專利名稱：一種具有延緩衰老功能的膠囊及其制作工藝的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種具有延緩衰老功能的保健食品。
目前，保健食品的種類很多，由于具有各自的強身健體功能而被人們廣泛食用，但具有延緩衰老功能明顯的保健食品目前還為數(shù)不多，解決這一問題已成為急需。
本發(fā)明的任務是克服現(xiàn)有技術的不足，提出一種有明顯抗氧化作用及延緩衰老功能的膠囊及其制作工藝。
本發(fā)明的任務是以如下方式實現(xiàn)的具有延緩衰老功能的膠囊的配方是刺五加浸膏粉70-80份、維生素E0.1-份。
其制作工藝是a、刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用；b、將維生素E與刺五加浸膏細粉混勻；c、將混合粉末裝入膠囊，拋光；d、包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射；e、檢驗合格后入庫。
本發(fā)明的任務還可以如下方式實現(xiàn)的具有延緩衰老功能的膠囊的配主是刺五加浸膏粉70-80份、核酸20-30份、維生素E0.1-1份。
a、刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用；b、將核酸烘干碾碎過80目備用；c、將核酸細粉與維生素E混合均勻后，再與刺五加浸膏細粉混勻；d、將混合粉末裝入膠囊，拋光；e、包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射；f、檢驗合格后入庫。
本發(fā)明由于以刺五加、核酸、VE為原料，刺五加為五加植物刺五加的根和莖。對其醫(yī)療價值我國古代醫(yī)籍已有記載刺五加味辛、微苦、性溫、無毒。歸脾、腎、心經(jīng)。具有益氣健脾，補腎安神之功，主要用于脾腎陰虛、體虛乏力、食欲不振、腰膝酸痛、失眠多夢等癥，李時珍在《本草綱目》中寫到“五加治風濕瘺痹，壯筋骨，其功良深”，“寧得五加一肥，不用金玉滿車”，足見其藥用價值。
近年來，科學家們對刺五加的藥理方面研究有了新的進展，特別是抗衰老作用成為最近研究的熱點。
1、已知蛋白質是長期記憶形成的內在基礎，記憶的鞏固與腦內RNA和蛋白質等大分子密切相關，它們的合成是記憶必需的，刺五加對蛋白質、DNA、RNA的生物合成有促進作用，因此對防止衰老和增強記憶有一定作用。
2、腦單胺氧化酶有二種形式即A型(MAO-A)和B型(MAO-B)，在衰老和某些老年精神性疾病如抑郁癥，巴金森氏癥、阿爾采默氏病對MAO-B活性顯著升高，因此MAO的抑制劑刺五加能減輕衰老癥狀及中樞兒茶酚胺下降所造成的損害。
3、機體衰老后對缺血、缺氧敏感，過氧化脂質(MDA)增加，超氧化物歧化酶(SOD)這一體內消除自由基的重要酶活力下降，刺五加能明顯增加血漿中SOD活力，降低肝、腦中MDA，對缺血再灌注有抗損傷作用，從而顯示出刺五加的抗衰老作用，另外刺五加對老年急性腦缺血有一定耐受能力和抗缺氧能力，對老年人腦血管病患者有益。
核酸是生物細胞的正常組分，是生命的基本物質，沒有核酸就沒有生命，它在新陳代謝過程中具有多種功能如能量代謝、生理調節(jié)劑、輔酶、活化媒介物、細胞激動劑等?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，營養(yǎng)豐富的人乳中核酸成分含量豐富，是牛奶中核酸含量的4倍，人從食物中攝入的核酸量很少，不能滿足機體的需要，補充核酸可以調節(jié)免疫功能，抗氧化減少自由基損害。而免疫功能衰退，氧自由基理論正是人體衰老的學說之一。
VE是一種重要的維生素，它具有多種生理功能抗氧化功能，保持紅細胞的完整性，調節(jié)體內某些物質合成，參與DNA生物合成過程，抑制含硒蛋白、含鐵蛋白氧化，保護巰基，與生殖功能有關。研究還發(fā)現(xiàn)補充VE還能提高GSH-Px和SOD酶活力，改善缺氧條件下心肌能量代謝，是減少缺氧心肌損害的一個重要環(huán)節(jié)，VE通過阻斷自由基水平干擾過氧化物鏈反應保護質膜免受攻擊，VE還能降低血中總膽固醇、甘油三酯含量，升高高密度脂蛋白膽固醇水平，保護人血管系統(tǒng)增進健康，延緩衰老。


圖1為本發(fā)明的一種工藝流程圖；圖2為本發(fā)明的第二種工藝流程圖。
本發(fā)明的一個最佳實施例，如圖，(以重量計)取刺五加浸膏粉70kg、維生素E1kg，將刺五加浸膏粉進行80目篩分，將維生素E與刺五加浸膏細粉混勻，將混合粉末裝入膠囊，拋光，包裝后經(jīng)7kGYCo-60照射，檢驗合格后入庫。
本發(fā)明的第二個實施方案，(以重量計)取刺五加浸膏粉80kg、維生素E0.1kg，將刺五加浸膏粉進行80目篩分，將維生素E與刺五加浸膏細粉混勻，將混合粉末裝入膠囊，拋光，包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射，檢驗合格后入庫。
