專利名稱：茶多酚軟膠囊及其制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于降血脂、抗癌及抗自由基氧化有關(guān)的疾病和癥狀的一種茶多酚軟膠囊及其制備工藝。
背景技術(shù)：
茶葉是僅次于水而被廣泛消費的飲料，作為傳統(tǒng)飲料在我國己有千年歷史，是名符其實的“傳統(tǒng)國飲”，主要有綠茶、紅茶和烏龍茶。近30年來國內(nèi)外科研工作者對茶葉進(jìn)行了廣泛研究，發(fā)現(xiàn)茶葉有防止紫外線照射、抗氧化、抗腫瘤、抗動脈粥樣硬化、強心、抗心律失常、防治腦缺血再灌注損傷、抗齲護齒、抑菌等多種藥理作用，起作用的主要成分是茶多酚。
茶多酚是一種新型的天然食品抗氧化劑，它具有優(yōu)良的抗氧化、抗幅射、抗突變和抗動脈粥樣硬化等多種生物活性。茶多酚類化合物的生物活性、保健功能、藥效機理等方面的研究已受到國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界、藥學(xué)界和茶學(xué)界的極大關(guān)注。有關(guān)研究表明茶多酚具有如下藥效(1)抗腫瘤、抗突變、預(yù)防癌癥。(2)增強微血管強韌性、降低血壓和血糖、預(yù)防肝臟及冠狀動脈粥樣硬化。(3)對病原菌及病毒的生長發(fā)育起抑制和殺滅作用。(4)緩和腸胃緊張、防炎止瀉和利尿作用。(5)促進(jìn)VitC的吸收、防治壞血病。(6)抗脂質(zhì)過氧化，對衰老有調(diào)控效應(yīng)。(7)重金屬鹽和生物堿中毒的抗解劑。
茶多酚具有強大的治療、保健功能，現(xiàn)在已用于食品、藥品、化妝品行業(yè)，僅限于片劑、顆粒劑、硬膠囊劑等固體中使用。茶多酚在溶液中不穩(wěn)定，因此多制成固體制劑，但固體制劑都存在生物利用度低、口感差等缺陷。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了一種用于降血脂、抗癌及抗自由基氧化有關(guān)的疾病和癥狀的茶多酚軟膠囊，其質(zhì)量穩(wěn)定，安全，使用方便。本發(fā)明還提供了一種茶多酚軟膠囊制備工藝。
本發(fā)明的技術(shù)方案之一是這樣來實現(xiàn)的一種茶多酚軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其囊心物按重量百分比含有5～60％的茶多酚、0～20％大豆磷脂、0～2％的維生素E、0～15％的囊化穩(wěn)定劑和余量的稀釋劑。
本發(fā)明的技術(shù)方案之二是這樣來實現(xiàn)的一種茶多酚軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其囊心物按重量百分比含有5～60％的茶多酚、2～20％大豆磷脂、0.5～2％的維生素E、0～15％的囊化穩(wěn)定劑和余量的稀釋劑。
上述稀釋劑為花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油等中的一種或一種以上。
上述囊化穩(wěn)定劑為蜂蠟、羊脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇1000～6000、泊洛沙姆188～407中的一種或一種以上。
上述囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、0～3％的聚乙二醇400、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.1％的矯味劑和余量的水。
上述增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上。
上述防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上。
上述遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上。
上述色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上。
上述矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、薄荷腦中的一種或一種以上。
本發(fā)明的技術(shù)方案之三是這樣來實現(xiàn)的上述茶多酚軟膠囊的制備工藝，其包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制，其中囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不銹鋼鍋內(nèi)攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不銹鋼夾層鍋內(nèi)，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹后加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態(tài)下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續(xù)減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；囊心物制備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入大豆磷脂、穩(wěn)定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入維生素E攪拌均勻；將茶多酚加入混合液中攪拌均勻并使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉(zhuǎn)模壓法壓制軟膠囊；然后進(jìn)行洗丸、干燥、包裝得到茶多酚軟膠囊。
