專利名稱：用作jnk抑制劑的吡唑并蒽酮及其衍生物和它們的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及吡唑并蒽酮及其衍生物，它們具有廣泛的適應(yīng)征，包括用作Jun N-末端激活酶抑制劑，以及相關(guān)的組合物和方法。
JNK類通過在Thr-183和Tyr-185上雙重磷酸化而被激活。JNKK1(也被稱作MKK4)和JNKK2(MKK7)，這兩種MAPKK等級(jí)的酶可以調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)JNK的激活作用(Lin A.，Minden A.，Martinetto H.，Claret F.-Z.，Lange-Carter C.，Mercurlo F.，Johnson G.L.，和Karin M.Science，科學(xué)，268286-289，1995；Tournier C.，Whitmarsh A.J.，Cavanagh J.，Barrett T.，和Davis R.J.Proc.Nat.Acad Sci.USA 947337-7342，1997).JNKK2專一性地將JNK磷酸化，而JNKK1也可以磷酸化并激活p38。JNKK1和JNKK2兩者均廣泛地表達(dá)在哺乳動(dòng)物的組織中。JNKK1和JNKK2被MAPKKK酶——MEKK1和2所激活(Lange-Carter C.A.，Pleiman C.M.，Gardner A.M.，Blumer K.J.，和Johnson G.L.Science，科學(xué)，260315-319，1993；Yan M.，Dai J.C.，Deak J.C.，Kyriakis J.M.，Zon L.I.，Woodgett J.R.，和Templeton D.J.Nature 372798-781，1994)。MEKK1和MEKK2兩者均廣泛地表達(dá)在哺乳動(dòng)物的組織中。
在許多疾病背景下JNK途徑的激活已得以引證，提供了旨在將該途徑用于藥物的發(fā)現(xiàn)的基本原理。另外，分子遺傳學(xué)方法已經(jīng)確認(rèn)這種途徑對(duì)幾種疾病的致病作用。例如，自身免疫性疾病和炎癥疾病是由于免疫系統(tǒng)的過分激活而引起的，被激活的免疫細(xì)胞表達(dá)出許多基因編碼炎性分子，包括細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、細(xì)胞表面受體、細(xì)胞粘著分子和降解酶。許多這樣的基因是通過JNK途徑進(jìn)行控制的，即通過轉(zhuǎn)錄因子AP-1和ATF-2，包括TNFa、IL-2、E-選擇蛋白和間質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases)如膠原酶-1(Manning A.M.和Mercurio F.Exp Opin Invest Drugs 6555-567，1997)。單核細(xì)胞、組織巨噬細(xì)胞和組織肥大細(xì)胞是TNFa生產(chǎn)的主要源頭，在細(xì)菌脂多糖刺激的巨噬細(xì)胞和FceRII受體刺激的肥大細(xì)胞中，JNK途徑控制TNFa的生產(chǎn)(Swantek J.L.，Cobb M.H.，Geppert T.D.Mol.Cell.Biol.176274-6282，1997；Ishizuka，T.，Tereda N.，Gerwins，P..Hamelmann E.，Oshiba A.，F(xiàn)anger G.R.，JohnsonG.L.，和Gelfland E.W.Proc.Nat.Acad.Sci.USA 946358-6363，1997)。抑制JNK的激活能有效地控制TNFa在這些細(xì)胞中的分泌，因此JNK途徑能控制這一主要促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生。間質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中促進(jìn)軟骨和骨頭的腐蝕，并在其它自身免疫性疾病中使組織破壞。MMPs的誘導(dǎo)型表達(dá)，包括MMP-3和MMP-9，II和IV型膠原酶，通過JNK途徑和AP-1的激活而進(jìn)行調(diào)節(jié)(Gum，R.，Wang.H..Lengyel，E..Juarez.J.，和Boyd，D.Oncogene141481-1493，1997)。在TNFa、IL-1或Fas配體活化的人類風(fēng)濕滑膜細(xì)胞(synoviocyte)中，JNK途徑是被激活的(Han Z.，BoyleD.L..Aupperle K.R..Bennett B.，Manning A.M.，F(xiàn)irestein G.S.J Pharm.Exp.Therap.2911-7，1999；Okamoto K.，F(xiàn)ujisawa K.，Hasunuma T.，Kobata T.，Sumida T.，和Nishioka K.Arth & Rheum40919-92615，1997)，抑制JNK的激活會(huì)降低AP-1的活化和膠原酶-1的表達(dá)(Han等，同上)。因此JNK途徑能夠控制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎細(xì)胞中的MMP表達(dá)。
T淋巴細(xì)胞不適當(dāng)?shù)募せ顣?huì)引發(fā)和維持許多自身免疫性疾病，包括哮喘、腸炎疾病和多發(fā)性硬化癥。JNK途徑在T細(xì)胞中由于抗原的刺激和CD28受體的共同刺激(co-stimulation)而被活化，并且控制生長(zhǎng)因子IL-2的生產(chǎn)和細(xì)胞的增生(Su B.，Jacinto E..Hibi M.Kallunki T.，Karin M.，Ben-Neriah Y.Cell 77727-736，1994；Faris M.，Kokot N.，Lee L.，和Nel A.E.J Biol.Chem.27127366-27373，1996)。取自JNKK1有遺傳性缺陷的鼠的外圍T細(xì)胞表明，在CD28共同刺激和PMA/Ca2+實(shí)電解質(zhì)活化之后，增生和IL-2的生產(chǎn)減少，這就提供了在這些細(xì)胞中JNK途徑的作用的重要證據(jù)。(Nishina H.，Bachmann M.，Oliveria-dos-Santos A.J.，等JExp.Med 186941-953，1997)。已經(jīng)知道，在沒有輔助細(xì)胞衍生的共同刺激信號(hào)存在的情況下，由抗原受體激活的T細(xì)胞就失去了合成IL-2的能力，一種稱為無克隆能力(clonal anergy)的狀態(tài)。這是一種重要方法，通過該方法在外周循環(huán)中除去自反應(yīng)(auto-reactive)T細(xì)胞群。很明顯，無變應(yīng)性的T細(xì)胞在應(yīng)答CD3-和CD28-受體的共同刺激時(shí)，不能激活JNK途徑，即使JNK酶的表達(dá)沒有變化(LiW.，Whaley C.D.，Mondino A.，和Mueller D.L.Science，科學(xué)，2711272-1276，1996)。最近，對(duì)JNK-有缺陷的鼠所進(jìn)行的測(cè)驗(yàn)表明，JNK途徑在T細(xì)胞活化和分化為1型和2型T輔助細(xì)胞過程中，具有關(guān)鍵作用。JNK1或JNK2打破了鼠的正常發(fā)育，而外表上并不顯著。這些鼠的被激活的原初CD4+T細(xì)胞不能生產(chǎn)IL-2，并且不能很好地增殖(Sabapathy，K，Hu，Y，Kallunki，T，Schreiber，M，David，J-P.Jochum，W，Wagner，E，Karin，M.Curr Biol 9116-125，1999)。取自這些鼠的T細(xì)胞中，能夠誘導(dǎo)T細(xì)胞的分化，生成Th1細(xì)胞(IFN-g和TNFβ的發(fā)生器)和Th2效應(yīng)細(xì)胞(IL-4，IL-5，IL-6，IL-10和IL-13的發(fā)生器)[22，23]。JNK1或JNK2任一個(gè)在鼠體內(nèi)的缺失會(huì)導(dǎo)致Th1效應(yīng)細(xì)胞表達(dá)IFNg能力選擇性的缺損，這就提示JNK1和JNK2在T細(xì)胞中沒有多余的功能，它們?cè)诳刂萍?xì)胞的生長(zhǎng)、分化和死亡方面起著不同的作用。因此JNK途徑是調(diào)節(jié)T細(xì)胞應(yīng)答抗原的重要所在。
心血管疾病(CVD)在世界范圍內(nèi)占年死亡總數(shù)的近四分之一。血管疾病如動(dòng)脈粥樣硬化和再狹窄(restenosis)是由于管壁的不規(guī)則生長(zhǎng)，限制了通向生命器官的血流。JNK途徑被動(dòng)脈粥樣化的促進(jìn)因素所激活，并控制局部細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子在血管細(xì)胞內(nèi)的生成(Yang，DD，Conze，D，Whitmarsh，AJ，等，Immunity，9575，1998)。另外，血流、血液動(dòng)力和血流量的變化導(dǎo)致JNK在血管內(nèi)皮的激活，引起AP-1的活化和促動(dòng)脈粥樣硬化基因(pro-atherosclerotic gene)的表達(dá)(Aspenstrom P.，Lindberg U.，和Hall A Curr.Biol670-77，1996)。心臟、腎和腦的局部缺血以及與再灌流(reperfusion)相關(guān)的局部缺血會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡和瘢痕的形成，這會(huì)最終導(dǎo)致充血性心力衰竭、腎衰和腦機(jī)能障礙。在器官移植術(shù)中，先前缺血的供體器官的再灌流會(huì)導(dǎo)致急性白細(xì)胞介導(dǎo)的組織損傷，并推遲移植物的功能。JNK途徑受到局部缺血和再灌流而激活(Li Y.，Shyy J.，Li S.，Lee J.，Su B.，Karin M..Chien S Mol.Cell.Biol.165947-5954，1996)，會(huì)導(dǎo)致JNK-應(yīng)答基因的激活和白細(xì)胞介導(dǎo)的組織損傷。在許多不同的背景下，JNK的活化可以是促-編程性細(xì)胞死亡的或抗-編程性細(xì)胞死亡的(pro-or anti-apoptotic)，局部缺血和再灌流后的心臟組織中，JNK活化與編程性細(xì)胞死亡的增加相關(guān)(Pombo CM.Bonventre JV，Avruch J，Woodgett JR，Kyriakis J.M，F(xiàn)orce T.J.Biol Chem.26926546-26551，1994)。
