專利名稱：防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及防護(hù)劑，具體地說(shuō)是一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑。
血吸蟲(chóng)病廣泛分布于世界74個(gè)國(guó)家和地區(qū)，其中70％在熱帶和亞熱帶國(guó)家中流行，受威脅人口達(dá)三億多，我國(guó)流行的是日本血吸蟲(chóng)病。在我國(guó)南方有12省(市、自治區(qū))共391個(gè)縣(市、區(qū))流行血吸蟲(chóng)病，受威脅的人口占全球1／3，達(dá)1．13億以上。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國(guó)現(xiàn)有釘螺面積34．7億m2，血吸蟲(chóng)病人76．2萬(wàn)人。南方五省(湖北、湖南、江西、安徽、江蘇)的局部地區(qū)因水位不能控制，人畜血吸蟲(chóng)病感染率高，“晚血、急感”病例仍有成批發(fā)生，血吸蟲(chóng)病的嚴(yán)重流行，仍是我國(guó)疫區(qū)人民群眾脫貧致富的陰霾，經(jīng)濟(jì)發(fā)展的隱患。
血吸蟲(chóng)病的感染途徑主要由皮膚、口腔粘膜以及胎內(nèi)(母嬰)傳播而感染。做好個(gè)體防護(hù)是血吸病綜合治理中的重要環(huán)節(jié)之一。具體來(lái)說(shuō)，就是如何殺滅血吸蟲(chóng)尾蚴與防止尾蚴侵入人體，形成感染的問(wèn)題。
近幾十年來(lái)，國(guó)內(nèi)外先后對(duì)血吸蟲(chóng)的防護(hù)劑有過(guò)不少的發(fā)明創(chuàng)造，在殺滅血吸蟲(chóng)尾蚴上雖有一定作用，但均為化學(xué)試劑。如鄰苯二酸酯類、苯甲酸芐酯制劑等皆為常用的昆蟲(chóng)驅(qū)邂劑。七十年代，科技工作者發(fā)現(xiàn)以苯甲酸芐酯、鄰苯二甲酸二丁酯和松節(jié)油加適當(dāng)?shù)幕|(zhì)合成的制劑(皮避敵)，動(dòng)物試驗(yàn)證明防護(hù)效果達(dá)82％以上，但經(jīng)不起水沖耐磨(泥磨擦僅維持5分鐘)，防護(hù)效果不理想。
本發(fā)明的目的在于提出一種防止感染血吸蟲(chóng)病的外用涂擦防護(hù)劑，使其長(zhǎng)時(shí)間在水沖洗的泥漿磨擦下能經(jīng)濟(jì)有效防制血吸蟲(chóng)感染，以保護(hù)人們免受血吸蟲(chóng)尾蚴侵襲。
本發(fā)明的上述發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑，其特殊之處是它包括從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油和苯甲酸芐酯、鄰苯二甲酸二丁酯以及乙醇，其中，苯甲酸芐酯的含量為5～10％重量，鄰苯二甲酸二丁脂含量為3～5％重量量，乙醇含量為3～5％重量，其余為從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油。
上述從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油采用的是將清洗干凈的麻楓樹(shù)籽在50～60℃溫度下烘干至含水量≤10％，然后在壓榨設(shè)備上用壓榨的方法而提取的基質(zhì)油。
本發(fā)明的另一發(fā)明目的是提出一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑的制備方法，以期能方便制備該防護(hù)劑。
本發(fā)明的這一發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑制備方法，其特征是它采用如下步驟1)在常溫下向基質(zhì)油內(nèi)加入苯甲酸芐酯，攪拌10～20mm；2)加入鄰苯二甲酸二丁酯，靜置15～30mm；3)加入乙醇，靜置15～30分鐘；4)最后一起攪拌10～20分鐘即可。
本發(fā)明所述防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑殺滅日本血吸蟲(chóng)尾蚴作用機(jī)理為1、干擾日本血吸蟲(chóng)尾蚴細(xì)胞信息通道，影響日本血吸蟲(chóng)尾蚴鉆腺的分泌；2、激活血吸蟲(chóng)尾蚴蛋白酶e，導(dǎo)致尾蚴Ca++濃度下降，從而使尾蚴活力減弱，尾叉斷折。
