專利名稱：N －{ [ ( 2 s ) － 4 － ( 3 , 4－二氟芐基 )嗎啉 － 2 －基}甲基} － 2 －{ 3 ...的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種新化合物，其制備方法，含有該化合物的藥物組合物及其在治療中的應用。
炎癥是對組織損傷或微生物侵染的初次應答，其特征是組織內(nèi)白細胞與內(nèi)皮的粘附、血液滲出和活化。白細胞活化會引起有毒氧物種(例如超氧陰離子)的生成和顆粒體產(chǎn)物(例如過氧化物酶和蛋白酶)的釋放。循環(huán)白細胞包括嗜中性白細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞和淋巴細胞。不同形式的炎癥涉及不同類型的浸潤白細胞，具體情況由組織內(nèi)粘著分子、細胞因子和趨化因子表達的序型來調節(jié)。
白細胞的主要功能是防衛(wèi)宿主免遭生物體例如細菌和寄生蟲入侵。一旦組織受損或被感染，則會發(fā)生一系列事件，使得白細胞從循環(huán)系統(tǒng)向受感染的組織中局部集中。白細胞的募集受到控制，以便能有序地破壞和吞噬外來細胞或死細胞，隨后修復組織和消退炎性滲液。然而在慢性發(fā)炎狀態(tài)中，募集常常不適當，消退不能充分控制，炎性反應造成組織破壞。
日益增多的證據(jù)表明，作為哮喘的特征的支氣管炎代表了細胞介導的免疫性的一種特化形式，其中細胞因子產(chǎn)物，例如由輔助性T淋巴細胞2(Th2)釋放的IL-4和IL-5協(xié)調粒細胞(尤其是嗜酸性粒細胞以及較小程度上對嗜堿性粒細胞)的累積與活化。通過細胞毒性堿性蛋白、促炎介體和氧自由基的釋放，嗜酸性粒細胞造成粘膜損傷并引發(fā)了構成支氣管反應過度的基礎的機制。因此，阻斷Th2細胞和嗜酸性粒細胞的募集和活化很可能對哮喘有消炎功能。另外，嗜酸性粒細胞還與其它類型的疾病，例如，鼻炎、濕疹、腸易激綜合癥和寄生蟲感染有庫連。
趨化因子是與白細胞的募集和輸運有關的一大家族的小蛋白(關于評述，見Luster，New Eng.J.Med.338，436-445(1998))。它們由許多種細胞釋放出來，起著吸引和活化各種類型的細胞的作用，包括嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、嗜中性白細胞、巨噬細胞、T和B淋巴細胞。按照靠近趨化因子蛋白的氨基末端處保存的半胱氨酸殘基的間隔分類，有兩大家族的化學因子CXC-(α)和CC-(β)。趨化因子與屬于G蛋白偶聯(lián)七跨膜域蛋白家族的特異性細胞表面受體結合(關于評述，見Luster，1998)。趨化因子受體的活化，除了其它響應之外，還引起胞內(nèi)鈣的增加，細胞形狀的改變，細胞粘著分子的表達增強，脫粒作用和促進細胞遷移(趨化作用)。
至今已確定了多種CC趨化因子受體，對本發(fā)明特別重要的是CC-趨化因子受體3(CCR-3)，它主要表達在嗜酸性粒細胞上，也表達在嗜堿性粒細胞、肥大細胞和Th2細胞上。在CCR-3處起作用的趨化因子，例如RANTES、MCP-3和MCP-4，已知會募集和活化嗜酸性粒細胞。特別重要的是與CCR-3特異性結合的嗜酸性粒細胞趨化蛋白和嗜酸性粒細胞趨化蛋白-2。CCR-3趨化因子的定位和功能表明它們在過敏性疾病(例如哮喘)的發(fā)展中起關鍵作用。例如，CCR-3特異地表達在與炎性過敏響應有關的所有主要類型的細胞上。在CCR-3處起作用的趨化因子因響應炎性刺激而產(chǎn)生，并起著將這些細胞類型募集到發(fā)炎部位造成其活化的作用(例如Griffiths等，J.Exp.Med.，179，881-887(1994)，Lloyd等，J.Exp.Med.，191，265-273(2000))此外，抗-CCR-3單克隆抗體完全抑制嗜酸性粒細胞趨化蛋白與嗜酸性粒細胞的相互作用(Heath.H等，J.Clin.Invest.99(2)，178-184(1997))，而CCR-3特異性趨化因子(嗜酸性粒細胞趨化蛋白)的一種抗體則在哮喘動物模型中對支氣管反應過度和肺嗜酸性粒細胞增多均起降低作用(Gonzalo等，J.Exp.Med.，188，157-167(1998))。因此，很多證據(jù)表明，CCR-3受體的拮抗劑很可能有治療多種炎癥的治療用途。
