專利名稱：引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物套管及其制造方法，特別是一種可以引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性人工生物套管及其制造方法，更具體地說，本發(fā)明涉及引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管及其制造方法，屬于生物醫(yī)用材料領(lǐng)域。
為了能在手術(shù)中進(jìn)行神經(jīng)束的定性吻接，多年來人們從解剖學(xué)和免疫組織化學(xué)等方面進(jìn)行了神經(jīng)功能束定位的研究，但迄今為止都無法應(yīng)用于臨床。Forssman和Cajal的選擇性再生理論，即在神經(jīng)對接的兩斷端間留出供其選擇性再生的空間將有利于混合神經(jīng)的再生；這一理論為神經(jīng)良好的對接指出了新的可行之路，其方法被稱為小間隙套接法，近年來被一些實驗所證實，如通過自體動脈套接混合神經(jīng)模型，從顯微外科手術(shù)觀察、組織學(xué)、電生理學(xué)、神經(jīng)免疫化學(xué)等多方面證實了周圍神經(jīng)選擇性再生的客觀性及小間隙套接縫合的優(yōu)越性。但自體動脈不可能在臨床中應(yīng)用，自體靜脈在臨床中也難以廣泛應(yīng)用。比較理想的套接材料應(yīng)是一種生物相容性較好、可吸收并有一定促進(jìn)和引導(dǎo)神經(jīng)再生效果的人工生物材料。
目前國內(nèi)外用于修復(fù)神經(jīng)缺損的材料有硅膠管、聚四氟乙烯導(dǎo)管、纖維素套管等，但這些材料在可吸收性和組織相容性方面都存在一定缺陷，難以在臨床上得到廣泛應(yīng)用。
WO9844020A1和WO9844021A1報道了含磷酸酯基團(tuán)的合成聚合物用于制作神經(jīng)生長的導(dǎo)管；US5844017A報道了一種脂族聚氧酯預(yù)聚物可制備用于神經(jīng)連接的導(dǎo)管；US4534349A中采用聚乳酸、聚乙醇酸、聚(乙交酯-丙交酯)、聚酯酰胺等合成聚合物及其共聚、共混物制備神經(jīng)修復(fù)導(dǎo)管；US4669474A、US4883618A、US5147399A、EP0327022A中采用如US4534349A中采用的聚合物的纖維產(chǎn)品，經(jīng)充膜和粘接處理制備多孔、表面粗糙的導(dǎo)管用于斷裂神經(jīng)修復(fù)；EP0286284A和WO9005490A1中分別采用丙烯酸共聚物或聚氨酯和聚合物駐極體材料制備用于修復(fù)神經(jīng)斷裂的膜管；WO9403212A1采用透明質(zhì)酸酯基體和透明質(zhì)酸酯線交織增強結(jié)構(gòu)，制備用于修復(fù)周圍神經(jīng)缺損的導(dǎo)管。然而，所報道的這些材料，或者制備困難，或者在可吸收性和組織相容性方面具有一定缺陷，或存在不利于神經(jīng)再生的因素，并沒能在臨床上取得實際應(yīng)用。
中國修復(fù)重建外科雜志7(3)169-171(1993)中報導(dǎo)了用幾丁質(zhì)(或稱甲殼質(zhì)、聚N-乙酰-2-氨基-2-脫氧-D-葡萄糖)橋接周圍神經(jīng)缺損的實驗研究，采用二甲基乙酰胺-氯化鋰溶劑體系溶解精制的蠶蛹?xì)锥≠|(zhì)，以一定口徑和管壁厚度的模具置于丙酮凝固浴中凝固成形，脫模后以蒸餾水漂洗、涼干，再復(fù)水制成所需長度，浸泡于75％酒精中消毒，用生理鹽水漂洗后得到所需幾丁質(zhì)管。但上述溶劑體系中的二甲基乙酰胺具有很強的毒性，并與幾丁質(zhì)有牢固的吸附作用，漂洗和萃取十分困難，極易吸附殘留而對生物體造成毒害。采用模具和凝固脫模工藝制備幾丁質(zhì)管時，由于幾丁質(zhì)大分子未受到拉伸取向，所得制品未獲得韌性而易于脆裂。另外，幾丁質(zhì)膜與神經(jīng)再生中作用重大的雪旺氏細(xì)胞之間的組織相容性不及幾丁糖(或稱殼聚糖、殼多糖、甲殼胺、脫乙酰甲殼質(zhì))液。