癌癥的特點(diǎn)在于細(xì)胞不受控制的生長(zhǎng)、增殖和遷移。癌癥是第二大死亡原因，1996年美國(guó)的死亡人數(shù)為500,000，并且估計(jì)有130萬新病人。信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)變異途徑對(duì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)形變異和癌起作用的觀念一般被接受。導(dǎo)致AP-1的JNK途徑似乎在癌癥中起決定性作用。c-jun的表達(dá)在早期肺癌發(fā)生改變并可能間介非小細(xì)胞肺癌中的生長(zhǎng)因子信號(hào)(Yin T.，Sandhu G.，Wolfgang C.D.，Burrier A.，Webb R.L..Rigel D.F.Hai T.，和Whelan J.J BioL Chem.27219943-19950，1997)。事實(shí)上，c-jun在細(xì)胞中的過分表達(dá)(over-expression)導(dǎo)致轉(zhuǎn)形變異，而阻斷c-jun活性會(huì)抑制MCF-7集落的形成(Szabo E.，Riffe M.，Steinberg SM.，Birrer M.J.，Linnoila R.I.Cancer Res.癌的研究，56305-315.1996)。DNA的破壞性試劑、離子化輻射和腫瘤壞死因子均能激活JNK途徑。除了控制c-jun的生成和活化以外，JNK的激活可以控制p53的磷酸化，因此可以調(diào)整細(xì)胞的循環(huán)級(jí)數(shù)(cycle progression)(Chen T.K.，Smith L.M.，Gebhardt D.K..Birrer M.J.，Brown P.H.Mol.Carcinogenesis 15215-226，1996)。致癌基因BCR-Ab1，與慢性骨髓性白血病的t(9，22)Philadelphia染色體易位相關(guān)，能夠激活JNK并導(dǎo)致造血細(xì)胞的轉(zhuǎn)形變異(Milne D.M.，Campbell L.E.，Campbell D.G.，Meek D.W.J BioLChem.2705511-5518，1995)。天然存在的JNK抑制蛋白，稱之為JIP-1，對(duì)JNK活化的選擇性抑制能阻斷BCR-Ab1表達(dá)所引起的細(xì)胞轉(zhuǎn)形變異(Raitano A.B.，Halpern J.R.，Hambuch T.M.，Sawyers C.L.Proc.Nat.Acad.Sci USA 9211746-11750，1995)。因此JNK抑制劑可以阻斷轉(zhuǎn)形變異和腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。
因此，本領(lǐng)域需要JNK選擇性抑制劑，以及它們的制備方法、含有這些抑制劑的藥物組合物，和抑制JNK的方法和處于JNK抑制應(yīng)答的哺乳動(dòng)物疾病的治療方法。本發(fā)明滿足了這些需要，并進(jìn)一步提供了相關(guān)的便利。
本發(fā)明還涉及治療多種疾病的方法，將有效量的JNK抑制劑給予需要的動(dòng)物和受治療者(在此稱為“患者”)，一般是溫血?jiǎng)游?包括人)。給藥前，優(yōu)選將本發(fā)明化合物配制為藥物組合物，它含有有效劑量的一種或多種JNK抑制劑，并與一種(或多種)可藥用載體相混合。用本發(fā)明化合物或含有本發(fā)明化合物的藥物組合物，可進(jìn)行治療的疾病包括可以通過JNK抑制劑給藥而獲益的任何疾病，特別適用于預(yù)防和/或治療的各種疾病包括(但不限于)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、哮喘、支氣管炎、囊性纖維變性、炎性腸疾病、過敏性腸綜合征、粘液性結(jié)腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、胃炎、食管炎、肝炎、多發(fā)性硬化癥、動(dòng)脈粥樣硬化、血管成形術(shù)后的再狹窄、左心室肥大、心肌梗死、中風(fēng)，局部缺血引起的心臟、腎臟、肝臟或腦損傷，移植性排異、內(nèi)毒素休克、銀屑病、濕疹、皮炎、癲癇、Alzheimer氏病、Huntington氏舞蹈病、肌萎縮性側(cè)索硬化、外周神經(jīng)病、脊索損傷、Parkinson氏病和癌癥。
參照下面的詳細(xì)說明，上述這些內(nèi)容以及本發(fā)明的其它方面將更加清楚，為此，本文引用了一些專利和其它文獻(xiàn)，更具體地闡明本發(fā)明的各個(gè)方面，因此，這些文件按引用全部結(jié)合至本文。
附圖2舉例說明本發(fā)明的代表性化合物在內(nèi)毒素休克鼠模型中抑制TNF-a的能力。
附圖3舉例說明本發(fā)明的代表性化合物在肺炎鼠模型中抑制白細(xì)胞募集反應(yīng)的能力。
附圖4舉例說明本發(fā)明的代表性化合物在佐劑關(guān)節(jié)炎(adjuvantarthrisis)鼠模型中抑制爪腫脹(附圖4A)、關(guān)節(jié)損壞(附圖4B)、轉(zhuǎn)錄因子AP-1的活化(附圖4C)和MMP-13的表達(dá)(附圖4D)的能力。
附圖5舉例說明本發(fā)明的代表性化合物降低紅藻氨酸(kainicacid)誘導(dǎo)的癲癇發(fā)作反應(yīng)的能力。
發(fā)明詳述如上所述，本發(fā)明涉及對(duì)JNK具有作為選擇性抑制劑活性的化合物以及與該化合物相關(guān)的組合物和方法，本發(fā)明化合物具有下面的結(jié)構(gòu)(I) 和它們的可藥用鹽，其中R1和R2是任選的相同或不同的取代基，并且獨(dú)立地表示烷基、鹵素、硝基、三氟甲基、磺酰基、羧基、烷氧羰基、烷氧基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基、芳烷基、環(huán)烷基烷氧基、環(huán)烷基氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氨基烷氧基、一-或二-烷基氨基烷氧基，或者由式(a)、(b)、(c)或(d)表示的基團(tuán) R3和R4一起表示亞烷基或含有雜原子的亞烷基，或者R3和R4相同或不同并各自獨(dú)立地表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、芳氧基烷基、烷氧基烷基、烷氧基氨基或烷氧基(一-或二-烷基氨基)；以及R5表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、烷氧基、氨基、一-或二-烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、環(huán)烷基氨基或環(huán)烷基烷基氨基。
上面使用的術(shù)語(yǔ)，在本文中具有如下的含義，“烷基”是指直鏈或支鏈的、飽和或不飽和的具有1-8個(gè)碳原子的烷基鏈，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、丙烯基、1-丁烯基、丙炔基等等。
“鹵素”是指氟、氯、溴或碘。
“三氟甲基”是指-CF3。
“磺?；笔侵?SO3H。
“羧基”是指-COOH。
“烷氧基”是指-O-(烷基)，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基等等。
“烷氧基烷氧基”是指-O-(烷基)-O-(烷基)，如-OCH2CH2OCH3等等。
“烷氧羰基”是指-C(＝O)O(烷基)，如-C(＝O)OCH3、-C(＝O)OCH2CH3等等。
“烷氧基烷基”是指-(烷基)-O-(烷基)，如-CH2OCH3、-CH2OCH2CH3等等。
“芳基”是指含有5-10個(gè)環(huán)原子的碳環(huán)或雜環(huán)芳香基。碳環(huán)芳香基的環(huán)原子全部是碳原子，包括苯基和萘基；雜環(huán)芳香基的環(huán)原子至少含有一個(gè)選自氮、氧和硫的雜原子，包括吡啶基、嘧啶基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吡唑基、噠嗪基、吡嗪基、三嗪基、四唑基和吲哚基。
“芳氧基”是指-O-(芳基)，如-O-苯基、-O-吡啶基等等。
“芳烷基”是指-(烷基)-(芳基)，如芐基(即，-CH2苯基)、-CH2-吡啶基等等。
“芳基烷氧基”是指-O-(烷基)-(芳基)，例如-O-芐基，-O-CH2-吡啶基等等。
“環(huán)烷基”是指具有3-7個(gè)碳原子的環(huán)狀烷基，如環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基等等。