除了在炎癥中的關鍵作用之外，趨化因子及其受體還在傳染性疾病中起一定作用。哺乳動物巨細胞病毒、皰疹病毒和痘病毒表達趨化因子受體相應物，它們能被人的CC趨化因子例如RANTES和MCP-3受體活化(關于評述，參見Wells and Schwartz，Curr.Opin.Biotech.，8，741-748，1997)。另外，人趨化因子受體，例如CXCR-4、CCR-5和CCR-3，對于哺乳動物細胞被微生物例如人免疫缺損病毒(HIV)感染能起共同受體的作用。因此，趨化因子受體拮抗劑，包括CCR-3拮抗劑，可用于阻斷CCR-3表達細胞被HIV感染，或防止免疫細胞響應被病毒(例如巨細胞病毒)操縱。
國際專利申請WO 01/24786(Shionogi & CO.Ltd.)公開了用于治療糖尿病的某些芳基和雜芳基衍生物。WO 00/69830(Torrey pinesInstitute for Molecular Studies)公開了某些用于生物篩選的二氮雜環(huán)化合物及含這些化合物的文庫。WO 00/18767(NeurogenCorporation)公開了作為多巴胺D4受體拮抗劑的一些哌嗪衍生物。美國專利6031097和WO 99/21848(Neurogen Corporation)公開了一些作為多巴胺受體配體的氨基異喹啉衍生物。WO 99/06384(Recordati Industria Chimica)公開了可用于治療下尿道神經(jīng)肌肉機能障礙的哌嗪衍生物。WO 98/56771(ScheringAktiengesellschaft)公開了作為消炎藥物的某些哌嗪衍生物。WO97/47601(Yoshitomi Pharmaceutical Industries Ltd.)公開了作為多巴胺D-受體阻斷劑的某些稠合雜環(huán)化合物。WO 96/39386(Schering Corporation)公開了作為神經(jīng)激肽拮抗劑的某些哌啶衍生物。WO 96/02534(Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik GmbH)公開了一些可用于控制螺桿菌屬細菌的哌嗪硫代吡啶。WO 95/31196(Merck Sharp & Dohme Limited)公開了作為5-HTID-α拮抗劑的某些哌嗪、哌啶和四氫吡啶衍生物。美國專利5,389,635(E.I.Du Pontde Nemours and Company)公開了作為血管緊張肽-II拮抗劑的某些取代的咪唑化合物。歐洲專利申請0 306 440(ScheringAktiengesellschaft)公開了某些作為心血管藥物的咪唑衍生物。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)一種新化合物，它是CCR-3拮抗劑。該化合物阻斷嗜酸性粒細胞的遷移/趨化作用，從而具有消炎性能。因此，該化合物具有潛在的治療價值，尤其是在嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和Th2細胞參與的疾病，包括但不限于支氣管哮喘、過敏性鼻炎和特應性皮炎中，提供免遭這些細胞誘發(fā)的組織損傷的保護作用。
于是，根據(jù)本發(fā)明的一個方面，提供了一種式(I)化合物及其鹽和溶劑化物
該化合物是N-{[(2S)-4(3，4-二氟芐基)嗎啉-2-基]甲基}-2-{3-[(甲基磺?；?氨基]苯基}乙酰胺。
式(I)化合物的合適的鹽包括生理上可接受的鹽，以及本身可能不是生理上可接受的，但可以用來制備式(I)化合物及其生理上可接受的鹽的那些鹽。適當時可以由無機或有機酸衍生出酸加成鹽，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、1-羥基-2-萘甲酸鹽、雙羥萘酸鹽、甲磺酸鹽、甲酸鹽或三氟乙酸鹽。
