;控制溫度在-10°c粉碎至粒徑在1. 2mmw下；添加構(gòu)杞重量4 倍的亞硫酸鋼水溶液，控制溶液的抑為4,添加混合物重量0. 5 %的復(fù)合酶，所述復(fù)合酶 由酸性果膠酶、纖維素酶和葡聚糖酶組成，酸性果膠酶、纖維素酶和葡聚糖酶的重量比為 2. 5 : 1 : 1，酶解溫度為50°C，酶解時(shí)間為化；之后將抑值調(diào)整為5. 3,溫度升到55°C，同 時(shí)添加混合物重量0. 4%的果膠酶和0. 3%的蛋白酶，作用時(shí)間為2.化；酶解液在6°C過濾； 濾液噴霧干燥后粉碎過60目篩，即得構(gòu)杞酶解粉。所述構(gòu)杞酶解粉中多糖含量達(dá)到42%。
[0059] 所述海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物的制備方法如下： W60] 發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖1 %，酶解玉米粉2 %，蛋白腺2. 5 %，硫酸儀0. 02 %，憐 酸二氨鐘0. 15 %，銅含量180mg/L(硫酸銅配置，W銅離子計(jì)算），氯化鋼20 %，其余為水； 初始抑為8,接種量5%，搖床轉(zhuǎn)速為60r/min，26°C培養(yǎng)12小時(shí)后調(diào)整溫度為18°C進(jìn)行低 溫靜止培養(yǎng)，停止攬拌，抑調(diào)整為4,保持3小時(shí)；之后每小時(shí)2-4°C階梯形升溫到28°C，pH 調(diào)整為5. 3,按照2. 5 %的添加量添加蛋白腺，按照2 %的量添加酵母粉；搖床轉(zhuǎn)速為80r/ min,繼續(xù)發(fā)酵12h。發(fā)酵液干燥粉碎過50-60目篩后即得海洋酵母發(fā)酵培養(yǎng)物。
[0061] 優(yōu)選的，在低溫靜止培養(yǎng)階段向培養(yǎng)基中添加培養(yǎng)基重量4wt%的滅菌蛋氨酸馨 和銅。
[0062] 所述酶解玉米粉的制備方法為：將玉米粉與水混合，濕法粉碎制備細(xì)微玉米粉 料液，加入a-淀粉酶和氯化巧，調(diào)節(jié)抑5. 5-6. 0,72°C保溫15min，再加熱至90°C酶解 20min，然后降溫至55°C，調(diào)節(jié)pH4. 5-5. 0,添加酸性蛋白酶水解40min，酶解液離屯、洗涂后 即得濃縮的酶解玉米粉。
[0063] 采用上述方法發(fā)酵培養(yǎng)海洋紅酵母WYN1，其生物量、類胡蘿h素產(chǎn)量及胞內(nèi)銅含 量分別為28g/LW上、38mg/L和7650yg/g干菌。
[0064] 飼料添加劑的制備方法如下： 陽0化]將甘草、酸角、魚腥草和蒲公英分別干燥粉碎過60目篩，再與通過上述方法制得 的海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物、淫羊蕾提取物和構(gòu)杞酶解粉按所述比例混合均勻即可
[0066] 實(shí)施例4 :飼料添加劑及其制備
[0067] 飼料添加劑的重量份數(shù)組成如下：
[0068] 淫羊蕾提取物12,海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物20,構(gòu)杞酶解粉10,甘草8,酸角8,魚腥 草5,蒲公英8 ;所述海洋紅酵母保藏編號(hào)為CCTCCNO:M2014592。
[0069] 所述淫羊蕾提取物的制備方法如下：
[0070] 淫羊蕾粉碎過40-50目篩后，添加淫羊蕾10倍重量的50%乙醇溶液，室溫條件下 用40曲Z超聲波輔助提取2次，每次30min，過濾得乙醇提取液，提取后的殘?jiān)刑砑?倍重 量熱水，80°C煎煮比，過濾后溶液與乙醇提取液混合，直火加熱濃縮提取液，常規(guī)方法干燥， 粉碎過60目篩，即得淫羊蕾提取物。
[0071] 所述海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物的制備方法如下：
[0072] 發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖1%，酶解玉米粉1%，蛋白腺2. 5%，硫酸儀0.02%，憐 酸二氨鐘0. 15%，銅含量200mg/l，氯化鋼20 %，其余為水；初始抑為8,接種量8 %，搖床 轉(zhuǎn)速為80r/min，24°C培養(yǎng)10小時(shí)后調(diào)整溫度為16°C進(jìn)行低溫靜止培養(yǎng)，停止攬拌，抑調(diào) 整為5,保持2小時(shí)；之后階梯形升溫到26°C，抑調(diào)整為5. 5,按照2. 5%的添加量添加蛋白 腺，按照2 %的量添加酵母粉；搖床轉(zhuǎn)速為50r/min，繼續(xù)發(fā)酵15h。發(fā)酵液干燥粉碎過50-60 目篩后即得海洋酵母發(fā)酵培養(yǎng)物。
[0073] 優(yōu)選的，在低溫靜止培養(yǎng)階段向培養(yǎng)基中添加培養(yǎng)基重量3wt%的蛋氨酸馨和銅。