本發(fā)明的第三個實施方案，如圖，(以重量計)取刺五加浸膏粉80kg、核酸30kg、維生素E0.1kg，將刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用，將核酸烘干碾碎過80目篩備用，將核酸細粉與維生素E混合均勻后再與刺五加浸膏細粉混勻，將混合粉末裝入膠囊，拋光，包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射，檢驗合格后入庫。
本發(fā)明的第四個實施方案，(以重量計)取刺五加浸膏粉80kg、核酸20kg、維生素E0.1kg，將刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用，將核酸烘干碾碎過80目篩備用，將核酸細粉與維生素E混合均勻后再與刺五加浸膏細粉混勻，將混合粉末裝入膠囊，拋光，包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射，檢驗合格后入庫。
具有延緩衰老功能的膠囊保健功能試驗
1、材料與方法樣品由黑龍江省益生堂保健品有限責任公司提供，每粒膠囊含受試物0.4g，受試物為褐色粉末，感官檢查未見異常。
實驗方法果蠅生存試驗果蠅來源Oregon K野生型黑腹果蠅(Drosophila melanog-aster)由上海鐵道大學醫(yī)學院引進，在本實驗室培育繁殖。
儀器與試劑暗溫箱20-25℃，相對濕度60-65％)，平底培養(yǎng)試管(1.3×10cm)、乙醚、苯甲酸等。
果蠅基礎飼料配方為玉米粉10％、紅糖13.5％、瓊脂1.5％、苯甲酸0.15％、干酵母粉1％、水73.85％。
劑量分組設1個空白對照組和3個劑量組，各劑量組飼料中含具有延緩衰老功能的膠囊受試物濃度分別為0.2％、1％和5％。
實驗步驟收集10小時內新羽化的果蠅成蟲，在乙醚麻醉下倒出稱重分組，選擇個體大小相近的果蠅，每管25只，雄雌分養(yǎng)，每組雌雄果蠅各100只。成蟲分窩2周后給受試物，受試物摻入基礎飼料中，并保持各組PH值一致。每天定時三次統(tǒng)計果蠅存活數(shù)、死亡數(shù)，直到全部死亡。每組最后死亡的10只果蠅成蟲存活天數(shù)的平均數(shù)為該組的最高壽命。試驗結束時計算平均壽命和最高壽命以及半數(shù)死亡時間。
抗氧化功能試驗實驗動物Wistar雄性大鼠32只(鼠齡18月)，由黑龍江省腫瘤研究所實驗動物中心提供，動物合格證號為醫(yī)動字第09-2-1號。動物在本實驗室繼續(xù)飼養(yǎng)2個月后進行實驗，同時購入3個月齡的雄性Wistar大鼠8只作為少齡對照組動物。
劑量設計試驗共分5組，其中老齡大鼠4組，包括老齡對照組和3個試驗組，另設一少齡對照組，每組動物8只。具有延緩衰老功能的膠囊人體推薦量為每人每日6粒，即2.4g/人/日。如成人體重60kg計，則相當于0.04g/kg體重。大鼠劑量設計分別為人推薦量的5倍、10倍和30倍，即低、中、高劑量組分別為0.2g/kg體重、0.4g/kg體重和1.2g/kg體重。兩個對照組給清潔水，所有動物均按10ml/kg體重灌胃容積經(jīng)口給予受試物或清潔水，連續(xù)灌胃30天。
試劑與儀器MDA測定試劑盒購于長春匯力生物制品公司、SOD檢測試劑盒及GSH-Px檢測試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。熒光分光光度計、紫外分光光度計等。
實驗方法各組動物按所設計劑量每日灌胃不同劑量受試物，每周稱重一次，調整灌胃量。連續(xù)給具有延緩衰老功能的膠囊30天后斷頭處死動物，取血制備血清，于24小時內完成血清中過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量測定(TBA熒光法)、超氧化物歧化酶(SOD)活力測定(羥胺法)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力測定(DTNB法)。
數(shù)據(jù)處理所得數(shù)據(jù)用均數(shù)t檢驗進行統(tǒng)計處理。
2、結果具有延緩衰老功能的膠囊果蠅生存試驗結果果蠅成蟲基礎飼料中摻入不同濃度具有延緩衰老功能的膠囊受試物后的生存試驗結果見表1。
表1具有延緩衰老功能的膠囊果蠅生存試驗結果受試物 果蠅平均體重半數(shù)死最高壽命平均壽命組別濃度 性別 亡時間 t值 P t值P(％)(只) (μg)(d)(d) (d)對照組 - 雌性 100 964±33.9 59 84.7±3.53 57.8±17.7雌性 100 720±35.4 51 79.0±2.91 51.2±15.0低劑量組0.1雌性 100 940±21.0 58 86.5±1.72 60.1±16.3雄性 100 716±25.9 53 78.9±3.04 54.3±16.3中劑量組1 雌性 100 964±30.7 67 93.0±3.63** 5.97＜0.01 66.8±17.5** 3.62＜0.01雄性 100 704±16.9 58 86.0±3.37** 4.98＜0.01 59.4±15.8** 3.75＜0.01高劑量組1 雌性 100 944±50.6 69 99.5±3.95** 8.83＜0.01 70.5±18.0** 5.02＜0.01雄性 100 696±441.2 62 90.0±2.45** 9.15＜0.01 63.2±17.0** 5.31＜0.01注**與對照組同性別的果蠅相比，P＜0.01。
