專利名稱：用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥制劑及其制備方法，特別是一種用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑及其制備方法，屬于中藥的技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中風(fēng)和胸痹即心腦血管疾病，是嚴(yán)重危害人類健康特別是中老年人健康的常見病和多發(fā)病，目前尚無很好的根治性藥物。本申請人于2001年8月20日向中國專利局提交了一份名稱為“一種可用于治療中風(fēng)和胸弊的中藥膠囊劑及其制法”的專利申請，并于2003年4月2日公開，公開號為1406609。它是由黃芪、丹參、當(dāng)歸、川芎、赤芍等16味中草藥以原藥材入藥制備而成膠囊劑。但膠囊劑并不能完全滿足醫(yī)患雙方的需求，特別是一些患者不愿意服用膠囊劑；另外膠囊劑的起效時間長，服用劑量大，也是現(xiàn)有技術(shù)存在的主要問題；另外，我們在實踐中發(fā)現(xiàn)，由于該專利申請文件中提供的工藝比較粗，得到的產(chǎn)品療效尚不夠理想。因此，我們在原來的基礎(chǔ)上，經(jīng)反復(fù)研究，完成本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種劑量更小、工藝更精、起效更快、療效更好的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑及其制備方法，特別是用于治療中風(fēng)和胸痹的軟膠囊及滴丸制劑和它們的制備方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題。
本發(fā)明是這樣構(gòu)成的它主要是用如下重量份的原料藥黃芪40-90份、赤芍15-40份、丹參15-40份、當(dāng)歸15-40份、川芎15-40份、桃仁15-40份、紅花8-20份、制乳香8-20份、制沒藥8-20份、雞血藤10-30份、牛膝15-40份、桂枝10-30份、桑枝15-40份、地龍15-40份、全蝎8-20份和水蛭15-40份制備成軟膠囊劑或滴丸劑。具體的，它主要是由如下重量份的原料藥黃芪66份、赤芍27份、丹參27份、當(dāng)歸27份、川芎27份、桃仁27份、紅花13份、制乳香13份、制沒藥13份、雞血藤20份、牛膝27份、桂枝20份、桑枝27份、地龍27份、全蝎13份和水蛭27份制備成軟膠囊劑或滴丸劑。這種治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法是采用超臨界萃取法提取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥中的揮發(fā)油成分及丹參中丹參酮類脂溶性有效成分，地龍、全蝎、水蛭采取滲漉法提肽類等活性物質(zhì)，然后將赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤藥材粗粉及超臨界萃取后藥渣和滲漉后藥渣用水煎煮提取水溶性有效成分，再用醇沉法除去淀粉、粘液質(zhì)、樹膠類等水溶性雜質(zhì)，最后分別加入不同的輔料制成軟膠囊劑或滴丸劑。
本發(fā)明所述的軟膠囊劑可以這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎、水蛭、地龍加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉，加超臨界萃取物、聚乙二醇400，膠體磨研磨，制膠，軟膠囊機(jī)壓丸，即得。具體地，取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用無水乙醇/藥材，ml/g30％量的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。合并兩個階段萃取物備用。取全蝎、水蛭、地龍藥材，粉成粗粉，加一定量的乙醇/藥材，g/g70％乙醇浸漬24小時后，進(jìn)行滲漉，收集10倍滲漉液，滲漉液備用。取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤藥材，粉成粗粉，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小時，紗布過濾，合并過濾液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加95％乙醇至含醇65％后，靜置24小時，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮至60℃相對密度為1.1，噴霧干燥，即得干粉備用。取過140目篩的干粉及超臨界萃取物，加入PEG-400，攪拌均勻后，膠體磨研磨，即得。按明膠∶甘油∶水為1∶0.3∶1的比例制膠，采用軟膠囊機(jī)壓丸，即得。