本發(fā)明茶多酚軟膠囊，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，相對其它劑型其生物利用度更高、吸收更好，在臨床劑量條件下是安全的，具有降血脂、抗癌、抗自由基氧化、抗動脈粥樣硬化、促進(jìn)VitC的吸收，防治壞血病等作用。
具體實施例方式
本發(fā)明不受下述實施例的限制，可根據(jù)上述本發(fā)明的技術(shù)方案和實際情況來確定具體的實施方式。
實施例1，該茶多酚軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為35％，聚乙二醇400為2.5％，甘油為18％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，水為44.42％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為10％，聚乙二醇400為79％，丙二醇為8％，聚乙二醇1000為3％。
實施例2，該茶多酚軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為45％，甘油為22％，對羥基苯甲酸乙酯為0.11％，二氧化鈦為1％，檸檬黃為0.35％，乙基香蘭醛為0.07％，水為31.47％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為50％，維生素E為2％，茶油為40％，蜂蠟為5％，聚乙二醇單硬脂酸脂為3％。
實施例3，該茶多酚軟膠囊的囊殼按重量百分比含有明膠為40％，甘油為12％，山梨醇為8％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，硫酸鋇為0.5％，莧菜紅為0.1％，香精油為0.05％，水為39.25％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為30％，大豆磷脂為10％，維生素E為1％，紅花油為53％，蜂蠟為4％，吐溫-80為2％。
實施例4，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為42％，聚乙二醇400為3％，山梨醇為19％，對羥基苯甲酸乙酯為0.09％，氧化鐵為0.68％，可可棕為0.28％，薄荷為0.06％，水為34.89％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為15％，大豆磷脂為20％，維生素E為0.5％，豆油為51.5％，羊脂為5％，泊洛沙姆188為8％。
實施例5，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為39％，甘油為20％，對羥基苯甲酸丁酯為0.1％，沉降碳酸鈣為0.78％，胭脂紅為0.12％，香精油為0.01％，水為39.99％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為30％，維生素E為2％，玉米油為58.5％，丙二醇為2.5％，聚乙二醇6000為7％。
實施例6，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為40％，甘油為18％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，二氧化鈦為0.8％，炭黑為0.28％，水為40.82％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為34％，大豆磷脂為10％，維生素E為1.5％，沙棘油為49.1％，蜂蠟為5.4％。
實施例7，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為45％，聚乙二醇400為2％，甘油為18％，對羥基苯甲酸乙酯為0.1％，硫酸鋇為0.75％，果綠為0.2％，水為33.95％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為20％，大豆磷脂為10％，維生素E為0.8％，紅花油為22.4％，豆油為20％，色拉油為20％，甲基纖維素為6.8％。
實施例8，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為44％，甘油為20％，對羥基苯甲酸丁酯為0.08％，二氧化鈦為0.65％，炭黑為0.18％，水為35.09％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為26％，大豆磷脂為8％，紅花油為35％，茶油為25％，蜂蠟為6％。
實施例9，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為45％，甘油為21％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，二氧化鈦為0.76％，莧菜紅為0.28％，乙基香蘭醛為0.03％，薄荷腦為0.07％，水為32.76％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為5％，維生素E為2％，大豆磷脂為20％，色拉油為73％。
實施例10，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為44％，甘油為22％，對羥基苯甲酸乙酯為0.11％，二氧化鈦為0.88％，可可棕為0.24％，香精油為0.04％，薄荷腦為0.04，水為32.69％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為60％，聚乙二醇400為37％，泊洛沙姆407為3％。
