專(zhuān)利名稱(chēng)：緩釋組合物及其制備方法
本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為1998年4月17日，申請(qǐng)?zhí)枮?8805220.2，發(fā)明名稱(chēng)為“緩釋組合物及其制備方法”的中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。
本發(fā)明首先涉及一種呈含有可生物降解聚合物或共聚物型賦形劑或此類(lèi)賦形劑混合物以及至少一種活性物質(zhì)的微囊或植入物形式的組合物，所述賦形劑或賦形劑混合物在氯仿中具有0.5dl/g至1.6dl/g的特性粘度。本發(fā)明還涉及一種呈含有至少一種高分子量的可生物降解聚合物或共聚物以及至少一種具有高比表面的水溶性活性物質(zhì)的微囊或植入物形式的組合物。所述組合物被用于在長(zhǎng)達(dá)三個(gè)月以上的延遲時(shí)間內(nèi)持續(xù)釋放活性物質(zhì)。
上述組合物，特別是微囊，主要用于藥劑學(xué)領(lǐng)域，但是也適用于其他領(lǐng)域，尤其是農(nóng)業(yè)化學(xué)，即植物保護(hù)的領(lǐng)域。
不論是常規(guī)藥物產(chǎn)品如甾類(lèi)、肽類(lèi)或蛋白質(zhì)類(lèi)(參加如Boswell的美國(guó)專(zhuān)利US 3,773,919)，抑或是用于植物保護(hù)的產(chǎn)品，將這些活性成分以緩釋組合物形式施用早已被公認(rèn)為頗具價(jià)值。所述劑型可以采用其中活性成分與可生物降解聚合物或共聚物如聚丙交酯/共聚乙交酯共聚物(PLGA)混合的微粒形式。
業(yè)已發(fā)現(xiàn)，特別是在尋求一種更恒定的在任何情況下均不間斷的釋放模式時(shí)，需要較低分子量，即低粘度的PLGA型聚合物，這種模式是指例如在歐洲專(zhuān)利EP 58 481中稱(chēng)作“單相”的釋放模式。就此可提及歐洲專(zhuān)利EP 21 234、EP 52 510和EP26 599；其中EP 21234可參見(jiàn)其實(shí)施例8.B.2中公開(kāi)的特性粘度為0.5dl/g的聚合物，EP 52 510中對(duì)粘度為0.38dl/g的處于六氟異丙醇(HFIP)中的共聚物進(jìn)行了體內(nèi)試驗(yàn)，和EP26 599公開(kāi)了例如粘度為0.12-0.20dl/g的聚合物并且要求保護(hù)粘度為0.08-0.30dl/g的聚合物。上述專(zhuān)利述及的聚合物被用作能夠產(chǎn)生恒速釋藥的組合物。例如，專(zhuān)利EP26599中含有節(jié)育藥。
在此方面同樣值得注意的是，于本專(zhuān)利申請(qǐng)的申請(qǐng)日，歐洲專(zhuān)利58 481正處于異議程序之中，申請(qǐng)人已將其主權(quán)利要求限定于唯一能夠產(chǎn)生單相型釋放的低粘度(低于0.3或0.5dl/g)聚合物。
此外，當(dāng)需要更長(zhǎng)期(如一個(gè)月以上)釋藥時(shí)，會(huì)出現(xiàn)更復(fù)雜的問(wèn)題，例如專(zhuān)利EPO 302 582中提供了一種解決方案，其中包括將由粘度不同的聚合物構(gòu)成的微囊混合在一起。
近期，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)某些高粘度聚合物適合于制備長(zhǎng)效緩釋組合物。并且還發(fā)現(xiàn)，利用某些聚合物可以生產(chǎn)具有長(zhǎng)時(shí)間單相釋放性能而且不存在無(wú)釋放的起始階段(靜止期)的組合物。具體所采用的聚合物在氯仿中的特性粘度適宜至少為0.5dl/g，并且更優(yōu)選至少為0.6或0.7dl/g。但總之，這些聚合物在氯仿中的特性粘度應(yīng)不超過(guò)1.6dl/g，并且可以低于1.4或1.2dl/g。所述聚合物優(yōu)選為其丙交酯/乙交酯配比在40/60-90/10，優(yōu)選約為75/25的PLGA類(lèi)物質(zhì)。
本發(fā)明的聚合物可以通過(guò)常規(guī)方式制備，具體可通過(guò)打開(kāi)丙交酯或乙交酯的環(huán)系來(lái)制備。在諸如美國(guó)專(zhuān)利US3,773,919中公開(kāi)了此類(lèi)開(kāi)環(huán)方法。
在本發(fā)明中，還可以采用具有不同較高粘度的聚合物的混合物，但優(yōu)選的組合物中只含有一種聚合物或共聚物。
所以，本發(fā)明首先涉及一種微囊或植入物形式的組合物，該組合物含有可生物降解的、在氯仿中的特性粘度為0.5dl/g-1.6dl/g的聚合物或共聚物型賦形劑或此類(lèi)賦形劑混合物以及一種活性物質(zhì)或活性物質(zhì)混合物，這些微囊或植入物可以在至少為1個(gè)月，優(yōu)選至少2個(gè)月，更優(yōu)選至少為3個(gè)月的長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)釋放出活性物質(zhì)或活性物質(zhì)的混合物。
還應(yīng)將所述微囊理解為包括微球、微粒、毫微囊、毫微球或毫微粒。所述聚合物的含義應(yīng)為聚合物、共聚物或這些個(gè)體的任意混合物。最后，應(yīng)將所述活性物質(zhì)的含義理解為活性物質(zhì)、其一種鹽、其一種前體或上述化合物的任意混合物。
