專利名稱：藥物吸收性改善劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及環(huán)氧乙烷衍生物在制造消化道粘液層的藥物吸附性改善劑中的應(yīng)用。具體涉及環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上在制造消化道粘液層的藥物吸附性改善劑中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
發(fā)現(xiàn)胃炎患者的胃組織存在幽門螺桿菌以來，已指出幽門螺桿菌與胃炎、消化性潰瘍等胃及十二指腸疾病的發(fā)病有關(guān)，對消除幽門螺桿菌可抑制潰瘍復(fù)發(fā)有所報道，認(rèn)識到消除幽門螺桿菌的重要性。此外，也提示了即使無致癌物質(zhì)共存，胃癌的發(fā)病與幽門螺桿菌感染具有因果關(guān)系(非專利文獻(xiàn)1)。
現(xiàn)行的幽門螺桿菌除菌療法，以將抗生素(阿莫西林和克拉霉素)與質(zhì)子泵抑制劑(蘭索拉唑)三藥并用的除菌療法作為首選。這是因?yàn)橥ǔ？股鼗钚缘淖罴裵H值在中性附近，單用抗生素或兩藥并用時藥物的酸穩(wěn)定性差，目前可得到的最高除菌率是三藥并用。然而，阿莫西林750mg、克拉霉素400mg和蘭索拉唑30mg每日給藥2次，給藥1周時的除菌率停留于85～90％。而且由于存在腹瀉、出現(xiàn)耐藥菌、給藥量多以及長期使用的復(fù)雜性引起順應(yīng)性降低等問題，所以希望有新的幽門螺桿菌除菌療法出現(xiàn)。
專利文獻(xiàn)1記載了2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹諾酮衍生物(以下將1-羥基-2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹諾酮稱為化合物A)單用或與其它抗菌劑等組合使用，以及對感染幽門螺桿菌的動物模型(沙土鼠)單用該化合物使體內(nèi)活菌數(shù)減少的效果。然而，在考慮單用該化合物時必須進(jìn)一步增強(qiáng)抗幽門螺桿菌的活性，為達(dá)到該目的，希望有使化合物A有效地作用于幽門螺桿菌的技術(shù)。
由于幽門螺桿菌生存于胃粘液中以及它與胃粘膜上皮細(xì)胞的表層的間隙中(非專利文獻(xiàn)2)，因此為使藥物直接作用于幽門螺桿菌，必須促進(jìn)藥物被粘液層的吸附、改善滯留性等，要通過某種手段回避粘液層的屏障。
另一方面，用作制劑化的基質(zhì)的聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷和聚氧乙烷-聚丙烯共聚物等環(huán)氧乙烷衍生物等，作為增溶劑、增塑劑、分散劑或穩(wěn)定劑被使用。聚乙二醇，例如可用作多肽穩(wěn)定化、含胃潰寧的組合物的增塑劑或延長血中滯留的基質(zhì)等。聚環(huán)氧乙烷，例如可用作控制溶出的基質(zhì)，聚氧乙烯-聚丙烯共聚物，例如普魯羅尼克(Pluronic)可用作表面活性劑、增溶劑、乳化劑、分散劑等。
如上所述，環(huán)氧乙烷衍生物作為制劑化時的基質(zhì)已有種種用途，但與增強(qiáng)藥物活性的技術(shù)有關(guān)，使用環(huán)氧乙烷衍生物來改善消化道粘液層對藥物的吸附性，特別是為增強(qiáng)抗幽門螺桿菌活性而增強(qiáng)幽門螺桿菌生存部位的消化道粘液層對藥物的吸附性，至今尚未進(jìn)行嘗試。
因此，本發(fā)明的目的是提供使用特定的環(huán)氧乙烷衍生物來改善消化道粘度層對藥物的吸附性的方法。
US 6,184,230號公報[非專利文獻(xiàn)1]T.Watanabe等，Gastroenterol.，115；642-648(1998)[非專利文獻(xiàn)2]Y.Akiyama等，Drug Delivery System，15-3；185-192(2000)發(fā)明的揭示在這種情況下，本發(fā)明者進(jìn)行深入探討，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在環(huán)氧乙烷衍生物共存下，化合物A的藥物被消化道粘液層的吸附性較高。再繼續(xù)進(jìn)行探討后發(fā)現(xiàn)，在環(huán)氧乙烷衍生物中的環(huán)氧乙烷平均加成摩爾數(shù)大于17時，特別能增強(qiáng)抗幽門螺桿菌的活性，從而完成了本發(fā)明。
