用于增加纖維素材料的消化率的方法和組合物的制作方法
【專利說明】用于增加纖維素材料的消化率的方法和組合物
[0001] 對生物材料保藏庫的參考
[0002] 本申請包含對生物材料保藏的參考，該保藏通過引用結(jié)合在此。 發(fā)明領(lǐng)域
[0003] 本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)動物飼料的方法，該方法包括對纖維素材料的處理，這可提 高纖維素材料的消化率。本發(fā)明還涉及能夠增加纖維素材料的消化率的組合物和/或其任 何組合，其采用一種或多種微生物和/或酶，并且涉及可被用在這類方法中的組合物。
[0004] 發(fā)明背景
[0005] 在動物飼料中可使用大量的谷物產(chǎn)品，主要是玉米。由于在如乙醇和丁醇等生物 燃料產(chǎn)品生產(chǎn)中使用農(nóng)作物，因此需要用于動物飼料的其它能量和蛋白來源。一種來源是 天然植物性材料。
[0006] 然而，存在著一項挑戰(zhàn)，因為天然植物性材料，尤其是農(nóng)作物秸桿材料、纖維性材 料和/或其它農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品（agricultural side streams)、以及傳統(tǒng)上用于青IC的材料，包 括在許多生物系統(tǒng)中不能消化的或可緩慢/部分消化的非常大量的纖維素材料，這些生物 系統(tǒng)包括并且尤其是動物，特別是反芻動物，如牛、山羊、綿羊、長頸鹿、野牛、駝鹿、麋鹿、牦 牛、水牛、鹿、駱駝、羊駝、駱駝、羚羊、叉角羚等等。相應(yīng)地，當(dāng)給反芻動物飼喂纖維素植物性 材料時，特別是飼喂農(nóng)作物秸桿材料、纖維性材料以及其它農(nóng)業(yè)副產(chǎn)品時，被處理過的材料 中的相當(dāng)大的一部分不能被消化或只能被部分消化。
[0007] 美國專利申請?zhí)?, 545, 418披露了通過用氧化鈣與氫氧化鈉一起使用或不與氫 氧化鈉一起使用對蔗渣進(jìn)行軟化并同時防止纖維素和半纖維素的大量分解而制備而成的 一種堿處理蔗渣、由堿處理蔗渣制備而成的蔗渣飼料和發(fā)酵蔗渣飼料、和它們的制品和應(yīng) 用，以及用于對堿處理蔗渣進(jìn)行發(fā)酵的細(xì)菌（即乳桿菌屬（Lactobacillus spp.))。
[0008] 中國專利申請?zhí)?01392268披露了用于獲得一種可轉(zhuǎn)化底物的木質(zhì)纖維素材料 的一種預(yù)處理方法，該可轉(zhuǎn)化底物在生物精煉、生物能源、生物醫(yī)藥、食品加工、輕工化工產(chǎn) 品、生物飼料和肥料的生產(chǎn)中是需要的，該方法采用了擔(dān)子菌屬（Basidiomycete sp.)菌株 或菌群，其可選擇性地破壞木質(zhì)纖維素的結(jié)構(gòu)來進(jìn)行對多種木質(zhì)纖維素材料在開放的條件 下進(jìn)行固體發(fā)酵的持續(xù)預(yù)處理。
[0009] 美國專利申請?zhí)?, 326, 037披露了用于對選自由豬、家禽和反芻動物組成的組的 動物進(jìn)行處理的一種方法，以增加動物生產(chǎn)性能，該方法包括隨其飼料給予動物可增加生 產(chǎn)性能的量的一種生物，該生物選自于由以下各項組成的組：布氏乳桿菌（Lactobacillus buchneri)，開菲爾乳桿菌（Lactobacillus kefir)，類開菲爾乳桿菌（Lactobacillus parakefir)、以及類布氏乳桿菌（Lactobacillus parabuchneri) 〇
