，用適當(dāng)?shù)呐鹚徇M(jìn)行鈀催化的Suzuki偶聯(lián)，得到本發(fā)明另外的化合物。
方案1 本發(fā)明化合物也可按下述方案2制備。酮或醛(或其半縮醛)可與氨基醇縮合，產(chǎn)生環(huán)狀縮醛胺。用3當(dāng)量的格氏試劑或有機(jī)鋰試劑處理，可獲得適當(dāng)烷基化的氨基醇。所述醇用鉻系統(tǒng)如瓊斯氧化或H5IO6/CrO3來氧化，或者通過兩步氧化(例如草酰氯/DMSO/Et3N，然后NaClO)，可獲得相應(yīng)的羧酸。如方案1所述進(jìn)行肽偶聯(lián)和Suzuki反應(yīng)，可獲得本發(fā)明的化合物。
方案2 本發(fā)明化合物也可按下述方案3制備。半縮醛可與其中醇部分用合適保護(hù)基保護(hù)的氨基醇縮合。所得亞胺用格氏試劑或有機(jī)鋰試劑處理，可獲得適當(dāng)烷基化的氨基醇。然后可除去醇保護(hù)基，所述醇可通過方案2所述的方法，或者通過首先進(jìn)行Suzuki反應(yīng)，然后用H5IO6/CrO3氧化所述醇和接著進(jìn)行肽偶聯(lián)，來轉(zhuǎn)化成本發(fā)明化合物。
方案3 可如方案4所述制備用以產(chǎn)生本發(fā)明化合物的甲酰胺-芳基溴。用堿如LDA或KHMDS處理溴苯基乙腈，然后用烷基鹵如甲基碘或1-溴-2-氯乙烷處理，產(chǎn)生α-取代的芐腈?；蛘撸稍谙噢D(zhuǎn)移條件下，使用氫氧化鈉、烷基鹵和合適的相轉(zhuǎn)移催化劑如氯化芐基三乙基銨，進(jìn)行此烷基化反應(yīng)。腈在堿性條件下水解，獲得相應(yīng)的羧酸，其可用適當(dāng)?shù)呐悸?lián)試劑如EDC、CDI、HATU、pyBOP或氯甲酸異丁酯與氨或伯胺或仲胺偶聯(lián)?？砂捶桨?所述使此取代的芳基溴與芳基硼酸頻哪醇酯(arylboron pinacolate)偶聯(lián)，產(chǎn)生本發(fā)明化合物。另外，芳基溴本身可通過與二硼酸二頻哪醇酯(bis(pinacolato)diboron)進(jìn)行鈀催化的反應(yīng)轉(zhuǎn)化成芳基硼酸頻哪醇酯。所得的此芳基硼酸頻哪醇酯可用于方案1、2或3所示的Suzuki偶聯(lián)反應(yīng)中，獲得本發(fā)明化合物。
方案4 可按方案5合成4-氟亮氨醇(4-fluoroleucinol)。4，5-脫水亮氨酸可如以下方案所述轉(zhuǎn)化成(4S)-4-(2-甲基丙-2-烯基)-1，3-唑啉-2-酮。然后用氫氟化試劑如HF-吡啶處理此中間體，產(chǎn)生(4S)-4-(2-氟-2-甲基丙基)-1，3-唑啉-2-酮。然后進(jìn)行堿水解(即Ba(OH)2或NaOH)，得到(2S)-2-氨基-4-氟-4-甲基戊-1-醇，其可如方案2所示進(jìn)行使用。選擇性保護(hù)該醇，得到可用于方案3的中間體。
方案5 用于本發(fā)明的氨基醇也可按方案6合成。在溶劑如EtOH或混合溶劑系統(tǒng)如EtOH/THF中，在有或沒有添加劑如LiCl下，用還原劑如NaBH4還原被護(hù)氨基酸。然后根據(jù)保護(hù)基的特性，用適當(dāng)?shù)姆椒ǔケＷo(hù)基。然后可將氨基醇甲硅烷基化，以供在方案3中使用。或者，所述醇可在胺的去保護(hù)之前進(jìn)行甲硅烷基化，然后再除去正交(orthogonal)胺保護(hù)基。
方案6 本發(fā)明化合物也可按下述方案7制備。適當(dāng)N保護(hù)的氨基酸衍生物與甲苯磺酸氧雜環(huán)丁烷酯在合適的有機(jī)溶劑如二甲基甲酰胺中在碘化鈉存在下反應(yīng)，得到相應(yīng)的氧雜環(huán)丁烷酯，其用乙硼烷處理時得到原酸酯。除去氨基保護(hù)基，獲得胺，其在上述反應(yīng)條件下與式R4CHO的醛或式R4C(OH)(OR)的半縮醛(其中R是烷基)縮合，得到亞胺。在上述反應(yīng)條件下用格氏試劑或有機(jī)鋰試劑處理亞胺，得到N-烷基化的衍生物。除去原酸酯，得到相應(yīng)的羧酸，其然后如方案1所述轉(zhuǎn)化成本發(fā)明化合物。
方案7 本發(fā)明化合物也可如方案8所示來制備。含適當(dāng)?shù)腞1、R2、R3和R4基團(tuán)的芳基鹵可與二硼酸二頻哪醇酯偶聯(lián)，產(chǎn)生芳基頻哪醇酯(aryl pinacolate)。后者可在Suzuki條件下與含酰胺的芳基溴偶聯(lián)，得到本發(fā)明化合物?；蛘?，此芳基頻哪醇酯可在Suzuki條件下與含羧酸芳基溴偶聯(lián)，所得的酸隨后與合適的胺偶聯(lián)，得到本發(fā)明化合物。
方案8 方案1、2和7所示的鹵素-D-CH(R4)NHCH(R3)COOH形式的羧酸也可如方案9所示來制備。適當(dāng)取代的芐基溴、芐基碘或三氟甲磺酸芐酯(其可以是手性的或外消旋的)可在堿性條件下與α-氨基酯偶聯(lián)。然后用堿水溶液水解得到酸，其可轉(zhuǎn)化成本發(fā)明的實(shí)例。
方案9
實(shí)施例1N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺的合成 步驟11-溴-4-(溴甲基)-2-氟苯的制備向4-溴-3-氟甲苯(10.6g)的四氯化碳(150mL)溶液(室溫)中加入過氧化苯甲酰(100mg)和N-溴琥珀酰亞胺(10g)。在80℃下加熱混合物(同時光照)，保持4小時。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃。濾過Celite，用己烷洗滌，真空除去溶劑。粗物質(zhì)在SiO2上用己烷進(jìn)行色譜純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物，含～30％的1-溴-4-(二溴甲基)-2-氟苯雜質(zhì)。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.66-7.10(1H，m)，7.42(1H，d)，7.29(1H，d)，4.66(2H，s).