“環(huán)烷氧基”是指-O-(環(huán)烷基)，如-O-環(huán)己基等等。
“環(huán)烷基烷氧基”是指-O-(烷基)-(環(huán)烷基)，如-O-CH2-環(huán)己基等等。
“亞烷基”是指二價(jià)基團(tuán)-CnH2n-，其中n是1-8的整數(shù)，如-CH2-、-CH2CH2-、-CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2-、-CH2CH2CH2CH2CH2-等等。
“含有雜原子的亞烷基”是指一個(gè)亞烷基，其中至少一個(gè)碳原子被選自氮、氧和硫的雜原子所替換，如-CH2CH2OCH2CH2-等等。
“氨基烷氧基”是指-O-(烷基)-NH2，如-OCH2NH2、-OCH2CH2NH2等等。
“一-或二-烷基氨基”分別是指-NH(烷基)或-N(烷基)(烷基)，如-NHCH3、-N(CH3)2等等。
“一-或二-烷基氨基烷氧基”分別是指-O-(烷基)-NH(烷基)或-O-(烷基)-N(烷基)(烷基)，如-OCH2NHCH3、-OCH2CH2N(CH3)2等等。
“芳基氨基”是指-NH(芳基)，如-NH-苯基、-NH-吡啶基等等。
“芳烷基氨基”是指NH-(烷基)-(芳基)，如-NH-芐基、-NHCH2-吡啶基等等。
“烷基氨基”是指-NH(烷基)，如-NHCH3、-NHCH2CH3等等。
“環(huán)烷基氨基″”是指-NH-(環(huán)烷基)，如-NH-環(huán)己基等等。
“環(huán)烷基烷基氨基”是指-NH-(烷基)-(環(huán)烷基)，如-NHCH2環(huán)己基等等。
在R1和R2不存在的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物具有下述結(jié)構(gòu)(II)(本文也稱為“化合物1”) 該化合物可以從Pfaltz-Bauer(Conn.，U.S.)購(gòu)得。
在R1和R2只有一個(gè)存在的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物具有下述結(jié)構(gòu)(III)或(IV)之一 在R1和R2兩個(gè)都存在的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物具有下述結(jié)構(gòu)(V)、(VI)或(VII)之一 結(jié)構(gòu)式(I)化合物的可藥用鹽也在本發(fā)明的范圍之內(nèi)，為此，化合物通常可以以游離堿的形式使用，另外，化合物也可以以酸加成鹽的形式應(yīng)用。本發(fā)明的游離堿氨基化合物的酸加成鹽可以按本領(lǐng)域已知的方法制備，并且可以由有機(jī)酸或無機(jī)酸生成。適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)酸包括馬來酸、富馬酸、苯甲酸、抗壞血酸、琥珀酸、甲磺酸、乙酸、草酸、丙酸、酒石酸、水楊酸、檸檬酸、葡萄糖酸、乳酸、扁桃酸、肉桂酸、天門冬氨酸、硬脂酸、棕櫚酸、羥基乙酸、谷氨酸和苯磺酸；適當(dāng)?shù)臒o機(jī)酸包括氫氯酸、氫溴酸、硫酸、磷酸和硝酸。因此，術(shù)語(yǔ)結(jié)構(gòu)式(I)化合物的“可藥用鹽”包括任何和所有可接受的鹽的形式。
本發(fā)明化合物通?？梢园凑毡绢I(lǐng)域技術(shù)人員已知的有機(jī)合成方法制備，也可以按照下面的一般方法或?qū)嵤├龅姆椒ㄖ苽?。因此，本發(fā)明化合物可以按照下面的反應(yīng)線路1-7制備。反應(yīng)線路1 在反應(yīng)線路1，將適當(dāng)?shù)妮祯c肼在合適的溶劑(如吡啶、二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿或二氧六環(huán))中進(jìn)行縮合，可制備本發(fā)明的吡唑并蒽酮，所述蒽醌在1-位上具有離去基團(tuán)(如氟、氯、溴、碘、硝基、甲磺酰氧基、甲苯磺酰氧基或苯氧基)。反應(yīng)在0℃-200℃溫度范圍進(jìn)行1-16小時(shí)。適當(dāng)?shù)妮祯鹗嘉锟梢詮牟煌膩碓词匈?gòu)，在蒽醌環(huán)上不同的位置具有R1和/或R2基團(tuán)。出于說明的目的，有以下的反應(yīng)線路僅描述5-和/或7-取代的吡唑并蒽酮的合成，本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，在其它位置取代的吡唑并蒽酮也可以按照類似的方法，從適當(dāng)取代的蒽醌起始物來制備。反應(yīng)線路2 在反應(yīng)線路2，將5-氯吡唑并蒽酮與一-或二-取代的胺在0-250℃，在沒有或有溶劑存在的情況下，進(jìn)行縮合反應(yīng)1-16小時(shí)，可制備具有5-氨基取代基的吡唑并蒽酮。在過量的胺存在下，或者在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，常用的溶劑是吡啶、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氯乙烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甘醇二甲醚或三甘醇二甲醚。反應(yīng)線路3 在反應(yīng)線路3，將7-氯吡唑并蒽酮與一-或二-取代的胺在0-250℃，在沒有或有溶劑存在的情況下，進(jìn)行縮合反應(yīng)1-16小時(shí)，可以制備具有7-氨基取代基的吡唑并蒽酮。在過量的胺存在下，或者在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，常用的溶劑是吡啶、二甲基甲酰胺、二甲亞砜、二氯乙烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甘醇二甲醚或三甘醇二甲醚。反應(yīng)線路4
在反應(yīng)線路4，將5-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與酰氯或磺酰氯進(jìn)行縮合，然后進(jìn)行脫保護(hù)，可制備具有5-?；?或磺?；被〈倪吝虿⑤焱?。5-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與適當(dāng)?shù)孽Ｂ萊6COCl或磺酰氯R6SO2Cl縮合反應(yīng)，是在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，在溶劑中于-20℃-50℃進(jìn)行0.5-16小時(shí)，溶劑為例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甲基甲酰胺和乙酸乙酯。實(shí)施脫保護(hù)步驟，可以將上述產(chǎn)物用酸如三氟乙酸、含水氫氯酸、含水氫溴酸或含水硫酸進(jìn)行處理。
起始物可以從兩個(gè)步驟制備，5-硝基吡唑并蒽酮的2-位可以在堿的協(xié)助下，用保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)，保護(hù)基如甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)或4-甲氧基芐基(PMB)，所用的堿如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅烷基氮化鈉(sodium hexamethyldisilazide)、六甲基二硅烷基氮化鉀或二異丙基氨化鋰；使用叔胺作為堿時(shí)，可以用4-(N，N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)作為催化劑。反應(yīng)一般在-40-60℃在溶劑中進(jìn)行1-16小時(shí)，所用溶劑如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷。作為氮保護(hù)基，MEM基團(tuán)是優(yōu)選的。
然后，將N-保護(hù)的5-硝基吡唑并蒽酮用各種還原劑如Sn或Fe金屬在酸性介質(zhì)(如乙酸或含水氫氯酸)下還原為它的5-氨基衍生物。反應(yīng)一般在20-160℃進(jìn)行1-16小時(shí)。通過氫化反應(yīng)也可以實(shí)現(xiàn)同樣的轉(zhuǎn)化，反應(yīng)在過渡金屬催化劑存在下，例如，有或沒有載體(如炭)的鈀、鉑、銠或銥，在溶劑中，例如乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷，在1-20大氣壓氫，于20-60℃進(jìn)行1-16小時(shí)。使用鈀/炭作催化劑的氫化反應(yīng)的方法是優(yōu)選的。反應(yīng)線路5 在反應(yīng)線路5，將7-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與酰氯或磺酰氯進(jìn)行縮合，然后進(jìn)行脫保護(hù)，可制備具有7-?；?或磺?；被〈倪吝虿⑤焱?。7-氨基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與適當(dāng)?shù)孽Ｂ萊6COCl或磺酰氯R6SO2Cl縮合反應(yīng)，是在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，在溶劑中于-20℃-50℃進(jìn)行0.5-16小時(shí)，溶劑為例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甲基甲酰胺或乙酸乙酯。實(shí)施脫保護(hù)步驟，可以將上述產(chǎn)物用酸如三氟乙酸、含水氫氯酸、含水氫溴酸或含水硫酸進(jìn)行處理。