從表1結果可以看出，新羽化的果蠅成蟲各組間同性別的體重比較均一。經(jīng)統(tǒng)計學處理，各組果蠅體重無顯著差異(P＞0.05)。當飼料摻入1％和5％濃度具有延緩衰老功能的膠囊受試物后可使兩個性別果蠅的半數(shù)死亡時間延長(增加均超過5天)，并且兩個性別的最高壽命及平均壽命都比同性別對照組果蠅增加，經(jīng)統(tǒng)計學處理，均有極顯著性差異。
具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠體重的影響老齡鼠及少齡鼠給予具有延緩衰老功能的膠囊30天后體重的增長情況見表2。
表2具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠體重的影響劑量 動物初始體重 終末體重組別 數(shù)t值Δ PFΔP(g/kg) (只) (g) (g)少齡對照組 - 8 231±7.37 322±9.66老齡對照組 - 8 458±7.77 487±4.60低劑量組 0.28 470±32.10 1.054 ＞0.05 490±2.92 1.673＞0.05中劑量組 0.48 462±11.70 0.711 ＞0.05 489±4.05 1.262＞0.05高劑量組 1.28 459±5.93 0.206 ＞0.05 488±3.53 0.792＞0.05注Δ統(tǒng)計時不包括少齡對照組數(shù)據(jù)，其它統(tǒng)計值均為與老齡對照組相比較。
從表2結果可以看出，給予具有延緩衰老功能的膠囊30天后，少齡對照組動物體重持續(xù)增長，而老齡組各組動物，體重也略有增長，但各組間無明顯差異。
具有延緩衰老功能的膠囊對血清丙二醛含量的影響經(jīng)口給予老齡大鼠具有延緩衰老功能的膠囊30天后，血清中過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛的含量測定結果見表3。
表3具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血清MDA的影響劑量 動物 MDA含量組別 數(shù)t值P(g/kg) (只) (mmol/L)少齡對照組 - 8 2.12±0.22老齡對照組 - 8 3.58±0.59Δ 6.561 ＜0.01低劑量組0.28 3.37±0.39中劑量組0.48 3.10±0.31高劑量組1.28 2.77±0.40** 3.191 ＜0.01注Δ與少齡對照組相比P＜0.01**與老齡對照組相比P＜0.01從表3結果可見，老齡對照組大鼠體內過氧化脂質的降解產(chǎn)物丙二醛較少齡對照組明顯增加(P＜0.01)，而給予1.2g/kg體重具有延緩衰老功能的膠囊30天后，其體內丙二醛含量明顯降低，與老齡對照組動物相比較有極顯著性差異(P＜0.01)。
具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血清抗氧化酶活力的影響各組動物給予具有延緩衰老功能的膠囊30天后，血清超氧化物岐化酶(SOD)活力及谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)活力的測定結果見表4。
表4具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血清SOD、GSH-Px活力的影響劑量 動物 SOD活力GSH-Px活力組別 數(shù) t值P t值P(g/kg)(只) (U/ml) (U/ml)少齡對照組 -897.9±6.6511.8±1.17老齡對照組 -875.1±5.95Δ 7.233＜0.01 7.8±0.86Δ7.82 ＜0.01低劑量組 0.2 876.9±7.20 8.5±1.10中劑量組 0.4 880.6±9.16 9.9±1.07** 4.19 ＜0.01高劑量組 1.2 887.1±6.58** 3.834＜0.01 10.1±1.12** 5.54 ＜0.01注Δ與少齡對照組相比P＜0.01**與老齡對照組相比P＜0.01
由表4結果可見，老齡對照組大鼠的抗氧化酶活力(SOD和GSH-Px)均較少齡對照組動物降低，統(tǒng)計學處理有極顯著性差別(P＜0.01)。當給予具有延緩衰老功能的膠囊30天后，兩個抗氧化酶的活力均有升高，在0.4g/kg體重條件下GSH-Px活力，與老齡對照組相比有極顯著性差異(P＜0.01)，而在1.2g/kg體重條件下SOD與SGH-Px活力與老齡對照組相比均有極顯著性差異(P＜0.01)。
小結具有延緩衰老功能的膠囊可延長兩個性別果蠅的半數(shù)死亡時間，并增加兩個性別果蠅的最高壽命和平均壽命。對老齡鼠血清過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛的含量有降低作用，對老齡大鼠抗氧化酶(超氧化物岐化酶及谷胱甘肽過氧化物酶)的活力有升高作用，因此認為具有延緩衰老功能的膠囊有延緩衰老作用。
