專利名稱：舒必利在制藥中的新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗精神病藥舒必利的用途，尤其是在制藥領(lǐng)域中的用途。
背景技術(shù)：
3，4亞甲二氧甲基苯丙胺(3，4-methylenedioxy-methamphetamine，MDMA，我國俗稱“搖頭丸”，在該說明書的后續(xù)內(nèi)容中，以“MDMA”代表“3，4亞甲二氧甲基苯丙胺”)屬于苯丙胺類興奮劑，也是一種強有力的間接單胺能激動劑，能誘導新奇感覺、增強快感、提高興奮性，是娛樂場所易獲得的非法藥品(Kaplan HI，and Sadock BJ.Synopsis ofPsychiatry.8th ed.BaltimoreMaryland Composition publishers，Inc.1998，pp407-412)。近年來以MDMA為代表的苯丙胺類興奮劑在國際上迅速泛濫，我國也面臨著繼海洛因之后MDMA流行性濫用的威脅。MDMA能破壞實驗動物和人類不同腦區(qū)的5-HT能神經(jīng)末梢，多次使用可導致5-HT的長期耗竭，引起長期的神經(jīng)毒性(Hegadoren KM，Baker GB，Bourin M.3，4-methylenedioxy analogues of amphetaminedefining the risks to humans.Neurosci Biobehav Rev，1999；24539-553)。目前主要的治療及干預方向集中在用藥物誘導低熱或阻止MDMA所致高熱，但尚無有效拮抗此類神經(jīng)毒性的藥品。
舒必利，化學名稱為N-[甲基-(1-乙基-2-吡咯烷基)]-2-甲氧基-5-(氨基磺?；?-苯甲酰胺，分子式C15H23N3O4S，分子量341.42，化學結(jié)構(gòu)式如下 舒必利是苯甲酰胺類抗精神病藥，能選擇性阻斷中腦邊緣系統(tǒng)的多巴胺D2受體，增加多巴胺的更新，并能從多巴胺受體部位置換出具有放射活性的配體，在臨床上已應(yīng)用多年，主要用于治療精神分裂癥、分裂情感性精神障礙、伴精神病性癥狀的抑郁癥等，亦可用于止吐、治療胃及十二指腸潰瘍、偏頭痛及前庭性眩暈等疾病(見《臨床精神藥理學》P158-159，王祖忻等主編，北京醫(yī)科大學中國協(xié)和醫(yī)科大學聯(lián)合出版社，1993年5月)，其劑型主要為片劑(白色)和針劑(無色透明)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于證明舒必利的新用途，即在制藥中的新用途，為治療或預防MDMA所致神經(jīng)毒性提供一種新藥。
本發(fā)明通過實驗證明MDMA造成實驗大鼠的5-HT能神經(jīng)毒性，其功能改變包括前腦組織5-HT及其代謝產(chǎn)物5-HIAA的長期減少，5-HT攝取位點(即5-HT轉(zhuǎn)運體SERT)減少及色氨酸羥化酶的活性降低；形態(tài)學上可引起5-HT能神經(jīng)末梢的損害以及膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)表達的上調(diào)。在對實驗大鼠給予MDMA之前半小時給予舒必利，在對實驗大鼠給予MDMA的同時給予舒必利，在對實驗大鼠給予MDMA之后半小時、5小時、12小時給予舒必利，均能減少額葉皮層、海馬和紋狀體三個腦區(qū)5-HT的耗竭，并對SERTmRNA的表達下調(diào)具有明顯的抑制作用；神經(jīng)病理學的結(jié)果顯示舒必利還能抑制MDMA所致的銀染色陽性面積的減少，并使膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達下調(diào)，這間接反映神經(jīng)損傷程度的減輕。所給舒必利的劑量為40mg/kg～80mg/kg。因此，可將舒必利用來作為治療或預防MDMA所致神經(jīng)毒性的藥品，本發(fā)明采用高效液相色譜法(HPLC)檢測5-HT，原位雜交法檢測SERTmRNA的表達，銀染色法顯示神經(jīng)末梢的損害，免疫組化SP法檢測GFAP的表達。