本發(fā)明所述的滴丸劑可以這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎、水蛭、地龍加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉，過篩后，加入己熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)中，滴制成丸，即得。具體地，取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用無水乙醇/藥材，ml/g30％量的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。取全蝎、水蛭、地龍粗粉加乙醇/藥材，ml/g70％乙醇浸漬24小時后，以5ml/min/kg的速度進(jìn)行滲漉，收集10倍量滲漉液備用。取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤藥材粗粉與超臨界萃取后藥渣和滲漉后藥渣合并，浸泡3小時后，加12倍量的水，煎煮兩次，每次2小時，合并煎液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加95％乙醇至含醇量為65％，靜置24小時，吸取上層清液，下層液離心，將離心后上清液與上層清液及滲漉液合并，減壓濃縮至60℃相對密度為1.1，噴霧干燥，即得固形物。過120目篩后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，使分散均勻，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)貯料罐中，保持藥液溫度80℃，滴頭溫度60℃，調(diào)節(jié)滴速，滴制成丸。
超臨界法提取當(dāng)歸、川芎、乳香、沒藥、桂枝中揮發(fā)油，這類成分具有鎮(zhèn)痛、調(diào)節(jié)心血管功能、抗凝血等作用。再用水提如川芎中的吡嗪類生物堿川芎嗪，具有調(diào)節(jié)心血管功能，改善血液流變性及微循環(huán)，抑制血小板聚集及血栓形成；如當(dāng)歸及川芎中的阿魏酸，具有抗血小板聚集作用。丹參含結(jié)晶性呋喃并菲醌類色素脂溶性成分，如丹參酮類，選用超臨界法提取，并用水提取丹參水溶性成分丹參素、原兒茶醛等酚性成分及水提紅花中的黃酮類成分，這些成分可擴(kuò)張冠狀動脈，增加血流量，改善微循環(huán)、抗血小板聚集和血栓的形成。另外用水煎煮提取一些苷類活性成分，如赤芍中的芍藥苷、黃芪中的黃芪甲苷、牛膝中的牛膝皂苷，桃仁的氰苷；這些成分已證實有較好的生理活性。地龍、全蝎、水蛭選用滲漉法，再用水提取多肽類活性成分，這類成分具有溶栓作用，可改善血液循環(huán)的功能。本發(fā)明將現(xiàn)有技術(shù)以原藥材直接入藥改成用提取物入藥，通過提取有效成分，除去其中大量非活性成分，療效大大提高，所以可以在保證療效的基礎(chǔ)上達(dá)到減少臨床服用劑量的目的。
采用水溶性聚乙二醇固體分散技術(shù)，改善了藥物的溶解性能，加快溶出速度，提高生物利用度，提高了臨床療效，并達(dá)到速效目的。
現(xiàn)以軟膠囊劑為例，說明其主要藥效學(xué)一、對大鼠局部腦缺血損傷的影響
1、大鼠50只隨機(jī)分為假手術(shù)組(PEG400)，模型對照組(PEG400)，本發(fā)明膠囊組(280mg/kg)，本發(fā)明軟膠囊小劑量組(30mg/kg)、中劑量組(60mg/kg)、大劑量組(120mg/kg)，每組10只。連續(xù)灌胃給藥3天，第2天給藥后禁食16小時，末次給藥90分鐘后，水合氯醛(360mg/kg，ip)麻醉，分離右側(cè)頸總動脈，夾閉頸內(nèi)、頸總動脈，頸外動脈近心端及遠(yuǎn)心端結(jié)扎，中間剪斷。將頸外動脈游離端拉至與頸內(nèi)動脈成一條直線，將栓線(選用直徑0.24mm尼龍線，長度5.0cm)由頸外動脈插入至顱內(nèi)，遇輕微阻力時停止，插入深度約為2cm。結(jié)扎頸外動脈開口，并打開頸總動脈動脈夾，消毒縫合傷口，造成右側(cè)大腦中動脈缺血模型；假手術(shù)組僅進(jìn)行右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈、頸外動脈的分離(以上實驗均在23℃～25℃進(jìn)行)。24小時后按如下方法及標(biāo)準(zhǔn)觀察并記錄大鼠的行為障礙(1)提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱伸向地面，計為0分，如手術(shù)對側(cè)前肢出現(xiàn)腕屈曲計為1分，肘屈曲計為2分，肩內(nèi)旋計為3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩內(nèi)旋者，計為4分。(2)將動物置于平地面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動，檢查阻力。如雙側(cè)阻力對等且有力，計為0分，如向手術(shù)對側(cè)推動時阻力下降者，根據(jù)下降程度不同分為輕、中、重三度，分別計為1，2和3分。(3)將動物雙前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察雙前肢的肌張力。雙前肢肌張力對等且有力者計為0分。同樣根據(jù)手術(shù)對側(cè)肌張力下降程度不同計為1，2和3分。(4)動物有不停地向一側(cè)轉(zhuǎn)圈者，計為1分。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)評分，滿分為11分，分?jǐn)?shù)越高，表示動物行為障礙越嚴(yán)重。數(shù)據(jù)用x±SD表示，以參比差值法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。
