專利名稱：雙羥萘酸或其一種衍生物或其一種類似物用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征 ...的制作方法
本文所述的發(fā)明涉及雙羥萘酸或其一種衍生物，或其一種類似物，或這些化合物的一種藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病的藥物的用途。
淀粉狀蛋白沉積和神經(jīng)元細(xì)胞骨架異常的存在是阿爾茨海默氏病(AD)最顯著的表現(xiàn)。這兩種事件在早期主要影響大腦皮層，盡管這種疾病的最終病變涉及整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)，它們是這種疾病發(fā)生的必要但本身并不充分的條件(Chen M.(1998)Frontiers in Bioscience(生物科學(xué)前沿)3a，32-37)。
一般地，不管形成淀粉狀蛋白的蛋白質(zhì)如何，所述物質(zhì)淀粉狀蛋白的特征是由測量直徑為7-8nm的纖維組成，對(duì)剛果紅具有親合力并不溶于水。在AD中，淀粉狀蛋白纖維在細(xì)胞外、腦細(xì)胞內(nèi)空間以及皮層和腦膜小動(dòng)脈中層內(nèi)蓄積，導(dǎo)致形成三種不同的肉眼可見的異常老年斑和彌散斑，它們?nèi)Q于圍繞中央淀粉狀蛋白沉積的神經(jīng)元突起的異常存在與否而不同，以及淀粉狀蛋白血管病，它是淀粉狀蛋白纖維浸潤到平滑肌纖維和內(nèi)彈性層之間的動(dòng)脈壁內(nèi)的表現(xiàn)。
除了形成淀粉狀蛋白和螺旋纖絲之外，已在患有AD的患者的皮層中檢測到非常嚴(yán)重的突觸稀疏。在此疾病的終末期大約80％-90％的神經(jīng)元接觸被破壞且這種異常實(shí)際上與癡呆具有病理學(xué)聯(lián)系。在分析癡呆傾向時(shí)，似乎可以肯定淀粉狀蛋白是疾病的早期、主要異常，而神經(jīng)內(nèi)螺旋纖絲是神經(jīng)元遇難的中間表現(xiàn)，它們最終喪失其突觸接觸，所導(dǎo)致的臨床效應(yīng)是精神智力功能惡化。
可溶形式的特定類型的β淀粉狀蛋白，βA1-42，至今認(rèn)為僅其聚集形式具有毒性，它與阿爾茨海默氏病人的記憶和認(rèn)知功能的漸進(jìn)性喪失有關(guān)。在疾病初期產(chǎn)生的βA1-42抑制促成提供乙酰輔酶A轉(zhuǎn)運(yùn)的ACh合成的丙酮酸脫氫酶的活性，減少神經(jīng)遞質(zhì)的釋放，改變突觸連接并造成導(dǎo)致疾病的膽堿能不足(Hoshi M.，Takashima A.，Murayama M.，Yasutake K.，Yoshida N.，Ishiguro K.，Hoshino T.，Imahori K.(1997)The Journal of Biological Chemistry(生物學(xué)化學(xué)雜志)2724，2038-2041)。
已知許多染料以特定的方式與淀粉狀蛋白纖維結(jié)合，其中最為重要的是剛果紅(CR)(Lorenzo A.和Yankner B.A，1994 PNAS 91；12243-12247)。
該染料導(dǎo)致淀粉狀蛋白纖維的雙折射增加，并產(chǎn)生指示染料和底物(纖維)之間的特異性相互作用的特征性圓二色性，從而有利于對(duì)組織中的淀粉樣變進(jìn)行診斷性檢測。
β-淀粉狀蛋白(βA)是由多種特定的酶對(duì)淀粉狀蛋白的前體(βAPP)的蛋白水解作用而產(chǎn)生的(Vassar R等人，1999 Science(科學(xué))286；735-740)。
β-淀粉狀蛋白片段可能誘導(dǎo)神經(jīng)毒性作用的機(jī)理是多樣的。首先，免疫組織化學(xué)研究已揭示老年斑中炎性白細(xì)胞介素(IL-1、IL-6)、補(bǔ)體因子、其它炎性因子和溶酶體水解酶的存在。已證明β-淀粉狀蛋白能夠刺激小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞合成和分泌IL-1、IL-6和IL-8，因而能夠激活急性炎癥的細(xì)胞毒性機(jī)制(Sabbagh M.N.，Galasko D.，Thal J.L.(1997)Alzheimer’s Disease Review(阿爾茨海默氏病綜述)3，1-19)。
以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病除阿爾茨海默氏病之外，包括唐氏綜合征、與“荷蘭型”淀粉樣變有關(guān)的遺傳性腦出血、與慢性炎癥有關(guān)的淀粉樣變、與多發(fā)性骨髓瘤和其它血B淋巴樣細(xì)胞惡液質(zhì)有關(guān)的淀粉樣變、與II型糖尿病有關(guān)的淀粉樣變、與朊病毒病有關(guān)的淀粉樣變?nèi)缈肆_伊茨費(fèi)爾特-雅各布病、格-施綜合征、庫魯病和綿羊癢病。
但是一般地，由βA導(dǎo)致的損害可以概括為1.淀粉狀蛋白產(chǎn)生異常；
2.神經(jīng)元對(duì)細(xì)胞外毒性的易感性增加；3.神經(jīng)元對(duì)低血糖損傷的易感性增加；4.鈣體內(nèi)平衡異常；5.氧化性損傷增加；6.炎癥機(jī)制激活；7.小神經(jīng)膠質(zhì)激活；8.誘導(dǎo)溶酶體蛋白酶；9.τ蛋白磷酸化異常；10.誘導(dǎo)凋亡；11.對(duì)膜的損傷。
從嚴(yán)格的理論觀點(diǎn)來講，降低βA誘導(dǎo)的損傷可以通過不同的治療途徑進(jìn)行1.使用分泌酶抑制劑改變APP代謝而降低βA產(chǎn)生(增加α或減少β和γ分泌酶)；2.防止或阻斷βA聚集；3.增加βA清除率；4.通過恢復(fù)鈣體內(nèi)平衡而阻斷βA的神經(jīng)毒性作用；5.防止自由基產(chǎn)生的毒性；6.防止細(xì)胞外毒性；7.減少由炎性反應(yīng)導(dǎo)致的損傷；8.糾正改變的銅-鋅平衡；9.抑制神經(jīng)元凋亡；(Sabbagh M.N.，Galasko D.，Thal J.L.(1997)Alzheimer’sDisease Review(阿爾茨海默氏病綜述)3，1-19)。
至今尚無特定的療法能夠預(yù)防、減緩或停止阿爾茨海默氏病潛在的淀粉狀蛋白產(chǎn)生過程。
實(shí)際上，目前用于治療這種疾病的療法僅僅針對(duì)癥狀，且它雖然作用于不同的方面，但基本上只是干擾調(diào)節(jié)學(xué)習(xí)和記憶的神經(jīng)遞質(zhì)機(jī)理。這些最常用的分子中有可逆性乙酰膽堿酯酶抑制劑如他克林、donezepil和利凡斯的明(rivastigmine)。