中國修復(fù)重建外科雜志12(2)90-93(1998)中報導(dǎo)了幾丁質(zhì)及幾丁糖與雪旺氏細(xì)胞相容性的實驗研究，發(fā)現(xiàn)幾丁質(zhì)及幾丁糖與雪旺氏細(xì)胞有著良好的組織相容性，幾丁糖液優(yōu)于幾丁質(zhì)膜片，兩者均可抑制成纖維細(xì)胞的生長。以上結(jié)論具有重要意義，因為雪旺氏細(xì)胞不但能夠引導(dǎo)神經(jīng)再生，而且還分泌多種促神經(jīng)再生的因子，如神經(jīng)生長因子、運動神經(jīng)營養(yǎng)因子等。如果一種材料能夠與雪旺氏細(xì)胞有很好的相容性，則能成為一種促進(jìn)和引導(dǎo)神經(jīng)再生的理想的神經(jīng)修復(fù)材料，如果抑制其生長則應(yīng)慎用。從幾丁質(zhì)及幾丁糖均可抑制成纖維細(xì)胞的生長的特性來看，這一特性的意義是早期可以防止瘢痕長入再生神經(jīng)中，晚期可避免瘢痕縮窄引起壓迫，這一點對再生神經(jīng)功能的恢復(fù)、不引起功能失常具有重要作用。但是，該實驗研究中所述“幾丁糖”為2％幾丁糖稀醋酸水溶液無菌風(fēng)干后所得產(chǎn)物，大分子結(jié)構(gòu)中的-NH2基團(tuán)已呈離子化狀態(tài)，這種“氨基離子化”的幾丁糖不具備抗水溶性，無法制得具有一定物理機(jī)械性能和降解吸收周期的膜管，用于混合神經(jīng)再生的間隙套接。
CN1262961中采用幾丁糖(文獻(xiàn)中稱為殼聚糖)100份、明膠5-10份及其它微量元素、戊二醛、多聚賴氨酸，制備用于神經(jīng)修復(fù)的殼聚糖導(dǎo)管。但是采用交聯(lián)劑戊二醛對殼聚糖進(jìn)行交聯(lián)，會影響殼聚糖的生物相容性和體內(nèi)降解吸收性能。另外，中國修復(fù)重建外科雜志14(3)175-179(2000)中曾指出，幾丁糖(文獻(xiàn)中稱為殼聚糖)周圍的明顯炎癥反應(yīng)可能與殼聚糖未呈離子化的-NH2基正電荷密度增高有關(guān)，因此有人認(rèn)為幾丁糖(文獻(xiàn)中稱為殼聚糖)不適合作為體內(nèi)埋植材料。
綜上所述，幾丁糖(甲殼胺)與醋酸形成的“氨基離子化”的幾丁糖(甲殼胺)不具備抗水溶性，無法制得具有一定物理機(jī)械性能和降解吸收周期的膜管；未呈“氨基離子化”的幾丁糖(甲殼胺)在體內(nèi)的生物相容性和降解吸收性能較差?？梢娔壳斑€沒有一種生物相容性較好、可吸收、具有一定促進(jìn)和引導(dǎo)神經(jīng)再生效果、物理機(jī)械性能和價格適宜的用于制備人工生物套管的材料。
本發(fā)明的另一目的在于提供一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性部分脫乙酰甲殼質(zhì)人工生物套管的制造方法，所述制備方法可以得到具有適宜的脫乙?；闹锌丈锾坠?，方法簡單，適宜工業(yè)化生產(chǎn)。
為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為，一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，所述的生物套管為脫乙酰度15-45％的甲殼質(zhì)中空生物套管，優(yōu)選甲殼質(zhì)的脫乙酰度為25-35％。
其中所述的生物套管的管壁上進(jìn)一步吸附、滲透有0.3-3％重量的海藻酸鈉及5-10％促神經(jīng)生長因子藥物。
其中所述的生物套管的尺寸根據(jù)需要調(diào)整，用于動物試驗的管內(nèi)徑一般為0.7-1.5mm，壁厚0.1-0.2mm；用于臨床(人體)的管內(nèi)徑一般為1-6mm，壁厚1-2mm。