行為評分后處死大鼠，取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干，冠狀切成5片，腦片用紅四氮唑(TTC)染色，正常組織經(jīng)染色后呈紅色，梗塞組織呈白色，染色后照相，用中國航空航天大學(xué)病理圖像分析軟件求梗塞面積比。數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
表1本發(fā)明軟膠囊對大鼠局部腦缺血損傷的影響(x±SD，n＝10)組別行為障礙 缺血面積(％)假手術(shù)組0 0模型對照組 9.7±1.1 23.9±4.5本發(fā)明膠囊組7.0±2.3* 18.9±4.2*本發(fā)明軟膠囊大劑量組6.1±3.0**15.3±4.6**本發(fā)明軟膠囊中劑量組7.4±2.2*#18.1±3.3*#本發(fā)明軟膠囊小劑量組8.5±1.8 21.1±5.1與模型對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與本發(fā)明膠囊比較#P＞0.05結(jié)果如表1所示，缺血24小時后，模型大鼠表現(xiàn)出明顯的行為障礙，大鼠腦組織也出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，壞死面積達(dá)到全腦的25％左右；給予不同劑量的本發(fā)明軟膠囊，動物行為障礙有不同程度的減輕，大鼠腦缺血區(qū)壞死面積也有明顯降低，且呈劑量依賴性；該結(jié)果表明相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊與膠囊作用強(qiáng)度相當(dāng)(P＞0.05)。
2、動物隨機(jī)分為假手術(shù)組(醫(yī)用豆油)，模型對照組(醫(yī)用豆油)，本發(fā)明膠囊組(280mg/kg)，本發(fā)明軟膠囊組(60mg/kg)、每組90只。連續(xù)灌胃給藥3天，并于第1次灌胃給藥后每隔8小時，各給分批取10只大鼠，水合氯醛(360mg/kg，ip)麻醉，分離右側(cè)頸總動脈，夾閉頸內(nèi)、頸總動脈，頸外動脈近心端及遠(yuǎn)心端結(jié)扎，中間剪斷。將頸外動脈游離端拉至與頸內(nèi)動脈成一條直線，將栓線(選用直徑0.24mm尼龍線，長度5.0cm)由頸外動脈插入至顱內(nèi)，遇輕微阻力時停止，插入深度約為2cm。結(jié)扎頸外動脈開口，并打開頸總動脈動脈夾，消毒縫合傷口，造成右側(cè)大腦中動脈缺血模型；假手術(shù)組僅進(jìn)行右側(cè)頸總動脈、頸內(nèi)動脈、頸外動脈的分離(以上實驗均在23℃～25℃進(jìn)行)。并于術(shù)后24小時按如下方法及標(biāo)準(zhǔn)觀察并記錄大鼠的行為障礙(1)提鼠尾觀察前肢屈曲情況，如雙前肢對稱伸向地面，計為0分，如手術(shù)對側(cè)前肢出現(xiàn)腕屈曲計為1分，肘屈曲計為2分，肩內(nèi)旋計為3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩內(nèi)旋者，計為4分。(2)將動物置于平地面上，分別推雙肩向?qū)?cè)移動，檢查阻力。如雙側(cè)阻力對等且有力，計為0分，如向手術(shù)對側(cè)推動時阻力下降者，根據(jù)下降程度不同分為輕、中、重三度，分別計為1，2和3分。(3)將動物雙前肢置一金屬網(wǎng)上，觀察雙前肢的肌張力。雙前肢肌張力對等且有力者計為0分。同樣根據(jù)手術(shù)對側(cè)肌張力下降程度不同計為1，2和3分。(4)動物有不停地向一側(cè)轉(zhuǎn)圈者，計為1分。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)評分，滿分為11分，分?jǐn)?shù)越高，表示動物行為障礙越嚴(yán)重。數(shù)據(jù)用x±SD表示，以參比差值法進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)檢驗。
行為評分后處死大鼠，取腦，去掉嗅球、小腦和低位腦干，冠狀切成5片，腦片用紅四氮唑(TTC)染色，正常組織經(jīng)染色后呈紅色，梗塞組織呈白色，染色后照相，用中國航空航天大學(xué)病理圖像分析軟件求梗塞面積比。并分別觀察給藥后8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h后，血栓的濕重，觀察本發(fā)明膠囊及軟膠囊的起效時間及速度。
數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
法羅培南鈉粉針的穩(wěn)定性考察

具體實施例方式以下實施例僅限于對本發(fā)明做近一步說明，但不是對本發(fā)明的任何限制。
實施例1法羅培南鈉片劑的處方及制備工藝片劑處方法羅培南鈉 123.5g原料藥預(yù)膠化淀粉 40.0g 賦形劑谷胱甘肽20.0g 抗氧劑羧甲基淀粉鈉30.0g 崩解劑結(jié)果如表2及表3所示，缺血24小時后，模型大鼠表現(xiàn)出明顯的行為障礙，大鼠腦組織也出現(xiàn)明顯的灶狀缺血區(qū)，壞死面積達(dá)到全腦的25％左右；給予本發(fā)明膠囊及本發(fā)明軟膠囊，動物行為障礙有不同程度的減輕，大鼠腦缺血區(qū)壞死面積也有明顯降低，但相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊在起效時間上早于本發(fā)明膠囊(本發(fā)明軟膠囊于給藥后48h起效，而膠囊組則于56h起效)。