起始物可以從兩個(gè)步驟制備，將7-硝基吡唑并蒽酮的2-位在堿的協(xié)助下，用保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)，保護(hù)基如甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)或4-甲氧基芐基(PMB)，所用的堿如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅烷基氮化鈉、六甲基二硅烷基氮化鉀或二異丙基氨化鋰；使用叔胺作為堿時(shí)，可以用4-(N，N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)作為催化劑。反應(yīng)一般在-40-60℃在溶劑中進(jìn)行1-16小時(shí)，所用溶劑如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷。作為氮保護(hù)基，MEM基團(tuán)是優(yōu)選的。
然后，將N-保護(hù)的7-硝基吡唑并蒽酮用各種還原劑如Sn或Fe金屬在酸性介質(zhì)(如乙酸或含水氫氯酸)下還原為它的7-氨基衍生物。反應(yīng)一般在20-160℃進(jìn)行1-16小時(shí)。通過氫化反應(yīng)也可以實(shí)現(xiàn)同樣的轉(zhuǎn)化，反應(yīng)在過渡金屬催化劑存在下，例如，有或沒有載體(如炭)的鈀、鉑、銠或銥，在溶劑中，例如乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷，在1-20大氣壓氫，于20-60℃進(jìn)行1-16小時(shí)。使用鈀/炭作催化劑的氫化反應(yīng)的方法是優(yōu)選的。反應(yīng)線路6 在反應(yīng)線路6，將5-羥基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與烷基鹵或磺酸酯R7-X進(jìn)行縮合，然后進(jìn)行脫保護(hù)，可制備具有5-烷氧基取代基的吡唑并蒽酮，X作為離去基團(tuán)，可以使用氯化物、溴化物、碘化物、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯。5-羥基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與適當(dāng)?shù)耐榛u或磺酸酯的縮合反應(yīng)，是在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，于-20℃-50℃在溶劑中進(jìn)行0.5-16小時(shí)，溶劑為例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甲基甲酰胺或乙酸乙酯。實(shí)施脫保護(hù)步驟，是將上述產(chǎn)物用酸如三氟乙酸、含水氫氯酸、含水氫溴酸或含水硫酸進(jìn)行處理。
起始物可以從兩個(gè)步驟制備，將5-芐氧基吡唑并蒽酮的2-位在堿的協(xié)助下，用保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)，保護(hù)基如甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)或4-甲氧基芐基(PMB)，所用的堿如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅烷基氮化鈉、六甲基二硅烷基氮化鉀或二異丙基氨化鋰；使用叔胺作為堿時(shí)，可以用4-(N，N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)作為催化劑。反應(yīng)一般在-40-60℃在溶劑中進(jìn)行1-16小時(shí)，所用溶劑如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷。作為氮保護(hù)基，MEM基團(tuán)是優(yōu)選的。
然后，通過氫化反應(yīng)將N-保護(hù)的5-芐氧基吡唑并蒽酮還原為它的5-羥基衍生物，反應(yīng)在過渡金屬催化劑例如，有或沒有載體(如炭)的鈀、鉑、銠或銥存在下，在溶劑中，例如乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷，在1-20大氣壓的氫，于20-60℃進(jìn)行1-16小時(shí)。使用鈀/炭作催化劑的氫化反應(yīng)的方法是優(yōu)選的。反應(yīng)線路7 在反應(yīng)線路7，將7-羥基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與烷基鹵或磺酸酯R7-X進(jìn)行縮合，然后進(jìn)行脫保護(hù)，可制備具有5-烷氧基取代基的吡唑并蒽酮，X作為離去基團(tuán)，可以使用氯化物、溴化物、碘化物、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、苯磺酸酯或三氟甲磺酸酯。7-羥基-2-(2-甲氧基乙氧基甲基)吡唑并蒽酮與適當(dāng)?shù)耐榛u或磺酸酯的縮合反應(yīng)，是在酸猝滅劑如三乙胺、二異丙基乙胺、碳酸氫鈉、碳酸鉀或氫氧化鈉的存在下，于-20℃-50℃在溶劑中進(jìn)行0.5-16小時(shí)，溶劑為例如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)、二甲基甲酰胺或乙酸乙酯。實(shí)施脫保護(hù)步驟，是將上述產(chǎn)物用酸如三氟乙酸、含水氫氯酸、含水氫溴酸或含水硫酸進(jìn)行處理。
起始物可以從兩個(gè)步驟制備，將7-芐氧基吡唑并蒽酮的2-位在堿的協(xié)助下，用保護(hù)基進(jìn)行保護(hù)，保護(hù)基如甲氧基甲基(MOM)、甲氧基乙氧基甲基(MEM)、2-三甲基甲硅烷基乙氧基甲基(SEM)或4-甲氧基芐基(PMB)，所用的堿如三乙胺、二異丙基乙胺、吡啶、六甲基二硅烷基氮化鈉、六甲基二硅烷基氮化鉀或二異丙基氨化鋰；使用叔胺作為堿時(shí)，可以用4-(N，N-二甲基氨基)吡啶(DMAP)作為催化劑。反應(yīng)一般在-40-60℃在溶劑中進(jìn)行1-16小時(shí)，所用溶劑如二氯甲烷、氯仿、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷。作為氮保護(hù)基，MEM基團(tuán)是優(yōu)選的。
然后，通過氫化反應(yīng)將N-保護(hù)的7-芐氧基吡唑并蒽酮還原為它的7-羥基衍生物，反應(yīng)在過渡金屬催化劑例如，有或沒有載體(如炭)的鈀、鉑、銠或銥存在下，在溶劑中，例如乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、二氧六環(huán)或二甲氧基乙烷，在1-20大氣壓的氫，于20-60℃進(jìn)行1-16小時(shí)。使用鈀/炭作催化劑的氫化反應(yīng)的方法是優(yōu)選的。
結(jié)構(gòu)式(V)、(VI)和(VII)的化合物可以按照上述相同的方法制備，所使用的起始物在所需產(chǎn)物的相應(yīng)位置具有多個(gè)反應(yīng)部位。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，公開了含有一種或多種本發(fā)明化合物的藥物組合物。出于給藥的目的，優(yōu)選將結(jié)構(gòu)式(I)化合物制劑成為藥物組合物。本發(fā)明的藥物組合物含有本發(fā)明化合物和可藥用載體，其中化合物在組合物中的存在量是治療相關(guān)疾病的有效量。根據(jù)給藥途徑的不同，本發(fā)明的藥物組合物每單位劑量?jī)?yōu)選包含0.1mg-250mg的結(jié)構(gòu)式(I)化合物，更優(yōu)選1mg-60mg。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠很容易地確定出合適的濃度和劑量。
可藥用載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟悉的，對(duì)于液體溶液制劑組合物，可應(yīng)用的載體包括生理鹽水和無菌水，并且可任選地包含有抗氧劑、緩沖劑、制菌劑和其它常規(guī)添加劑。組合物還可以制成丸劑、膠囊劑、顆粒劑或片劑，除了本發(fā)明化合物以外，它們還含有稀釋劑、分散劑和表面活性劑、粘結(jié)劑和潤(rùn)滑劑。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以進(jìn)一步將本發(fā)明化合物以適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行制劑，以及根據(jù)一般慣例制劑，如在Remington’s Pharmaceutical Sciences，[Gennaro，Ed.，MackPublishing Co.，Easton，PA 1990]中所公開的方法。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供了治療各種疾病的方法，對(duì)需要的患者給以有效量的JNK抑制劑。使用本發(fā)明化合物或含有該化合物的藥物組合物，可以進(jìn)行治療的疾病包括任何對(duì)JNK抑制反應(yīng)應(yīng)答因而能由使用JNK抑制劑受益的疾病。這方面有代表性的疾病包括(但不限于)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、哮喘、支氣管炎、囊性纖維變性、炎性腸疾病、過敏性腸綜合征、粘液性結(jié)腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、胃炎、食管炎、肝炎、多發(fā)性硬化癥、動(dòng)脈粥樣硬化、血管成形術(shù)后的再狹窄、左心室肥大、心肌梗死、中風(fēng)，局部缺血引起的心臟、腎臟、肝臟或腦損傷，移植性排異(如腎、肝、心、肺等等)、內(nèi)毒素休克、銀屑病、濕疹、皮炎、癲癇、Alzheimer氏病、Huntington氏舞蹈病、肌萎縮性側(cè)索硬化、外周神經(jīng)病、脊索損傷、Parkinson氏病和癌癥。