本發(fā)明具有以下有益效果1、本發(fā)明對已知化合物舒必利——N-[甲基-(1-乙基-2-吡咯烷基)]-2-甲氧基-5-(氨基磺?；?-苯甲酰胺發(fā)掘了新的醫(yī)療用途，開拓了一個新的應(yīng)用領(lǐng)域。
2、本發(fā)明對MDMA中毒的治療提供了一種有效的新藥品，可抵御毒品對人們的危害，具有明顯的社會效益和經(jīng)濟效益。


圖1是用原位雜交法檢測SERTmRNA表達的結(jié)果圖，其中，a圖顯示了MDMA組的SERTmRNA原位雜交結(jié)果，c圖顯示了生理鹽水對照組的SERTmRNA原位雜交結(jié)果，b圖顯示了既給予MDMA、又注射舒必利(40mg/kg，給予MDMA半小時后)的實驗組的SERTmRNA原位雜交結(jié)果；圖2是銀染色法的結(jié)果圖，其中，a圖顯示了MDMA組的銀染色結(jié)果，c圖顯示了生理鹽水對照組的銀染色結(jié)果，b圖顯示了既給予MDMA、又注射舒必利(40mg/kg，給予MDMA半小時后)的實驗組的銀染色結(jié)果；
圖3是免疫組化SP法檢測GFAP表達的結(jié)果圖，其中，a圖顯示了MDMA組的GFAP表達結(jié)果；c圖顯示了生理鹽水對照組的GFAP表達結(jié)果；b圖顯示了既給予MDMA、又注射舒必利(40mg/kg，給予MDMA半小時后)的實驗組的GFAP表達結(jié)果。
具體實施例方式
1、材料與方法1.1材料1.1.1動物 Wistar雄性大鼠150只，體重140±2克，購自四川大學實驗動物中心，將動物隨機分為10組，每組15只。實驗前讓動物在清潔恒溫(20℃±2℃)恒濕(濕度50％)飼養(yǎng)室適應(yīng)3天，每天抓取一次，并單籠飼養(yǎng)，整個實驗過程中自由飲水及進食。
1.1.2藥品和試劑MDMA由中國藥品生物制品檢定所提供。舒必利為上海禾豐制藥廠提供(批號000801)。以上藥品均用生理鹽水溶解，給藥體積為1ml/kg。SERTmRNA原位雜交試劑盒購自武漢博士德公司。10％水合氯醛(由四川大學華西醫(yī)院藥房提供，批號020524)，用于動物麻醉。膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP(兔單克隆抗體，稀釋度為1∶300)購自北京中山公司。
1.2、方法1.2.1動物實驗過程10組中隨機選取一組為MDMA實驗組(B組)，五組為舒必利低劑量干預組(C、D、E、F、G組)，三組為高劑量干預組(c、d、e組)，一組為生理鹽水組(A組)。B組給予MDMA(8×20mg/kg每天兩次，8am 8pm i.p×4天)制成亞急性中毒模型(Hegadoren KM，Baker GB，Bourin M.3，4-methylenedioxy analogues of amphetaminedefining the risks to humans.Neurosci Biobehav Rev，1999；24539-553)；C、D、E、F、G組分別在給予MDMA之前30分鐘，在給予MDMA的同時，給予MDMA之后30分鐘、5小時、12小時腹腔注射舒必利(40mg/kg)；c、d、e組分別在給予MDMA之前30分鐘，在給予MDMA的同時，在給予MDMA之后30分鐘腹腔注射舒必利(80mg/kg)；A組注射等體積的生理鹽水。