二、對大鼠心肌缺血損傷的影響取大鼠50只，隨機(jī)分為空白對照組(PEG400)、本發(fā)明膠囊(280mg/kg)、本發(fā)明軟膠囊小劑量組(30mg/kg)、中劑量組(60mg/kg)、大劑量組(120mg/kg)，每組10只。連續(xù)灌胃給藥3天，第2天給藥后禁食16小時，末次給藥90分鐘后，以20％烏拉旦1.2g/kg麻醉，記錄正常心電圖，隨即自左側(cè)3～4肋間開胸，暴露心臟，于肺動脈圓錐及左房間找出冠脈左前降支(LAD)，在距起點2～3mm處穿一“0”號線結(jié)扎，將心臟送回胸腔，擠出胸腔內(nèi)血液和氣體，立即縫合胸壁。整個手術(shù)在30秒內(nèi)完成。記錄手術(shù)后5、15、30、45、60、90、120、150、180、210、240分鐘心電圖。
手術(shù)360分鐘后，腹主動脈采血，分離血清，按照檢測試劑盒說明書所述方法測定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脫氫酶(LDH)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性。開胸取心臟，除去心房，將心室橫切成3～4片，置入pH7.4的0.25％氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)溶液，37℃染色，待梗死心肌界線清楚時立即取出，分離梗死心肌與正常心肌，分別稱重，計算心肌梗死百分比(梗死心肌占全心室肌濕重的百分比)。
數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
表4本發(fā)明軟膠囊對心肌缺血大鼠心電圖J點的影響(x±SD，n＝10)冠狀動脈結(jié)扎后各時間點心電圖J點值(mv)組別5min15min 30min 60min 90min 120min 180min 240min空白對照組 0.45±0.18 0.44±0.13 0.45±0.1 0.39±0.08 0.36±0.08 0.35±0.06 0.33±0.06 0.31±0.08本發(fā)明膠囊組0.34±0.07 0.40±0.13 0.35±0.06*0.32±0.04*0.3±0.04*0.29±0.06*0.25±0.09*0.29±0.07本發(fā)明軟膠囊大劑量組0.31±0.09*0.32±0.06*0.35±0.08*0.30±0.07*0.24±0.07**0.27±.09*0.27±0.09*0.25±0.08本發(fā)明軟膠囊中劑量組0.33±0.12#0.31±0.1*#0.30±0.08**#0.29±0.08*#0.30±0.07#0.30±0.07#0.26±0.06*#0.28±0.06#本發(fā)明軟膠囊小劑量組0.34±0.14 0.38±0.16 0.37±0.14 0.34±0.18 0.33±0.14 0.32±0.15 0.32±0.14 0.31±0.14與空白對照組對應(yīng)時間點J點值比較*P＜0.05，**P＜0.01；與本發(fā)明膠囊對應(yīng)時間點J點值比較#P＞0.05。
表5本發(fā)明軟膠囊對心肌缺血大鼠血清CK、LDH、AST活性以及心肌梗死百分比的影響(x±SD，n＝10)CKLDH AST 心肌梗死百分比組別(U·L-1) (U·L-1) (U·L-1) (％)空白對照組 958.4±254.9 871.4±321.9 179.8±45 25.3±3.1本發(fā)明膠囊組703.1±179*471.1±144.1**126.8±48.1*21.2±4.2*本發(fā)明軟膠囊大劑量組663.4±269.5**436.7±177.4**123.2±19**20.5±3.3**本發(fā)明軟膠囊中劑量組652.5±263.3*#502.3±242.2*#126.7±24.5*#21.0±4.6*#本發(fā)明軟膠囊小劑量組773.9±188.2 746.4±237.0 152.9±34.0 24.4±4.9與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與本發(fā)明膠囊比較#P＞0.05。
結(jié)果如表4及表5所示，結(jié)扎大鼠冠狀動脈左前降支可以導(dǎo)致大鼠急性心肌缺血，表現(xiàn)為心電圖J點明顯抬高，血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性(含量)明顯升高，心肌梗死百分比明顯增加。本發(fā)明軟膠囊60mg/kg、120mg/kg與本發(fā)明膠囊280mg/kg均可在冠狀動脈結(jié)扎后一定時間范圍內(nèi)抑制心電圖J點的抬高；明顯抑制血清肌酸激酶、乳酸脫氫酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性(含量)的升高；降低心肌梗死百分比。相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊與膠囊作用強(qiáng)度相當(dāng)(P＞0.05)。
