專利名稱：抑制癌癥的瘢痕形成的方法
相關(guān)申請的交叉參考本申請是一份部分繼續(xù)申請，要求美國專利申請No.10/657,414的優(yōu)先權(quán)，題為抑制血管生成的方法，于2003年9月8日提交，它是美國專利申請No.10/153,003的繼續(xù)申請，題為抑制血管生成的方法，于2002年5月22日提交，現(xiàn)已頒布為美國專利No.6,632,798，還要求美國臨時專利申請No.60/431,780的優(yōu)先權(quán)，題為抑制癌癥的方法，于2002年12月9日提交。
備注聯(lián)邦資助的研究/開發(fā)不可用發(fā)明背景本發(fā)明涉及有效抑制癌癥、瘢痕形成、破壞細(xì)胞骨架和賦予抗感染性的方法。更確切地，本發(fā)明涉及治療與癌癥、瘢痕形成和感染有關(guān)的疾病的方法，和在患有這類疾病的活體動物、包括人類中遞送這種活性的方法。
癌癥是失去調(diào)節(jié)的細(xì)胞與腫瘤生長。盡管細(xì)胞的存活、分化、運動和侵襲在傷口愈合、胎兒與胚胎發(fā)育中和在黃體、子宮內(nèi)膜與胎盤的形成中的過程是天然的并且是受調(diào)節(jié)的。這些過程對健康和生長是緊要的，受到致癌基因、腫瘤抑制基因和無數(shù)生長因子的非常好地調(diào)節(jié)，不過它們在失調(diào)時能夠引起腫瘤形成。不過，由遺傳與環(huán)境因素所導(dǎo)致的基因改變能夠引起病原性與失調(diào)的生長和腫瘤。引起癌癥和其他疾病的病原性細(xì)胞調(diào)節(jié)障礙是所不希望的，是治療性干預(yù)的目標(biāo)。
發(fā)明的簡要概述在一種特征中，本發(fā)明涉及抑制癌細(xì)胞的方法，該方法包含使具有癌細(xì)胞的細(xì)胞、組織或器官與治療有效量的式I化合物接觸。式I化合物具有下列通式式I 式I中，R1和R2是包括但不限于下列的官能團羥基、-NH2和-SH基團。
式I中，R3是包括但不限于下列的官能團氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3。
式I中，R4是包括但不限于下列的官能團氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)。
式I中，R5是包括但不限于下列的官能團氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3。
式I中，X1-X3是包括但不限于下列的官能團氧、硫、-CH2-或羧基，它們可以是不同的，但是優(yōu)選地是相同的官能團。
在優(yōu)選的本發(fā)明實施方式中，式I化合物是式C25H32O13的橄欖苦苷(oleuropein)，描述在THE MERK INDEX的第十版中，專題編號為6709，如式II所示。
式II
可以獲得植物提取物，其可以包含植物提取物的任意醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水提取液，將含有橄欖苦苷，即式II所示化合物。植物提取物是從橄欖樹Olea europaea L.、女貞樹Ligustrumobtusifolium(木犀科)等的包括但不限于下列的植物部分獲得的葉、芽、果實、樹干、樹皮和根。
另一方面，本發(fā)明涉及有力抑制組織或器官中癌細(xì)胞的方法，該方法包含使該細(xì)胞與藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有橄欖苦苷、即式II所示化合物或式I所示其衍生物或者其水解產(chǎn)物，這可以包括但不限于橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate或其藥物組合物，含量足以抑制癌癥。在當(dāng)前優(yōu)選的實施方式中，該細(xì)胞位于活的生物體中。這類組合物可以包含植物提取物的醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液，或者其醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液或組分的衍生物。
另一方面，本發(fā)明涉及治療由不需要與失控的癌細(xì)胞生長、存活、復(fù)制、能動性、侵襲和轉(zhuǎn)移所介導(dǎo)或者與之有關(guān)的癌癥疾病的方法，該方法包含對活的動物給以有效劑量的藥物組合物，所述藥物組合物含有橄欖苦苷、即式II所示化合物或式I所示其衍生物或者其水解產(chǎn)物，這可以包括但不限于橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate或其藥物組合物，劑量足以抑制癌細(xì)胞存活、復(fù)制、生長、能動性、侵襲和轉(zhuǎn)移。這些方法可用于改善以異常或不可取的癌細(xì)胞增殖和/或移行為特征的病癥后果。這類組合物可以包含植物提取物X的醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液，或者其醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液或組分的衍生物。
另一方面，本發(fā)明涉及癌細(xì)胞被橄欖苦苷的葡萄糖部分選擇性靶向的方法，橄欖苦苷即式II所示化合物或式I所示其衍生物或者其水解產(chǎn)物，這可以包括但不限于橄欖苦苷苷元、elenolicacid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate或其藥物組合物，用量足以抑制癌癥。按照這樣的方法，橄欖苦苷借助受促進的擴散作用通過葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(GLUT)進入所述細(xì)胞。目前存在12種GLUT蛋白，它們具有不同的葡萄糖親和性和組織特異性分布。已有報道人類惡性腫瘤是以葡萄糖攝取和利用升高為特征的，這是基于多種GLUT同工型的表達增強。例如，發(fā)現(xiàn)GLUT1和/或GLUT 3mRNA在乳腺癌、食道癌和結(jié)腸癌中增加。癌細(xì)胞過度表達GLUT蛋白，因而更有可能攝取含有葡萄糖分子的橄欖苦苷。
另一方面，本發(fā)明涉及破壞細(xì)胞骨架和防止其再生的方法，由此動物細(xì)胞圓潤，不能分化、運動或侵襲，該方法包含使該細(xì)胞與藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有橄欖苦苷、即式II所示化合物或式I所示其衍生物或者其水解產(chǎn)物，這可以包括但不限于橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate或其藥物組合物，含量足以抑制癌癥。在當(dāng)前優(yōu)選的實施方式中，所述細(xì)胞位于活的生物體中。這類組合物可以包含植物提取物的醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液，或者其醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液或組分的衍生物。
另一方面，本發(fā)明涉及破壞細(xì)胞骨架的方法，由此動物細(xì)胞耐受細(xì)菌、病毒或寄生生物的感染，該方法包含使該細(xì)胞與藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有橄欖苦苷、即式II所示化合物或式I所示其衍生物或者其水解產(chǎn)物，這可以包括但不限于橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate或其藥物組合物，含量足以使所述細(xì)胞耐受感染。這類組合物可以包含植物提取物X的醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液，或者其醇性、丙酮、無機與有機酸或堿和/或水溶液或組分的衍生物。按照這樣的方法，相信動物細(xì)胞骨架、包括人類細(xì)胞骨架在被各種病毒、細(xì)菌和寄生生物感染期間被靶向了。例如，病原體李斯特氏菌單細(xì)胞基因是一種被宿主細(xì)胞內(nèi)在化的細(xì)菌，它誘導(dǎo)肌動蛋白(一種細(xì)胞骨架蛋白)在其表面聚合，并且利用來自聚合作用的能量驅(qū)動細(xì)胞內(nèi)能動性和細(xì)胞到細(xì)胞的傳播。橄欖苦苷抑制動物細(xì)胞的細(xì)胞骨架再生，能夠防止感染性疾病的蔓延。在當(dāng)前優(yōu)選的實施方式中，所述細(xì)胞位于活的生物體中。
本發(fā)明及其優(yōu)選實施方式的其他特征、目的和優(yōu)點將因下列詳細(xì)說明而變得顯而易見。
附圖的簡要說明參照附圖，本發(fā)明的這些以及其他特征將變得更加顯而易見。


