專利名稱：用山羊血清治療ms的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及治療。
背景技術(shù)：
WO 97/02839涉及病毒感染的病毒遏制、治療和預(yù)防。它提供了用于治療患者體內(nèi)病毒感染的中和抗體的生產(chǎn)方法，包括下列步驟a.將哺乳動物暴露于病毒，使得所述哺乳動物生成針對所述病毒的中和抗體；和b.由所述哺乳動物收集所述中和抗體。
在實施例中，通過混合HIV病毒與得自山羊的HIV中和抗體獲得了命名為AAV2的HIV疫苗。
WO 01/60156涉及中和抗體和免疫調(diào)控增強組合物。它提供了免疫調(diào)控組合物，包含對抗原特異的異源抗體；和抗原，其中異源抗體與抗原形成復(fù)合物以聯(lián)合藥物載體。
實施例與WO 97/02839類似，并再次通過混合HIV病毒與得自山羊的HIV中和抗體獲得了命名為AAV2的HIV疫苗。
WO 02/07760關(guān)注治療劑。它提供了預(yù)防HIV感染或治療受HIV感染個體的方法，包括下列步驟(1)將山羊免疫系統(tǒng)暴露于HIV；(2)由經(jīng)過HIV攻擊后的山羊純化抗體；和(3)用上述步驟2中獲得的抗體治療個體。
PCT/GB 02/03037關(guān)注治療劑，并報道了在由經(jīng)過HIV攻擊的山羊血清制備的組合物中發(fā)現(xiàn)了抗HLA和其它抗體活性。本PCT申請要求PCT/GB02/03037的優(yōu)先權(quán)。我們完整收錄PCT/GB 02/03037的內(nèi)容作為參考。
在基于PCT/GB 02/03037產(chǎn)品的初步試驗中，使用來自經(jīng)過HIV攻擊的山羊的血清，HIV患者得到了成功的治療。
優(yōu)選的是，治療采用可以通過下述過程獲得的血清組合物在山羊中引發(fā)有效抗體，由山羊取血，在所取血液中證明HIV中和能力，由血液除去固體，使用過飽和硫酸銨或其它合適沉淀劑來沉淀，分離沉淀，將沉淀溶于合適的水性介質(zhì)，并將溶液透析，截留值為5,000-50,000道爾頓，優(yōu)選7,000-30,000道爾頓，更優(yōu)選8,500-15,000道爾頓，尤其是大約10,000道爾頓。免疫山羊的方法可以是肌肉內(nèi)，但是也可以使用其它標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，諸如皮下或皮內(nèi)施用。倘若使用的是總殘留物，那么還可以通過其它常用分級作用方法(例如辛酸)來完成純化過程。
更具體的說，治療通常采用以下述方式獲得的山羊血清。
生產(chǎn)山羊血清的實施例通過肌肉內(nèi)注射懸浮于普通商品化上清液中的經(jīng)裂解HIV-3b病毒給山羊接種，肌肉內(nèi)注射HIV-3b的濃度是每毫升109個病毒粒子。事先于60℃30分鐘加熱殺死病毒。經(jīng)過適當(dāng)時間間隔后，諸如兩周，采集血樣用于初始評估。在經(jīng)過優(yōu)化的程序中，每周給山羊進行注射達四周，然后在第六周將山羊放血以獲得試劑。
在無菌技術(shù)下由山羊采集了大約400cc血液。將插針抽血的部位刮毛并用betadine準(zhǔn)備。將18號針頭用于由動物抽取大約400cc血液。注意動物能夠耐受大約400cc的采血，而不會遭受任何不利影響。不必處死動物。然后可以在動物補充血液容量后大約10-14天將動物再次放血。
確認了潛在有用抗體的存在。一旦確認了這些試劑的存在，在第4-6周由山羊取血，并離心以分離血清。然后將300ml血清過濾以除去大凝塊和顆粒物。然后用過飽和硫酸銨(45％溶液，室溫)處理血清以沉淀抗體和其它物質(zhì)。將由此生成的溶液以5000rpm離心5分鐘，然后除去上清液。將沉淀的免疫球蛋白重懸于足以重新溶解沉淀的磷酸鹽緩沖鹽水(“PBS緩沖液”，參閱Sambrook等人，‘Molecular Cloning，A Laboratory Manual’，1989)。
然后將溶液通過分子量截留值10,000道爾頓的膜進行透析。透析在PBS緩沖液中進行，每4小時更換，達24小時。透析于4℃進行。
透析24小時后，將透析袋中的內(nèi)容物倒入無菌燒杯。調(diào)整溶液使得單位體積的質(zhì)量為每毫升10毫克。使用PBS進行稀釋。然后將由此生成的溶液經(jīng)0.2微米濾器過濾到無菌容器中。過濾后，將溶液分裝成等分試樣以提供1ml單劑，并在使用前保存于-22℃。
此時試劑可供使用。
在此程序中可以進行改變，諸如例如改變硫酸銨的濃度或換用其它試劑。類似的，透析截留值不必是10,000道爾頓。
發(fā)明本發(fā)明提供了用于緩和(palliation)接受治療的人或非人動物的狀況的方法。
在一個相關(guān)方面，本發(fā)明提供了用于改善人或非人動物的一般身體和/或精神狀況的方法。
另外，本發(fā)明的方法給出了提高保持良好狀態(tài)和/或精神狀況的治療。
本發(fā)明還提供了用于改善生活品質(zhì)的程序。
在一個具體方面，待治療的狀況表現(xiàn)出衰老過程或與其相關(guān)，或者表現(xiàn)出健康和福利(welfare)。
在一個相關(guān)版本中，我們提供了復(fù)壯的方法。在這個方面，我們觀察到產(chǎn)品的施用導(dǎo)致常常歸結(jié)于老齡的一些身體狀況的逆轉(zhuǎn)，諸如皮膚彈性、記憶、視力的改善。它有效復(fù)原了部分身體。
一方面，本發(fā)明采用包含抗HLA抗體的組合物。在這個方面，抗體可以是天然的或經(jīng)過改造的，而且可以是完整的或部分的。因此，例如，抗HLA抗體可以是Fab。
在一個相關(guān)方面，本發(fā)明采用由經(jīng)過HIV裂解物攻擊的山羊的血清獲得的血清組合物?？梢酝ㄟ^作為生產(chǎn)山羊血清的實施例給出的方法來制備組合物。
可以通過本發(fā)明緩和治療的狀況的實例包括皮膚、指甲、毛發(fā)、肌肉、記憶、協(xié)調(diào)、能量水平、沮喪、食欲和性活動。
一般而言，對有所需要的人或其它動物施用組合物能夠?qū)е逻@些狀況中的一項或多項的顯著改善?？梢赃M行一次或多次施用，而且在一系列即至少三次、五次或更多施用后通常觀察到受益。
動物通常指可能具有或沒有需要治療的某些疾病或其它疾病的人。疾病可以是對本發(fā)明所采用組合物的治療敏感的疾病。
因此，本發(fā)明涵蓋對可能正在或未在接受山羊血清產(chǎn)品以外的某些其它治療，和可能具有或沒有正在治療的疾病的人的治療。
通常，本發(fā)明采用的組合物包含可以通過血清提取技術(shù)由經(jīng)過適當(dāng)攻擊的山羊的血液衍生的活性成分，所述血清提取技術(shù)并非設(shè)計用于分離個別特異抗體。具體而言，本發(fā)明關(guān)注來自經(jīng)過攻擊的山羊的血清的活性成分的分離，而無需徹底純化和提取以獲得個別抗體，目前我們認為活性成分包括抗HLA抗體，有可能是協(xié)作性抗HLA抗體和/或抗FAS抗體的混合物。觀察到的受益，諸如毛發(fā)和皮膚的健康狀況和顏色即抗衰老，提出了不能必然由抗體獨家解釋的獨特特性。