而且目前，可以獲得的用于診斷阿爾茨海默氏病的唯一診斷工具是行為檢查和臨床評(píng)分，而放射攝影或閃爍成像方法仍不能精確區(qū)分阿爾茨海默氏類型的退化和其它變性現(xiàn)象，其準(zhǔn)確的原因是缺乏適宜的示蹤。
在阿爾茨海默氏病的治療中遇到的困難、其嚴(yán)重性和在診斷中的困難使得人們期望鑒定能治愈該疾病或減緩其進(jìn)程的新藥，并期望發(fā)現(xiàn)用于對(duì)其進(jìn)行診斷的放射攝影或閃爍成像方法的化合物。
因此令人驚奇的是，雙羥萘酸，或其一種衍生物，或其一種類似物，或一種其藥學(xué)上可接受的鹽，或在文獻(xiàn)中所述和已知的該酸的衍生物已證明在治療和預(yù)防阿爾茨海默氏病和以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病中是潛在有效的藥物。
在此發(fā)現(xiàn)中，已發(fā)現(xiàn)新的雙羥萘酸衍生物，如以下所述，其在治療上述疾病中潛在有效，并已證明它是用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病的藥物的有用藥劑。
實(shí)際上，具有通式(I)的雙羥萘酸的衍生物 其中1R1＝R5＝-COOCH2C6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-2R1＝R5＝-COOCH(CH3)2
R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-3 R1＝R5＝-COOC2H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-4 R1＝R5＝-COOC6H11R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-5 R1＝R5＝-COOCH3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-6 R1＝R5＝-COOC(CH3)3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-在專利N°ES 432416中有所描述，而沒有描述或要求保護(hù)這些化合物的用途；7 R1＝R5＝-CONHC6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-在專利N° JP 7138347中描述上述化合物作為制備尼龍纖維的有用試劑；8 R1＝R5＝-CONH-CH(CH(CH3)2)-COOHR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-
在Reetz，Manfred T.等人；Chem.Commun，(Cambridge)(1998)，(19)，2075-2076中描述該化合物作為HIV-1蛋白酶抑制劑；9 R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OCOCH3R3＝-CH2-在Poupelin，Jean Pierre；Eur.J.Med.Chem.-Chim.Ther.(1978)，13(4)，381-5中描述該化合物作為具有抗炎活性的藥劑；10 R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OCOCH2CH3R3＝-CH2-在專利N° NE 1945254中描述了該化合物，指出此化合物的鹽與鏈霉素聯(lián)合使其作為治療結(jié)核的藥劑的效果更為持久；11 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOC6H5R3＝-CH2-12 R1＝R5＝-HR2＝R4＝ R3＝-CH2-在Dorogov，M.V.；Khim.Khim.Tekhnol.(1996)，39(4-5)，170-172中描述了該化合物，沒有說明它們的用途；13 R1＝R5＝-H
R2＝R4＝-OCOCH＝CH2R3＝-CH2-；在Kielkiewicz，Jedrzej等人；Polimery(Warsaw)(1984)，29(6)，216-19中描述了該化合物，沒有說明其用途；14 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-此化合物是1，1’-亞甲基-二(2-萘酚)，在US4,147,806中描述它是抗炎和止痛藥物。
15 R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-此化合物是雙羥萘酸；它被描述為用作藥物中的平衡離子，所述藥物作為抗驅(qū)蟲劑(雙羥萘酸噻嘧啶)使用，或者用于治療癌癥(雙羥萘酸奧曲肽)。
因此本文所述的本發(fā)明的目的是具有通式(I)的雙羥萘酸，或其一種衍生物，或其一種類似物，或這些化合物的一種藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病的藥物的用途 其中R1和R5，可以相同或不同，為COOR6、CONHR6、SO2R6、SO2NHR6、SO3R6、OR6、COR6、NHR6、R6；
其中R6為H或者具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈，或者苯基，被R7取代；其中R7為OH、COOH、SO3H、NR8R9， 其中R8和R9可以相同或不同，為H、具有1-5個(gè)碳原子的烷基；R2和R4可以相同或不同，為H、OH、NHR6、OCO-R10-NR8R9， 其中R10為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈；R3為-[CH2]n-、-CH2-O-、-CH(R11)-，其中n為1-4的整數(shù)，R11為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述基團(tuán)被氨基、烷基氨基C1-C5、二烷基氨基C1-C5、OH、烷氧基C1-C5取代。
在式(I)化合物中，優(yōu)選雙羥萘酸，特別是雙羧萘酸鈉。
本文所述的本發(fā)明的另一目的是上述的式(I)化合物用于制備診斷以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病的診斷試劑盒的用途。