適用于本發(fā)明組合物的活性物質(zhì)的鹽可具體包括由有機(jī)酸形成的鹽，如乙酸鹽、蘋(píng)果酸、酒石酸鹽、草酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、硬脂酸鹽、撲酸鹽(1，1’-亞甲基-二(2-羥基-3-萘甲酸)鹽)、甲磺酸鹽或?qū)?甲苯磺酸鹽；由無(wú)機(jī)酸形成的鹽，如鹽酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽或氫溴酸鹽。優(yōu)選采用通過(guò)與例如乙酸以陽(yáng)離子形式發(fā)生成鹽作用獲得的水溶性產(chǎn)物。但是，也可以采用不溶性鹽，例如(1，1’-亞甲基-二(2-羥基-3-萘甲酸)鹽)。
本發(fā)明具體涉及一種含有可生物降解聚合物或共聚物型賦形劑或此類(lèi)賦形劑的混合物以及活性物質(zhì)或活性物質(zhì)混合物的呈微囊或植入物形式的組合物，所述微囊或植入物能夠在長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月或更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)以基本單相的釋放模式釋放活性物質(zhì)或其混合物，所述組合物的特征在于-當(dāng)組合物為微囊形式時(shí)·所述聚合物或共聚物在氯仿中的粘度介于0.7dl/g-1.6dl/g之間，并且該微囊的制備過(guò)程中不包括所述微囊的溶化階段，·或所述聚合物或共聚物在氯仿中的粘度介于0.5dl/g-1.6dl/g，并且所述聚合物或共聚物具有親水特性；-當(dāng)所述組合物為植入物形式時(shí)，所述聚合物或共聚物在氯仿中的粘度為0.5dl/g-1.6dl/g。
適用于本發(fā)明組合物的聚合物或共聚物在氯仿中的粘度優(yōu)選至少等于0.9dl/g。
特別適用于本發(fā)明的聚合物或共聚物尤其可以是聚合物如乳酸、乙醇酸、檸檬酸或蘋(píng)果酸的聚合物，或是其它可生物降解聚合物如聚-β-羥基丁酸、聚原酸酯、聚原碳酸酯、聚-α-氰基丙烯酸酯、聚草酸鏈烷二醇酯如聚草酸丙二醇酯或丁二醇酯、聚氨基酸等。也可以采用共聚物，如PLGA、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸、甲基丙烯酸/丙烯酸共聚物、聚氨基酸、馬來(lái)酸酐共聚物、乙基纖維素、硝基纖維素、乙酰基纖維素等。這些聚合物或共聚物可以單獨(dú)使用也可混合采用。通常，PLGA含有40-90％丙交酯以及10-60％乙交酯。優(yōu)選采用D，L-PLGA，并且更優(yōu)選采用由70-80％DL-丙交酯和20-30％乙交酯制成的D，L-PLGA。特別適用于本發(fā)明的是由75％DL-丙交酯和25％乙交酯合成的PLGA。
另一種特別適用于本發(fā)明的聚合物是由L-丙交酯和乙交酯制成的L-PLGA。與具有相同粘度的D，L-PLGA相比，L-PLGA釋放速度更緩慢并且可以被用作粘度更高的D，L-PLGA的替代物。
從常規(guī)方式來(lái)說(shuō)，適宜采用具有親水特性的聚合物或共聚物。所以，一般優(yōu)選由疏水性起始物如十二烷醇開(kāi)環(huán)制得的PLGA和由親水性起始物如乳酸或乙醇酸開(kāi)環(huán)得到的PLGA。
親水性聚合物或共聚物，是指其中端鏈具備極性(例如端鏈的末端是酸性官能團(tuán))的聚合物或共聚物，這與具有非極性端鏈(例如端鏈為脂肪鏈)的疏水性聚合物或共聚物相反。
酸值對(duì)于聚合物或共聚物的親水性或疏水性來(lái)說(shuō)似乎是最相關(guān)的參數(shù)，所謂酸值是對(duì)1克聚合物中和游離酸度所需的氫氧化鉀毫當(dāng)量數(shù)。由于聚合物或共聚物的端鏈可以帶有游離酸官能團(tuán)，所以，可以依據(jù)單體特性測(cè)定酸值。
本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，通常情況中，親水性聚合物產(chǎn)生一種較好的緩釋曲線(xiàn)。所以，適用于本發(fā)明的聚合物的酸值優(yōu)選至少等于1，更好地至少等于1.2，并且更優(yōu)選至少等于1.5或2。
本發(fā)明所述微囊的活性物質(zhì)含量，即內(nèi)部負(fù)荷，即微囊內(nèi)純凈肽的重量相對(duì)于微囊總重量的比例通常為0-20％，優(yōu)選為2-15％。對(duì)于曲普瑞林乙酸鹽，其可釋藥約3個(gè)月的劑型的負(fù)荷優(yōu)選小于或等于10％，并且更優(yōu)選4-8％。對(duì)于蘭瑞肽乙酸鹽，其負(fù)荷優(yōu)選為10～20％。
在植入物中，活性物質(zhì)負(fù)荷一般為0-30％，并且適宜為15-25％。
包封步驟可以稱(chēng)作凝集，如美國(guó)專(zhuān)利US3 773 919或歐洲專(zhuān)利EP52 510所述。
也可以采用所謂的熔融-擠出法，如歐洲專(zhuān)利EP58 481或美國(guó)專(zhuān)利US5 225 205所述，隨后視具體情況而定以常規(guī)方法研磨所得產(chǎn)物得到微粒。
另一方面，可以采用水溶性活性成分，例如肽的水溶性鹽(如乙酸鹽)。也可以采用可溶性化合物的不溶性鹽，例如肽的脂肪酸鹽(如肽的撲酸鹽)，如同在例如英國(guó)專(zhuān)利GB2 209 937中所述的。
利用本發(fā)明所述聚合物、經(jīng)熔融-擠出法制成的組合物也可以以植入物形式提供并且可被直接投入使用。
適宜采用直徑約為1mm，例如0.8-1.2mm的小植入物(小型植入物或微型植入物)。這些植入物的長(zhǎng)度可在例如10-35mm之間，如約25mm。含有低劑量活性成分例如每個(gè)植入物含有約3mg曲普瑞林乙酸鹽的植入物產(chǎn)生非常好的結(jié)果。此類(lèi)植入物可以在長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月或更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)釋放活性成分。