[0010] 美國專利申請?zhí)?, 494, 675公開了用于生產(chǎn)動物飼料的一種方法，該方法包括添 加經(jīng)過處理而使之更易于被動物消化的纖維素材料，并且添加隨蒸餾器干燥向經(jīng)處理的纖 維素材料中加入干酒糟或具有可溶物的干酒糟。
[0011] WO 2012/027374披露了用以提高動物飼料的消化率的酶以及這些酶的組合物。
[0012] 對于可增加纖維素材料的消化率的方法仍然存在需求。
[0013] 發(fā)明概述
[0014] 在第一方面中，本發(fā)明涉及一種用于生產(chǎn)動物飼料的方法，該方法包括：
[0015] (a)對纖維素材料進(jìn)行預(yù)處理，以分離和/或釋放纖維素、半纖維素和/或木質(zhì) 素；
[0016] (b)用至少一種芽孢桿菌（Bacillus)接種經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料；
[0017] (C)對經(jīng)過接種的預(yù)處理的纖維素材料進(jìn)行孵育；并且
[0018] (d)向經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料加入蛋白源，以生產(chǎn)該動物飼料；
[0019] 其中步驟⑷是在步驟（a)、（b)或（C)之后發(fā)生的，或與步驟（b)或（C)同時發(fā) 生。
[0020] 在第二方面中，本發(fā)明涉及一種用于生產(chǎn)動物飼料的方法，該方法包括：
[0021] (a)對纖維素材料進(jìn)行預(yù)處理，用以分離和/或釋放纖維素、半纖維素和/或木質(zhì) 素；
[0022] (b)用至少一種微生物接種經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料；
[0023] (C)將經(jīng)過接種的預(yù)處理的纖維素材料在基本上厭氧的條件下進(jìn)行孵育；并且
[0024] (d)用至少一種酶對經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料進(jìn)行處理；并且
[0025] (e)向經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料加入蛋白源，以生產(chǎn)該動物飼料；
[0026] 其中步驟⑷是在步驟（a)、(b)、（c)或（e)之后發(fā)生的，或與步驟（b)、（c)或（e) 同時發(fā)生，并且步驟（e)是在步驟（a)、（b)、（c)或（d)之后發(fā)生的，或與步驟（b)、（c)或 (d)同時發(fā)生。
[0027] 在第三方面中，本發(fā)明涉及一種用于生產(chǎn)動物飼料的方法，該方法包括：
[0028] (a)對纖維素材料進(jìn)行預(yù)處理，用以分離和/或釋放纖維素、半纖維素和/或木質(zhì) 素；
[0029] (b)在pH7. 5-11下，例如在pH8-10下，用一種或多種酶對經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材 料進(jìn)行處理，這個或這些酶選自于由以下各項組成的組：乙酰木聚糖酯酶，a -L-阿拉伯呋 喃糖酶，β -葡糖苷酶，β -木糖苷酶，纖維二糖水解酶，纖維二糖脫氫酶，內(nèi)切半乳糖苷酶， 內(nèi)切葡聚糖酶，阿魏酸酯酶，以及木聚糖酶。