1.2.2取材過程每組隨機選5只大鼠在最后一次藥物注射后4小時經(jīng)10％水合氯醛(30mg/kg)腹腔注射麻醉，斷頭處死，剝離腦組織，經(jīng)矢狀位切開，隨機取一側(cè)大腦半球，參照《The rat brain in stereotaxic coordinates》(Paxinos G，Watson C.The rat brain instereotaxic coordinates，1986；2nd edition.Academic Press INC.(London)LTD，London.Figure1～25)，修塊后迅速置于冰凍切片機中，行8μm連續(xù)冠狀切片，取含有紋狀體、海馬及額葉皮層等腦結(jié)構(gòu)的切片，置于-70℃冰箱中備用。另一側(cè)大腦半球置于10％福爾馬林中固定，石蠟包埋，制成厚度為8μm的連續(xù)切片備用(因Bielschowsky及Glee Marsland氏改良銀浸染法需要在損傷后短時間內(nèi)處死，方能取得最佳染色效果，見Gallyas F，Zaborszky L，Wolff JR.Experimental studies of mechanisms involved in methods demonstrating axonal and terminal degeneration.Stain Technol，1980，55281-290)。
每組剩下的10只大鼠中隨機選5只在末次藥物注射后7天斷頭處死，取材方法同上，冰凍切片為8μm連續(xù)冠狀切片，石蠟切片為4μm的連續(xù)切片備用。
每組中最后5只大鼠在末次藥物注射后7天，將之拉脫頸髓并斷頭，快速剝離腦組織，在冰上分離出海馬、前腦額葉皮層和紋狀體，置于液氮中速凍后，儲存于-70℃冰箱中備測。測定前將上述組織融化，稱重，在超聲勻漿機(型號Somcs & materials Inc.(203)-744-4400)上勻漿。
1.2.3神經(jīng)遞質(zhì)5-HT的檢測將前述勻漿置于高效液相色譜儀(HPLC)進行檢測。方法如下取用流動相稀釋的5-羥色胺(5-HT)標準溶液100μl(或大鼠腦組織100μl)，加入2ml離心管內(nèi)，分別加入16ng/ml 2，4-二羥基芐胺(I.S)和10％HClO4溶液30μl，混勻，高速離心(12000/min，4℃)8min，取上清液100μl進樣，記錄色譜峰高，由標準系列中5-HT與I.S的峰高比對濃度作標準曲線，求出回歸方程。然后由樣品中5-HT與I.S的峰高比在回歸方程上求出濃度。
儀器與色譜條件Waters510泵，Gilson 141-ECD(玻璃碳工作電極，Ag-AgCl參比電極)，U6K進樣器，460電化學檢測器，高速離心機，旋渦振蕩器。江蘇淮陰KROMASILC18柱(250mm×4.6mm，5μm)，流動相為0.05mol/L NaAc-Hac(PH3.0)∶CH3OH∶0.05mol/LEDTA-Na2(78∶20∶2)，流速1.0ml/min，每1L流動相加入十二烷基硫酸鈉100mg；氧化電壓為0.69V。
1.2.4 SERTmRNA原位雜交檢測按試劑盒說明書提供的方法進行設(shè)計的探針為針對Serotenin transporter(SERT)的寡核苷酸探針，經(jīng)地高辛標記。試劑盒內(nèi)容胃蛋白酶(×10；Pepsin)2ml；預雜交液2ml；Serotenin transporter寡核苷酸探針雜交液2ml；封閉液5ml；生物素化鼠抗地高辛5ml；SABC-POD 5ml；生物素化過氧化物酶5ml。
SERT靶基因的mRNA序列為①5’——GGCGC TTCCC CTACA TATGT TCCCA GAATG——3’②5’——AGGTG GTGTG GGTGA CAGCC ACCTT CCCTT——3’③5’——TGGTT CTGGA GGATC TGCTG GGTGG CCATC——3’實驗中所用緩沖液及其配制
3％檸檬酸——100ml蒸餾水中加檸檬酸(C6H8O7·H2O)，pH2.0；2×SSC——1000ml蒸餾水中加NaCl 17.6g，檸檬酸三鈉(C6H5O7Na3·2H2O，分子量294)8.8g；0.5×SSC——300ml蒸餾水中加100ml2×SSC即可；0.2×SSC——270ml蒸餾水中加30ml2×SSC即可；0.5MPBS——1000ml蒸餾水中加NaCl30g，Na2HPO4·12H2O6g，NaH2PO4·2H2O0.4g，pH7.2-7.6。