[0074] 所述酶解玉米粉的制備方法為：將玉米粉與水混合，濕法粉碎制備細(xì)微玉米粉 料液，加入a-淀粉酶和氯化巧，調(diào)節(jié)抑5. 5-6. 0,72°C保溫15min，再加熱至90°C酶解 30min，然后降溫至60°C，調(diào)節(jié)pH4. 5-5. 0,添加酸性蛋白酶水解30min，酶解液離屯、洗涂后 即得濃縮的酶解玉米粉。
[00巧]采用上述方法發(fā)酵培養(yǎng)海洋紅酵母WYN1，其生物量、類胡蘿h素產(chǎn)量及胞內(nèi)銅含 量分別為27g/LW上、35mg/L和7350yg/g干菌。
[0076] 所述構(gòu)杞酶解粉的制備方法如下：構(gòu)杞?jīng)_洗后迅速冷凍至-20°C至40°C;升華干 燥，真空度400-500Pa，溫度-10°C至0°C，干燥到水分<12% ;控制溫度在-10°C至-2°C粉 碎至粒徑在1. 2mmW下；添加構(gòu)杞重量2倍的亞硫酸鋼水溶液，控制溶液的pH為3,添加混 合物重量0.3%的復(fù)合酶，所述復(fù)合酶由酸性果膠酶、纖維素酶和葡聚糖酶組成，酸性果膠 酶、纖維素酶和葡聚糖酶的重量比為2.5 : 1 : 1.5,酶解溫度為45°C，酶解時(shí)間為2.化； 之后將抑值調(diào)整為5. 0,溫度升到50°C，同時(shí)添加混合物重量0. 2%的果膠酶和0. 5%的蛋 白酶，作用時(shí)間為2.化；酶解液在5°C過濾；濾液噴霧干燥后粉碎過60目篩，即得構(gòu)杞酶解 粉。 陽077] 飼料添加劑的制備方法如下：
[0078] 將甘草、酸角、魚腥草和蒲公英分別干燥粉碎過60目篩，再與通過上述方法制得 的海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物、淫羊蕾提取物和構(gòu)杞酶解粉按所述比例混合均勻即可
[0079] 實(shí)施例5 :飼料添加劑及其制備
[0080] 飼料添加劑的重量份數(shù)組成如下：
[0081] 淫羊蕾提取物15,海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物8,構(gòu)杞酶解粉5,甘草3,酸角6,魚腥草 3,蒲公英1 ;所述海洋紅酵母保藏編號(hào)為CCTCCNO:M2014592。
[0082] 所述淫羊蕾提取物的制備方法如下：
[0083] 淫羊蕾粉碎過40-50目篩后，添加淫羊蕾9倍重量的50%乙醇溶液，室溫條件下用 40曲Z超聲波輔助提取2次，每次30min，過濾得乙醇提取液，提取后的殘?jiān)刑砑?倍重量 熱水，80°C煎煮比，過濾后溶液與乙醇提取液混合，直火加熱濃縮至恰好蒸干，自然驚干，粉 碎過60目篩，即得淫羊蕾提取物。
[0084] 所述海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物由如下方法制備：
[00化]發(fā)酵培養(yǎng)基組成為葡萄糖1 %，酶解玉米粉3 %，蛋白腺2. 5 %，硫酸儀0. 02 %，憐 酸二氨鐘0. 15 %，銅含量150mg/L(硫酸銅配置，W銅離子計(jì)算），氯化鋼20 %，其余為水； 初始抑為8,接種量3%，搖床轉(zhuǎn)速為50r/min，28°C培養(yǎng)15小時(shí)后調(diào)整溫度為20°C進(jìn)行低 溫靜止培養(yǎng)，停止攬拌，抑調(diào)整為3,保持4小時(shí)；之后階梯形升溫到30°C，抑調(diào)整為4. 8， 按照初始培養(yǎng)基2. 5 %的添加量添加蛋白腺，按照2 %的量添加酵母粉，搖床轉(zhuǎn)速為10化/ min,繼續(xù)發(fā)酵lOh;發(fā)酵液干燥粉碎過50-60目篩后即得海洋酵母發(fā)酵培養(yǎng)物。
[0086] 優(yōu)選的，在所述低溫靜止培養(yǎng)階段向培養(yǎng)基中添加初始培養(yǎng)基重量5wt%的蛋氨 酸馨合銅。
[0087] 所述酶解玉米粉的制備方法同實(shí)施例4。
[0088] 所述構(gòu)杞酶解粉的制備方法如下：構(gòu)杞?jīng)_洗后迅速冷凍至-20°C至40°C;升華干 燥，真空度400-500Pa，溫度-10°C至0°C，干燥到水分<12% ;控制溫度在-10°C至-2°C粉 碎至粒徑在1. 2mmW下；添加構(gòu)杞重5倍的亞硫酸鋼水溶液，控制溶液的抑為5,添加混合 物重量0. 6%的復(fù)合酶，所述復(fù)合酶由酸性果膠酶、纖維素酶和葡聚糖酶組成，酸性果膠酶、 纖維素酶和葡聚糖酶的重量比為2.5 : 1 : (1-1.2)，酶解溫度為55°C，酶解時(shí)間為化；之 后將抑值調(diào)整為5. 6,溫度升到60°C，同時(shí)添加混合物重量0. 6%的果膠酶和0. 2%的蛋白 酶，作用時(shí)間為化；酶解液在l〇°C過濾；濾液噴霧干燥后粉碎過60目篩，即得構(gòu)杞酶解粉。
[0089] 飼料添加劑的制備方法如下：
[0090] 將甘草、酸角、魚腥草和蒲公英分別干燥粉碎過60目篩，再與通過上述方法制得 的海洋紅酵母發(fā)酵培養(yǎng)物、淫羊蕾提取物和構(gòu)杞酶解粉按所述比例混合均勻即可
[0091] 實(shí)施例6 :飼料添加劑及其制備
[0092] 飼料添加劑的重量份數(shù)組成如下