即本發(fā)明涉及1.環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上在制造消化道粘液層的藥物吸附性改善劑中的應(yīng)用。
2.藥物為抗菌劑的上述1所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
3.藥物具有抗幽門螺桿菌活性的上述2所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
4.用于改善消化道粘液層對藥物的吸附性的、環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
5.藥物為抗菌劑的上述4所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烷-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
6.藥物具有抗幽門螺桿菌活性的上述5所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
7.消化道粘液層的藥物吸附性改善劑，含有環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上作為有效成分。
8.藥物為抗菌劑的上述7所述的消化道粘液層的藥物吸收性改善劑。
9.藥物具有抗幽門螺桿菌活性的上述8所述的消化道粘液層的藥物吸收性改善劑。
10.改善消化道粘液層對藥物的吸附性的醫(yī)藥組合物，至少由藥物及環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的環(huán)氧乙烷衍生物組成。
11.藥物為抗菌劑的上述10所述的醫(yī)藥組合物。
12.藥物具有抗幽門螺桿菌活性的上述11所述的醫(yī)藥組合物。
13.上述10所述的醫(yī)藥組合物，給藥劑型為液體制劑時，組合物的成分比例是，相對于組合物總量，藥物為0.00005％～50％、環(huán)氧乙烷衍生物為0.1％～37.5％及/或藥物為0.1mg以上1g以下、環(huán)氧乙烷衍生物為2mg以上1g以下。
14.上述10所述的醫(yī)藥組合物，給藥劑型為固體制劑時，組合物的成分比例是，相對于組合物總量，藥物為0.01％～95％、環(huán)氧乙烷衍生物為5％～99.99％及/或藥物為0.1mg以上1g以下、環(huán)氧乙烷衍生物為50mg以上1g以下。
本發(fā)明中“消化道粘液”指自消化道粘膜分泌的具粘附性的分泌液，例如從胃壁分泌的粘液?！跋勒骋簩印敝冈谙郎掀ぜ?xì)胞表面上形成的上述消化道粘液的層。本發(fā)明中“消化道粘度層對藥物的吸附性”指能反映體內(nèi)情況的消化道粘度成分在體外對藥物的吸附性，例如使作為消化道粘度成分的脂質(zhì)(油相)與藥物懸浮液(水相)接觸，測定脂質(zhì)對藥物的吸附率，可以評價其吸附性(關(guān)于粘液層組成，可參考Pharm.Res.，15，66-71(1998))。本發(fā)明中，在吸附性得到改善時，認(rèn)為藥物在消化道粘液層的“滯留性”也同樣被改善，也就是說“滯留性”有時作為同義詞使用。如果粘液層對藥物的吸附性增高，則可以推測藥物向粘液層的移行性也提高了?！案纳葡勒骋簩拥奈叫浴痹诒景l(fā)明中指，例如在水相中添加環(huán)氧乙烷衍生物時的油相對藥物的吸附率比不添加環(huán)氧乙烷衍生物時有顯著增加的情況。
本發(fā)明所述的“環(huán)氧乙烷衍生物”是分子內(nèi)含有環(huán)氧乙烷鏈的物質(zhì)，可例舉聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷，聚氧乙烯-聚丙烯共聚物。其中較好的是聚乙二醇6000(商品名Macrogol 6000，平均相對分子質(zhì)量(以下簡稱平均分子量)8000)或聚乙二醇20000(商品名Macrogol 20000，平均分子量20000)、聚環(huán)氧乙烷(平均分子量90萬、700萬)、聚氧乙烯-聚丙烯共聚物(例如商品名Pluronic F68，旭電化制)等。