對(duì)于本發(fā)明所述的防護(hù)劑，我們委托同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)農(nóng)藥毒理研究中心作了毒性試驗(yàn)報(bào)告，結(jié)果如下一、大鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)(一)材料與方法1、受試物防護(hù)劑，橙色液體，無(wú)異味。
2、動(dòng)物受試動(dòng)物為健康成年Wistar大鼠，共50只，雌、雄各半，體重180～220克。由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
3、動(dòng)物分組和劑量將雌、雄大鼠各隨機(jī)分成5組，每組5只。雌、雄大鼠各設(shè)立464mg／kg、1000mg／kg、2150mg／kg、4640mg／kg及5000mg／kg五個(gè)劑量組。
4、試驗(yàn)操作步驟動(dòng)物給藥前隔夜禁食但不禁水。稱重后按劑量一次經(jīng)口灌胃，染毒后觀察中毒癥狀及死亡情況。觀察時(shí)間為2周。
5、結(jié)果評(píng)價(jià)用Horn氏法計(jì)算LD50。
(二)試驗(yàn)結(jié)果1、結(jié)果大鼠染毒后30分鐘開(kāi)始出現(xiàn)中毒癥狀，主要表現(xiàn)為，呆滯，對(duì)外界反應(yīng)遲鈍。但未見(jiàn)死亡。48h后逐漸恢復(fù)正常。
2、小結(jié)本次送檢防護(hù)劑對(duì)大鼠經(jīng)口LD50雌、雄均大于5000mg／kg，屬低毒性。
二、大鼠急性經(jīng)皮毒性試驗(yàn)(一)材料與方法1、受試物同經(jīng)口。
2、動(dòng)物受試動(dòng)物為健康成年Wistar大鼠，共40只，雌、雄各半，體重200～300克。由同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。
3、動(dòng)物分組和劑量將雌、雄大鼠各隨機(jī)分成4組，每組5只。雌、雄大鼠各設(shè)立215mg／kg、464mg／kg、1000mg／kg、2150mg／kg四個(gè)劑量組。
4、試驗(yàn)操作步驟給藥前24h背部去毛4×5cm2。稱重后，按劑量在略小于剃毛區(qū)面積內(nèi)涂藥，然后覆蓋一個(gè)與脫毛區(qū)面積相當(dāng)?shù)暮惺秸?，再以膠布固定，觀察中毒癥狀和死記情況。涂藥4h后取下盒罩，溫水洗去農(nóng)藥，觀察時(shí)間為2周。
5、結(jié)果評(píng)價(jià)用Horn氏法計(jì)算LD50。
(二)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1、結(jié)果給藥1h后出現(xiàn)中毒癥狀，主要表現(xiàn)為呆滯，對(duì)外界反應(yīng)心鈍。但各組未見(jiàn)死亡。48h后逐漸恢復(fù)正常。
2、小結(jié)本次送檢防護(hù)劑對(duì)大鼠經(jīng)皮LD50雌、雄均大于5000mg／kg，屬低毒性。
從上述實(shí)驗(yàn)可以看出本防護(hù)劑生物毒性低，無(wú)環(huán)境污染。
對(duì)于本發(fā)明所述的防護(hù)劑我們還進(jìn)行了預(yù)防血吸蟲(chóng)病感染效果觀察實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程如下一、觀察方法及實(shí)施過(guò)程1、觀察地點(diǎn)概況及分組鄂州市蘆州村屬血吸蟲(chóng)病湖沼型州垸亞型流行區(qū)，釘螺面積139畝，釘螺陽(yáng)性率為1．96％，陽(yáng)性釘螺密度為0．006只／0．11m2，人口總數(shù)為3312人，人群感染率為6．49％。其中蘆州村2組人數(shù)為250人，人群感染率為5．6％，作為對(duì)照組；蘆州村3組人數(shù)為217人，人群感染率為7．37％，作為實(shí)驗(yàn)組。
2、觀察對(duì)象的病原學(xué)處理及選擇觀察前通過(guò)對(duì)蘆洲村2組和3組6～65歲的居民采用糞便常規(guī)沉孵法進(jìn)行檢查，對(duì)查出的病人進(jìn)行病原治療(吡喹酮?jiǎng)┝?0mg／kg，60kg為限)，對(duì)糞檢陰性的居民，采用詢檢法化療進(jìn)行病原處理(吡喹酮?jiǎng)┝?0mg／kg，60kg為限)，然后將經(jīng)過(guò)病原學(xué)處理的蘆州村2組的66人和3組和70人分別作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的觀察對(duì)象。