結論結果與判定(Results of Evaluation)具有延緩衰老功能的膠囊可延長兩個性別果蠅的半數(shù)死亡時間，并增加兩個性別果蠅的最高壽命和平均壽命。對老齡鼠血清過氧化脂質降解產(chǎn)物丙二醛的含量有降低作用，對老齡大鼠抗氧化酶(超氧化物岐化酶及谷胱甘肽過氧化物酶)的活力有升高作用。因此認為具有延緩衰老功能的膠囊有延緩衰老作用。
具有延緩衰老功能的膠囊的動物實驗材料和方法樣品具有延緩衰老功能的膠囊由黑龍江省益生堂保健品有限責任公司提供，每粒膠囊含受試物0.4g，受試物為褐色粉末，感官檢查未見異常。
試驗動物昆明種小白鼠(批準證號醫(yī)動字第09-2-1號)，Wistar品系大白鼠(批準證號為醫(yī)動字第09-3-2)均購自黑龍江省腫瘤研究所試驗動物中心。
小鼠急性毒性試驗選昆明種小鼠40只，雌雄各半，體重18-22g，按性別分別隨機分成4組，每組5只。按霍恩化法進行劑量設計，即4個劑量分別為2.15g/kg體重、4.64g/kg體重、10.0g/kg體重和21.5g/kg體重。動物隔夜空腹后按20ml/kg體重灌胃容積一次灌胃(21.5g/kg體重劑量組動物可間隔4小時二次灌胃達到總劑量)。觀察小鼠的中毒表現(xiàn)和死亡時間，觀察時間為14天。
遺傳毒性試驗Ames試驗檢樣制備將檢樣以無菌蒸餾水作溶劑分別制成5mg/0,1ml、1mg/0.1ml、0.2mg/0.1ml、0.04mg/0.1ml和0.008mg/0.1ml，共5個濃度的檢樣，試驗時各濃度每皿加入0.1ml。
試驗方法應用美國加州大學AMES實驗室提供的鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100和TA102四個菌株，進行加與不加S9(肝微粒體酶)代謝活化的兩種摻入法試驗，共設7組，即除上述5個濃度組外又設自發(fā)回變對照組和陽性對照組，每次試驗每個劑量均做3皿，相同試驗重復一次，最后以3皿的平均值報告試驗結果。
小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗選昆明種小白鼠50只，隨機分成5組，每組10只，雌雄各半，體重25-30g，設3個劑量組，高劑量為10g/kg體重，中劑量為5g/kg體重，低劑量為2.5g/kg，陰性對照組(給清潔水)，各組均按20ml/kg體重灌胃容積進行灌胃，另設陽性對照組給環(huán)磷酰胺(40mg/kg)，按0.1ml/10g體重進行腹腔注射。采用30h給受試物法，即第一次給受試物或對照物24h后，再次給受試物或對照物，6h后頸椎脫臼處死小鼠，取股骨，常規(guī)制片。顯微鏡下每只小鼠觀察1000個嗜多染紅細胞(PCE)，記錄有微核的細胞數(shù)和微核數(shù)，計算出微核率。
小鼠精子畸形試驗采用昆明種雄性小白鼠25只，體重25-30g，隨機分成5組，每組5只。設3個劑量組，高劑量為10g/kg體重，中劑量為5g/kg體重，低劑量2.5g/kg。陰性對照組給予清潔水，陽性對照組給環(huán)磷酰胺(40mg/kg體重)，各組動物均按20ml/kg體重灌胃容積進行灌胃，每日一次，連續(xù)5天。各組動物均于首次投與受試物后35天外死，按常規(guī)方法制片、固定、2％伊紅溶液染色，每只小鼠鏡檢1000個完整精子，計算精子畸形率。
小鼠睪丸染色體畸變分析試驗采用昆明種雄性小白鼠25只，體重25-30g，隨機分成5組，每組5只。各劑量組及陰性對照組的劑量設計及給受試物途徑均與小鼠精子畸形試驗相同。陽性對照組給環(huán)磷酰胺(40mg/kg體重，每日腹腔注射一次，連續(xù)5天)，于第1次給受試物后的第12天處死動物，處死前6h按4mg/kg體重劑量經(jīng)腹腔注射秋水仙素，處死動物后立即取睪丸，常規(guī)制片、染色、油鏡下分析分散良好的、染色體收縮適中的中期分裂相精母細胞，記錄染色體畸變情況。
30天喂養(yǎng)試驗采用剛斷乳的Wistar大鼠80只，體重60-80g，隨機分成4組，每組20只，雌雄各半，其中三組為試驗組，一組為對照組。
具有延緩衰老功能的膠囊的推薦用量為6粒/人/日，每粒膠囊含受試物0.4g，即2.4g/人/日，如成人體重按60kg計，則相當0.04g/kg。動物試驗具體劑量設計如下高劑量組劑量為4g/kg體重，此劑量相當人推薦用量的100倍。
中劑量組劑量為2g/kg體重，此劑量相當人推薦用量的50倍。
低劑量組劑量為1g/kg體重，此劑量相當人推薦用量的25倍。
各組動物灌胃容積均為20ml/kg體重。對照組給等容積清潔水，連續(xù)灌胃30天。
動物每天觀察并記錄一般狀況，中毒癥狀及死亡情況。每周稱一次動物體重并記錄飼料攝入量，計算食物利用率。試驗結束時，采血檢測血液學指標，并檢測血清生化學指標，如谷丙轉氨酶(ACT)，谷草轉氨酶(AST)，總蛋白(TP)，白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和尿素氮(BUN)等，同時取肝、腎、脾、睪丸、卵巢稱重，計算臟/體比值，并進行病理組織學檢查。