實施例11，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為40％，聚乙二醇400為2.5％，甘油為17％，對羥基苯甲酸丁酯為0.09％，硫酸鋇為0.8％，炭黑為0.3％，水為39.31％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為25％，聚乙二醇400為60％，丙二醇為5％，聚乙二醇6000為10％。
實施例12，該茶多酚軟膠囊的囊殼中按重量百分比含有明膠為43％，聚乙二醇400為3％，甘油為19％，對羥基苯甲酸甲酯為0.08％，對羥基苯甲酸丙酯為0.02％，二氧化鈦為1％，胭脂紅為0.2％，水為33.7％；該茶多酚軟膠囊的囊心物按原料重量百分比含有茶多酚為16％，聚乙二醇400為66％，丙二醇為6％，泊洛沙姆237為12％。
上述實施例中的茶多酚軟膠囊可通過以下制備工藝得到該制備工藝包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制，其中囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不銹鋼鍋內(nèi)攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不銹鋼夾層鍋內(nèi)，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹后加熱至50℃或60℃或70℃或80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態(tài)下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續(xù)減壓攪拌30分鐘或50分鐘或70分鐘或90分鐘或110分鐘或120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減速壓脫氣待用；囊心物制備將稀釋劑加熱至25℃或35℃或45℃或55℃或65℃或75℃或85℃，加入穩(wěn)定劑、大豆磷脂混合均勻；待溫度降至25℃或30℃或35℃時，加入維生素E攪拌均勻；將茶多酚、加入混合液中攪拌均勻并使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉(zhuǎn)模壓法壓制軟膠囊；然后進(jìn)行洗丸、干燥、包裝得到茶多酚軟膠囊。
下面對上述實施例所得產(chǎn)品即茶多酚軟膠囊進(jìn)行藥效學(xué)試驗、毒理學(xué)實驗和穩(wěn)定性實驗如下一、藥效學(xué)試驗降血脂試驗1.1實驗設(shè)計選取雄性Wistar大鼠50只，體重160-180g，基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，取尾血，測定血清膽固醇。根據(jù)膽固醇水平和體重將大鼠分為5組，每組10只。設(shè)基礎(chǔ)飼料對照組、高脂飼料對照組以及低、中、高三個劑量組，茶多酚軟膠囊推薦的人每日攝入量為1.0g/60kg，由此計算出大鼠各劑量組每日應(yīng)攝入茶多酚軟膠囊分別為低劑量組，0.083g/kgbW；中劑量組，0.167g/kgbW；高劑量組，0.500g/kgbw。分別相當(dāng)于人每日每公斤體重攝入量的5倍、10倍和30倍。實驗開始后，除基礎(chǔ)飼料對照組大鼠喂飼基礎(chǔ)飼料外，其余各組大鼠均喂飼高脂飼料。由于受試物水溶性差，將受試物以3％淀粉溶液配制成灌胃液，每日經(jīng)口灌胃給予受試物，灌胃量為1ml/100gbW?；A(chǔ)飼料對照組和高脂飼料對照組給予等體積的3％淀粉溶液灌胃，連續(xù)灌胃30天，每周稱體重。各組動物自由進(jìn)食、飲水。30天后，股動脈取血，分離血清。
1.2檢驗指標(biāo)血清總膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，采用酶法在日立7020全自動生化分析儀上測定，試劑采用英國朗道(Randox)生化試劑。
1.3檢驗結(jié)果1.3.1茶多酚軟膠囊調(diào)節(jié)血脂實驗大鼠體重(見表1)表1茶多酚軟膠囊調(diào)節(jié)血脂實驗大鼠體重情況(g，X±SD)組別n 0周 1周 2周 3周 4周基礎(chǔ)飼料對照組 10 181.8±5.2 245.9±9.1298.4±8.1352.9±18.4 400.8±29.0高脂飼料對照組 10 180.8±5.1 250.9±9.8301.6±19.5 352.1±28.5 396.8±30.80.083g/kgbw組 10 180.0±4.1 249.2±11.7 301.9±17.2 363.2±25.3 400.1±23.10.167g/kgbw組 10 181.9±6.2 249.4±13.7 305.9±12.3 366.7±18.2 404.0±25.30.500g/kgbw組 10 181.8±5.6 243.4±8.8290.4±10.1 338.5±16.4 369.5±20.8茶多酚軟膠囊各劑量組大鼠體重與高脂飼料對照組比較無明顯差異。
1.3.2茶多酚軟膠囊對大鼠血脂的影響(見表2)1.3.2.1基礎(chǔ)飼料對照組大鼠血清TC和TG含量顯著低于高脂飼料對照組，表明高脂模型的建立。
1.3.2.2茶多酚軟膠囊各劑量組大鼠血清TC水平低于高脂飼料對照組，差異具有顯著性(P＜0.05＝。
1.3.2.3茶多酚軟膠囊低、中劑量組大鼠血清TG低于高脂飼料對照組，差異具有顯著性(P＞0.05)。
1.3.2.4茶多酚軟膠囊各劑量組大鼠血清HDL-C與高脂飼料對照組相比無明顯變化(P＞0.05)。
表2茶多酚軟膠囊對大鼠TC、TG和HDL-C的影響(mmol/L，X±SD)組別動物數(shù) TC TG HDL-C基礎(chǔ)飼料對照組101.63±0.17*1.37±0.31*1.20±0.11*高脂飼料對照組103.54±0.42 2.11±0.31 1.36±0.220.083g/kgbw組 102.82±0.31*1.29±0.26*1.32±0.110.167g/kgbw組 103.02±0.50*1.88±0.73 1.31±0.160.500g/kgbw組 102.84±0.45*1.54±0.55*1.31±0.19*表示與高脂飼料對照組相比有顯著差異(P＜0.05＝