本發(fā)明方法包括本發(fā)明化合物的全身給藥(systemicadministration)，優(yōu)選以藥物組合物的形式給藥。在此所述的全身給藥，包括口服和非腸道給藥兩種方法。對(duì)口服給藥而言，適當(dāng)?shù)乃幬锝M合物包括粉劑、丸劑、顆粒劑、片劑和膠囊劑，以及液體、糖漿、懸浮液和乳狀液，這些組合物還可以包括矯味劑、防腐劑、懸浮劑、增稠劑和乳化劑，以及其它可藥用添加劑。對(duì)非腸道給藥而言，本發(fā)明化合物可以制成水性注射液，它可以含有緩沖劑、抗氧化劑、制菌劑以及這類溶液中常用的添加劑。
以下給出實(shí)施例的目的在于舉例說明，而不是限定。
實(shí)施例實(shí)施例1有代表性的化合物的合成 A.蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(“化合物1”) 將水合肼加入到2-氯蒽醌(Aldrich)在10mL吡啶的溶液中，混合物在100℃加熱16小時(shí)。將混合物冷卻，真空蒸發(fā)溶劑，將殘留物移至熱的6N HCI中，過濾收集固體。粗產(chǎn)物在硅膠上進(jìn)行急驟色譜分離，得到黃色固體狀蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(“化合物1”)。
由于化合物1的溶解度有限，其純化可如下進(jìn)行首先將化合物1衍生為更易溶解的中間產(chǎn)物，如相應(yīng)的乙酸鹽，將中間產(chǎn)物重結(jié)晶，然后將中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化，以良好的產(chǎn)率得到純凈的化合物1。更具體地講，向吡唑并蒽酮(9.67g，43.9mmol)的乙酸(700mL)溶液中加入乙酸酐(12.4mL.132mmol)，溶液加熱至80℃5小時(shí)，然后冷卻至室溫，16小時(shí)后將反應(yīng)混合物冷卻至0℃2小時(shí)。然后過濾得到中間產(chǎn)物N-乙?；吝虿⑤焱?，該中間產(chǎn)物在乙酸中重結(jié)晶，得到純凈的中間產(chǎn)物(5.96g，52％)。1H NMR(CDCL3)δ10.6(br s，1H)，8.46(d，1H)，8.33(d，1H)，8.26(d，1H)，8.08(d，1H)，7.96-7.87(m，2H)，7.78(t，1H)，2.83(s，3H)；ES-MS(m/z)263[M+1]+。往純凈中間產(chǎn)物(5.96g，23mmol)的甲醇(600mL)溶液中加入氫氧化銨(60mL)，寶溫?cái)嚢璺磻?yīng)16小時(shí)，然后過濾，于真空箱中干燥，回收第二茬晶體，得到總量為4.8g、純度大于98％的化合物1，ES-MS(m/z)221[M+1]+。B.5-氯蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，從1，4-二氯蒽醌(市售產(chǎn)品)制備。C.7-氯蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，從1，5-二氯蒽醌(市售產(chǎn)品)制備。D.5-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以從1，4-二硝基蒽醌制備(Krapcho，A.P.；Avery，K.L.，Jr.J.Org.Chem.有機(jī)化學(xué)雜志，55，5562-4，1990)。E.7-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，從1，5-二氯蒽醌(市售產(chǎn)品)制備。F.5-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，從1-硝基-4-芐氧基蒽醌制備。起始物可以如下制備，將芐溴加入到1-硝基-4-羥基蒽醌(Aldrich)和碳酸鉀于二甲基甲酰胺的混合物中，混合物攪拌16小時(shí)，加入水，混合物用乙酸乙酯萃取(×2)，合并的有機(jī)層依次用碳酸氫鈉溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物用硅膠層析，得到1-硝基-4-芐氧基蒽醌。G.7-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，從1-硝基-5-芐氧基蒽醌制備。其起始物可以按照Reubke、Hohmann和Bien的德國(guó)專利DE 2254199所公開的方法制備。H.5-(乙酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮
該化合物可以按照相同的方法，從4-乙酰氨基-1-氯蒽醌制備。起始物可以如下制備，將4-氨基-1-氯蒽醌加入到吡啶中，并用乙酸酐處理?；旌衔飻嚢?小時(shí)，倒入到水中，過濾收集固體，用水洗滌，真空干燥得到無色固體狀4-乙酰氨基-1-氯蒽醌。
實(shí)施例2有代表性的化合物的合成 A.5-(二甲基氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 將5-氯蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-B)和二甲胺在吡啶中的混合物，于100℃加熱16小時(shí)。將混合物冷卻并蒸發(fā)，將殘留物在硅膠上層析，得到黃色固體狀的所需化合物。B.5-(1-哌啶基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用哌啶作為胺進(jìn)行制備。C.5-(1-嗎啉基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用嗎啉作為胺進(jìn)行制備。D.5-(芐氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用芐胺作為胺進(jìn)行制備。E.5-{(4-吡啶基甲基)氨基}蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用4-吡啶基甲胺作為胺進(jìn)行制備。F.5-{2-(1-哌啶基)乙基氨基}蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-(1-哌啶基)乙基胺作為胺進(jìn)行制備。
實(shí)施例3有代表性的化合物的合成 A.7-(二甲基氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 將7-氯蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-C)和二甲胺在吡啶中的混合物，于100℃加熱16小時(shí)。將混合物冷卻并蒸發(fā)，將殘留物在硅膠上層析，得到黃色固體狀的所需化合物。B.7-(1-哌啶基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用哌啶作為胺進(jìn)行制備。C.7-(1-嗎啉基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用嗎啉作為胺進(jìn)行制備。D.7-(芐氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用芐胺作為胺進(jìn)行制備。E.7-{(4-吡啶基甲基)氨基}蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用4-吡啶基甲胺作為胺進(jìn)行制備。F.7-{2-(1-哌啶基)乙基氨基}蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-(1-哌啶基)乙基胺作為胺進(jìn)行制備。
實(shí)施例4有代表性的化合物的合成 A.5-(苯甲酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 在0℃，將苯甲酰氯加入到2-(甲氧基乙氧基甲基)-5-氨基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮和三乙胺的二氯甲烷溶液中，混合物攪拌16小時(shí)，用水熄滅反應(yīng)，并用乙酸乙酯(×2)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。然后將粗反應(yīng)混合物移入6N的鹽酸中，于80℃加熱4小時(shí)，冷卻后，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取，用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到黃色固體狀的所需酰胺。