操作程序如下1)冷凍切片按下述方法固定固定液為4％多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.4)，含有1/1000DEPC。室溫固定20-30min，蒸餾水分洗滌；2)新鮮配制0.5％H2O2/甲醇室溫處理30min以滅活內(nèi)源性過氧化物酶，蒸餾水洗滌3次；3)暴露mRNA核酸片段切片上滴加3％檸檬酸新鮮稀釋的胃蛋白酶，37℃消化2min，0.5M PBS洗3次×5min，蒸餾水洗1次；4)預雜交按每張切片20μl加預雜交液，放入濕盒，置于37℃恒溫箱孵育4小時，吸取多余液體，不洗；5)雜交按每張切片20μl雜交液，加在切片上，將原位雜交專用蓋玻片的保護膜揭開后，蓋在切片上，恒溫箱37℃雜交過夜；6)雜交后洗滌揭掉蓋玻片，37℃左右水溫的2×SSC洗滌，5min×2次，0.5×SSC洗滌15min×1次，0.2×SSC洗滌15min×1次；7)滴加封閉液37℃30min，甩去多余液體，不洗；8)滴加生物素化鼠抗地高辛37℃孵育60min，0.5M PBS洗5min×4次；9)滴加SABC37℃孵育20min，0.5M PBS洗5min×3次；10)滴加生物素化過氧化物酶37℃孵育20min，0.5M PBS洗5min×4次；11)DBA顯色使用DBA顯色試劑盒-1ml蒸餾水加顯色劑A，B，C各一滴，混勻，加至標本上顯色，用自來水適時終止；12)酒精脫水，二甲苯透明，加拿大膠封片。
陰性對照切片上不加含探針的雜交液，以PBS替代，其余步驟相同。
1.2.5 Bielsehowsky及Glee Marsland氏改良銀浸染法觀察各組神經(jīng)元、軸索及樹突的變化。以上切片均請病理學專家盲法讀片。改良銀浸染方法如下
1)石蠟切片8μm，二甲苯脫蠟，浸入純酒精；2)用0.2％火棉膠封蓋切片，以免脫片；3)擦掉多余的火棉膠，再入70％酒精硬化，蒸餾水洗三次；4)入20％硝酸銀水溶液25～30min，置于37℃孵箱；5)蒸餾水洗2次，入10％甲醛自來水溶液浸二次，每次10秒，切片呈黃色，除掉多余的甲醛溶液；6)切片浸于Glee氏銨銀液30秒；7)排去切片上多余的銨銀液，浸入10％甲醛自來水溶液，每次1min，切片呈棕黃色，甲醛呈黑色，蒸餾水洗；8)調(diào)色于0.2％氯化金水溶液5min；9)蒸餾水洗后入5％硫代硫酸鈉溶液固定5min，自來水清洗；10)吸干、酒精脫水(因金屬沉淀常附于火棉膠膜上，純酒精浸泡可溶解膠膜)，二甲苯透明，樹膠封固。
1.2.6免疫組織化學染色采用SP法(Streptavidin-biotin immuno peroxidase methed)，步驟如下1)4μm厚石蠟組織切片裱于經(jīng)3-氨基丙基三乙氧硅烷(3-amino-propyltriethoxylsilane，APES，Sigma)硅化的切片上，置37℃恒溫箱48小時；2)二甲苯脫蠟10min×2，依次通過梯度乙醇(100％、95％、80％、70％)水化各5min，蒸餾水洗5min×2；3)置于新鮮配制的3％過氧化氫溶液，避光室溫放置20min，以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶；4)蒸餾水洗5min×2；5)切片放入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液內(nèi)(pH6.0)，微波抗原修復15min，冷卻至室溫后取出切片，0.01MPBS(pH7.2)洗5min×2；6)用正常羊血清(即用型)37℃孵育25min，封閉非特異性抗原抗體反應(yīng)；7)棄去多余血清，直接滴加一抗(稀釋度1∶300)，37℃孵育30min后，置4℃冰箱過夜；8)0.01M PBS洗5min×3，滴加生物素標記二抗(即用型)，37℃孵育30min；9)0.01M PBS洗5min×3，滴加鏈親和素-過氧化物酶復合物(即用型)，37℃，孵育30min；