1.4結(jié)果小結(jié)經(jīng)口連續(xù)30天給予大鼠茶多酚軟膠囊送檢樣品，在高脂血癥模型成立的前提下，茶多酚軟膠囊各劑量組血清總膽固醇(TC)均明顯低于高脂飼料對照組，低、中劑量組甘油三酯(TG)明顯低于高脂飼料對照組，高密度脂蛋白膽固醇在高脂飼料對照組與茶多酚軟膠囊各劑量組之間無明顯差異。可認(rèn)為茶多酚軟膠囊具有輔助降血脂的功能。
二、毒理學(xué)實驗1、劑量設(shè)計、樣品性狀及處理樣品人體最大推薦劑量為每日1.6g/60kg.bw，除急性經(jīng)口毒性試驗外，其它各項動物試驗均按人體推薦劑量的25、50、100倍即0.67、1.33、2.67g/kg.bw.給予。分別稱取樣品13.4、26.8、53.4g加葵花籽油定容至100ml，配制成13.4％、26.7％、53.4％的溶液。葵花籽油為陰性對照組，各劑量組均按5ml/kg.bw等容積灌胃。Ames試驗受試物配制取1g受試物用滅菌植物油稀釋至20ml，此為最高濃度組，再按5倍依次稀釋4組濃度受試物分別為50、10、2、0.4、0.08mg/ml溶液，每皿加受試物0.2ml，則從高至低各組劑量為10、2、0.4、0.08、0.016mg/皿。
2.實驗動物昆明種小白鼠、Wistar大白鼠及全價顆粒飼料均由新疆醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供(合格證號醫(yī)動字16-003)。
3、實驗方法與結(jié)果3.1急性經(jīng)口毒性試驗取昆明種小白鼠20只，體重(19-22克)，Wistar大白鼠20只，體重(180-218克)，雌雄各半。采用最大一次限量法，劑量為10.0g/kg.bw。取樣品原液大、小鼠按10ml/kg.bw灌胃一次，觀察兩周，灌胃后出現(xiàn)輕度腹瀉，24小時內(nèi)恢復(fù)正常，動物無其它不良癥狀，無一死亡。大、小鼠急性經(jīng)口LD50均大于10g/kg.bw。
3.2微核試驗取昆明種小白鼠50只(25-31克)，隨機分5組，每組10只，雌雄各半。采用二次給樣法，各劑量組按5ml/kg.bw給予13.4％、26.7％、53.4％的濃度的受試物，陽性對照組(環(huán)磷酰胺50mg/kg)腹腔注射，予未次給樣后6小時，按常規(guī)取材、制片、鏡檢，每鼠計數(shù)1000個骨髓嗜多染紅細(xì)胞的微核率。(詳見表3)。
表3樣品骨髓微核試驗結(jié)果組別動物數(shù) 受檢 含微核 微核率 P值(只) PCE數(shù)PCE數(shù) (‰)陰性對照55×10003 0.6±0.89低劑量組55×10002 0.4±0.55 0.6547中劑量組55×10003 0.6±0.55 1.0000♀高劑量組55×10003 0.6±0.89 1.0000陽性對照55×100048 9.6±6.31 0.0000陰性對照55×10004 0.8±0.84低劑量組55×10003 0.6±0.89 0.7055中劑量組55×10002 0.4±0.55 0.4142♂高劑量組55×10005 1.0±1.22 0.7389陽性對照55×100052 10.4±4.67 0.0000由上表可見，樣品各劑量組小鼠嗜多染紅細(xì)胞微核率與陰性對照組相比較，經(jīng)泊松分布檢驗(P＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而陽性組與陰性組比較(P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；即樣品微核試驗結(jié)果為陰性。
3.3精子畸形試驗取雄性小鼠25只(26至30克)，隨機分為5組，每組5只。樣品各劑量組及陰性對照組均同微核試驗，陽性組劑量(環(huán)磷酰胺40mg/kg腹腔注射)。連續(xù)灌胃5天，于第一次灌胃后35天按常規(guī)取材、制片、鏡檢。每鼠計數(shù)分析1000個精子的畸變率。(詳見表4)。
表4樣品精子畸形試驗結(jié)果動物數(shù) 畸變精子數(shù)畸變精子 昂畸變率P值組別 (只)不定形無鉤香蕉 胖頭雙頭尾 尾折 (個) (％)陰性對照 574 36 11 97 9146 2.92低劑量組 569 41 10 15 3 4142 2.84 0.814中劑量組 587 40 15 65 8161 3.22 0.392高劑量組 574 45 11 18 2 3153 3.06 0.686陽性對照 5235 152 60 15 11 11 484 9.68 0.000由上表可見，樣品各劑量組小鼠的精子畸形率與陰性對照組相比較，經(jīng)泊松分布檢驗(P＞0.05)差異無統(tǒng)計學(xué)意義；而陽性組與陰性組比較(P＜0.01)差異有統(tǒng)計學(xué)意義，即樣品精子畸形試驗結(jié)果為陰性。
3.4 Ames試驗3.4.1試驗菌種組氨酸缺陷型鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102及大鼠肝勻漿均由中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院勞衛(wèi)所分子毒理室提供，其生物學(xué)性狀經(jīng)鑒定合格。
3.4.2陽性劑-S9TA97及TA98均為2.4.7-三硝基芴酮(0.4ug/皿)、TA100為疊氮鈉(1.5ug/皿)、TA102為絲裂霉素C(1ug/皿)。+S9TA97、TA98、TA100為2-氨基芴(20ug/皿)。TA102為1.8-二羥基蒽醌(50ug/皿)。