圖1基質(zhì)膠侵襲測定法。在基質(zhì)膠上研究大多數(shù)侵襲性癌(結(jié)腸)，我們發(fā)現(xiàn)橄欖苦苷的作用。用0.1％橄欖苦苷處理過的細(xì)胞完全停止了侵襲凝膠，黏附于底側(cè)上的濾器?；|(zhì)膠侵襲室的圖解如(A)所示。在實驗過程中對細(xì)胞層和濾器平面照相。含有未處理細(xì)胞的侵襲室如(B)和(C)所示，分別對細(xì)胞和濾器平面照相。從照片中明顯看到，在濾器的焦點平面能夠見到細(xì)胞陰影，表明它們接近濾器，并且移動穿過基質(zhì)膠層。相反，含有用橄欖苦苷處理過的細(xì)胞的侵襲室濾器平面照片(F)不含有細(xì)胞陰影。事實上，細(xì)胞在基質(zhì)膠中高得多的平面上被照相，在基質(zhì)膠中似乎不是可移動的(E)。在實驗終點，徹底除去基質(zhì)膠。將濾器固定，染色，照相。已經(jīng)移行穿過基質(zhì)膠層并且黏附于濾器下側(cè)的細(xì)胞如(D)和(G)所示。從含有橄欖苦苷的侵襲室(G)所得到的濾器缺乏細(xì)胞，表明沒有細(xì)胞到達濾器。來自未處理室的濾器含有穿透基質(zhì)膠并且黏附于濾器的細(xì)胞(D)。
圖2細(xì)胞移行測定法。在本測定法中，將腎腺癌細(xì)胞培養(yǎng)至匯合，然后用無菌木條劃傷，形成一條路的樣子。然后使細(xì)胞培育并且移行穿過這條路，以修復(fù)培養(yǎng)物中的傷口。(A)、(B)、(C)、(D)所示未處理細(xì)胞已經(jīng)成功地封閉了傷口區(qū)域。與之相比，(E)、(F)、(G)、(H)所示用0.01％橄欖苦苷處理過的細(xì)胞沒有有效地封閉傷口。箭頭表明傷口的方向。
圖3描繪上述圖2細(xì)胞移行測定法的變化。本測定法中的傷口更加廣泛，形成轉(zhuǎn)角或彎曲邊緣。在本實驗中，使惡性黑素瘤細(xì)胞生長至匯合，然后用木條劃傷，方式如上所述。(A)所示為未處理細(xì)胞，在平板上沿所有方向移行。用0.01％橄欖苦苷溶液處理過的細(xì)胞(B)的移行完全停止了。在這種傷口測定法中能夠清楚地見到傷口邊緣，用于評估移行細(xì)胞的前進。
圖4利用與圖3相同的細(xì)胞描繪上述實驗的變化，除了平板接種成圓圈以外。(A)已處理細(xì)胞(0.01％橄欖苦苷)沒有移行至指定圓圈以外。不過(B)未處理細(xì)胞向外徑向移行，覆蓋平板。
圖5生長測定法。將五種代表大多數(shù)侵襲性癌癥的具體癌細(xì)胞系以相等的數(shù)目接種在含有不同濃度橄欖苦苷的平板上。5天后，利用MTS測定法評估細(xì)胞數(shù)，在圖片y軸上顯示光密度(490nm)值。x軸代表橄欖苦苷的濃度。沒有進行數(shù)據(jù)的處理。這些代表在微量平板讀數(shù)器上所進行的真實而原始的統(tǒng)計。在全部所研究的癌癥中，橄欖苦苷有效地抑制生長。
圖6基質(zhì)膠上的管破裂測定法。將細(xì)胞置于基質(zhì)膠型管狀網(wǎng)絡(luò)上，后者在24-48小時內(nèi)瓦解為叢(圖6A，頂行)。管瓦解過程的特寫證明它因管的退縮而發(fā)生，由此結(jié)節(jié)(管交叉處)更接近于彼此而合并(圖6A，底行)。備細(xì)胞仍然延長遍及各處。這種緩慢的細(xì)胞移動和收縮過程(24-48小時)牽涉主動的細(xì)胞骨架再生。向所進行的管加入0.1％橄欖苦苷“圓潤”或者誘導(dǎo)各細(xì)胞通過發(fā)生在2小時內(nèi)的快速過程就地形成球形(圖6B)，破壞管狀網(wǎng)絡(luò)?；谛纬汕蛐位蛘邎A潤的細(xì)胞不會運動，無期限地停留在原位這樣一種理解，從而通過防止細(xì)胞骨架再生而阻撓細(xì)胞移動性，使退縮過程中止。
圖7基質(zhì)膠上的管破裂測定法。加入橄欖苦苷，發(fā)生葡萄糖受抑制的細(xì)胞圓潤。
圖8細(xì)胞移行測定法。使兔皮膚成纖維細(xì)胞生長至匯合的單細(xì)胞層，隨后用無菌木條劃傷。然后培育細(xì)胞，使其在培養(yǎng)中修復(fù)傷口。未處理細(xì)胞成功地移行穿過受傷區(qū)域(A)。如(C)所示，用橄欖苦苷(0.01％)處理過的細(xì)胞被有效抑制了。經(jīng)過橄欖苦苷處理的細(xì)胞的特寫顯示單細(xì)胞層的不連續(xù)性(D和E)，這是因為受到橄欖苦苷對細(xì)胞骨架的影響，細(xì)胞形成球形或圓潤。相反，未處理細(xì)胞顯得平坦(B)。洗去細(xì)胞的橄欖苦苷，逆轉(zhuǎn)圓潤過程。細(xì)胞變平，補償單層中的不連續(xù)性(H)，開始從傷口邊緣移行(F和G)。
發(fā)明的詳細(xì)說明下列詳細(xì)說明打算作為當(dāng)前優(yōu)選的發(fā)明實施方式的說明，不打算代表本發(fā)明可以被實施或利用的唯一形式。本說明闡述實施本發(fā)明步驟的功能和順序。不過可以理解，不同的實施方式也可以完成相同或等價的功能和順序，所述等價的功能和順序也打算被涵蓋在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
A.定義術(shù)語“動物”表示具有封閉血管循環(huán)系統(tǒng)的生物，包括鳥、哺乳動物、兩棲動物、魚和爬行動物。這里所用的術(shù)語“動物”也包括人類。
術(shù)語“抗感染性”表示橄欖苦苷賦予動物細(xì)胞的一種性質(zhì)，使這些細(xì)胞抵抗感染劑，象細(xì)菌、病毒和寄生蟲。由橄欖苦苷賦予這種性質(zhì)與其對微生物本身的直接作用無關(guān)，已有文獻詳盡記載。
術(shù)語“癌癥”表示細(xì)胞在組織、器官或人體背景中的失控與失調(diào)生長。
術(shù)語“轉(zhuǎn)移”表示腫瘤細(xì)胞擴散至機體遠(yuǎn)距離部分的過程。該術(shù)語在本文中也用于表示通過轉(zhuǎn)移過程形成的腫瘤。
術(shù)語“接觸”在本文中與下列術(shù)語互換使用合并、加入、混合、穿越、培育、流經(jīng)等。而且，本發(fā)明化合物能夠借助任何常規(guī)方法“給藥”，例如腸胃外、口服、局部和吸入途徑，如本文所述。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”表示這樣的化合物鹽，它們保留游離堿的生物有效性和性質(zhì)，通過與無機酸反應(yīng)而得，例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。藥學(xué)上可接受的鹽例如包括堿金屬鹽，例如鈉和鉀的鹽，堿土金屬鹽和銨鹽。
“足量”、“有效量”、“治療有效量”或“抗血管生成量”表示化合物或組合物有效降低、壓制或抑制血管生成或者導(dǎo)致與血管生成性疾病有關(guān)的癥狀改善的量。所需結(jié)果可以是主觀性癥狀減輕或者客觀上可鑒別的接受給藥者好轉(zhuǎn)、內(nèi)皮細(xì)胞血管化減少或者血管生成率降低，由臨床醫(yī)師或其他有資格的觀察人員進行記錄。
術(shù)語“治療癌癥”、“療法”等一般表示患有癌癥的動物的任何好轉(zhuǎn)，其中該好轉(zhuǎn)可以歸因于用本發(fā)明化合物治療。該好轉(zhuǎn)可以是主觀性的或客觀性的。例如，如果動物是人，患者可以把精力或活力好轉(zhuǎn)或者疼痛減輕記錄為主觀性癥狀好轉(zhuǎn)或療法響應(yīng)。作為替代選擇，臨床醫(yī)師可以基于身體檢查、實驗室參數(shù)、腫瘤標(biāo)志物或放射照相發(fā)現(xiàn)而注意到腫瘤大小或腫瘤負(fù)荷的減少。一些可供臨床醫(yī)師觀察療法響應(yīng)的實驗室跡象包括測試的正常化，例如白細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞數(shù)、血小板數(shù)、紅細(xì)胞沉降率和各種酶水平。另外，臨床醫(yī)師可以觀察到可檢測的腫瘤標(biāo)志物減少。作為替代選擇，可以利用其他測試來評價客觀性好轉(zhuǎn)，例如聲波圖、核磁共振測試和正電子發(fā)射測試。
“抑制腫瘤細(xì)胞生長”可以借助任何公認(rèn)的測量腫瘤細(xì)胞生長是否已被延緩或消除的方法加以評價。這包括直接觀察和間接評價，例如如上所討論的主觀癥狀或客觀體征。
術(shù)語“烷基”在本文中用于表示分支或不分支的、飽和或不飽和的、具有1-12個碳、優(yōu)選1-6個碳的一價烴原子團。當(dāng)烷基具有1-6個碳原子時，它被稱為“低級烷基”。適合的烷基原子團例如包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、2-丙烯基(或烯丙基)、正丁基、叔丁基、異丁基(或2-甲基丙基)等。正如本文所用的，該術(shù)語涵蓋“取代的烷基”。
“取代的烷基”表示如剛才所述的烷基，包括一個或多個官能團，例如低級烷基、芳基、?；?、鹵素(即烷基鹵，例如CF3)、羥基、氨基、烷氧基、烷基胺、?；被?、酰氧基、芳氧基、芳氧基烷基、巰基、飽和與不飽和的環(huán)狀烴、雜環(huán)等。這些基團可以連接于烷基部分的任何碳。