溶劑化物的實例包括水合物。
式(I)化合物及其鹽和溶劑化物可以用下面所述的方法制備，它們構成本發(fā)明的另一方面。
在本發(fā)明的一種制備式(I)化合物的方法中，包括將式(II)化合物或其鹽 與式(III)化合物偶合
隨后如果需要，進行以下任選步驟中的一個或多個步驟(i)除去任何保護基團；(ii)制備這樣形成的化合物的合適的鹽或溶劑化物。
式(II)和式(III)化合物的偶合在任何合適的溶劑例如極性有機溶劑(如N，N-二甲基甲酰胺)中于合適的脫水劑例如碳化二亞胺試劑(如，1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽)存在下進行，可以任選地有合適的活化劑例如活性羥基化合物(如1-羥基苯并三唑)以及堿例如叔胺(如N，N-二異丙基乙胺)存在，采用常規(guī)的偶合條件，在提供所要產(chǎn)物合適的形成速度的任何溫度下反應合適的時間，例如12-24小時。
合適的反應溫度包括18-25℃。
反應產(chǎn)物用常規(guī)方法分離和純化。
式(III)化合物可以通過式(IV)化合物的磺?；苽?該磺?；磻梢杂贸Ｒ?guī)的磺?；噭缁酋Ｂ?如甲磺酰氯)在合適的堿(例如碳酸鈉水溶劑)存在下進行。
式(II)化合物可以通過反應(a)、反應(b)或反應(c)的任何一個制備。
反應(a).式(V)化合物與式(VI)化合物反應 其中A是被保護的氨基，例如苯二甲酰亞氨基，隨后將氨基去保護以得到式(IIR)化合物 然后將得到的(IIR)化合物的對映體拆解。
反應(b).上面定義的式(V)化合物與式(VIA)化合物反應 其中A與上面對式(VI)的定義相同，隨后將氨基去保護，得到式(II)化合物。
反應(c).將式(VII)化合物水解 隨后將所形成的式(IIR)化合物的對映體拆解。
對于反應(a)和(b)，在式(V)化合物與式(VI)或(VIA)化合物之間的反應中中間體二醇(IIBR)和(IIB)的環(huán)化通常在Mitsunobu條件下進行如下通常，將式(V)化合物和式(VI)或式(VIA)化合物在合適的溶劑(例如四氫呋喃)中的混合物在合適的溫度(以溶劑的回流溫度為宜)和惰性氣氛(以氮氣氛的宜)下攪動例如20-24小時。然后再加溶劑，將混合物冷卻，以冷卻至0-5℃為宜。加入合適的膦(例如三苯膦)，攪拌該混合物直至所有固體均溶解。接著在一段時間(例如10-15分鐘)內(nèi)加入合適的偶氮化合物，例如二異丙基偶氮二羥酸酯，同時保持溫度低于7℃。將混合物放置一段時間(宜為2-3小時)，然后溫熱至例如20-25℃。又放置一段時間(宜為4-6小時)后，再加膦和偶氮化合物。再放置一段時間(宜為20-24小時)，將反應混合物濃縮至接近干燥。加入合適的醇(如丙-2-醇)，重復該濃縮步驟；然后重復加醇和濃縮步驟。再加入醇，將混合物熱至某個溫度(宜為65-75℃)。經(jīng)過一段時間(例如20-45)，將所形成的漿體冷卻至20-25℃，然后放置例如1.5-3小時，接著過濾分離產(chǎn)物。濾床用更多的醇洗，然后在35-45℃下干燥，分別得到被保護形式的式(IIR)或式(II)化合物。
從產(chǎn)物中除去保護基團通常進行如下。將被保護形式的式(IIR)或式(II)化合物在合適溶劑(例如水)中的漿體加熱至高溫(宜為70-75℃)，然后逐滴加入濃無機酸(例如濃硫酸)。將混合物在升溫(以溶劑的回流溫度為宜)下加熱適當時間(例如20-24小時)，隨后將反應混合物冷卻至20-25℃，再用合適的非極性溶劑(例如二氯甲烷)處理。然后逐滴加入堿，例如0.880氨溶液，并維持溫度在20至25℃之間。加入更多的非極性溶劑，分離出水明并用非極性溶劑萃取。合并的有機相用水洗，然后蒸發(fā)至干。將殘余物重新溶解并蒸除非極性溶劑，得到式(IIR)和式(II)化合物。
上述的被保護形式的式(IIR)或式(II)的制備方法也可以分兩步進行，其中分別分離出式(IIBR)或式(IIB)中間體化合物。
其中A與先前對式(VI)和(VIA)定義的相同。
