鈣固化:量取20mL步驟(4 )制備的氯化鈣添加到步驟(7 )制備的復乳中，在40°C溫控條件下固化5h;
(9)復合物凝聚:首先將步驟(8)制備的海藻酸鈣微囊洗脫掉外油相后用1mL去離子水懸浮，然后緩慢滴加1mL步驟(5)制備的殼聚糖溶液，磁力攪拌下固化1.5h，洗脫掉多余的殼聚糖后將微囊用3mL去離子水懸浮后常規(guī)冷凍12h;
(10)冷凍干燥:將步驟(9)微膠囊冷凍樣品進行72h冷凍干燥，即得所述的魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊。
[0017]本實施例的魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊的粒徑為648±75nm，多分散指數(shù)(PDI)為0.147，表面電荷為+7.9mV，魚油/藻油的有效裝載率為32%，冷場掃面電鏡圖片見附圖2。
[0018]實施例2:
(1)內油相配制:稱取0.1g脂溶性抗壞血酸，將其添加到10mL深海魚油/藻油中，磁力攪拌Ih;
(2)水相配制:稱取0.1g吐溫-20，將其添加到10mL質量比為1.0%的海藻酸鈉水溶液中，磁力攪拌2h;
(3)外油相配制:稱取適量的2g斯盤-80，將其添加到10mL葵花籽油中，磁力攪拌lh;
(4)氯化鈣固化劑的配制:將5ml質量比為6%的氯化鈣水溶液添加到40mL步驟(3)的外油相中，設定功率為30%條件下超聲乳化2min;
(5)殼聚糖溶液的配制:將1.0g殼聚糖添加到100mLpH4.0的醋酸溶液中，磁力攪拌2h后離心取上清液備用；
(6)第一次快速膜乳化:按照1:10體積比將ImL步驟(I)的內油相預先添加到1mL步驟
(2)的水相中磁力攪拌lh，選取孔隙為0.Ιμπι的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第一次快速膜乳化3遍后形成初乳；
(7)第二次快速膜乳化:按照1:20體積比將5mL步驟(6)的初乳預先添加到10mL步驟
(3)的外油相中磁力攪拌lh，選取孔隙為7.2μπι的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第二次快速膜乳化3次后形成復乳；
(8 )氯化鈣固化:量取I OmL步驟(4 )制備的氯化鈣添加到步驟(7 )制備的復乳中，在40°C溫控條件下固化6h;
(9)復合物凝聚:首先將步驟(8)制備的海藻酸鈣微囊洗脫掉外油相后用1mL去離子水懸浮，然后緩慢滴加1mL步驟(5)制備的殼聚糖溶液，磁力攪拌下固化1.0h，洗脫掉多余的殼聚糖后將微囊用3mL去離子水懸浮后常規(guī)冷凍12h;
(10)冷凍干燥:將步驟(9)微膠囊冷凍樣品進行72h冷凍干燥，即得所述的魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊。
[0019 ]本實施例的魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊的粒徑為5 7 3 ± 7 5nm，多分散指數(shù)(PDI)為0.212，表面電荷為+8.0mV，魚油/藻油的有效裝載率為27%，其冷場掃面電鏡圖片見附圖3。
【主權項】
1.一種微納米級魚油/藻油微膠囊，包括由魚油/藻油組成的活性層和由海藻酸鈣-殼聚糖組成的壁材層，其特征在于:所述活性層及壁材層分別占總重量的25-35%、65-75%;所述微膠囊的粒徑范圍為500?800nm，魚油/藻油的有效裝載率為25%_35%。2.如權利要求1所述的微鈉米級魚油/藻油微膠囊，其特征在于:所述微膠囊中還含有占總重量0.05-1.5%的脂溶性抗氧化劑、1-10%的親水性乳化劑。3.如權利要求2所述的微鈉米級魚油/藻油微膠囊，其特征在于:所述脂溶性抗氧化劑選自維生素E或脂溶性抗壞血酸中的一種或兩種。4.如權利要求2所述的微鈉米級魚油/藻油微膠囊，其特征在于:所述親水性乳化劑選自蔗糖脂肪酸酯或吐溫-20中的一種或兩種。5.如權利要求2所述的微鈉米級魚油/藻油微膠囊，其特征在于:所述的親油性乳化劑優(yōu)選聚甘油脂肪酸酯或斯盤-80中的一種或兩種。6.