術(shù)語“S-烷基”在本文中用于表示基團-SR，其中R是如本文所定義的低級烷基或取代的低級烷基。
術(shù)語“芳基”在本文中用于表示芳族取代基，它可以是單一的芳族環(huán)或多個芳族環(huán)，它們稠合在一起、共價連接或者與公共的基團連接，例如亞甲基或亞乙基部分。公共的連接基團也可以是羰基，如二苯酮中的。芳族環(huán)可以包括苯基、萘基、聯(lián)苯、二苯甲基和二苯酮。術(shù)語“芳基”涵蓋“芳基烷基”。
“取代的芳基”表示如剛才所述的芳基，包括一個或多個官能團，例如低級烷基、?；?、鹵素、烷基鹵(例如CF3)、羥基、氨基、烷氧基、烷基胺、?；被ⅤＱ趸?、巰基、飽和與不飽和的環(huán)狀烴，它們與芳族環(huán)稠合、共價連接或者與公共的基團連接，例如亞甲基或亞乙基部分。連接基團也可以是羰基，例如環(huán)己基苯基酮中的。術(shù)語“取代的芳基”涵蓋“取代的芳基烷基”。
術(shù)語“鹵素”在本文中用于表示氟、溴、氯和碘原子。
術(shù)語“羥基”在本文中用于表示基團-OH。
術(shù)語“氨基”在本文中用于表示基團-NRR’，其中R和R’可以獨立地是氫、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基或?；?。
術(shù)語“硝基”在本文中用于表示基團-NO2。
術(shù)語“烷氧基”在本文中用于表示-OR基團，其中R是低級烷基、取代的低級烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基或取代的芳基烷基，其中該烷基、芳基、取代的芳基、芳基烷基和取代的芳基烷基是如本文所述的。適合的烷氧基原子團例如包括甲氧基、乙氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芐氧基、苯乙氧基、叔丁氧基等。
術(shù)語“鏈烯基”在本文中用于表示不飽和的支鏈、直鏈或環(huán)狀一價烴原子團，具有至少一條碳-碳雙鍵。該原子團可以是關(guān)于雙鍵的順式或反式構(gòu)型。適合的鏈烯基原子團例如包括乙烯基、丙烯基、異丙烯基、環(huán)丙烯基、丁烯基、異丁烯基、環(huán)丁烯基、叔丁烯基、戊烯基、己烯基等。
術(shù)語“炔基”在本文中用于表示不飽和的支鏈、直鏈或環(huán)狀一價烴原子團，具有至少一條碳-碳叁鍵。適合的炔基原子團例如包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、異丁炔基、戊炔基、己炔基等。
術(shù)語對映體在本文中用于表示分子實體對之一，它們是彼此的鏡像，并且是不可重疊的。
B.化合物本發(fā)明涉及這樣的發(fā)現(xiàn)，式I化合物抑制癌細(xì)胞生長，可用于治療癌癥疾病。式I化合物具有下列通式式I 其中R1、R2、R3、R4、R5和X1、X2和X3是如上所定義的。在優(yōu)選的本發(fā)明實施方式中，式I化合物是橄欖苦苷，如下式II所示 用在本發(fā)明中的化合物橄欖苦苷可以容易地從植物中獲得，包括但不限于橄欖樹Olea europaea L.、女貞樹Ligustrum obtusifolium(木犀科)。
利用體外和體內(nèi)篩選測定法能夠容易地鑒別適合用在本發(fā)明方法中的化合物。這類測定法可以篩選特定化合物體外與體內(nèi)抑制癌細(xì)胞生長、移動與侵襲或腫瘤產(chǎn)生的能力。作為替代選擇，這類測定法可以篩選特定化合物抑制引起細(xì)胞圓潤的細(xì)胞骨架的能力。例如，下面有詳細(xì)描述的基質(zhì)膠侵襲測定法可以用于篩選給定化合物抑制細(xì)胞侵襲細(xì)胞外基質(zhì)的能力。這種類型的細(xì)胞侵襲是癌癥建立和生長的必需。在如本發(fā)明所進行的基質(zhì)膠侵襲測定法中，將癌細(xì)胞接種在基質(zhì)膠上，后者是細(xì)胞外基質(zhì)。使細(xì)胞消化和侵襲凝膠。已成功侵襲基質(zhì)膠的細(xì)胞黏附于濾器下側(cè)，濾器含有孔。利用顯微鏡聚焦于含有細(xì)胞的腔室的各個平面，可以進行細(xì)胞侵襲基質(zhì)膠的監(jiān)測。在測定終點，完全除去基質(zhì)膠，將濾器固定，染色，以顯露已成功穿透基質(zhì)膠層的細(xì)胞?；跒V器上的大量細(xì)胞數(shù)，可以評估化合物對細(xì)胞侵襲性的抑制作用結(jié)果。這種測定法可以用于評估本發(fā)明化合物的抗癌性質(zhì)。
在另一種測定法中，一些類型的細(xì)胞當(dāng)生長在高濃度基礎(chǔ)膜基質(zhì)(基質(zhì)膠＞10mg/ml)上時在48小時內(nèi)經(jīng)歷一系列形態(tài)變化。這使研究人員可以通過加入到培養(yǎng)物中的化合物對這些變化的作用剖析它們的影響。在此過程期間，細(xì)胞的形態(tài)從平坦的兩維細(xì)胞變?yōu)槿S管樣網(wǎng)絡(luò)。不過，所生成的管是不穩(wěn)定的，最終在48小時內(nèi)因退縮而瓦解。加入到所生成的管中導(dǎo)致細(xì)胞因圓潤而破裂的化合物被認(rèn)為作用于細(xì)胞骨架。這種測定法可以用于評估化合物在本發(fā)明中對細(xì)胞骨架的破壞作用。將為本領(lǐng)域技術(shù)人員所顯而易見的是，本發(fā)明化合物能夠被單獨給藥，采取藥學(xué)上可接受的鹽和/或藥物組合物的形式。
C.本發(fā)明化合物的用途正如上面所解釋的，本發(fā)明涉及這樣的發(fā)現(xiàn)，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可用于抑制癌細(xì)胞存活、生長、移動和侵襲，繼而可用于治療與失控的和失調(diào)的癌生長有關(guān)的疾病。因此，在一種實施方式中，本發(fā)明提供抑制失控與失調(diào)癌細(xì)胞的方法，該方法包含使細(xì)胞與有效量、即抗癌量的式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物接觸。在另一種實施方式中，本發(fā)明提供抑制癌細(xì)胞的方法，該方法包含使含有癌細(xì)胞的細(xì)胞、組織或器官與有效量式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物接觸。在當(dāng)前優(yōu)選的實施方式中，所述細(xì)胞位于動物受治療者中。
本發(fā)明涉及治療與所不需要的和失控的癌癥有關(guān)的疾病的方法，該方法包含對動物給以抗癌的式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物，用量、即劑量足以抑制癌癥。式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物抑制癌癥和/或癌疾病所需的特定劑量將依賴于病癥的嚴(yán)重性、給藥的途徑和有關(guān)因素，這將取決于主治醫(yī)師。一般而言，被公認(rèn)的和有效的每日劑量將是足以有效抑制癌癥和/或癌疾病的量。在這一點上，本發(fā)明的方法將非常類似于本申請人的未決美國專利申請No.10/153,003，題為抑制血管生成的方法，于2002年5月22日提交，現(xiàn)處于頒布過程。在這一點上，申請人特意將美國專利申請No.10/153,003的教導(dǎo)結(jié)合在此供參考。
由本發(fā)明所提供的治療方法是這樣實施的，對需要的動物給以一定劑量的式I化合物或其優(yōu)選實施方式或其水解產(chǎn)物(或者其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物)，所述劑量有效抑制癌癥和/或癌疾病。術(shù)語“抑制”在本文中用于包括其被公認(rèn)的含義，這包括預(yù)防性處置人類受治療者免于獲得癌癥和/或癌疾病，制止和/或治療現(xiàn)有癌癥和/或癌疾病。因此，本發(fā)明包括醫(yī)學(xué)治療性和/或預(yù)防性處置，視情況而定。