本發(fā)明中一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性部分脫乙酰甲殼質(zhì)人工生物套管的制造方法，以甲殼胺為原料，經(jīng)中空纖維紡絲和牽伸工藝制得具有適合修復(fù)神經(jīng)缺損的管徑與壁厚的甲殼胺中空管，然后對所得甲殼胺中空管進(jìn)行乙?；幚恚刂品磻?yīng)條件得到脫乙酰度15-45％的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，再進(jìn)行后處理。
本發(fā)明中采用脫乙酰度≥70％的甲殼胺的稀醋酸水溶液通過中空纖維紡絲和牽伸工藝制得甲殼胺中空管，然后通過乙酰化處理回補乙酰胺基-NHCOCH3，通過控制乙?；噭┑臐舛?、反應(yīng)溫度和時間，可以有效地控制脫乙酰度的范圍。
本發(fā)明所述的中空纖維紡絲和牽伸工藝除說明書中及實施例中描述之外，還可以采用現(xiàn)有技術(shù)的方法及工藝參數(shù)。
其中所述的乙酰化處理的處理液為體積百分比為2-8％的醋酸酐-甲醇溶液，處理溫度為室溫至60℃。
其中所述的制備方法進(jìn)一步包括將脫乙酰度15-45％的部分脫乙酰甲殼質(zhì)套管以含促神經(jīng)生長因子藥物的處理液浸漬處理，得到促進(jìn)神經(jīng)再生功能更佳的含藥物型生物套管。
所述的浸漬處理液為含促神經(jīng)生長因子的海藻酸納水溶液。
所述的后處理為用醇類溶劑洗滌、浸泡。
具體地說，本發(fā)明所述的一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性部分脫乙酰甲殼質(zhì)人工生物套管的制造方法將脫乙酰度大于70％、重均分子量15至50萬的甲殼胺按1-8％的濃度(W/W)溶解于1.5-6％的稀醋酸水溶液中，得到高粘度溶液，抽真空脫泡至得到無泡紡絲原液。將紡絲原液從釜中壓出，經(jīng)紡絲計量泵計量，從中空噴絲孔的皮層擠出，與此同時，將3-10％NaOH(W/W)水溶液凝固劑從中空噴絲孔的芯層擠出。紡絲原液擠出后直接進(jìn)入3-10％NaOH(W/W)水溶液凝固浴，在外界和芯層凝固劑的同時作用下甲殼胺得以析出凝固，經(jīng)導(dǎo)輥引出后牽伸0.5-3倍，得到連續(xù)的甲殼胺中空管，管內(nèi)徑一般為0.7-6mm，壁厚0.1-2mm。當(dāng)用于動物試驗時，管內(nèi)徑一般為0.7-1.5mm，壁厚優(yōu)選為0.1-0.2mm；當(dāng)用于臨床時，管內(nèi)徑一般為1-6mm，壁厚為1-2mm。
將甲殼胺中空圓管用水洗滌中性，用甲醇脫水后置于10-60℃2-8％醋酸酐-甲醇溶液(V/V)中乙?；?0分鐘至16小時后取出，用甲醇洗滌，再以乙醇洗滌，洗滌后浸泡于乙醇中消毒備用，所得部分脫乙酰甲殼質(zhì)中空圓管，在生理鹽水(0.9％NaCl水溶液)中無溶解，濕態(tài)下穿針無脆裂。
本發(fā)明所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，進(jìn)一步包括將所得的部分脫乙酰甲殼質(zhì)中空圓管置于含0.5-2.5％海藻酸鈉和5-15％促神經(jīng)生長因子的水溶液中浸漬10-300分鐘，處理溫度4-10℃。
其中所述“促神經(jīng)生長因子”可以為促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長的藥物或活性物，如市售的NGF(神經(jīng)生長因子，由第二軍醫(yī)大學(xué)生物制品檢測中心提供)、bFGF(堿性成纖維細(xì)胞生長因子，由麗珠醫(yī)藥集團(tuán)股份有限公司提供)、復(fù)方紅芪注射液(由北京兒科研究所與北京大學(xué)人民醫(yī)院共同提供)，公知的雪旺細(xì)胞或適合本發(fā)明的其他促進(jìn)神經(jīng)細(xì)胞生長的藥物或活性物，也可以是其一種以上的組合，如促神經(jīng)生長因子為重量比NGF/bFGF/復(fù)方紅芪注射液＝1/1/1.5-1/2/3。所得“含藥物型生物套管”將上述藥物帶入體內(nèi)，緩釋于局部，從而起到促進(jìn)神經(jīng)再生的作用。添加促神經(jīng)生長因子后，各個工藝環(huán)節(jié)的溫度均控制為處理溫度1-10℃。
