專利名稱：一種用作殺菌劑的含有香芹酚和麝香草酚的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含有天然物質(zhì)香芹酚和麝香草酚的組合物。該組合物對(duì)密螺旋體屬具有協(xié)同殺菌功效，其中的密螺旋體屬會(huì)引起嚴(yán)重的粘膜出血疾病，例如豬痢疾和嚴(yán)重的有蹄動(dòng)物尤其是偶蹄動(dòng)物如反芻動(dòng)物感染性蹄疾病。該組合物適合通過(guò)食物或飲用水或獸用頓服藥浴給予動(dòng)物。
由密螺旋體屬引起的疾病在動(dòng)物家畜中是常見(jiàn)的。例如，厭氧螺旋體舌骨痢疾密螺旋體(Treponema hyodysenteriae)被認(rèn)為是豬痢疾(SD)主要病因。參見(jiàn)例如D.L.Harris和R.J.Lysons(1992)，豬痢疾，豬疾病，第7版，Iowa州立大學(xué)出版社，Ames，Iowa，美國(guó)。SD是一種嚴(yán)重的粘膜出血性腹瀉。真正感染SD的豬通常只消耗很少量的飼料，引起生長(zhǎng)的明顯下降和可觀的經(jīng)濟(jì)損失。在Top Agrar(1998)第4卷第52頁(yè)中的報(bào)道指出，在德國(guó)三分之一的小豬群和多達(dá)一半以上的生長(zhǎng)豬群可能呈密螺旋體屬陽(yáng)性。所以應(yīng)當(dāng)作大量的努力來(lái)防止這種疾病的傳播。人們也都知道密螺旋體屬會(huì)引起嚴(yán)重的有蹄動(dòng)物尤其是偶蹄動(dòng)物如反芻動(dòng)物感染性蹄疾病。
而且，在WO 97/01348中公開(kāi)了一種含有以香芹酚和麝香草酚的草藥精油作為其主要成分和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。在該精油中香芹酚和麝香草酚的總量至少為55％，優(yōu)選70％(按精油重量計(jì))，并且香芹酚與麝香草酚的比率至少為10。該藥用組合物能夠用于預(yù)防和治療家禽的球蟲(chóng)病。
現(xiàn)已報(bào)道廣譜抗生素如鏈霉素、桿菌肽、新霉素、泰洛星、慶大霉素、金霉素、維吉霉素和林可霉素在SD的治療中都有效。當(dāng)該疾病是地方性的，通常把預(yù)防藥劑加入動(dòng)物飼料中。但是似乎抗生素變得越來(lái)越低效，并且在1997年，Top Agrar(1998)第4卷第52頁(yè)中報(bào)道密螺旋體屬對(duì)泰洛星的耐藥性比率為99％，對(duì)林可霉素的耐藥性比率為92％，對(duì)硫姆林的耐藥性比率為48％。
但是，近年來(lái)在關(guān)于化學(xué)的和抗菌生長(zhǎng)促進(jìn)劑的使用上存在激烈的爭(zhēng)論，并且在許多國(guó)家中正在考慮禁用這種類型的飼料添加劑。因此，迫切需要為農(nóng)業(yè)開(kāi)發(fā)具有可靠和通?？山邮艿膶?shí)施而且不具藥物性質(zhì)的物質(zhì)。
本發(fā)明的一個(gè)目的就是提供作為活性劑的天然物質(zhì)，它們適合于通過(guò)食物、飲用水或獸用頓服藥浴對(duì)動(dòng)物給藥來(lái)治療、預(yù)防或緩解由密螺旋體引起的疾病。本發(fā)明的另一個(gè)目的是降低對(duì)生長(zhǎng)的負(fù)面影響。