—種制備如權利要求1所述微鈉米級魚油/藻油微膠囊的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: (1)內油相配制:稱取適量脂溶性抗氧化劑，將其按照質量百分比0.1?5.0%添加到一份魚油/藻油中，磁力攪拌至混勻； (2)水相配制:稱取適量的一種或幾種親水性乳化劑，將其按照質量百分比0.2?2.0%添加到一份0.5?3.0%的海藻酸鈉水溶液中，磁力攪拌至混勻； (3)外油相配制:稱取適量的一種或幾種親油性乳化劑，將其按照質量百分比I?4%添加到一份食用油中，磁力攪拌至混勻； (4)氯化鈣固化劑的配制:首先制備一定量的重量比為I?10%的氯化鈣水溶液，然后按照體積1:5?1:10的比例將氯化鈣水溶液添加到一定量步驟(3)的外油相中，超聲混勻后備用； (5)殼聚糖溶液的配制:按照重量比為I?3%的比例將一定量的殼聚糖溶解到pH值為3?4的醋酸/檸檬酸等酸性溶液中，磁力攪拌均勻后備用； (6)第一次快速膜乳化:按照體積1:3?1:10的比例將步驟(I)的內油相預先添加到步驟(2 )的水相中磁力攪拌均勻，首先盡可能小地選取孔隙在0.1O?0.2 8μπι之間的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第一次快速膜乳化，乳化I?3遍后形成初乳； (7)第二次快速膜乳化:按照體積1:5?1:20的比例將步驟(6)的初乳預先添加到步驟(3)的外油相中磁力攪拌均勻，首先根據(jù)所預期要達到的微囊粒徑大小分別選取0.28?18.ΟΟμπι不等的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第二次快速膜乳化，乳化I?3次后形成復乳； (8)氯化鈣固化:根據(jù)海藻酸鈉大分子中所含古洛糖醛酸單元的數(shù)量，按照1:1?1:4的摩爾比將步驟(4)制備的氯化鈣添加到步驟(7)制備的復乳中，在30?60°C溫控條件下固化2 ?6h; (9)復合物凝聚:首先將步驟(8)制備的海藻酸鈣微囊洗脫掉外油相，而后用一定量去離子水懸浮，再按照等體積的比例將步驟(5)制備的殼聚糖溶液添加到該溶液中，磁力攪拌下固化I?3h，洗脫掉多余的殼聚糖后將微囊用少量去離子水懸浮； (10)冷凍干燥:將步驟(9)微膠囊懸浮液冷凍干燥24?72h，即得所述的魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊。7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于:通過選取相應孔隙的SPG膜可制備500nm?SOOnm尺寸不等且粒徑大小均一的微鈉米級魚油/藻油微膠囊。8.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟: (1)內油相配制:稱取0.5g維生素E，將其添加到10mL深海魚油中，磁力攪拌Ih; (2)水相配制:稱取0.2g蔗糖脂肪酸酯(SE-15)，將其添加到10mL質量比為1.5%的海藻酸鈉水溶液中，磁力攪拌2h; (3)外油相配制:稱取適量的Ig聚甘油脂肪酸酯(PO-5S)，將其添加到10mL葵花籽油中，磁力攪拌Ih; (4)氯化鈣固化劑的配制:將5mL質量比為5%的氯化鈣水溶液添加到15mL步驟(3)的外油相中，設定功率為30%條件下超聲乳化2min; (5)殼聚糖溶液的配制:將1.5g殼聚糖添加到100mLpH4.0的醋酸溶液中，磁力攪拌2h后離心取上清液備用； (6)第一次快速膜乳化:按照1:5體積比將2ml步驟(I)的內油相預先添加到1ml步驟(2)的水相中磁力攪拌lh，選取孔隙為0.Ιμπι的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第一次快速膜乳化3遍后形成初乳； (7)第二次快速膜乳化:按照1:10體積比將1mL步驟(6)的初乳預先添加到10mL步驟(3)的外油相中磁力攪拌lh，選取孔隙為9.2μπι的SPG膜，然后將預混液放進裝置中進行第二次快速膜乳化3次后形成復乳； (8 )氯化鈣固化:量取20mL步驟(4)制備的氯化鈣添加到步驟(7 )制備的復乳中，在40°C溫控條件下固化5小時； (9)復合物凝聚:首先將步驟(8)制備的海藻酸鈣微囊洗脫掉外油相后用1ml去離子水懸浮，然后緩慢滴加1mL步驟(5)制備的殼聚糖溶液，磁力攪拌下固化1.5h，洗脫掉多余的殼聚糖后將微囊用3mL去離子水懸浮后常規(guī)冷凍12h; (10)冷凍干燥:將步驟(9)微膠囊冷凍樣品進行72h冷凍干燥，即得所述的微鈉米級魚油/藻油的海藻酸鈣-殼聚糖固體微膠囊。
【專利摘要】本發(fā)明涉及富含人體所必需的多不飽和脂肪酸（PUFA）的魚油/藻油微囊化產(chǎn)品及其生產(chǎn)工藝。所述的微膠囊借助于快速膜乳化工藝，以生物可降解兼具保健功效且價廉易得的海藻酸鈉和殼聚糖為壁材通過復凝聚法制備而成。本發(fā)明制備的魚油/藻油微膠囊粒徑大小均一，粒徑可控制在幾百納米～幾十微米之間，具有良好的緩釋、腸溶和高效吸收及低生產(chǎn)成本等優(yōu)勢，可廣泛適用于食品的營養(yǎng)強化及保健食品中。
【IPC分類】A23P10/30, A23L33/00
【公開號】CN105533691
【申請?zhí)枴緾N201510928123
【發(fā)明人】霍軍生, 王連艷, 黃建, 楊婷媛, 張貴鋒, 劉輝, 張博
【申請人】中國疾病預防控制中心營養(yǎng)與健康所, 中國科學院過程工程研究所
【公開日】2016年5月4日
【申請日】2015年12月15日