此外，我們發(fā)現(xiàn)，活性成分的構(gòu)型也會(huì)對(duì)產(chǎn)品的擴(kuò)散產(chǎn)生影響。特別是如果活性成分可以結(jié)晶或無(wú)定形形式得到時(shí)，不能隨意地對(duì)兩種形式進(jìn)行選擇。
專(zhuān)利申請(qǐng)EP709 085中描述了含有聚合物和無(wú)定形水溶性活性物質(zhì)的微囊。其中具體闡述了獲得小顆粒(優(yōu)選粒度小于10m)活性物質(zhì)的重要性。但是，該專(zhuān)利申請(qǐng)沒(méi)有公開(kāi)任何制備這種顆粒的方法，并且未提及活性成分顆粒的比表面對(duì)含有這些顆粒的組合物的釋放性能所產(chǎn)生的影響。如今，本申請(qǐng)人業(yè)已從1986年始采用含有無(wú)定形活性物質(zhì)的微囊，也就是采用含有3.75mg以Decapeptyl商品名銷(xiāo)售的曲普瑞林乙酸鹽的微囊，其粒度只有約8μm。然而，迄今發(fā)現(xiàn)，粒度不是唯一的有利于緩釋藥物長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月以上時(shí)間的決定性參數(shù)。
原則上說(shuō)，對(duì)于例如肽類(lèi)或蛋白質(zhì)類(lèi)的產(chǎn)品而言無(wú)定形特征并不會(huì)產(chǎn)生問(wèn)題，這些產(chǎn)品的制備方法，特別是冷凍干燥法在多數(shù)情況中產(chǎn)生的是無(wú)定形產(chǎn)物，例如Decapeptyl 3.75mg。
在文獻(xiàn)中已對(duì)這種現(xiàn)象作了大量描述，并且特別值得提及的是下列文章Hsu，C.C.等人，《藥物研究》，12(1)，68-77(1995)或Towns，J.K.《色譜學(xué)雜志》，A，705(1)，115-27(1995)。
所以，本發(fā)明還涉及一種微囊或植入物形式的組合物，該組合物含有至少一種優(yōu)選為高分子量的可生物降解聚合物或共聚物以及至少一種高比表面的水溶性活性物質(zhì)。具體來(lái)說(shuō)，所述比表面大于2m2/g，并且優(yōu)選大于3m2/g。更優(yōu)選所述比表面大于5m2/g或10m2/g。特別優(yōu)選所述比表面大于20m2/g，首選大于30m2/g。
本發(fā)明優(yōu)選地涉及其中水溶性活性物質(zhì)是蛋白質(zhì)或肽的上述組合物。
本發(fā)明還涉及其中聚合物或共聚物在氯仿中的粘度為0.5-1.6dl/g，優(yōu)選0.9-1.6dl/g的上述組合物。尤其是應(yīng)選用粘度為0.7-1.3dl/g的聚合物或共聚物，并且更優(yōu)選粘度為0.9-1.3dl/g的聚合物或共聚物。尤其適用的聚合物是PLGA。所述PLGA適宜由40-90％丙交酯和10-60％乙交酯，更優(yōu)選含有70-80％丙交酯和20-30％乙交酯制備。摻混在所述微囊或植入物中的水溶性活性物質(zhì)優(yōu)選是蛋白質(zhì)類(lèi)或肽類(lèi)。
在優(yōu)選的含有高比表面活性物質(zhì)的組合物中，聚合物或共聚物在氯仿中的粘度在0.5-1.6dl/g之間，并且所述聚合物或共聚物具有親水特性，聚合物或共聚物的酸值大于1毫當(dāng)量(meq)KOH/克聚合物或共聚物，優(yōu)選大于1.2meq，更優(yōu)選1.5meq或2meq KOH/克聚合物或共聚物。
本發(fā)明還涉及含有高比表面活性物質(zhì)的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述聚合物或共聚物為PLGA，優(yōu)選由70-80％丙交酯和20-30％乙交酯制成的PLGA，所述PGA在氯仿中的粘度為0.5-1.6dl/g，并且混在微囊或植入物內(nèi)的活性物質(zhì)為蛋白質(zhì)或肽。
與某些采用低分子量聚合物的其它制劑相比，這些微囊或植入物能夠呈現(xiàn)出一個(gè)單相釋放曲線(xiàn)，其中的起始峰(或突起)降低，由此使這些微囊或植入物能夠在長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月或更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)釋放活性物質(zhì)。
換言之，本申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，對(duì)于微囊或植入物形式的組合物，具體如基于PLGA和包括肽或蛋白質(zhì)作為活性成分的組合物來(lái)說(shuō)，其釋放性質(zhì)，特別是單相型釋放作用可以在至少下列特性之一存在的條件下得到顯著改進(jìn)a)所述聚合物或共聚物是PLGA，其在氯仿中的粘度高于0.5dl/g，優(yōu)選高于0.9dl/g且原則上低于1.6dl/g；b)所述聚合物或共聚物是由70-80％丙交酯和20-30％乙交酯制成的PLGA；c)所述聚合物或共聚物具有親水特性，并且其酸值優(yōu)選地大于1meqKOH，更優(yōu)選大于1.2或1.5meq KOH/克聚合物或共聚物；d)所述活性成分，優(yōu)選是肽或蛋白質(zhì)，具有高比表面并且大于2m2/g，優(yōu)選大于10m2/g，更優(yōu)選大于20m2/g或30m2/g。
這些特征可以視具體情況而定與L-PLGA而不是與D，L-PLGA的使用相結(jié)合。
根據(jù)申請(qǐng)人所了解到的實(shí)際情況，申請(qǐng)人估計(jì)特性d)自身非常重要并且可以有利地與其它特性a)、b)或c)相結(jié)合。具體地，特性d)可以與下列特性相結(jié)合單獨(dú)a)、單獨(dú)b)、單獨(dú)c)、a)+b)、a)+c)、b)+c)或a)+b)+c)。更優(yōu)選地，使特性d)與至少特性c)相結(jié)合。
