專(zhuān)利名稱：一種藏藥的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藏藥的制備方法，特別是涉及一種治療消化系統(tǒng)疾病的藏藥制劑的制備方法。
“石榴健胃丸”、“石榴健胃散”是藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)收載品種，由石榴子、蓽茇、紅花、肉桂、豆蔻五味藥組成，臨床應(yīng)用多年，具有溫胃益火、化滯降溫、溫通脈道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹瀉。這兩種藥品在藏藥方中堪稱組方精當(dāng)之劑，具有組方合理、配伍嚴(yán)謹(jǐn)、療效顯著、服用量小、主治征候明確、所用藥物易得等諸多優(yōu)點(diǎn)。
藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)收載的“石榴健胃丸”屬水泛丸劑，崩解慢，藥效緩慢，而且放久后質(zhì)堅(jiān)硬，難以嚼碎，此外含較多揮發(fā)油，口感苦澀、辛辣，給患者服用帶來(lái)諸多不便，限制了該藥的推廣使用。
藏藥部頒標(biāo)準(zhǔn)收載的“石榴健胃散”是國(guó)家中藥保護(hù)品種，制法簡(jiǎn)便，具有易分散、奏效快的特點(diǎn)。但石榴健胃散由于藥物粉碎后比表面積較大，故其嗅味、刺激性、吸濕性及化學(xué)活動(dòng)性等也相應(yīng)地增加，使得藥物穩(wěn)定性降低，方中揮發(fā)性成分易散失，而且依然存在口感不適、服用不便的缺點(diǎn)。
藏藥傳統(tǒng)制劑石榴健胃丸由石榴子、蓽茇、紅花、肉桂、豆蔻五味藥組成，方中石榴子為君藥。
處方中藏藥石榴子種皮含有機(jī)酸類(lèi)成分，種仁主含脂肪油、雌二醇激素。石榴子脂肪油不溶于水，可采用乙醇提取。石榴子又含鞣質(zhì)，其中含訶子酸、原訶子酸、沒(méi)食子酸、等化學(xué)成分，均為水溶性成分，故又可采用水提。由于未見(jiàn)與本品相關(guān)的藥理試驗(yàn)研究報(bào)道，對(duì)石榴子進(jìn)行了提取工藝的化學(xué)藥理初步試驗(yàn)研究。
采用不同極性大小的乙醇、氯仿對(duì)500克石榴子進(jìn)行了提取分離，提取流程見(jiàn)說(shuō)明書(shū)附2，制備出相應(yīng)的石榴子提取部位A(乙醇提取物)、提取部位B(氯仿提取物)和提取部位C(水提取物)，供藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)的樣品。制得水提物浸膏500g藥材提取33g，收膏率為6.6％；氯仿浸膏相當(dāng)于200g藥材提取1g，收膏率為0.5％；醇提物浸膏相當(dāng)于300g藥材提取25.5g收膏率為8.5％。
為了進(jìn)一步確定提取路線，保證制劑療效和減少服用量，采用小鼠止瀉試驗(yàn)進(jìn)行對(duì)比篩選。根據(jù)藥典規(guī)定石榴用量為5~12g，即人用量為12g/50kg，相當(dāng)于0.24g/kg。根據(jù)出膏率計(jì)算并且分別配制三種浸膏人用量的10倍、30倍。陽(yáng)性對(duì)照藥硫酸阿托品(廠家江蘇鹽城制藥有限公司“蘇衛(wèi)藥準(zhǔn)字1982第276803號(hào)”批號(hào)20000701規(guī)格0.3mg*100)配制溶度5片/30ml即5mg/100ml。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明氯仿提取物的兩個(gè)劑量組能明顯(p＜0.01)地延長(zhǎng)小鼠出現(xiàn)稀便潛伏期，并且其高劑量組也能明顯(p＜0.05)減少小鼠排便的次數(shù)。氯仿提取物低及高兩個(gè)劑量組對(duì)小鼠小腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)有抑制作用，此外，水提物低劑量組及醇提物低劑量組也出現(xiàn)此趨勢(shì)但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即石榴子不同提取物對(duì)正常小鼠推進(jìn)運(yùn)動(dòng)無(wú)明顯影響。各給藥組的高劑量組均有抑制新斯的明致小鼠亢進(jìn)作用，以水提取物最為顯著，其效果次序?yàn)樗崛∥锔邉┝拷M＞氯仿提取物高劑量組＞乙醇提取物提高劑量組＞氯仿提取物提低劑量組＞乙醇提取物低劑量組＞水提取物低劑量組。