10)0.01M PBS洗5min×3，用新鮮配制的DAB在光學顯微鏡觀察下顯色，自來水沖洗，適時終止；11)Harris蘇木素復染細胞核，1％鹽酸酒精分化，充分水洗返藍，梯度酒精脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。
2、結(jié)果2.1神經(jīng)遞質(zhì)5-HT的檢測結(jié)果神經(jīng)遞質(zhì)5-HT的檢測結(jié)果見表1、表2。給予MDMA 7天后，與生理鹽水組比較，大鼠額葉皮層、海馬和紋狀體的5-HT均有下降(P＜0.05)，三個腦區(qū)的下降率分別為68.14％、74.27％和37.38％，其中海馬的5-HT降低最明顯。將舒必利以40mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時，在給予MDMA的同時，在給予MDMA之后半小時、5小時、12小時注入大鼠體內(nèi)，有效抑制了5-HT的下降；將舒必利以80mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時、在給予MDMA的同時、在給予MDMA之后半小時注入大鼠體內(nèi)，也能有效抑制5-HT的下降。說明兩個劑量之間的舒必利對5-HT功能的損害具有預防和治療作用。
表1大鼠不同腦區(qū)5-HT的檢測結(jié)果(ng/g) (舒必利劑量40mg/kg)組別皮層5-HT P值 海馬5-HT P值 紋狀體5-HT P值生理鹽水組 29.06±1.18*0.00038.16±1.27*0.000 50.56±0.70*0.000MDMA組 9.26±1.44 9.82±2.83 31.66±0.11舒必利+MDMA(-1/2h) 19.34±1.43*0.00027.58±1.07*0.000 40.10±1.33*0.000舒必利+MDMA(同時) 18.94±0.62*0.00016.46±2.73*0.005 40.50±1.82*0.000舒必利+MDMA(+1/2h) 16.94±0.97*0.00016.78±3.09*0.006 35.92±3.11*0.020舒必利+MDMA(+5h)14.54±1.96*0.00114.04±2.77*0.043 34.96±2.07*0.014舒必利+MDMA(+12h) 11.94±0.91*0.00813.24±2.14 0.063 33.86±1.65*0.037*P＜0.05，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
表2大鼠不同腦區(qū)5-HT的檢測結(jié)果(ng/g) (舒必利劑量80mg/kg)組別皮層5-HT P值 海馬5-HT P值 紋狀體5-HT P值生理鹽水組 29.06±1.18*0.00038.16±1.27*0.000 50.56±0.70*0.000MDMA組 9.26±1.44 9.82±2.83 31.66±0.11舒必利+MDMA(-1/2h) 17.54±1.44*0.00024.04±1.87*0.000 39.60±1.97*0.000舒必利+MDMA(同時) 15.82±1.59*0.00020.70±2.78*0.000 34.66±2.32*0.031舒必利+MDMA(+1/2h) 13.20±1.29*0.00218.00±2.47*0.001 33.80±1.63*0.040*P＜0.05，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