通常，將式(V)化合物和式(VI)或式(VIA)化合物在合適溶劑(例如四氫呋喃)中的混合物在合適的溫度(例如溶劑的回流溫度)于惰性氣氛(例如氮氣氛)下攪拌例如20-24小時。加入更多的式(V)化合物，將混合物在合適的溫度(例如溶劑的回流溫度)于惰性氣氛(例如氮氣氛)下加熱一段合適的時間，例如3-6小時。然后將反應混合物冷卻，例如至20-25℃，通過加入合適的共溶劑(例如二異丙基醚)使化合物沉淀。過濾后進一步用共溶劑洗并在真空下干燥，分別分離出式(IIBR)或式(IIB)化合物。
然后可以由式(IIBR)或式(IIB)化合物出發(fā)，在與此前所述的式(V)和式(VI)或(VIA)化合物之間反應相似的條件下制備式(IIR)或式(II)化合物的被保護形式，但是省去加入膦和偶氮化合物之前的回流階段。
反應(C)通常的進行方式是將式(VII)化合物在合適溶劑(例如甲醇和水的混合物)中的溶液攪拌，加入合適的堿，例如碳酸鉀。將該混合物在合適的溫度(例如20-25℃)下攪拌適當?shù)臅r間(例如16-20小時)，隨后減壓除去有機溶劑。加入水，混合物用合適的有機溶劑(例如乙酸乙酯)萃取。合并的有機相用水和氮化鈉飽和水溶液洗，然后用合適的干燥劑(例如硫酸鈉)干燥，過濾并減壓蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物隨后用快速色譜法純化。
由外消旋產(chǎn)物即式(IIR)化合物中拆分式(II)化合物可以用本領域技術人員熟知的技術進行，例如制備型手性高效液相色譜法(手性HPLC)或非對映異構的鹽的分級結晶。
式(V)化合物可以由式(IX)化合的 通過與乙醇胺反應制備。該反應宜在高溫(例如40-60℃)于溶劑不存在下進行。
式(VII)化合物可以通過式(VIII)化合物
與3，4-二氟芐基氯反應制備。
式(VIII)化合物和3，4-二氟芐基氯之間的反應通常在合適的溶劑(例如N，N-二甲基甲酰胺)中于惰性氣氛(例如氮氣氛)下進行，并加入合適的堿(例如碳酸鉀)和合適的活化劑(例如碘化鈉)。然后將該混合物在合適的溫度(例如20-25℃)下攪拌一段合適的時間(例如16-20小時)，隨后減壓除去揮發(fā)性組分。
式(VIII)化合物的制備方法是，用α，α，α-三氟乙酸乙酯在合適有機溶劑(例如乙醚)中的溶液在惰性氣氛(例如氮氣氛)下處理嗎啉-2-基甲胺在合適的有機溶劑(例如甲醇)中的溶液。將該混合物在合適的溫度(例如20-25℃)下攪拌一段合適的時間，例如20-40分鐘，并減壓除去揮發(fā)性組分。隨后將殘余物溶于合適的有機溶劑(例如甲醇)中，減壓去除揮發(fā)性組分。
式(IV)和(VI)化合物是可以買到的商品，并可按照已知步驟，例如在合成方法的標準參考教材如J.March，Adranced OrganicChemistry，3rd Edition(1985)，Wiley Interscience中所公開的方法類似地制備。
式(II)、(IIBR)、(IIB)和(V)化合物被認為是新化合物。
因此，本發(fā)明提供了一種式(II)化合物。
還提供了一種式(IIBR)化合物。
還提供了一種式(IIB)化合物。
還提供了一種式(V)化合物。
上述所有反應中的合適保護基團均為本領域常用的基團。這些保護基團的形成和除去方法是適合被保護分子的那些常規(guī)方法，例如在合成方法的標準參考教材如P.J.Kocienski，ProtectingGroups，(1994)，Thieme中所討論的方法。
對于上述任何反應或方法，均可使用常規(guī)的加熱與冷卻方法，例如電熱板和冰/鹽浴。根據(jù)需要可以使用常規(guī)的純化方法，例如結晶和柱色譜法。
式(I)化合物的鹽和溶劑化物可以由式(I)化合物或其合適的鹽或溶劑化物制備，并按照常規(guī)步驟分離。
本發(fā)明的化合物可按照以下測定方法試驗其體外生物活性。