3、防護(hù)劑的涂抹方法和時(shí)間3．1實(shí)驗(yàn)組不同年齡、性別和職業(yè)人群在接觸疫水之前，可根據(jù)當(dāng)天身體接觸疫水部位的深淺程序，每隔4小時(shí)均勻涂抹防護(hù)劑于身體的相應(yīng)部位。
3．2對(duì)照組不加任何防護(hù)措施，僅做人群接觸疫水方式、頻率、頻度等情況的觀察。
4、防護(hù)劑的毒副作用觀察對(duì)實(shí)驗(yàn)組的人群每次接觸疫水之前涂抹防護(hù)劑的方法、面積以及涂抹防護(hù)劑后1h、3h、24h、48h、72h的癥狀，體征進(jìn)行觀察，觀察其涂抹防護(hù)劑后的毒副作用的表現(xiàn)。(附涂藥面積計(jì)算1、至雙踝8％；2、雙膝19％；3、雙胯37％；4、腰部42％；5、雙腕6％；6、雙肘12％；7、雙肩20％；8、頸部88％；9、全身100％。)5、防護(hù)藥對(duì)人群接觸疫水情況影響觀察通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)組發(fā)放防護(hù)劑外用預(yù)防藥物，對(duì)照組不發(fā)放任何外用藥物，觀察其對(duì)實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組人群接觸疫水的比率、方式、頻率、頻度等情況有無(wú)影響。(指數(shù)A=∑{[持續(xù)時(shí)間(h)×接觸面積(％)]／調(diào)查日數(shù)(d)}，指數(shù)B=∑[持續(xù)時(shí)間(h)／調(diào)查日數(shù)(d)]，其中指數(shù)A代表暴露強(qiáng)度，指數(shù)B代表暴露持續(xù)時(shí)間。)6、防護(hù)效果實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的人群在末次接觸疫水后的第4周，采用糞便常規(guī)沉孵法進(jìn)行檢查，然后統(tǒng)計(jì)分析實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的人群感染率及人群預(yù)防保護(hù)率，考核防護(hù)劑的預(yù)防效果。[預(yù)防保護(hù)率=(對(duì)照組陽(yáng)性率-實(shí)驗(yàn)組陽(yáng)性率)×100％對(duì)照組陽(yáng)性率]。
三、結(jié)果1、疫水接觸及涂抹藥物情況通過(guò)對(duì)經(jīng)過(guò)病原處理的蘆州村3組70人涂抹防護(hù)劑，蘆州村2組的66人不涂抹防護(hù)劑進(jìn)行疫水接觸情況及涂藥情況觀察，結(jié)果實(shí)驗(yàn)組70人有36人接觸疫水，其中每次接觸疫水前均涂抹防護(hù)劑完全的有30人，涂藥不完全的有6人，對(duì)照66人有28人接觸疫水。具體情況見(jiàn)表1。表1實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組接觸疫水及涂抹防護(hù)劑情況表組別人口 病原處理人數(shù) 接觸疫 涂藥完 未涂藥或不完總數(shù) (觀察人數(shù)) 水人數(shù) 全人數(shù) 全涂藥人數(shù)蘆州2組(對(duì)照組) 250 66 28 028蘆州3組(實(shí)驗(yàn)組) 217 70 36 3062、防護(hù)劑對(duì)疫水接觸情況影響實(shí)驗(yàn)組70人發(fā)放防護(hù)劑后，接觸疫水人數(shù)為36人，接觸疫水人數(shù)占實(shí)驗(yàn)組的51．43％；對(duì)照組66人不發(fā)放任何防護(hù)藥物，接觸疫水人數(shù)為28人，接觸疫水人數(shù)占對(duì)照組42．42％。兩者之間無(wú)明顯性差異(X2=1．11 P＞0．05)。
實(shí)驗(yàn)組的暴露強(qiáng)度為2．33，暴露持續(xù)時(shí)間為5．98h／d；對(duì)照組的暴露強(qiáng)度為0．21，暴露持續(xù)時(shí)間為1．28h／d。實(shí)驗(yàn)組的暴露強(qiáng)度、暴露持續(xù)時(shí)間均明顯高于對(duì)照組。
3、防護(hù)劑的毒副作用通過(guò)對(duì)蘆州村3組經(jīng)過(guò)病原學(xué)處理的70人發(fā)放防護(hù)劑后，觀察他們每次接觸疫水前涂抹防護(hù)劑的方法、面積，以及涂抹防護(hù)劑后1h、3h、24h、48h、72h的毒副作用，結(jié)果實(shí)驗(yàn)組涂抹防護(hù)劑的人數(shù)為36人。其中涂抹面積小于或等于62％的34人，涂抹面積大于或等于88％的2人。涂抹面積小于或等于62％的人群在涂抹防護(hù)劑后72h內(nèi)未發(fā)現(xiàn)過(guò)敏、胸悶以及其他毒副作用的反應(yīng)；涂抹面積大于或等于88％的2人在涂抹防護(hù)劑后1h左右出現(xiàn)輕微的胸悶癥狀，無(wú)其他毒副作用的表現(xiàn)，以后逐漸緩解，24h完全消失。