傳統(tǒng)致畸試驗采用性成熟Wistar大鼠，體重220-250g，雌雄大鼠按2∶1同籠交配，每日早晨檢查雌鼠陰栓或進行陰道涂片精子檢查，查出陰栓或精子當日作為“受孕”的第0天，將受精鼠60只隨機分成4組，每組15只，其中3組為試驗組，另一組為陰性對照組，投與檢樣的途徑為經(jīng)口灌胃，時間為妊娠第7天至第16天，灌胃容積為10ml/kg體重。具體分組及劑量見表1。
表1具有延緩衰老功能的膠囊大鼠致畸試驗分組及劑量表組別 劑量(mg/kg)高劑量組 5000中劑量組 2500低劑量組 1250低性對照(蒸餾水) 10(ml/kg)在受孕的第0、7、12、16、20天稱體重，觀察母鼠體重變動情況，于受孕第20天頸椎脫臼處死動物，立刻剖腹檢查，稱量胎仔窩重，記錄活胎、死胎及吸收胎數(shù)，然后逐個檢查活胎的外觀有無畸形，做胎仔發(fā)育測量，將活胎的1/2用BOUIN氏液固定備作內臟檢查，另外1/2經(jīng)茜素紅S染色做骨骼發(fā)育和畸形等檢查。
對試驗數(shù)據(jù)選用泊松分布檢驗、方差分析和均數(shù)t檢驗等方法進行統(tǒng)計學分析。
結果急性毒性試驗具有延緩衰老功能的膠囊的小鼠急性毒性試驗結果見表2。
表2具有延緩衰老功能的膠囊對小鼠的急性毒性動物劑量死亡性別 數(shù)量 途徑 結論品種 (g/kg·bw) 情況小鼠 雄性 5經(jīng)口 2.15 無 屬實際無毒物質5經(jīng)口 4.64 無5經(jīng)口10.00 無小鼠 雌性 5經(jīng)口 2.15 無 屬實際無毒物質5經(jīng)口 4.64 無5經(jīng)口10.00 無5經(jīng)口21.50 無在14天的觀察期間內，小鼠未出現(xiàn)任何中毒癥狀，無一動物死亡，根據(jù)試驗所設計的劑量、觀察到的結果及小鼠急性毒性判定標準，可認為具有延緩衰老功能的膠囊屬實際無毒物質。
遺傳毒性試驗Ames試驗具有延緩衰老功能的膠囊的Ames試驗結果分別見表3和表4。
表3具有延緩衰老功能的膠囊Ames試驗結果(第一次試驗)劑 量TA97 TA98TA100 TA102受試物(mg/皿) -s9 +s9 -s9 +s9 -s9 +s9 -s9 +s9具有延 5 131 147 4035 157 155 252 271緩衰老 1 145 151 3637 143 155 282 252功能的 0.2141 147 3334 152 150 271 290膠 囊 0.04 148 151 3639 148 159 254 2740.008 113 138 3845 159 148 297 254自發(fā)回變 121 137 4338 148 149 260 260陰性對照(μg/皿)DEXON 601410866140613572-AF 10 1360883 9891220
表4具有延緩衰老功能的膠囊Ames試驗結果(第二次試驗)劑量 TA97 TA98 TA100 TA102受試物(mg/皿) -s9 +s9 -s9 +s9 -s9 +s9 -s9 +s9具有延 5 147 149 35 34 136 152 278 260緩衰老 1 146 150 42 38 175 161 261 265功能的 0.2 145 157 34 43 164 179 299 296膠 囊 0.04 149 160 43 34 169 185 280 2820.008 145 139 40 44 179 142 259 266自發(fā)回變 126 129 38 39 156 152 267 274陽性對照(μg/皿)DEXON 60 1233 1180 1443 13172-AF 101336 1150 1257 1190試驗結果表明，受檢樣品在加與不加S9(肝微粒體酶)活化條件下，對Ames試驗菌株均呈陰性結果，即Ames試驗結果為致突變陰性。
小鼠骨髓哮多染紅細胞微核試驗具有延緩衰老功能的膠囊的小鼠骨髓嗜多染微核試驗結果見表5。
表5具有延緩衰老功能的膠囊對小鼠骨髓微核發(fā)生率的影響劑量動物數(shù) 受檢PCE 微核數(shù) 微核率組別 性別(g/kg·bw) (只)數(shù)(個)(個) (‰)高劑量組 雄性 10 51000×5 10 2.0中劑量組 5 51000×5 9 1.8低劑量組 2.5 51000×5 9 1.8陰性對照 0 51000×5 10 2.O陽性對照 40mg/kg51000×5183 36.6(環(huán)磷酰胺)高劑量組 雌性 10 51000×5 9 1.8中劑量組 5 51000×5 10 2.0低劑量組 2.5 51000×5 9 1.8陰性對照 0 51000×5 11 2.0陽性對照 40mg/kg51000×5184 6.8(環(huán)磷酰胺)
對試驗結果進行泊松分布檢驗，結果表明兩個性別動物除陽性對照組外，各劑量組與陰性對照組微核率相比均無明顯差異，說明受試物的小鼠骨髓嗜多染微核試驗為陰性結果。
小鼠精子畸形試驗具有延緩衰老功能的膠囊的小鼠精子畸形試驗結果見表6。