三、對大鼠體內(nèi)血栓形成的影響1、取大鼠50只，隨機(jī)分為空白對照組(PEG400)，本發(fā)明膠囊組(280mg/kg)，本發(fā)明軟膠囊小劑量組(30mg/kg)、中劑量組(60mg/kg)、大劑量組(120mg/kg)，每組10只。連續(xù)灌胃給藥3天，第2天給藥后禁食16小時，末次給藥90分鐘后，水合氯醛麻醉(360mg/kg，i.p.)，分離右側(cè)頸總動脈及左頸外靜脈，在聚乙烯管中放入一根長5cm已稱重的七號絲線。以含肝素鈉(50U/ml)的生理鹽水溶液充滿聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈，另一端插入右頸總動脈。打開夾閉血管的動脈夾，使血流從右總頸動脈流經(jīng)聚乙烯管后，返回左頸外靜脈。開放血流15min后立即取出棉線稱重，減去絲線重量即得血栓濕重。
數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
表6本發(fā)明軟膠囊對大鼠動—靜脈旁路血栓形成的影響(x±s，n＝10)組別 血栓濕重(mg) 抑制率(％)空白對照組32.8±9.4本發(fā)明膠囊組 21.2±11.8** 35本發(fā)明軟膠囊大劑量組 21.3±10.2** 35本發(fā)明軟膠囊中劑量組 22.3±12.2*#32本發(fā)明軟膠囊小劑量組 26.9±12.218與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與本發(fā)明膠囊比較#P＞0.05。
結(jié)果如表6所示，開放血流15min后絲線上有明顯的血栓黏附，本發(fā)明軟膠囊60mg/kg、120mg/kg、本發(fā)明膠囊280mg/kg均可明顯抑制血栓的形成，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊與膠囊作用強(qiáng)度相當(dāng)(P＞0.05)。
四、對小鼠凝血時間的影響昆明種小鼠50只，隨機(jī)分為空白組(PEG400)，本發(fā)明膠囊組(560mg/kg)，本發(fā)明軟膠囊小劑量組(60mg/kg)、中劑量組(120mg/kg)、大劑量組(240mg/kg)，每組10只。連續(xù)灌胃給藥3天，第2天給藥后禁食16小時，末次給藥90分鐘后，眼眶取血，用玻片法測定凝血時間(實驗在22℃下進(jìn)行)。
數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
表7本發(fā)明軟膠囊對小鼠凝血時間的影響(x±SD，n＝10)組別 凝血時間(s) 延長率(％)空白對照組 78.3±16.7本發(fā)明膠囊組 98.3±17.9* 26本發(fā)明軟膠囊大劑量組 106.7±23.4**36本發(fā)明軟膠囊中劑量組 98.4±20.5*#26本發(fā)明軟膠囊小劑量組 85.0±22.9 9與空白對照組比較*P＜0.05，**P＜0.01；與本發(fā)明膠囊比較#P＞0.05結(jié)果如表7所示，本發(fā)明軟膠囊120mg/kg、240mg/kg、本發(fā)明膠囊560mg/kg劑量組凝血時間明顯長于空白對照組(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊與膠囊作用強(qiáng)度相當(dāng)(P＞0.05)。
2、動物隨機(jī)分為空白對照組(醫(yī)用豆油)，本發(fā)明膠囊組(280mg/kg)，本發(fā)明軟膠囊組(60mg/kg)、每組90只。連續(xù)灌胃給藥3天，并于第1次灌胃給藥后第隔8小時，各給分批取10只大鼠，水合氯醛麻醉(360mg/kg，ip.)，分離右側(cè)頸總動脈及左頸外靜脈，在聚乙烯管中放入一根長5cm已稱重的七號絲線。以含肝素鈉(50U/ml)的生理鹽水溶液充滿聚乙烯管，聚乙烯管的一端插入左頸外靜脈，另一端插入右頸總動脈。打開夾閉血管的動脈夾，使血流從右總頸動脈流經(jīng)聚乙烯管后，返回左頸外靜脈。開放血流15min后立即取出棉線稱重，減去絲線重量即得血栓濕重，并分別觀察給藥后8h、16h、24h、32h、40h、48h、56h、64h、72h后，血栓的濕重，觀察本發(fā)明膠囊及軟膠囊的起效時間及速度。
數(shù)據(jù)以x±SD表示，并與空白對照組比較，T-test檢驗。
表8對大鼠動—靜脈旁路血栓形成的影響(x±s，n＝10)

與空白對照組比較*P＜0.05。
結(jié)果如表8所示，開放血流15min后絲線上有明顯的血栓黏附，本發(fā)明軟膠囊60mg/kg、本發(fā)明膠囊280mg/kg均可明顯抑制血栓的形成，與空白對照組比較有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)；相同原料藥的本發(fā)明軟膠囊與膠囊作用強(qiáng)度相當(dāng)(P＞0.05)。但本發(fā)明軟膠囊的起效速度快于本發(fā)明膠囊(56h開始起效，與空白對照組比較有顯著性差異，P＜0.05。)以上實驗說明與膠囊劑相比，軟膠囊劑在保證療效的基礎(chǔ)上，減少了臨床服用劑量。膠囊劑每粒0.4g，每日3次，每次2-4粒。軟膠囊劑每粒0.4g，每日3次，每次1-2粒，劑量減少了一半。另外，起效速度也快于膠囊劑。
滴丸劑主要藥效學(xué)結(jié)論與軟膠囊劑相同。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明明顯具有劑量小、工藝精制，起效快，療效顯著的特點，達(dá)到了發(fā)明的目的。