對(duì)石榴子進(jìn)行植物化學(xué)預(yù)試試驗(yàn)。取石榴子藥材150g，用5倍量70％乙醇提取3次，每次2小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至20ml無(wú)醇味，用40ml，30ml，30ml石油醚(60～90℃)分次萃取，萃取液揮發(fā)得藥材油脂部分。萃取殘留物加在28*4cm的聚酰胺柱上，加水2000ml水洗至無(wú)色，水洗液濃縮至40ml，得試樣1；用50％乙醇1500ml洗至近無(wú)色，洗脫液減壓濃縮，殘?jiān)鼡]干，50％乙醇40ml溶解，得試樣2；再用95％乙醇1000ml洗脫至無(wú)色，洗脫液減壓濃縮，殘?jiān)?5％乙醇40ml使溶解，得試樣3。結(jié)果表明在試樣2中有皂苷類(lèi)成分存在。故對(duì)方中石榴子的提取工藝采用乙醇進(jìn)行提取，才能將其抗腹瀉有效組分提取出來(lái)，以保證臨床療效。
處方中紅花含紅花醌甙、新紅花甙、紅花甙和6-羥基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黃酮類(lèi)成分，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道6-羥基山柰酚-3-O-葡萄糖苷等黃酮類(lèi)具有抗炎作用，而該類(lèi)成分在甲醇和乙醇中的溶解性大于水，可采用乙醇提取。
處方中肉桂、豆蔻、蓽茇含揮發(fā)油。肉桂揮發(fā)油具抗?jié)?，調(diào)整平滑肌功能，利膽，止瀉的作用；豆蔻含桉油精等成分，理氣止嘔，消除胃脘脹悶。由于以上兩味的水溶性成分具有抗炎等藥理作用，在臨床中廣泛運(yùn)用，均為本方的有效組分，有必要使其有效成分充分提取。因而擬定將以上三味首先提取揮發(fā)油，然后再將藥液保存?zhèn)溆?。肉桂、豆蔻主要含揮發(fā)油，在水中溶解較小，故采用采用水蒸汽蒸餾后，再進(jìn)行水提或醇提工藝。蓽茇含胡椒堿、棕櫚酸等，具促進(jìn)膽固醇酯化和排泄的功效，而胡椒堿水中溶解性差，且遇熱、光不穩(wěn)定，因而考慮打粉直接加入。
為了進(jìn)一步確定提取工藝路線，保證制劑療效和減少服用量，對(duì)處方藥物的四種不同提取工藝路線進(jìn)行了樣品制備，并采用藥效學(xué)指標(biāo)作篩選試驗(yàn)。
采用醇提法制得樣品a將肉桂、豆蔻、蓽茇粉碎成粗粉，取石榴子、紅花，加8倍量83％乙醇提取3次，每次1小時(shí)，提取液濾過(guò)。濾液減壓濃縮成清膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉。
采用部分醇提法制得樣品b取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小時(shí)，收集揮發(fā)油。濾過(guò)，濾液備用。另取石榴子、紅花加6倍量83％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，分次濾過(guò)，合并兩次提取液，濾液回收乙醇后，濃縮至相對(duì)密度為1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。將上述兩種干膏粉碎成80目細(xì)粉混勻。蓽茇粉碎成細(xì)粉，與干膏混勻，再加入揮發(fā)油混勻。
采用綜合醇提法制得樣品c取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍量水提取4小時(shí)，收集揮發(fā)油。濾過(guò)，濾液備用。另取石榴子、紅花加83％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，分次濾過(guò)，合并兩次提取液，濾液回收乙醇后，濃縮至相對(duì)密度為1.30~1.35(60℃)的稠膏，干燥。將石榴子、紅花醇提取藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣，加6倍水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，分次濾過(guò)，合并煎液，并與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮干燥。將上述干膏粉碎成80目細(xì)粉混勻。蓽茇粉碎成細(xì)粉，與干膏和揮發(fā)油混勻。
采用部分水提法制得樣品d取肉桂、豆蔻粉碎成粗粉，加10倍水提取4小時(shí)，收集揮發(fā)油。濾過(guò)，濾液備用。石榴子、紅花水提3次、每次1小時(shí)每次加8倍量水，濾過(guò)。濾液濃縮成浸膏，再真空干燥成干浸膏，粉碎成細(xì)粉。將上述兩種干膏粉碎成80目細(xì)粉混勻，蓽茇粉碎成細(xì)粉，與干膏混勻，加入揮發(fā)油混勻。