本發(fā)明所述的“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”指容易算出的在分子內(nèi)一個位置上加成的環(huán)氧乙烷鏈的摩爾數(shù)。具體通過算出每一分子所含全部的環(huán)氧乙烷鏈的加成摩爾數(shù)除以結(jié)構(gòu)中的環(huán)氧乙烷鏈數(shù)所得的值而求出?！敖Y(jié)構(gòu)中的環(huán)氧乙烷鏈數(shù)”指結(jié)構(gòu)中環(huán)氧乙烷鏈的數(shù)目。例如“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”可如下算出。
例如Macrogol 6000的場合，由表4所示的模式圖可知其化學(xué)結(jié)構(gòu)中環(huán)氧乙烷鏈?zhǔn)且粭l。因此表3所示的每一分子中所含的全部環(huán)氧乙烷鏈的加成摩爾數(shù)(n)本身就成為“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)(m)”。即Macrogol 400、Macrogol 4000、Macrogol 6000、Macrogol 20000的“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”分別為8、72、188、455。而Pluronic的場合，由于結(jié)構(gòu)中環(huán)氧乙烷鏈有2條(表4)，每分子中所含的全部環(huán)氧乙烷鏈的加成摩爾數(shù)(n，表3)除以2的值就是“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”。即L31、L44、L64、P103、P85、F68的每分子所含的全部環(huán)氧乙烷鏈的加成摩爾數(shù)(n)分別為3、20、27、29、54、160，所以“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”分別為1.5、10、13.5、14.5、27、80。
“環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)”為17以上、較好為27以上，即可改善消化道粘液層對藥物的吸附性。
本發(fā)明可改善化合物A以及2-(2-反-壬烯基)-3-甲基-4(1H)-喹諾酮衍生物在消化道粘液層中的吸附性。其它藥物可例舉硝基咪唑類抗菌劑，如替硝唑、甲硝唑等，四環(huán)素類藥物，如四環(huán)素、米諾環(huán)素、多西環(huán)素等，青霉素類藥物，如阿莫西林、氨芐西林、酞氨西林、巴氨西林、侖氨西林、美洛西林、舒他西林等，頭孢菌素類藥物，如頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢氨芐、頭孢泊肟酯、頭孢克肟、頭孢地尼、頭孢布烯、頭孢替安酯、頭孢他美酯、頭孢呋辛酯等，青霉烯類藥物，如フロペネム、利替培南酯等，大環(huán)內(nèi)酯類藥物，如紅霉素、竹桃霉素、交沙霉素、麥迪霉素、羅他霉素、克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素等，林可霉素類藥物，如林可霉素、克林霉素，氨基糖苷類藥物，如巴龍霉素等，喹諾酮類藥物，如氧氟沙星、左氧氟沙星、諾氟沙星、依諾沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、托氟沙星、氟羅沙星、司帕沙星、替馬沙星、那氟沙星、格帕沙星、帕珠沙星等，以及呋喃妥因等醫(yī)藥中容許的抗菌劑。還可例舉與胃酸分泌等相關(guān)的疾病的治療用醫(yī)藥化合物，例如，酸泵抑制劑，如奧美拉唑、蘭索拉唑等，H2拮抗劑，如雷尼替丁、西咪替丁、法莫替丁等。還可例舉鈣拮抗劑，如硝苯地平、鹽酸尼卡地平、鹽酸巴尼地平、尼群地平等。此外，還可例舉低鈉血癥治療藥，如4’-[(2-甲基-1，4，5，6-四氫咪唑并[4，5-d][1]苯并氮雜-6-基)羰基]-2-苯基苯甲酰苯胺鹽酸鹽等，抗胃泌激素藥，如(R)-1-[2，3-二氫-1-(2’-甲基苯甲酰甲基)-2-氧代-5-苯基-1H-1，4-苯并二氮雜-3-基]-3-(3-甲基苯基)脲、鹽酸哌侖西平、胰泌素、丙谷胺等。這些藥物可1種或2種以上組合使用。