表6具有延緩衰老功能的膠囊對小鼠精子畸形發(fā)生率的影響劑 量 動 觀察精子 各 型 畸 形 精 子 數(shù) 畸形 精 子組別 物 精子 畸形率(g/kg) 數(shù)數(shù) 無鉤頭 胖頭 香蕉頭 無定形頭 折尾 雙尾 數(shù)(％)高劑量10 5 1000×5 344 37 361 851.70中劑量組 5 5 1000×5 293 39 351 801.60低劑量組 2.55 1000×5 353 28 362 801.72陰性對照 0 5 1000×5 314 37 402 871.74陽性對照 40g/kg 5 1000×5 83 4531 29 644 2565.12(環(huán)磷酰胺)從表6可見，各組動物均可見到一定數(shù)量畸形精子，但給予環(huán)磷酰胺的陽性對照組精子畸形率與陰性對照組相比有極顯著性差異(P＜0.01)；而試驗組動物的精子畸形率與陰性對照組相比均無顯著性差異(P＞0.05)，說明受試物對小鼠精子畸形發(fā)生率無影響。
小鼠睪丸染色體畸變分析試驗具有延緩衰老功能的膠囊小鼠睪丸染色體畸變分析試驗的結果見表7。
表7具有延緩衰老功能的膠囊小鼠睪丸染色體畸變分析結果劑量 動物數(shù) 觀察中期 性染色體 常染色體 斷 畸變細 細胞畸組別 相細胞數(shù) 早熟分離 早熟分離 片 胞 數(shù) 變 率(g/kg) (只) (個) (個) (個) (個) (個)(％)高劑量組 10 5 100×5 10 1 011 2.20中劑量組 5 5 100×5 11 2 013 2.60低劑量組 2.5 5 100×5 11 2 013 2.60陰性對照組 0 5 100×5 13 2 015 3.00陽性對照 40mg/kg 5 100×5 65 33 4 10220.40(環(huán)磷酰胺)
本試驗各試驗組及對照組僅見染色體單價體、常染色體單價體及很少的染色體斷片。各試驗組染色體畸變類型和細胞畸變率與陰性對照組相比均無顯著性差別(U檢驗，P＞0.05)；而陽性對照組上述各項指標與陰性對照組比較差異均顯著(U檢驗，P＜0.01)。由此可見，具有延緩衰老功能的膠囊對小鼠睪丸染色體無損傷作用。
30天喂養(yǎng)試驗在整個試驗過程中各組動物一般狀況良好，未見受試動物有任何不良反應，亦無中毒或死亡。
對大鼠體重的影響在30天喂養(yǎng)過程中，具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠體重增長的影響見表8。
表8具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠體重的影響劑量 動物 始 重第1周 第2周 第3周 第4周組別 性別 數(shù) 體 重 體 重 體 重 體 重(g/kg) (只)(g) (g) (g) (g) (g)高劑量組4 10 68.4±7.9 109.4±10.1 141.7±11.5 158.1±12.1 192.5±17.1中劑量組 雄性 2 10 69.5±5.6 107.3±8.8 148.1±8.5 181.0±8.9 191.7±8.6低劑量組1 10 70.3±7.0 112.1±7.8 151.6±8.7 181.8±8.6 193.6±9.2陰性對照0 10 69.7±6.4 108.3±5.5 148.4±7.0 178.8±6.6 191.6±7.9高劑量組4 10 69.6±6.6 103.4±7.3 144.5±9.1 175.4±10.2 187.1±10.6中劑量組 雌性 2 10 68.6±6.6 108.7±7.1 138.3±7.9 166.5±8.2 184.3±9.8低劑量組1 10 67.8±6.6 109.8±6.8 137.8±7.1 169.8±7.6 190.3±6.0陰性對照0 10 68.0±7.0 109.0±7.9 136.6±3.9 170.2±7.9 187.5±6.6對表8中各周動物體重進行方差處理，結果均無顯著差異(P＞0.05)，說明具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠體重的增長無明顯影響。
對大鼠總食物利用率的影響具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠總食物利用率的影響見表9。
表9具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠總食物利用率的影響性劑 量動物體重增重 進 食 量 食物利用組別 數(shù) 率別 (g/kg·bw) (只) (g) (g) (％)高劑量組 410124.2±15.0 771.9±6.516.1±2.0中劑量組 雄 210122.2±5.1 769.0±10.2 15.9±0.7低劑量組 110123.3±5.1 770.0±9.016.0±0.7陰性對照 010121.9±8.0 769.9±9.315.9±1.1高劑量組 410117.5±6.8 769.4±12.5 15.3±1.0中劑量組 雌 210115.7±8.7 774.0±11.9 14.9±1.3低劑量組 110122.5±5.8 772.3±5.515.9±0.7陰性對照 010119.5±5.6 775.1±6.315.4±0.7對表9的結果進行方差分析，各組間無顯著性差異(P＞0.05)，說明具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠的總食物利用率無明顯影響。