[0030] (C)向經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料加入蛋白源，以生產(chǎn)該動物飼料，其中步驟（C)是 在步驟（a)或（b)之后發(fā)生的，或與步驟（b)同時發(fā)生。
[0031] 本發(fā)明的方法可增加纖維素材料的可消化性。
[0032] 在第四方面中，本發(fā)明涉及包括由本發(fā)明的方法生產(chǎn)的纖維素材料的動物飼料添 加劑和組合物以及一種蛋白源。
[0033] 在一個最后實施例中，本發(fā)明涉及用于增加玉米秸桿的消化率的一種組合物，該 組合物包括至少一種微生物，該微生物能夠在基本上厭氧的條件下接種一種經(jīng)過化學(xué)處理 的玉米稻桿。
[0034] 定義
[0035] 乙酰木聚糖醋酶：術(shù)語"乙酰木聚糖醋酶（Acetylxylan Esterase) "的意思是一種 羧酸酯酶（EC3. I. 1. 72)，其催化乙酰基自聚合木聚糖、乙酰化木糖、乙?；咸烟?、α -萘 基乙酸酯、和對硝基苯基乙酸酯的水解。為了本發(fā)明的目的，用0. 5mM對硝基苯基乙酸酯作 為底物，在含有0.01%TWEENTM20(聚氧乙烯山梨醇酐月桂酸酯）的50mM乙酸鈉（pH5.0) 中，對乙酰木聚糖酯酶的活性進(jìn)行測定。一個單位的乙酰木聚糖酯酶被定義成是能夠在pH5 和25°C的條件下每分鐘釋放1微摩爾對硝基酚鹽陰離子的酶量。
[0036] a -L-阿拉伯呋喃糖酶：術(shù)語" a -L-阿拉伯呋喃糖酶 (a -L-Arabinofuranosidase) "的意思是一種a -L-阿拉伯呋喃糖苷阿拉伯呋喃糖水解酶 (EC3. 2. 1. 55)，其催化在a -L-阿拉伯糖苷中的末端非還原性a -L-阿拉伯呋喃糖苷殘基 的水解。該酶作用于a-L-阿拉伯呋喃糖苷、含有（1，3)_和/或（1，5)_鍵的a-L-阿拉伯 聚糖、阿拉伯木聚糖以及阿拉伯半乳聚糖。已知a-L-阿拉伯呋喃糖酶還已知為阿拉伯糖 苷酶、α-阿拉伯糖苷酶、a-L-阿拉伯糖苷酶、α-阿拉伯呋喃糖酶、多糖a-L-阿拉伯呋 喃糖酶、a-L-阿拉伯呋喃糖苷水解酶、L-阿拉伯糖苷酶、或a-L-阿拉伯聚糖酶。為了本 發(fā)明的目的，對a -L-阿拉伯呋喃糖酶活性進(jìn)行測定，該測定使用在每毫升的IOOmM乙酸鈉 (ρΗ5)溶液中的5mg中等粘度小麥阿拉伯糖基木聚糖（Megazyme International Ireland， Ltd.，Bray，Co.，威克洛郡，愛爾蘭），總體積是200微升，在40°C下持續(xù)30分鐘，隨后通過 ΑΜΙΝΕΧ?ΗΡΧ-87Η柱色譜法（美國伯樂公司（Bio-Rad Laboratories，Inc.)，赫拉克勒 斯，CA，USA)進(jìn)行阿拉伯糖分析。
[0037] α -葡萄糖醛酸酶：術(shù)語" α -葡萄糖醛酸酶（a -Glucuronidase) "是指可催 化a-D-葡萄糖苷酸水解成為D-葡萄糖醛酸酯和醇的一種a-D-葡萄糖苷酸葡萄糖醛 酸水解酶（EC3. 2. 1.139)。為了本發(fā)明的目的，可根據(jù)de Vries，1998,《細(xì)菌學(xué)雜志》 (J. Bacteriol. ) 180 :243-249的方法確定α -葡萄糖醛酸酶的活性。一個單位的α -葡萄 糖醛酸酶等于在pH5、40°C的條件下每分鐘能夠釋放1微摩爾葡萄糖醛酸或4-0-甲基葡萄 糖醛酸的酶量。