至今能夠得到的所有資料都指向活性并非由抗HIV中和抗體產(chǎn)生的事實。因此，在一個優(yōu)選方面，我們提供了組合物，合適的是由經(jīng)過免疫原攻擊的山羊獲得的組合物，其中組合物不包含抗HIV中和抗體。
不受任何理論或假說的約束，工作物質(zhì)似乎可以包括生物學(xué)活性山羊分子，其不是山羊抗體，卻是細胞因子、激素、或經(jīng)由粗糙純化過程得到保留的相似類型分子。
若活性物質(zhì)是抗體，則它可能識別在體內(nèi)觸發(fā)我們正在觀察的生理學(xué)效應(yīng)的一種或多種配體或受體。
目的分子可能是或不是與來自用于培養(yǎng)病毒的H9淋巴瘤細胞系或激活的人PMBC的病毒是共享的。病毒免疫原在本發(fā)明中的作用尚不清楚。它可能是或不是必需的。若它是必需的，則它可能或是在細胞中誘導(dǎo)危險信號以分泌目的分子，或是結(jié)合并轉(zhuǎn)運這些分子(諸如HLA、或LFA-1等等)出細胞而進入上清液。
一般而言，將由非人宿主衍生的抗體或血清組合物注射到人體內(nèi)是不必要的。通常會測定到針對外來抗體自身的強烈免疫應(yīng)答。然而，令人驚訝的是，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)山羊血清提取物的使用沒有引發(fā)使用其它外來動物蛋白時所預(yù)期的免疫反應(yīng)。山羊血清提取物的注射得到了免疫遏制患者和正常個體二者的耐受。
本發(fā)明具體使用由經(jīng)過HIV攻擊的山羊衍生的血清提取物，其有可能包含抗體分子總集(包括抗HLA活性)。不希望受到理論的約束，我們認為這種方法具有顯著優(yōu)點。使用這種血清提取物治療的患者在接受治療后幾分鐘內(nèi)就顯示顯著效果。
通過肌肉內(nèi)注射將滅活病毒注射到經(jīng)過特別鑒定的山羊體內(nèi)，并進行保溫。然后采集測定量的血液并相應(yīng)地處理。
將選擇的山羊與HIV病毒一起保溫后，與早期研究一致，我們注意到因暴露于外來蛋白質(zhì)抗原而引起的免疫應(yīng)答。然后進一步處理提取的血清，從而將其制備用于人類用途。
通過皮下注射進行治療，數(shù)量在1/10-10cc之間變化，并設(shè)計盡可能快的將藥物投遞給淋巴系統(tǒng)。對于本發(fā)明而言，優(yōu)選劑量通常是每周1ml或根據(jù)需要，將劑量分成兩半，注射到雙臂中。通常是每2或3周進行施用，然后每3月施用。對于癌癥患者，每周0.3ml似乎是最佳的。
在大多數(shù)情況中，在三個月的時間里每四周進行一次治療。一般觀察如下1.中等至嚴(yán)重沮喪在注射后少于六十分鐘內(nèi)逆轉(zhuǎn)。
2.患者通常在注射后兩小時內(nèi)恢復(fù)食欲并積極尋找食物。
3.在第一次治療后大約兩周內(nèi)患者開始增加體重。
4.獨立實驗室報告確認了第一次治療后4-6周病毒負荷和P24值顯著下降，而且CD4和CD8細胞顯著增加。
5.沒有觀察到顯著副作用。
重要的是要注意本發(fā)明藥物與現(xiàn)行治療不同，不需要患者維持嚴(yán)格的每小時或每天服藥，而是依靠每周或每月施用的簡單注射。
優(yōu)選的是，組合物是經(jīng)過純化的，而且基本上只是由純化的血清提取物組成。在另一種變化中，產(chǎn)品還可以是通過常規(guī)或任何其它合適程序純化的，包括但不限于例如免疫親和層析、鹽沉淀、離子交換層析、大小層析、親和層析、及其適當(dāng)或需要的聯(lián)合。
如本文所述生產(chǎn)的山羊血清提取物可以依照本發(fā)明配制成減輕組合物。如此，本發(fā)明還涉及包含本發(fā)明山羊試劑、適合于治療的藥物組合物。本發(fā)明的試劑可以與合適的藥用載體混合。
藥物組合物的實例包括具有合適組成的任何固體(片劑、丸劑、膠囊、顆粒、等)，或者口服、局部或腸胃外施用，而且它們可以包含載體。若腸胃外施用，則組合物可能需要是無菌的。
常常采用測試劑量來看個體是否發(fā)生針對超免疫山羊血清的過敏反應(yīng)。皮內(nèi)注射后等待30分鐘，看是否發(fā)生中間反應(yīng)，表現(xiàn)為水腫、紅腫(erythemia)、和發(fā)癢。若這個反應(yīng)是陰性的，則假設(shè)立即敏感反應(yīng)極可能發(fā)生。然而，過敏反應(yīng)并不會因可能的過敏反應(yīng)而排除個體接受潛在的救命治療。
可以通過任何合適方法來施用本發(fā)明的組合物，諸如通過靜脈內(nèi)輸注、皮下、肌肉內(nèi)注射、口服制劑、腹膜內(nèi)和靜脈內(nèi)施用。正確劑量將根據(jù)具體配方、應(yīng)用模式、以及所治療的具體部位、宿主和狀況而變化。應(yīng)當(dāng)考慮其它因素，像年齡、體重、性別、飲食、施用時間、排泄速率、宿主狀況、藥物組合、反應(yīng)敏感性和疾病嚴(yán)重性?？梢栽谧畲竽褪軇┝績?nèi)連續(xù)或定期進行施用。
與常常需要患者在剩余患者生命里每天服藥的現(xiàn)有藥物不同，典型治療依靠醫(yī)生每周或每月施用的簡單注射。普通治療程序歷時三個月的時間，后續(xù)程序預(yù)期在六個月、十二個月和兩年或者必要時即病毒再次出現(xiàn)時。
本發(fā)明的組合物可以與其它藥物一起使用以提供聯(lián)合療法。其它藥物可以是同一組合物的一部分，或者作為同一時間施用的分開組合物。
本發(fā)明還延伸至包含用于保護非山羊物種的試劑的保護性組合物的生產(chǎn)方法，該方法包括用非山羊抗原(如病毒或外來蛋白質(zhì))免疫山羊，并純化由經(jīng)過抗原攻擊的山羊生成的血清提取物。然后，試劑可用于保護非山羊動物免于用作免疫原的抗原的危害。
本發(fā)明還涉及包含經(jīng)過人HIV病毒攻擊的山羊的血清提取物的組合物在藥物中的用途，以及包含經(jīng)過人HIV病毒攻擊的山羊的抗體總集的組合物在藥物制備中的用途。
優(yōu)選的是，本發(fā)明的組合物經(jīng)過下列一項或所有的處理用45％硫酸銨沉淀、于-70℃冷凍24小時或微量過濾。
一方面，產(chǎn)品優(yōu)選得自針對狂犬病接種的山羊。
在一種變化中，本發(fā)明延伸至由馬、綿羊和其它合適動物生成的產(chǎn)品。產(chǎn)品可以是以與山羊產(chǎn)品相似的方式得到的，而且可以任選評估抗HLA和/或抗FAS活性。在另一種變化中，不需要使用HIV病毒作為免疫原來生成產(chǎn)品，而是采用人白細胞或人衍生細胞系膜抗原作為免疫原來生成有效的抗體制劑。另外，我們設(shè)想可以用免疫原取代抗體，即治療性組合物可以包含HIV物質(zhì)或白細胞。
在還有一種變化中，熱滅活后，已經(jīng)用于培養(yǎng)病毒培養(yǎng)物的上清液或者能夠但是尚未用于培養(yǎng)病毒培養(yǎng)物的上清液也可用作將引起合適應(yīng)答的免疫原。適合于體外培養(yǎng)HIV或另一種病毒的任何上清液或其它培養(yǎng)基可用于生成將引起有效應(yīng)答的可接受免疫原。給出了細胞培養(yǎng)物培養(yǎng)基諸如用于培養(yǎng)HIV 111b的PMBC或癌癥無限增殖細胞系的上清液作為實例。并不需要HIV或其它選定病毒的存在來生成有效免疫原進而生成制劑。