在適合本發(fā)明不同需要的活性物質(zhì)中，特別值得提及的是蛋白質(zhì)類(lèi)和肽類(lèi)。所述活性物質(zhì)可選自曲普瑞林或其鹽，具體如曲普瑞林乙酸鹽；蘭瑞肽或其一種鹽，具體如蘭瑞肽乙酸鹽；奧曲肽或其一種鹽(如歐洲專(zhuān)利EP29 579所述)，具體如奧曲肽乙酸鹽或撲酸鹽；具有LH-RH活性的化合物，如曲普瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林、布舍瑞林或其鹽；LH-RH拮抗劑；GPIIb/IIa拮抗劑；具有與GPIIb/IIa拮抗劑相似活性的化合物；促紅細(xì)胞生成素(EPO)或其類(lèi)似物；不同類(lèi)型的干擾素-α、干擾素-β或-γ；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子衍生物(如歐洲專(zhuān)利EP 215 171中公開(kāi)的)；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子類(lèi)似物(如美國(guó)專(zhuān)利US5 552 520中公開(kāi)的，該專(zhuān)利中還包括了其它公開(kāi)了生長(zhǎng)激素釋放抑制因子類(lèi)似物的專(zhuān)利的目錄，這些文獻(xiàn)均引入本申請(qǐng)作為參考)；胰島素；生長(zhǎng)激素；生長(zhǎng)激素釋放因子(GRF)；生長(zhǎng)激素釋放肽(GHRP)；表皮生長(zhǎng)因子(EGF)；促黑素細(xì)胞素(MSH)；促甲狀腺素釋放激素(TRH)或其鹽或其衍生物；甲狀腺刺激激素(TSH)；促黃體素(LH)；促濾泡素(FSH)；甲狀旁腺素(PTH)或其衍生物；溶菌酶鹽酸鹽；甲狀旁腺素相關(guān)肽(PTHrp)；和人體PTH激素的N-末端肽片段(1→34位)；后葉加壓素或其衍生物；催產(chǎn)素；降鈣素；與降鈣素具有相似活性的降鈣素衍生物；降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)；高血糖素；高血糖素相似肽(GLP)；胃泌素；胃泌素釋放肽(GRP)；腸促胰液肽；促胰酶素；縮膽囊素；血管緊張素；人胎盤(pán)催乳激素；人絨毛膜促性激素(HCG)；腦啡肽；腦啡肽衍生物；集落刺激因子(CSF)；內(nèi)啡肽；京都酚；白介素類(lèi)，例如白介素-2；吞噬細(xì)胞激素；胸腺生成素；胸腺刺激素；胸腺激素因子(THF)；胸腺血清因子(TSF)；胸腺血清因子(TSF)衍生物；胸腺素；胸腺因子X(jué)；腫瘤壞死因子(TNF)；胃動(dòng)素；鈴蟾肽或其衍生物(如美國(guó)專(zhuān)利US5 552520所述，該專(zhuān)利還包括了其它公開(kāi)了鈴蟾肽衍生物的專(zhuān)利的目錄，這些文獻(xiàn)均引入本申請(qǐng)作為參考)；催乳激素；神經(jīng)降壓素；強(qiáng)啡肽；雨蛙肽；P物質(zhì)；尿激酶；天冬酰胺酶；緩激肽；激肽釋放酶；神經(jīng)生長(zhǎng)因子；凝血因子；多粘菌素B；多粘菌素E；短桿菌肽；桿菌肽；蛋白質(zhì)合成刺激肽；內(nèi)皮素拮抗劑或其鹽或其衍生物；血管活性腸肽(VIP)；促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)或其片段；血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)；骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)；垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽(PACAP)；神經(jīng)肽Y(NPY)；肽YY(PYY)；腸抑胃肽(GIP)；和多核苷酸，具體如雙鏈RNA(ds-RNA)，如專(zhuān)利申請(qǐng)EP0300680或法國(guó)專(zhuān)利2622 586所述。
優(yōu)選地，將ds-RNA理解為與聚尿苷酸復(fù)合的聚腺苷酸，也稱(chēng)作聚(A)-聚(U)或聚腺苷尿苷酸(poly-adenur)。其它RNA也適用于本發(fā)明，具體如聚肌苷酸與聚胞苷酸的復(fù)合物，其也可稱(chēng)作聚(I)-聚(C)，以及通過(guò)在這種聚胞苷酸鏈中引入尿苷酸獲得的改性復(fù)合物，例如由HEMISPHERx公司提供的產(chǎn)品擴(kuò)增基因(Ampligen)(這些產(chǎn)品具體公開(kāi)在歐洲專(zhuān)利申請(qǐng)EP0 300 680中)。ds-RNA優(yōu)選地通過(guò)法國(guó)專(zhuān)利2 622 586中所述方法制備。
當(dāng)上述活性物質(zhì)為水溶性物質(zhì)或被轉(zhuǎn)化為水溶性物質(zhì)時(shí)，就可以獲得高比表面，所述轉(zhuǎn)化方式可例如是成鹽作用或在結(jié)構(gòu)中引入水溶性鏈。這對(duì)于上述肽類(lèi)和蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)來(lái)說(shuō)特別有效。在本發(fā)明這方面來(lái)說(shuō)，所屬領(lǐng)域技術(shù)人員可以采用其它任何認(rèn)為適當(dāng)?shù)乃苄曰钚晕镔|(zhì)或其鹽或其前體，特別是與乙酸成鹽制得的鹽。
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方面，具有高比表面的肽或蛋白質(zhì)選自曲普瑞林乙酸鹽、蘭瑞肽乙酸鹽或奧曲肽乙酸鹽。