3.4.3方法采用標(biāo)準(zhǔn)平皿摻入法，在加與不加S9活化系統(tǒng)的情況下劑量以樣品膠囊內(nèi)容物計，設(shè)0.016、0.08、0.4、2.0、10.0mg/皿、自發(fā)回變、溶劑對照及陽性對照8個劑量組進(jìn)行致突變試驗。在試驗條件和試驗菌株完全相同的情況下重復(fù)做兩次實驗結(jié)果詳見表5。
表5樣品Ames試驗結(jié)果(一)劑量(mg/皿) TA97TA98 TA100 TA102自發(fā)回變 -S9 193±13.035±9.5 193±24.3247±38.6+S9 209±6.2049±13.4143±38.0239±17.1溶劑對照 -S9 186±20.138±9.0 194±20.4291±30.8+S9 200±3.5 46±11.5179±36.8280±29.10.016 -S9 191±14.651±10.8172±24.6293±15.9+S9 184±8.6044±8.0 175±15.4282±31.80.08 -S9 175±36.340±8.50200±22.6296±9.90+S9 177±24.435±7.00198±14.7184±15.60.4 -S9 206±9.0037±0.6 190±10.1278±4.40+S9 203±2.1034±6.00151±44.1262±55.82.0 -S9 179±30.261±6.4 178±28.2281±15.7+S9 215±5.6057±10.7188±35.8258±10.810.0 -S9 145±63.055±8.1 182±34.5259±34.5+S9 157±44.442±17.0161±5.70258±17.7陽性對照 -S9 3723±466.5 3941±220.1 971±76.21022±123.1+S9 1077±66.20 2954±487.0 4042±1156.5 822±98.9
表5(續(xù))樣品Ames試驗結(jié)果(二)劑量(mg/皿) TA97 TA98 TA100TA102自發(fā)回變 -S9181±25.0 38±14.0197±23.2 272±21.1+S9184±19.5 47±14.1160±20.2 246±25.1溶劑對照 -S9174±22.5 45±8.90176±12.1 299±19.5+S9181±12.2 46±16.0168±17.0 268±15.70.016-S9181±26.1 43±8.70176±10.0 280±12.1+S9174±14.6 47±8.70181±30.3 282±19.30.08 -S9177±20.3 45±14.2175±15.5 281±8.10+S9188±12.5 45±10.8178±24.3 268±17.50.4 -S9176±25.7 52±10.80 186±20.0 282±12.0+S9180±20.7 45±9.30173±19.2 291±10.52.0 -S9183±7.40 45±6.60167±22.5 289±18.0+S9174±33.1 45±13.1180±15.5 269±14.410.0 -S9172±18.6 47±12.1172±19.0 290±13.2+S9184±17.2 44±8.0 175±25.4 277±9.80陽性對照 -S93797±259.4 3869±273.4 978±58.7 1016±152.9+S91051±56.02838±296.5 4051±1130.8 827±114.0由上表可見，樣品各劑量組回變菌落數(shù)均未超過菌種本身自發(fā)回變菌落數(shù)的兩倍，而陽性組明顯大于自發(fā)回變菌落數(shù)，表明樣品Ames試驗結(jié)果為陰性。
3.5 30天喂養(yǎng)試驗3.5.1劑量設(shè)計樣品的人體推薦劑量為每日1.6g/60kg.bw。本試驗按人體推薦劑量的25、50、100倍設(shè)計劑量，分別為0.67、1.33、2.67g/kg.bw。分別稱取樣品配制成13.4％、26.7％、53.4％的溶液備用。各劑量組均按5ml/kg等容積灌胃，另設(shè)陰性對照組。
3.5.2實驗方法與結(jié)果取Wistar大白鼠80只(體重♂77-126、♀84-113)，隨機分為4組，每組20只、雌雄各半。每周稱一次體重和剩食，計算其食物攝入量及食物利用率；連續(xù)喂養(yǎng)30天后，禁食12-16小時眼球取血，進(jìn)行血液學(xué)(東亞KX-21型全血細(xì)胞計數(shù)儀)、生化學(xué)檢查(貝克曼CX9型全自動生化儀及配套試劑)，解剖取肝、腎、脾、睪丸等臟器稱重，計算臟體比，并對主要臟器進(jìn)行病理組織學(xué)檢查。整個試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用《中國醫(yī)學(xué)百科全書—醫(yī)學(xué)統(tǒng)計學(xué)》統(tǒng)計軟件包，進(jìn)行統(tǒng)計分析。
3.5.2.1生長情況及食物利用率(見表6、表7)表6各實驗組動物體重增長情況(單位g)組別動物數(shù) 0周1周 2周 3周 4周♂對照組 10 100.8±8.9 137.3±11.8 181.4±12.6 223.7±13.8 270.4±16.9低劑量 10 103.9±13.8144.9±18.1 187.3±29.3 228.6±33.5 277.3±29.0中劑量 10 103.3±15.9140.3±18.8 182.3±21.4 220.8±20.7 264.2±25.2高劑量 10 106.1±8.4 145.4±11.1 187.2±19.4 225.2±20.7 267.9±21.1♀對照組 10 98.3±9.9 130.0±11.7 156.2±11.1 175.7±8.5 196.7±9.4低劑量 10 102.4±7.5 130.8±7.5 153.6±6.3 171.6±7.5 186.9±13.6中劑量 10 98.4±9.5 125.0±11.0 149.9±12.6 170.2±12.2 195.5±13.5高劑量 10 102.8±10.1129.9±10.1 152.4±12.0 167.6±12.0 187.0±11.8由上表結(jié)果表明，各試驗組與對照組相比較，經(jīng)方差分析(P＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