4、防護(hù)效果實(shí)驗(yàn)組70人通過(guò)采用糞便常規(guī)沉孵法查出病人1人(屬涂藥不完全者)，人群感染率為1．43％，涂藥完全的人群感染率為0，有接觸疫水史的人群感染率為2．78％；對(duì)照組66人，查出病人6人，人群感染率為9．09％，有接觸疫水史的人群感染率為21．43％。結(jié)果實(shí)驗(yàn)組只要涂藥完全其人群感染率明顯低于對(duì)照組(X2=6．65P＜0．01)，有疫水接觸史的人群感染率實(shí)驗(yàn)組也明顯低于對(duì)照組(X2=5．62 P＜0．05)。結(jié)果見(jiàn)表2。表2實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組的人群感染率情況組別人數(shù)查出 人群感染 未涂藥或涂藥完全 接觸疫 接觸疫水人群病人數(shù) 率(％) 的人群感染率(％) 水人數(shù) 感染率(％)對(duì)照組 66 6 9．09 9．09 28 21．43實(shí)驗(yàn)組 70 1 1．43 0 36 2．785、防護(hù)劑的預(yù)防保護(hù)率實(shí)驗(yàn)組的人群血吸蟲(chóng)病感染率為1．43％，涂抹防護(hù)劑完全的人群感染率為0；對(duì)照組的人群感染率為9．09％防護(hù)劑的預(yù)防保護(hù)率為84．27％涂抹防護(hù)劑完全的人群預(yù)防保護(hù)率為100％。
通過(guò)本次觀察結(jié)果表明本發(fā)明所述防護(hù)劑是一種毒副作用很低的生物制劑，并且只要按照要求涂抹完全，該防護(hù)劑對(duì)疫區(qū)人群血吸蟲(chóng)病的感染具有很好的預(yù)防保護(hù)作用。
綜上所述，本發(fā)明所述防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑具有如下特點(diǎn)
A、對(duì)血吸蟲(chóng)尾蚴有直接殺滅作用；B、可阻止血吸蟲(chóng)尾蚴侵入皮膚；C、可防止水蛭(馬蝗)叮咬；D、對(duì)皮膚無(wú)刺激，無(wú)特殊不適感，長(zhǎng)期使用不致中毒；E、價(jià)格低廉，資源充足，使用方便。
下面將描述本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施例，但本發(fā)明的內(nèi)容完全不局限于此。
實(shí)施例1將清洗干凈的麻楓樹(shù)籽在50～60℃溫度下烘干至含水量≤10％，然后在壓榨設(shè)備上壓榨出基質(zhì)油。取基質(zhì)油89kg，在常溫下加入苯甲酸芐酯5kg，攪拌10～20分鐘；再加入鄰苯二甲酸二丁酯3kg，靜置15～30min。再加入乙醇3kg，靜置15～30分鐘，最后一起攪拌10～20分鐘即制成100kg重量的防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑。
實(shí)施例2基質(zhì)油的提取與實(shí)施例1相同，取基質(zhì)油80kg、苯甲酸芐酯10kg、鄰苯二甲酸二丁酯5kg、乙醇5kg，按實(shí)施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑。
實(shí)施例3基質(zhì)油的提取與實(shí)施例1相同，取基質(zhì)油86．5kg、苯甲酸芐酯7．5kg、鄰苯二甲酸二丁酯3kg、乙醇3kg，按實(shí)施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑。
實(shí)施例4基質(zhì)油的提取與實(shí)施例1相同，取基質(zhì)油86kg、苯甲酸芐酯6kg、鄰苯二甲酸二丁酯4kg、乙醇4kg，按實(shí)施例1所述方法配制出100kg的防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑。
取上述實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3和純基質(zhì)油各300mL樣品，分別標(biāo)號(hào)為FHJ1、FHJ2、FHJ3和FHJ0，對(duì)這四種樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室殺滅尾蚴試驗(yàn)。