(a)CCR-3結合試驗使用CCR-3競爭結合SPA(丙爍親近測定法)評價新化合物對CCR-3的親和性。將由穩(wěn)定表達CCR-3的K562細胞制備的膜(2.5μg/孔)與0.25mg/孔的麥胚凝集素SPA珠(Amersham)混合，于4℃在結合緩沖液(HEPES 50mM，CaCl21mM，MgCl25mM，0.5％BSA)中培養(yǎng)1.5小時。培養(yǎng)之后，加入20PM的[126I]嗜酸性粒細胞趨化蛋白(Amersham)和濃度漸增的化合物(1PM至30μM)，在96孔板中于22℃培養(yǎng)2小時，然后在Microbeta板計數(shù)器上計數(shù)?？倻y定體積為100μl。通過與一個四參數(shù)對數(shù)方程進行擬合，分析競爭結合數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)表示成至少兩次實驗的PIC50平均值(抑制[125I])嗜酸性粒細胞趨化蛋白結合達到50％時化合物濃度的負對數(shù)值)。
(b)嗜酸性粒細胞趨化性分析評價化合物對嗜酸性粒細胞趨化性的抑制作用。如先前所述(Motegi & Kita，1998；J.Immunology，1614340-6)，使用一只Miltenyi細胞分離柱和磁性Super Macs磁體，用標準的CD16細胞缺失法由人外周血中純化嗜酸性粒細胞。將細胞重新懸浮于RPMI1640/10％FCS溶液中并在37℃下用鈣熒光素-AM(MolecularProbes)培養(yǎng)30分。培養(yǎng)之后，將嗜酸性粒細胞在400g下離心5分鐘，按2.2×106/mL重新懸浮在RPMI/FCS中。然后在濃度漸增的化合物(1PM至30μM)存在下于37℃培養(yǎng)30分鐘。對于對照響應，細胞只用RPMI/FCS培養(yǎng)。向96孔趨化性板(5μm濾板，ReceptorTechnologies)的下部隔室中加入激動劑嗜酸性粒細胞趨化蛋白(EC80濃度)。向濾板的上隔室中加入嗜酸性粒細胞(50μl，每mL 2×106個細胞)，在37℃培養(yǎng)45分鐘。除去保留在趨化性濾板頂部的細胞，在熒光板讀取器上定量測定已遷移的嗜酸粒細胞的數(shù)目。通過將數(shù)據(jù)與一個四參數(shù)的對數(shù)方程擬合，分析關于化合物對嗜酸性粒細胞趨化性的作用的抑制曲線。利用以下公式(Lazareno & Birdsall，1995，Br.J.pharmacol.1091110-9)得到函數(shù)pK1值(fpKi)
本發(fā)明化合物在CCR-3結合和/或嗜酸性粒細胞趨化性試驗(測定(a)和(b))中進行了試驗。本發(fā)明化合物在CCR-3結合試驗中PIC50值為8.0。在CCR-3嗜酸性粒細胞趨化性分析中試驗的本發(fā)明化合物的fpKi值為8.4。
本發(fā)明化合物于其中具有潛在有益的消炎效果的疾病實例包括呼吸道疾病，例如支氣管炎(包括慢性支氣管炎)、支氣管擴張、哮喘(包括過敏誘發(fā)的哮喘反應)、慢性阻塞性肺病(CORD)、囊性纖維變性、竇炎和鼻炎。
還包括胃腸道疾病，例如腸部炎性疾病，包括炎癥性腸病(例如節(jié)段性回腸炎或潰瘍性結腸炎)以及暴露于輻射或過敏原之后繼發(fā)的腸部炎癥。
另外，本發(fā)明化合物可用于治療腎炎；皮膚病，例如牛癬、濕疹、過敏性皮炎和超敏反應；以及具有炎性成分的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病(例如阿爾茲海默病、腦膜炎、多發(fā)性硬化癥)、HIV和艾滋病癡呆。
本發(fā)明化合物還可用于治療鼻息肉病、結膜炎或瘙癢。
本發(fā)明化合物對其具有潛在有益效果的其它疾病的實例包括心血管病，例如，動脈粥樣硬化、外周血管病和特發(fā)性高嗜酸性粒細胞綜合癥。
本發(fā)明化合物可作為免疫抑制劑使用，因此可用于治療自免疫病，例如移植后的同種異體組織排斥，類風濕性關節(jié)炎和糖尿病。本發(fā)明化合物還可用于抑制轉移。最重要的疾病包括哮喘、COPD和上呼吸道炎癥，包括季節(jié)性和常年性鼻炎。
本領域技術人員應該理解，這里所說的治療應擴展到預防和已確定的病癥的治療。
如上所述，式(I)化合物可作為治療藥物使用。