根據(jù)本發(fā)明，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)一種含有5ppm到90％(按干重計(jì))天然物質(zhì)香芹酚和5ppm到80％(按干重計(jì))的麝香草酚，而且香芹酚與麝香草酚的重量比為1∶5到10∶1，優(yōu)選在2∶3到4∶1的組合物，顯示有抗密螺旋體屬的協(xié)同作用，并且由此減少了這些細(xì)菌對(duì)動(dòng)物健康和生長(zhǎng)的副作用。在本文中“天然物質(zhì)”的表述可以理解為由天然產(chǎn)生的化合物組成，并且其可從天然產(chǎn)物或通過(guò)合成獲得的物質(zhì)。該組合物通常以含有占包括營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在內(nèi)的食物組合物的干重或飲用水重量的5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的香芹酚和麝香草酚的食物組合物或飲用水給藥。該組合物也可以占獸用頓服藥浴重量的0.2-30％的含量來(lái)提供，從而治療有蹄動(dòng)物尤其是偶蹄動(dòng)物如反芻動(dòng)物的蹄。本發(fā)明也包括預(yù)混物和食物添加劑，它們可以用于制備食物組合物和飲用水補(bǔ)充劑以及獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑。
該組合物和食物組合物也可以含有其它能夠改善健康和促進(jìn)生長(zhǎng)的天然物質(zhì)。在食物組合物中，這些物質(zhì)一般以0.1到30ppm的(按干重計(jì))含量存在。這類物質(zhì)及它們的含量的例子是1-5ppm愈創(chuàng)木酚、1-5ppm丁子香酚、0.1-2ppm辣椒堿和1-20mg鞣酸。食物組合物中的其它適當(dāng)成分是天然物質(zhì)的食用香料。它們通常以食物組合物干重的0.2-50ppm的含量存在。適當(dāng)食用香料及它們的含量的例子是0.05-0.5ppm甲氧甲酚、0.1-5mg茴香腦、0.1-2ppm十-、十一-和/或十二內(nèi)酯、0.1-2ppm喹啉(quinoleine)、0.1-2ppm紫羅酮和/或鳶尾酮、0.05-1ppm姜醇、0.05-2ppm胡椒堿、0.05-1ppm亞丙基2-苯并[c]呋喃酮和/或亞丁基2-苯并[c]呋喃酮以及0.1-5ppm水楊酸戊酯和/或水楊酸芐酯。
通常可以通過(guò)制備活性化合物香芹酚和麝香草酚以及其它適當(dāng)?shù)奶砑觿┑念A(yù)混物把活性成分摻入食物組合物。這種預(yù)混物可以含有1-10％(按干重計(jì))的香芹酚和麝香草酚、0-40％(按干重計(jì))促進(jìn)生長(zhǎng)添加劑、食用香料和改善健康的添加劑以及50-99％(按重量計(jì))的吸收支持物。該支持物例如可以含有40-50％(按重量計(jì))的木纖維、8-10％(按重量計(jì))的硬脂精、4-5％(按重量計(jì))的姜黃粉、4-5％(按重量計(jì))的迷迭香粉、22-28％(按重量計(jì))的石灰石、1-3％(按重量計(jì))的膠如阿拉伯膠、5-50％(按重量計(jì))的糖和/或淀粉和5-15％(按重量計(jì))的水。
在制備含有0.2-5％(按重量計(jì))預(yù)混物的食物組合物添加劑過(guò)程中，可以把預(yù)混物與常用的飼料組份如維生素、酶、礦物鹽、谷粉、含蛋白的組份、含碳水化合物的組份、小麥粗粉和/或糠混合。最后把食物組合物添加劑以這樣的量即使飼料含有5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的活性混合物加入到食物組合物中。該食物組合物添加劑一般占食物組合物的0.3-3.5％(按重量計(jì))。
根據(jù)本發(fā)明，食物組合物通常含有占飼料干重的下列組份a)0-80％、優(yōu)選10-70％(按重量計(jì))谷類，b)0-30％、優(yōu)選1-12％(按重量計(jì))脂肪，c)0-85％、優(yōu)選10-50％(按重量計(jì))非谷類類型的含蛋白營(yíng)養(yǎng)物和d)1-500ppm、優(yōu)選10-100ppm的該混合物。a)-d)總量?jī)?yōu)選至少為80％(按重量計(jì))。