本發(fā)明所用藥物的配比量只要是疾病治療有效量即可，無特別限制。
形成組合物時的各成分的比例很難一概規(guī)定，例如給藥劑型是懸浮劑等液體制劑時，相對于組合物總量，藥物為0.00005％～50％，較好是0.00015％～25％，更好是0.0003％～15％，環(huán)氧乙烷衍生物相對于組合物總量為0.1％～37.5％，較好是0.1％～25％。給藥劑型是散劑等固體制劑時，相對于組合物總量，藥物可為0.01％～95％，較好是0.1％～90％，環(huán)氧乙烷衍生物相對于組合物總量為5％～99.99％，較好是10％～99.9％。
例如，給藥劑型是液體制劑的場合，相對于組合物總量，藥物可為0.00005％～50％，較好是0.0001％～30％，而環(huán)氧乙烷衍生物相對于組合物總量可為0.1％～37.5％，較好是1％～25％。
在低于這里所述的環(huán)氧乙烷的組成比例時，擔(dān)心藥物不能充分吸附。
各組分的使用量，例如給藥劑型是液體制劑的場合，藥物是0.1mg以上1g以下，較好是0.5mg以上750mg以下，環(huán)氧乙烷衍生物是2mg以上1g以下，較好是5mg以上750mg以下。
例如給藥劑是固體制劑的場合，藥物是0.1mg以上1g以下，較好是0.5mg以上750mg以下，環(huán)氧乙烷衍生物是50mg以上1g以下，較好是50mg以上750mg以下。
這里所述的使用量與組成比例同樣，過低時擔(dān)心藥物不能充分吸附。
本發(fā)明的環(huán)氧乙烷衍生物可與藥物和一般制藥學(xué)所容許的適當(dāng)?shù)馁x形劑等一起形成口服醫(yī)藥組合物。對該口服醫(yī)藥組合物可采用的制劑形態(tài)沒有特別限制，可例舉散劑、片劑、膠囊劑、溶液劑、懸浮劑及乳劑等可口服的劑型。制劑時可采用公知的方法。
本發(fā)明所述的“一般制藥學(xué)所容許的賦形劑等”可包括賦形劑、崩解劑、粘合劑、潤滑劑、助流劑、分散劑、懸浮劑、乳化劑、防腐劑、穩(wěn)定劑等醫(yī)藥品添加劑。
作為賦形劑可例舉乳糖、甘露醇、馬鈴薯淀粉、小麥淀粉、米淀粉、玉米淀粉、結(jié)晶纖維素等，崩解劑可例舉碳酸氫鈉、十二烷基硫酸鈉等，分散劑可例舉結(jié)晶纖維素、糊精、檸檬酸等，增溶劑可例舉羥丙甲纖維素、聚氧乙烯硬化蓖麻油、環(huán)糊精類、吐溫80等，膨潤劑可例舉羧甲纖維素、羧甲纖維素鈣、交聯(lián)羧甲纖維素鈉等，表面活性劑可例舉十二烷基硫酸鈉、蔗糖脂肪酸酯等，根據(jù)需要可以適當(dāng)?shù)牧渴褂?種或2種以上。
形成口服醫(yī)藥組合物時的制造方法，例如可將Macrogol 6000(聚乙二醇6000)、藥物(化合物A)以及必要的賦形劑等加入制藥學(xué)所容許的溶劑中，經(jīng)充分?jǐn)嚢枋蛊淙芙饧?或懸浮。制藥學(xué)容許的溶劑可選擇例如離子交換水、緩沖溶液或生理鹽水等。也可將該溶液及/或懸浮液填充入明膠膠囊等膠囊而形成的膠囊劑。作為粉末化的方法，可例舉將Macrogol 6000、化合物A以及必要的醫(yī)藥品賦形劑等用公知的方法，如粉碎法、噴霧干燥法、冷凍干燥法、濕式造粒法或干式造粒法等造粒的方法。也可適當(dāng)配合醫(yī)藥品賦形劑等壓片制成片劑。
附圖的簡要說明

圖1是表示粘液層的藥物透過性的模擬圖。
圖2表示一分子中的環(huán)氧乙烷(POE)的總加成摩爾數(shù)對于油相的藥物吸附率的影響。
圖3表示換算成每一環(huán)氧乙烷(POE)單鏈長的平均加成摩爾數(shù)對于油相的藥物吸附率的影響。
圖4表示表面張力對于油相的藥物吸附率的影響。
圖5表示環(huán)氧乙烷(POE)含有率對于油相的藥物吸附率的影響。
實(shí)施發(fā)明的最佳方式以下例舉實(shí)施例具體說明本發(fā)明，但本發(fā)明的范圍并不由其限定。
實(shí)施例1將規(guī)定量的化合物A加入離子交換水中，用超聲波(SONO CLEANER，KAIJ0公司制)照射20分鐘，得藥物懸浮液，使聚乙二醇6000(三洋化學(xué)(株)制、商品名Macrogol 6000)的添加濃度分別為0、1.5％、3.5％、10％、12％、35％。