在本申請(qǐng)中應(yīng)將肽和/或蛋白質(zhì)理解為肽和/或蛋白質(zhì)本身以及這些肽類(lèi)或蛋白質(zhì)類(lèi)的藥理活性片段、鹽或衍生物。
用于制造本發(fā)明所述微囊或植入物的水溶性活性物質(zhì)，具體如曲普瑞林乙酸鹽、蘭瑞肽乙酸鹽和奧曲肽乙酸鹽、戈舍瑞林、亮丙瑞林、布舍瑞林或其鹽優(yōu)選通過(guò)一種主要包括兩個(gè)步驟的方法獲得-冷凍干燥步驟，其中包括將水溶性物質(zhì)的稀溶液快速浸漬在溫度低于-50℃，優(yōu)選低于-70℃的介質(zhì)內(nèi)；和-視具體情況而進(jìn)行的研磨步驟，其中優(yōu)選地包括超聲研磨。
應(yīng)將活性物質(zhì)的稀溶液理解為所述活性物質(zhì)的濃度小于其飽和濃度的一半并且優(yōu)選小于其飽和濃度的四分至一的溶液，條件是其飽和濃度至少等于200g/l。此方法制備出高比表面的活性物質(zhì)。
快速浸漬應(yīng)被理解為與低溫介質(zhì)相接觸，從而引起水溶性物質(zhì)的溶液瞬時(shí)凍結(jié)。
對(duì)于冷凍干燥而言，在進(jìn)行實(shí)際凍干前，該溶液可以在例如處于液氮罐中的浮盤(pán)內(nèi)冷凍。
為了獲得最大比表面，對(duì)溶液的快速浸漬優(yōu)選地歷經(jīng)將活性物質(zhì)溶液微粉化的過(guò)程。當(dāng)首先將活性物質(zhì)溶液微粉化時(shí)，低溫介質(zhì)的溫度可以只低于-50℃。
例如，為了獲得極高的比表面，可以選擇將溶液通過(guò)噴霧器噴霧到極低溫的金屬盤(pán)上。金屬盤(pán)的溫度優(yōu)選地低于-50℃，更優(yōu)選低于-70℃，甚至-80℃或-120℃。例如通過(guò)將金屬盤(pán)浸漬在極低溫介質(zhì)如液氮中可以獲得這樣的溫度。按照本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方案，所述金屬盤(pán)為凹形并且利用噴霧器將溶液噴霧到該盤(pán)內(nèi)。
也可以考慮采用其它冷凍技術(shù)，例如將活性物質(zhì)的溶液噴霧到該活性物質(zhì)的預(yù)冷非溶劑浴中。所述非溶劑優(yōu)選是液化氣體，例如液氮。
另一種可能的作法是在轉(zhuǎn)鼓式致冷機(jī)上冷凍活性物質(zhì)溶液。如上所述，在進(jìn)行該冷凍過(guò)程之前，優(yōu)選對(duì)活性物質(zhì)溶液進(jìn)行微粉化處理。
當(dāng)為了制備本發(fā)明所述緩釋微囊或植入物而采用在盤(pán)中冷凍活性物質(zhì)的方法時(shí)，優(yōu)選活性物質(zhì)的比表面在冷凍干燥后和研磨前大于2m2/g。更優(yōu)選地，活性物質(zhì)的比表面大于3m2/g，甚至大于5m2/g。
若需要使比表面大于10m2/g，則優(yōu)選采用包括微粉化步驟的方法?；钚晕镔|(zhì)在冷凍干燥后獲得的比表面優(yōu)選大于15m2/g。此比表面更優(yōu)選大于20m2/g甚至大于30m2/g。
為了得到不同的比表面，可通過(guò)改變參數(shù)例如冷凍速度或溶液濃度使活性物質(zhì)溶液的冷凍條件發(fā)生變化。
活性物質(zhì)的比表面是獲得長(zhǎng)時(shí)間緩釋的有利因素，對(duì)于微囊來(lái)說(shuō)尤其如此。事實(shí)上已提出，粒度相同但比表面不同的活性物質(zhì)顆粒對(duì)于相同的高分子賦形劑來(lái)說(shuō)將產(chǎn)生完全不同的結(jié)果。
所以，本發(fā)明還涉及適用于水溶性生物活性物質(zhì)的上述制備方法以及由此方法獲得的具有高比表面的水溶性生物活性物質(zhì)。
具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明涉及由上述方法制得的曲普瑞林乙酸鹽、蘭瑞肽乙酸鹽或奧曲肽乙酸鹽，或雙鏈RNA，優(yōu)選地由此類(lèi)方法制得的聚腺苷酸復(fù)合聚尿苷酸。
如上指出，本發(fā)明組合物優(yōu)選被用于制藥領(lǐng)域。所述藥物組合物可以通過(guò)不同途徑施用給病患，但是，優(yōu)選經(jīng)皮下或肌肉內(nèi)給藥?？蓪⒈景l(fā)明所述微囊首先懸浮在適于注射的載體中，例如氯化鈉水溶液或甘露糖醇水溶液。
除非另有定義，本文所用的全部科技術(shù)語(yǔ)具有本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的常用含義。另外，在此提及的所有出版物、專(zhuān)利申請(qǐng)、專(zhuān)利以及其它參考文獻(xiàn)引入本申請(qǐng)作為參考。
下列實(shí)施例用于說(shuō)明上述方法，但不可理解為對(duì)本發(fā)明范圍構(gòu)成限定。
實(shí)施例對(duì)于這些實(shí)施例，特性粘度(IV)是通過(guò)常規(guī)的流動(dòng)時(shí)間測(cè)定法，例如《歐洲藥典》，1997，17-18頁(yè)(毛細(xì)管測(cè)定法)測(cè)出；除非另有說(shuō)明，這些粘度均在在氯仿中和25℃下以0.1％的濃度測(cè)定，或于30℃下在六氟異丙醇中以0.5％的濃度測(cè)定。在測(cè)定中，活性物質(zhì)的比表面是通過(guò)所謂的BET法(對(duì)活性物質(zhì)表面上氮單層的吸收)測(cè)定，這是一種本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法。
對(duì)于下列實(shí)施例，按照本發(fā)明所述冷凍干燥過(guò)程得到的肽稱(chēng)作“改性”肽，與“未改性”肽相對(duì)照，“未改性”肽是以常規(guī)方法進(jìn)行凍干(未經(jīng)過(guò)猝發(fā)式低溫浸漬)實(shí)施例1將16.620g“未改性”曲普瑞林乙酸鹽溶解在554ml水中。將溶液在置于液氮罐中的浮盤(pán)內(nèi)冷凍，隨后凍干。