步驟2(4-溴-3-氟苯基)甲醇的制備向步驟1所得的1-溴-4-(溴甲基)-2-氟苯(11.8g)的DMF(150mL)溶液(室溫)中加入乙酸鈉(10.8g)。在80℃下加熱混合物，保持16小時。將混合物冷卻至室溫，倒入冰和飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)中，用二乙醚(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。粗物質(zhì)在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶25-1∶10)進(jìn)行色譜純化，產(chǎn)生乙酸4-溴-3-氟芐酯(含約15％的4-溴-3-氟苯甲醛)。殘余物溶于甲醇(100mL)中，在0℃下冷卻，加入甲醇鈉(250mg)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時。將其冷卻至0℃，加入硼氫化鈉(1.5g)。在0℃下攪拌1小時后，倒入冰和飽和氯化銨水溶液(200mL)中。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶5-1∶3)進(jìn)行色譜純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.55-7.65(1H，m)，7.28(1H，d)，7.15(1H，d)，4.63(2H，d)，4.50(1H，t).
步驟3(4-溴-3-氟苯基)乙腈的制備向步驟2所得的(4-溴-3-氟苯基)甲醇(7.2g)和三乙胺(5.9mL)的二氯甲烷(300mL)溶液(-78℃)中慢慢加入甲磺酰氯(3.0mL)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌1小時。然后倒入冰和飽和氯化銨水溶液(200mL)中，進(jìn)行分配。水層用二氯甲烷(1×150mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物溶于DMF(150mL)，加入氰化鈉(5.1g)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時后，倒入冰和水(100mL)中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶10-1∶5)進(jìn)行色譜純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.70-7.78(1H，m)，7.39(1H，d)，7.28(1H，d)，4.09(2H，s).
步驟41-(4-溴-3-氟苯基)-環(huán)丙基甲腈的制備向步驟3所得的(4-溴-3-氟苯基)乙腈(6.4g)于7.5mL氫氧化鈉溶液(50％于水中W/W)中的溶液(室溫)中加入1-溴-2-氯乙烷(4.0mL)和氯化芐基三乙基銨(204mg)?；旌衔镌?0℃下加熱，保持5小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(200mL)萃取。萃取物用水(100mL)、氯化氫(100mL，10％HCl于水中)和鹽水洗滌。然后用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用甲基叔丁基醚和己烷通過快速(swish)純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1HNMR(CD3COCD3)δ7.69-7.73(1H，m)，7.28(1H，d)，7.25(1H，d)，1.80-1.87(2H，m)，1.59-1.65(2H，m).
步驟51-(4-溴-3-氟苯基)-環(huán)丙基甲酸的制備向步驟4所得的1-(4-溴-3-氟苯基)-環(huán)丙基甲腈(4.3g)的乙醇(40mL)溶液(室溫)中加入20mL的氫氧化鈉溶液(25％NaOH于水中W/W)。反應(yīng)混合物在100℃下加熱過夜。將其冷卻至室溫，倒入冰和氯化氫(1N)中，用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用甲基叔丁基醚和己烷通過快速純化，產(chǎn)生標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ10.75-10.98(1H，bs)，7.59-7.65(1H，m)，7.35(1H，d)，7.22(1H，d)，1.58-1.65(2H，m)，1.25-1.32(2H，m).
步驟61-(4-溴-3-氟苯基)-N-環(huán)丙基環(huán)丙烷甲酰胺的制備向步驟5所得的1-(4-溴-3-氟苯基)-環(huán)丙基甲酸(2.0g)的DMF(20mL)溶液(0℃)中加入六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基尿(3.5g)和環(huán)丙胺(1.15mL)。攪拌1分鐘后，滴加二異丙基乙胺(4.3mL)，在室溫下攪拌混合物16小時。將所得混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中，用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用己烷和乙酸乙酯(1∶2-1∶1)進(jìn)行色譜純化，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.59-7.65(1H，m)，7.30(1H，d)，7.20(1H，d)，6.44(1H，bs)，1.44-1.51(2H，m)，1.00-1.09(2H，m)，0.50-0.60(2H，m)，0.30-0.40(2H，m).
步驟7(3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-羥基丁酸芐酯的制備將N-(叔丁氧基羰基)-1-天冬氨酸4-芐酯(30g)溶于二甲氧基乙烷(90mL)中，所得溶液冷卻至-5℃。加入N-甲基嗎啉(10.32mL)，然后慢慢加入氯甲酸異丁酯(12.66mL)，使得反應(yīng)溫度保持在-10℃以下，使混合物老化0.5小時?？焖龠^濾固形物，用二甲氧基乙烷(90mL)洗滌。濾液冷卻至-50℃，慢慢加入硼氫化鈉(4.4g)的水(45mL)溶液，使得反應(yīng)溫度保持在-30℃至-15℃之間。然后加入水(500mL)，使得反應(yīng)混合物溫度保持在-15℃以下。過濾懸浮液，固形物用水(400mL)洗滌，干燥，獲得(3S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-4-羥基丁酸芐酯。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.3-7.45(5H，m)，5.85-5.95(1H，NH)，5.15(2H，s)，3.95-4.1(2H，m)，3.5-3.7(2H，m)，2.55-2.75(2H，m)，1.4(9H，s).
步驟8[(4S)-2-氧代-1，3-唑啉-4-基]乙酸芐酯的制備向步驟7所得的醇(95.7g)的二氯乙烷(925mL)溶液中加入吡啶(625mL)，所得混合物冷卻至0-5℃。加入無水對甲苯磺酸酐(105.7g)，所得混合物升溫至室溫，攪拌1小時后加熱至90℃，保持2小時。將混合物冷卻，用二氯甲烷(1000mL)稀釋，用1N HCl(3×600mL)洗滌。有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷以1∶1比例進(jìn)行色譜純化，然后用乙酸乙酯進(jìn)行色譜純化，得到[(4S)-2-氧代-1，3-唑啉-4-基]乙酸芐酯。
1H NMR(CD3SOCD3) δ7.8(1H，NH)，7.3-7.45(5H，m)，5.05-5.15(2H，m)，4.4-4.5(1H，m)，4.1-4.2(1H，m)，4.0-4.05(1H，m)，3.6-3.8(2H，m).