實(shí)驗(yàn)例1由于化合物A是從胃管腔側(cè)直接作用于生存于粘液層中的幽門螺桿菌的藥物，所以考慮如圖1所示給予的原藥粉末在管腔內(nèi)溶解(I)后移行(IV)的場合或原藥粉末移行至粘液層中(III)后溶解(II)的場合。研究了Macrogol 6000對化合物A溶解過程的影響。在離子交換水、0.8％粘蛋白(Sigma有限公司制)溶液、6.2％BSA(Sigma有限公司制)溶液和亞油酸(Sigma有限公司制)中加入規(guī)定量的化合物A，經(jīng)超聲波(SONO CLEANER，KAIJO公司制)照射20分鐘得各種藥物的懸浮液。以下操作與實(shí)施例1同樣進(jìn)行，得以下樣品。
1)化合物A在水中的分散液(化合物A的濃度530μg/mL)2)化合物A在水中的分散液(化合物A的濃度530μg/mL)+Macrogol6000(3.5％)3)化合物A在粘蛋白水溶液(0.8％)中的分散液(化合物A的濃度300μg/mL)4)化合物A在粘蛋白水溶液(0.8％)中的分散液(化合物A的濃度300μg/mL)+Macrogol 6000(3.5％)5)化合物A在(BSA)水溶液(6.2％)中的分散液6)化合物A在(BSA)水溶液(6.2％)中的分散液+Macrogol 6000(3.5％)
7)化合物A在亞油酸中的分散液8)化合物A在亞油酸中的分散液+Macrogol 6000(10％)[方法]化合物A在水中的溶解度，通過將分散后的液體經(jīng)親水性濾器(0.45μm，Advantec公司制)過濾，以高效液相色譜法(以下稱HPLC)定量而算出(n＝2，樣品1)，n＝3，樣品2))。
藥物在粘蛋白中的溶解度，通過將分散后的液體經(jīng)親水性濾器(0.8μm，Advantec公司制)過濾，以HPLC定量而算出(n＝3，樣品3)、4))。
將分散后的液體經(jīng)親水性濾器(0.45μm，Advantec公司制)過濾，以紫外可見分光光度計在室溫下測定370nm和550nm(濁度校正)的吸光度，算出溶解度(n＝3，樣品5)、6))。
將分散后的液體經(jīng)親水性濾器(0.45μm，Advantec公司制)過濾，以紫外可見分光光度計在室溫下測定366nm和550nm的吸光度，算出溶解度(n＝3，樣品7)、8))。
盡管使Macrogol 6000增加到3.5％時，化合物A的溶解性(2)，0.1μg/mL)未見比不添加Macrogol 6000時(1)，0.1μg/mL)有顯著增加，但將在化合物A中添加Macrogol 6000 0.2％的處方給予感染幽門螺桿菌的動物模型(沙土鼠)時，與未添加Macrogol 6000的場合相比，見體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)(實(shí)驗(yàn)例4)。由此認(rèn)為體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)的主要原因并不是由于Macrogol6000使藥物在水中的溶解性提高。
表1 PEG 6000對化合物A在水中及/或粘液層各成分中溶解度的影響(*，p＜0.05；#，無顯著差異) 消化道內(nèi)的粘液層由粘蛋白、蛋白質(zhì)及脂質(zhì)構(gòu)成[W.L.Agneta等，Pharm.Res.，15；66-71(1998)]]，研究Macrogol 6000的添加對各粘液成分中的化合物A的溶解性的影響(表1)。
化合物A在粘蛋白水溶液中的溶解度(樣品3)，5.9μg/mL)比在水中的溶解度顯著增加，但加入Macrogol 6000時(樣品4)，6.9μg/mL)僅增加1.2倍。化合物A在作為粘液層中蛋白質(zhì)模型的BSA溶液中的溶解度(樣品5)，18.0μg/mL)比在水中的溶解度顯著增加，但添加Macrogol 6000時(樣品6)，26.9μg/mL)僅增加1.5倍。據(jù)報道，粘液中各種脂質(zhì)的總量為37％，在含有的脂質(zhì)中亞油酸含有率最高，為24％[W.L.Agneta等，Pharm.Res.，15；66-71(1998)]?