對于兩種劑型制備需要選用的輔料及工藝，我們作了實驗選擇對于軟膠囊劑1、囊材配比關(guān)系的確定軟膠囊囊材的主要成分為基質(zhì)和增塑劑組成。其中基質(zhì)常用物質(zhì)為明膠，起到軟膠囊骨架的作用；增塑劑常用物質(zhì)為甘油，填充于骨架中的間隙，可增加膠皮的可塑性。在熬膠過程中，為了保持膠液的穩(wěn)定性，還須加入適量的水，水不宜太多。水過量，膠液的凍力升高，給制膠帶來困難，同時也將延長定型及干燥的時間。
為考察不同配比的關(guān)系對囊殼的崩解時間的影響，我們固定明膠及水的量，而加入不同比例的甘油進(jìn)行考察
表9囊材的不同配比對崩解時間的影響配比崩解時間(分組(n＝4)明膠(份) 甘油(份) 水(份) 鐘)1 1 0 1262 1 0.1 1183 1 0.3 1134 1 0.6 110通過試驗可知，隨著甘油量的增加，崩解時間逐漸縮短。但另一方面甘油量的過多，制備的軟膠囊較軟，成形性差。我們經(jīng)反復(fù)試驗，選擇明膠∶甘油∶水為1∶0.3∶1的比例制膠。
2、內(nèi)容物處方研究內(nèi)容物處方研究主要是進(jìn)行稀釋劑的選擇，理論上軟膠囊中可作為稀釋劑的輔料有多種，如聚乙二醇400，植物油等。我們選擇三種不同的處方系統(tǒng)進(jìn)行了研究和比較，處方中藥物成分與各輔料的配比見表7。
表10三種不同處方處方1 處方2 處方3本發(fā)明提取物 本發(fā)明提取物本發(fā)明提取物(43.0g) (43.0g) (43.0g)蜂蠟(2.0g)豆油(57.0g) 豆油(55.0g) PEG400(57.0g)制法處方1取處方量的本發(fā)明提取物，加入處方量的豆油研磨均勻即可。
處方2 取處方量蜂蠟融解于加熱的豆油中，將此溶液與處方量的本發(fā)明提取物研磨均勻即可。
處方3 取處方量的本發(fā)明提取物，加入處方量的PEG-400研磨均勻即可。
結(jié)果由處方1所制得軟膠囊內(nèi)容物靜置后快速分層，部分不溶性成分聚集成團(tuán)，難于再次分散，可見藥物中含有的水溶性成分與豆油的相容性較差，不利于其在豆油中的均勻分散；處方2中添加蜂蠟后，明顯提高了提取物的分散效果，但內(nèi)容物的粘稠度也相應(yīng)增大，流動性降低。同時，靜置較長時間后仍出現(xiàn)明顯的聚集和分層，不適于制作軟膠囊；由處方3所制得軟膠囊內(nèi)容物細(xì)膩、均勻，長時間室溫放置后仍未見分層或聚集現(xiàn)象，且流動性較好，適于制作軟膠囊。
對于滴丸劑滴丸劑常用的基質(zhì)有聚乙二醇6000、聚乙二醇4000、聚乙二醇400、聚乙二醇10000、明膠、硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、氫化植物油等，本發(fā)明選用熔點低同時具有良好分散力和較大內(nèi)聚力的聚乙二醇4000和用于調(diào)整滴丸硬度、耐熱性及流動性的PEG6000進(jìn)行滴丸成型處方的設(shè)計和篩選。
滴丸劑常用的冷卻劑有液體石蠟、植物油、甲基硅油等。冷卻劑與藥液間的密度差是影響滴丸的重要因素。在一定密度差范圍內(nèi)，密度越接近，滴丸的形狀越圓。而滴丸熔融物的相對密度一般都大于1，與甲基硅油的相對密度(0.970-0.980)較接近，通過多次預(yù)試，我們選用比重較大且冷卻效果較好的甲基硅油為冷卻劑處方設(shè)計先以PEG4000作基質(zhì)，將其熔融后與藥物混合均勻，80℃保溫。以10-15℃的甲基硅油為冷卻劑，加入滴丸機(jī)中滴制成丸，以滴丸基本能成型為依據(jù)，篩選出藥物與基質(zhì)的最低配比為1∶3，在此基礎(chǔ)上，以PEG6000替換PEG4000，設(shè)計出一系列不同配比的基質(zhì)處方，見下表。
成型處方組成處方號 藥物 PEG4000 PEG6000113 0212 1311 2410 3
按表8取各處方的藥物和基質(zhì)，制成滴丸，以丸的圓整度、溶散時限、硬度為考察指標(biāo)。實驗結(jié)果表明，當(dāng)混合基質(zhì)中PEG6000比例增大時，料液的粘度較高，易拖尾，圓整度差。而采用PEG4000為基質(zhì)制成的滴丸，其圓整度、硬度、溶散時限均符合滴丸劑的要求，故本試驗篩選本發(fā)明滴丸最佳成型處方是藥物∶PEG4000為1∶3。
具體實施例方式
本發(fā)明的實施例1取川芎15份、當(dāng)歸15份、桂枝10份、乳香8份、沒藥8份粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉15份超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎8份、水蛭15份、地龍15份粗粉加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍15份、黃芪40份、紅花8份、桃仁15份、桑枝15份、牛膝15份、雞血藤10份與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉備用；取上述干粉及超臨界萃取物，加分散劑，制成軟膠囊或滴丸。
本發(fā)明的實施例2取川芎20份、當(dāng)歸35份、桂枝15份、制乳香18份、制沒藥10份粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉35份超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎10份、水蛭35份、地龍20份加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍35份、黃芪50份、紅花18份、桃仁20份、桑枝35份、牛膝20份、雞血藤25份，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉，加超臨界萃取物、聚乙二醇400，膠體磨研磨，制膠，軟膠囊機(jī)壓丸，即得。