實(shí)際上，本文所述的本發(fā)明的化合物在其分子結(jié)構(gòu)中包含在診斷成像方法中常用的元素的原子。例如，可以將碳、氫、氮、氧、碘和銦的放射性同位素引入它們的分子結(jié)構(gòu)。更準(zhǔn)確地說，式(I)化合物自身分子結(jié)構(gòu)中的至少一種元素，碳、氫、氮、氧可以被相應(yīng)的放射性同位素置換；或者它攜帶至少一個(gè)放射性碘原子；或者它是與放射性銦形成的絡(luò)合物的形式。
這些同位素可用于諸如PET(正電子發(fā)射斷層成像術(shù))、SPECT(單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層成像術(shù))和平面閃爍成像的技術(shù)。可選擇地，不管是否包含放射性同位素或用作輻射不透性物質(zhì)的元素的原子(如碘)，本發(fā)明的化合物可以用作在診斷成像技術(shù)中常用元素如釓(NMR)和锝(閃爍成像技術(shù))的絡(luò)合劑。
在此診斷應(yīng)用的基礎(chǔ)上，本發(fā)明的化合物還用于預(yù)防上述的疾病。
本文所述的本發(fā)明的另一目的是具有通式(I)的新化合物 其中R1和R5可以相同或不同，為COOR6、CONHR6、SO2R6、SO2NHR6、SO3R6、OR6、COR6、NHR6、R6；其中R6為H或具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈，或者苯基，被R7取代；其中R7為OH、COOH、SO3H、NR8R9， 其中R8和R9可以相同或不同，為H、具有1-5個(gè)碳原子的烷基；R2和R4可以相同或不同，為H、OH、NHR6、OCO-R10-NR8R9， 其中R10為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈；R3為-[CH2]n-、-CH2-O-、-CH(R11)-，其中n為1-4的整數(shù)，R11為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述基團(tuán)被氨基、烷基氨基C1-C5、二烷基氨基C1-C5、OH、烷氧基C1-C5取代；附帶條件是取代基R1、R2、R3、R4和R5不是1 R1＝R5＝-COOCH2C6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-2 R1＝R5＝-COOCH(CH3)2R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-3 R1＝R5＝-COOC2H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-4 R1＝R5＝-COOC6H11R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-5 R1＝R5＝-COOCH3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-6 R1＝R5＝-COOC(CH3)3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-
7R1＝R5＝-CONHC6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-11 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOC6H5R3＝-CH2-12 R1＝R5＝-HR2＝R4＝ R3＝-CH2-13 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOCH＝CH2R3＝-CH2-；14 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-15 R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-。
本文所述的本發(fā)明的另一目的是制備具有通式(I)的化合物的方法 其中R1和R5為-COOR6，
其中R2、R3、R4和R5具有上述的含義，其特征在于用鹵化劑如SOCl2或PCl5處理其中的R6為H的通式(I)化合物以得到相應(yīng)的酰氯，然后在攪拌下于25-60℃溫度范圍內(nèi)與R6-OH醇以1-6的摩爾比反應(yīng)2-24小時(shí)，或者在惰性無水溶劑如二甲基甲酰胺中與化學(xué)計(jì)算量的R6-OH反應(yīng)。
本文所述的本發(fā)明的另一目的是制備式(I)化合物的方法， 其中R1和R5為CONHR6；其中R2、R3、R4和R6具有上述含義，其特征在于用鹵化劑如SOCl2或PCl5處理其中的R6為H的通式(I)化合物以得到相應(yīng)的酰氯，或者用偶聯(lián)劑如DCC、EEDQ處理，然后在攪拌下，在25-60℃溫度范圍內(nèi)與R6-NH2胺以6-1的摩爾比反應(yīng)2-24小時(shí)，或在惰性無水溶劑中與化學(xué)計(jì)算量的R6-NH2反應(yīng)。
本文所述的本發(fā)明的另一目的是制備式(I)化合物的方法 其中R2和R4為OH；其中R1和R5為SO3R6、SO2NHR6；
R3為-CH(R11)-，其中R11具有上述含義；其特征在于該方法根據(jù)以下的反應(yīng)路線1進(jìn)行，其中使式“a”化合物與R11-CHO醛在冰醋酸中在90℃-150℃的溫度范圍內(nèi)反應(yīng)從而得到具有通式“b”的化合物，然后用鹵化劑如SOCl2或PCl5處理通式″b″化合物得到相應(yīng)的磺酰氯，隨后與R6-OH醇反應(yīng)得到具有通式″d″的化合物，或者與R6-NH2胺反應(yīng)得到具有通式″e(cuò)″的化合物；路線1 本文所述的本發(fā)明的另一目的是制備式(I)化合物的方法
其中R1、R2、R4和R5為OR6和/或NHR6；R3為-CH(R11)-，其中R6和R11具有上述含義；其特征在于該方法是根據(jù)以下的反應(yīng)路線2進(jìn)行的，其中使式A化合物與R11-CHO醛在酸性環(huán)境中如在乙酸中反應(yīng)得到對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)B、C和D的化合物的混合物，通過色譜法將它們分離并純化；在堿存在下使這些化合物與烷基鹵R6-X反應(yīng)，然后在酸性或堿性環(huán)境中去保護(hù)得到相應(yīng)的萘基醚E、F和G；用在硫酸中的NaNO2對(duì)后者進(jìn)行處理之后，得到化合物H、I和L；
路線2PG＝保護(hù)基(如乙?；?、甲苯磺?；?