表7各實驗組動物食物利用率結(jié)果組別動物數(shù) 總增重 總進(jìn)食食物利用率(只)(g)(g) (％)對照組10 169.6±11.96 527.8±28.61 32.12±1.20♂低劑量10 173.4±20.53 537.3±65.49 32.41±1.36中劑量10 160.9±15.54 519.5±31.93 30.94±2.71高劑量10 161.8±18.03 525.4±35.55 30.70±1.84對照組10 98.4±10.64423.8±26.44 23.17±3.31低劑量10 84.5±14.56406.6±28.37 21.61±2.28♀中劑量10 97.1±8.31 403.5±25.97 23.39±1.74高劑量10 84.2±11.86412.4±29.96 20.39±2.58上表結(jié)果表明，各試驗組與對照組相比較，經(jīng)方差分析(P＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
3.5.2.2血液學(xué)檢查(見表8、表9)表8血常規(guī)測定結(jié)果組別 動物數(shù) WBC(109/L) RBC(1012/L)HGB(g/L) PLT(109/L)對照組 10 8.44±2.28 6.50±0.58139.8±6.7 840.9±69.0低劑量 10 7.34±1.53 6.13±0.85132.6±10.9 821.2±162.7♂中劑量 10 7.18±1.24 5.52±1.52133.0±9.33 853.1±146.4高劑量 10 6.97±2.05 6.87±0.26144.7±9.63 903.0±58.9對照組 10 5.92±2.81 6.09±1.16135.9±7.09 864.7±237.1低劑量 10 4.98±1.11 5.77±0.66127.5±6.34 885.0±84.8♀中劑量 10 6.84±1.61 6.39±0.46134.3±8.57 921.7±132.7高劑量 10 6.49±3.12 6.13±0.51132.3±9.07 846.9±122.0以上結(jié)果可見，各實驗組與對照組大鼠的各項指標(biāo)相比較，經(jīng)方差分析(p＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
表9白細(xì)胞分類結(jié)果組別 動物數(shù)(只) LYM(％)NEUT(％)對照組 100.84±0.07 0.16±0.07♂低劑量 100.87±0.09 0.13±0.09中劑量 100.84±0.12 0.16±0.12高劑量 100.81±0.11 0.19±0.11對照組 100.93±0.07 0.07±0.07♀低劑量 100.86±0.12 0.14±0.12中劑量 100.91±0.11 0.09±0.11高劑量 100.80±0.14 0.20±0.14以上結(jié)果可見，各實驗組與對照組大鼠的白細(xì)胞分類指標(biāo)，經(jīng)方差分析，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
3.5.2.3生化學(xué)檢查表10生化檢測結(jié)果組別 動物數(shù)ALT(IU/L) BUN(mmol/L) Gr(umol/L)BG(mmol/L)AST(U/L)對照組 10 54.20±6.34 5.75±1.11 41.80±2.74 5.45±0.68 107.60±10.24低劑量 10 51.90±9.23 5.12±1.08 40.70±2.11 5.28±0.42 98.00±8.27♂中劑量 10 50.30±8.96 4.60±0.56 41.20±3.56 5.01±0.38 105.40±14.17高劑量 10 45.60±4.90 4.57±0.58 42.30±3.13 5.62±0.64 85.50±4.84對照組 10 43.80±6.44 5.40±0.70 42.00±2.62 6.09±0.80 100.10±15.19低劑量 10 42.90±9.10 5.00±0.76 42.50±4.40 6.08±0.35 75.50±11.77♀中劑量 10 39.50±8.95 5.43±0.94 38.30±4.42* 5.43±0.94 89.00±7.83高劑量 10 37.30±6.41 5.02±0.59 36.60±1.84** 6.20±0.68 79.80±8.30表11生化檢測結(jié)果組別 動物數(shù) 總蛋白(g/L) 白蛋白(g/l) 甘油三脂(mmol/L) 總膽固醇(mmol/l)對照組 10 59.40±1.58 18.40±0.52 0.78±0.16 0.98±0.09低劑量 10 55.80±1.48* 17.50±0.85 0.83±0.12 0.90±0.11♂中劑量 10 58.00±2.36 18.00±1.76 0.87±0.13 0.90±0.12高劑量 10 59.80±3.22 18.80±1.03 0.91±0.26 0.95±0.10對照組 10 58.60±3.53 20.20±1.13 0.68±0.25 0.74±0.11低劑量 10 55.90±2.88 19.30±1.25 0.75±0.45 0.66±0.13♀中劑量 10 57.10±3.69 19.50±1.35 0.66±0.16 0.65±0.09高劑量 10 55.70±3.13 18.90±1.20 0.36±0.08 0.60±0.07以上生化結(jié)果表明，除雌性中、高劑量組肌酐值高于對照組，雄性低劑量組總蛋白低于對照組，經(jīng)方差分析(P＜0.05)其余生化值各實驗組與對照組相比較，經(jīng)方差分析，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