不受任何理論的約束，我們認為抗HLA活性的存在是本發(fā)明產(chǎn)品的重要組成。優(yōu)選的是，本發(fā)明產(chǎn)品中的任何抗體是識別II型HLA抗原全集和gp120抗原或者識別FAS的多克隆抗體。我們的發(fā)現(xiàn)說明具有II型HLA抗原是優(yōu)選的。盡管我們偏愛抗HLA活性，然而我們并不排除存在其它活性分子的可能性。在這個方面，本發(fā)明的組合物因而可以包含額外的生物活性化合物。我們早已證明口服施用給出與注射類似的效果。IgG不能由口進入血流，這使得人們相信IgG可能不是唯一的活性成分。
可以通過采用選擇的抗原(優(yōu)選抗原混合物)作為免疫原來生成合適產(chǎn)品。有可能的是，使用一定范圍的不同抗原產(chǎn)生識別抗原一般結(jié)構(gòu)的抗體，在患者體內(nèi)引起較強應(yīng)答。我們假設(shè)選擇的HIV分離群將提供具有較小結(jié)構(gòu)變化的表位并導(dǎo)致全抗體。
由此，為了生成血清，我們優(yōu)選采用主要在PBMC中生成的不同HIV病毒混合物，而非單獨使用T細胞?；旌衔镞m當(dāng)?shù)陌@些病毒的2種、3種、4種、5種、6種、或更多。病毒優(yōu)選是裂解物的形式，因為裂解物不具有感染性，且用于將免疫系統(tǒng)暴露于內(nèi)在蛋白質(zhì)。優(yōu)選裂解物的實例包括下列HIV-1分離群91US056、92HT593、92US723、92US657、92US660、和92US714。優(yōu)選的是，混合物包含這些具體分離群的至少1種、2種、3種、4種、5種、或所有6種。
由此，可以采用類似細胞的混合物(多種PBMC供體、多種T細胞供體、多種激活的神經(jīng)細胞供體)。期望多種細胞來源能夠擴寬細胞蛋白質(zhì)的范圍。這一擴寬可能有助于縮小人們對具有不同類型HLA的患者可能期望的改善的差異等。
細胞蛋白質(zhì)通常是活性免疫原的一部分，諸如但不限于FAS、IP10、NGFp75。
除了H9和PBMC以外，我們關(guān)注不同細胞系和種類作為免疫原來源的用途。可以使用可能在顯著更高水平表達其它蛋白質(zhì)或類似蛋白質(zhì)從而改變產(chǎn)品相對強度的其它細胞類型。針對這些不同蛋白質(zhì)的抗體將通過類似的基礎(chǔ)調(diào)控機制發(fā)揮作用。最后，我們可以使用這種方法來改善通過使用激活的神經(jīng)細胞的MS或神經(jīng)生長產(chǎn)物。這種程序能夠生成抑制可能集中于神經(jīng)應(yīng)力和損傷途徑的抗體，大大優(yōu)于我們目前使用的H9系。對于骨退化疾病類似考慮施用激活的骨細胞。
細胞激活，例如使用伴刀豆球蛋白A，具有優(yōu)勢，例如可以使用ConA來實現(xiàn)較高水平的抗多巴胺活性。SHULA(未激活的)并未使抗多巴胺R水平在O.D.基線以上顯著上升[其中SHULA是S氏人白細胞抗原的首字母縮寫詞。認為它是未激活的。激活的細胞經(jīng)過刺激而生成蛋白質(zhì)。盡管是未激活的，用SHULA的針對所檢驗細胞標(biāo)記的抗體與用HIV3B病毒裂解物以及單獨使用的H9細胞即用于培養(yǎng)HIV3B的細胞系顯著相似]。同時，HIV3B(12只山羊和兔的的平均值)如此。混合物中由ConA激活的PBMC細胞之間的多巴胺R水平也有上升。
更一般的是，本發(fā)明可以采用未激活的細胞蛋白質(zhì)。在未激活和激活的細胞二者中都發(fā)現(xiàn)了用于生成目的抗體的一些未知蛋白質(zhì)(但是極有可能是不同水平)。這種效果的實例是用SHULA血清發(fā)現(xiàn)的FAS數(shù)量。對于激活的細胞，可以采用不同的激活方法。
在還有一種變化中，適合于體外培養(yǎng)HIV病毒但不限于HIV的上清液將為如為了培養(yǎng)HIV111b在實施例中所用的PBMC或其它介質(zhì)如無限增殖細胞系的形式，利用其自身而不導(dǎo)入病毒(若以所用普通方式進行熱滅活，則不應(yīng)當(dāng)存在HIV病毒)就生成有效的抗體制劑。
還可以使用包含下列各項的蛋白質(zhì)來獲得這些制劑由HIV裂解物分離的肽、合成肽、合成寡核苷酸、細菌融合蛋白、以及來自包含或模擬期望細胞培養(yǎng)物或其它上清液碎片的系統(tǒng)發(fā)生學(xué)無關(guān)來源的蛋白質(zhì)/肽?？梢垣@得并測試針對裂解物的抗體。
更一般的說，似乎可以使用起源于人的細胞(或蛋白質(zhì)混合物)作為免疫原來獲得有效抗體。然后在宿主物種中生成來自這些人細胞的抗體，并將最終的抗體產(chǎn)品用回于人。蛋白質(zhì)混合物可以在最初供體與受體之間具有極端相似同源性。這種同源性容許例如猿神經(jīng)起源的蛋白質(zhì)或細胞能夠用于人的概念。感興趣的是來自密切相關(guān)動物的高度保守蛋白質(zhì)混合物。
還希望捐獻最初細胞的個體的HLA類型與受體的HLA類型之間將存在相關(guān)性。這種相關(guān)性可以解釋已經(jīng)看到的一些可變性，而且可以在選擇與患者匹配的制劑時予以考慮。
另外，我們關(guān)注使用來自不同身體部位的激活的或癌細胞系，包括來自神經(jīng)胚細胞瘤、胰腺癌、前列腺和鱗狀上皮細胞癌的細胞系?？梢灶A(yù)言在這些不同細胞類型之間生成的抗體之間的微妙差異產(chǎn)生極其不同的特征，而且在很廣泛的意義上可能有助于靶向某些器官系統(tǒng)。
一些證據(jù)表明給予山羊的狂犬病疫苗可能對觀察到的治療效果負責(zé)。我們篩選了在威爾士得到的山羊的血清，包括3份不同血清(正常血清)和沒有發(fā)現(xiàn)狂犬病或其它預(yù)防性疫苗的供體小山羊的血清的集合。這些動物不含活性抗體。
在還有一種變化中，我們關(guān)注細胞體外增殖過程中脫落的細胞膜成分可能提供抗原從而引起山羊或其它物種中的抗體應(yīng)答。這可能發(fā)生于缺乏病毒感染時。
不受我們現(xiàn)有理論的約束，似乎本發(fā)明的抗體承擔(dān)了依靠這種免疫應(yīng)答來遏制HIV或其它狀況所需要的類型的細胞增殖作用。由此，例如，本發(fā)明在多種硬化癥的治療中找到了應(yīng)用。
由PCT/GB02/03037了解到來自山羊血清的抗體的抗HLA和抗FAS活性可能很重要，評估一定范圍的這種山羊血清的大概效用可能是合適的。一種簡單測定法能夠評估抗HLA和/或抗FAS活性的存在，并能夠鑒定適合施用于患者的候選血清。
依照本發(fā)明，提供了制備血清的方法，尤其是山羊血清，包括對動物施用一種或多種、優(yōu)選至少幾種HIV分離群，使其發(fā)生免疫應(yīng)答，由動物取血，監(jiān)測抗HLA抗體和/或抗FAS抗體的存在，并制備適合于治療人類的抗HLA和/或抗FAS血清。
通常，將采用多種動物，而且可以對動物評估哪些產(chǎn)生有效血清的產(chǎn)量較佳。然后可以飼養(yǎng)這些較佳動物以提供尤其適合于本發(fā)明的動物世系。
與緩和(palliative)治療一樣，本發(fā)明的抗體產(chǎn)品可用于治療具有炎癥成分的疾病，不僅包括HIV，還有糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)炎、多發(fā)性骨髓瘤、結(jié)腸直腸癌、等。
