蟲草蠶豆的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 米用冬蟲夏草（Ophiocordycepssinensis)和蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)， 以蠶豆為培養(yǎng)基，進(jìn)行雙菌混合固態(tài)發(fā)酵，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。利用菌株Cordyc印s militaris保藏號(hào)為CICC14013,菌株Ophiocordycepssinensis保藏號(hào)為CICC14088,通 過雙菌混合固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)得到營(yíng)養(yǎng)保健蠶豆。
【背景技術(shù)】
[0002] 蟲草屬（Cordyceps)隸屬于真菌界（Fungi)、子囊菌門（Ascomycota)、子囊菌 綱（Ascomycetes)、奠殼菌亞綱（Sordariomycetidae)、肉座菌目（Hypocreales)、麥角菌 科（Clavicipitaceae)。蟲草屬真菌大多數(shù)是藥用真菌，其中冬蟲夏草（Ophiocordyceps sinensis)普遍為人們所熟知，應(yīng)用歷史也最為久遠(yuǎn)，而蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)的 應(yīng)用研宄最為深入。
[0003] 冬蟲夏草據(jù)文獻(xiàn)考證最早記載于公元710年《月王藥診》，以藥記載始見于清代吳 儀洛《本草從新》（公元1757年），認(rèn)為其"甘平，保肺益腎，止血化痰，已勞咳，治膈癥皆良"。 冬蟲夏草為我國(guó)傳統(tǒng)名貴中藥，它與人參、鹿茸同被譽(yù)為中國(guó)中藥三寶。其具有補(bǔ)而不峻、 溫而不火、滋而不膩的藥效特點(diǎn)，更具有陰陽同補(bǔ)的獨(dú)特功效，使它成為滋補(bǔ)圣藥，被醫(yī)學(xué) 家譽(yù)為"百藥之王"。
[0004] 蛹蟲草是我國(guó)非常珍貴的中藥藥材之一，它的藥用價(jià)值在很早就有記載，李時(shí)珍 (1518)在《本草綱目》中指出，蟬花能主治"小兒天吊驚癇，夜啼，心悸"。蛹蟲草易于規(guī)模 化人工培養(yǎng)，其活性成分和藥理作用又與冬蟲夏草相似。
[0005] 當(dāng)前將冬蟲夏草或蛹蟲草應(yīng)用于糧食原料發(fā)酵已經(jīng)被廣泛報(bào)道。例如：專利 200610117997. 4采用蛹蟲草工業(yè)化培養(yǎng)廢棄物制成米粉產(chǎn)品；專利200710050135. 9將 蟲草粉碎后與炒熟的草青稞混合做成保健品；專利200710166278. 6采用小麥培養(yǎng)蛹蟲草 子實(shí)體；專利200810068734. 8采用紅曲協(xié)同發(fā)酵從而提高蛹蟲草子實(shí)體及蟲草菌素的產(chǎn) 量；專利200910218363. 1公開了一種通過茯苓與蛹蟲草固體共發(fā)酵提高主要藥用成分的 方法；專利201110055425. 9利用固態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)蛹蟲草發(fā)酵米；專利201110348239. 4以蓮 子為基質(zhì)，進(jìn)行蛹蟲草或冬草夏草的固態(tài)發(fā)酵；專利201110064459. 4公開了一種蛹蟲草稻 谷食品的制備方法；專利201310150267. 4和201310151228. 6分別以黃豆和花生為基質(zhì)， 接種蛹蟲草后進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，但過程中需添加昆蟲酶解液，導(dǎo)致成本和質(zhì)量難以控制；專利 201210064068. 7公開了一種以靈芝、桑黃等能夠高效產(chǎn)纖維素酶的菌子實(shí)體作為培養(yǎng)基主 料、糧食原料為輔料，再接種入蛹蟲草、冬蟲夏草、香菇、猴頭菌、金針姑等菌種進(jìn)行混合培 養(yǎng)，制成保健品或添加劑，但該工藝復(fù)雜，食藥用菌子實(shí)體價(jià)格昂貴，而且經(jīng)高壓滅菌后破 壞了食藥用菌子實(shí)體的有效成分，再經(jīng)其它菌種發(fā)酵后成分復(fù)雜而不可控，各種復(fù)雜的菌 種組合也將導(dǎo)致最終產(chǎn)品質(zhì)量的不穩(wěn)定。