步驟9(4S)-4-(2-羥基-2-甲基丙基)-1，3-唑啉-2-酮的制備在-20℃下，將溴化甲基鎂(227mL的3M二乙醚溶液)加入到甲苯(340mL)和THF(340mL)的混合物中。然后滴加步驟8所得的酯(40g)的暖THF溶液(170mL)，溫度保持低于-10℃。使混合物老化2小時，然后慢慢加入水(1000mL)和乙酸(200mL)的混合物中，所得混合物在室溫下攪拌2小時。分離水層，有機(jī)層用水(2×200mL)萃取。用二氯甲烷和連續(xù)萃取器從合并的水層萃取產(chǎn)物。用庚烷作為共溶劑將二氯甲烷萃取物蒸發(fā)至干，以共沸除去乙酸。殘余物在SiO2上用乙醇和二氯甲烷(1∶30)進(jìn)行色譜純化，得到(4S)-4-(2-羥基-2-甲基丙基)-1，3-唑啉-2-酮。
1H NMR(CD3COCD3)δ6.1-6.4(1H，NH)，4.45-4.55(1H，m)，4.1-4.2(1H，m)，3.95-4.05(1H，m)，3.7(1H，s)，1.65-1.85(2H，m)，1.25(6H，m).
步驟10(4S)-4-(2-氟-2-甲基丙基)-1，3-唑啉-2-酮的制備將步驟9所得的醇(47.8g)的二氯甲烷溶液(100mL)加入到-70℃下的三氟化(二乙基氨基)硫(48.5g)的二氯甲烷溶液(500mL)中。將混合物升溫至室溫，攪拌1小時。然后將混合物小心加入到飽和NaHCO3水溶液的0℃混合物(800mL)中。分離有機(jī)層，用飽和NaHCO3水溶液洗滌。水層進(jìn)一步用二氯甲烷(100mL)萃取，干燥濃縮合并的二氯甲烷層。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶5)進(jìn)行色譜純化，然后用乙酸乙酯進(jìn)行色譜純化，得到(4S)-4-(2-氟-2-甲基丙基)-1，3-唑啉-2-酮。
1HNMR(CD3SOCD3)δ7.6(1H，NH)，4.4-4.5(1H，m)，3.95-4.05(1H，m)，3.9-3.95(1H，m)，1.8-1.95(2H，m)，1.25-1.4(6H，2s).
步驟11(2S)-2-氨基-4-氟-4-甲基戊-1-醇的制備向步驟10所得的氟衍生物(21.0g)于90％乙醇水溶液(216mL)中的溶液中加入氫氧化鉀(21.9g)。將混合物加熱回流4小時后冷卻至室溫。然后濃縮混合物，用甲苯(3×300mL)共蒸發(fā)。殘余物溶于二氯甲烷(500mL)中，攪拌0.5小時。懸浮液濾過celite，用二氯甲烷(3×100mL)洗滌celite。濾液濃縮至干，獲得(2S)-2-氨基-4-氟-4-甲基戊-1-醇。
1H NMR(CD3OD)δ3.4-3.5(1H，m)，3.2-3.3(1H，m)，3.0-3.1(1H，m)，1.5-1.7(2H，m)，1.35(3H，s)，1.3(3H，s).
步驟12(2S)-1-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-4-氟-4-甲基戊-2-胺的制備將步驟11所得的氨基醇(21.0g)溶于二氯甲烷(300mL)中，所得溶液冷卻至0℃。加入4-(二甲基氨基)吡啶(0.051g)和叔丁基二甲基甲硅烷基氯(21g)，然后加入三乙胺(25mL)?；旌衔镌谑覝叵聰嚢柽^夜。將反應(yīng)混合物慢慢倒入0℃的飽和氯化銨水溶液中，用二氯甲烷(3×300mL)萃取。有機(jī)層用鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，真空除去溶劑，獲得(2S)-1-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-4-氟-4-甲基戊-2-胺。
1HNMR(CD3OD)δ3.6-3.65(1H，m)，3.4-3.5(1H，m)，3.1-3.2(1H，m)，1.6-1.8(2H，m)，1.35-1.45(6H，m)，0.93(9H，s)，0.1(6H，s).
步驟13(2S)-1-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-4-氟-4-甲基-N-[(1E)-2，2，2-三氟亞乙基]戊-2-胺的制備向步驟12所得的胺(31.5g)的苯(126mL)溶液中加入三氟乙醛甲基半縮醛(21.6mL)。將溶液加熱回流過夜，用Dean-Stark汽水閘收集水。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，濃縮至干。殘余物在SiO2上用4％乙酸乙酯/己烷純化，獲得(2S)-1-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}-4-氟-4-甲基戊-2-胺。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.9-7.95(1H，m)，3.75-3.85(1H，m)，3.7-3.75(1H，m)，3.53-3.6(1H，m)，1.9-2.0(2H，m)，1.3-1.4(6H，m)，0.9(9H，s)，0.1(3H，s)，0.05(3H，s).
步驟14(2S)-2-{[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]氨基}-4-氟-4-甲基戊-1-醇的制備向1，4-二溴苯(0.26g)的THF(4mL)溶液(-75℃)加入n-BuLi(0.42mL的2.5M己烷溶液)，使混合物老化20分鐘。加入步驟13所得的亞胺(0.329g)的THF(2mL)溶液，使混合物老化2小時。然后將混合物加入到水(50mL)、NH4Cl(1g)和碎冰的混合物中。用乙酸乙酯(2×25mL)萃取，合并的乙酸乙酯層干燥并蒸發(fā)至干。
用1，4-二溴苯(1.2g)、n-BuLi(1.84mL)和亞胺(1.38g)以更大的規(guī)模重復(fù)相同的程序，反應(yīng)混合物如上進(jìn)行處理。合并兩次制備所得的殘余物，溶于THF(10mL)中并冷卻至0℃。加入氟化四正丁基銨(1MTHF溶液取6mL)，混合物在+5℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(50mL)、氯化銨(1g)和碎冰的混合物中，分離有機(jī)層。水層進(jìn)一步用乙酸乙酯(2×15mL)萃取，干燥并濃縮合并的有機(jī)層。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶5)純化，獲得(2S)-2-{[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]氨基}-4-氟-4-甲基戊-1-醇。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.65(2H，m)，7.5(2H，m)，4.5-4.6(1H，m)，3.8(1H，m)，3.6(1H，m)，3.3-3.4(1H，m)，2.85-2.0(1H，m)，2.55(1H，m)，1.7-1.9(2H，s)，1.3-1.4(6H，m).