由此得到15.18g“改性”曲普瑞林乙酸鹽，收率為91.34％。此化合物具有4.7m2/g的比表面，冷凍干燥前的比表面為0.8m2/g。
隨后，將曲普瑞林乙酸鹽超聲粉碎對(duì)于改性肽來(lái)說(shuō)15分鐘就足以獲得粒度小于10μm的顆粒(對(duì)于未改性肽來(lái)說(shuō)需要30分鐘才能夠獲得如此的粒度)。
隨后按照歐洲專(zhuān)利EP52 510和美國(guó)專(zhuān)利US 3 773 919中所述的凝聚方法進(jìn)行包封步驟，以3.378g上述碎化的改性曲普瑞林乙酸鹽和D，L-PLGA(D，L-PLGA由75％DL-丙交酯和25％乙交酯組成，在氯仿中的特性粘度＝0.70dl/g，酸值＝1.61meq KOH/g)的7.30％二氯甲烷溶液為起始物。加入390ml硅油以便通過(guò)凝聚作用形成微囊。浸漬在庚烷浴(22L)中并且在10μm的膜上過(guò)濾后回收所述微囊。
實(shí)施例2
將超聲碎化30分鐘后粒度為8μm的0.338g未改性曲普瑞林乙酸鹽在攪拌條件下加入到D，L-PLGA(PLGA與實(shí)施例1中的PLGA等量)的7.30％二氯甲烷溶液中。加入40ml硅油以形成微囊，隨后在庚烷浴(2L)中沉淀并且再在10μm的膜上過(guò)濾。
實(shí)施例3-6將0.338g曲普瑞林乙酸鹽按照上面表1中所述的條件改性，隨后超聲碎化，再將其加入到溶于二氯甲烷中的三種D，L-PLGA(其特性如下表2所示)的33.3％/33.3％/33.3％混合物的7.30％溶液中。加入40ml硅油以形成微囊，隨后在庚烷浴(2L)中沉淀并且再在10μm的膜上過(guò)濾。
表1
(未改性)曲普瑞林乙酸鹽丁酸起始物的比表面為0.8m2/g。
三種混合聚合物的物理化學(xué)特性列于表2中
實(shí)施例7將22.560g“未改性”蘭瑞肽乙酸鹽溶解在752ml水中。將該溶液在置于液氮罐中的浮盤(pán)內(nèi)冷凍，隨后凍干。得到21.75g“改性”蘭瑞肽乙酸鹽，收率為96.41％，此化合物具有4.4m2/g的比表面。
隨后按照歐洲專(zhuān)利EP52 510和美國(guó)專(zhuān)利3 773 919中所述的凝聚法進(jìn)行包封步驟，以7.5g上述碎化的改性蘭瑞肽乙酸鹽和D，L-PLGA(D，L-PLGA由50％DL-丙交酯和50％乙交酯組成，在HFIP中的特性粘度＝0.55dl/g)的3.70％二氯甲烷溶液為起始物。加入650ml硅油以便通過(guò)凝聚作用形成微囊。浸漬在庚烷浴(30L)中并且在10μm的膜上過(guò)濾后回收所述微囊。
實(shí)施例8和9用不同重均分子量(Mw)的D，L-PLGA(由75％DL-丙交酯和25％乙交酯組成)來(lái)制造曲普瑞林乙酸鹽的微囊。采用比表面為4.7m2/g的曲普瑞林乙酸鹽、按照實(shí)施例1所述方法制備微囊。
實(shí)施例8和9的物理化學(xué)參數(shù)如下表所示
實(shí)施例10按照實(shí)施例1所述的方法、采用具有疏水趨勢(shì)的D，L-PLGA(該D，L-PLGA由75％DL-丙交酯和25％乙交酯組成；在THF中測(cè)得的分子量80100；在氯仿中的特性粘度0.75dl/g；酸值＝0.40meq KOH/g)制備微囊。
實(shí)施例11按照實(shí)施例1所述的方法、采用有結(jié)晶趨勢(shì)的L-PLGA(該L-PLGA由75％L-丙交酯和25％乙交酯組成；在THF中測(cè)得的分子量99260；在氯仿中的特性粘度0.78dl/g；酸值＝1.80meq KOH/g)為起始物制備微囊。
實(shí)施例12將1重量份的曲普瑞林乙酸鹽加入到4重量份的粉化D，L-PLGA(該P(yáng)LGA由75％丙交酯和25％乙交酯組成；在THF中測(cè)得的分子量103810；在氯仿中的特性粘度0.82dl/g)中。
用400μm篩將固體塊破碎，將產(chǎn)物以42rpm的轉(zhuǎn)速混合20分鐘并且將該混合物在120℃下用一個(gè)位于螺旋擠壓機(jī)上的直徑為1mm的擠壓模擠出。隨后將擠出物在空氣中冷卻并且通過(guò)拉絲使其最終的直徑達(dá)到0.85mm。
測(cè)定每單位長(zhǎng)度(mm)的混合物濃度，并且將擠出物棒切成預(yù)定長(zhǎng)度(在此為24mm)，得到含有3mg曲普瑞林的微型植入物。最后，檢測(cè)各微型植入物的重量。
實(shí)施例13和14這兩個(gè)實(shí)施例采用同樣的方法5g蘭瑞肽乙酸鹽溶解在水中以達(dá)到所選擇的濃度(例如，加入167ml滅菌水，所得濃度為30g/l)。用500ml的噴霧器將這種溶液霧化，調(diào)節(jié)噴霧流得到盡可能細(xì)的液滴。將所得液滴噴霧在底部浸漬在液氮中的盤(pán)中。在操作前在盤(pán)內(nèi)放置兩根溫度計(jì)，以便監(jiān)測(cè)產(chǎn)物的溫度變化。
一旦產(chǎn)物被凍結(jié)，將盤(pán)插入到底盤(pán)溫度約為-54℃的冷凍干燥器中。
用1小時(shí)使產(chǎn)物溫度和底盤(pán)溫度達(dá)到平衡。這可以誘發(fā)升華階段(將底盤(pán)溫度設(shè)定在20℃并且罐內(nèi)壓力為100μbar)。此階段持續(xù)約30小時(shí)。產(chǎn)物的平均最終溫度為13℃。隨后進(jìn)行約24小時(shí)的二次干燥(罐內(nèi)壓力50μbar)。產(chǎn)物的平均最終溫度是20℃。
所用反應(yīng)物和產(chǎn)物的特性概括在下表中
將上述(實(shí)施例14)得到的比表面為43m2/g的蘭瑞肽乙酸鹽按照下列方法混合到微囊內(nèi)在玻璃管中稱(chēng)量0.782g蘭瑞肽乙酸鹽。將15ml二氯甲烷加入到該肽鹽中。用裝備有放大器和浸插探針或平頭探針的超聲發(fā)生器將上述肽超聲粉碎(頻率＝50Hz，功率＝250W；粉碎持續(xù)約15分鐘)。