當(dāng)制備該食物組合物時(shí)，可以把該食物組合物添加劑與干組份混合，所述干組份由谷類如磨成粉或碾碎的小麥、燕麥、大麥、玉米和水稻；以菜籽、大豆和向日葵為主的植物蛋白飼料；動(dòng)物蛋白飼料如血粉、肉、骨粉和魚(yú)粉；糖蜜和；奶產(chǎn)品如各種奶粉和乳清粉組成?；旌纤械母尚蕴砑觿┖?，加入液體組份和加熱后變成液體的組份。液體組份可由脂質(zhì)如脂肪、例如任選加熱液化的動(dòng)物脂肪和植物脂肪和/或羧酸如脂肪酸組成。充分混合后，按照組分研磨的程度得到粉狀或顆粒狀的密度。為了防止儲(chǔ)藏過(guò)程中的分離，應(yīng)當(dāng)優(yōu)選把水加入動(dòng)物飼料中，然后使其經(jīng)歷常規(guī)的制粒、膨脹或壓制加工。干燥除去任何多余的水份。如果需要的話，也可以把所得到的顆粒狀動(dòng)物飼料粉碎成粒度較小的顆粒。
飲用水補(bǔ)充劑可以含有2-90％(按干重計(jì))、優(yōu)選10-50％(按干重計(jì))的香芹酚和麝香草酚。除了香芹酚和麝香草酚外，該補(bǔ)充劑還含有10-98％(按干重計(jì))的大量的其它組份。常用的組份是礦物鹽、維生素、促進(jìn)健康和生長(zhǎng)的天然物質(zhì)、食用香料、水溶性或可水分散載體，如糖、奶粉、奶副產(chǎn)品和纖維素衍生物，分散劑和穩(wěn)定劑，如水溶性或可水分散的聚合物。促進(jìn)健康和生長(zhǎng)的天然物質(zhì)的適當(dāng)例子已在上文中進(jìn)行了描述。當(dāng)制備飲用水時(shí)，一般把補(bǔ)充劑以能夠使天然物質(zhì)達(dá)到5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm濃度的量加入水中。
獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑可以含有30-98％(按干重計(jì))的香芹酚和麝香草酚和2-70％(按重量計(jì))的礦物鹽、水溶性或可水分散的載體、分散劑和/或穩(wěn)定劑，如水溶性或可水分散的聚合物。
在本發(fā)明的范圍內(nèi)，也有可能制備食物組合物的懸浮液。如果制備用于立即食用的飼料，這是非常方便的。
現(xiàn)在通過(guò)下列實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1在體外測(cè)定本發(fā)明組合物對(duì)無(wú)害密螺旋體(Treponema innocens)和舌骨痢疾密螺旋體的抗菌活性。在該試驗(yàn)中，適用下列有機(jī)物、培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件和評(píng)估方法。有機(jī)體無(wú)害密螺旋體ATTC 29796舌骨痢疾密螺旋體ATCC 31212生長(zhǎng)培養(yǎng)基酪蛋白-胨豆粉-胨瓊脂USP(Caso-Agar，Merch第5458號(hào))+5％羊血培養(yǎng)條件在37℃厭氧孵育4-6天評(píng)估方法瓊脂稀釋試驗(yàn)(按照DIN 58940，teil 6)用向其中加入了10％(按重量計(jì))香芹酚和/或麝香草酚的聚丙二醇溶液的生長(zhǎng)培養(yǎng)基來(lái)制備瓊脂平皿。
制備每種有機(jī)體濃度為10.9cfu/ml的細(xì)胞懸浮液。然后用多點(diǎn)孵育器以1μl對(duì)大約0.5cm2的最終表面的量把單一懸浮液分布在瓊脂表面。各種濃度的香芹酚和/或麝香草酚孵育兩個(gè)平行平皿，并且在每個(gè)平皿上各采用兩種有機(jī)物的三個(gè)孵育點(diǎn)。孵育期后，觀察有機(jī)體的生長(zhǎng)。如果沒(méi)有觀察到生長(zhǎng)，下一個(gè)試驗(yàn)把香芹酚和/或麝香草酚的濃度減半。記錄導(dǎo)致細(xì)菌生長(zhǎng)總抑制的香芹酚和/或麝香草酚的最小濃度，將其作為活性組份或化合物的MIC值(最小抑制濃度)。得到下列試驗(yàn)結(jié)果。