步驟15N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的制備將H5IO6/CrO3的懸浮液(66mL，0.44M，于CH3CN中；注)冷卻至0℃，滴加步驟14所得的醇(1.55g)的CH3CN(5mL)溶液。將混合物在0-5℃下攪拌3.5小時。在劇烈攪拌下將其倒入pH 4的Na2HPO4(200mL)中，所得混合物用二乙醚(3×50mL)萃取。合并的醚萃取物用水和鹽水(1∶1)洗滌，然后用稀NaHSO3水溶液和鹽水洗滌?；旌衔镉昧蛩徕c干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑至干，獲得N-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酸，其原樣在下一個步驟中使用。
注按Tetrahedron Letters 39(1998)5323-5326中所述制備氧化試劑(H5IO6/CrO3)，不過使用HPLC級CH3CN(含0.5％的水)；不加水。
將二異丙基乙胺(4.2mL)加入到以上所得的酸(1.5g)、鹽酸1-氨基-1-環(huán)丙基甲腈(1.18g)、六氟磷酸O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基尿(1.94g)和二甲基甲酰胺(5mL)的懸浮液(0℃)中，使所得混合物在室溫下反應(yīng)48小時。然后將其倒在冰和稀氯化銨水溶液上。用乙酸乙酯和乙醚(1∶1)萃取混合物，合并的有機(jī)層用pH 3的稀Na2HPO4和鹽水洗滌。溶劑蒸發(fā)至干，殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶2)進(jìn)行色譜純化，獲得N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺，其有足夠的純度供用于下一個步驟。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.15(1H，NH)，7.6(2H，m)，7.45(2H，m)4.35-4.45(1H，m)，3.45-3.55(1H，m)，1.9-2.1(2H，m)，1.75-1.85(1H，NH)，1.35-1.55(8H，m)，1.1-1.15(1H，m)，0.95-1.05(1H，m).
步驟16N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]乙基}-L-亮氨酰胺的制備使氮?dú)饬魍ㄟ^步驟15所得的N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺(2.0g)、二硼酸二頻哪醇酯(1.24g)和乙酸鉀(1.53g)的DMF(40mL)懸浮液15分鐘。然后加入催化劑[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯合鈀(II)與二氯甲烷的復(fù)合物(1∶1)(181mg)，所得混合物升溫至65℃，在氮?dú)庀卤３诌^夜。將混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯和己烷(1∶1，100mL)稀釋后，倒在水(50mL)和冰(50g)上。分離有機(jī)層，水層進(jìn)一步用乙酸乙酯和己烷(1∶1，3×50mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑后殘留的殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶3-1∶2)進(jìn)行色譜純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.15(1H，bs)，7.78(2H，d)，7.50(2H，d)，4.31-4.40(1H，m)，3.47-3.54(1H，m)，2.72-2.80(2H，m)，1.32-1.48(9H，m)，1.05-1.11(1H，m)，0.87-0.95(1H，m).
步驟17N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺的制備使氮?dú)饬魍ㄟ^DMF(4mL)、步驟15所得的N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]乙基}-L-亮氨酰胺(350mg)、步驟6所得的1-(4-溴-3-氟苯基)-N-環(huán)丙基環(huán)丙烷甲酰胺(250mg)和2M Na2CO3(900μL)的溶液15分鐘，然后加入[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯合鈀(II)與二氯甲烷的復(fù)合物(1∶1)(29mg)。所得混合物升溫至80℃，在氮?dú)庀卤３?小時。將混合物冷卻至室溫，倒入冰(20g)和飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)中，用乙酸乙酯(3×60mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑后殘留的殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶1-2∶1)作為洗脫劑進(jìn)行色譜純化，然后用乙酸異丙酯和己烷重結(jié)晶，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.18(1H，s)，7.60-7.70(4H，m)，7.50-7.55(1H，m)，7.33(1H，d)，7.28(1H，d)，6.40(1H，bs)，4.38-4.48(1H，m)，3.56(1H，t)，2.67-2.69(1H，m)，1.92-2.01(2H，m)，1.45-1.46(10H，m)，1.05-1.11(3H，m)，0.92-0.99(1H，m)，0.56-0.60(2H，m)，0.36-0.38(2H，m).
實(shí)施例2N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的合成 步驟1(6-氯吡啶-3-基)甲醇的制備向6-氯煙酸乙酯(10g)于250mL THF中的溶液(-78℃)中慢慢加入126mL氫化鋁鋰(1.5M，于甲苯中)。所得混合物在0℃下攪拌1小時。將其倒入飽和酒石酸水溶液(200mL)中，用乙酸乙酯(2×200mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶2-1∶1)進(jìn)行色譜純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.35(1H，s)，7.80(1H，d)，7.40(1H，d)，4.68(2H，d)，4.55(1H，t).
步驟2(6-氯吡啶-3-基)乙腈的制備向步驟1所得的(6-氯吡啶-3-基)甲醇(7.5g)和三乙胺(8.7mL)的二氯甲烷(250mL)溶液(-78℃)中慢慢加入加甲磺酰氯(4.5mL)。在0℃下攪拌反應(yīng)混合物1小時。然后倒入冰和HCl(1N)中，用飽和磷酸氫二鈉水溶液調(diào)pH為4，進(jìn)行分配。水層用二氯甲烷(1×150mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物溶于DMF(100mL)中，加入氰化鈉(2.8g)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物3小時后，倒入冰和水(100mL)中，用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物在SiO2上用乙酸乙酯和己烷(1∶5-1∶2)進(jìn)行色譜純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.45(1H，s)，7.90(1H，d)，7.50(1H，d)，4.06(2H，s).
步驟31-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙基甲腈的制備向步驟2所得的(6-氯吡啶-3-基)乙腈(6.1g)于9.9mL氫氧化鈉(50％于水中W/W)中的溶液(室溫)中加入1-溴-2-氯乙烷(5.3mL)和氯化芐基三乙基銨(273mg)?；旌衔镌?0℃下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫，倒入水(100mL)中，用乙酸乙酯(200mL)萃取。萃取物用飽和氯化銨水溶液和鹽水洗滌。然后用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3) δ8.45(1H，s)，7.80(1H，d)，7.48(1H，d)，1.80-1.87(2H，m)，1.59-1.68(2H，m).
步驟41-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙基甲酸的制備向步驟3所得的1-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙基甲腈(5.3g)的乙醇(60mL)溶液(室溫)中加入30mL氫氧化鈉溶液(25％NaOH于水中w/w)。混合物在100℃下加熱8小時。將混合物冷卻至室溫，倒入飽和磷酸氫二鈉水溶液(0℃下)中，用氯化氫(1N)調(diào)pH為4?；旌衔镉枚燃淄?2×100mL)萃取，合并的萃取物鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ10.90(1H，bs)，8.44(1H，s)，7.88(1H，d)，7.41(1H，d)，1.60-1.68(2H，m)，1.28-1.35(2H，m).