本文所述的本發(fā)明的另一目的是包含具有通式(I)的化合物作為活性成分和藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或稀釋劑的藥物組合物 其中R1、R2、R3、R4和R5具有上述含義，附帶條件是R1、R2、R3、R4和R5不是1 R1＝R5＝-COOCH2C6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-2 R1＝R5＝-COOCH(CH3)2R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-3 R1＝R5＝-COOC2H5R2-R4＝-OHR3＝-CH2-4 R1＝R5＝-COOC6H11R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-5 R1＝R5＝-COOCH3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-6 R1＝R5＝-COOC(CH3)3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-
7 R1＝R5＝-CONHC6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-11R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOC6H5R3＝-CH2-12R1＝R5＝-HR2＝R4＝ R3＝-CH2-13R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOCH＝CH2R3＝-CH2-；14R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-15R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-。
本文以下給出多個(gè)進(jìn)一步例示本發(fā)明的實(shí)施例。
實(shí)施例1(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({3-羧基-1-[(3-羧基-2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨(ST1722)的制備
室溫下將2.39g(0.01mol)氯化乙酰L-肉堿、2ml無水CH2Cl2和1.1ml(0.015mol)亞硫酰氯的溶液攪拌4小時(shí)。除去溶劑并用無水CH2Cl2洗滌殘余固體三次。獲得一種油，即氯化乙酰L-肉堿的酰氯，將此化合物直接用于下一步驟。
將2.58g(0.01mol)氯化乙酰L-肉堿的酰氯、3.88g(0.01mol)雙羥萘酸和10ml N-甲基-2-吡咯烷二酮的懸浮液攪拌一夜。用乙醚沉淀后，得到一種黃色固體(7g)。使用硅膠柱色譜法純化如此得到的粗產(chǎn)物，首先用CH2Cl2-MeOH 90∶10洗脫以收集未反應(yīng)的雙羥萘酸，然后用CH2Cl2-MeOH 85∶15洗脫以收集產(chǎn)物。除去溶劑后，得到1.2克(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({3-羧基-1-[(3-羧基-2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨。
產(chǎn)率＝19.7％，M.P.＝185℃分解，[α]D20＝-17.5°，1H NMR(DMSO，300MHz)，δ7.1-8.5(m，10H，H-Ar)，5.50(m，1H，-C-CH-C-N)，4.76(s，2H，Ar-CH2-Ar)，3.70(m，2H，-CH2-N)，3.11(s，9H，-N-CH3)，2.85(m，2H，-CH2-COO-)，2.01(s，3H，CH3-COO-)。
K.F.＝1.4％C32H32NO9Cl的C、H、N計(jì)算值(校正水存在量)C，63.00；H，5.29；N，2.30；實(shí)測值C，60.45；H，5.83；N，2.87。
實(shí)施例2(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨(ST1745)的制備 室溫下將2.39g(0.01mol)的氯化乙酰L-肉堿、2ml無水CH2Cl2和1.1ml(0.015mol)亞硫酰氯的溶液攪拌4小時(shí)。除去溶劑并用無水CH2Cl2洗滌殘余固體三次。獲得一種油，即氯化乙酰L-肉堿的酰氯，將此化合物直接用于下一步驟。
將3g(0.01mol)1，1’-亞甲基-二(2-萘酚)(ST1859)加入2.58g(0.01mol)氯化乙酰L-肉堿的酰氯在CH3CN(5ml)中的溶液。室溫下將混合物攪拌過夜。用乙醚沉淀后得到粗產(chǎn)物。用乙醚洗滌該產(chǎn)物，真空干燥并用硅膠色譜法進(jìn)行純化(9∶1 CH2Cl2/MeOH混合物)。通過TLC控制合并包含產(chǎn)物的餾分。除去溶劑得到2g(0.0038mol)(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨(ST1745)。產(chǎn)率＝38％1H NMR(DMSO，300MHz)，δ10.05(s，1H，-OH)，7.15-8.3(m，12H，H-Ar)，5.55(m，1H，-C-CH-C-N)，4.65(s，2H，Ar-CH2-Ar)，3.6-3.9(m，2H，-CH2-N)，3.10(s，9H，-N-CH3)，2.95(m，2H，-CH2-COO-)，2.00(s，3H，CH3-COO-)K.F.＝4.4％C30H32NO5Cl的C、H、N計(jì)算值(校正水存在量)C，69.02；H，6.18；N，2.68；實(shí)測值C，68.6；H，6.3；N，2.61。
實(shí)施例32-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-2-氧代乙烷氯化銨(ST1913)的制備 將0.62g(0.011mol)KOH和2ml H2O加入在2ml甲苯中的2g(0.011mol)N-(叔丁氧羰基)-甘氨酸(BOC-GLY-OH)的溶液。
將混合物進(jìn)行共沸蒸餾(150℃)以除去水。0℃下冷卻所得的溶液并加入0.85ml異丁醇、11μl(d＝0.92，0.1mmol)N-甲基嗎啉和1.68ml氯甲酸異丁酯(d＝1.044，0.0128mol)。0℃下將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)。
然后，制備在15ml H2O中的1.65g 1，1’-亞甲基-二(2-萘酚)(ST1859)(0.0055mol)和0.62g KOH的溶液。將此溶液加入反應(yīng)混合物并在室溫下攪拌。1小時(shí)后用HCl 3N調(diào)節(jié)pH至3，并進(jìn)行相分離。使用20ml以NaOH 3N調(diào)節(jié)至pH9的H2O萃取有機(jī)相甲苯，并用H2O洗滌直至中性。用Na2SO4干燥分離的有機(jī)相并除去溶劑得到一種粗產(chǎn)物。用正己烷/乙酸乙酯8∶2重結(jié)晶后得到0.2g產(chǎn)物，將其溶于1ml三氟乙酸中進(jìn)行叔丁氧基-羰基水解。20分鐘后得到固體沉淀并過濾，用正己烷/乙酸乙酯8∶2的混合物洗滌。將所得的產(chǎn)物溶于甲醇并通過A21/Cl-樹脂，用100ml MeOH洗脫得到60mg 2-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-2-氧代乙烷氯化銨(ST1913)。
1H NMR(DMSO，300MHz)，δ9.6(s，1H，-OH)，8.7(s，3H，-NH3)，7.2-8.4(m，12H，H-Ar)，4.7(s，2H，Ar-CH2-Ar)，3.72(s，2H，C-CH2-N).
K.F.＝1.2％C23H20NO3Cl的C、H、N計(jì)算值(校正水存在量)C，70.14；H，5.12；N，3.56；實(shí)測值C，69.1；H，5.4；N，3.3。
實(shí)施例42-({4-[(3-{[2-(二乙基銨)乙氧基]羰基}-2-羥基-1-萘基)甲基]-3-羥基-2-萘甲?；鶀氧)-N，N-二乙基乙烷銨二氯化物(ST1800)的制備
將3.88g(0.01mol)雙羥萘酸(ST1641)懸浮在4.36ml亞硫酰氯(0.06mol)中并在80℃回流5小時(shí)。結(jié)束時(shí)，真空下除去溶劑并用乙醚洗滌殘余物。將得到的酰氯懸浮在30ml CH2Cl2中并滴加0.7mlN，N-二乙醇。室溫下將混合物攪拌過夜。結(jié)束時(shí)得到一種白色固體，將其過濾并用正己烷/乙酸乙酯8∶2的混合物洗滌得到0.5g2-({4-[(3-{[2-(二乙基銨)乙氧基]羰基}-2-羥基-1-萘基)甲基]-3-羥基-2-萘甲?；鶀氧)-N，N-二乙基乙烷銨二氯化物(ST1800)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)，δ10.05(s，2H，-OH)，7.1-8.4(m，10H，H-Ar)，4.85(s，2H，Ar-CH2-Ar)，4.55(t，4H，-O-CH2-CH2-N)，3.0(t，4H，-O-CH2-CH2-N)，2.75(m，8H，-N-CH2-CH3)，1.0(t，12H，-N-CH2-CH3).