進(jìn)一步，上述經(jīng)過處理液處理的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管取出后置于含1-10％促神經(jīng)生長因子、1-8％氯化鈣或1-8％氯化鋅或0.1-8％氯化鈣和0.1-8％氯化鋅的混合水溶液中浸漬。上述處理液的溫度控制為4-10℃，浸漬后取出冷凍干燥，得到促進(jìn)神經(jīng)再生功能更佳的含藥物型生物套管。
脫乙酰度反映了甲殼質(zhì)大分子鏈上的-NHCOCH3基轉(zhuǎn)化為-NH2基的程度。關(guān)于甲殼胺的概念并非是很嚴(yán)密的，如脫乙酰度為50％左右稱甲殼胺，全部脫乙酰基也稱甲殼胺，也有將能溶解于1％鹽酸或醋酸的可溶性甲殼質(zhì)衍生物稱為甲殼胺。總的來說，脫乙酰度高者稱之為甲殼胺，脫乙酰度低者稱之為甲殼質(zhì)。為避免混淆和敘述方便起見，在本發(fā)明中將脫乙酰度≥70％的甲殼質(zhì)衍生物稱為甲殼胺，將脫乙酰度15-45％范圍的甲殼質(zhì)衍生物稱為部分脫乙酰甲殼質(zhì)。本發(fā)明的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，脫乙酰度為15-45％范圍的部分脫乙酰甲殼質(zhì)既具有促進(jìn)雪旺氏細(xì)胞生長和抑制成纖維細(xì)胞生長的功能，又具有良好的生物相容性和降解吸收性能，從而可以避免脫乙酰度低的甲殼質(zhì)對雪旺氏細(xì)胞促進(jìn)性較差，而脫乙酰度高的甲殼胺生物相容性和降解吸收性能較差的矛盾。鑒于上述脫乙酰度范圍的部分脫乙酰甲殼質(zhì)既不能很好地溶解于適用于甲殼質(zhì)的二甲基乙酰胺一氯化鋰溶劑體系，又不能很好地溶解于適用于甲殼胺的稀醋酸水溶液溶解體系，本發(fā)明中采用脫乙酰度≥70％的甲殼胺的稀醋酸水溶液通過中空纖維紡絲和牽伸工藝制得甲殼胺中空管，然后通過乙酰化處理回補乙酰胺基-NHCOCH3，通過控制乙?；噭┑臐舛?、反應(yīng)溫度和時間，可以有效地控制脫乙酰度的范圍。
本發(fā)明所述“含藥物型生物套管”的浸漬處理液為含促神經(jīng)生長因子并具有一定粘度的海藻酸納水溶液。海藻酸納具有優(yōu)良的生物相容性和降解可吸收性，溶于水后形成一定的粘度，從而作為促神經(jīng)生長因子的載體使之附著于套管管壁，經(jīng)固化后得到“含藥物型生物套管”。
由于在紡絲和牽伸過程中大分子受到拉伸取向，因而所得中空管具有韌性而不易脆裂，同時所采用的制備工藝路線避免了毒性試劑二甲基乙酰胺的殘留問題。
按照上述方法制造的可吸收性人工生物套管，生物相容性好，對生物體無毒性和炎癥反應(yīng)。易于在體內(nèi)降解吸收，降解吸收周期適宜并可以人為調(diào)控。能夠促進(jìn)雪旺氏細(xì)胞生長和抑制成纖維細(xì)胞的生長，加入的促進(jìn)神經(jīng)再生因子能夠緩釋于神經(jīng)斷端，從而起到引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的作用。將其置于神經(jīng)的兩斷端間，進(jìn)行小間隙套接，可使復(fù)雜的神經(jīng)修復(fù)方法簡單化、程序化，并取得理想再生效果，從而可以替代周圍神經(jīng)修復(fù)中傳統(tǒng)外膜原位縫合的方法。