步驟51-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙烷甲酰胺的制備向步驟4所得的1-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙基甲酸(1.0g)的氯仿(50mL)溶液(0℃)中慢慢加入氯甲酸異丁酯(800μL)和三乙胺(920μL)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌2小時。然后混合物用氨氣飽和，在0℃下攪拌10分鐘。讓反應(yīng)混合物在室溫下靜置1小時，然后倒入水(80mL)中進(jìn)行分配。水層用二氯甲烷(2×80mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.40(1H，s)，7.83(1H，d)，7.40(1H，d)，6.50(1H，bs)，6.29(1H，bs)，1.45-1.50(2H，m)，1.00-1.08(2H，m).
步驟6N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的制備使氮?dú)饬魍ㄟ^DMF/1-丙醇(分別為1mL和4mL)、實(shí)施例1步驟15所得的N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]乙基}-L-亮氨酰胺(150mg)、步驟5所得的1-(6-氯吡啶-3-基)環(huán)丙烷甲酰胺(74mg)和2M Na2CO3(400μL)的溶液15分鐘，然后加入乙酸鈀(II)與三苯膦(16mg)的復(fù)合物(4∶1)(16mg)。將混合物升溫至80℃，在氮?dú)庀卤３?小時。將混合物冷卻至室溫，倒入冰(20g)和飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)中，用乙酸乙酯(3×60mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥。除去溶劑后殘留的殘余物在SiO2(Combiflash)上用乙酸乙酯和己烷(60％10分鐘，然后60-100％30分鐘)作為洗脫劑進(jìn)行色譜純化，然后用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.75(1H，s)，8.18-8.21(3H，m)，7.95(1H，d)，7.91(1H，d)，7.60-7.62(2H，m)，6.40(1H，bs)6.20(1H，bs)，4.38-4.48(1H，m)，3.50-3.60(1H，m)，1.92-2.01(2H，m)，1.35-1.52(10H，m)，1.09-1.17(3H，m)，0.92-1.02(1H，m).
實(shí)施例3N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的合成 步驟11-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲腈的制備向4-溴苯基乙腈(18.0g)于22mL氫氧化鈉(50％于水中W/W)中的溶液(室溫)中加入1-溴-2-氯乙烷(12.0mL)和氯化芐基三乙基銨(627mg)?；旌衔镌?0℃下加熱過夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，加入二乙醚(300mL)進(jìn)行分配。乙醚層用水(100mL)、氯化氫(100mL，10％HCl于水中)和鹽水洗滌。然后用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.60(2H，d)，7.35(2H，d)，1.74-1.80(2H，m)，1.52-1.57(2H，m).
步驟21-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲酸的制備向步驟1所得的1-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲腈(13g)的乙醇(110mL)溶液(室溫)中加入56mL的氫氧化鈉溶液(25％NaOH于水中W/W)?；旌衔镌?00℃下加熱過夜。將混合物冷卻至室溫，倒入冰和氯化氫(1N)中，用二氯甲烷(2×100mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.50(2H，d)，7.35(2H，d)，1.53-1.60(2H，m)，1.18-1.22(2H，m).
步驟31-(4-溴苯基)環(huán)丙烷甲酰胺的制備向步驟2所得的1-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲酸(1.5g)的氯仿(60mL)溶液(-15℃)中慢慢加入氯甲酸異丁酯(900μL)和三乙胺(1.1mL)。反應(yīng)混合物在-15℃下攪拌2小時。然后混合物用氨氣飽和，在-15℃下攪拌10分鐘。讓反應(yīng)混合物在室溫下靜置1小時，然后倒入水(60mL)中進(jìn)行分配。水層用二氯甲烷(2×60mL)萃取。合并的萃取物用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，真空除去溶劑。殘余物用二乙醚和己烷通過快速純化，獲得標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ7.54(2H，d)，7.40(2H，d)，6.45(1H，bs)，5.96(1H，bs)，1.42-1.48(2H，m)，0.98-1.02(2H，m).
步驟41-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，32-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]環(huán)丙烷甲酰胺的制備將步驟3所得的1-(4-溴苯基)環(huán)丙烷甲酰胺(14.2g，59.2mmol)、二硼酸二頻哪醇酯(18.0g，70.9mmol，1.2當(dāng)量)和乙酸鉀(20.4g，208mmol，3.5當(dāng)量)混合于N，N-二甲基甲酰胺(300mL)中。所得混合物用氮?dú)饷摎?次，然后加入氯化[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]合鈀(II)與二氯甲烷的1∶1復(fù)合物(2.16g，3.0mmol，0.05當(dāng)量)，用氮?dú)馐够旌衔镌倜摎?次。在65℃下加熱反應(yīng)混合物18小時，然后倒入H2O(1.2L)中，用乙酸乙酯(2×300mL)萃取。合并的有機(jī)級分用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥，蒸發(fā)至干。用乙酸乙酯/己烷(2∶1)作為洗脫劑使棕色殘余物通過二氧化硅小墊。回收得到的淺黃色固體在20％乙酸乙酯/己烷(250mL)中攪拌6小時，然后過濾，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮d6)δ7.7(d，2H)，7.45(d，2H)，6.4(s，br，1H)，5.8(s，br，1H)，1.46-1.4(m，2H)，1.31(s，12H)，1.0-0.96(m，2H).
步驟5N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2-二氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的制備以二氯乙醛乙基半縮醛為原料，按照實(shí)施例1步驟13-14的方法制備標(biāo)題化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮d6)δ8.2(s，1H)，7.56(d，2H)，7.4(d，2H)，6.15-5.9(m，1H)，4.08-3.98(m，1H)，3.4-3.34(m，1H)，2.61-2.55(m，1H)，2.0-1.9(m，2H)，1.42-1.34(m，8H)，1.05-0.92(m，2H).