[0006] 綜上所述，當(dāng)前蛹蟲草或冬蟲夏草的固態(tài)發(fā)酵過程均會(huì)添加無機(jī)鹽、昆蟲水解 液或其它藥用成分，以期提高蟲草菌體或蟲草素產(chǎn)量及藥效。不同的添加物會(huì)導(dǎo)致成分 復(fù)雜及導(dǎo)入外來的污染源，而且不容易建立質(zhì)量指標(biāo)體系。另外，蛹蟲草的固態(tài)發(fā)酵過 程經(jīng)常將蟲草素（Cordycepin)作為重要的質(zhì)量指標(biāo)。蟲草素，也被稱為3' -脫氧腺苷 (3-deoxyadenosine)，自發(fā)現(xiàn)以來，其藥理作用不斷被揭曉。經(jīng)研宄人員們研宄發(fā)現(xiàn)，蟲草 素具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗白細(xì)胞、抗真菌、抗病毒等多種藥理作用。有趣的是，蟲草素主 要存于蛹蟲草中，而在冬蟲夏草中的含量極微，但蟲草素的缺失并未影響冬蟲夏草的顯著 功效。因此，冬蟲夏草和蛹蟲草這兩種功效相似，但成分不完全相同的菌種具有互補(bǔ)性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 基于當(dāng)前的情況，本發(fā)明以蠶豆為培養(yǎng)基，在不添加任何其它添加物的情況下，僅 將蠶豆進(jìn)行膨化處理，滅菌后同時(shí)接種冬蟲夏草和蛹蟲草進(jìn)行混合培養(yǎng)，最終得到高蟲草 素含量和高生物活性的養(yǎng)生保健蠶豆。該方法實(shí)施簡(jiǎn)單，質(zhì)量可控，具有廣闊的應(yīng)用開發(fā)前 景。
[0008] 本發(fā)明所用的冬蟲夏草菌株Ophiocordycepssinensis保藏號(hào)為CICC14088,蛹 蟲草菌株Cordycepsmilitari保藏號(hào)為CICC14013。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
[0010] (1)部分蠶豆采用含有三個(gè)區(qū)段的雙螺桿擠壓膨化機(jī)進(jìn)行處理。第1區(qū)段為預(yù) 熱區(qū)，使用溫度為40-60°C，第2區(qū)為運(yùn)輸區(qū)，溫度為120-160°C，第3區(qū)為熟化區(qū)，溫度為 140-180 °C。膨化前蠶豆的含水量為10% -20%。
[0011] (2)部份蠶豆機(jī)械粉碎至粒徑為0.l-2mm。
[0012] (3)將擠壓膨化的蠶豆與機(jī)械粉碎的蠶豆以一定比例混合，擠壓膨化的蠶豆所占 比例為1-100%。混合后補(bǔ)充水分使含水量達(dá)20% -70%，121°C保溫20分鐘滅菌。冷卻 后，接入冬蟲夏草，接種量為1-10%。同時(shí)，接入蛹蟲草，接種量為1-10%。起始pH和發(fā)酵 過程pH均為自然，發(fā)酵溫度為15-28°C，環(huán)境相對(duì)濕度為60% -100%，發(fā)酵周期為5-25天。 最
[0013] 終蟲草素的含量最高可達(dá)8. 2%。
[0014] 本發(fā)明所用的冬蟲夏草和蛹蟲草菌種保存用斜面培養(yǎng)基配方均為：葡萄糖20g/ 1，馬鈴薯汁200g/l，瓊脂20g/l，pH自然。
[0015] 本發(fā)明的冬蟲夏草和蛹蟲草的種子培養(yǎng)基配方均為：葡萄糖20g/l，馬鈴薯汁 200g/l，pH自然。將斜面菌種接種到裝有種子培養(yǎng)基的三角瓶后，種子的培養(yǎng)時(shí)間為96小 時(shí)，種子的培養(yǎng)溫度為25°C。