隨后按照歐洲專(zhuān)利EP52 510和美國(guó)專(zhuān)利3 773 919中所述的凝聚法使用0.782g上述碎化的蘭瑞肽乙酸鹽和溶于35ml二氯甲烷中的4g 50∶50D，L-PLGA(在氯仿中的IV＝0.48dl/g)溶液進(jìn)行包封步驟。加入34.2ml硅油以便通過(guò)凝聚作用形成微囊。浸漬在庚烷浴(2.5L)中并且在10μm的膜上過(guò)濾后回收所述微囊。
隨后將所得的微球真空干燥，分裝到瓶中并且與賦形劑(例如惰性物質(zhì)或表面活性劑)一起冷凍干燥，以確保儲(chǔ)存在良好的條件下并且易于得到微囊的懸浮液。
實(shí)施例15和16這兩個(gè)實(shí)施例采用與實(shí)施例1相似的方法。所用的肽也相同。但所用PLGA的特征、肽(此兩個(gè)實(shí)施例采用改性曲普瑞林乙酸鹽)的用量以及微囊的制備參數(shù)如下表所示
對(duì)本發(fā)明微囊的釋放曲線(xiàn)的研究為了說(shuō)明本發(fā)明微囊的價(jià)值，對(duì)其體外釋放曲線(xiàn)作了研究將實(shí)施例1-11和15-16各取3個(gè)約25mg(實(shí)施例7取約20mg)的微囊樣品置于4ml 0.9％氯化鈉溶液中，分別測(cè)定其釋放性能。在37℃下，在1小時(shí)、1天和4天后提取釋放到溶液中的藥物。
利用高效液體色譜(HPLC)、相對(duì)于校準(zhǔn)范圍、在三氟乙酸(TFA)體系中以梯度模式測(cè)定曲普瑞林。為了得到曲普瑞林的標(biāo)準(zhǔn)范圍，按照下列方法制備溶液T1將約7.5mg參比曲普瑞林乙酸鹽樣品置于50ml燒瓶中；用0.1％乙酸溶液配制到50ml。由溶液T1制備溶液T2和T3對(duì)于T2，取10ml溶液T1并且用0.1％乙酸溶液配制到20ml。對(duì)于溶液T3，取1ml溶液T1并且用0.1％乙酸溶液配制到50ml。
按照類(lèi)似的方法通過(guò)HPLC測(cè)定蘭瑞肽。為了得到蘭瑞肽的校準(zhǔn)范圍，按照下列方法制備溶液T’1將約16.5mg參比蘭瑞肽乙酸鹽樣品置于50ml燒瓶中；用0.1％乙酸溶液配制到50ml。由溶液T’1制備溶液T’2、T’3、T’4和T’5對(duì)于T’2，取10ml溶液T’1并且用0.1％乙酸溶液配制到25ml。對(duì)于溶液T’3，取5ml溶液T’1并且用0.1％乙酸溶液配制到25ml。T’4通過(guò)將2ml溶液T’1用0.1％乙酸溶液稀釋到總體積為25ml制得。溶液T’5通過(guò)將1ml溶液T’1用0.1％乙酸溶液稀釋到總體積為25ml制得。
以相對(duì)于曲普瑞林乙酸鹽或蘭瑞肽乙酸鹽的起始含量的百分比(100％)計(jì)，測(cè)定曲普瑞林乙酸鹽或蘭瑞肽乙酸鹽的量，這可作為參比。
該體外試驗(yàn)的結(jié)果概括在下表中
體內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果與那些體外試驗(yàn)完全相關(guān)。例如，將實(shí)施例1的微囊以1.2mg/kg的劑量肌內(nèi)注射到大鼠體內(nèi)。對(duì)血漿的分析揭示了曲普瑞林的量在超過(guò)90天的期間內(nèi)恒定地保持在0.1ng/ml以上。對(duì)實(shí)施例2的微囊進(jìn)行的相同研究顯示出睪酮的量在超過(guò)90天的期間內(nèi)恒定地保持在1ng/ml以下。此外，將實(shí)施例9的微囊以1.2mg/kg的劑量肌內(nèi)注射到大鼠體內(nèi)，對(duì)血漿的分析揭示了曲普瑞林的量在超過(guò)90天的期間內(nèi)恒定地保持在0.1ng/ml以上。
按照下列方法對(duì)實(shí)施例12的微型植入物進(jìn)行體內(nèi)試驗(yàn)在每只短腿小獵兔犬(體重約12kg)的后爪肌肉內(nèi)注射總劑量為3mg的曲普瑞林。血漿分析揭示出，曲普瑞林的量在超過(guò)90天的期間內(nèi)恒定地保持在0.1ng/ml以上。
權(quán)利要求
1.微囊或植入物形式的組合物，其中含有至少一種丙交酯和乙交酯的共聚物或此類(lèi)共聚物的混合物，以及至少一種水溶性活性物質(zhì)，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于2m2/g。
2.權(quán)利要求1的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于3m2/g。
3.權(quán)利要求2的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于5m2/g。
4.權(quán)利要求3的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于10m2/g。
5.權(quán)利要求4的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于20m2/g。
6.權(quán)利要求5的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)的比表面積大于30m2/g。
7.權(quán)利要求1的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物或共聚物混合物在氯仿中的粘度為0.5-1.6dl/g。
8.權(quán)利要求7的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物或共聚物混合物在氯仿中的粘度為0.9-1.6dl/g。