本發(fā)明的方法可以用于治療多種癌疾病。已知能夠用本發(fā)明方法治療的癌癥疾病包括但不限于成人急性成淋巴細(xì)胞性白血??；兒童急性成淋巴細(xì)胞性白血??；成人急性骨髓性白血病；腎上腺皮質(zhì)癌；兒童腎上腺皮質(zhì)癌；AIDS相關(guān)性淋巴瘤；AIDS相關(guān)性惡性腫瘤；肛門癌；兒童小腦星形細(xì)胞瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤；肝外膽管癌；膀胱癌；兒童膀胱癌；骨肉瘤/惡性纖維組織細(xì)胞瘤型骨癌；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；成人腦瘤；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童小腦星形細(xì)胞瘤型腦瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤/惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童室管膜瘤型腦瘤；兒童成神經(jīng)管細(xì)胞瘤型腦瘤；兒童幕上原神經(jīng)外胚層腫瘤型腦瘤；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童腦瘤(其他)；乳腺癌；乳腺癌與妊娠；兒童乳腺癌；男性乳腺癌；兒童支氣管腺瘤/類癌；兒童類癌瘤；胃腸類癌瘤；腎上腺皮質(zhì)癌；胰島細(xì)胞癌；未知原發(fā)性癌；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；兒童小腦星形細(xì)胞瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤/惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤；宮頸癌；兒童癌癥；慢性淋巴細(xì)胞性白血??；慢性骨髓性白血??；慢性脊髓增生癥；腱鞘明細(xì)胞肉瘤；結(jié)腸癌；兒童結(jié)腸直腸癌；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；子宮內(nèi)膜癌；兒童室管膜瘤；卵巢上皮癌；食道癌；兒童食道癌；尤因氏瘤家族；兒童顱外胚細(xì)胞瘤；生殖腺外胚細(xì)胞瘤；肝外膽管癌；眼內(nèi)黑素瘤型眼癌；成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤型眼癌；膽囊癌；胃癌；兒童胃癌；胃腸類癌瘤；兒童顱外胚細(xì)胞瘤；生殖腺外胚細(xì)胞瘤；卵巢胚細(xì)胞瘤；妊娠滋養(yǎng)層瘤；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤；毛細(xì)胞白血?。活^頸癌；成人(原發(fā)性)肝細(xì)胞(肝)癌；兒童(原發(fā)性)肝細(xì)胞(肝)癌；成人何杰金氏淋巴瘤；兒童何杰金氏淋巴瘤；妊娠期何杰金氏淋巴瘤；下咽部癌；兒童下丘腦與視路神經(jīng)膠質(zhì)瘤；眼內(nèi)黑素瘤；胰島細(xì)胞癌(內(nèi)分泌胰腺)；卡波濟氏肉瘤；腎癌；喉癌；兒童喉癌；成人急性成淋巴細(xì)胞性白血病；兒童急性成淋巴細(xì)胞性白血病；成人急性骨髓性白血??；兒童急性骨髓性白血??；慢性淋巴細(xì)胞性白血?。宦怨撬栊园籽?；毛細(xì)胞白血病；唇與口腔癌；成人(原發(fā)性)肝癌；兒童(原發(fā)性)肝癌；非小細(xì)胞性肺癌；小細(xì)胞性肺癌；成人急性成淋巴細(xì)胞性白血??；兒童急性成淋巴細(xì)胞性白血?。宦粤馨图?xì)胞性白血?。籄IDS相關(guān)性淋巴瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)(原發(fā)性)淋巴瘤；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；成人何杰金氏淋巴瘤；兒童何杰金氏淋巴瘤；妊娠期何杰金氏淋巴瘤；成人非何杰金氏淋巴瘤；兒童非何杰金氏淋巴瘤；妊娠期非何杰金氏??；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血；男性乳腺癌；成人惡性間皮瘤；兒童惡性間皮瘤；兒童成神經(jīng)管細(xì)胞瘤；黑素瘤；眼內(nèi)黑素瘤；美克耳氏細(xì)胞癌；惡性間皮瘤；隱性原發(fā)性轉(zhuǎn)移性鱗狀頸癌；兒童多發(fā)性內(nèi)分泌瘤形成綜合征；多發(fā)性骨髓瘤/漿細(xì)胞瘤形成；蕈樣真菌?。患顾璋l(fā)育不良綜合征；慢性骨髓性白血病；兒童急性骨髓性白血??；多發(fā)性骨髓瘤；慢性脊髓增生癥；鼻腔與鼻竇癌；鼻咽癌；兒童鼻咽癌；成神經(jīng)細(xì)胞瘤；成人非何杰金氏淋巴瘤；兒童非何杰金氏淋巴瘤；妊娠期非何杰金氏淋巴瘤；非小細(xì)胞性肺癌；兒童口癌；口腔與唇癌；口咽癌；骨肉瘤/惡性骨纖維組織細(xì)胞瘤；兒童卵巢癌；卵巢上皮癌；卵巢胚細(xì)胞瘤；卵巢低惡性潛在腫瘤；胰腺癌；兒童胰腺癌；胰島細(xì)胞性胰腺癌；副鼻竇與鼻腔癌；甲狀旁腺癌；陰莖癌；嗜鉻細(xì)胞瘤；兒童松果體與幕上原神經(jīng)外胚層瘤；垂體瘤；漿細(xì)胞瘤形成/多發(fā)性骨髓瘤；胸膜肺胚細(xì)胞瘤；妊娠與乳腺癌；妊娠與何杰金氏淋巴瘤；妊娠與非何杰金氏淋巴瘤；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；成人原發(fā)性肝癌；兒童原發(fā)性肝癌；前列腺癌；直腸癌；腎細(xì)胞(腎)癌；兒童腎細(xì)胞癌；腎盂與輸尿管過渡型細(xì)胞癌；成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤；兒童橫紋肌肉瘤；唾液腺癌；兒童唾液腺癌；尤因氏瘤家族肉瘤；卡波濟氏肉瘤；骨的肉瘤(骨肉瘤)/惡性纖維組織細(xì)胞瘤；兒童橫紋肌肉瘤；成人軟組織肉瘤；兒童軟組織肉瘤；Sezary綜合征；皮膚癌；兒童皮膚癌；皮膚癌(黑素瘤)；美克耳氏細(xì)胞性皮膚癌；小細(xì)胞性肺癌；小腸癌；成人軟組織肉瘤；兒童軟組織肉瘤；隱性原發(fā)性轉(zhuǎn)移性鱗狀頸癌；胃癌；兒童胃癌；兒童幕上原神經(jīng)外胚層瘤；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；睪丸癌；兒童胸腺瘤；胸腺瘤與胸腺癌；甲狀腺癌；兒童甲狀腺癌；腎盂與輸尿管過渡型細(xì)胞癌；妊娠滋養(yǎng)層瘤；成人未知原發(fā)性部位癌；兒童未知原發(fā)性部位癌；兒童不尋常癌；輸尿管與腎盂過渡型細(xì)胞癌；尿道癌；子宮內(nèi)膜癌；子宮肉瘤；陰道癌；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤；外陰癌；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血；維耳姆斯氏瘤。
本發(fā)明的方法也可以用于賦予動物細(xì)胞以抗感染性。通過破壞動物細(xì)胞的細(xì)胞骨架，橄欖苦苷賦予細(xì)胞對病毒、細(xì)菌和寄生物感染的抗性。
與水皰、潰瘍形成、結(jié)痂和瘢痕形成有關(guān)的疾病也可以用本發(fā)明的方法來治療。引起潰瘍形成和瘢痕形成的疾病包括但不限于化學(xué)品、熱與放射性灼傷、擦傷與割傷、創(chuàng)傷、纖維瘤、囊腫、瘢痕疙瘩、痤瘡、胃炎、陰道、宮頸、子宮、卵巢、胃、角膜、視網(wǎng)膜、糖尿病、AIDS相關(guān)性瘢痕形成、回腸與結(jié)腸潰瘍、間質(zhì)性肺疾病、人纖維變性肺疾病、人腎疾病、腎小球性腎炎、與系統(tǒng)性狼瘡有關(guān)的腎炎、腹膜纖維變性、囊性纖維變性、肝纖維變性、心肌纖維變性、肺纖維變性、Grave氏眼病、藥物誘發(fā)的麥角中毒、心血管疾病、癌癥、阿爾茨海默氏病、瘢痕形成、硬皮病、Li-Fraumeni綜合征中的成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、散發(fā)性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、骨髓性白血病、急性骨髓性白血病、脊髓發(fā)育不良綜合征、脊髓增生綜合征、婦科學(xué)癌癥、卡波濟氏肉瘤、漢森氏病、或不包括膠原性結(jié)腸炎的炎性腸疾病、腎纖維變性、腹部粘連、輻射誘發(fā)的纖維變性、閉塞性細(xì)支氣管炎、硅肺損傷、或特農(nóng)氏囊纖維增生、或者血管胎記、紋身與創(chuàng)傷性瘢痕形成的激光處置。
在特別優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明涉及與活性免疫療法(例如腫瘤疫苗接種)聯(lián)合給以式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷的方法。
而且，按照上述方法，所要治療的動物受治療者包括但不限于人、實驗室動物、寵物和牲畜。
D.藥物制劑/給藥途徑在本發(fā)明的方法中，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以被單獨遞送或給藥至動物，例如人類患者，采取藥學(xué)上可接受的鹽或藥物組合物的形式，在所述組合物中將治療有效量的化合物與適合的載體或賦形劑混合，所述有效量例如有效降低、壓制或抑制癌癥或者導(dǎo)致與癌疾病有關(guān)的癥狀改善的劑量。