我們已經(jīng)研究了用不同病毒/細胞制劑免疫的不同山羊的血清，而且可以顯示經(jīng)過混合物注射的山羊產(chǎn)生免疫應(yīng)答且它識別許多隱藏即沉默的HIV包膜部分，這可能是很重要的。
另外，本發(fā)明還提供了使用這些產(chǎn)品來治療疾病的方法。
本發(fā)明的一種方法用于治療疾病，包括多發(fā)性硬化癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、糖尿病、原發(fā)性膽管chirrosis、chirrosis自身免疫、以及涉及心、肺、皮膚、胃腸道、腎、腦、CNS的病毒性b和c自身免疫疾病。更一般的說，可以通過本發(fā)明治療的疾病包括HIV、炎性疾病、自身免疫病、軸突或神經(jīng)損傷或相關(guān)損傷、或者癌癥和具有炎癥成分的其它疾病或狀況。
血清似乎特別適合于與可能分泌損傷信使諸如細胞因子和趨化因子的慢性激活的細胞有關(guān)的疾病。這些疾病包括多發(fā)性硬化癥、所有形式的神經(jīng)系統(tǒng)慢性炎性狀況和慢性感染諸如病毒、細菌、以及與慢性炎性損傷有關(guān)的局部癌癥(tropical cancer)，特別是，肺、胰、肝、腸、淋巴結(jié)、皮膚尤其是鱗狀上皮細胞和基底細胞癌中的那些可能也有益于腦和脊髓的原發(fā)性和繼發(fā)性腫瘤。
在神經(jīng)受到外傷損傷的個體中觀察到的神經(jīng)功能改善說明了神經(jīng)元生長因子特性，并因而可用于損傷、感染后損傷如急性熱病性多神經(jīng)炎、惡性損傷等、與糖尿病有關(guān)的神經(jīng)病、酒精中毒、金屬或其它毒素中毒、等。
血清具有降低繼發(fā)性癌癥活性的報告說明了直接的抗癌活性。
在本發(fā)明的一個具體方面，采用本發(fā)明的組合物既為患者的狀況提供緩和的改善又治療疾病諸如多發(fā)性硬化癥。
除了在接受治療后一小時內(nèi)報告的情緒升高以外，在許多MS患者中看到的恢復(fù)同樣促使我們在CNS中尋找針對受體的活性，它可能涉及神經(jīng)刺激和可能的再生。我們對多種血清篩選了針對許多抗原的活性，并且找到了針對多巴胺受體、血清素受體、神經(jīng)生長因子受體p75、和趨化因子CXCL10(IP10)的活性。
因此，本發(fā)明延伸至針對多巴胺受體、血清素受體、神經(jīng)生長因子受體p75、和趨化因子CXCL10(IP10)的一種或多種的抗體。這些抗體活性的一種或多種可能單獨存在，或者與抗HLA和/或抗FAS活性聯(lián)合存在。
抗FAS和/或抗HLA抗體連同針對多巴胺受體、血清素受體、神經(jīng)生長因子受體p75、或趨化因子CXCL10的一種或多種的抗體的聯(lián)合可能是重要的，由此測定可以針對多種抗體活性以確定它們在產(chǎn)品中的存在。
本發(fā)明還提供了包含針對多巴胺受體、血清素受體、神經(jīng)生長因子受體p75、或趨化因子CXCL10的一種或多種的抗體的組合物，通常還含有抗FAS抗體和/或抗HLA抗體，以及使用這些組合物的治療方法。
這種血清中的抗2型多克隆抗體不僅直接而且還間接發(fā)生作用。通過直接方式，它們將阻斷導(dǎo)致自身免疫性、炎性破壞性過程的不合適的肽呈遞。
另一種機制是通過結(jié)合通常表達2型的細胞上的2型，這可能誘導(dǎo)細胞凋亡的死亡。這與經(jīng)由fas L網(wǎng)絡(luò)誘導(dǎo)的途徑屬于相同類型。
已經(jīng)報道了細胞是如何死亡的，即凋亡或壞死對于針對細胞上抗原的免疫應(yīng)答是極其重要的。在MS中，由細胞介導(dǎo)的免疫似乎優(yōu)于體液免疫，而且認為致力于推動體液或TH2型免疫應(yīng)答的治療在多發(fā)性硬化癥中是理想的。在少數(shù)患者中，我們在施用血清之前和之后檢查了這種活性，它們確實轉(zhuǎn)向了期望的免疫應(yīng)答。期望的免疫應(yīng)答包括誘導(dǎo)的細胞因子IL4、IL6、IL10。
最近的動物資料說明，可以使用作為TH2體液途徑一部分的IL6家族的細胞因子誘導(dǎo)髓鞘再生來改善MS動物模型。
出現(xiàn)了下列觀點
1.形勢強烈要求宣稱2型MHC多克隆抗體的抑制可能能夠在上文所述鎖定自身肽的適當(dāng)呈遞并因而阻斷導(dǎo)致脫髓鞘的旁分泌驅(qū)動的個體中誘導(dǎo)超過一種活性。(旁分泌集合由以損傷為生的其它細胞誘導(dǎo)應(yīng)答)。
2.附著于2型，并且或是直接或是通過誘導(dǎo)由抗體指導(dǎo)的細胞毒性(這有多種機制)來誘導(dǎo)細胞凋亡。
3.通過以這種方式(即由抗原呈遞細胞攝取并呈遞給免疫系統(tǒng))引起發(fā)炎細胞的細胞死亡，使得它將免疫偏愛轉(zhuǎn)向TH2應(yīng)答，其包括誘導(dǎo)IL6應(yīng)答，導(dǎo)致脫髓鞘斑塊(這是MS病的特點)的髓鞘再生。4。2型誘導(dǎo)具有不適當(dāng)2型的細胞系凋亡的能力意味著可以對過度表達2型MAC的那些稀有腫瘤類型誘導(dǎo)這種治療。最近已經(jīng)顯示了針對這些細胞系的抗體將誘導(dǎo)凋亡。我們已注意到在我們的一些細胞系中凋亡增加。
4.幾種淋巴瘤和晚期骨髓瘤表達高水平的2型HLA。因此，對于這些腫瘤而言，多克隆血清可能是比正在開發(fā)的單克隆療法更好的治療。幾份最近的發(fā)表物著重于細胞因子在MS中驅(qū)動損傷的作用。這包括IL1和β-TGF，后者證實增加在MS斑中高水平出現(xiàn)的稱為鋸齒狀1的分子，并下調(diào)髓鞘再生損傷。2.還有可觀的證據(jù)表明炎癥細胞展示對凋亡的抵抗力，BCL2和aflip蛋白質(zhì)表達較高，而且這些不受β-干擾素治療的影響。誘導(dǎo)凋亡途徑以防止保護性BCL2途徑可能是血清活性的重要組成要素。
5.最近另一種途徑由于具有潛在重要性而已經(jīng)得到更多的認可，即宣揚NHC分子(人的HLA)在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育中的作用。首先似乎違抗免疫學(xué)和神經(jīng)學(xué)定理的這一工作顯示了腦組織中存在的MHC分子是怎樣確定腦組織如何與其環(huán)境相互作用并調(diào)控神經(jīng)發(fā)育尤其是眼的。不適當(dāng)?shù)腍LA表達在鎖定后可能解釋了在持續(xù)幾年尚存視覺損傷后視覺得到改善的這些患者中的一些中看到的快速重組和髓鞘再生。
6.這些觀察結(jié)果包括那些先前對非特異HIV所進行的觀察，而且可用于任何慢性感染性疾病的治療。這有可能是慢性炎癥過程的下調(diào)。
7.在施用血清后已注意到嚴(yán)重痛風(fēng)的顯著改善。這些患者的大多數(shù)注意到了健康的顯著改善和能量水平的上升。
8.兩名帕金森病患者的改善。這可能歸功于必需傳輸因子的誘導(dǎo)，或者也可能歸功于它對驅(qū)動疾病的某一試劑的抗炎癥效果(假設(shè)是慢性helicobater感染)。
9.對具有carototic損傷的患者有顯著效果，而且早期鱗狀細胞癌和基底細胞癌二者都在這種治療中得到了解決。不進行積極治療這是絕不可能發(fā)生的。因此直接或間接通過誘導(dǎo)多種細胞因子/趨化因子得知血清作用，導(dǎo)致凋亡的誘導(dǎo)和這些皮膚損傷的解決。