起始物如下制備，將六甲基二硅烷基氮化鈉加入到冷卻的(0℃)5-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-D)的四氫呋喃溶液，并將混合物在0℃下攪拌30分鐘，加入MEM-氯，混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，加入水并用乙酸乙酯萃取(×2)，將合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到油狀的2-MEM-5-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮。
將鈀(10％)/炭和2-MEM-5-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮的乙醇液置于1大氣壓的氫下，混合物攪拌6小時(shí)。用硅藻土(celite)濾去催化劑，濾液蒸發(fā)至干，得到2-(甲氧基乙氧基甲基)-5-氨基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮，該化合物使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。B.5-(異煙酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用異煙酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。C.5-(煙酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用煙酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。D.5-(2-噻吩甲?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-噻吩甲酸作為酰氯進(jìn)行制備。E.5-(3-甲基丁酰基氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用異戊酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。F.5-(甲磺?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用甲磺酰氯作為磺酰氯進(jìn)行制備。G.5-(苯磺?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用苯磺酰氯作為磺酰氯進(jìn)行制備。
實(shí)施例5有代表性的化合物的合成 A.7-(苯甲酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 在0℃，將苯甲酰氯加入到2-(甲氧基乙氧基甲基)-7-氨基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮和三乙胺的二氯甲烷溶液中，混合物攪拌16小時(shí)，用水熄滅反應(yīng)，并用乙酸乙酯(×2)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。然后將粗反應(yīng)混合物移入6N的鹽酸中，于80℃加熱4小時(shí)，冷卻后，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取，用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到黃色固體狀的所需酰胺。
起始物如下制備，將六甲基二硅烷基氮化鈉加入到冷卻的(0℃)7-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-E)的四氫呋喃溶液，并將混合物在0℃下攪拌30分鐘，加入MEM-氯，混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，加入水并將混合物用乙酸乙酯萃取(×2)，將合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到油狀的2-MEM-7-氨基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮。
將鈀(10％)/炭和2-MEM-7-硝基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮的乙醇液置于1大氣壓的氫下，混合物攪拌6小時(shí)。用硅藻土(celite)濾去催化劑，濾液蒸發(fā)至干，得到2-(甲氧基乙氧基甲基)-7-氨基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮，該化合物使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。B.7-(異煙酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用異煙酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。C.7-(煙酰氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用煙酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。D.7-(2-噻吩甲?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-噻吩甲酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。E.7-(3-甲基丁?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用異戊酰氯作為酰氯進(jìn)行制備。F.7-(甲磺酰基氨基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用甲磺酰氯作為磺酰氯進(jìn)行制備。G.7-(苯磺?；被?蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用苯磺酰氯作為磺酰氯進(jìn)行制備。
實(shí)施例6有代表性的化合物的合成 A.5-(3-甲基丁氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 在室溫下，將異戊基溴加入到2-(甲氧基乙氧基甲基)-5-羥基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮和碳酸鉀在二甲基甲酰胺中的混合物中，混合物攪拌16小時(shí)后，加入水，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。然后將殘留物移入6N的鹽酸中，于80℃加熱4小時(shí)，冷卻后，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取，合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物經(jīng)柱層析純化，得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。
起始物如下制備，將六甲基二硅烷基氮化鈉加入到冷卻的(0℃)5-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-F)的四氫呋喃溶液，并將混合物在0℃下攪拌30分鐘，加入MEM-氯，混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，加入水并用乙酸乙酯萃取(×2)，將合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到油狀的2-MEM-5-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮。
將鈀(10％)/炭和2-MEM-5-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮的乙醇液置于1大氣壓的氫下，混合物攪拌6小時(shí)。用硅藻土(celite)濾去催化劑，濾液蒸發(fā)至干，得到2-(2-甲氧基乙氧基甲基)-5-羥基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮，該化合物使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。B.5-(4-吡啶基甲氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用氯甲基-4-吡啶作為烷基鹵進(jìn)行制備。C.5-(3-吡啶基甲氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用氯甲基-3-吡啶作為烷基鹵進(jìn)行制備。D.5-(2-甲氧基乙氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-甲氧基乙基溴作為烷基鹵進(jìn)行制備。E.5-(2-二甲基氨基乙氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-二甲基氨基乙基氯作為烷基鹵進(jìn)行制備。