K.F.＝0.8％C35H44N2O6Cl2的C、H、N計(jì)算值(校正水存在量)C，63.72；H，6.72；N，4.24；實(shí)測值C，63.5；H，5.87；N，4.6。
實(shí)施例5雙羥萘酸鈉(ST1641)對(duì)β-淀粉狀蛋白25-35肽的抗聚集作用的評(píng)價(jià)將250μl βa25-352mM(cat.Bachem n°H-1192.0001)水溶液加到250μl由雙羥萘酸鈉2mM和磷酸鹽緩沖液200mM pH5組成的溶液中。如此得到500μl雙羥萘酸鈉1mM、βA25-351mM和磷酸鹽緩沖液100mMpH5的溶液。
對(duì)于其中不存在雙羥萘酸鈉的對(duì)照樣品進(jìn)行同樣的處理。
室溫下24小時(shí)后，將樣品和對(duì)照于12000rpm下離心20分鐘，從上清液中分離沉淀的固體。往沉淀的固體加入250μl水。室溫下3小時(shí)后將樣品再次在12000rpm下離心20分鐘。離心后，與對(duì)照物不同的是在樣品中沒有觀察到任何固體的存在。此結(jié)果表明雙羥萘酸鈉完全抑制原纖維中βA25-35肽的聚集。
實(shí)施例6
雙羥萘酸鈉(ST1641)對(duì)β-淀粉狀蛋白1-42肽的抗聚集作用的評(píng)價(jià)根據(jù)以下方法通過測定硫黃素T(thioflavin T)結(jié)合來評(píng)價(jià)雙羥萘酸鈉對(duì)βA1-42肽的抗聚集作用。
37℃下在Tris緩沖液100mM pH7.4中，將濃度為0.22mM的βA1-42肽(cat.Bachem n°H-1368.0500)單獨(dú)或在雙羥萘酸鈉存在下溫育5天。肽與雙羥萘酸鈉的摩爾比一般為1∶8、1∶4和1∶2。
13000rpm下將溶液離心5分鐘并除去上清液。用500μl的H2O洗滌沉淀物并在13000rpm下離心5分鐘。在此沉淀物中，用600μl溶于甘氨酸-NaOH緩沖液50mM，pH9.4的硫黃素T(ThT)2μM檢測原纖維形式的聚集物。溫育5分鐘后將500μl的樣品轉(zhuǎn)移到石英比色杯中并在熒光分光光度計(jì)中在420nm激發(fā)波長和480nm發(fā)射波長下檢測熒光信號(hào)。在這些條件下，熒光信號(hào)與淀粉狀蛋白聚集物的量成比例(Le Vine，Methods in Enzymology(酶學(xué)方法).vol.309 pp274-284)。
雙羥萘酸鈉在此實(shí)驗(yàn)中被證明能夠一致地和劑量依賴性地降低原纖維形式的βA1-42聚集物的形成。這種效果是顯著的，且與對(duì)照相比降低達(dá)到70％之多。
還測定了原纖維形成的抑制作用對(duì)溫育時(shí)間的函數(shù)。在進(jìn)行1-5天的溫育時(shí)，雙羥萘酸鈉表現(xiàn)出降低硫黃素T結(jié)合的效力遞增。
實(shí)施例7ST化合物對(duì)β-淀粉狀蛋白1-42肽的抗聚集作用的評(píng)價(jià)采用以下方法(M.A.Findeis，S.M.Molineaux；Mehods inEnzymology(酶學(xué)方法)309，487-488(1999))，使用硫黃素“T”結(jié)合測定評(píng)價(jià)ST1641、ST1722、ST1859、ST1745、ST1800、ST1913抵抗βA1-42聚合的能力將βA1-42肽(1mg/ml)溶于H2O/CH3CN(1∶1)，凍干，溶于DMSO+PBS，并在37℃下溫育8天。然后對(duì)肽進(jìn)行超聲處理并將其溶于PBS(1∶5)。用βA1-42(40μl/孔)和ST測試化合物(50μl/孔，濃度在0.8和100μM之間)的溶液制備96孔平板。15分鐘后將50μl未聚集的βA1-42加到每孔，并在37℃振蕩下將平板溫育過夜。然后將200μl包含硫黃素“T”(10μM)和Na2HPO4×2H2O(50μM)溶液(pH6.5)的反應(yīng)混合物加到每孔。60秒內(nèi)在450nm的激發(fā)波長和482nm的發(fā)射波長下用96孔熒光平板讀出器測定熒光。在此實(shí)驗(yàn)條件下，熒光測定結(jié)果與βA1-42聚合肽的量相關(guān)。
表1顯示ST測試化合物的DE50值。
表1
實(shí)施例8雙羥萘酸鈉(ST1641)對(duì)預(yù)先形成的原纖維形式的β-淀粉狀蛋白1-42聚集物的溶解根據(jù)以下方法進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)以評(píng)價(jià)雙羥萘酸鈉對(duì)事先聚集的βA1-42肽的抗聚集能力。
使βA1-42肽在實(shí)施例6所述的條件下于37℃下聚集48小時(shí)。加入雙羥萘酸鈉(肽∶雙羥萘酸鹽比值1∶8)。
在這些條件下，證明雙羥萘酸鈉在降低硫黃素T結(jié)合方面具有非常高的活性。
與不用雙羥萘酸鈉進(jìn)行溫育的對(duì)照相比，用雙羥萘酸鈉溫育導(dǎo)致熒光降低70％。
此結(jié)果證實(shí)雙羥萘酸鈉能夠?qū)Ζ翧1-42的原纖維結(jié)構(gòu)施加事后的抗聚集作用。
實(shí)施例9雙羥萘酸鈉(ST1641)誘導(dǎo)的β-淀粉狀蛋白1-42肽對(duì)胰蛋白酶消化作用的抗性的降低用15μl的NaOH 0.1M將βA1-42肽溶解。用15μl TRIS緩沖液100mM使溶液變?yōu)閜H7.4，向其中加入30μl單獨(dú)的緩沖液或30μl包含雙羥萘酸鈉的緩沖液。βA1-42肽的終濃度為0.22mM，雙羥萘酸鈉的終濃度范圍為0.055-1.76mM，因而βA1-42肽∶雙羥萘酸鈉的比值范圍為4∶1-1∶8。
將如此制備的樣品在37℃下溫育5天；在這些條件下βA1-42肽形成原纖維形式的聚集物，修飾其結(jié)構(gòu)由無規(guī)卷曲變?yōu)棣抡郫B(Zagorski M.G等人1999“Methodological and Chemical Factors AffectingAmyloid β Peptide Amyloidogenicity(影響淀粉狀蛋白β肽淀粉樣變形成的方法學(xué)和化學(xué)因素)″Methods in Enzymology(酶學(xué)方法)309189-204)。5天溫育后，將24μg胰蛋白酶(Merck)加到每份樣品，攪拌并在13000rpm下離心1分鐘；然后在37℃下將樣品溫育1小時(shí)。