10.神經(jīng)生長因子髓鞘再生因子的誘導(dǎo)在其自身權(quán)利中是重要的，因為兩名患者的神經(jīng)切斷外傷的再生與他們的MS無關(guān)。這在科學(xué)上再次屬于上文所述生長因子包括IL6的直接活性或間接誘導(dǎo)。盡管有可能通過對施用含抗DR抗體的山羊血清的直接或間接應(yīng)答來解釋上述許多特征(而且DR方面有可能是極其重要的，一般與其它2型相反，它們抑制下一個淋巴細胞應(yīng)答，而難以置信的是在接種山羊血清的山羊中較好，同時其它抗2型抗體應(yīng)答近乎無效)。
除了其它抗體和先前提及的已知抗炎癥靶目標(biāo)，包括fassil和Icam，還有可能存在另一種很重要的試劑。
有利效果很可能是由分子或通過接種疫苗過程而誘導(dǎo)的抗體引起的。
所有患者在第一次注射后15分鐘內(nèi)都經(jīng)歷了極好感覺的事實使得必然存在一些這種抗體的事實變得更加可能。這使得厭食的個體突然渴望強大的胃口，而且這種功能因此可用于厭食和cocexic的癌癥患者。
MS損傷的主要特點是神經(jīng)元細胞包括星形膠質(zhì)細胞上HLA-DR的不當(dāng)表達(Traugott和Lebon，J.Neurol，1988年4月，84 257；Microglia，J.NeurolScience，1987年8月，80 25-37)。認為這種不當(dāng)表達將自身神經(jīng)元抗原呈遞給免疫系統(tǒng)，還擔(dān)當(dāng)了靶目標(biāo)。表達不當(dāng)II型的細胞與典型的、正在進行的炎癥應(yīng)答有關(guān)。眾所周知抗炎癥治療本身顯著改善復(fù)發(fā)緩和型MS。最近，已經(jīng)顯示由此生成的炎癥產(chǎn)物諸如細胞因子和趨化因子可能負責(zé)神經(jīng)元損傷，特別是脫髓鞘。在最新的慢性脫髓鞘病小鼠病毒模型中，顯示趨化因子CXCL10的中和降低炎癥細胞侵入脫髓鞘，事實上改善了神經(jīng)學(xué)功能。模型顯示了對正在進行的脫髓鞘的顯著遏制，這與改善的神經(jīng)學(xué)功能有關(guān)。這與顯著的髓鞘再生有關(guān)。因此在這兩種經(jīng)典實驗室模型中的這些觀察結(jié)果以及我們自己的觀察結(jié)果說明，在多發(fā)性硬化癥中看到的損傷可能不像繼發(fā)性進行性MS的臨床特征那樣是急性的且永久的，而且慢性炎癥狀態(tài)與神經(jīng)學(xué)系統(tǒng)短路類似，與永久損傷相反，至少在早期是這樣。
炎癥級聯(lián)反應(yīng)與高γ-干擾素水平有關(guān)，認為它導(dǎo)致神經(jīng)學(xué)組織上II型HLA的不當(dāng)上調(diào)，以及導(dǎo)致多種細胞因子和趨化因子作用的顯著炎癥應(yīng)答。對于這種血清的進一步研究顯示它具有針對至少3種不同炎癥途徑的活性。此外，至今接受過治療且能夠在治療之前和之后提供血清的所有患者顯示γ-干擾素降低且TH2細胞因子產(chǎn)生增加，這是理想的免疫療法的期望免疫學(xué)效果。
需要考慮還有一種途徑，即通過觸發(fā)某些APC群表面的某些II型HLA分子和相關(guān)復(fù)合物引起的下游免疫調(diào)控效果。由此，除了凋亡清除對APC的物理損失，事實上我們可以觸發(fā)抗炎癥細胞因子以及再生生長和修復(fù)因子。
山羊有可能在感染了這種欺騙性危害物(HIV)后改變其表型的人淋巴瘤細胞系表面上生成因子。事實上，除了在山羊中誘導(dǎo)針對人淋巴瘤細胞上的每種外來物的異種應(yīng)答以外，這些細胞還應(yīng)答于這些細胞中HIV的存在而上調(diào)了某些分子(危險樣配體)。
我們非常成功的治療了具有視覺問題的患者，它們的發(fā)生是與多發(fā)性硬化癥有關(guān)的一般衰弱問題的一部分。并非所有患者都有這種問題，但是在有問題的患者中，它通常在幾天內(nèi)消失，(即)他們恢復(fù)了視力。
同類視覺問題還發(fā)生于不具有MS的患者中。
在神經(jīng)科學(xué)學(xué)會第32屆年會關(guān)于組織相容性如何建立腦研究員的公開演講中，Carla Shatz不僅描述了視覺系統(tǒng)是如何建立的，她還討論了她的最新發(fā)現(xiàn)在免疫識別中最詳細了解的分子參與建立神經(jīng)連接系統(tǒng)。
許多科學(xué)家把大腦中的神經(jīng)連接比作電腦中的它們的電對應(yīng)物。但是，在哈佛醫(yī)學(xué)院專門研究哺乳動物視覺系統(tǒng)發(fā)育的Shatz顯示，哺乳動物大腦中的連接的柔韌性比電腦芯片中的硬連線聯(lián)系要大得多。
在眼發(fā)育過程中，信號由視網(wǎng)膜傳遞給外側(cè)膝狀體核(LGN)，然后繼續(xù)傳遞給大腦的視皮層，其中信息得到加工。最初，來自一只眼的連接與來自另一只眼的連接在LGN中和在皮層上隨機混合。但是在發(fā)育早期——甚至在眼睜開或發(fā)揮功能之前——鄰組的視網(wǎng)膜神經(jīng)元就在腦電波中啟動了，無需任何輸入信號。來自相鄰視網(wǎng)膜神經(jīng)元的這些自發(fā)脈沖波似乎增強LGN和皮層中的一些連接，同時削弱另一些連接。
最后的結(jié)果是，來自一只眼的信號以分層模式與來自另一只眼的輸入一起散布。就像斑馬的黑色和白色條紋，在成熟大腦中，來自每種眼的輸入的條紋并列而非混合Shatz小組先前已經(jīng)顯示，如果他們阻斷由視網(wǎng)膜發(fā)往LGN的自發(fā)脈沖，那么就不能形成正常成年人的整齊分層模式，而保留不成熟的混合模式。由此，研究人員得出結(jié)論，成熟模式是一些連接削弱同時其它連接增強的結(jié)果。但是參與這個過程的確實分子在很大程度上仍然是未知的。
現(xiàn)在，Shatz及其同事令人驚訝的發(fā)現(xiàn)I型主要組織相容性復(fù)合物(MHCI)中的蛋白質(zhì)直接參與該過程。先前，認為MHC分子在免疫系統(tǒng)的唯一范圍內(nèi)，其中它們負責(zé)將外來抗原呈遞給E細胞并誘導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答。但是，當(dāng)Shatz小組使用微陣來比較來自具有來自視網(wǎng)膜的正常輸入的LGN神經(jīng)元的mRNA與連接被阻斷的LGN神經(jīng)元的mRNA時，他們發(fā)現(xiàn)MHCI RNA只存在于正常LGN中。
Shatz小組還有光顯微鏡數(shù)據(jù)，指出MHCI蛋白質(zhì)存在于發(fā)育中的大腦和成熟大腦二者幾個區(qū)域的突觸中。
她目前的假設(shè)是，MHCI蛋白質(zhì)是容許破壞不當(dāng)早期連接的“抗膠粘劑”。她提出，設(shè)想MHCI蛋白質(zhì)位于突觸后神經(jīng)元的膜上，并與突觸前神經(jīng)元上的蛋白質(zhì)復(fù)合物相互作用。Shatz推測，相互作用啟動了信號級聯(lián)反應(yīng)，從而以某種方式降低了連接的強度，最終導(dǎo)致了它的完全消除。