血液學檢查結果大鼠給30天具有延緩衰老功能的膠囊，在處死動物之前經(jīng)尾采集了大鼠末梢血，進行了血紅蛋白(Hb)、白細胞(WBC)總數(shù)及分類等檢查，結果列于表10。表中數(shù)據(jù)表明，各試驗組動物未梢血WBC總數(shù)和分類及Hb等與對照組一樣均在正常值范圍，即具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血液學指標無不良影響。
表10具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血液學指標的影響劑 量 WBC總數(shù) WBC分類(％) HbRBC組別(g/kg·bw)(10/L) LN EM (g/L) (10/L)高劑量組 4 138.05±13.07 78.4 19.6 0.6 1.4 125.8±5.0 4.94±0.39中劑量組 2 139.65±19.74 78.8 19.0 0.7 1.5 127.2±3.3 4.90±0.43低劑量組 1 141.40±21.78 79.3 18.8 0.6 1.5 124.6±4.6 4.89±0.46對照組 0 137.85±15.42 79.3 18.7 0.6 1.5 125.9±4.7 4.93±0.45
末期血清生化學檢查結果試驗結束后處死動物，分離動物血清，進行了血清谷——草轉氨酶(AST)活性、谷-丙轉氨酶(ALT)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)和血清尿素氮(BUN)含量等指標的測定見表11。結果表明各項指標均在正常值范圍內且與對照組相比無顯著性差異。
表11具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠血清生化指標的影響指標高劑量組中劑量組 低劑量組 對照組ALT(IU/L) 89.9±8.385.9±4.986.9±7.188.5±5.8AST(IU/L) 186.1±7.0 187.9±7.9 187.6±6.8 186.9±7.2BUN(mmol/L) 7.5±0.7 7.5±0.6 7.5±0.5 7.6±0.6TP(g/L)68.6±6.466.1±6.666.8±5.068.5±5.5ALB(g/L) 39.3±4.437.9±3.937.7±3.438.7±3.8GLO(g/L) 31.2±4.331.0±2.730.3±3.731.1±3.8具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠臟體比值的影響在30天喂養(yǎng)試驗中，計算臟/體比值的結果見表12。
表12具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠臟/體比值的影響劑 量組別肝 脾 腎 睪丸(g/kg·bw)高劑量組 4 4.23±0.45 0.46±0.11 0.77±0.07 1.35±0.07中劑量組 2 4.10±0.32 0.43±0.08 0.76±0.06 1.41±0.05低劑量組 1 4.22±0.26 0.44±0.06 0.76±0.08 1.37±0.06對照組 - 4.26±0.23 0.44±0.06 0.77±0.11 1.36±0.05
對表12結果在試驗組與對照組之間進行比較，方差分析表明各臟器的臟/體比均無明顯差別(P＞0.05)。
病理組織學檢查結果各組動物主要臟器的病理組織學檢查均未見到有與陰性對照組不同的病理組織學改變，說明具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠肝、脾、腎、睪丸等主要臟器無損害作用。
傳統(tǒng)致畸試驗具有延緩衰老功能的膠囊對孕鼠體重的影響受孕大鼠給予具有延緩衰老功能的膠囊后對體重的影響見表13。
表13具有延緩衰老功能的膠囊對孕鼠體重的影響劑量孕鼠 妊娠天數(shù)總增重組 別 數(shù)(g/kg·bw) (只)0天(g) 7天(g) 12天(g) 16天(g) 20天(g) (g)高劑量組 5 11 201.1±12.2 215.9±15.1 223.8±18.9 249.6±27.0 270.3±27.0 69.2±18.5中劑量組 2.511 197.1±15.6 215.6±14.3 224.1±14.2 251.1±18.5 268.0±18.4 70.9±13.2低劑量組 1.25 12 198.9±18.5 216.3±19.8 222.3±15.9 247.7±20.5 268.8±23.1 69.8±17.7對照組 0 11 199.6±15.5 214.8±15.5 221.6±19.5 237.7±36.4 266.0±22.5 66.4±18.0對各組動物的總增重進行統(tǒng)計分析，各試驗組與陰性對照組相比，無顯著性差異，說明受試物對孕鼠體重無明顯影響。