當(dāng)此段時(shí)期過去后，將混合物在13000rpm下離心5分鐘，除去50μl上清液，并用40μl HCOOH和10μl包含0.1％三氟乙酸(TFA)的H2O溶解沉淀物。
此時(shí)樣品準(zhǔn)備就緒進(jìn)行定量HPLC分析。將與雙羥萘酸鈉一起溫育的樣品的HPLC曲線與單獨(dú)用肽得到的曲線進(jìn)行比較，從而對(duì)βA1-42肽進(jìn)行定量。
上述條件下胰蛋白酶能夠水解30-50％的βA1-42肽。雙羥萘酸鈉在最高劑量(肽∶雙羥萘酸鹽比值1∶8)時(shí)將胰蛋白酶對(duì)βA1-42的水解增加50％以上，而在最低劑量(1∶4)時(shí)增加40％以上。
實(shí)施例10
雙羥萘酸鈉(ST1641)對(duì)由β-淀粉狀蛋白25-35誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的抑制作用為了證實(shí)雙羥萘酸鈉的潛在神經(jīng)保護(hù)活性，使用通過顯微解剖妊娠16-18天的大鼠胚胎腦而得到的原代皮層神經(jīng)元培養(yǎng)物。在胎牛血清存在下培養(yǎng)腦組織并通過在第3和5天將抗有絲分裂劑阿糖胞苷加到培養(yǎng)基中而抑制神經(jīng)膠質(zhì)增生(Andreoni等人，1997 Exp.Neurology(實(shí)驗(yàn)神經(jīng)學(xué))148281-287)。在雙羥萘酸鈉存在或不存在下使細(xì)胞培養(yǎng)物與βA25-35肽接觸5-7天。在由紅藻氨酸誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性條件下評(píng)價(jià)神經(jīng)保護(hù)作用以證實(shí)雙羥萘酸鈉作用的特異性和它有效的針對(duì)神經(jīng)毒性劑的抗聚集活性。還在培養(yǎng)基中缺乏胎牛血清的情況下培養(yǎng)的神經(jīng)元中評(píng)價(jià)雙羥萘酸鈉保護(hù)細(xì)胞對(duì)抗變性的能力。在這種情況下，在接種后24小時(shí)，用含有谷氨酰胺、胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白、腐胺、孕酮、亞硒酸鈉和Hepes的無血清培養(yǎng)基更換細(xì)胞培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)方法從妊娠16-18天的大鼠胚胎腦中取出小腦皮層的神經(jīng)元原代培養(yǎng)物并在胎牛血清中培養(yǎng)。在溫育第3和5天時(shí)，使用阿糖胞苷作為抗有絲分裂劑抑制神經(jīng)膠質(zhì)增生。
從接種之后那天開始使培養(yǎng)物接觸濃度為25和50μM的βA25-35肽5-7天。
將βA25-35肽與雙羥萘酸鈉一起加到培養(yǎng)物中，雙羥萘酸鈉具有與肽本身相同的摩爾濃度或較低的濃度。
使用比色法和采用圖像分析儀進(jìn)行光密度分析來評(píng)價(jià)對(duì)抗神經(jīng)毒性的保護(hù)作用。
所得的結(jié)果表明雙羥萘酸鈉針對(duì)由βA25-35誘導(dǎo)的毒性能夠提供完全的保護(hù)作用。所得的結(jié)果在表2中給出。
表2
％S存活百分率實(shí)施例11雙羥萘酸鈉(ST1641)減少由K+喪失誘導(dǎo)的小腦顆粒凋亡從8天大的大鼠小腦中分離的顆粒在大約一周發(fā)生生化和形態(tài)學(xué)分化，形態(tài)學(xué)上變得成熟并具有谷氨酸能中間神經(jīng)元表型(Gallo等人，1982 PNAS 797919-7923)。在除去培養(yǎng)基中的血清并將細(xì)胞外鉀離子濃度(25mM)降至非去極化條件的程度(5mM)時(shí)，在大約24小時(shí)以后實(shí)現(xiàn)由于凋亡導(dǎo)致的細(xì)胞死亡。
編程性神經(jīng)元死亡是一種不僅在多種生理過程而且在許多神經(jīng)變性疾病如AD、帕金森病、亨廷頓氏舞蹈病和肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥中觀察到的現(xiàn)象。在AD的情況下，檢測到凋亡與本身調(diào)節(jié)淀粉狀蛋白產(chǎn)生的早老2(PS2)基因存在βA突變之間存在密切關(guān)系。實(shí)際上，在存在PS2突變的AD的情況下，還可以檢測到典型的腦和血漿βA1-42增加(Scheuner D.，Eckman C.，Jensen M.，Song X.，Citron M.，SuzukiN.，Bird T.D.，Hardy J.，Hutton M.，Kukull W.，Laeson E.，Levy-Lahad E.，Viitanen M.，Peskind E.，Selkoe D.，Yunkin S.(1996)Nat.Med.2，864-870.)；而且，在PC12中表達(dá)的突變形式的PS2基因?qū)е碌蛲?Wolozin B.，Iwasaki K.，D’Adamio L.(1996)Science(科學(xué))274，1710-1713)。
這種實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ湍軌颢@得“自我促成”βA產(chǎn)生體系，其中小腦顆粒的神經(jīng)元凋亡致使淀粉狀蛋白前體APP的加工發(fā)生變化，其性質(zhì)有助于淀粉狀蛋白產(chǎn)生代謝的過程。βA水平的增加進(jìn)而促進(jìn)編程性細(xì)胞死亡。在這個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中，根據(jù)培養(yǎng)基中KCl減少之后既定時(shí)間(24、48和72小時(shí))的細(xì)胞存活來測定研究物質(zhì)的潛在效力。
實(shí)驗(yàn)方法在處于含KCl 25mM的培養(yǎng)基中的8天大的大鼠的小腦顆粒原代培養(yǎng)物中，在培養(yǎng)6天之后用35S-蛋氨酸標(biāo)記細(xì)胞。
通過除去血清和將KCl濃度從25mM降至5mM而誘導(dǎo)凋亡。
這種情況代表體外神經(jīng)元去傳入狀態(tài)或進(jìn)出神經(jīng)組織細(xì)胞的樹突和軸突的切除。