實施例緩和治療通過施用組合物，我們已注意到患者的健康狀態(tài)有了以下改善1.皮膚皮膚更健康；具有較為年輕的外觀；更加年輕；皮膚附屬物消失；傷口愈合更快(包括對牙齦的堵漏操作(dental work))；絲狀靜脈消失；看上去血管循環(huán)有所改善(可能是haemeroids減輕了)。
2.指甲生長手指甲和腳趾甲生長得更快速且更牢固。
3.毛發(fā)生長得更快；毛發(fā)更柔軟且有光澤；頭發(fā)更密；可能是原來脫發(fā)部位有一些再生。
4.肌肉健康狀況大體有所改善；發(fā)現(xiàn)背痛有所減輕。
5.記憶和協(xié)調(diào)大體有所改善。
6.保持良好狀態(tài)(well being)明顯感到保持良好狀態(tài)；能量水平增加；注意到抗抑郁效果。
7.食欲顯著增加。
8.性活動對于兩性來說都增強了性欲。對于男性恢復(fù)了勃起功能；精液增多。對于女性提高了濕潤程度。
由此，在一個優(yōu)選方面，本發(fā)明提供了改善因素(1)至(8)的一項或多項的方法。
疾病的治療患者(自我進行治療的和/或在其醫(yī)生監(jiān)督下進行治療的和/或在海外進行治療的)通過皮下注射采取治療。括弧內(nèi)所顯示的是患者數(shù)目。
他們所患病征以及對他們進行的觀察如下1.癌癥及生長(8/9)對于晚期患者，壽命比其醫(yī)院或醫(yī)生的預(yù)測有所延長。
黑素瘤和某些其它前期皮膚癌消失。
皮脂和其它囊腫消失。
子宮肌瘤縮小(女性)。
患者AAA(男性)?；己戆?其影響之一是妨礙講話)的皇家海軍前PT教員。現(xiàn)已痊愈。他已重新開始了比他在海軍時更積極的日常健身活動(特別是長椅俯臥撐)。
患者BBB(女性)?；甲訉m息肉?，F(xiàn)已痊愈。
患者CCC(男性)。侵蝕性潰瘍/滲漏疼痛?，F(xiàn)已痊愈。
2.AIDS/HIV(100+)保持健康水平。無繼發(fā)性感染(感冒、鵝口瘡等)。
3.多發(fā)性硬化癥(30)這是觀察最嚴(yán)密的一組，而且除了AIDS/HIV患者之外，這組數(shù)目最大。所有人都感到上文(A)中所列舉的癥狀有所改善。靈活性增加、協(xié)調(diào)性增強、且“自我照顧”的能力提高，同時減少了對輔助護理的依賴。
病情惡化導(dǎo)致膀胱功能及腸道蠕動削弱的患者報告其膀胱和腸道的正常功能有了顯著恢復(fù)。
4.運動神經(jīng)元疾病/ALS/肌肉萎縮癥(1)靈活性和協(xié)調(diào)性提高。
5.痛風(fēng)(1-3)有一名主要患者，但另外兩名因其它病征而接受治療的患者也報告了他們先前的間歇性痛風(fēng)發(fā)作有所改善。
6.帕金森氏病(3)協(xié)調(diào)性增加。
7.類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和其它骨/關(guān)節(jié)疾病(1)患者報告類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎沒有復(fù)發(fā)且沒有發(fā)炎。
在其他患者中有證據(jù)顯示骨關(guān)節(jié)炎節(jié)點縮小，而且在骨質(zhì)疏松癥的病例中骨密度增加。
8.骨和神經(jīng)的再生長(2)來自兩名患者的觀察證據(jù)似乎暗示有一些再生長、修復(fù)、或部分再連接。
Lamenectomy患者DDD。脊椎第一節(jié)嚴(yán)重受損。曾經(jīng)行走需要拐杖且登機需要輪椅。有疼痛且活動受限制?，F(xiàn)在可以活動且無疼痛。
患MS的患者EEE。已觀察到鼻子和受傷手指恢復(fù)了“知覺”。
第三名患者的狹窄癥得到減輕。
9.視力/神經(jīng)連接系統(tǒng)治療似乎對兩名患者的白內(nèi)障清除有效。患視網(wǎng)膜萎縮癥的許多MS患者的視力有了顯著恢復(fù)，所述視力或者衰退(failing)，或者，在一名患者中，已經(jīng)失明多年。
10.糖尿病患2型糖尿病患者報告他們的血糖水平已經(jīng)恢復(fù)正常。
11.發(fā)炎的緩解治療似乎減輕許多發(fā)炎狀況。這是對上文所述廣泛狀況以及下文所述特定疾病的共同觀察結(jié)果。對于哮喘(肺組織發(fā)炎)沒有收集數(shù)據(jù)，但是一名患者可能正顯示這種癥狀有一些減輕。許多大量吸煙的煙民也可能感到呼吸更輕松了。
非人類動物的治療尚無治療動物的方案。然而，四名患者已對年老病弱的寵物提供口服治療。這四只寵物都報告與在人中觀察到的相同的狀況改善。
1號病例狗。約11歲。病征癌癥/疼痛結(jié)果疼痛減輕；壽命有所延長。
2號病例狗。約15歲。病征關(guān)節(jié)炎性關(guān)節(jié)；嚴(yán)重損害行走。
結(jié)果靈活性大大增加。氣喘減少(是疼痛的一個征兆)。
3號病例狗。年齡未知。病征關(guān)節(jié)炎性關(guān)節(jié)；疼痛結(jié)果靈活性大大提高。
4號病例貓。約17歲。病征身體消瘦；脫毛。
結(jié)果毛發(fā)質(zhì)量和食欲都恢復(fù)了。
患者評論的實例患者ZZ在患上MS癥27年后，今年11月我感到在遙遠的將來也許存在治愈的可能性，但我有生之年也許是看不到了。我正在考慮自己也許會看到治愈的可能性，但只是象針對脊髓灰質(zhì)炎等病征一樣給一些新生嬰兒接種疫苗，無論如何，那是我的一種感覺。去年十月份當(dāng)一些朋友打電話告訴我他們能給我提供這一治療方案時，我被震動了，我想我的祈禱已經(jīng)得到了回答。
在進行第一次真正注射后我有了令人驚奇的結(jié)果，我的視力在幾分鐘之后開始改善，醫(yī)生和與我一起坐在診療室里的另一個人以及我的丈夫都同樣感到驚奇。
從那以后我變得越來越有力量，行走極好，在房屋四周我不再需要使用拐杖或數(shù)周前醫(yī)院借給我的行走輔助框架。除非長途行走，其它時候我的輪椅就變得多余了。
從那以后我丈夫和我已遭受了那些6次攻擊我們的危險的病毒之一的襲擊，事實上他甚至昏倒，導(dǎo)致頭部撞在電暖爐上，前額留下了嚴(yán)重的擦傷，而我只是不能夠在無幫助的情況下走動。所有這一切都發(fā)生在今年一月，除了有一段時間感到虛弱外，我非常迅速的恢復(fù)了精神。我確實在想如果不是接受了這種治療，我可能會舊病復(fù)發(fā)且非常嚴(yán)重，甚至可能象過去這類事情發(fā)生后那樣被送往醫(yī)院并服用類固醇。
隨著時間的推移我們確實遇到了幾次暫時的病情反復(fù)(a couple ofblips)，但沒有什么是我不能克服的，因為我知道這種治療能在未來帶給我什么后果。我已經(jīng)被邀請與其他正在考慮開始此療法的人通電話，直到現(xiàn)在我仍然與他們保持聯(lián)系，因此我們知道我們怎樣進行治療，且再一次當(dāng)他們遇到病情反復(fù)時我能告訴他們不要擔(dān)心，情況會變好，堅持治療下去。我可以發(fā)誓坦白地說，這項治療給我?guī)Щ亓宋艺J為我已經(jīng)失去了的非凡的生活質(zhì)量，對于我和許多其他人來說它確實是隧道盡頭的亮光變成了真實的，我可以繼續(xù)談關(guān)于它的感受，但一天內(nèi)沒有足夠的時間讓我能就我所知對其進行合理的評價。感謝借用時間來閱讀我這些。