表1.最小抑制濃度試驗(yàn)編號(hào) 活性化合物MIC值，ppm無(wú)害密螺旋體 舌骨痢疾密螺旋體1 麝香草酚 625 6252 香芹酚 313 3133 2/3麝香草酚156 1561/3香芹酚4 1/2麝香草酚156 1561/2香芹酚5 1/3麝香草酚＜78 ＜782/3香芹酚從結(jié)果中顯示本發(fā)明組合物對(duì)受試有機(jī)體具有協(xié)同抗菌作用。
實(shí)施例2為了測(cè)定本發(fā)明混合物降低密螺旋體屬出現(xiàn)的效率，用生長(zhǎng)豬(25kg到100kg)進(jìn)行了一些試驗(yàn)，該豬飼喂含下列組份的商用飼料。粗蛋白質(zhì)，％24.0粗脂肪，％ 6.0粗纖維，％ 3.5粗灰，％ 5.0賴氨酸，％1.35MJDE，kg 14.3通過(guò)把適當(dāng)量的小麥、羽扇豆仁、低芥酸菜子粉、稻糠(ricepollare)、肉粉、血粉和動(dòng)物脂混合配制飼料。向試驗(yàn)組所給的飼料中加入100ppm含有67ppm香芹酚和33ppm麝香草酚的混合物。
在生長(zhǎng)期中，監(jiān)控動(dòng)物糞便中密螺旋體的出現(xiàn)情況，并記錄痢疾的發(fā)作。得到下列結(jié)果。
表2.豬痢疾和糞便中密螺旋體的出現(xiàn)所監(jiān)控的動(dòng)物編號(hào) 糞便中密螺旋體的出現(xiàn) 豬痢疾的發(fā)作對(duì)照組23 8 1試驗(yàn)組10 0 0這些結(jié)果清楚地表明，與陰性對(duì)照組相比，當(dāng)本發(fā)明混合物加入飼料中時(shí)，密螺旋體的出現(xiàn)率低很多。
實(shí)施例3下列試驗(yàn)的目的是調(diào)查本發(fā)明組合物增加動(dòng)物生長(zhǎng)和抑制密螺旋體生長(zhǎng)的作用。把兩圈中40頭雄性豬分配到各治療組中。在46日齡時(shí)分別稱量豬，再給予試驗(yàn)飼料。該試驗(yàn)持續(xù)42天。試驗(yàn)的所有飼料都含有下列基本組份。粗蛋白質(zhì)，％24.4粗脂肪，％ 6.3粗纖維，％ 3.5粗灰，％5.3賴氨酸，％ 1.35MJDE，kg14.5通過(guò)把適當(dāng)量的小麥、羽扇豆仁、低芥酸菜子粉、稻糠、肉粉、血粉和動(dòng)物脂混合配制該組合物。
在對(duì)照試驗(yàn)A中，向基本組合物中加入100ppm的奧喹多司和25ppm的硫姆林，而在按照本發(fā)明的試驗(yàn)I和II中，飼料含有100ppm和200ppm的實(shí)施例2中所公開(kāi)的香芹酚和麝香草酚混合物。在對(duì)照試驗(yàn)B中，飼料由基本組合物組成。得到下列結(jié)果。
表3.對(duì)46到67日齡之間的豬的表現(xiàn)的影響試驗(yàn) A B III起始體重(kg)15.3 15.2 15.3 15.2最終體重(kg)28.6 27.0 26.9 27.2每日增重(g) 666 588 578 595飼料攝入量(g/d) 1100 1000 933 971飼料增重1.65 1.70 1.61 1.63表4.對(duì)67到88日齡之間的豬的表現(xiàn)的影響試驗(yàn) ABI II最終體重(kg) 42.8 41.9 40.8 41.2每日增重(g) 665 695 655 671飼料攝入量(kg/d) 1.38 1.42 1.32 1.37飼料增重 2.04 2.05 2.02 2.05從這些結(jié)果中我們能夠清楚地看到，本發(fā)明混合物的加入增加了生長(zhǎng)，尤其是在46到67天的年齡期間。
通過(guò)飼喂四組、每組5頭豬以對(duì)照試驗(yàn)A和B所用飲食以及試驗(yàn)I和II中所用飲食來(lái)調(diào)查含有本發(fā)明活性混合物的飲食的作用及糞便中密螺旋體的出現(xiàn)。在飼喂豬第4、8和16天后，就密螺旋體的出現(xiàn)檢查每只豬的糞便。得到下列結(jié)果。