[0038] 淀粉酶：術(shù)語"淀粉酶（Amylase)"的意思是可水解低聚糖和多糖中的1，4-α-葡 糖苷鍵的一種酶，包括下述類別的酶：α -淀粉酶（EC3. 2. I. 1)、β -淀粉酶（EC3. 2. 1. 2)、 葡糖淀粉酶（EC3. 2. 1. 3)、α -葡糖苷酶（EC3. 2. 1. 20)、G4-淀粉酶（EC3. 2. 1. 60)、異淀粉 酶（EC3. 2. 1. 68)、G6-淀粉酶（EC3. 2. 1. 98)、麥芽糖 α -淀粉酶（EC3. 2. 1. 133)、環(huán)糊精葡 萄糖基轉(zhuǎn)移酶（EC2. 4. 1. 19)、以及淀粉酶III (EC2. 4. 1. 161)。
[0039] β-葡糖苷酶：術(shù)語"β-葡糖苷酶（β-Glucosidase)"是指可催化末端非還 原性β-D-葡萄糖殘基的水解伴隨釋放β-D-葡萄糖的β-D-葡萄糖苷葡糖水解酶 (E. C. 3. 2. 1. 21)。為了本發(fā)明的目的，使用對硝基苯基-β -D-吡喃葡糖苷作為底物對 β -葡糖苷酶活性進(jìn)行測定，其根據(jù)下述文獻(xiàn)中的程序=Venturi等人，2002, "嗜熱毛殼菌 coprophiIum 亞種（Chaetomium thermophiIum var.coprophiIum)的細(xì)胞外 β-D-葡糖苷 酶：產(chǎn)生、純化及一些生化特性"，《基礎(chǔ)微生物學(xué)雜志》（J. Basic Microbiol.)42 :55-66。 一個單位的β -葡糖苷酶被定義為：在含有0. 01 % TWEEN? 20的50mM檸檬酸鈉中，在 25°C、pH4. 8,從作為底物的ImM對硝基苯基-β -D-吡喃葡糖苷每分鐘生成I. 0微摩爾對硝 基酚鹽陰離子。
[0040] β -木糖苷酶：術(shù)語" β -木糖苷酶（β -Xylosidase) "是指可催化短Ml - 4)-低 聚木糖的外切水解而將連續(xù)的D-木糖殘基從非還原端去除的一種β -D-木糖苷木糖水解 酶（E. C. 3. 2. 1. 37)。為了本發(fā)明的目的，一個單位的β -木糖苷酶被定義為：在含有0. 01% T\VEEN?20的IOOmM檸檬酸鈉中，在40°C、ρΗ5,從作為底物的ImM對硝基苯基-β -D-木 糖苷每分鐘生成1.0 微摩爾對硝基酚鹽陰離子。
[0041] 纖維二糖水解酶：術(shù)語"纖維二糖水解酶（CelIobiohydrolase) "是指一種 1，4-β-D-葡聚糖纖維二糖水解酶（E.C. 3. 2. 1.91以及E.C. 3. 2. 1. 176)，可催化纖維素、 纖維低聚糖或者任何含有β -1，4-連接葡萄糖的聚合物中的1，4-β -D-葡糖苷鍵的水 解，從而從鏈的還原端或非還原端釋放纖維二糖（Teeri，1997，"結(jié)晶纖維素的降解：纖維 二糖水解酶的新觀點"，《生物技術(shù)趨勢》（Trends in Biotechnology) 15 :160-167 ;Teeri 等人，1998，"里氏木霉（Trichoderma reesei)纖維二糖水解酶：為何如此高效作用于 結(jié)晶纖維素？"，《生物化學(xué)協(xié)會學(xué)報》（Biochem. Soc. Trans.) 26 :173-178)。