本發(fā)明的實施例3取川芎35份、當(dāng)歸20份、桂枝25份、乳香10份、沒藥18份粗粉超臨界萃取，取丹參20份粗粉超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎18份、水蛭10份、地龍35份加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍20份、黃芪80份、紅花10份、桃仁35份、桑枝15份、牛膝35份、雞血藤15份，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉，過篩后，加入已熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)中，滴制成丸，即得。
本發(fā)明的實施例4取藥材粗粉川芎15份、當(dāng)歸15份、桂枝10份、乳香8份、沒藥8份超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉15份超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用30％量(無水乙醇/藥材，ml/g)的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。合并兩個階段萃取物備用。取藥材粗粉全蝎20份、水蛭15份、地龍15份，加70％乙醇(70％乙醇/藥材，g/g)滲漉，收集10倍滲漉液備用。取藥材粗粉赤芍15份、黃芪40份、紅花8份、桃仁15份、桑枝15份、牛膝15份、雞血藤10份藥材，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小時，合并過濾液，減壓濃縮至相對密度為1.05(60℃)，加95％乙醇至含醇65％后，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮至相對密度為1.1(60℃)，噴霧干燥，即得干粉，過140目篩，加超臨界萃取物，加入PEG-400至250份，膠體磨研磨，按明膠∶甘油∶水為1∶0.3∶1的比例制膠，軟膠囊機(jī)壓丸。
本發(fā)明的實施例5取藥物粗粉川芎27份、當(dāng)歸27份、桂枝20份、乳香(制)13份、沒藥(制)13份超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉27份超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用30％量(無水乙醇/藥材，ml/g)的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。取藥材粗粉全蝎13份、水蛭27份、地龍27份，加70％乙醇滲漉，收集10倍量(70％乙醇/藥材，ml/g)滲漉液備用。取藥材粗粉赤芍27份、黃芪66份、紅花13份、桃仁27份、桑枝27份、牛膝27份、雞血藤20份，與超臨界萃取后藥渣和滲漉后藥渣合并，加12倍量的水，煎煮2次，每次2小時，合并煎液，減壓濃縮至相對密度為1.05(60℃)，加95％乙醇至含醇量為65％，吸取上層清液，下層液離心，將離心后上清液與上層清液及滲漉液合并，減壓濃縮至相對密度為1.1(60℃)，噴霧干燥，得固形物，過120目篩后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)貯料罐中，保持藥液溫度80℃，滴頭溫度60℃，調(diào)節(jié)滴速，滴制成丸。
權(quán)利要求
1.一種用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑，其特征在于它主要是用如下重量份的原料藥黃芪40-90份、赤芍15-40份、丹參15-40份、當(dāng)歸15-40份、川芎15-40份、桃仁15-40份、紅花8-20份、制乳香8-20份、制沒藥8-20份、雞血藤10-30份、牛膝15-40份、桂枝10-30份、桑枝15-40份、地龍15-40份、全蝎8-20份和水蛭15-40份制備成軟膠囊劑或滴丸劑。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑，其特征在于準(zhǔn)確的說，它主要是用如下重量份的原料藥黃芪66份、赤芍27份、丹參27份、當(dāng)歸27份、川芎27份、桃仁27份、紅花13份、制乳香13份、制沒藥13份、雞血藤20份、牛膝27份、桂枝20份、桑枝27份、地龍27份、全蝎13份和水蛭27份制備成軟膠囊劑或滴丸劑。