因此，作為本發(fā)明的又一方面，提供了用來作為活性治療藥物的式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
因此還提供了式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物，用于治療炎癥，例如哮喘或鼻炎。
根據(jù)本發(fā)明的另一方面，提供了式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物在制造用于治療患有炎癥(例如哮喘或鼻炎)的患者的藥物方面的應用。
在本發(fā)明的又一方面，提供了一種用于治療患有炎癥(例如哮喘或鼻炎)的人或哺乳動物的方法，該方法包括服用有效數(shù)量的式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
本發(fā)明化合物可以配制加工以便以任何方便的方式服用。
因此還提供了一種藥物組合物，其中含有式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物，以及任選存在的一種或多種生理上可接受的稀釋劑或載體。
還提供了一種制備這類藥物制劑的方法，包括將式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物與一種或多種生理上可接受的稀釋劑或載體混合。
本發(fā)明的化合物例如可以配制成口服、吸入、鼻內(nèi)、頰含、非腸道或直腸給藥，優(yōu)選口服給藥。
用于口服給藥的片劑和膠囊劑可以含有常規(guī)的賦形劑，例如粘合劑，如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、淀粉膠漿、纖維素或聚乙烯吡咯烷酮；填料，例如乳糖、微晶纖維素、糖、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨醇；潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；崩解劑，例如，土豆淀粉，交聯(lián)的羧甲基纖維素鈉或淀粉羥乙酸鈉；或潤濕劑，例如十二烷基硫酸鈉。片劑可以按照本領域熟知的方法包衣。
口服液體制劑的形式可以是例如水基或油基懸浮劑、溶液劑、乳劑、糖漿劑或酏劑，或者可以是干產(chǎn)物的形式，在使用前用水或其它合適的載液配制。這些液體制劑可以包含常規(guī)的添加劑，例如懸浮劑，如，山梨醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/糖漿、明膠、羥甲基纖維素、羧甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化的食用脂肪；乳化劑，例如卵磷脂、脫水山梨醇單油酸酯或阿拉伯膠；非水載液(可以包括食用油)，例如杏仁油、分級的椰子油、油性酯、丙二醇或乙醇；或防腐劑，例如，對羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸。制劑中還可以在適當時含有緩沖鹽、風味劑、著色劑和/或甜味劑(例如甘露醇)。
對于頰含給藥，組合物可采取按常規(guī)方式配制的片制或錠劑形式。
本發(fā)明化合物還可以配制成栓劑，例如，其中含有常用的栓劑基料，例如可可脂或其它甘油酯。
本發(fā)明化合物還可以配制成利用快速濃注或連續(xù)輸注方式非腸道給藥，并且可以是單位劑量形式，例如安瓿劑、小瓶劑、小體積輸注液或預充注射器等形式，或是與加入的防腐劑一起在多劑量容器中。組合物可以采取諸如在水或非水載液中的溶液、懸浮液或乳狀液等形式，并可含有配制劑，例如抗氧化劑、緩沖劑、抗微物劑和/或滲透壓調節(jié)劑?；蛘呤?，活性成分可以是粉末形式，用于在使用前以合適的載液(例如滅菌、無熱原的水)配制。這種干固體形式的制備方法可以是，將滅菌的粉末在無菌條件下裝入各個無菌容器中，或者將無菌的溶液在無菌條件下裝入各個容器并且冷凍干燥。