按照下述文 獻(xiàn)中描述的程序?qū)w維二糖水解酶的活性進(jìn)行測定：Lever等人，1972,《分析生物化學(xué)》 (Anal. Biochem. )47 :273-279 ;van Tilbeurgh等人，1982,《歐洲生化學(xué)會聯(lián)合會快報》 (FEBS Lett. )，149 :152-156 ;van Tilbeurgh 和 Claeyssens，1985,《歐洲生化學(xué)會聯(lián)合 會快報》（FEBS Lett. )，187 :283-288 ;以及To_e等人，1988,《歐洲生物化學(xué)期刊》伍111·· J. Biochem.) 170 :575-581。在本專利中，采用Tomme等人的方法對纖維二糖水解酶的活性 進(jìn)行測定。
[0042] 纖維素分解酶或纖維素酶：術(shù)語"纖維素分解酶（Cellulolytic Enzyme) "或"纖 維素酶（Cellulase)"是指可對纖維素材料進(jìn)行水解的一種或多種（例如數(shù)種）酶。這類 酶包括內(nèi)切葡聚糖酶、纖維二糖水解酶、β -葡糖苷酶、或它們的組合。測定纖維素分解活性 的兩種基本方法包括：（1)測定總纖維素分解活性，以及（2)測定個體纖維素分解活性（內(nèi) 切葡聚糖酶、纖維二糖水解酶和β-葡糖苷酶），如在Zhang等人，"纖維素酶改進(jìn)的前景：篩 選與選擇策略"，2006,《生物技術(shù)進(jìn)展》（Biotechnology Advances) 24 :452-481中所述的。 通常使用不溶性底物對總纖維素分解活性進(jìn)行測定，包括沃特曼一號（WhatmanN2 1)濾紙、 微晶纖維素、細(xì)菌纖維素、藻類纖維素、棉花、經(jīng)過預(yù)處理的木質(zhì)纖維素等。最常用的總纖維 素分解活性測定法是使用沃特曼一號濾紙作為底物的濾紙測定法。該測定法是由國際純粹 與應(yīng)用化學(xué)聯(lián)合會（IUPAC)建立的（Ghose，1987，"纖維素酶活性的測定"，《純粹與應(yīng)用化 學(xué)》（Pure Appl. Chem.) 59 :257-68) 〇
[0043] 為了本發(fā)明的目的，通過在下述條件下由纖維素分解酶測定的纖維素材料水解 的升高來確定纖維素分解酶的活性：在PCS中（或其他經(jīng)過預(yù)處理的纖維素材料）l-50mg 纖維素分解酶蛋白/g纖維素，，在合適的溫度下，例如50°C、55°C或60°C，持續(xù)3-7天，與 不添加纖維素分解酶蛋白的對照組的水解相比較。典型的條件是：1ml反應(yīng)，洗滌或未洗 滌的PCS，5 %不溶性固形物，50mM乙酸鈉，pH5，ImM MnSO4，50 °C、55 °C或60 °C，72小時，由 ΑΜΙΝΕΧ?ΗΡΧ-87Η 柱（美國伯樂公司（Bio-Rad Laboratories，Inc.)，赫拉克勒斯，CA， USA)進(jìn)行糖分析。
[0044] 纖維素材料：術(shù)語"纖維素材料（Cellulosic Material) "是指任何含有纖維素的 材料。在生物質(zhì)的初生細(xì)胞壁中的主要的多糖是纖維素，第二最豐富的是半纖維素，第三是 果膠。細(xì)胞停止生長之后生成的次生細(xì)胞壁還含有多糖，并通過聚合木質(zhì)素與半纖維素共 價交聯(lián)而被加強。纖維素是脫水纖維二糖的均聚物，并且由此是一種線性e-(i-4)-D-葡 聚糖，而半纖維素包括多種化合物，如木聚糖、木葡聚糖、阿拉伯木聚糖、以及甘露聚糖，以 具有一系列取代基的復(fù)雜支鏈結(jié)構(gòu)而存在。雖然纖維素一般是多形性的，但是植物組織中 發(fā)現(xiàn)的纖維素主要是一種平行葡聚糖鏈的不溶性晶體基質(zhì)。半纖維素通常與纖維素以及其 它半纖維素以氫鍵連接，這有助于穩(wěn)定細(xì)胞壁基質(zhì)。