2.2 SERTmRNA原位雜交檢測結(jié)果生理鹽水對照組的SERTmRNA原位雜交結(jié)果見圖1中的c圖和表3、表4；MDMA組的SERTmRNA原位雜交結(jié)果見圖1中的a圖和表3、表4，給予MDMA 7天之后大鼠額葉皮層、海馬和紋狀體的SERTmRNA的表達均有較大程度的降低(P＜0.05)，說明MDMA可導致SERTmRNA的表達下調(diào)。將舒必利以40mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時，在給予MDMA的同時，在給予MDMA之后半小時、5小時、12小時注入大鼠體內(nèi)，SERTmRNA的表達上調(diào)，見圖1中的b圖和表3；將舒必利以80mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時、在給予MDMA的同時、在給予MDMA之后半小時注入大鼠體內(nèi)，SERTmRNA的表達也上調(diào)，見表4。說明在不同時間給予舒必利、給藥劑量在40mg/kg～80mg/kg對大鼠額葉皮層、海馬和紋狀體的SERTmRNA表達的降低具有抑制作用(P＜0.05)。
表3三個腦區(qū)SERTmRNA原位雜交結(jié)果(陽性細胞計數(shù)x±S) (舒必利劑量40mg/kg)組別額葉皮層P值海馬 P值 紋狀體 P值生理鹽水組 34.6±1.14*0.000 50.4±2.72*0.000 34.8±3.27*0.000MDMA組 13.5±1.29 19.6±3.65 21.8±3.03舒必利+MDMA(-1/2h) 28.0±3.16*0.000 42.8±1.92*0.000 26.8±2.39*0.02舒必利+MDMA(同時) 18.6±1.82*0.001 34.8±3.96*0.000 27.4±1.95*0.008舒必利+MDMA(+1/2h) 20.6±2.41*0.001 31.4±2.30*0.001 26.4±2.07*0.023舒必利+MDMA(+5h)16.4±1.14*0.005 26.0±2.65*0.015 27.2±1.92*0.010舒必利+MDMA(+12h) 16.0±1.58*0.017 25.2±3.12*0.032 26.0±2.24*0.037*P＜0.05，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
表4三個腦區(qū)SERTmRNA原位雜交結(jié)果(陽性細胞計數(shù)x±S) (舒必利劑量80mg/kg)組別 額葉皮層 P值海馬 P值 紋狀體 P值生理鹽水組 34.6±1.14*0.000 50.4±2.72*0.000 34.8±3.27*0.000MDMA組 13.5±1.2919.6±3.65 21.8±3.03舒必利+MDMA(-1/2h) 27.0±3.16*0.000 40.8±1.92*0.000 27.8±3.12*0.015舒必利+MDMA(同時)19.0±2.07*0.000 31.4±3.36*0.001 26.2±3.03 0.051舒必利+MDMA(+1/2h) 18.4±2.70*0.005 33.4±3.65*0.000 27.4±3.36*0.024*P＜0.05，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
2.3銀染色的結(jié)果生理鹽水對照組的銀染色結(jié)果見圖2中的c圖和表5，MDMA組的銀染色結(jié)果見圖2中的a圖和表5，從圖和表5可以看出，MDMA造成神經(jīng)元軸索脫髓鞘改變，樹突減少(在5-HT能神經(jīng)元集中的腦區(qū)上述變化顯著)，銀染色陽性面積減??；而將舒必利以40mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時，在給予MDMA的同時，在給予MDMA之后半小時、5小時、12小時注入大鼠體內(nèi)，其銀染色陽性面積接近生理鹽水組，神經(jīng)毒性損害較單用MDMA組明顯減輕(見圖2中的b圖和表5)。