實(shí)施例7有代表性的化合物的合成 A.7-(3-甲基丁氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 在室溫下，將異戊基溴加入到2-(甲氧基乙氧基甲基)-7-羥基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮和碳酸鉀在二甲基甲酰胺中的混合物中，混合物攪拌16小時(shí)后，加入水，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取。合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)。然后將殘留物移入6N的鹽酸中，于80℃加熱4小時(shí)，冷卻后，混合物用乙酸乙酯(×2)萃取，合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物經(jīng)柱層析純化，得到黃色固體狀的標(biāo)題化合物。
起始物如下制備，將六甲基二硅烷基氮化鈉加入到冷卻的(0℃)7-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮(實(shí)施例1-F)的四氫呋喃溶液，并將混合物在0℃下攪拌30分鐘，加入MEM-氯，混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，加入水并用乙酸乙酯萃取(×2)，將合并的有機(jī)層用碳酸氫鈉水溶液、水、1N鹽酸和鹽水洗滌，干燥并蒸發(fā)，殘留物在硅膠上層析，得到油狀的2-MEM-7-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮。
將鈀(10％)/炭和2-MEM-7-芐氧基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮的乙醇液置于1大氣壓的氫下，混合物攪拌6小時(shí)。用硅藻土(celite)濾去催化劑，濾液蒸發(fā)至干，得到2-(2-甲氧基乙氧基甲基)-7-羥基蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮，該化合物使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。B.7-(4-吡啶基甲氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用氯甲基-4-吡啶作為烷基鹵進(jìn)行制備。C.7-(3-吡啶基甲氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用氯甲基-3-吡啶作為烷基鹵進(jìn)行制備。D.7-(2-甲氧基乙氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-甲氧基乙基溴作為烷基鹵進(jìn)行制備。E.7-(2-二甲基氨基乙氧基)蒽并[1，9cd]吡唑-6(2H)-酮 該化合物可以按照相同的方法，用2-二甲基氨基乙基氯作為烷基鹵進(jìn)行制備。
實(shí)施例8代表性化合物的活性按照下述方法對(duì)本發(fā)明化合物的活性進(jìn)行測(cè)定JNK測(cè)定向10μL測(cè)試化合物在20％DMSO/80％稀釋緩沖液(其組成為20mMHEPES(pH7.6)、0.1mM EDTA、2.5mM氯化鎂、0.004％ Triton×100、2μg/mL亮抑酶肽、20mM甘油磷酸酯、0.1mM釩酸鈉和2mM DTT水溶液)中的液體中，加入30μL的50-300ng His6-JNK1、JNK2或JNK3在相同稀釋緩沖液中的液體。所得混合物在室溫下預(yù)孵化30分鐘，加入60微升的10μg GST-c-Jun(1-79)在測(cè)試緩沖液(其組成為20mM HEPES(pH7.6)、50mM氯化鈉、0.1mM EDTA、24mM氯化鎂、1mM DTT、25mM PNPP、0.05％ Triton×100、11μM ATP和0.5μCiγ-32P ATP水溶液)中的液體，讓反應(yīng)在室溫下進(jìn)行1小時(shí)。加入150μL的12.5％三氯乙酸，終止c-Jun磷酸化作用。30分鐘后，將沉淀物收集到濾盤上，用50μL閃爍液稀釋，進(jìn)行計(jì)數(shù)測(cè)量。計(jì)算出IC50值，作為c-Jun磷酸化作用降低到對(duì)照值的50％時(shí)測(cè)試化合物的濃度。在該項(xiàng)測(cè)試中，本發(fā)明優(yōu)選的化合物IC50值范圍是0.01-10μM。因此，本發(fā)明優(yōu)選的化合物是化合物1，按照該項(xiàng)測(cè)試，其IC50對(duì)JNK1和JNK2為0.11μM，而對(duì)JNK3是0.15μM。對(duì)JNK的選擇性按照本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法(例如，見ProteinPhosphorylation.Sefton & Hunter，Eds.，Academic Press.pp.97-367，1998)，還測(cè)定了化合物1對(duì)以下蛋白激活酶的抑制活性酶 IC50p38-2 ＞30,000nMERK1 ＞30,000nMMEKK1 ＞30,000nMIKK1 ＞30,000nMIKK2 ＞30,000nMPKA＞30,000nMPKC＞10,000nMEGF-TK ＞10,000nMJurkat T-細(xì)胞IL-2產(chǎn)生測(cè)定從American Tissue Culture Collection(美國(guó)組織培養(yǎng)收藏中心)購(gòu)買Jurkat T細(xì)胞(克隆E6-1)，并保存于生長(zhǎng)培養(yǎng)液(其組成為含有2mM L-谷氨酰胺(Mediatech)的RPMI 1640培養(yǎng)液、與10％的胎牛血清(Hyclone)和青霉素/鏈霉素)，所有細(xì)胞在37℃和95％空氣和5％CO2中培養(yǎng)。以每個(gè)加樣孔0.2×106細(xì)胞的密度，將細(xì)胞用200μL培養(yǎng)液涂板。將化合物儲(chǔ)存液(20mM)用生長(zhǎng)培養(yǎng)液稀釋，相當(dāng)于25μL體積的濃溶液10倍稀釋，加入到每個(gè)加樣孔、混合并進(jìn)行細(xì)胞預(yù)孵化30分鐘。在所有樣品中，化合物賦形劑(二甲亞砜)保持0.5％的最終濃度。30分鐘后，將細(xì)胞用PMA(佛波醇十四烷酸乙酸酯，最終濃度為50ng/mL)和PHA(植物凝集素，最終濃度2μg/mL)進(jìn)行活化。加入PMA和PHA，相當(dāng)于濃溶液在生長(zhǎng)培養(yǎng)液中形成10倍稀釋液，每個(gè)加樣孔加入25μL的體積。將細(xì)胞平板培養(yǎng)10小時(shí)，離心分離使細(xì)胞成粒，移取培養(yǎng)液并保存在-20℃，培養(yǎng)液的等分試樣通過夾心ELISA法按照制造廠商的說明書(Endogen)分析IL-2的存在。計(jì)算出IC50值，作為IL-2產(chǎn)生降低到對(duì)照值的50％時(shí)測(cè)試化合物的濃度。在該項(xiàng)測(cè)試中，本發(fā)明優(yōu)選的化合物IC50值范圍是0.1-30μM。附

圖1表示按照該方法，化合物1對(duì)Jarkat T-細(xì)胞中IL-2的抑制作用與劑量的依賴關(guān)系，其IC50為5μM。鼠體內(nèi)LPS-誘導(dǎo)的TNF-α產(chǎn)生的測(cè)定將不禁食的鼠至少適應(yīng)7天。注射0.5mg/kg Bacto LPS(自E.coli 055B5(Difco Labs))之前，各組4-6只雌性BALB/c或CD-1鼠(8-10周齡，由Charles River laboratories提供)預(yù)先用測(cè)試化合物進(jìn)行處理，采用靜脈注射或口管飼15-180分鐘。LPS激發(fā)后90分鐘，從其腹腔靜脈進(jìn)行定期取血，室溫下令血液在微量血清分離試管(Microtainer serum separator tube)中聚集30分鐘，離心分離后，將血清在-80℃冷凍儲(chǔ)存。用鼠TNF-α試劑盒(BiosourceInternational)對(duì)解凍的稀釋樣品(1∶10-1∶20)進(jìn)行ELIZA分析，計(jì)算出ED50值，作為TNF-α產(chǎn)生降低到對(duì)照值的50％時(shí)測(cè)試化合物的劑量。在該項(xiàng)測(cè)試中，本發(fā)明優(yōu)選的化合物ED50值范圍是1-30mg/kg。附圖2說明了使用化合物1，以15和30mg/kg靜脈注射(I.V.)給藥，以及以7.5、15和30mg/kg口服(P.O.)給藥本實(shí)驗(yàn)所得的結(jié)果。單獨(dú)的賦形劑(PEG-400、丙二醇、cremophor EL和乙醇的標(biāo)準(zhǔn)生理鹽水溶液、“PPCES”)和地塞米松-21乙酸鹽(′DEX″)(1mg/kgP.O.)用作對(duì)照樣(n＝6，*＝p0.01)。在LPS激發(fā)前15分鐘進(jìn)行化合物1給藥，LPS后90分鐘開始取血。發(fā)炎的鼠肺中白細(xì)胞募集反應(yīng)的抑制作用事先經(jīng)卵白蛋白(OA)注射敏化的Brown Norway鼠，進(jìn)行卵白蛋白(ovalbumun)氣霧劑給藥會(huì)導(dǎo)致變應(yīng)性氣管炎，表現(xiàn)在肺部產(chǎn)生富嗜曙紅細(xì)胞和富T-淋巴細(xì)胞性的白細(xì)胞浸潤(rùn)(見Richards等人，Am.J.Physiol、2712Pt1，L267-76，1996)。將化合物1以30mg/kg，b.i.d.的劑量進(jìn)行皮下注射，給藥3天，然后通過氣霧劑卵白蛋白激發(fā)。從支氣管肺泡灌洗樣品得到細(xì)胞計(jì)數(shù)，其結(jié)果如附圖3所示(V＝PPCES賦形劑)。鼠體內(nèi)佐劑關(guān)節(jié)炎從0天起，使用弗氏完全佐劑，令雄性Lewis鼠產(chǎn)生免疫，以誘導(dǎo)出侵蝕性關(guān)節(jié)炎，具有關(guān)節(jié)損壞和爪腫脹特征。