患者YY自從接受藥物，已發(fā)生了小部分但清楚地改善·直到那時已靜止的右眼又轉(zhuǎn)動了·膀胱衰弱已經(jīng)幾乎消失·我感到我具有很多能量，和在一天中疲勞已減少·平衡已變得很好了，但仍不穩(wěn)定·我又可以直立站立，不搖擺·當(dāng)走樓梯時；經(jīng)常上樓，和常常當(dāng)下樓時我又可以使用兩條腿了。
當(dāng)行走時在風(fēng)格方面沒有改善，但在持續(xù)時間方面有了改善，距離緩慢地變長了。
注意我只是短期服用了藥物第一次注射是在11周前進行的。患者XX我自從21/03/02就開始使用新的動物血清了。我已被診斷為患有MS，并且目前僅對我可用的治療是Avonex干擾素β-1a。當(dāng)然干擾素對我的疾病無顯著的效果，其已經(jīng)發(fā)展為步法困難，我的腿僵硬，尿急和尿頻問題和腸蠕動困難。
我從第一次應(yīng)用這種血清，就不用拐杖，現(xiàn)在我很少用到它，尿急尿頻的問題也幾乎消失了，盡管步態(tài)沒有顯著的改進，但總的說來精神變好了，因為我確實感到它對我的癥狀產(chǎn)生了顯著的積極影響。我是用這一系列方式治療這種可怕疾病的堅定信徒，我力勸所有有關(guān)的人注意這一療法的良好的、顯著的療效。
患者WW在2000年12月和2002年之間我由于MS發(fā)作已6次住進醫(yī)院和康復(fù)中心，我的問題是頭昏，失去平衡感，足、腿、手和背刺痛。我的腳、腿、手臂和臉局部麻木，腿僵硬，右側(cè)臉頰和雙眼抽搐。在我的腦子里總有拖的感覺，不能正常行走，有的時候我的行走降低到只能走幾步，沒有精神，而且感到非常沮喪，總是在睡覺，對任何事情都不感興趣——因為我沒有任何積極性去堅持。這些正是我從2000年12月以來遇到的問題。
2002年6月19日我周圍的生活改變了，我第一次接受注射這種血清，從那以后我再也沒有回到從前。刺痛和局部麻木減輕了，我的右腳仍然有刺痛感，但幾乎不再象過去那樣了。我的平衡感好多了，而且目前精力充沛，不再象從前那樣總是睡覺。
我的右瞳孔自從1986年被診斷患了眼神經(jīng)炎后就擴大了，現(xiàn)在它又與左瞳孔大小一樣了。6周前我居然給兒子做了一張床，而且開始在公寓四周做一些小的工作。2周前我上街購物，這是數(shù)月以來的第一次，我在超市里站了將近兩小時，我已經(jīng)快兩年沒有這樣活動過了?，F(xiàn)在我還去游泳，過去由于腿部的虛弱，這是不可能的，我定期約會朋友，雖然我仍然有身體不適的時候，但隨著星期的推移，這樣的次數(shù)是越來越少了。
自從我接受此血清治療后，我又重新獲得了原來的生活、尊嚴(yán)和自我尊重，我的孩子們回到了它們母親的身邊。
我的理療醫(yī)師說我的腿強壯了約15％，而那只是我開始治療的6周后。
患者VV我的年齡是44歲。已婚并有三個很棒的孩子。
三年前我被正式診斷患了多發(fā)性硬化癥。我與大部分此病患者都正式聲稱，對自己癥狀和病情的認識帶來的感覺是，雖然這些癥狀已經(jīng)確實存在相當(dāng)一段時間了，但我們就象傀儡(dumsy)一樣，并且不舒服。
事實上我的癥狀被歸為包括在停經(jīng)期內(nèi)有許多怪異且相當(dāng)稀薄的流血。我不能全責(zé)怪那些本應(yīng)知道有關(guān)此病的信息以及缺乏治療辦法的人。我確實嘗試使用了干擾素(intaferon)，但它對我不起作用。
總之到我已被確診時病情開始發(fā)展。兩年前是我最沮喪的時候。我雙腿痙攣，我拖著我的右腿，并且用我的左手拖著它，因為我的右手不能工作了。我不能抓住或拿到任何東西。我變得愈加無方向感，如果沒有幫助，所有時間都可能跌倒。我的記憶功能不正常，在談話中間會忘詞，感到失敗和困窘。即使是最簡單的事情我也需要被提醒才能想起來，最糟糕的是我已經(jīng)混淆了自己最珍貴的記憶存儲，其中之一就是我孩子們的生日和他們大部分的年紀(jì)。隨后是我的講話，有一段時間我完全不能夠進行適當(dāng)?shù)慕涣鳌?br> 我的食欲減小，而且盡管因為疲憊很需要睡眠卻睡不著，我沒有辦法只能在幾乎整個白天不時上床睡覺，因為痙攣會使我醒來，所以有時會做惡夢，我丈夫在晚上也是如此。
我的視力也開始出問題，過去我從未有過這方面的問題。我的膀胱和腸道活動都受到了很壞的影響。生活有了驚人的改變，但不是朝著好的方向；我變得寂寞并開始過隱遁者的生活，因為試圖從中掙脫出來就象一個惡夢。如果是在公共場合，即餐館、電影院等地方，你需要先掃視要去的目的地來觀察盥洗室在哪，如果在建筑物內(nèi)有臺階需要越過，有多少和什么類型的設(shè)備是為我這樣的人設(shè)置的，相信我，那不會有很多，也是在那瞬間的觀察后我可能不得不取消我的行程，因為我不足以強壯來參加這樣的活動。
生活對于我和我的家庭來說都是不好的，因為他們也是這種可怕疾病的受害者。我不能參加正常的父母孩子的事情，孩子們變得令人擔(dān)心的不健康。我們沒有未來，也不能計劃未來，因為我的情況正在螺旋式的下降。它影響了我的婚姻，而且我開始認識到我可能不應(yīng)該在孩子們周圍，那太受傷害了。同樣的，事實上我不認為自己的情況會變好了，因為得不到任何幫助，面對這種情況，我開始計劃最終死在我所選擇的住宅里，因為我已經(jīng)在生活里完全失去了自我和作出選擇的權(quán)利，疾病完全控制了我，而我最后的唯一選擇是保持自己的尊嚴(yán)。
然后我遇到了這一生活的贈禮，開始了下一段生活旅程，坦白的說當(dāng)我聽說這種療法時就想，好吧，反正我也沒有什么可失去的了，所以我沒有想很久就同意嘗試這種療法。
這是我所做過的最佳決定，我開始接受注射，并且能夠從坐著的椅子上立即而不是搖擺的站起來，過去是不可能的。事實上我基本上是緩慢的坐進或從橫撐中站起來。我被震驚了，并喜極而泣。我繼續(xù)接受注射，每周在我身體里都有新的進展，已經(jīng)失去的一些身體功能得到了恢復(fù)。
現(xiàn)在兩年過去了，我已能很好地行走，我講話正常，協(xié)調(diào)性良好，膀胱和腸道沒有問題，食欲良好，記憶開始回到從前，不管是短期還是長期。我又得到了自己珍藏的記憶，并開始撰寫有關(guān)孩子們過去生活的心智健全的日記。
現(xiàn)在我的持久力和精力都很好。我實際上還需要照顧我的父母，我父親在1年前開始行走不便，母親健康狀況也不是很好，因此我現(xiàn)在需要負責(zé)兩個家庭的家務(wù)，而且還找到時間參加一些志愿者的工作。
我擔(dān)心地想如果這時沒有這種極好的藥物出現(xiàn)，我現(xiàn)在可能會在哪呢，無論如何不能在這里。我和我的家庭已回到了病前的生活。孩子們又得回了他們的母親，我丈夫現(xiàn)在也得回了自己的妻子。我們現(xiàn)在確實可以規(guī)劃未來了，甚至感覺到現(xiàn)在我們就擁有一個良好的未來。在過去的無數(shù)年中我從未夢想過這是可能的，但這的確是，我活著就是證據(jù)。這是生活給我的禮物。
童話故事確實變成了現(xiàn)實，從此以后我們將一直幸福的生活下去?；颊遀U請尋找我只有在使用IgG的模式中注意到的一些觀察結(jié)果。從記錄上看，我曾經(jīng)大部分時間是4周服用2.5mg作為一個循環(huán)。