3.5.2.4臟體比結(jié)果(見表12)表12各劑量組小鼠臟體比值組別 動物數(shù)肝體比 腎體比 脾體比睪體比(只) (％)(％) (％)卵體比(％)對照組 103.44±0.27 0.67±0.050.26±0.030.96±0.07低劑量 103.62±0.26 0.70±0.040.28±0.070.93±0.09♂中劑量 103.33±0.15 0.71±0.020.27±0.041.01±0.10高劑量 103.25±0.24 0.72±0.060.25±0.010.99±0.06對照組 103.20±0.19 0.67±0.030.27±0.03低劑量 103.22±0.23 0.65±0.030.29±0.03♀中劑量 103.18±0.17 0.67±0.060.28±0.03高劑量 103.19±0.24 0.70±0.100.29±0.03以上結(jié)果表明。各實驗組大鼠主要臟體比與對照組相比較，經(jīng)方差分析(P＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
3.5.2.5病理組織學(xué)檢查各組動物大體檢查未見異常，肝、腎、脾、胃、腸、睪丸、等臟器的病理組織學(xué)檢查結(jié)果未見到與實驗因素(受試物)有關(guān)的病變。
各組大鼠肝臟皆可見到小膽管輕度增生，但在程度和范圍上組間無明顯差異。小結(jié)樣品對雌雄大、小白鼠的急性經(jīng)口LD50均大于10g/kg；微核試驗、精子畸形試驗和Ames試驗結(jié)果均為陰性，無致突變作用；30天喂養(yǎng)試驗結(jié)果，實驗動物生長情況正常，血液學(xué)檢查、生化檢查、主要臟體比及病理組織學(xué)檢查結(jié)果與對照組相比較，無異常。綜上所述，樣品按以上劑量給予動物，對大、小鼠的各項觀察指標(biāo)未產(chǎn)生明顯毒性作用。
三、穩(wěn)定性實驗三批茶多酚軟膠囊供試樣品，在30±2℃，相對濕度60％±5％條件下，在保存時間為零月、一月、二月、三月時分別抽樣，做零月批次、一月批次、二月批次、三月批次的穩(wěn)定性實驗。實驗結(jié)果表明茶多酚、大豆磷脂、維生素E、酸價、過氧化值、羰基價、黃曲霉素B1、菌落總數(shù)、大腸桿菌、霉菌、酵母菌、致病菌均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。
權(quán)利要求
1.一種茶多酚軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其特征在于囊心物按重量百分比含有5～60％的茶多酚、0～20％大豆磷脂、0～2％的維生素E、0～15％的囊化穩(wěn)定劑和余量的稀釋劑。
2.一種茶多酚軟膠囊，包括囊心物和囊殼，其特征在于囊心物按重量百分比含有5～60％的茶多酚、2～20％大豆磷脂、0.5～2％的維生素E、0～15％的囊化穩(wěn)定劑和余量的稀釋劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的茶多酚軟膠囊，其特征在于稀釋劑為花生油、豆油、紅花油、沙棘油、茶油、色拉油、聚乙二醇400、玉米油等中的一種或一種以上；或/和，囊化穩(wěn)定劑為蜂蠟、羊脂、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙二醇單硬脂酸脂、吐溫-80、聚乙二醇1000～6000、泊洛沙姆188～407中的一種或一種以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的茶多酚軟膠囊，其特征在于囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、0～3％的聚乙二醇400、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.1％的矯味劑和余量的水。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的茶多酚軟膠囊，其特征在于囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、0～3％的聚乙二醇400、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.1％的矯味劑和余量的水。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的茶多酚軟膠囊，其特征在于增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上；或/和，防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上；或/和，遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上；或/和，色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上；或/和，矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、薄荷腦中的一種或一種以上。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的茶多酚軟膠囊，其特征在于增塑劑是甘油、山梨醇中的一種或一種以上；或/和，防腐劑是對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯、對羥基苯甲酸丁酯中的一種或一種以上；或/和，遮蔽劑是二氧化鈦、硫酸鋇、氧化鐵、沉降碳酸鈣中的一種或一種以上；或/和，色素是檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、可可棕、炭黑、果綠中的一種或一種以上；或/和，矯味劑是乙基香蘭醛、香精油、薄荷腦中的一種或一種以上。