凋亡的結(jié)果是βA的過量產(chǎn)生。
將培養(yǎng)物與濃度范圍從1μM至100μM的雙羥萘酸鈉一起溫育。
以24、48和72小時(shí)的細(xì)胞生存來評(píng)價(jià)抗毒性保護(hù)作用。
結(jié)果在這個(gè)實(shí)驗(yàn)中獲得的結(jié)果表明濃度為10μM的雙羥萘酸鈉具有對(duì)抗在凋亡過程中淀粉狀蛋白形成導(dǎo)致的損傷的保護(hù)作用(89％保護(hù)作用)。
實(shí)施例12ST1859在“體內(nèi)”穿透血腦屏障的能力AD腦切片的尸檢揭示其中存在大量由纖維狀淀粉狀蛋白聚集物組成的細(xì)胞外老年斑。β淀粉狀蛋白肽的存在和疾病嚴(yán)重性之間的關(guān)系表明肽原纖維形成的抑制作用可能是治療這種疾病的潛在的工具。ST1859在“體外”抑制β淀粉狀蛋白聚集，為了測試它穿過完整血腦屏障的透性，將用14C標(biāo)記的ST1859(S.A.50μCi/mM)以18μCi/大鼠的劑量靜脈注射到正常大鼠體內(nèi)。在注射后30分鐘取出腦和血液，然后將血液離心(3000RPM×15分鐘)并用水1∶20稀釋所得的血清，同時(shí)在水中1∶20w/v均化腦組織。隨后對(duì)于樣品水溶液，將4ml閃爍液加入每份樣品。用自動(dòng)β計(jì)數(shù)器(Packard 4600)計(jì)數(shù)放射性的量。將以DPM報(bào)道的數(shù)據(jù)(表1)對(duì)每份樣品的重量或體積進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。此實(shí)驗(yàn)中所得的結(jié)果表明ST1859能夠以比率血清/腦＜1穿透血腦屏障(表3)。
表權(quán)利要求
1.具有通式(I)的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中R1和R5，可以相同或不同，為COOR6、CONHR6、SO2R6、SO2NHR6、SO3R6、OR6、COR6、NHR6、R6；其中R6為H或者具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈，或者苯基，被R7取代；其中R7為OH、COOH、SO3H、NR8R9， 其中R8和R9可以相同或不同，為H、具有1-5個(gè)碳原子的烷基；R2和R4可以相同或不同，為H、OH、NHR6、OCO-R10-NR8R9， 其中R10為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈；R3為-[CH2]n-、-CH2-O-、-CH(R11)-，其中n為1-4的整數(shù)，R11為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述基團(tuán)被氨基、烷基氨基C1-C5、二烷基氨基C1-C5、OH、烷氧基C1-C5取代；附帶條件是取代基R1、R2、R3、R4和R5不是1R1＝R5＝-COOCH2C6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-2R1＝R5＝-COOCH(CH3)2R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-3R1＝R5＝-COOC2H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-4R1＝R5＝-COOC6H11R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-5R1＝R5＝-COOCH3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-6R1＝R5＝-COOC(CH3)3R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-7R1＝R5＝-CONHC6H5R2＝R4＝-OHR3＝-CH2-11 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOC6H5R3＝-CH2-12 R1＝R5＝-HR2＝R4＝ R3＝-CH2-13 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OCOCH＝CH2R3＝-CH2-；14 R1＝R5＝-HR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-15 R1＝R5＝-COOHR2＝R4＝-OHR3＝-CH2-。
2.(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({3-羧基-1-[(3-羧基-2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨。
3.(2R)-2-(乙酰氧基)-4-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-N，N，N-三甲基-4-氧代-1-丁烷氯化銨。
4.2-({1-[(2-羥基-1-萘基)甲基]-2-萘基}氧)-2-氧代乙烷氯化銨。
5.2-({4-[(3-{[2-(二乙基銨)乙氧基]羰基}-2-羥基-1-萘基)甲基]-3-羥基-2-萘甲?；鶀氧)-N，N-二乙基乙烷銨二氯化物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5的化合物用作藥物。
7.具有通式(I)的化合物的制備方法 R1和R5為-COOR6，其中R2、R3、R4和R5具有權(quán)利要求1中定義的含義，其特征在于用鹵化劑處理其中的R6為H的通式(I)化合物得到相應(yīng)的酰氯，然后在攪拌下與R6-OH醇以1-6的摩爾比反應(yīng)，或者在惰性無水溶劑中與化學(xué)計(jì)算量的R6-OH反應(yīng)。
8.式(I)化合物的制備方法 其中R1和R5為CONHR6；其中R2、R3、R4和R6具有權(quán)利要求1中定義的含義，其特征在于用鹵化劑處理其中的R6為H的通式(I)化合物得到相應(yīng)的酰氯，或者用偶聯(lián)劑處理，并在攪拌下與R6-NH2胺以6-1的摩爾比反應(yīng)，或在惰性無水溶劑中與化學(xué)計(jì)算量的R6-NH2反應(yīng)。