；衔顰在亞油酸中的溶解度(樣品7)，135.0μg/mL)比在水中的溶解度顯著增加，但添加Macrogol 6000時(樣品8)，110.0μg/mL)未見增加。由以上結(jié)果可推測，化合物A移行至粘液層內(nèi)之后，其溶解度容易達(dá)到粘液層中的殺菌濃度(抑制菌數(shù)增加的最低濃度(0.025μg/mL)的10倍濃度)以上，但由于添加Macrogol6000時的粘液成分中的化合物A的溶解度增加(1.2～1.5倍)比粘液成分中油對化合物A的吸附量的增加(2.0倍，參照實(shí)驗(yàn)例2)小，因此推測Macrogol 6000并不是引起體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)(參照實(shí)驗(yàn)例4)的主要原因。
由此認(rèn)為，體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)的主要原因并不是由于添加Macrogol 6000引起的化合物A在水中和粘液成分中的溶解度提高。
實(shí)驗(yàn)例2[方法]為探討油相(粘液層的模型)從水相吸附藥物的吸附性，將油相用膠凝劑固定，用粘蛋白溶液使之與懸浮有藥物的水相相隔，構(gòu)成防止油成分混入水相的體外試驗(yàn)系統(tǒng)。油相的固定化是在試管內(nèi)(內(nèi)徑1cm的榮研5號試管)調(diào)制在2mL中鏈脂肪酸甘油三酯(日本油脂有限公司制、商品名パナセ一ト)中加入120mg油膠凝劑(由蓖麻油提取的天然油脂系脂肪酸，Johnson有限公司制)而形成的油凝膠。調(diào)制在0.8％粘蛋白水溶液2mL中懸浮化合物A600μg的溶液，使其與油相接觸(n＝6)。在水相中添加Macrogol 6000的場合，其濃度為3.5％(n＝3-6)。靜置2小時后，回收水相，用HPLC定量化合物A。再用甲醇洗滌油相表面，用HPLC定量回收溶液中的化合物A。
使粘蛋白溶液單獨(dú)或使化合物A粘蛋白懸浮液與固定化的油相接觸并放置后，與傾析出水相時的油相表面的附著物相比，觀察到添加Macrogol 6000時附著物有所增加。分離定量附著物中的化合物A(表2)，在化合物A-粘蛋白懸浮液的場合，油相表面的藥物吸附量為259μg(為加入量的47％)，而加入Macrogol 6000時增加到506μg(2.0倍)，加入的藥物的平均93％吸附于油相表面。同時確認(rèn)Macrogol 6000在粘蛋白水溶液中(未加入藥物)因相互作用而發(fā)生凝集。由以上結(jié)果認(rèn)為，由于Macrogol 6000與粘蛋白凝集，該粘蛋白-Macrogol 6000凝集物被油吸附時，藥物保持在凝集物中，所以觀察到油相對藥物的吸附量增加。另一方面，在不加入粘蛋白時，不管Macrogol 6000有否添加，油相對藥物的吸附量均不增加(表2)，因此提示粘蛋白與Macrogol 6000共存對于增加油相對藥物的吸附量是必要的。
表2PEG 6000與粘蛋白對于油凝膠相吸附化合物A的量的影響(*，p＜0.01)

藥物加入量600μg
根據(jù)上述可以認(rèn)為，作為化合物A對體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性的增強(qiáng)機(jī)制，加入Macrogol 6000對提高化合物A在水和粘液成分中的溶解度(表1)的作用很小。而加入Macrogol 6000對溶解后的藥物向粘液層的擴(kuò)散性的作用據(jù)推測也是很小的。因此，作為化合物A的體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)的主要原因，可以認(rèn)為是Macrogol 6000與粘蛋白凝集，被吸附于作為粘液成分的脂質(zhì)(油)時攝取藥物，從而改善了化合物A在粘液中的吸附性。
實(shí)驗(yàn)例3[方法]用與實(shí)驗(yàn)例2同樣的方法測定油相對化合物A的藥物吸附率。