步驟6N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺的制備將N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2-二氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺(11.2g，25.9mmol)、1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]環(huán)丙烷甲酰胺(8.2g，28.5mmol，1.1當(dāng)量)和2M碳酸鈉溶液(35.4mL，70.8mmol，2.7當(dāng)量)混合于225mL N，N-二甲基甲酰胺中。所得混合物用氮?dú)饷摎?次，然后加入氯化[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]合鈀(II)與二氯甲烷的1∶1復(fù)合物(838mg，1.15mmol，0.044當(dāng)量)，用氮?dú)馐够旌衔镌倜摎?次后，在80℃下加熱6小時。將反應(yīng)混合物倒入H2O(900mL)中，用乙酸乙酯(2×250mL)和二氯甲烷(250mL)萃取。合并的有機(jī)部分用鹽水洗滌，用硫酸鈉干燥并蒸發(fā)。殘余物通過快速色譜法純化，先用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，然后用9∶1乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫?；厥盏玫降臏\粉紅色固體在150mL的1∶1乙酸乙酯/二氯甲烷中攪拌2小時，過濾得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(500MHz，丙酮d6)δ8.22(s，1H)，7.73-7.67(m，4H)，7.58-7.53(m，4H)，6.35(s，1H)，6.2-5.95(m，1H)，5.84(s，1H)，4.12-4.04(m，1H)，3.49-3.43(m，1H)，2.66-2.62(m，1H)，2.04-1.93(m，2H)，1.5-1.36(m，10H)，1.07-1.0(m，4H).
MS+ESI 513.2[M+1]
實(shí)施例4N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{[(1R，2R)-2-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺的合成 步驟1(1R，2R)-2-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲酸用市售的2，2′-亞異丙基雙[(4S)-4-叔丁基-2-唑啉]連同三氟甲磺酸銅(I)和重氮乙酸乙酯，采用與文獻(xiàn)方法(Evans等J.Am.Chem.Soc.1991，113，726)類似的對映選擇性環(huán)丙烷化反應(yīng)，從4-溴苯乙烯制備旋光活性(1R，2R)-2-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲酸乙酯。根據(jù)旋光性意義類比分配絕對構(gòu)型。用LiOH(1當(dāng)量，以反式酯計(jì))選擇性水解順式和反式酯混合物(由環(huán)丙烷化方法獲得)中的反式異構(gòu)體，得到標(biāo)題化合物。
步驟2(1R，2R)-2-(4-溴苯基)-N-環(huán)丙基環(huán)丙烷甲酰胺在室溫下，向步驟1所得的(1R，2R)-2-(4-溴苯基)環(huán)丙基甲酸(300mg，1.24mmole)的二甲基甲酰胺(5mL)溶液中加入HATU(500mg，1.31mmole)，然后加入環(huán)丙胺(0.44mL，6.2mmole)。反應(yīng)混合物攪拌過夜，用半飽和的碳酸氫鈉水溶液(50mL)、乙醚(50mL)和乙酸乙酯(50mL)稀釋。分離各相，有機(jī)層用水(每份30mL)洗滌兩次，用無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮。殘余物在短硅膠柱上用50％乙酸乙酯∶二乙醚純化，得到標(biāo)題化合物。
步驟3N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺按實(shí)施例1步驟16所述，使N2-[(1S)-1-(4-溴苯基)-2，2-二氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺與二硼酸二頻哪醇酯反應(yīng)，獲得標(biāo)題化合物。
步驟4N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{[(1R，2R)-2-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺在室溫下，向步驟2所得的(1R，2R)-2-(4-溴苯基)-N-環(huán)丙基環(huán)丙烷甲酰胺(480mg，1.6mmole)和步驟3所得的N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜戊硼烷-2-基)苯基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺(704mg，1.46mmoles)的二甲基甲酰胺(15mL)溶液中加入2.0M碳酸鈉水溶液(2.2mL)，攪拌5分鐘，同時通過移液管吹入氮?dú)?。?0℃、氮?dú)庀聰嚢璺磻?yīng)混合物20小時，冷卻至室溫后，倒入水(25mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)和乙酸乙酯(100mL)中。分離各相，水層用50mL/份的乙酸乙酯萃取兩次。合并的有機(jī)層用鹽水(50mL)洗滌，用無水硫酸鎂干燥，減壓濃縮。殘余物在硅膠上用50％乙酸乙酯∶甲苯-75％乙酸乙酯∶25％甲苯的梯度純化。所得固體在二乙醚和己烷的混合物中研磨，然后在二氯甲烷和己烷中攪拌過夜，得到標(biāo)題化合物，為白色固體。MS(+ESI)553.4[M+1]+。
實(shí)施例5甲磺酸(2S)-N-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-1-[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]-4-氟-4-甲基-1-氧代戊-2-銨的合成 向N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺(112mg，0.219mmol)的THF(8mL)溶液中加入0.21mL的甲磺酸(1M二氯甲烷溶液)，然后加入甲基叔丁基醚(2mL)。加入晶種，讓混合物靜置，至形成晶體層。除去溶劑，將所得固體懸浮于甲基叔丁基醚中，加熱回流過夜。冷卻至室溫，過濾，真空干燥，得到標(biāo)題化合物。熔點(diǎn)126℃。
1HNMR(400MHz 甲醇d4)δ7.82(d，2H)，7.70(d，2H)，7.62(d，2H)，7.55(d，2H)，6.41(dt，1H)，4.7(m，1H)，3.84(m，1H)，2.73(s，3H)，2.3(m，2H)，2.58(m，2H)，1.5-1.35(m，8H)，1.13(m，4H).
實(shí)施例64-甲基苯磺酸(2S)-1-[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]-N-[(1S)-1-(4′-{(1R，2R)-2-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-4-甲基-1-氧代戊-2-銨的合成
將N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{(1S，2S)-2-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺(60mg，0.11mmol)溶于0.80mL THF中。將TsOH.H2O(21mg，0.11mmol)溶于0.20mLTHF中，并加入到反應(yīng)混合物中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。然后加入己烷(～3mL)，至溶液中沉下沉淀。聲波破碎沉淀5分鐘，用布氏漏斗過濾。將所得白色固體抽吸干燥過夜。在室溫下用二乙醚(～5mL)將其研磨2小時，用布氏漏斗過濾，得到標(biāo)題化合物。
1H NMR(CD3COCD3)δ8.80(brs，1H)，7.60-7.80(m，8H)，7.45(brs，1H)，7.22-7.32(m，4H)，6.60(t，1H)，4.60(m，1H)，4.05(m，1H)，2.77(m，1H)，2.28-2.42(m，6H)，1.85(m，1H)，1.37-1.53(m，9H)，1.23(m，1H)，1.12(m，2H)，0.65(m，2H)，0.47(m，2H).