測(cè)試條件1、實(shí)驗(yàn)室溫濕度24±1℃，RH65±5％；2、日本血吸蟲(chóng)尾蚴為釘螺飼養(yǎng)室飼養(yǎng)的陽(yáng)性釘螺逸出。
測(cè)試方法1、即時(shí)接觸實(shí)驗(yàn)用實(shí)驗(yàn)樣品FHJ1、FHJ2、FHJ3和FHJ0防護(hù)劑，以1mg／cm2劑量分別均勻涂抹在聚乙烯食用薄膜上，取尾蚴30±2條，滴去氯水?dāng)?shù)滴，使尾蚴與防護(hù)劑充分接觸，在解剖鏡下觀察，記錄尾蚴的反應(yīng)和死亡時(shí)間?？瞻讓?duì)照為去氯水。
2、延遲接觸實(shí)驗(yàn)樣品按劑量1mg／cm2均勻涂抹在薄膜上后，用流水不間斷地沖洗，分別于4h、6h和8h時(shí)取出，按即時(shí)接觸實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)試。
樣品對(duì)日本血吸蟲(chóng)尾蚴的效果觀察分為四個(gè)等級(jí)尾蚴頭尾正常協(xié)同活動(dòng)為無(wú)作用，用“-”表示，尾蚴頭尾伸長(zhǎng)性活動(dòng)為有作用，用“+”表示；尾蚴頭尾伸長(zhǎng)性活動(dòng)減弱為作用較強(qiáng)，用“++”表示；尾蚴活動(dòng)停止為作用強(qiáng)，用“+++”表示；尾蚴死亡為作用最強(qiáng)，用“++++”表示。
測(cè)試結(jié)果防護(hù)劑接觸實(shí)驗(yàn)對(duì)日本血吸蟲(chóng)尾蚴的效果(見(jiàn)表3)表3防護(hù)劑接觸實(shí)驗(yàn)對(duì)日本血吸蟲(chóng)尾蚴的效果 上述實(shí)驗(yàn)可以看出，本防護(hù)劑對(duì)日本血吸蟲(chóng)尾蚴的效果，依次為FHJ2＞FHJ1＞FHJ3＞FHJ0。以防護(hù)劑FHJ2效果最佳。即時(shí)接觸實(shí)驗(yàn)防護(hù)劑FHJ1、FHJ2、FHJ3樣品4、6、8小時(shí)的有效率均為100％；其尾蚴接觸實(shí)驗(yàn)3min顯作用，8min100％死亡。這說(shuō)明本發(fā)明殺蚴效果強(qiáng)，顯效時(shí)間快。
權(quán)利要求
1.一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑，其特征是它包括從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油和苯甲酸芐酯、鄰苯二甲酸二丁酯以及乙醇，其中，苯甲酸芐酯的含量為5～10％重量，鄰苯二甲酸二丁脂含量為3～5％重量量，乙醇含量為3～5％重量，其余為從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油。
2.按照權(quán)利要求1所述防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑，其特征是所述從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油采用的是將清洗干凈的麻楓樹(shù)籽在50～60℃溫度下烘干至含水量≤10％，然后在壓榨設(shè)備上用壓榨的方法而提取的基質(zhì)油。
3.一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑制備方法，其特征是它采用如下步驟1)在常溫下向基質(zhì)油內(nèi)加入苯甲酸芐酯，攪拌10～20mm；2)加入鄰苯二甲酸二丁酯，靜置15～30mm；3)加入乙醇，靜置15～30分鐘；4)最后一起攪拌10～20分鐘即可。
全文摘要
一種防止感染血吸蟲(chóng)病的防護(hù)劑,特征是它包括從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油和苯甲酸芐酯、鄰苯二甲酸二丁酯以及乙醇,其中,苯甲酸芐酯的含量為5～10%重量,鄰苯二甲酸二丁酯含量為3～5%重量,乙醇含量為3～5%重量,其余為從麻楓樹(shù)籽中提取的基質(zhì)油。本發(fā)明是一種毒副作用很低的生物制劑,它對(duì)血吸蟲(chóng)病感染具有很好的預(yù)防保護(hù)作用。
文檔編號(hào)A61K31/21GK1289590SQ0011606
公開(kāi)日2001年4月4日 申請(qǐng)日期2000年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月30日
發(fā)明者劉紹明, 戴裕海, 周鴻勇 申請(qǐng)人:劉紹明, 戴裕海, 周鴻勇