用在本發(fā)明方法中的式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以被結(jié)合到多種制劑中，供治療性給藥。更確切地，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以與適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)上可接受的載體或稀釋劑聯(lián)合配制成藥物組合物，可以配制成固體、半固體、液體或氣態(tài)形式的制備物，例如片劑、膠囊劑、丸劑、粉劑、顆粒劑、錠劑、凝膠劑、漿液、軟膏劑、溶液、栓劑、注射劑、吸入劑和氣霧劑。因此，化合物的給藥可以以不同方式實現(xiàn)，包括口、頰、直腸、腸胃外、腹膜內(nèi)、真皮內(nèi)、透皮、intracheal給藥等。而且，所述化合物可以以局部而非全身方式給藥，例如將該化合物直接注射至實體腫瘤內(nèi)，經(jīng)常在藥庫或緩釋制劑中。另外，所述化合物可以在靶藥物遞送系統(tǒng)中給藥，例如涂有腫瘤特異性抗體的脂質(zhì)體。這類脂質(zhì)體將被靶向于腫瘤，并且被腫瘤選擇性吸收。
另外，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以與普通的賦形劑、稀釋劑或載體一起配制，壓制成片，或者配制成酏劑或溶液，以方便口服給藥，或者通過肌內(nèi)或靜脈內(nèi)途徑給藥。該化合物可以被透皮給藥，可以配制成緩釋劑型等。
式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以被單獨或彼此聯(lián)合給藥，或者它們可以與其他已知化合物聯(lián)合使用(例如其他抗癌藥或其他藥物，例如AZT、抗炎劑、抗生素、皮質(zhì)類固醇、維生素等)。例如，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以與其他已知抗血管生成化療劑或抗瘤形成劑一起用在聯(lián)合療法中(例如長春花屬生物堿、抗生素、抗代謝劑、鉑配位復(fù)合物等)。例如，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以與下列藥物一起用在聯(lián)合療法中長春花屬生物堿化合物，例如長春花堿、長春新堿、紫杉醇等；抗生素，例如亞德里亞霉素(阿霉素)、放線菌素(放線菌素D)、柔紅霉素(道諾霉素、紅比霉素)、博萊霉素、plicamycin(mithramycin)和絲裂霉素(絲裂霉素C)等；抗代謝劑，例如甲氨蝶呤、阿糖胞苷(AraC)、azauridine、azaribine、氟脫氧尿苷、脫氧助間型霉素、巰基嘌呤等；或者鉑配位復(fù)合物，例如順鉑(cis-DDP)、卡鉑等。另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將領(lǐng)會到，本發(fā)明化合物可以與其他已知抗血管生成化療劑或抗瘤形成化合物一起用在聯(lián)合療法中。在藥物劑型中，所述化合物可以以它們藥學(xué)上可接受的鹽形式給藥，或者它們也可以單獨或適當(dāng)配合使用，以及與其他藥學(xué)活性化合物聯(lián)合使用。
本文所述藥物組合物可以以本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方式加以制造，也就是借助常規(guī)的混合、溶解、造粒、制錠、研碎、乳化、包封、包埋或凍干過程。下列方法和賦形劑僅供例證，決非限制。
就注射而言，化合物可以這樣被配制成制備物，將它們?nèi)芙?、懸浮或乳化在水性或非水性溶劑中，例如植物油或其他相似的油、合成脂肪酸甘油酯、高級脂肪酸酯或丙二醇；如果需要的話，還有常規(guī)添加劑，例如增溶劑、等滲劑、懸浮劑、乳化劑、穩(wěn)定劑和防腐劑。優(yōu)選地，本發(fā)明化合物可以被配制在水溶液中，優(yōu)選生理學(xué)上可相容的緩沖液，例如漢克斯氏溶液、林格氏溶液或生理鹽水緩沖液。就透粘膜給藥而言，在制劑中使用適合于所要輸注的屏障的滲透劑。這類滲透劑是本領(lǐng)域公知的。
就口服給藥而言，通過與本領(lǐng)域熟知的藥學(xué)上可接受的載體混合，可以容易地配制式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物。這類載體使所述化合物能夠被配制成片劑、丸劑、錠劑、膠囊劑、乳劑、親脂性與親水性懸液、液體、凝膠劑、糖漿劑、漿液、懸液等，供所治療的患者口服攝取。口用藥物制備物可以這樣得到，將所述化合物與固體賦形劑混合，可選地研磨所得混合物，加工混合物為顆粒，如果需要的話，在加入適合的助劑后得到片劑或錠劑芯。適合的賦形劑確切地有填充劑，例如糖類，包括乳糖、蔗糖、甘露糖醇或山梨糖醇；纖維素制備物，例如玉米淀粉、小麥淀粉、水稻淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要的話，可以加入崩解劑，例如交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或者藻酸或其鹽，例如藻酸鈉。
錠劑芯帶有適合的包衣。為此，可以使用濃糖溶液，其中可以可選地含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、carbopol凝膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液和適合的有機溶劑或溶劑混合物?？梢韵蚱瑒┗蝈V劑包衣加入染料或色素，供鑒別或者區(qū)分活性化合物劑量的不同組合。
可以口用的藥物制備物包括由明膠制成的推入-配合式膠囊劑以及由明膠和增塑劑制成的軟密封膠囊劑，所述增塑劑例如甘油或山梨糖醇。所述推入-配合式膠囊劑可以含有活性成分與下列成分的混合物填充劑，例如乳糖；粘合劑，例如淀粉；和/或潤滑劑，例如滑石或硬脂酸鎂；和可選的穩(wěn)定劑。在軟膠囊劑中，可以將活性化合物溶解或懸浮在適合的液體中，例如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇。另外，可以加入穩(wěn)定劑。所有口服給藥制劑的劑量都應(yīng)當(dāng)適合于這類給藥。就頰給藥而言，所述組合物可以采取片劑或糖錠劑的形式，按常規(guī)方式配制。
就吸入給藥而言，用于本發(fā)明的化合物適宜以氣霧噴霧劑的方式從加壓包裝或霧化器中遞送出來，使用適合的推進劑，例如二氯二氟甲烷、三氯氟代甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適合的氣體，或者從無推進劑的干粉吸入器中遞送出來。在加壓氣霧劑的情況下，提供計量遞送的閥門可以決定劑量單元。用在吸入器或吹入器中的例如明膠膠囊和藥筒可以被配制成含有化合物與適合粉末基質(zhì)的混合物，所述基質(zhì)例如乳糖或淀粉。
所述化合物可以被配制成借助注射供腸胃外給藥，例如大丸劑注射或連續(xù)輸注。注射制劑可以呈現(xiàn)單元劑型，例如在安瓿或多劑容器中，含有所加入的防腐劑。所述組合物可以采取在油性或水性載體中的懸液、溶液或乳液的形式，可以含有配制劑，例如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。
供腸胃外給藥的藥物制劑包括活性水溶性形式的活性化合物的水溶液。另外，可以將活性化合物的懸液制成適當(dāng)?shù)挠托宰⑸鋺乙?。適合的親脂性溶劑或載體包括脂肪油，例如芝麻油，或合成脂肪酸酯，例如油酸乙酯或甘油三酯，或者脂質(zhì)體。水性注射懸液可以含有增加懸液粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、山梨糖醇或葡聚糖?？蛇x地，所述懸液也可以含有適合的穩(wěn)定劑或者增加所述化合物溶解度的試劑，以便制備高度濃縮的溶液。作為替代選擇，所述活性成分可以是粉末形式，供使用前用適合的載體再生，例如無菌無熱原的水。
所述化合物也可以被配制在直腸組合物中，例如栓劑或保留灌腸劑，例如含有常規(guī)栓劑基質(zhì)，例如可可脂、碳蠟、聚乙二醇或其他甘油酯，所有它們都在體溫下融化，在室溫下固化。
除了前述制劑以外，所述化合物也可以被配制成藥庫制備物。這類長效制劑可以借助植入(例如皮下或肌內(nèi))或者肌內(nèi)注射給藥。因而例如，該化合物可以與適合的聚合性或疏水性材料(例如在可接受的油中配制成乳劑)或者離子交換樹脂一起配制，或者配制成難溶性衍生物，例如難溶性鹽。作為替代選擇，可以采用疏水性藥物化合物的其他遞送系統(tǒng)。脂質(zhì)體和乳劑是熟知的疏水性藥物遞送載體的實例。