9.權(quán)利要求1的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物或共聚物混合物的酸值大于1meq KOH/克共聚物。
10.權(quán)利要求9的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物或共聚物混合物的酸值大于1.2meq KOH/克共聚物。
11.權(quán)利要求10的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物或共聚物混合物的酸值大于1.5meq KOH/克共聚物。
12.權(quán)利要求1的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述共聚物為丙交酯和乙交酯的共聚物，由70-80％丙交酯和20-30％乙交酯制成。
13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)為蛋白質(zhì)或肽。
14.權(quán)利要求1的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)選自曲普瑞林或其一種鹽；蘭瑞肽或其一種鹽；奧曲肽或其一種鹽；具有LH-RH活性的化合物，如曲普瑞林、戈舍瑞林、亮丙瑞林、布舍瑞林或其鹽；LH-RH拮抗劑；GPIIb/IIa拮抗劑；具有與GPIIb/IIa拮抗劑相似活性的化合物；促紅細(xì)胞生成素(EPO)或其類(lèi)似物；不同類(lèi)型的干擾素-α、干擾素-β或-γ；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子衍生物；生長(zhǎng)激素釋放抑制因子類(lèi)似物；胰島素；生長(zhǎng)激素；生長(zhǎng)激素釋放因子(GRF)；生長(zhǎng)激素釋放肽(GHRP)；表皮生長(zhǎng)因子(EGF)；促黑素細(xì)胞素(MSH)；促甲狀腺素釋放激素(TRH)或其鹽或其衍生物；甲狀腺刺激激素(TSH)；促黃體素(LH)；促濾泡素(FSH)；甲狀旁腺素(PTH)或其衍生物；溶菌酶鹽酸鹽；甲狀旁腺素相關(guān)肽(PTHrp)；和人體PTH激素的N-末端肽片段(1→34位)；后葉加壓素或其衍生物；催產(chǎn)素；降鈣素；與降鈣素具有相似活性的降鈣素衍生物；降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)；高血糖素；高血糖素相似肽(GLP)；胃泌素；胃泌素釋放肽(GRP)；腸促胰液肽；促胰酶素；縮膽囊素；血管緊張素；人胎盤(pán)催乳激素；人絨毛膜促性激素(HCG)；腦啡肽；腦啡肽衍生物；集落刺激因子(CSF)；內(nèi)啡肽；京都酚；白介素類(lèi)，例如白介素-2；吞噬細(xì)胞激素；胸腺生成素；胸腺刺激素；胸腺激素因子(THF)；胸腺血清因子(TSF)；胸腺血清因子(TSF)衍生物；胸腺素；胸腺因子X(jué)；腫瘤壞死因子(TNF)；胃動(dòng)素；鈴蟾肽或其衍生物；催乳激素；神經(jīng)降壓素；強(qiáng)啡肽；雨蛙肽；P物質(zhì)；尿激酶；天冬酰胺酶；緩激肽；激肽釋放酶；神經(jīng)生長(zhǎng)因子；凝血因子；多粘菌素B；多粘菌素E；短桿菌肽；桿菌肽；蛋白質(zhì)合成刺激肽；內(nèi)皮素拮抗劑或其鹽或其衍生物；血管活性腸肽(VIP)；促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)或其片段；血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)；骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)；垂體腺苷酸環(huán)化酶活化多肽(PACAP)；神經(jīng)肽Y(NPY)；肽YY(PYY)；腸抑胃肽(GIP)；和多核苷酸。
15.權(quán)利要求14的微囊或植入物形式的組合物，其特征在于所述活性物質(zhì)選自曲普瑞林乙酸鹽、蘭瑞肽乙酸鹽或奧曲肽乙酸鹽。
16.權(quán)利要求1中定義的水溶性物質(zhì)的制備方法，包括下列步驟-冷凍干燥步驟，其中包括將所述水溶性物質(zhì)的稀溶液快速浸漬在溫度低于-50℃的介質(zhì)內(nèi)；和-任選進(jìn)行的研磨步驟，其中優(yōu)選地包括超聲研磨。
17.權(quán)利要求16的方法，其特征在于所述稀溶液是濃度小于其飽和濃度一半的溶液。
18.權(quán)利要求17的方法，其特征在于所述水溶性物質(zhì)的飽和濃度至少為200g/l，并且所述稀溶液是濃度小于飽和濃度的四分之一的溶液。
19.權(quán)利要求16-18中任一項(xiàng)的方法，其特征在于所述快速浸漬是在將活性物質(zhì)溶液微粉化的步驟后進(jìn)行的，該微粉化步驟優(yōu)選地包括將該溶液經(jīng)過(guò)噴霧器微粉化。
全文摘要
本發(fā)明涉及微囊或植入物形式的組合物，該組合物含有可生物降解聚合物或共聚物型賦形劑或此類(lèi)賦形劑的混合物以及活性物質(zhì)或活性物質(zhì)的混合物，所述賦形劑或賦形劑的混合物在氯仿中具有0.5dl/g－1.6dl/g的特性粘度。所述微囊或所述植入物能夠在長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月或更長(zhǎng)的延遲時(shí)間內(nèi)釋放出活性物質(zhì)或活性物質(zhì)混合物。所述組合物還含有高比表面的活性成分。
文檔編號(hào)A61K38/00GK1494900SQ03154599
公開(kāi)日2004年5月12日 申請(qǐng)日期1998年4月17日 優(yōu)先權(quán)日1997年4月18日
發(fā)明者M·派利特, M 派利特, C·魯米 申請(qǐng)人:Ipsen藥物生物技術(shù)公司