我能給出的詳細具體信息包括首先而且最重要的是我眼睛下的carototic損傷得到控制。除了科學(xué)上的好奇心外，這是我試用IgG的主要個人原因。在十年中較好的部分時間我都是在暴露于陽光下的戶外環(huán)境中度過的。結(jié)果，多年來我的兩眼下方明顯脫皮并發(fā)紅。面霜和乳液可以緩解這種情況，但皮膚卻總是發(fā)紅的。而現(xiàn)在，我的面部皮膚是柔軟的。身體皮膚也不像每年這個時候應(yīng)該感到的那樣“干燥”。不再像過去那樣每天需要在肩膀上抹乳液。我現(xiàn)在仍然使用乳液涂敷皮膚，但不再像過去的4、5年中那樣有明顯的差異。
在一年多的時間內(nèi)我沒有患過明顯的感冒，盡管我從美國到英國旅行了12次，來往于家和孩子們的學(xué)校之間。這可能只是好運氣而已，或者是由于好的生活條件，但我更希望自己是真正微生物“抵抗”類型。請注意我已經(jīng)多次“僥幸免撞脫險”，但從未受到過直接的攻擊。
在數(shù)月里我不再需要使用以煤焦油為基礎(chǔ)的洗發(fā)劑來控制頭皮屑。過去我是每天都需要用的，尤其是在十月和四月之間。即使使用了基于煤焦油的洗發(fā)劑治療，我仍然在24小時內(nèi)感到頭皮發(fā)癢。今年十一月我正在使用更溫和的洗發(fā)劑。而且，如果我有一天沒有用，我不再會像從前那樣感到“發(fā)癢”。
有更多的前列腺液產(chǎn)生。談到泌尿這一方面，我發(fā)現(xiàn)排尿后“滯留”尿滴更少了。尿流關(guān)閉速度更接近我20-30歲時的情況。而在6-7年前我注意到此關(guān)閉過程慢下來了。
我發(fā)現(xiàn)早晨不再有“僵硬”的感覺。不再需要時間來作“準(zhǔn)備運動”。
較小的具體觀察資料我注意到自己只是看上去更有“活力”和更敏捷。這不像多喝了一兩杯咖啡那樣；而只是看起來我更能集中注意力了。
還有總體上的“保持良好狀態(tài)”的感覺。這與喝醉了不一樣。更像是經(jīng)過“真正”好的晚間睡眠后所感到的那樣。
最后一個我注意到有所改善，但不易進行“之前和之后”比較的方面是我的肌肉健康狀況。我看起來能夠更長時間保持肌肉的健康狀況。例如，在上次去英國旅行期間我沒有在早晨跑步。我通常是每兩個早晨出去跑一次步…這使我的晨跑有10天的延遲。但在回來后第一次跑步時，我并未感到有任何不適，并確實達到了“奔跑者的興奮點”。奔跑者的興奮點應(yīng)在進行至少一次或兩次以上的AM奔跑后才能再達到的。
我的8歲大的博德牧羊犬(牧羊犬)Taran患臀部displasia，現(xiàn)正服用150mg rimadly來緩解臀部的不適感。作為我個人訓(xùn)練的工作用博德牧羊犬，我們相互之間具有比傳統(tǒng)狗/人類關(guān)系更密切的理解。對于我們來說，為了與動物一起工作，相互之間更需要確切知道對方正在想什么。在11月9日周三，它口服了15mg IgG。我可以說它立即“感到”了舒適，當(dāng)時它在我的辦公室椅子邊呆了約一小時，只有稍微不同的表示。三天后，我注意到它在與我們的小狗玩耍時正扭轉(zhuǎn)它的上身并很快的旋轉(zhuǎn)。它也更經(jīng)常在房屋四周跟隨我，而不是躺在熱床墊上。它的面部表情像一條更年輕和“快樂的狗”。
我不能說這種療法確實對它的臀部有明顯的幫助，但看起來對我原來未察覺到它所患的僵硬等癥狀的緩解有幫助。還有就是看上去總體來說感到舒服了。我計劃下周給它再喂食1.5mg此藥物，看我最初的印象是否持續(xù)。
另外的患者一名患漸進性多發(fā)硬化癥已3年的患者自愿試用此血清。簡而言之，在開始治療后，她保持了6個多月的明顯的臨床癥狀改善。在至少另外兩名患者身上也表現(xiàn)出了客觀的好轉(zhuǎn)。當(dāng)同樣的MS患者知道這種好轉(zhuǎn)的效果后他們也要求進行此治療。在治療前他們被建議應(yīng)由神經(jīng)科專門醫(yī)師進行正式的功能性評估，然后在一個月后重復(fù)此評估。數(shù)名這樣的患者在由當(dāng)?shù)蒯t(yī)生診治后同樣證實了他們的好轉(zhuǎn)。
該醫(yī)生報告說，除了一名患者之外，其他患者在此項治療后都有了明顯的臨床好轉(zhuǎn)。大部分這類好轉(zhuǎn)涉及舒適感、精力增強和主觀感覺改善的報告。神經(jīng)科醫(yī)師證實了這些患者中至少有兩名有了明顯的客觀應(yīng)答，這在這組患者中是出乎意料的，而且不能看作是安慰劑的效果。
另外，這組患者已經(jīng)確認了整個缺乏任何血清病或其它顯著副作用，除了皮下注射部位(體積從未超過1ml)的發(fā)紅、發(fā)炎以及有時的發(fā)癢反應(yīng)。
權(quán)利要求
1.一種用于緩和改善人或非人動物狀況的方法，其包括施用含有抗HLA抗體的組合物。
2.一種用于緩和改善人或非人動物狀況的方法，其包括施用獲自HIV攻擊后山羊的血清組合物。
3.依照權(quán)利要求2的方法，其中用HIV裂解物免疫所述山羊。
4.依照任何一項上述權(quán)利要求的方法，它改善了皮膚，指甲，毛發(fā)，肌肉，記憶，協(xié)調(diào)，能量，沮喪，食欲和性活動中的一項或多項。
5.依照任何一項上述權(quán)利要求的方法，其中通過施用所述組合物對所述動物治療一種疾病。
6.依照權(quán)利要求1-4之任一項的方法，其中所述動物并未被治療一種疾病。
7.依照任何一項上述權(quán)利要求的方法，其中多次施用所述組合物。
8.依照權(quán)利要求7的方法，其中至少五次施用所述組合物。
9.依照權(quán)利要求或87的方法，其中施用的時間間隔為一周或一月。
10.一種制備藥物組合物的方法，其包括給山羊注射HIV裂解物混合物，由所述山羊制備血清提取物，并檢查并非抗HIV抗體的一種或多種所選抗體的存在。
11.依照權(quán)利要求10的方法，其中所選抗體選自抗HLA，抗FAS，抗多巴胺受體，抗血清素受體，抗神經(jīng)生長因子受體p75和抗CXCL10。
12.一種用于藥物組合物的方法，其包括給山羊注射HIV裂解物混合物，由所述山羊制備血清提取物，并測試抗HIV中和抗體的缺失。
13.一種用于制備藥物組合物的方法，其包括給山羊注射HIV裂解物混合物，由所述山羊制備血清提取物，并測試緩和動物狀況的活性。
14.一種用于鑒定藥物的方法，其包括給山羊注射HIV裂解物混合物，由所述山羊制備血清提取物，并分離對緩和動物狀況的活性負責(zé)的分子。
15.一種用于鑒定藥物的方法，其包括給山羊注射HIV裂解物混合物，由所述山羊制備血清提取物，并分離對有炎癥成分的疾病治療中的活性負責(zé)的分子。
16.依照權(quán)利要求14或15的方法，其中所述分子選自細胞因子，激素，或其它生物活性山羊分子。
17.一種分子，其通過權(quán)利要求16的方法鑒定。
18.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求16的分子。
19.一種藥物組合物，其包含可以通過給山羊施用HIV和制備所述山羊血清提取物的方法獲得的提取物作為活性成分。
全文摘要
來自用HIV免疫的山羊的血清組合物，其含有抗HLA抗體，而且適合于動物狀況的緩和改善。
文檔編號A61PGK1674936SQ03806785
公開日2005年9月28日 申請日期2003年1月28日 優(yōu)先權(quán)日2002年1月28日
發(fā)明者喬納森·希尼, 安格斯·G·達格利什, 斯坦利·D·T·懷特 申請人:艾姆斯科有限公司