另外，可以采用標(biāo)志物在異常腫瘤脈管系統(tǒng)上的靶向。靶向部分當(dāng)與毒性藥物或放射性同位素偶聯(lián)時，將根據(jù)需要起到集中藥物的作用。也可以使用腫瘤締合性血管標(biāo)志物的配體。例如，可以采用細(xì)胞粘附分子，它與腫瘤血管元件表面標(biāo)志物結(jié)合。也可以使用脂質(zhì)體和其他藥物遞送系統(tǒng)，尤其如果它們的表面含有使載體優(yōu)先指向腫瘤脈管系統(tǒng)的配體。脂質(zhì)體提供附加的優(yōu)點，即屏蔽藥物與大多數(shù)正常組織，由此減少很多化合物的固有毒性。當(dāng)包以使吞噬細(xì)胞攝取最小化的聚乙二醇(PEG)(即隱身脂質(zhì)體)和腫瘤脈管系統(tǒng)特異性靶向部分時，脂質(zhì)體提供更長的血漿半衰期、更低的非靶組織毒性和優(yōu)于未靶向藥物的功效。其他靶向策略包括但不限于ADEPT(指向抗體的酶前體藥物療法)、GDEPT(指向基因的EPT)和VDEPT(指向病毒的EPT)。在ADEPT中，無活性前體藥物靶向于腫瘤塊受到抗腫瘤締合性標(biāo)志物抗體的影響。腫瘤之中或附近的酶環(huán)境將前體藥物轉(zhuǎn)化為活性毒性劑，后者然后作用于腫瘤組織。類似地，在GDEPT和VDEPT中，分別利用腫瘤部位上的不同基因表達或病毒靶向?qū)⑶绑w藥物活化為它的活性毒性形式。其他策略包括靶向不同表達的基因、酶或表面標(biāo)志物，它們出現(xiàn)在腫瘤締合性脈管系統(tǒng)上，以實現(xiàn)腫瘤生長的控制。利用上述方法，式I化合物或其優(yōu)選實施方式橄欖苦苷或其水解產(chǎn)物可以被靶向于腫瘤脈管系統(tǒng)，以實現(xiàn)腫瘤進展的控制，或靶向于其他有關(guān)部位(例如內(nèi)皮細(xì)胞)。
也可以采用某些有機溶劑，例如二甲基亞砜。另外，可以利用緩釋系統(tǒng)遞送所述化合物，例如含有治療劑的固體疏水性聚合物的半滲透性基質(zhì)。各種類型的緩釋材料都已經(jīng)是成熟的，是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的。根據(jù)它們的化學(xué)屬性，緩釋膠囊劑可以釋放所述化合物長達幾周至100天以上。
所述藥物組合物也可以含有適合的固體或凝膠相載體或賦形劑。這類載體或賦形劑的實例包括但不限于碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖類、淀粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物，例如聚乙二醇。
適合用在本發(fā)明中的藥物組合物包括這樣的組合物，其中含有治療有效量的活性成分。組合物的給藥量當(dāng)然將依賴于所治療的受治療者、受治療者的體重、病患的嚴(yán)重性、給藥的方式和主治醫(yī)師的判斷。有效量的確定完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)，尤其鑒于本文所提供的詳細(xì)內(nèi)容。
當(dāng)前，期望用在本發(fā)明實施中的化合物的治療有效量無論何處可以包含大約0.030g至20.000g這類化合物每千克受治療者體重。
F.實施例本發(fā)明將借助具體實施例加以詳細(xì)描述。下列實施例僅供闡述目的，不打算以任何方式限制本發(fā)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易認(rèn)識到多種可以改變或修正的非關(guān)鍵性參數(shù)，以得到本質(zhì)上相同的結(jié)果。
實施例1本例闡述橄欖苦苷在基質(zhì)膠侵襲測定法中的抗癌性質(zhì)?；|(zhì)膠侵襲測定法的終點是侵襲并消化基質(zhì)膠而到達腔室另一端上濾器的細(xì)胞數(shù)的測定。這樣一種量化將借助癌細(xì)胞消化和侵襲細(xì)胞外基質(zhì)的能力闡述它們的侵襲性。因橄欖苦苷的施用而發(fā)現(xiàn)濾器上的細(xì)胞數(shù)減少，即表明它的抗癌性質(zhì)。
利用如附圖所示Boyden腔室(圖1A)，我們存放基質(zhì)膠的頂層，濃度10mg/ml。利用最大侵襲性癌(結(jié)腸)細(xì)胞系，我們將細(xì)胞接種在含有或沒有橄欖苦苷的基質(zhì)膠頂層。允許細(xì)胞移行穿過凝膠達3天，在此期間對細(xì)胞層和濾器平面照相。在實驗終點，除去基質(zhì)膠層，將附著在濾器下側(cè)的細(xì)胞固定，染色，照相。用0.1％橄欖苦苷處理過的細(xì)胞完全停止侵襲凝膠和黏附于濾器底側(cè)。含有未處理細(xì)胞的侵襲腔室如圖1B和圖1C所示，分別對細(xì)胞和濾器平面照相。從照片明顯看出，在濾器的焦點平面可以見到細(xì)胞陰影，表明它們接近濾器和移動穿過基質(zhì)膠層。相反，含有用橄欖苦苷處理過的細(xì)胞的侵襲腔室中的濾器平面照片(圖1F)不含有細(xì)胞陰影。事實上，對細(xì)胞是在基質(zhì)膠中高得多的平面上照相的，似乎不是可移動的(圖1E)。已經(jīng)移行穿過基質(zhì)膠層并且黏附于濾器下側(cè)的細(xì)胞如圖1D和圖1G所示。從含有橄欖苦苷的腔室所得濾器(圖1G)缺乏細(xì)胞，表明沒有細(xì)胞到達濾器。來自未處理腔室的濾器含有穿透基質(zhì)膠并黏附于濾器的細(xì)胞(圖1D)。這類結(jié)果說明，橄欖苦苷是有效的癌細(xì)胞侵襲抑制劑，因而被視為抗癌化合物。
實施例2本例闡述橄欖苦苷在細(xì)胞移行測定法中的抗癌性質(zhì)。細(xì)胞移行測定法的終點是移行以封閉在培養(yǎng)平皿中所產(chǎn)生的傷口的細(xì)胞數(shù)的測定。這樣一種量化將借助癌細(xì)胞完全封閉這樣一種傷口的能力闡述它們的移動性。因橄欖苦苷的施用而發(fā)現(xiàn)傷口區(qū)域中的細(xì)胞數(shù)減少，即表明它的抗癌性質(zhì)。
在經(jīng)典傷口測定法中，將細(xì)胞培養(yǎng)至匯合，然后用無菌木條劃傷，形成一條路的樣子。然后將細(xì)胞培育，移行穿過這條路，以修復(fù)培養(yǎng)物中的傷口。在本實驗中，我們使用腎腺癌細(xì)胞。如圖(2A)、(2B)、(2C)、(2D)所示未處理細(xì)胞已經(jīng)成功地封閉傷口區(qū)域。相形之下，如圖(2E)、(2F)、(2G)、(2H)所示用0.01％橄欖苦苷處理過的細(xì)胞沒有有效地封閉傷口。再次顯示橄欖苦苷抑制癌細(xì)胞的移動性，具有抗癌性質(zhì)。
上述細(xì)胞移行測定法的一種變化是利用更廣泛的受傷區(qū)域進行傷口測定法，形成轉(zhuǎn)角或彎曲邊緣(圖3)。在本實驗中，使惡性黑素瘤細(xì)胞生長至匯合，然后利用木條劃傷，方式如上所述。圖3A所示為未處理細(xì)胞，在平板上沿各個方向移行。用0.01％橄欖苦苷溶液處理過的細(xì)胞的移行(圖3B)被完全終止了。在本傷口測定法中可以清楚地見到傷口邊緣，用于評估移行細(xì)胞的前進。這再次表明橄欖苦苷的抗癌性質(zhì)。
上述實驗的另一種變化是將黑素瘤細(xì)胞平板接種成圓圈(圖4)。已處理細(xì)胞(0.01％橄欖苦苷)沒有移行至指定圓圈的外面(圖4A)。不過，未處理細(xì)胞向外徑向移行，并且覆蓋平板(圖4B)。這類結(jié)果強烈提示橄欖苦苷的抗癌性質(zhì)。
實施例3失調(diào)的細(xì)胞生長是癌癥的標(biāo)記。本例闡述橄欖苦苷在細(xì)胞生長測定法中的抗癌性質(zhì)。將代表最大侵襲性癌的癌細(xì)胞等量接種在含有不同濃度橄欖苦苷的平板上。5天后，利用MTS測定法評估細(xì)胞數(shù)，光密度(490nm)值如圖片y軸所示(圖5)。x軸代表橄欖苦苷的濃度。這些代表在微量平板讀數(shù)器上所進行的真實而原始的統(tǒng)計。在全部所研究的癌癥中，橄欖苦苷有效地抑制生長。
實施例4本例借助管破裂測定法闡述橄欖苦苷對細(xì)胞骨架的影響。在本測定法中，將細(xì)胞平板接種在基質(zhì)膠型管狀網(wǎng)絡(luò)上，后者在24-48小時內(nèi)瓦解成叢(圖6A，頂行)。管瓦解過程的特寫證明它因管的退縮而發(fā)生，由此結(jié)節(jié)(管交叉處)更接近于彼此而合并(圖6A，底行)。各細(xì)胞仍然延長遍及各處。這種緩慢的細(xì)胞移動和收縮過程(24-48小時)牽涉主動的細(xì)胞骨架再生。向所進行的管加入橄欖苦苷通過發(fā)生在2小時內(nèi)的快速過程就地圓潤各細(xì)胞(圖6B)，破壞管狀網(wǎng)絡(luò)。圓潤的細(xì)胞不會運動，無期限地停留在原位。因而，通過破壞細(xì)胞骨架并防止其再生而阻撓細(xì)胞移動性，使退縮過程中止。橄欖苦苷的這種性質(zhì)受到葡萄糖的抑制，表明橄欖苦苷通過葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白進入細(xì)胞，葡萄糖競爭這種轉(zhuǎn)運(圖7)。
實施例5本例闡述橄欖苦苷在細(xì)胞移行測定法中對傷口愈合的影響。在本例中，證明了橄欖苦苷對細(xì)胞骨架和細(xì)胞圓潤的影響。本例也闡述橄欖苦苷對細(xì)胞影響的可逆性，提示了微小的副作用。
使兔皮膚成纖維細(xì)胞生長至匯合的單細(xì)胞層，隨后用無菌木條劃傷。然后培育細(xì)胞，允許修復(fù)培養(yǎng)物中的傷口。未處理細(xì)胞成功移行穿過受傷區(qū)域(圖8A)。圖8C所示用橄欖苦苷(0.01％)處理過的細(xì)胞被有效抑制了。經(jīng)過橄欖苦苷處理的細(xì)胞的特寫顯示單細(xì)胞層的不連續(xù)性(圖8D和8E)，這是因為受到橄欖苦苷對細(xì)胞骨架的影響，細(xì)胞圓潤。相反，未處理細(xì)胞顯得平坦(圖8B)。洗去細(xì)胞的橄欖苦苷，逆轉(zhuǎn)圓潤過程。細(xì)胞變平，補償單層中的不連續(xù)性(H)，開始從傷口邊緣移行(圖8F和8G)。