3.如權(quán)利要求1或2所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法，其特征在于采用超臨界萃取法提取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥中的揮發(fā)油成分及丹參中丹參酮類脂溶性有效成分，地龍、全蝎、水蛭采取滲漉法提肽類等活性物質(zhì)，然后將赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤幾味藥材粗粉及超臨界萃取后藥渣和滲漉后藥渣用水煎煮提取水溶性有效成分，再用醇沉法除去淀粉、粘液質(zhì)、樹膠類等水溶性雜質(zhì)，最后分別加入不同的輔料制成軟膠囊劑或滴丸劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述軟膠囊劑可以這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎、水蛭、地龍加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉備用；取上述干粉及超臨界萃取物，加聚乙二醇400，膠體磨研磨，制膠，軟膠囊機(jī)壓丸，即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述軟膠囊劑可以這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用無水乙醇/藥材，ml/g30％量的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。合并兩個階段萃取物備用。取全蝎、水蛭、地龍藥材，粉成粗粉，加一定量的乙醇/藥材，g/g70％乙醇浸漬24小時后，進(jìn)行滲漉，收集10倍滲漉液，滲漉液備用。取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤藥材，粉成粗粉，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，煎煮2次，每次加12倍量的水，每次2小時，紗布過濾，合并過濾液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加95％乙醇至含醇65％后，靜置24小時，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮至60℃相對密度為1.1，噴霧干燥，即得干粉備用。取過140目篩的干粉及超臨界萃取物，加入PEG-400，攪拌均勻后，膠體磨研磨，即得；按明膠∶甘油∶水為1∶0.3∶1的比例制膠，采用軟膠囊機(jī)壓丸，即得。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述滴丸劑這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，取丹參粗粉超臨界萃取，合并兩個階段萃取物備用；全蝎、水蛭、地龍加乙醇滲漉，收集滲漉液備用；取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤，與超臨界萃取和滲漉后的藥材合并，用水煎煮，濾液減壓濃縮后醇沉，將上清液與滲漉液合并，減壓濃縮，噴霧干燥，得干粉，過篩后，加入已熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)中，滴制成丸，即得。
7.根據(jù)權(quán)利要求3或6所述的用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑的制備方法，其特征在于所述滴丸劑可以這樣制備取川芎、當(dāng)歸、桂枝、乳香、沒藥粗粉超臨界萃取，萃取壓力28Mpa，萃取溫度40℃，萃取2小時，萃取物備用；取丹參粗粉超臨界萃取，萃取壓力30Mpa，萃取溫度40℃，使用無水乙醇/藥材，ml/g30％量的無水乙醇作為夾帶劑，萃取2小時，回收溶劑后萃取物備用。取全蝎、水蛭、地龍粗粉加乙醇/藥材，ml/g70％乙醇浸漬24小時后，以5ml/min/kg的速度進(jìn)行滲漉，收集10倍量滲漉液備用。取赤芍、黃芪、紅花、桃仁、桑枝、牛膝、雞血藤藥材粗粉與超臨界萃取后藥渣和滲漉后藥渣合并，浸泡3小時后，加12倍量的水，煎煮兩次，每次2小時，合并煎液，減壓濃縮至60℃相對密度為1.05，加95％乙醇至含醇量為65％，靜置24小時，吸取上層清液，下層液離心，將離心后上清液與上層清液及滲漉液合并，減壓濃縮至60℃相對密度為1.1，噴霧干燥，即得固形物。過120目篩后，加入3倍量已熔融的聚乙二醇4000中，攪拌，使分散均勻，再加入超臨界萃取物，攪拌后加入滴丸機(jī)貯料罐中，保持藥液溫度80℃，滴頭溫度60℃，調(diào)節(jié)滴速，滴制成丸。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療中風(fēng)和胸痹的中藥制劑及其制備方法，它以黃芪、丹參、當(dāng)歸、川芎、赤芍等16味藥材制備而成，具有益氣活血、化淤通絡(luò)之功效，主治氣虛血滯、脈絡(luò)淤阻所致中風(fēng)中經(jīng)絡(luò)，半身不遂、肢體麻木、口眼歪斜、舌強(qiáng)語蹇及胸痹心痛、胸悶、心悸、氣短；腦梗塞、冠心病心絞痛屬于上述證候者；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有劑量小、工藝精制，起效迅速、療效顯著的特點。
文檔編號A61P9/10GK1615958SQ20041004080
公開日2005年5月18日 申請日期2004年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月30日
發(fā)明者趙濤 申請人:咸陽步長醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司