研究環(huán)氧乙烷(POE)加成摩爾數(shù)對于油相對藥物的吸附率的影響(表3)。添加Macrogol時加成摩爾數(shù)(n)在72以上、添加Plaronic時在54以上，見吸附率顯著增加，與此相反，添加硬化蓖麻油(日本クミカルズ有限公司制，HCO)時加成摩爾數(shù)即使增加到100，也未見對吸附率產(chǎn)生影響。解析吸附率與POE加成摩爾數(shù)的關(guān)系(圖2)，相關(guān)系數(shù)為0.4，提示兩者的相關(guān)性低。
表4PEG衍生物的化學(xué)結(jié)構(gòu)和示意圖 實(shí)驗(yàn)例4[方法]用沙土鼠感染模型進(jìn)行動物試驗(yàn)，評價體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性。試料溶液采用含0.2％Macrogol 6000的0.5％甲基纖維素溶液，將化合物A懸浮，調(diào)制藥劑溶液。用口服探頭以給藥量20mL/kg給藥，每日2次，共3天。末次給藥的次日進(jìn)行解剖，測定摘取的胃內(nèi)的幽門螺桿菌數(shù)。體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性用清除率，即治療后菌數(shù)降至檢出限以下的例數(shù)與幽門螺桿菌原來定居的例數(shù)的比值判定。
用沙土鼠感染模型進(jìn)行動物試驗(yàn)評價體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性(表5).0.5％甲基纖維素懸浮液(MC sus.)在1mg/kg劑量時顯示80％的清除率。在0.5％MC sus.中加入0.2％Macrogol 6000的處方，以0.1mg/kg以上的劑量即顯示80％以上的清除率，提示化合物A的體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)了(10倍)?？梢哉J(rèn)為化合物A的體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性增強(qiáng)的主要原因是Macrogol 6000與粘蛋白凝集，在吸附于作為粘液成分的脂質(zhì)(油)時攝取藥物，從而改善了化合物A的粘液吸附性(參照表2)。
從上述實(shí)驗(yàn)例1～實(shí)驗(yàn)例4的結(jié)果表明，添加Macrogol 6000增強(qiáng)化合物A的體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性的機(jī)制的主要因素是，Macrogol 6000與粘液成分的粘蛋白形成凝集物，在該凝集物吸附于作為粘液成分的油時攝取藥物，在添加Macrogol 6000時增加了固定化油相的藥物吸附量。說明化合物a的體內(nèi)抗幽門螺桿菌活性在添加Macrogol 6000時得到增強(qiáng)，這與體外粘液成分(油)的藥物吸附量增加相關(guān)。而且，油對藥物的吸附與環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)相關(guān)連，能顯著增加固定化油相對藥物的吸附的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)在17以上。
表5化合物對沙土鼠幽門螺桿菌感染的療效

實(shí)驗(yàn)例5[方法]用實(shí)驗(yàn)例2所示的方法測定油相在體外對各種藥物的吸附量。調(diào)制各種化合物600μg在0.8％粘蛋白的水溶液2mL中的懸浮液，使其與油相接觸(n＝3，6)。在水相添加Macrogol 6000的場合，使?jié)舛葹?.5％(n＝3，6)。靜置2小時后，回收水相，用紫外可見分光光度計定量水相中的藥物含量。所用的化合物是硝苯地平、鹽酸尼卡地平、化合物B和化合物C?；衔顱是(R)-1-[2，3-二氫-1-(2’-甲基苯甲酰甲基)-2-氧代-5-苯基-1H-1，4-苯并二氮雜-3-基]-3-(3-甲基苯基)脲，化合物C是4’-[(2-甲基-1，4，5，6-四氫咪唑并[4，5-d][1]苯并氮雜-6-基)羰基]-2-苯基苯甲酰苯胺鹽酸鹽。再用甲醇洗滌油相表面，油相吸附的藥物用紫外可見分光光度計定量所回收的溶液中的各種化合物。