本發(fā)明的其他變化和改進也可以為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所顯而易見。因而，本文所描述和闡述的部分和步驟的特定組合打算僅代表本發(fā)明的某些實施方式，不打算充當(dāng)屬于本發(fā)明精神和范圍的替代裝置和方法的限制。在這一點上，期望本發(fā)明的方法可以進一步發(fā)現(xiàn)超出本文所公開以及另外本申請人的未決美國專利申請No.10/153,003所公開和要求保護的治療應(yīng)用。
權(quán)利要求
1.治療受治療者牽涉癌癥的醫(yī)學(xué)病癥的方法，該方法包含對需要這類治療的受治療者給以治療有效量的具有化學(xué)預(yù)防活性的藥物組合物，所述組合物含有治療有效量的下式化合物或其對映體作為活性成分 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
2.權(quán)利要求1的方法，其中該藥物組合物包括藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
3.抑制癌細(xì)胞生長、移動、侵襲和轉(zhuǎn)移的方法，包含使所述細(xì)胞與足以抑制癌癥或其復(fù)發(fā)量的藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有有效量的下式化合物或其對映體 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
4.權(quán)利要求3的方法，其中該藥物組合物包括藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
5.權(quán)利要求3的方法，其中所述癌細(xì)胞存活、生長、移動、侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制發(fā)生在體內(nèi)。
6.權(quán)利要求3的方法，其中所述癌細(xì)胞存活、生長、移動、侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制發(fā)生在體外。
7.治療受治療者牽涉癌癥的醫(yī)學(xué)病癥的方法，所述方法包含對需要這類治療的受治療者給以治療量的有效實現(xiàn)與所述癌癥有關(guān)的抗存活、抗生長、抗移動、抗侵襲和抗轉(zhuǎn)移活性的藥物組合物，該藥物組合物含有至少一種由下式化合物或其對映體水解所生成的組合物作為活性成分 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
8.抑制癌細(xì)胞生長的方法，包含使癌細(xì)胞與足以抑制其生長量的藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有有效量的化合物，所述化合物選自由至少一種由下式化合物或其對映體水解所生成的組合物組成的組 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
9.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物包含下式化合物或其對映體
10.權(quán)利要求3的方法，其中所述組合物包含下式化合物或其對映體
11.治療需要這類治療的動物癌癥的方法，包含對所述患者給以治療有效量的具有下式結(jié)構(gòu)的化合物或其對映體 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團；或者其藥學(xué)上可接受的鹽、前體藥物或水合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的治療癌癥的方法，其中所述癌癥選自下組成人急性成淋巴細(xì)胞性白血?。粌和毙猿闪馨图?xì)胞性白血??；成人急性骨髓性白血??；腎上腺皮質(zhì)癌；兒童腎上腺皮質(zhì)癌；AIDS相關(guān)性淋巴瘤；AIDS相關(guān)性惡性腫瘤；肛門癌；兒童小腦星形細(xì)胞瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤；肝外膽管癌；膀胱癌；兒童膀胱癌；骨肉瘤/惡性纖維組織細(xì)胞瘤型骨癌；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；成人腦瘤；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童小腦星形細(xì)胞瘤型腦瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤/惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童室管膜瘤型腦瘤；兒童成神經(jīng)管細(xì)胞瘤型腦瘤；兒童幕上原神經(jīng)外胚層腫瘤型腦瘤；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤型腦瘤；兒童腦瘤(其他)；乳腺癌；乳腺癌與妊娠；兒童乳腺癌；男性乳腺癌；兒童支氣管腺瘤/類癌；兒童類癌瘤；胃腸類癌瘤；腎上腺皮質(zhì)癌；胰島細(xì)胞癌；未知原發(fā)性癌；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；兒童小腦星形細(xì)胞瘤；兒童大腦星形細(xì)胞瘤/惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤；宮頸癌；兒童癌癥；慢性淋巴細(xì)胞性白血??；慢性骨髓性白血病；慢性脊髓增生癥；腱鞘明細(xì)胞肉瘤；結(jié)腸癌；兒童結(jié)腸直腸癌；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；子宮內(nèi)膜癌；兒童室管膜瘤；卵巢上皮癌；食道癌；兒童食道癌；尤因氏瘤家族；兒童顱外胚細(xì)胞瘤；生殖腺外胚細(xì)胞瘤；肝外膽管癌；眼內(nèi)黑素瘤型眼癌；成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤型眼癌；膽囊癌；胃癌；兒童胃癌；胃腸類癌瘤；兒童顱外胚細(xì)胞瘤；生殖腺外胚細(xì)胞瘤；卵巢胚細(xì)胞瘤；妊娠滋養(yǎng)層瘤；兒童腦干神經(jīng)膠質(zhì)瘤；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤；毛細(xì)胞白血??；頭頸癌；成人(原發(fā)性)肝細(xì)胞(肝)癌；兒童(原發(fā)性)肝細(xì)胞(肝)癌；成人何杰金氏淋巴瘤；兒童何杰金氏淋巴瘤；妊娠期何杰金氏淋巴瘤；下咽部癌；兒童下丘腦與視路神經(jīng)膠質(zhì)瘤；眼內(nèi)黑素瘤；胰島細(xì)胞癌(內(nèi)分泌胰腺)；卡波濟氏肉瘤；腎癌；喉癌；兒童喉癌；成人急性成淋巴細(xì)胞性白血病；兒童急性成淋巴細(xì)胞性白血??；成人急性骨髓性白血??；兒童急性骨髓性白血??；慢性淋巴細(xì)胞性白血?。宦怨撬栊园籽?；毛細(xì)胞白血??；唇與口腔癌；成人(原發(fā)性)肝癌；兒童(原發(fā)性)肝癌；非小細(xì)胞性肺癌；小細(xì)胞性肺癌；成人急性成淋巴細(xì)胞性白血病；兒童急性成淋巴細(xì)胞性白血??；慢性淋巴細(xì)胞性白血病；AIDS相關(guān)性淋巴瘤；中樞神經(jīng)系統(tǒng)(原發(fā)性)淋巴瘤；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；成人何杰金氏淋巴瘤；兒童何杰金氏淋巴瘤；妊娠期何杰金氏淋巴瘤；成人非何杰金氏淋巴瘤；兒童非何杰金氏淋巴瘤；妊娠期非何杰金氏??；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血；男性乳腺癌；成人惡性間皮瘤；兒童惡性間皮瘤；兒童成神經(jīng)管細(xì)胞瘤；黑素瘤；眼內(nèi)黑素瘤；美克耳氏細(xì)胞癌；惡性間皮瘤；隱性原發(fā)性轉(zhuǎn)移性鱗狀頸癌；兒童多發(fā)性內(nèi)分泌瘤形成綜合征；多發(fā)性骨髓瘤/漿細(xì)胞瘤形成；蕈樣真菌??；脊髓發(fā)育不良綜合征；慢性骨髓性白血??；兒童急性骨髓性白血?。