以下是本發(fā)明的具體實施例，所述的實施例是用于描述本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明。
將SD大鼠的腓總神經(jīng)于坐骨神經(jīng)分叉處分出后約5mm處切斷，切斷處留2mm間隙，將從75％乙醇中取出并以生理鹽水漂洗后備用的甲殼質(zhì)生物套管置于神經(jīng)兩斷端之間，用9-0縫線做1針套管壁神經(jīng)外膜掛線縫合，然后在對側(cè)套管端與神經(jīng)外膜表面加縫1針，使神經(jīng)兩斷端各嵌入套管內(nèi)。術(shù)后第3周，顯微鏡下解剖觀察，原切口解剖腓總神經(jīng)及套管橋接體，套管周圍無炎性反應(yīng)，與周圍組織無粘連，分界清楚，無瘢痕樣組織。管壁無塌陷，神經(jīng)近、遠(yuǎn)端與管腔無脫落。7周后管壁脆弱，仔細(xì)剝?nèi)ス鼙?，見近端神?jīng)已與遠(yuǎn)端神經(jīng)連接，在神經(jīng)連接處無瘢痕及粘連。11周后大體觀察出現(xiàn)展趾反射，顯微鏡下解剖觀察見套管基本軟化被組織吸收。將套管橋接部分新生神經(jīng)用1％鋨酸固定染色后，制成3-5μm橫斷切片及10μm的縱行切片，光學(xué)顯微鏡下觀察并計數(shù)有髓神經(jīng)纖維，在10×40倍下單位視野的有髓神經(jīng)纖維數(shù)為10.02。取近縫合點末梢側(cè)5mm神經(jīng)節(jié)段，2.5％戊二醛固定，812樹脂包埋后作成超薄切片，掃描電鏡下觀察，在4000-10000倍放大掃描電鏡下，可見有髓神經(jīng)纖維密集，髓鞘發(fā)育良好，髓鞘旁可見雪旺細(xì)胞胞質(zhì)，并可見到髓鞘的分層。上述實驗證明本發(fā)明所述的可吸收性人工生物套管可以有效地引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)再生。
實施例2其它同實施例1，所不同的是將實施例1中脫乙酰度82％的甲殼胺中空圓管經(jīng)醋酸酐-甲醇溶液乙?；幚砗笏妹撘阴６?7％的部分脫乙酰甲殼質(zhì)中空圓管置于含7％神經(jīng)生長因子(NGF/bFGF/復(fù)方紅芪注射液＝1/1/1.5重量比)的1％海藻酸鈉水溶液中浸漬30分鐘，取出后置于含組成同上的7％神經(jīng)生長因子、0.7％氯化鈣和1％氯化鋅的水溶液中浸漬20分鐘，然后取出，上述各處理液的溫度均控制為4-10℃。取出的套管在冷凍干燥機(jī)中冷凍干燥后置于冰箱中2-8℃保存?zhèn)溆?。?jīng)此生化處理后的套管增重8.2％，即套管中含神經(jīng)生長因子約6.5％，含海藻酸鈣/海藻酸鋅約1％(W/W)。術(shù)后第3周，顯微鏡下解剖觀察，原切口解剖腓總神經(jīng)及含緩釋藥物的生物套管橋接體，套管周圍無炎性反應(yīng)，與周圍組織無粘連，分界清楚，無瘢痕樣組織。管壁無塌陷，神經(jīng)近、遠(yuǎn)端與管腔無脫落。7周后管壁脆弱，仔細(xì)剝?nèi)ス鼙?，見近端神?jīng)已與遠(yuǎn)端神經(jīng)連接，在神經(jīng)連接處無瘢痕及粘連。10周后大體觀察出現(xiàn)展趾反射，顯微鏡下解剖觀察見套管基本被組織吸收。將套管橋接部分新生神經(jīng)用1％鋨酸固定染色后，制成3-5μm橫斷切片及10μm的縱行切片，光學(xué)顯微鏡下觀察并計數(shù)有髓神經(jīng)纖維，在10×40倍下單位視野的有髓神經(jīng)纖維數(shù)為10.27。取近縫合點末梢側(cè)5mm神經(jīng)節(jié)段，2.5％戊二醛固定，812樹脂包埋后作成超薄切片，掃描電鏡下觀察，在4000-10000倍放大掃描電鏡下，可見有髓神經(jīng)纖維密集，髓鞘發(fā)育良好，髓鞘旁可見雪旺細(xì)胞胞質(zhì)，并可見到髓鞘的分層。