采用與上列方法類似的實(shí)驗(yàn)方法，合成以下化合物。
藥物組合物作為本發(fā)明的一個具體實(shí)施方案，將100mg的N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4-(6-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2-氟吡啶-3-基)苯基]-2，2，2-三氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺與足夠的微細(xì)乳糖一起配制，以提供580-590mg的總量來填充0號硬明膠膠囊。
本申請公開的化合物在以下試驗(yàn)中顯示活性。此外，本申請公開的化合物相比于先前公開的化合物具有提高的藥理學(xué)特征(profile)。
組織蛋白酶K試驗(yàn)在二甲亞砜(DMSO)中配制試驗(yàn)化合物從500μM減至0.0085μM的系列稀釋液(1/3)。然后從每種稀釋液中取2μL的DMSO加入到50μL的分析緩沖液(MES，50mM(pH 5.5)；EDTA，2.5mM；DTT，2.5mM和10％DMSO)和25μL的人組織蛋白酶K(0.4nM，于分析緩沖溶液中)中。將分析溶液在搖板上混合5-10秒鐘，在室溫下孵育15分鐘。向分析溶液中加入Z-Leu-Arg-AMC(8μM，于25μL的分析緩沖液中)。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)后進(jìn)行分光熒光測定(Exλ＝355nm；Emλ＝460nm)，持續(xù)10分鐘。通過將實(shí)驗(yàn)值對劑量反應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型進(jìn)行擬合，計(jì)算抑制百分率。
組織蛋白酶L試驗(yàn)在二甲亞砜(DMSO)中配制試驗(yàn)化合物從500μM減至0.0085μM的系列稀釋液(1/3)。然后從每種稀釋液中取2μL的DMSO加入到50μL的分析緩沖液(MES，50mM(pH 5.5)；EDTA，2.5mM；DTT，2.5mM和10％DMSO)和25μL的人組織蛋白酶L(0.5nM，于分析緩沖溶液中)中。將分析溶液在搖板上混合5-10秒鐘，在室溫下孵育15分鐘。向分析溶液中加入Z-Leu-Arg-AMC(8μM，于25μL的分析緩沖液中)。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)后進(jìn)行分光熒光測定(Exλ＝355nm；Emλ＝460nm)，持續(xù)10分鐘。通過將實(shí)驗(yàn)值對劑量反應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型進(jìn)行擬合，計(jì)算抑制百分率。
組織蛋白酶B試驗(yàn)在二甲亞砜(DMSO)中配制試驗(yàn)化合物從500μM減至0.0085μM的系列稀釋液(1/3)。然后從每種稀釋液中取2μL的DMSO加入到50μL的分析緩沖液(MES，50mM(pH 5.5)；EDTA，2.5mM；DTT，2.5mM和10％DMSO)和25μL的人組織蛋白酶B(4.0nM，于分析緩沖溶液中)中。將分析溶液在搖板上混合5-10秒鐘，在室溫下孵育15分鐘。向分析溶液中加入Z-Leu-Arg-AMC(8μM，于25μL的分析緩沖液中)。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)后進(jìn)行分光熒光測定(Exλ＝355nm；Emλ＝460nm)，持續(xù)10分鐘。通過將實(shí)驗(yàn)值對劑量反應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型進(jìn)行擬合，計(jì)算抑制百分率。
組織蛋白酶S試驗(yàn)在二甲亞砜(DMSO)中配制試驗(yàn)化合物從500μM減至0.0085μM的系列稀釋液(1/3)。然后從每種稀釋液中取2μL的DMSO加入到50μL的分析緩沖液(MES，50mM(pH 5.5)；EDTA，2.5mM；DTT，2.5mM和10％DMSO)和25μL的人組織蛋白酶S(20nM，于分析緩沖溶液中)中。將分析溶液在搖板上混合5-10秒鐘，在室溫下孵育15分鐘。向分析溶液中加入Z-Leu-Arg-AMC(8μM，于25μL的分析緩沖液中)。水解香豆素離去基團(tuán)(AMC)后進(jìn)行分光熒光測定(Exλ＝355nm；Emλ＝460nm)，持續(xù)10分鐘。通過將實(shí)驗(yàn)值對劑量反應(yīng)曲線的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)學(xué)模型進(jìn)行擬合，計(jì)算抑制百分率。
權(quán)利要求
1.一種下式的化合物或其藥物可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中R1是氫、C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被一個至六個鹵素、C3-6環(huán)烷基、-SR7、-SOR7、-SO2R7、-SO2CH(Ra)(Rb)、-OR7、-N(R7)2、芳基、雜芳基或雜環(huán)基取代，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、羥基烷基、羥基、烷氧基或酮基的取代基取代；R2是氫、C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被一個至六個鹵素、C3-6環(huán)烷基、-SR7、-SOR7、-SO2R7、-SO2CH(Ra)(Rb)、-OR7、-N(R7)2、芳基、雜芳基或雜環(huán)基取代，其中所述芳基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵素、羥基烷基、羥基、烷氧基或酮基的取代基取代；或者R1和R2可與它們所連接的碳原子一起形成C3-8環(huán)烷基環(huán)或雜環(huán)基環(huán)，其中所述環(huán)系統(tǒng)任選被一個或兩個獨(dú)立選自C1-6烷基、羥基烷基、鹵代烷基或鹵素的取代基取代；R3是C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基和烯基任選被C3-6環(huán)烷基或一個至六個鹵素取代；R4是被1-6個鹵素取代的C1-6烷基；R5選自氫或C1-3烷基；D是芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基可以是單環(huán)或雙環(huán)，任選在碳上或雜原子上被一個至五個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵代烷基、鹵素、酮基、烷氧基、-SR7、-OR7、-N(R7)2、-SO2R7或-SO2Ra的取代基取代；E是芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基可以是單環(huán)或雙環(huán)，任選在碳上或雜原子上被一個至五個獨(dú)立選自C1-6烷基、鹵代烷基、鹵素、酮基、烷氧基、-SR7、-OR7、-N(R7)2或-SO2R7的取代基取代；X是CRaRb或C3-8環(huán)烷基；R7選自氫、C1-6烷基、芳基、芳基(C1-4)烷基、雜芳基、雜芳基(C1-4)烷基、C3-8環(huán)烷基、C3-8環(huán)烷基(C1-4)烷基和雜環(huán)基(C1-4)烷基，其中所述基團(tuán)可任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素、烷氧基、氰基、-NRaRb、-SRa或-SOmRa的取代基取代；R6選自氫、C1-6烷基、C3-8環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜芳基、氰基、鹵素、烷氧基、-ORa、-NRa、-SRa或-SOmR5；其中所述烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)基和雜芳基可任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素、氰基或-ORa的取代基取代；Ra是氫或任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素或-OR5的取代基取代的C1-6烷基；Rb是氫或任選被一個、兩個或三個獨(dú)立選自鹵素或-OR5的取代基取代的C1-6烷基；m是0-2的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1是氫，R2是氫，或者R1和R2可與它們所連接的碳原子一起形成C3-8環(huán)烷基環(huán)。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R3是任選被一個至六個鹵素取代的C1-6烷基。
4.權(quán)利要求3的化合物，其中D是芳基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中D是苯基。
6.權(quán)利要求4的化合物，其中X是C3-8環(huán)烷基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中X是環(huán)丙基。
8.權(quán)利要求1的化合物，所述化合物選自1)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；2)N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；3)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；4)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{[(1R，2R)-2-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；5)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；6)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氮雜環(huán)丁烷-1-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；7)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；8)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；9)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(異丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；10)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(吡啶-3-基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；11)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-羥乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；12)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(1-甲基環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；13)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟-1-甲基乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；14)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-氟環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；15)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(1，3-噻唑-2-基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；16)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1，1-二氟-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；17)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；18)N1-(氰基甲基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；19)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；20)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-L-亮氨酰胺；21)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2，2，2-三氟乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；22)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-L-亮氨酰胺；23)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丁基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；24)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丁基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；25)