從第8天到第20天，將化合物1進(jìn)行每天一次的皮下給藥。通過水置換器官充滿度測(cè)量法(water displacement plethysmometry)，測(cè)定爪腫脹(見附圖4A；*＝p＜0.01)。取得右后爪的放射照片，用半定量評(píng)分體系評(píng)價(jià)骨頭的變化失礦質(zhì)程度(0-2+)、跟骨侵蝕(0-1+)以及異位骨的形成(0-1+)，最高得分＝6(見附圖4B)。采用電泳遷移率變動(dòng)分析方法(EMSA)，通過DNA結(jié)合活性來測(cè)定AP-1的活化(見附圖4C)(Ausubel等人，Short Protocols in Molecular Biology，第二版，John Wiley& Sons Publisher，New York.1992)。間質(zhì)金屬蛋白酶-13的表達(dá)(見附圖4D)，通過MMP-13 mRNA的印跡雜交(nothern blot)分析進(jìn)行測(cè)量(Ausebel等人，同上)(另見Winter等人，Arthritisand Rheumatism 9(3)394-404，1966；Weichman等人，Pharmacological Methods in the Control of Inflammation，Chang and Lewis Eds.，Alan R.Liss，Inc.，PubI.，New York，1989).紅藻氨酸-誘導(dǎo)的癲癇發(fā)作反應(yīng)通過一個(gè)尾靜脈導(dǎo)管以10mg/kg的劑量，將化合物1對(duì)雄性CD鼠進(jìn)行靜脈注射給藥，此后立即以30mg/kg的劑量進(jìn)行皮下注射。賦形劑對(duì)照組僅接受相同注射體積的PPCES賦形劑。30分鐘后，以1-mg/kg i.p.的劑量給動(dòng)物注射紅藻氨酸標(biāo)準(zhǔn)生理鹽水溶液。先前已經(jīng)報(bào)道，該劑量的紅藻氨酸能夠誘導(dǎo)鼠的癲癇發(fā)作綜合征(Maj等人，Eur.J.Pharm.35927-32，1992)。注射紅藻氨酸后，對(duì)癲癇發(fā)作行為監(jiān)測(cè)4小時(shí)。如附圖5所示，行為的評(píng)價(jià)以下面的累積評(píng)分體系為基礎(chǔ)1點(diǎn)＝停止運(yùn)動(dòng)；2點(diǎn)＝頭和頸發(fā)生肌陣攣反射(中等)；3點(diǎn)＝單側(cè)的或兩側(cè)的前肢陣攣性活動(dòng)；4點(diǎn)＝全身性陣攣；5點(diǎn)＝陣攣性-強(qiáng)直性的癲癇發(fā)作；6點(diǎn)＝癲癇發(fā)作狀態(tài)(另見Mathis和Ungerer，Exp.Brain Res.88277-282，1992；Rong等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 969897-9902，1999；Yang等人，Nature389865-870，1997)。
應(yīng)當(dāng)理解，出于舉例說明的目的，盡管本文僅描述了本發(fā)明的具體的實(shí)施方案，但在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下，可以進(jìn)行各種改進(jìn)。因此，本發(fā)明不僅限于權(quán)利要求所限定的內(nèi)容。
權(quán)利要求
1.具有以下結(jié)構(gòu)的化合物或其可藥用鹽 其中R1和R2是任選的相同或不同的取代基，并且獨(dú)立地表示烷基、鹵素、硝基、三氟甲基、磺酰基、羧基、烷氧羰基、烷氧基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基、芳烷基、環(huán)烷基烷氧基、環(huán)烷基氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氨基烷氧基、一-或二-烷基氨基烷氧基，或者由式(a)、(b)、(c)或(d)表示的基團(tuán) R3和R4一起表示亞烷基或含有雜原子的亞烷基，或者R3和R4相同或不同并各自獨(dú)立地表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、芳氧基烷基、烷氧基烷基、烷氧基氨基或烷氧基(一-或二-烷基氨基)；以及R5表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、烷氧基、氨基、一-或二-烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、環(huán)烷基氨基或環(huán)烷基烷基氨基；其前提條件是至少R1或R2是存在的。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R1或R2是存在的，并且具有下述結(jié)構(gòu)之一
3.權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2兩者都存在，并且具有下述結(jié)構(gòu)之一
4.權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2是
5.權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2是
6.權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2是
7.權(quán)利要求2的化合物，其中R1和R2是
8.一種含有權(quán)利要求1化合物和可藥用載體的組合物。
9.一種治療JNK抑制作用應(yīng)答性疾病的方法，包括給需要治療的患者以有效量的下述結(jié)構(gòu)的化合物或其可藥用鹽 其中R1和R2是任選的相同或不同的取代基，并且獨(dú)立地表示烷基、鹵素、硝基、三氟甲基、磺酰基、羧基、烷氧羰基、烷氧基、芳基、芳氧基、芳基烷氧基、芳烷基、環(huán)烷基烷氧基、環(huán)烷基氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷氧基、氨基烷氧基、一-或二-烷基氨基烷氧基，或者由式(a)、(b)、(c)或(d)表示的基團(tuán) R3和R4一起表示亞烷基或含有雜原子的亞烷基，或者R3和R4相同或不同并各自獨(dú)立地表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、芳氧基烷基、烷氧基烷基、烷氧基氨基或烷氧基(一-或二-烷基氨基)；以及R5表示氫、烷基、環(huán)烷基、芳基、芳烷基、環(huán)烷基烷基、烷氧基、氨基、一-或二-烷基氨基、芳基氨基、芳烷基氨基、環(huán)烷基氨基或環(huán)烷基烷基氨基。
10.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是癌癥。
11.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕脊椎炎、骨關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、哮喘、支氣管炎、囊性纖維變性、炎性腸疾病、過敏性腸綜合征、粘液性結(jié)腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩氏病、胃炎、食管炎、肝炎、多發(fā)性硬化癥、內(nèi)毒素休克、銀屑病、濕疹或皮炎。
12.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是動(dòng)脈粥樣硬化、血管成形術(shù)后的再狹窄、左心室肥大或心肌梗死。
13.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是中風(fēng)，或者心臟、腎臟、肝臟或腦的局部缺血性損傷。
14.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是移植性排異。
15.權(quán)利要求9的方法，其中的疾病是中樞神經(jīng)或外周神經(jīng)退化性疾病。
16.權(quán)利要求15的方法，其中所述中樞神經(jīng)或外周神經(jīng)退化性疾病是癲癇、Alzheimer氏病、Parkinson氏病、Huntington氏舞蹈病、肌萎縮性側(cè)索硬化、外周神經(jīng)病或脊索損傷。
17.權(quán)利要求9的方法，其中R1和R2不存在，并且具有下述結(jié)構(gòu)
18.權(quán)利要求9的方法，其中R1或R2是存在的，并且具有下述結(jié)構(gòu)之一
19.權(quán)利要求9的方法，其中R1和R2兩者都存在，并且具有下述結(jié)構(gòu)之一
20.權(quán)利要求18的方法，其中R1和R2是
21.權(quán)利要求18的方法，其中R1和R2是
22.權(quán)利要求18的方法，其中R1和R2是
23.權(quán)利要求18的方法，其中R1和R2是
24.一種組合物，含有具有下述結(jié)構(gòu)的化合物 或其可藥用鹽，以及可藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了具有JNK選擇性抑制劑活性的化合物,本發(fā)明化合物為具有結(jié)構(gòu)式(I)的吡唑并蒽酮及其衍生物,其中R
文檔編號(hào)A61P17/00GK1379763SQ00814387
公開日2002年11月13日 申請(qǐng)日期2000年8月19日 優(yōu)先權(quán)日1999年8月19日
發(fā)明者B·L·本尼特, S·S·巴瓦特, A·M·曼寧, B·W·墨雷, E·C·奧萊里, Y·薩托 申請(qǐng)人:信號(hào)藥品公司