表5大鼠三個腦區(qū)銀染的陽性面積(x±S)組別 額葉皮層 P值海馬 P值紋狀體 P值生理鹽水組 66.98±3.45*0.000 58.89±2.72*0.000 75.38±2.63*0.000MDMA組 53.89±3.18 47.66±2.6664.10±1.42舒必利+MDMA(-1/2h) 60.00±3.16*0.016 55.66±2.87*0.002 70.90±3.58*0.004舒必利+MDMA(同時) 59.98±0.93*0.003 52.28±2.40*0.020 67.62±2.76*0.035舒必利+MDMA(+1/2h) 59.74±2.80*0.015 53.16±2.72*0.012 70.42±3.218 0.004舒必利+MDMA(+5h) 59.18±3.11*0.029 52.90±2.36*0.011 68.26±3.64*0.045舒必利+MDMA(+12h) 58.34±2.81*0.047 52.84±2.09*0.009 68.30±2.02*0.014*P＜0.05，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
2.4 GFAP免疫組織化學染色的結(jié)果生理鹽水對照組的GFAP表達結(jié)果見圖3中的c圖和表6，MDMA組的GFAP表達結(jié)果見圖3中的a圖和表6，從圖和表6可以看出，給予大鼠MDMA7天后，額葉皮層、海馬、紋狀體的GFAP表達較生理鹽水對照組增多；將舒必利以40mg/kg的劑量在給予MDMA之前半小時，在給予MDMA的同時，在給予MDMA之后半小時、5小時、12小時注入大鼠體內(nèi)，則三個腦區(qū)的GFAP表達顯著減少(見圖3中的b圖和表6)。
表6GFAP陽性細胞計數(shù)(x±S)組別 額葉皮層 P值 海馬 P值 紋狀體 P值生理鹽水組 6.2±2.94*0.000 8.0±1.58*0.0006.20±1.64*0.000MDMA組 24.8±2.3922.4±1.95 25.8±1.92舒必利+MDMA(-1/2h) 11.4±1.95*0.000 11.6±2.41*0.00014.6±1.92*0.000舒必利+MDMA(同時) 19.0±2.24*0.004 17.0±2.24*0.00420.4±3.44*0.015舒必利+MDMA(+1/2h) 13.8±2.28*0.000 16.4±1.14*0.00019.0±3.39*0.005舒必利+MDMA(+5h) 20.4±2.07*0.014 18.0±1.58*0.00421.0±4.06*0.044舒必利+MDMA(+12h) 20.8±2.39*0.029 18.8±1.92*0.01919.2±4.03*0.011*P＜0.01，與MDMA組比較，在統(tǒng)計學上有顯著性差異。
權(quán)利要求
1.舒必利在制備治療或預防3，4亞甲二氧甲基苯丙胺所致神經(jīng)毒性的藥中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于所給舒必利的劑量為40mg/kg～80mg/kg。
全文摘要
本發(fā)明公開了舒必利在治療或預防3，4亞甲二氧甲基苯丙胺(MDMA)所致神經(jīng)毒性的藥中的應(yīng)用。在對實驗大鼠給予MDMA之前半小時給予舒必利，在對實驗大鼠給予MDMA的同時給予舒必利，在對實驗大鼠給予MDMA之后半小時、5小時、12小時給予舒必利，均能減少額葉皮層、海馬和紋狀體三個腦區(qū)5－HT的耗竭，并對SERTmRNA的表達下調(diào)具有明顯的抑制用；神經(jīng)病理學的結(jié)果顯示舒必利還能抑制MDMA所致的銀染色陽性面積的減少，并使膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達下調(diào)，這間接反映神經(jīng)損傷程度的減輕。所給舒必利的劑量為40mg/kg～80mg/kg。
文檔編號A61P25/36GK1579388SQ200410022529
公開日2005年2月16日 申請日期2004年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月14日
發(fā)明者王雪, 黃明生, 孫學禮, 李靜, 李素霞, 況偉宏 申請人:四川大學華西醫(yī)院