本發(fā)明的化合物和藥物組合物還可以用來與其它治療藥物組合，例如，抗組胺藥、抗膽堿能藥、消炎藥物例如皮質類固醇，例如，丙酸氟替卡松、丙酸倍氯米松、糠酸莫米松、曲安奈德或布地奈德；或者非甾類消炎藥物(NSAID)，例如色甘酸鈉、奈多羅米鈉、PDE-4抑制劑、白三烯拮抗劑、iNOS抑制劑、類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整聯(lián)蛋白拮抗劑和腺苷2α激動劑；或者β-腎上腺素能藥物，例如沙美特羅、沙丁醇胺、福莫特羅、非諾特羅或特布他林及其鹽；或者抗感染藥物，例如抗生素藥物和抗病毒藥物。應該理解，當本發(fā)明化合物與通常以吸入或鼻內(nèi)途徑給藥的其它治療藥物組合給藥時，所形成的藥物組合物可以以吸入或鼻內(nèi)途徑給藥。
本發(fā)明化合物的服用量宜為每kg體重0.001-500mg，優(yōu)選0.01-500mg，更優(yōu)選0.01-100mg，以任何合適的頻率給藥，例如每天1-4次。準確的劑量方案當然要取決于諸如治療的適應癥、患者的年齡和狀況，以及選擇的具體給藥途徑等因素。
在整個說明書和隨后的權利要求中，除非上下文另有說明，“含有”一詞及其變型，例“包含”和“含”，應理解為包括所述的整體或步驟或整體的集合，但不排除任何其它的整體或步驟或者整體或步驟的集合。
通用實驗細節(jié)液相色譜質譜(LC/MS)系統(tǒng)使用以下(LC/MS)系統(tǒng)一只3μm ABZ+PLUS(3.3cm×4.6mm內(nèi)徑)柱，用以下溶劑A-0.1％W/V甲酸+0.077％W/V乙酸銨在水中，B-95.5的乙腈水+0.05％V/V甲酸，以每分鐘3ml的流速洗脫。使用以下的梯度方案100％A，0.7分；A+B混合物，梯度型式3.5分內(nèi)0-100％B；在100％B保持1.1分；0.2分鐘內(nèi)回到100％A。
固相萃取(離子交換)“SCX”是指Isolute Flash SCX-2磺酸固相萃取柱。
所有溫度均為攝氏度。
實施例1N-{[(2S)-4-(3，4-二氟芐基)嗎啉-2-基]甲基}-2-{3-[(甲基磺?；?氨基]苯基}乙酰胺 在22℃和攪拌下，向說明例4化合物(0.0242g)在N，N-二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(0.0304g)、1-羥基苯并三唑(0.0171g)和說明例3化合物(0.0243g)在N，N-二甲基甲酰胺(1ml)中的溶液。向混合物中加入N，N-二異丙基乙胺(0.0368ml)，然后在22℃攪拌18小時。將該混合物加在2g預先用甲醇調理的SCX離子交換柱(IST Isolute FlashSCX-2)上。用甲醇和10％的0.880氨/甲醇溶液洗脫柱子。將第一份氨級分減壓蒸發(fā)，殘余物的硅膠上用BiotageTM快速色譜進一步純化，用200∶8∶1的二氯甲烷/乙醇/0.880氨溶液洗脫。將所要的級分合并，減壓蒸發(fā)溶劑，得到標題化合物(0.0353g)為無色玻璃體。LC/MSRt＝2.16分，m/z 454(MH+)說明例12-(3，4-二氟芐基氨基)乙醇
在氮氣和攪拌下向乙醇胺(325.8ml)中于40℃逐滴加入4-氯甲基-1，2-二氟苯(90.0g)(Fluorochem Chemicals/Journal of OrganicChemistry，1961，(26)，2353-2355)，并冷卻之以保持反應溫度。將混合物攪拌3小時，同時在約50℃下加熱，然后冷卻至室溫。將混合物分配在乙酸乙酯和碳酸氫鈉飽和水溶液之中。分離兩相，有機相再用碳酸氫鈉飽和水溶液(100ml)洗。合并的水相再用一份乙酸乙酯(100ml)萃取，合并的有機相用水(2×500ml)和氯化鈉飽和水溶液洗。將有機相減壓濃縮，加入甲苯后再濃縮，得到標題化合物，為白色固體(92.5g)。