[0045] 內(nèi)切葡聚糖酶：術(shù)語"內(nèi)切葡聚糖酶（Endoglucanase) "是指內(nèi)切-1，4-(1，3 ; l，4)-f3-D-葡聚糖4-葡聚糖水解酶（E.C.3.2. 1.4)，其催化纖維素、纖維素衍生物（如羧 甲基纖維素和羥乙基纖維素）、地衣淀粉中的1，4-β-D-糖苷鍵，混合的β-1，3-葡聚糖 如谷物β -D-葡聚糖或木葡聚糖、以及其它含有纖維素組分的植物材料中的β -1，4-鍵的 內(nèi)切水解?？赏ㄟ^測定底物粘度的下降或通過還原糖測定法測定的游離端的增加來確定 內(nèi)切葡聚糖酶的活性（Zhang等人，2006,《生物技術(shù)進(jìn)展》（Biotechnology Advances) 24: 452-481)。為了本發(fā)明的目的，使用羧甲基纖維素（CMC)作為底物，根據(jù)在Ghose，1987,《純 粹與應(yīng)用化學(xué)》（Pure and Appl. Chem.) 59 :257-268中所述的過程，在pH5、40°C下，確定內(nèi) 切葡聚糖酶的活性。
[0046] 家族61的糖苷水解酶：術(shù)語"家族61的糖苷水解酶（Family61GlyC〇Side Hydrolase) "或"家族GH61"或"GH61"是指屬于根據(jù)Henrissat，1991，"基于氨基酸序列的 相似之的糖基水解酶的分類"，《生物化學(xué)期刊》(Biochem. J.) 280 :309-316,以及Henrissat 和8&化〇(*，1996，"基于序列的糖基水解酶的分類的更新"，《生物化學(xué)期刊》出1〇(* 6111. J.) 316 :695-696的糖苷水解酶家族61的一種多肽?；谠谝粋€家族成員中的極弱的內(nèi)切 1，4-β -D-葡聚糖酶的活性的測定，這個家族中的酶最初被分類為是一種糖苷水解酶家族。 這些酶的結(jié)構(gòu)和作用模式是不標(biāo)準(zhǔn)的，并且它們不能被視為真正的糖苷酶。然而，基于它們 在與纖維素酶或纖維素酶的混合物一起使用時可提高木素纖維素的分解，它們被分在CAZy 分類中。
[0047] 阿魏酰醋酶：術(shù)語"阿魏酰醋酶（Feruloyl Esterase) "是指一種4-羥基-3-甲 氧基肉桂?；?糖水解酶（EC3. I. 1. 73)，可催化4-羥基-3-甲氧基肉桂?；ò⑽乎＃┗?團(tuán)從酯化糖（通常是在天然生物質(zhì)底物中的阿拉伯糖）上的水解，以產(chǎn)生阿魏酸酯（4-羥 基-3-甲氧基肉桂酸酯）。阿魏酰酯酶也被稱為阿魏酸酯酶、羥基肉桂?；ッ浮AE-III、 肉桂酰酯水解酶、FAEA、cinnAE、FAE-I、或FAE-II。為了本發(fā)明的目的，使用0. 5mM對硝基 苯阿魏酸醋作為底物在50mM乙酸鈉中在pH5. 0對阿魏酰醋酶的活性進(jìn)行測定。一個單位 的阿魏酰酯酶相當(dāng)于是能夠在PH5和25°C每分鐘釋放1微摩爾對硝基酚鹽陰離子的酶量。