實施例3將市售脫乙酰度為70％、重均分子量45萬的甲殼胺按2％濃度(W/W)溶解于6％的稀醋酸水溶液中，得到高粘度溶液，抽真空脫泡至得到無泡紡絲原液。將紡絲原液以0.8MPa空氣壓力從釜中壓出，經(jīng)紡絲計量泵計量，從中空噴絲孔的皮層擠出，與此同時，以0.3Mpa的空氣壓力將10％NaOH(W/W)水溶液凝固劑從中空噴絲孔的芯層擠出。紡絲原液擠出后直接進(jìn)入10％NaOH(W/W)水溶液凝固浴，在外界和芯層凝固劑的同時作用下甲殼胺得以析出凝固，經(jīng)導(dǎo)輥引出后牽伸3倍，得到連續(xù)的甲殼胺中空管，管內(nèi)徑6mm，管壁厚度2mm。將甲殼胺中空圓管用水洗滌至pH＝7.1，用甲醇脫水后置于50℃7％醋酸酐-甲醇溶液(V/V)中，10小時后取出，用75％乙醇洗滌，洗滌后浸泡于75％乙醇中消毒備用，所得甲殼質(zhì)中空圓管的脫乙酰度為25％，在生理鹽水(0.9％NaCl水溶液)中無溶解，濕態(tài)下穿針無脆裂。
體外試驗及動物試驗證明產(chǎn)物的強度、抗水溶性、生物吸收、炎癥反應(yīng)等性能均符合要求，該尺寸規(guī)格的產(chǎn)品可以用于臨床。
實施例4-6表1為本發(fā)明的一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性部分脫乙酰甲殼質(zhì)人工生物套管的制造方法及產(chǎn)品，基本采用實施例1的方法，不同之處見表1中所述。
表1
表2列出了對實施例4-6的產(chǎn)品進(jìn)一步處理的方法及產(chǎn)品。表2
比較例將脫乙酰度85％、分子量35萬的殼聚糖溶于2％(V/V)醋酸溶液，使殼聚糖的終濃度為2％(V/V)，充分?jǐn)嚢?、過濾、脫泡得殼聚糖原液，經(jīng)流延、NaOH水溶液處理、洗滌得純殼聚糖(脫乙酰度85％)膜，動物試驗中在大白鼠左腿后外側(cè)肌間隔處包埋該膜，至第6周基本未吸收，并伴有輕度的炎癥反應(yīng)。
權(quán)利要求
1.一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，其特征在于所述的生物套管為脫乙酰度15-45％的甲殼質(zhì)中空生物套管。
2.根據(jù)權(quán)利1所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，其特征在于所述的生物套管為脫乙酰度25-35％的甲殼質(zhì)中空生物套管。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，其特征在于所述的生物套管或管壁上進(jìn)一步包括海藻酸鹽和促神經(jīng)生長因子藥物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，其特征在于其中所述促神經(jīng)生長因子為NGF、bFGF、復(fù)方紅芪注射液，雪旺細(xì)胞或其一種以上的組合。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管，其特征在于所述的生物套管的內(nèi)徑0.7-6mm，壁厚0.1-2mm；適用于修復(fù)人神經(jīng)缺損的套管的內(nèi)徑優(yōu)選為1-6mm，壁厚1-2mm。
6.權(quán)利要求1所述的引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，其步驟為以經(jīng)過脫泡的甲殼胺的醋酸溶液為原料，經(jīng)中空纖維紡絲和牽伸工藝制得甲殼胺中空管，然后對所得甲殼胺中空管進(jìn)行乙?；幚?，以得到部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，其中所述的乙?；幚淼奶幚硪簽轶w積百分比為2-8％的醋酸酐-甲醇溶液，處理溫度為室溫至60℃。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，進(jìn)一步包括將脫乙酰度15-45％的部分脫乙酰甲殼質(zhì)套管以含促神經(jīng)生長因子藥物的處理液浸漬處理的步驟。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，其中所述的浸漬處理液為含促神經(jīng)生長因子的海藻酸納水溶液。