9.式(I)化合物的制備方法 其中R2和R4為OH；其中R1和R5為SO3R6、SO2NHR6；R3為-CH(R11)-，其中R6和R11具有權(quán)利要求1中所述的含義；其特征在于該方法根據(jù)以下的反應(yīng)路線1進(jìn)行，其中使式“a”化合物與R11-CHO醛在冰醋酸中在90℃-150℃的溫度范圍內(nèi)反應(yīng)得到具有通式“b”的化合物，然后用鹵化劑處理通式″b″化合物得到相應(yīng)的磺酰氯，并與R6-OH醇反應(yīng)得到具有通式″d″的化合物，或者與R6-NH2胺反應(yīng)得到具有通式″e(cuò)″的化合物；路線1
8.式(I)化合物的制備方法 其中R1、R2、R4和R5為OR6和/或NHR6；R3為-CH(R11)-，其中R6和R11具有權(quán)利要求1中定義的含義；其特征在于該方法是根據(jù)以下反應(yīng)路線2進(jìn)行的，其中使式A化合物與R11-CHO醛在酸性環(huán)境中反應(yīng)得到對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)B、C和D的化合物的混合物，將它們分離并純化；在堿存在下使這些化合物與R6-X烷基鹵反應(yīng)，然后在酸性環(huán)境中去保護(hù)得到相應(yīng)的萘基醚E、F、G；用在硫酸中的NaNO2對(duì)后者進(jìn)行處理之后，得到化合物H、I和L；路線2PG＝保護(hù)基
9.藥物組合物，包含根據(jù)權(quán)利要求1-5的化合物作為其活性成分和至少一種藥學(xué)上可接受的賦形劑和/或稀釋劑。
10.具有通式(I)的雙羥萘酸或其一種衍生物或這些化合物的一種藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物的沉積為特征的疾病的藥物的用途 其中R1和R5可以相同或不同，為COOR6、CONHR6、SO2R6、SO2NHR6、SO3R6、OR6、COR6、NHR6、R6；其中R6為H或者具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈，或者苯基，被R7取代；其中R7為OH、COOH、SO3H、NR8R9， 其中R8和R9可以相同或不同，為H、具有1-5個(gè)碳原子的烷基；R2和R4可以相同或不同，為H、OH、NHR6、OCO-R10-NR8R9， 其中R10為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈、飽和或不飽和烷基鏈；R3為-[CH2]n-、-CH2-O-、-CH(R11)-，其中n為1-4的整數(shù)，R11為具有1-5個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，所述基團(tuán)被氨基、烷基氨基C1-C5、二烷基氨基C1-C5、OH、烷氧基C1-C5取代。
11.根據(jù)權(quán)利要求12的用途，其中所述的以淀粉狀蛋白聚集物的沉積為特征的疾病選自阿爾茨海默氏病、唐氏綜合征、與荷蘭型淀粉樣變有關(guān)的遺傳性腦出血、與慢性炎癥有關(guān)的淀粉樣變、與多發(fā)性骨髓瘤和其它血B淋巴樣細(xì)胞惡液質(zhì)有關(guān)的淀粉樣變、與II型糖尿病有關(guān)的淀粉樣變和與朊病毒疾病有關(guān)的淀粉樣變、庫魯病或綿羊癢病。
12.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中所述的與朊病毒疾病有關(guān)的淀粉樣變選自克羅伊茨費(fèi)爾特-雅各布病和格-施綜合征。
13.根據(jù)權(quán)利要求12-14的用途，其中該化合物為雙羥萘酸鈉鹽。
14.診斷試劑盒，包含至少一種權(quán)利要求12中所述的化合物，該診斷試劑盒用于診斷以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病。
15.根據(jù)權(quán)利要求16的試劑盒，其中所述化合物的至少一種元素，碳、氫、氮或氧被相應(yīng)的放射性同位素置換。
16.根據(jù)權(quán)利要求16的試劑盒，其中所述化合物攜帶至少一個(gè)放射性碘原子。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的試劑盒，其中所述化合物無論是否攜帶根據(jù)權(quán)利要求17-18的同位素，其形式為與一種金屬的放射性同位素形成的絡(luò)合物。
18.根據(jù)權(quán)利要求19的試劑盒，其中所述金屬選自銦、釓和锝。
19.根據(jù)權(quán)利要求16-20的試劑盒用于通過診斷成像技術(shù)進(jìn)行診斷的用途。
20.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中所述診斷成像技術(shù)選自PET、SPECT、NMR和閃爍成像技術(shù)。
21.根據(jù)權(quán)利要求22的用途，其中所述閃爍成像技術(shù)為平面閃爍成像。
22.如權(quán)利要求12中所述的化合物，其中至少一種元素，碳、氫、氮或氧被相應(yīng)的放射性同位素置換。
23.如權(quán)利要求12中所述的化合物，該化合物攜帶至少一個(gè)放射性碘原子。
24.如權(quán)利要求12中所述的化合物，無論是否攜帶按照權(quán)利要求24-25的放射性同位素，它與診斷成像中所用的元素絡(luò)合。
25.根據(jù)權(quán)利要求26的化合物，其中所述絡(luò)合的元素選自銦、釓和锝。
全文摘要
描述了具有通式(I)的雙羥萘酸或其一種衍生物(其中基團(tuán)R1和R5如在說明書中所述)，或者它們的一種藥學(xué)上可接受的鹽用于制備治療以淀粉狀蛋白聚集物沉積為特征的疾病的藥物的用途。
文檔編號(hào)A61P25/00GK1449375SQ01812446
公開日2003年10月15日 申請(qǐng)日期2001年6月15日 優(yōu)先權(quán)日2000年6月23日
發(fā)明者M·G·加羅, M·G·?，? F·吉而基, M·O·廷迪, P·皮爾維申, O·吉拉迪 申請(qǐng)人:希格馬托制藥工業(yè)公司