表5.糞便中密螺旋體的出現(xiàn)率含有密螺旋體的樣本時(shí)間，天 對(duì)照組A 對(duì)照組B 試驗(yàn)I試驗(yàn)II4 1 3 448 3 3 0016 0 0 00從結(jié)果可見(jiàn)，顯然8天后，飼喂本發(fā)明飲食的豬在其糞便中沒(méi)有密螺旋體，而飼喂對(duì)照組A和B中飲食的豬需要16天的治療。
權(quán)利要求
1.一種組合物，其特征在于它含有5ppm到90％按干重計(jì)的天然物質(zhì)香芹酚和5ppm到80％按干重計(jì)的天然物質(zhì)麝香草酚，香芹酚與麝香草酚的重量比為1∶5到10∶1。
2.一種組合物，其特征在于重量比為2∶3到4∶1。
3.權(quán)利要求1或2所述的食物組合物，其特征在于它含有占食物組合物干重的5-2000ppm、優(yōu)選20-600ppm的香芹酚和麝香草酚。
4.權(quán)利要求3所述的食物組合物，其特征在于該食物組合物含有0.1-30ppm按干重計(jì)的選自下述的天然物質(zhì)愈創(chuàng)木酚、丁子香酚、辣椒堿和鞣酸，它們能夠促進(jìn)健康和加速生長(zhǎng)；和/或含有0.2-50ppm按干重計(jì)的選自下述的天然物質(zhì)甲氧甲酚、茴香腦、十-、十一-和/或十二內(nèi)酯、喹啉、紫羅酮和/或鳶尾酮、姜醇、胡椒堿、亞丙基2-苯并[c]呋喃酮和/或亞丁基2-苯并[c]呋喃酮、水楊酸戊酯和/或水楊酸芐酯。
5.權(quán)利要求4所述的食物組合物，其特征在于它含有a)10-70％按重量計(jì)的谷類，b)1-12％按重量計(jì)的飼料脂肪，和c)10-50％按重量計(jì)的非谷類含蛋白營(yíng)養(yǎng)物。
6.權(quán)利要求1或2所述的預(yù)混物，其特征在于它含有1-10％按干重計(jì)的香芹酚和麝香草酚、0-40％按干重計(jì)的生長(zhǎng)促進(jìn)添加劑、健康改善添加劑和食用香料以及50-99％按干重計(jì)的吸收支持物。
7.一種食物添加劑，其特征在于它含有0.2-5％按干重計(jì)的權(quán)利要求6中所述的預(yù)混物、80-99％按干重計(jì)的維生素、酶、礦物鹽、谷粉、蛋白組份、碳水化合物組份、麥粗粉和/或糠。
8.權(quán)利要求1或2所述的飲用水補(bǔ)充劑，其特征在于它含有2-90％按干重計(jì)的香芹酚和麝香草酚。
9.權(quán)利要求1或2所述的獸用頓服藥浴補(bǔ)充劑，其特征在于它含有30-98％按干重計(jì)的香芹酚和麝香草酚。
10.權(quán)利要求1或2中所述的組合物作為殺菌劑的用途。
11.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)所述的用作藥劑的組合物。
12.權(quán)利要求11所述的組合物，其中藥劑可用于抵抗豬痢疾。
13.權(quán)利要求11所述的組合物，其中該藥劑可以用于獸用頓服藥浴治療有蹄動(dòng)物的蹄。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含有天然物質(zhì)香芹酚和麝香草酚的組合物。香芹酚的含量為5ppm到90%(按干重計(jì)),麝香草酚的含量為5ppm到80%(按干重計(jì)),香芹酚與麝香草酚的重量比是1∶5到10∶1。該組合物對(duì)密螺旋體屬具有協(xié)同殺菌功效,其中的密螺旋體屬可以引起嚴(yán)重的粘膜出血疾病,例如豬痢疾和嚴(yán)重的有蹄動(dòng)物尤其是偶蹄動(dòng)物如反芻動(dòng)物的感染性蹄疾病。該組合物適合通過(guò)食物或飲用水或獸用頓服藥浴對(duì)動(dòng)物給藥。
文檔編號(hào)A61P31/04GK1350435SQ00807423
公開(kāi)日2002年5月22日 申請(qǐng)日期2000年4月17日 優(yōu)先權(quán)日1999年5月12日
發(fā)明者R·羅薩 申請(qǐng)人:阿克佐諾貝爾公司