具有延緩衰老功能的膠囊對大鼠胎鼠的影響具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠一般發(fā)育的影響見表14。
表14具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠一般發(fā)育的影響劑量 受精 受孕 胎仔 平均胎胎仔平 吸收 死胎組別 鼠鼠數(shù) 仔 數(shù)均體重 胎(g/kg·bw) (只) (只) (只) (只) (克) (只) (只)高劑量組5151187 7.9±2.6 3.57±0.33 1 0中劑量組2.5 151190 8.2±1.6 3.58±0.44 0 0低劑量組1.25 151296 8.0±2.4 3.59±0.37 0 0高對照 0151183 7.5±3.3 3.52±0.23 1 0
表14結果表明，各試驗組動物的吸收胎、死胎、平均胎仔數(shù)及胎仔平均體重與陰性對照組相比，均無統(tǒng)計學差別(P＞0.05)，表明受試物對胎鼠的一般發(fā)育無明顯影響。
具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠骨骼發(fā)育的影響具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠骨骼發(fā)育的影響見表15。
表15具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠骨骼發(fā)育的影響劑量例肋骨 胸 骨 頭頂骨骨組別 數(shù)(g/kg·bw) (只) 13對 12對 6塊 第5呈點狀 5塊 4塊化 不 全高劑量組5 4646041 18 50 0中劑量組2.54848046 14 20 0低劑量組1.25 5050050 18 00 0陰性對照0 4343040 14 30 0骨骼檢查結果見到，受試物各劑量組胎鼠骨骼發(fā)育遲緩指標與陰性對照組相比無顯著性差別(P＞0.05)，此外，各劑量組均未見有骨骼畸形的胎鼠。
具有延緩衰老功能的膠囊對胎鼠外觀及內臟發(fā)育的影響受試物各劑量組均未見到外觀畸形的胎鼠，內臟徒手切片檢查亦未見到內臟有異常改變。
小結受試物具有延緩衰老功能的膠囊小鼠經(jīng)口急性毒性屬實際無毒物質；Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠精子畸形和小鼠睪丸染色體畸變分析等四項遺傳毒性試驗檢測均為陰性結果；30天喂養(yǎng)試驗亦未見其對受試動物有任何毒性損害作用。傳統(tǒng)致畸試驗檢測未見其對胎鼠致畸效應或其它胚胎毒性作用。
結果與判定(Results of Evaluation)受試物具有延緩衰老功能的膠囊小鼠經(jīng)口急性毒性屬實際無毒物質；Ames試驗、小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗、小鼠精子畸形和小鼠睪丸染色體畸變分析等四項遺傳毒性試驗檢測均為陰性結果；30天喂養(yǎng)試驗亦未見其對受試動物有任何毒性損害作用。傳統(tǒng)致畸試驗檢測未見其對胎鼠致畸效應或其它胚胎毒性作用。
權利要求
1.一種具有延緩衰老功能的膠囊，其配方是(以重量計)刺五加浸膏粉70-80份、維生素E0.1-份。
2.一種具有延緩衰老功能的膠囊，其配方是(以重量計)刺五加浸膏粉70-80份、核酸20-30份、維生素E0.1-1份，
3.一種如權利要求1所述的具有延緩衰老功能的膠囊的制作工藝，其特征在于取刺五加浸膏粉70-80份、維生素E0.1-1份。a、刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用；b、將維生素與刺五加浸膏細粉混勻；c、將混合粉末裝入膠囊，拋光；d、包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射；e、檢驗合格后入庫。
4.一種如權利要求2所述的具有延緩衰老功能的膠囊的制作工藝，其特征在于取刺五加浸膏粉70-80份、核酸20-30份、維生素E0.1-1份。a、刺五加浸膏粉進行80目篩分，備用；b、將核酸烘干碾碎過80目備用；c、將核酸細粉與維生素E混合均勻后，再與刺五加浸膏細粉混勻；d、將混合粉末裝入膠囊，拋光；e、包裝后經(jīng)7KGYCo-60照射；f、檢驗合格后入庫。
全文摘要
一種具有延緩衰老功能的膠囊,其配方是:刺五加浸膏粉70—80份、核酸20—30份、維生素E0.1—1份,將刺五加浸膏粉進行80目篩分,備用,將核酸烘干碾碎過80目備用,將核酸細粉與維生素E混合均勻后再與刺五加浸膏細粉混勻,將混合粉末裝入膠囊,拋光,包裝后經(jīng)7kgYCo－60照射即可,這種膠囊具有明顯的抗氧化作用及延緩衰老功能,可廣泛作為中老年人的保健食品。
文檔編號A61P39/00GK1306843SQ0011010
公開日2001年8月8日 申請日期2000年2月2日 優(yōu)先權日2000年2月2日
發(fā)明者隋煥平 申請人:隋煥平