對(duì)上述四種樣品進(jìn)行藥理篩選，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下表1 石榴健胃片不同提取方法對(duì)蓖麻油所致小鼠腹瀉的影響劑量給藥后排便次數(shù)(x±s)組別(mg/潛伏期 總數(shù) 1h 2h 3h4h5h6hkg)空白對(duì)96.14± 9.71± 0.43±2.71± 1.71± 0.93± 0.43± 0.21±照組- 25.32 3.22 1.16 1.90 0.83 1.07 0.76 0.58陽(yáng)性對(duì) 1.0 111.71± 7.57± 1.07±1.92±2.00± 1.36± 0.93± 0.36±照組 79.17* 3.27 1.90 1.69 1.47 1.45 0.92 0.74*a低劑 124.75± 6.00± 0.92±2.33± 1.58± 0.67± 0.42± 0.08±量組 105.13**2.98**1.38 1.50 1.56 0.78 0.67 0.29**a高劑 134.83± 6.33± 0.58±1.17±2.00± 1.33± 1.08± 0.17±量組 88.11** 3.42* 1.08*1.70*1.54 1.44 1.24 0.39**b低劑 111.00± 8.16 0.33±2.25± 2.17± 0.50± 0.50± 0.58±量組 54.77* ±3.130.78** 2.49 1.62 0.67* 0.67 0.67b高劑 104.00± 6.00± 0.33± 1.92±2.08± 0.92± 0.42± 0.33±量組 49.71 3.25**0.78** 2.07 1.93 0.79 0.67 0.78*c高劑 126.42± 6.67± 0.92±2.25± 1.92± 0.92± 0.58± 0.08±量組 86.22** 3.17* 1.78 2.45 1.38 0.90 0.90 0.29**
d低劑106.83± 7.50±1.33± 2.50±1.58±0.67±0.58±0.50±量組 94.48*4.80 2.57 2.11 0.79 0.78 1.08 0.67d高劑90.42±5.91± 1.08± 2.00±1.33±0.58±0.50±0.42±量組 34.98 2.16**1.44 1.35 1.50 0.79 0.90 0.79*p＜0.05； **p＜0.01表2不同提取方法對(duì)新斯的明所致小鼠腸亢進(jìn)模型的影響組別 劑量(mg/kg) 動(dòng)物數(shù)(只) 推進(jìn)百分率(x±s)空白對(duì)照組- 13 0.66±0.15陽(yáng)性對(duì)照組 1.00 10 0.55±0.13A低劑量組 90.49±0.07*A高劑量組 90.51±0.13*B低劑量組 10 0.48±0.15**B高劑量組 90.50±0.16*C低劑量組 10 0.44±0.12**C高劑量組 10 0.44±0.13**D低劑量組 10 0.56±0.19D高劑量組 11 0.55±0.19*p＜0.05； **p＜0.01實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，四種樣品對(duì)腹瀉均有止瀉作用，在相同劑量下，所試樣品止瀉作用強(qiáng)度有如下大致規(guī)律樣品c＞樣品b＞樣品a＞樣品d，樣品c即綜合醇提法效果最好，故本發(fā)明確定為綜合提取工藝。
本品中揮發(fā)油含量較多，為了為減少揮發(fā)油散失，增加揮發(fā)油成分的穩(wěn)定性，提高藥品質(zhì)量，保證療效，可采用β-環(huán)糊精包結(jié)復(fù)方中的揮發(fā)油，可采用飽和水溶液法包結(jié)。
取肉桂、豆蔻一定量，過(guò)10目篩，加10倍量的水浸泡5小時(shí)后，加熱煮沸提取5小時(shí)，將揮發(fā)油加無(wú)水硫酸鈉脫水。稱取適量β-環(huán)糊精，β-環(huán)糊精與水以1∶10的比例加熱溶解于水中制成飽和溶液，保持35℃恒溫。在攪拌速度800轉(zhuǎn)/分下，用移液管量取復(fù)方揮發(fā)油1ml，緩慢滴加入一定量的β-環(huán)糊精水飽和溶液中，用攪拌器攪拌包結(jié)1小時(shí)，取出置冰箱中冷藏24小時(shí)，20ml，10ml，10ml乙醚洗滌三次，冷風(fēng)吹干，在干燥器中放置一日，即得揮發(fā)油的β-環(huán)糊精包結(jié)物。
對(duì)包結(jié)前后揮發(fā)油進(jìn)行薄層色譜及氣質(zhì)聯(lián)用分析得知，復(fù)方的揮發(fā)油經(jīng)β-環(huán)糊精包結(jié)后組分沒(méi)有明顯變化。