[0048] 半纖維素分解酶或半纖維素酶：術(shù)語"半纖維素分解酶（Hemicellulolytic Enzyme) "或"半纖維素酶（Hemicellulase) "是指可對半纖維素材料進(jìn)行水解的一種或多 種（例如數(shù)種）酶。參見例如Shallom和Shoham，2003，"微生物半纖維素酶"，《醫(yī)學(xué)病毒 學(xué)評論》（Current Opinion In Microbiology) 6 (3) :219-228)中所述的。半纖維素酶是 在植物生物質(zhì)的降解中的關(guān)鍵組分。半纖維素酶的實例包括但不限于乙酰甘露聚糖酯酶、 乙酰木聚糖酯酶、阿拉伯聚糖酶、阿拉伯呋喃糖酶、香豆酸酯酶、阿魏酰酯酶、半乳糖苷酶、 葡萄糖醛酸酶、葡糖醛酸酯酶、甘露聚糖酶、甘露糖苷酶、木聚糖酶和木糖苷酶。這些酶的底 物一一半纖維素一一是支鏈和直鏈多糖的異質(zhì)性組，其可通過氫鍵與植物細(xì)胞壁中的纖維 素微纖維相結(jié)合，交聯(lián)成堅固的網(wǎng)絡(luò)。半纖維素還可與木質(zhì)素共價連接，與纖維素一起形成 一種高度復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。半纖維素的可變結(jié)構(gòu)和組織需要許多酶的協(xié)同作用來使其完全降 解。半纖維素酶的催化模式是水解糖苷鍵的糖苷水解酶（GHs)、或水解醋酸酯或阿魏酸側(cè) 基團(tuán)的酯鍵的碳水化合物酯酶（CEs)。這些催化模式可基于其主要序列的同源性而被分配 到GH和CE家族中。具有總體上相似的折疊的某些家族可被分成族，按字母順序進(jìn)行標(biāo)記 (例如GH-A)。在碳水化合物活性酶（CAZy)數(shù)據(jù)庫中可得到這些酶以及碳水化合物活性酶 的最翔實和更新的分類。可根據(jù)Ghose和Bisaria，1987,《純粹與應(yīng)用化學(xué)》（PureMppI. Chem.)59 :1739-1752中所述的方法在合適的溫度（例如50°C、55°C或60°C )和pH(例如 5. 0或5. 5)下對半纖維素分解酶的活性進(jìn)行測定。
[0049] 木質(zhì)素分解酶：術(shù)語"木質(zhì)素分解酶（ligninolytic enzyme) "是指可水解木質(zhì)素 聚合物的結(jié)構(gòu)的一種酶?？煞纸饽举|(zhì)素的酶包括木質(zhì)素過氧化物酶、錳過氧化物酶、漆酶 和阿魏酰酯酶，以及在本領(lǐng)域中描述的已知可解聚或以其他方式分解木質(zhì)素聚合物的其它 酶。還包括能夠水解在半纖維素糖類（主要是阿拉伯糖）與木質(zhì)素之間形成的鍵的酶。
[0050] 脂酶：術(shù)語"脂酶（Lipase) "是指可水解脂質(zhì)、脂肪酸、以及包括磷酸甘油脂、脂蛋 白、二?；视偷仍趦?nèi)的?；视王サ拿?。在植物中，脂質(zhì)被用作結(jié)構(gòu)組分來限制失水和病 原體感染。這些脂質(zhì)包括由脂肪酸衍生的蠟，以及角質(zhì)和軟木脂。脂酶包括下述類別的酶： 三酰甘油脂肪酶（EC3. I. 1. 3)、磷脂酶A2 (EC3. I. 1. 4)、溶血磷脂酶（EC3. I. 1. 5)、?；视?脂肪酶（EC3. I. 1. 23)、半乳糖脂酶（EC3. I. 1. 26)、磷脂酶Al (EC3. I. 1. 32)、二氫香豆素脂 肪酶（EC3. I. 1. 35)、2_乙酰-1-烷基甘油磷酸膽堿酯酶（EC3. I. 1. 47)、磷脂酰肌醇脫酰酶 (EC3. I. 1. 52)、角質(zhì)酶（EC3. I. 1. 74)、磷脂酶 C(EC3. 1. 4. 3)、磷脂酶D(EC3. 1. 4. 4)、1_磷脂 酰肌醇磷酸二酯酶（EC3. 1. 4. 10)、以及烷基甘油磷酸乙醇胺磷酸二酯酶（EC3. 1. 4. 39)。
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