[0016] 蟲草素含量采用液相色譜法測(cè)定。測(cè)定方法詳見：韋會(huì)平，葉小莉，張華英，李 學(xué)剛，鐘運(yùn)俊，用蛹蟲草固體發(fā)酵法高效生產(chǎn)蟲草素的研宄，中國(guó)中藥雜志，1998, 33 (19)， 2159-2162。
[0017] 本發(fā)明的有益效果：通過膨化，在短時(shí)間內(nèi)使蠶豆淀粉糊化和蠶豆蛋白質(zhì)變性。膨 化蠶豆與機(jī)械粉碎蠶豆混合后進(jìn)行發(fā)酵，一方面使得菌體可以快速利用膨化過程所產(chǎn)生的 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另一方面機(jī)械粉碎蠶豆相當(dāng)于是固態(tài)發(fā)酵載體使發(fā)酵基質(zhì)保持疏松有利菌體生 長(zhǎng)，當(dāng)菌體生長(zhǎng)旺盛時(shí)菌體產(chǎn)生大量胞外酶又可以進(jìn)一步分解利用機(jī)械粉碎蠶豆。該過程 無需添加其它物質(zhì)，保證發(fā)酵產(chǎn)品的質(zhì)量高度可控。冬蟲夏草和蛹蟲草兩種性質(zhì)類似菌種 的共發(fā)酵，一方面相似性質(zhì)菌種的發(fā)酵產(chǎn)物不會(huì)改變總體的藥理藥學(xué)性狀，另一方面可以 調(diào)和兩種菌種發(fā)酵產(chǎn)物各自的缺陷。該方法簡(jiǎn)單可行，易于實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，具有廣泛的應(yīng) 用前景。
【具體實(shí)施方式】
[0018] 實(shí)施例1
[0019] 采用濟(jì)南聚賢機(jī)械設(shè)備有限公司生產(chǎn)的DS56-III型雙螺桿擠壓膨化機(jī)處理蠶豆， 所用的蠶豆為市售，經(jīng)水分測(cè)定儀測(cè)定其含水率為12. 1%。設(shè)定進(jìn)料速度為120kg/h。表 1列出了三個(gè)區(qū)段的溫度組合及膨化度。由表1可以看出當(dāng)預(yù)熱區(qū)、運(yùn)輸區(qū)、熟化區(qū)的溫度 分別為60、160、190°C時(shí)蠶豆的膨化度最高，在此溫度條件下進(jìn)一步往蠶豆中補(bǔ)充少量無 菌水或者將蠶豆進(jìn)一步烘干，考察不同含水量時(shí)的膨化度。由表2可以看出，含水率為在 12-18%左右時(shí)膨化效果良好，因此可以直接用市售蠶豆進(jìn)行膨化。
[0020] 表1 :擠壓膨化機(jī)不同各區(qū)段不同溫度組合得到膨化蠶豆的膨化度
[0021]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 本發(fā)明采用蠶豆為基質(zhì)，進(jìn)行冬蟲夏草和蛹蟲草混合固態(tài)發(fā)酵。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的混合固態(tài)發(fā)酵，其特征在于部分蠶豆需進(jìn)行膨化處理。
【專利摘要】以蠶豆為培養(yǎng)基，采用冬蟲夏草和蛹蟲草進(jìn)行雙菌混合固態(tài)發(fā)酵，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過雙菌生物轉(zhuǎn)化得到的蠶豆，具有養(yǎng)生保健之功效，具有良好的應(yīng)用前景。
【IPC分類】A23L1-20, A23L1-29, A01G1-04
【公開號(hào)】CN104824574
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510126480
【發(fā)明人】蔡宇杰, 王小梅, 白玉, 管政兵, 廖祥儒, 張大兵
【申請(qǐng)人】江南大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請(qǐng)日】2015年3月20日