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丁基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；26)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-L-亮氨酰胺；27)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(甲氧基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-L-亮氨酰胺；28)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；29)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-羥乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；30)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(二甲基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；31)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丁基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；32)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-2，2-二氟-1-{4′-[1-(吡咯烷-1-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；33)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[甲氧基(甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；34)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-2，2-二氟-1-[4′-(1-{[(2-甲氧基乙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；35)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-2，2-二氟-1-{4′-[1-(嗎啉-4-基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；36)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(甲基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；37)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(環(huán)丙基甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；38)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-2，2-二氟-1-(4′-{1-[(丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；39)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；40)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4′-(1-{[(氰基甲基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；41)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4′-(1-{[(甲磺酰基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；42)N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(叔丁基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；43)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-1，1-二甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；44)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-3′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；45)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}聯(lián)苯-4-基)-2，2，2-三氟乙基]-L-亮氨酰胺；46)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-3′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；47)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-((1S)-1-{4′-[2-(環(huán)丙基氨基)-1，1-二甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2-二氟乙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；48)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-[(1S)-1-(4′-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}-2′-氟聯(lián)苯-4-基)-2，2-二氟乙基]-4-氟-L-亮氨酰胺；49)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-N2-{(1S)-2，2，2-三氟-1-[4′-(1-{[(2-氟環(huán)丙基)氨基]羰基}環(huán)丙基)聯(lián)苯-4-基]乙基}-L-亮氨酰胺；50)N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]-3-氯吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；51)N2-{(1S)-1-[4-(3-氯-5-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；52)N1-(1-氰基環(huán)丙基)-N2-{(1S)-1-[4-(5-{1-[(環(huán)丙基氨基)羰基]環(huán)丙基}吡啶-2-基)苯基]-2，2，2-三氟乙基}-4-氟-L-亮氨酰胺；53)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；54)N2-[(1S)-1-(4-{5-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]吡啶-2-基}苯基)-2，2，2-三氟乙基]-N1-(氰基甲基)-4-氟-L-亮氨酰胺；55)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；56)N2-((1S)-1-{4′-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；57)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；58)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；59)N2-((1S)-1-{4-[5-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)吡啶-2-基]苯基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；60)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2-二氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；61)N2-((1S)-1-{4′-[(1R)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；62)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2′-氟聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；63)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]-2-溴聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；64)N2-((1S)-1-{4′-[(1S)-2-氨基-1-甲基-2-氧代乙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-5-羥基-L-亮氨酰胺；65)1-(4′-{(1S)-1-[((1S)-1-{[(1-氰基環(huán)丙基)氨基]羰基}-3，3，3-三氟丙基)氨基]-2，2，2-三氟乙基}聯(lián)苯-4-基)環(huán)丙烷甲酰胺；66)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)乙烯基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；67)N2-((1S)-1-{4′-[1-(氨基羰基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-L-正纈氨酰胺；68)N2-((1S)-1-{4′-[1-(2-氨基-2-氧代乙基)環(huán)丙基]聯(lián)苯-4-基}-2，2，2-三氟乙基)-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；69)N2-{(1S)-1-[4′-(3-氨基-2，2-二甲基-3-氧代丙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；70)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-2-氧代乙基)-2′-氟聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺；71)N2-{(1S)-1-[4′-(2-氨基-2-氧代乙基)聯(lián)苯-4-基]-2，2，2-三氟乙基}-N1-(1-氰基環(huán)丙基)-4-氟-L-亮氨酰胺或其藥物可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
9.一種藥物組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1的化合物和藥物可接受的載體。
10.權(quán)利要求1的化合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療需要治療有效量的權(quán)利要求1化合物的哺乳動物中的以下疾病骨質(zhì)疏松癥、糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、骨周轉(zhuǎn)異常增加、牙周病、牙齒缺失、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍骨質(zhì)溶解、成骨不全、肥胖癥、轉(zhuǎn)移性骨病、惡性腫瘤的高鈣血癥或多發(fā)性骨髓瘤。
11.一種藥物組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1的化合物和另一種選自以下的藥物有機(jī)雙膦酸鹽、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雌激素受體β調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑或成骨細(xì)胞合成代謝劑及它們的藥物可接受的鹽和混合物。
12.權(quán)利要求1的化合物和另一種藥劑(agent)在制備藥物中的用途，所述另一種藥劑選自有機(jī)雙膦酸鹽、雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、破骨細(xì)胞質(zhì)子ATP酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、整聯(lián)蛋白受體拮抗劑、成骨細(xì)胞合成代謝劑及它們的藥物可接受的鹽和混合物，所述藥物用于治療有需要的哺乳動物中的骨質(zhì)疏松癥、糖皮質(zhì)激素引起的骨質(zhì)疏松癥、佩吉特病、骨周轉(zhuǎn)異常增加、牙周病、牙齒缺失、骨折、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、假體周圍骨質(zhì)溶解、成骨不全、肥胖癥、轉(zhuǎn)移性骨病、惡性腫瘤的高鈣血癥或多發(fā)性骨髓瘤。
全文摘要
本發(fā)明涉及屬半胱氨酸蛋白酶抑制劑的新的一類化合物，包括但不限于組織蛋白酶K、L、S和B的抑制劑。這些化合物可用于治療其中骨吸收需要加以抑制的疾病，如骨質(zhì)疏松癥。
文檔編號A61P19/00GK1906164SQ200480036642
公開日2007年1月31日 申請日期2004年12月9日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月12日
發(fā)明者M·博伊德, C·勞, C·梅龍, B·洛伊, J·謝格茨, V·L·特隆 申請人:默克弗羅斯特加拿大有限公司