由于復(fù)方揮發(fā)油中以肉桂油含量最多，而桂皮醛占肉桂油的75％~85％，因而考慮用桂皮醛的包合率作為考察指標(biāo)的一個(gè)重要因素，其中桂皮醛含量包合前較包合后基本相同。
采用紅外光譜法考察揮發(fā)油中桂皮醛的包合程度。對(duì)β-環(huán)糊精，石榴子揮發(fā)油包合物，復(fù)方揮發(fā)油進(jìn)行紅外光譜的測(cè)定。通過(guò)比較包合前后紅外線取特征吸收峰的變化，揮發(fā)油包合物，整個(gè)包合物主要呈現(xiàn)β-CD的紅外光譜圖形，其在1700nm處芳香骨架的特征紅外峰幾乎消失。
利用高效液相色譜法考察揮發(fā)油中桂皮醛的保留率。在三個(gè)月中，分別精密稱取2個(gè)批號(hào)的揮發(fā)油包合物15mg左右，25ml乙醇超聲30min，離心(5000轉(zhuǎn)/分)，取上清液于10ml容量瓶中，吸取20ul注入高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算每克揮發(fā)油包合物中桂皮醛含量，結(jié)果如下樣品號(hào) 0月(mg) 1月(mg) 2月(mg) 3月(mg)批1 39.1 34.2 31.5 28.3批2 42.9 35.2 33.6 27.9結(jié)果表明，3個(gè)月內(nèi)，桂皮醛峰形無(wú)大的改變，且桂皮醛含量衰減不到一半，說(shuō)明包合物能減少揮發(fā)油的散失與變化，保證揮發(fā)油制劑的穩(wěn)定性。
本發(fā)明涉及的藥物由于揮發(fā)油含量較多，故不適合制成口服液等液體制劑，可根據(jù)需要添加輔料，依常規(guī)制劑技術(shù)，制成片劑、膠囊劑型。
本發(fā)明制得的浸膏粉由于其中所含油脂類(lèi)成分較多，水分難以進(jìn)入，故若制成片劑，片劑崩解較為困難，需要添加崩解劑。淀粉、羧甲淀粉鈉(CMS-Na)、低取代羥丙基纖維素(L-HPC)和微晶纖維素(MCC)是常用的片劑崩解劑，都可應(yīng)用于本品，經(jīng)崩解實(shí)驗(yàn)證明其中尤以羧甲淀粉鈉、微晶纖維素二者配合使用效果最好，片劑崩解速度快。
為了改善本品制成普通片劑的溶出性能，提高生物有效性，可以將本品制成分散片。
本發(fā)明涉及的藥物可制成膠囊劑型，包括硬膠囊、軟膠囊。
普通劑型揮發(fā)油容易散失，可選擇將本品進(jìn)行薄膜包衣，增加穩(wěn)定性且外形美觀。
為了檢驗(yàn)本發(fā)明的藥效作用，結(jié)合具體實(shí)施例，與石榴健胃丸進(jìn)行了對(duì)比性的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。
石榴子 326g 蓽茇 32.6g 肉桂 52g紅花163g 豆蔻 26g蓽茇粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，備用。肉桂、豆蔻以水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾后的水溶液濾過(guò)，濾液與殘?jiān)謩e另器收集備用。揮發(fā)油用β-環(huán)糊精飽和水溶液混合，攪勻，冷藏過(guò)夜，濾過(guò)，干燥。取石榴子、紅花加85％乙醇回流提取二次，提取時(shí)間分別為60分鐘、40分鐘。濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇并減壓濃縮至相對(duì)密度約為1.10(室溫)的清膏。將乙醇提取后的藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣合并，加水煎煮二次，第一次60分鐘，第二次30分鐘，濾過(guò)，濾液與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮至相對(duì)密度為1.10(室溫)的清膏。將上述兩種清膏噴霧干燥成細(xì)粉，加入蓽茇細(xì)粉、羧甲淀粉鈉、微晶纖維素、十二烷基硫酸鈉、75％乙醇、微粉硅膠適量，混勻，制成顆粒，干燥，加入揮發(fā)油包合物，混勻，壓片，制成石榴健胃片。
研究結(jié)論如下1.石榴健胃片0.9、1.8g/kg劑量對(duì)蓖麻油所致小鼠腹瀉有明顯的止瀉作用(P＜0.01)，而石榴健胃丸0.45、0.9g/kg劑量對(duì)蓖麻油所致小鼠腹瀉有良好的止瀉作用(P＜0.05～0.01)。
2.2.石榴健胃片0.45、0.9g、1.8g/kg3個(gè)劑量組對(duì)番瀉葉所致小鼠腹瀉都有明顯的止瀉作用(P＜0.05～0.01)，而石榴健胃丸0.9g、1.8g/kg對(duì)番瀉葉所致小鼠腹瀉都有明顯的止瀉作用(P＜0.01)。