8.一種根據(jù)權(quán)利要求1、2、5、6或7所述的茶多酚軟膠囊制備工藝，其特征在于按下述步驟進(jìn)行其包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制，其中囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不銹鋼鍋內(nèi)攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不銹鋼夾層鍋內(nèi)，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹后加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態(tài)下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續(xù)減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；囊心物制備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入大豆磷脂、穩(wěn)定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入維生素E攪拌均勻；將茶多酚加入混合液中攪拌均勻并使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉(zhuǎn)模壓法壓制軟膠囊；然后進(jìn)行洗丸、干燥、包裝得到茶多酚軟膠囊。
9.一種根據(jù)權(quán)利要求3所述的茶多酚軟膠囊制備工藝，其特征在于按下述步驟進(jìn)行其包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制，其中囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不銹鋼鍋內(nèi)攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不銹鋼夾層鍋內(nèi)，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹后加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態(tài)下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續(xù)減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；囊心物制備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入大豆磷脂、穩(wěn)定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入維生素E攪拌均勻；將茶多酚加入混合液中攪拌均勻并使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉(zhuǎn)模壓法壓制軟膠囊；然后進(jìn)行洗丸、干燥、包裝得到茶多酚軟膠囊。
10.一種根據(jù)權(quán)利要求4所述的茶多酚軟膠囊制備工藝，其特征在于按下述步驟進(jìn)行其包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制，其中囊殼制備將所需量的水、增塑劑、聚乙二醇400、防腐劑加入具有攪拌減壓裝置的夾層不銹鋼鍋內(nèi)攪拌均勻，做為第一液體；將所需量的明膠加入到盛有第一液體的不銹鋼夾層鍋內(nèi)，溫度控制在室溫不斷減壓攪拌，待明膠粒膨脹后加熱至50～80℃使明膠粒全部融溶；在攪拌狀態(tài)下加入所需量的遮蔽劑、色素，繼續(xù)減壓攪拌30～120分鐘；均勻融溶液過濾，將濾液保溫靜置或減壓脫氣待用；囊心物制備將稀釋劑加熱至25～85℃，加入大豆磷脂、穩(wěn)定劑混合均勻；待溫度降至25～35℃時，加入維生素E攪拌均勻；將茶多酚加入混合液中攪拌均勻并使降至室溫，過膠體磨放置使脫氣；軟膠囊壓制將囊心物放入儲液糟中，使用旋轉(zhuǎn)模壓法壓制軟膠囊；然后進(jìn)行洗丸、干燥、包裝得到茶多酚軟膠囊。
全文摘要
一種茶多酚軟膠囊，其包括囊心物和囊殼。其囊心物按重量百分比含有5～60％的茶多酚、0～20％大豆磷脂、0～2％的維生素E、0～15％的囊化穩(wěn)定劑和余量的稀釋劑。其囊殼按原料重量百分比含有35～45％的明膠、0～3％的聚乙二醇400、18～22％的增塑劑、0.08～0.11％的防腐劑、0～1％的遮蔽劑、0～0.35％的色素、0～0.1％的矯味劑和余量的水。上述茶多酚軟膠囊的制備工藝包括囊殼制備、囊心物制備和軟膠囊壓制。本發(fā)明茶多酚軟膠囊，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，相對其它劑型其生物利用度更高、吸收更好，在臨床劑量條件下是安全的，具有降血脂、抗癌、抗自由基氧化、抗動脈粥樣硬化、促進(jìn)VitC的吸收，防治壞血病等作用。
文檔編號A61P3/06GK1476830SQ0313290
公開日2004年2月25日 申請日期2003年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2003年7月17日
發(fā)明者陶亮, 馮崴, 肖健民, 云琦, 王玉龍, 陶 亮 申請人:新疆特豐藥業(yè)股份有限公司