10.根據(jù)權(quán)利要求6或7所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，其步驟為將脫乙酰度大于70％、重均分子量15至50萬的甲殼胺按1-8％的濃度(W/W)溶解于1.5-6％的稀醋酸水溶液中，得到高粘度溶液，使該溶液經(jīng)真空脫泡至得到無泡紡絲原液。將該紡絲原液，經(jīng)紡絲計量泵計量，從中空噴絲孔的皮層擠出，與此同時，將1-10wt％NaOH水溶液凝固劑從中空噴絲孔的芯層擠出。該紡絲原液擠出后直接進(jìn)入1-10wt％NaOH水溶液凝固浴，經(jīng)導(dǎo)輥引出后牽伸0.5-3倍，得到連續(xù)的甲殼胺中空管，將該甲殼胺中空圓管用水洗滌至中性，用甲醇脫水后置于醋酸酐-甲醇溶液中乙?；撩撘阴６?5-45％后取出，用醇洗滌。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，其中乙?；臏囟葹?0-60℃，醋酸酐-甲醇溶液的體積濃度2-8％，反應(yīng)時間50分鐘-16小時。
12.根據(jù)權(quán)利要求8或9或10所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，包括將脫乙酰度15-45％的甲殼質(zhì)中空生物套管置于含0.5-2.5％海藻酸鈉和5-15％促神經(jīng)生長因子藥物的水溶液中浸漬10-300分鐘，處理溫度1-10℃。
13.根據(jù)權(quán)利要求9或10所述的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管的制備方法，將經(jīng)過處理的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管取出后置于含1-10％促神經(jīng)生長因子、1-8％氯化鈣或1-8％氯化鋅或0.1-8％氯化鈣和0.1-8％氯化鋅的混合水溶液中浸漬，處理溫度1-10℃，然后取出置于冷凍干燥機(jī)中干燥，得到含藥物型生物套管。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生的可吸收性人工生物套管及其制造方法。以甲殼胺為原料，經(jīng)中空纖維紡絲和牽伸工藝制得具有所需尺寸和物理機(jī)械性能的甲殼胺中空圓管，通過對所得甲殼胺中空圓管進(jìn)行乙?；幚恚玫矫撘阴６?5－45％的部分脫乙酰甲殼質(zhì)生物套管。以海藻酸納水溶液為促神經(jīng)生長因子的載體，使之附著于部分脫乙酰甲殼質(zhì)套管的管壁，經(jīng)固化后得到含藥物型生物套管。本發(fā)明的可吸收性人工生物套管，生物相容性好，對生物體無毒性和炎癥反應(yīng)，易于在體內(nèi)降解吸收，降解吸收周期適宜并可以人為調(diào)控。能夠促進(jìn)雪旺氏細(xì)胞生長和抑制成纖維細(xì)胞的生長，從而具有優(yōu)良的引導(dǎo)和促進(jìn)神經(jīng)有效再生作用。
文檔編號A61L29/00GK1411873SQ0113631
公開日2003年4月23日 申請日期2001年10月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年10月9日
發(fā)明者姜保國, 孫玉山, 傅中國, 朱慶松, 張殿英, 林華體, 李劍, 張彩霞, 任俠飛, 陸伊倫 申請人:中國紡織科學(xué)研究院, 北京大學(xué)人民醫(yī)院