質譜m/z 188[MH+]說明例2[4-(3，4二氟芐基)嗎啉-2-基]甲胺 在80-90℃和氮氣氛下，于50分鐘內(nèi)向攪拌著的說明例1的化合物(128.12g)分批加入2-(環(huán)氧乙烷-2-基甲基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(166.8g)。將混合物在80- 0℃再攪拌3小時，然后于40分鐘內(nèi)逐滴加入濃硫酸(200ml)。將該混合物加熱至150℃并攪拌過液。冷卻至室溫后，該混合物用乙酸乙酯(2×400ml)洗。將水相冷卻至10℃，于30分鐘內(nèi)小心地加入氯化鈉飽和水溶液(400ml)。向水相再加入氯化鈉飽和水溶液(400ml)，另用幾份乙酸乙酯(3×500ml)洗該混合物。將水相冷卻至10℃，用10N氫氧化鈉水溶液調節(jié)至pH12-13。將混合物用乙酸乙酯(3×500ml)萃取，合并的有機相經(jīng)“Hyflo”助濾劑過濾。合并的有機萃取液用水(3×500ml)和氯化鈉飽和水溶液洗。將有機相減壓濃縮，加入甲苯(3×150ml)后再濃縮3次。得到標題化合物，為琥珀色油(94g)。
質譜m/z 243[MH+]說明例31-[(2S)-4-(3，4-二氟芐基)嗎啉-2-基]甲胺 利用制備型手性HPLC，將說明例2化合物(4.5g)(外消旋混合物)分離成其單個對映體。此分離用2”×22cm Chiralpak AD 20μm柱(Merck自填充DAC系統(tǒng))進行，用95∶5∶0.1(V/V)的庚烷無水乙醇∶二乙胺洗脫(流速40分鐘內(nèi)50ml/分，紫外檢測220nm)；樣品裝填制備300mg樣品在10ml 1∶1(V/V)無水乙醇∶系統(tǒng)洗脫劑中。減壓除去所要級分中的溶劑，將產(chǎn)物分配在二氯甲烷和2N鹽酸水溶液中，分離兩相，有機相進一步用2N鹽酸水溶液萃取2次。加入固體碳酸鉀將合并的萃取水溶液調節(jié)至pH12，用固體氯化鈉將溶液飽和。用二氯甲烷萃取該溶液3次，合并的有機萃取液用水洗，用硫酸鎂干燥，過濾，減壓除去溶劑，得到標題化合物(1.84g)，為黃色油狀物。制備型HPLC保留時間28.5分。
說明例43[(甲基磺?；?氨基]苯基乙酸 在攪拌下向3-氨基苯基乙酸(3.2g)和碳酸鈉(5.44g)在去離子水(36ml)中的溶液中加入甲基磺酰氯(1.7ml)。將混合物在攪拌下于85℃加熱4小時，然后放置冷卻至室溫，用濃鹽酸酸化至pH2，在4℃的冰箱內(nèi)放置過夜。過濾出沉淀的固體，用水和乙醚洗，將合并的濾液和洗液減壓蒸發(fā)至干。得到的殘余物溶于熱水中，在4℃的冰箱中放置過液使其重結晶。過濾出晶體，用少量冷水洗，真空干燥，得到標題化合物(0.417g)，為無色晶體。
LC/MSRt＝2.00分，m/z 228[MH]，m/z 247[MNH4+]
權利要求
1.一種式(I)化合物 及其鹽和溶劑化物。
2.一種制備式(I)化合物或其鹽或溶劑化物的方法，該方法包括使式(II)化合物或其鹽與式(III)化合物偶合
3.權利要求1的化合物作為治療藥物使用。
4.一種漢療患有或容易患有炎癥的人和動物的方法，該方法包括服用有效數(shù)量的權利要求1的化合物。
5.一種藥物組合物，其中含有權利要求1的化合物和一種生理上可接受的載體。
6.一種式(II)化合物
7.一種式(IIBR)化合物 其中A是一個被保護的氨基。
8.一種式(IIB)化合物 其中A是一個被保護的氨基。
9.一種式(V)化合物
全文摘要
式(I)化合物N－{[(2 S)－4－(3，4－二氟芐基)嗎啉－2－基]甲基}－2－{3－[(甲基磺?；?氨基]苯基}乙酰胺及其鹽和溶劑化物，它及中間體的制備方法，含有它的藥物制劑及其作為CCR3拮抗劑在治療炎癥中的應用。
文檔編號A61P11/06GK1642553SQ03806865
公開日2005年7月20日 申請日期2003年3月27日 優(yōu)先權日2002年3月28日
發(fā)明者R·A·安克利夫, C·M·庫克, C·D·埃爾德雷, P·M·戈爾, L·A·哈里森, M·A·哈耶斯, S·T·霍奇森, D·B·朱德, S·E·基林, X·Q·勒維爾, G·米爾斯, G·M·羅伯森, S·斯萬森, A·J·沃爾克, M·維爾金森 申請人:葛蘭素集團有限公司