3.石榴健胃片0.9g/kg可促進(jìn)小鼠的胃排空運(yùn)動(dòng)(P＜0.05)，而石榴健胃丸0.45g/kg也可促進(jìn)小鼠的胃排空運(yùn)動(dòng)(P＜0.01)。
4.石榴健胃片0.9g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可抑制正常小鼠的小腸的推進(jìn)動(dòng)(p＜0.05)。
5.石榴健胃片0.45、0.9g/kg和石榴健胃丸0.45、0.9g/kg可明顯抑制新斯的明致小鼠腸亢進(jìn)模型的腸推進(jìn)運(yùn)動(dòng)(p＜0.05～0.01)。
6.石榴健胃片0.9、1.8g/kg和石榴健胃丸1.8g/kg可促進(jìn)大鼠胃液的分泌(P＜0.05)，使胃酸度和胃蛋白的活性增加(P＜0.05～0.01)。
以上實(shí)驗(yàn)表明，石榴健胃丸的新劑型石榴健胃片完全保留了石榴健胃丸的藥效作用，并且該片劑劑型有效成分保持率較高，用量小，起效快。此外石榴健胃片改善了原劑型的苦澀辛辣口感，服用方便，貯運(yùn)方便。
圖2為石榴子藥效學(xué)篩選樣品提取流程圖
權(quán)利要求
1.一種藏藥的制備方法，其特征是以下述重量配比的原料組分按下述制法制成A、石榴子55重量份、肉桂9重量份、蓽茇5重量份、紅花27重量份、豆蔻4重量份；B、蓽茇粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，備用；肉桂、豆蔻以水蒸氣蒸餾法提取揮發(fā)油，蒸餾的水溶液濾過(guò)，濾液與殘?jiān)謩e另器收集備用；石榴子、紅花用乙醇提取二至三次，濾過(guò)，合并濾液，回收乙醇并減壓濃縮成清膏；將乙醇提取后的藥渣與提取揮發(fā)油后的藥渣合并，加水煎煮提取，濾過(guò)，濾液與提取揮發(fā)油的濾液合并，濃縮成清膏；將上述兩種清膏噴霧干燥成細(xì)粉，加入蓽茇細(xì)粉和適量輔料，混勻，制成顆粒，干燥，加入揮發(fā)油，混勻，制劑成型。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是肉桂、豆蔻加6-10倍量水浸泡3-5小時(shí)后提取揮發(fā)油；
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的揮發(fā)油的提取時(shí)間是3-6小時(shí)；
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是石榴子、紅花加60％-85％乙醇以回流法提取，每次提取時(shí)間為30-90分鐘；
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的藥渣加水提取的次數(shù)是1-3次，加水量是藥渣的4-8倍，每次提取時(shí)間是30-90分鐘；
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述的揮發(fā)油用β-環(huán)糊精包合；
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學(xué)所說(shuō)的膠囊劑劑型；
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學(xué)所說(shuō)的片劑劑型；
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征是壓片后薄膜包衣；
10.據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征是以羧甲淀粉鈉、微晶纖維素作為崩解劑；
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征是其所涉及的藥物制成藥劑學(xué)所說(shuō)的分散片劑型。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種藏藥的制備方法，該藥物以石榴子、肉桂、蓽茇、紅花、豆蔻為藥物組分，其制法包括提取肉桂、豆蔻揮發(fā)油，提取石榴子、紅花、肉桂、豆蔻有效成分，蓽茇粉碎直接加入。本發(fā)明涉及的藥物具有溫胃益火、化滯降溫、溫通脈道功效，主治消化不良、食欲不振、寒性腹瀉。
文檔編號(hào)A61P1/04GK1424085SQ0215644
公開(kāi)日2003年6月18日 申請(qǐng)日期2002年12月16日 優(yōu)先權(quán)日2002年12月16日
發(fā)明者張藝 申請(qǐng)人:北京正青星光生物醫(yī)學(xué)科技有限公司