欢喟l(fā)性骨髓瘤；慢性脊髓增生癥；鼻腔與鼻竇癌；鼻咽癌；兒童鼻咽癌；成神經(jīng)細(xì)胞瘤；成人非何杰金氏淋巴瘤；兒童非何杰金氏淋巴瘤；妊娠期非何杰金氏淋巴瘤；非小細(xì)胞性肺癌；兒童口癌；口腔與唇癌；口咽癌；骨肉瘤/惡性骨纖維組織細(xì)胞瘤；兒童卵巢癌；卵巢上皮癌；卵巢胚細(xì)胞瘤；卵巢低惡性潛在腫瘤；胰腺癌；兒童胰腺癌；胰島細(xì)胞性胰腺癌；副鼻竇與鼻腔癌；甲狀旁腺癌；陰莖癌；嗜鉻細(xì)胞瘤；兒童松果體與幕上原神經(jīng)外胚層瘤；垂體瘤；漿細(xì)胞瘤形成/多發(fā)性骨髓瘤；胸膜肺胚細(xì)胞瘤；妊娠與乳腺癌；妊娠與何杰金氏淋巴瘤；妊娠與非何杰金氏淋巴瘤；原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)淋巴瘤；成人原發(fā)性肝癌；兒童原發(fā)性肝癌；前列腺癌；直腸癌；腎細(xì)胞(腎)癌；兒童腎細(xì)胞癌；腎盂與輸尿管過渡型細(xì)胞癌；成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤；兒童橫紋肌肉瘤；唾液腺癌；兒童唾液腺癌；尤因氏瘤家族肉瘤；卡波濟氏肉瘤；骨的肉瘤(骨肉瘤)/惡性纖維組織細(xì)胞瘤；兒童橫紋肌肉瘤；成人軟組織肉瘤；兒童軟組織肉瘤；Sezary綜合征；皮膚癌；兒童皮膚癌；皮膚癌(黑素瘤)；美克耳氏細(xì)胞性皮膚癌；小細(xì)胞性肺癌；小腸癌；成人軟組織肉瘤；兒童軟組織肉瘤；隱性原發(fā)性轉(zhuǎn)移性鱗狀頸癌；胃癌；兒童胃癌；兒童幕上原神經(jīng)外胚層瘤；皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤；睪丸癌；兒童胸腺瘤；胸腺瘤與胸腺癌；甲狀腺癌；兒童甲狀腺癌；腎盂與輸尿管過渡型細(xì)胞癌；妊娠滋養(yǎng)層瘤；成人未知原發(fā)性部位癌；兒童未知原發(fā)性部位癌；兒童不尋常癌；輸尿管與腎盂過渡型細(xì)胞癌；尿道癌；子宮內(nèi)膜癌；子宮肉瘤；陰道癌；兒童視路與下丘腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤；外陰癌；瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血；維耳姆斯氏瘤。
13.賦予動物細(xì)胞抗性從而賦予細(xì)胞以抗病毒、細(xì)菌和寄生物感染性的方法，包含使所述細(xì)胞與足以賦予其抗性量的藥物組合物接觸，所述藥物組合物含有有效量的下式化合物或其對映體 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的治療疾病的方法，其中所述細(xì)胞被HIV、瘧疾、幽門螺桿菌和陰道酵母所感染。
15.治療與水皰、潰瘍形成、結(jié)痂和瘢痕形成有關(guān)的醫(yī)學(xué)病癥的方法，該方法包含對需要這類治療的受治療者給以治療有效量的藥物組合物，所述組合物含有下式化合物或其對映體作為其活性成分 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的治療疾病的方法，其中所述疾病選自下組灼傷、擦傷、割傷、創(chuàng)傷、纖維瘤、囊腫、瘢痕疙瘩、痤瘡、胃炎、陰道、官頸、子宮、卵巢、胃、角膜、視網(wǎng)膜、糖尿病、AIDS相關(guān)性瘢痕形成、回腸(iliac)與結(jié)腸潰瘍、間質(zhì)性肺疾病、人纖維變性肺疾病、人腎疾病、腎小球性腎炎、與系統(tǒng)性狼瘡有關(guān)的腎炎、腹膜纖維變性、囊性纖維變性、肝纖維變性、心肌纖維變性、肺纖維變性、Grave氏眼病、藥物誘發(fā)的麥角中毒、心血管疾病、癌癥、阿爾茨海默氏病、瘢痕形成、硬皮病、Li-Fraumeni綜合征中的成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、散發(fā)性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、骨髓性白血病、急性骨髓性白血病、脊髓發(fā)育不良綜合征、脊髓增生綜合征、婦科學(xué)癌癥、卡波濟氏肉瘤、漢森氏病、不包括膠原性結(jié)腸炎的炎性腸疾病、腎纖維變性、腹部粘連、輻射誘發(fā)的纖維變性、閉塞性細(xì)支氣管炎、硅肺損傷、特農(nóng)氏囊纖維增生、血管胎記、紋身與創(chuàng)傷性瘢痕形成的激光處置、陰道酵母感染和幽門螺桿菌潰瘍。
17.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物被配制成供口服給藥的片劑或酏劑。
18.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物是經(jīng)由一種途徑給藥的，所述途徑選自由肌內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥組成的組。
19.權(quán)利要求1的方法，其中所述組合物是經(jīng)由吸入給藥的。
20.權(quán)利要求11的方法，其中所述化合物是經(jīng)由一種途徑給藥的，所述途徑選自由口、頰、直腸、腸胃外、腹膜內(nèi)、真皮內(nèi)、透皮和intracheal組成的組。
21.權(quán)利要求11的方法，其中所述組合物被配制成供口服給藥的片劑或酏劑。
22.權(quán)利要求11的方法，其中所述組合物是經(jīng)由一種途徑給藥的，所述途徑選自由肌內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥組成的組。
23.權(quán)利要求11的方法，其中所述組合物是經(jīng)由吸入給藥的。
24.根據(jù)權(quán)利要求11的治療癌癥的方法，其中所述組合物包含下式化合物或其對映體
25.權(quán)利要求7的方法，其中所述至少一種組合物選自由橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate組成的組。
26.權(quán)利要求8的方法，其中所述至少一種組合物選自由橄欖苦苷苷元、elenolic acid、β-3，4-二羥基苯乙醇和甲基-o-甲基elenolate組成的組。
27.權(quán)利要求3的方法，其中所述動物細(xì)胞存活、生長、移動、侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制發(fā)生在體內(nèi)。
28.權(quán)利要求3的方法，其中所述動物細(xì)胞存活、生長、移動、侵襲和轉(zhuǎn)移的抑制發(fā)生在體外。
29.借助藥物化合物的R4部分選擇性靶向和遞送有效量化合物的方法，所述量足以抑制所述細(xì)胞的癌性生長或復(fù)發(fā)，所述化合物具有下式或其對映體 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
30.權(quán)利要求27的方法，其中該R4部分是B-D-吡喃葡萄糖，所述組合物包含下式化合物或其對映體
31.權(quán)利要求27的方法，其中所述細(xì)胞是動物細(xì)胞。
32.破壞和防止細(xì)胞骨架再生、由此動物細(xì)胞呈現(xiàn)球形并不能分化、運動或侵襲的方法，該方法包含使該細(xì)胞與有效量的下式化合物或其對映體接觸 其中R1和R2是選自羥基、-NH2和-SH基團的官能團；R3是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和COOCH3的官能團；X1-X3是選自氧、硫、-CH2-或羧基的官能團；R4是選自氫、C1-C6-烷氧基、葡萄糖、B-D-吡喃葡萄糖、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、鹵素、NO2、NH3、碳水化合物、氨基酸、核苷酸和脂質(zhì)的官能團；和R5是選自氫、C1-C6-烷基、C2-C6-鏈烯基、C2-C6-炔基、芳基、羥基、C1-C6-烷氧基、鹵素、NO2、NH3和CH3的官能團。
33.權(quán)利要求30的方法，其中所述組合物包含下式化合物或其對映體
34.權(quán)利要求32的方法，其中所述細(xì)胞位于活動物中。
35.權(quán)利要求32的方法，其中所述細(xì)胞位于癌癥患者中。
36.權(quán)利要求32的方法，其中所述細(xì)胞位于AIDS患者中。
全文摘要
公開了抑制癌癥、瘢痕形成、破壞細(xì)胞骨架和賦予抗感染性的方法。這類方法包含治療有效量橄欖苦苷和/或其水解產(chǎn)物的給藥。為此，各種藥物制劑和給藥途徑被公開，并可以用于治療多種疾病。
文檔編號A61K31/70GK1738533SQ200380108713
公開日2006年2月22日 申請日期2003年12月4日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月9日
發(fā)明者哈姆迪·K·哈姆迪, 拉克爾·卡斯特利翁 申請人:哈姆迪·K·哈姆迪, 拉克爾·卡斯特利翁