可以使用許多選擇系統(tǒng)包括，但不限制于，在tk-，hgprt-或aprt-細(xì)胞中分別使用HSV胸苷激酶、次黃嘌呤-鳥嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶和腺嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶基因。以及，抗代謝物抗性可以用作gpt、neo以及hygro的選擇基礎(chǔ)，其分別提供了對霉酚酸的抗性、對氨基糖苷類G418抗性以及對潮霉素的抗性。
從上述的，可以看出本發(fā)明的各種目的和特征。
權(quán)利要求
1.環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上在制造消化道粘液層的藥物吸附性改善劑中的應(yīng)用。
2.如權(quán)利要求1所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途，其特征還在于，藥物為抗菌劑。
3.如權(quán)利要求2所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途，其特征還在于，藥物具有抗幽門螺桿菌活性。
4.用于改善消化道粘液層對藥物的吸附性的、環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途。
5.如權(quán)利要求4所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途，其特征還在于，藥物為抗菌劑。
6.如權(quán)利要求5所述的環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的用途，其特征還在于，藥物具有抗幽門螺桿菌活性。
7.消化道粘液層的藥物吸附性改善劑，其特征在于，含有環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上作為有效成分。
8.如權(quán)利要求7所述的消化道粘液層的藥物吸附性改善劑，其特征還在于，藥物為抗菌劑。
9.如權(quán)利要求8所述的消化道粘液層的藥物吸附性改善劑，其特征還在于，藥物具有抗幽門螺桿菌活性。
10.改善消化道粘液層對藥物的吸附性的醫(yī)藥組合物，其特征在于，至少由藥物及環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯-聚丙烯共聚物的1種或2種以上的環(huán)氧乙烷衍生物組成。
11.如權(quán)利要求10所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，藥物為抗菌劑。
12.如權(quán)利要求11所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，藥物具有抗幽門螺桿菌活性。
13.如權(quán)利要求10所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，給藥劑型為液體制劑時的組合物的成分比例是，相對于組合物總量，藥物為0.00005％～50％、環(huán)氧乙烷衍生物為0.1％～37.5％及/或藥物為0.1mg以上1g以下、環(huán)氧乙烷衍生物為2mg以上1g以下。
14.如權(quán)利要求10所述的醫(yī)藥組合物，其特征還在于，給藥劑型為固體制劑時的組合物的成分比例是，相對于組合物總量，藥物為0.01％～95％、環(huán)氧乙烷衍生物為5％～99.99％及/或藥物為0.1mg以上1g以下、環(huán)氧乙烷衍生物為50mg以上1g以下。
全文摘要
本發(fā)明涉及環(huán)氧乙烷單鏈長的平均加成摩爾數(shù)為17以上的選自聚乙二醇、聚環(huán)氧乙烷及聚氧乙烯－聚丙烯共聚物的1種或2種以上在制造消化道粘液層的藥物吸附性改善劑中的應(yīng)用。將其用于具有抗幽門螺桿菌活性的藥物，可使藥理作用增強(qiáng)。
文檔編號A61K9/14GK1681534SQ0382243
公開日2005年10月12日 申請日期2003年9月25日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月26日
發(fā)明者吉原慶一, 迫和博 申請人:山之內(nèi)制藥株式會社