專(zhuān)利名稱(chēng)：新型靈芝營(yíng)養(yǎng)液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種廣泛使用的增強(qiáng)體質(zhì)的新型靈芝培養(yǎng)液及其制備方法。
靈芝(Ganoderma Lucidum)歷來(lái)視為中華醫(yī)藥寶庫(kù)的奇葩異草。千百年來(lái)其藥用價(jià)值已得到廣泛地認(rèn)同，它可以提高人體的免疫機(jī)能，是WHO確認(rèn)的理想免疫增強(qiáng)劑。靈芝多糖的抗衰老作用機(jī)理，已被證實(shí)。因此，將其以合理的制劑形式加以利用，更好地為增強(qiáng)人們的體質(zhì)服務(wù)，是當(dāng)前的主要課題。
迄今，靈芝制劑多以子實(shí)體或固體培養(yǎng)菌絲為原料，生產(chǎn)周期長(zhǎng)，易受環(huán)境污染，當(dāng)然對(duì)其品質(zhì)產(chǎn)生影響。液體培養(yǎng)技術(shù)在此領(lǐng)域的應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)了靈芝的大規(guī)模工業(yè)化培養(yǎng)。但遣憾的是，現(xiàn)行的液體培養(yǎng)技術(shù)中，培養(yǎng)基全部入培養(yǎng)罐，培養(yǎng)基含有不溶性固形物，在液體培養(yǎng)過(guò)程中釋放出酵素，致使培養(yǎng)液有異味，而且引起菌絲、不溶性固形物和培養(yǎng)液的分離困難。
本發(fā)明正是基于此而提出的，為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明在液體培養(yǎng)工藝中增設(shè)配料罐，培養(yǎng)基經(jīng)配料罐處理后，將不溶性的固形物分去，將濾液輸入培養(yǎng)罐，接種菌種后進(jìn)行液體培養(yǎng)。經(jīng)過(guò)本發(fā)明人的多次反復(fù)研究，確定了培養(yǎng)基濾液配伍量與靈芝菌種接種量的最佳比例。經(jīng)本發(fā)明方法制得的靈芝培養(yǎng)液含有所有菌絲中的有效成分，以及豐富的維生素，多糖、氨基酸和微量元素。產(chǎn)品口感純正、酸甜微苦，無(wú)異味。
本發(fā)明的靈芝培養(yǎng)液的培養(yǎng)基的配置如下(W/V)麥麩粉3—8％，豆餅粉2—5％，玉米粉2-5％，蔗糖4—8％，磷酸二氫鉀0.03-0.1％，硫酸鎂0.01-0.％，硫酸鋅5-10PPM，硫酸亞鐵10-20PPM，硫酸錳10-20PPM，余為水。
本發(fā)明使用的菌種為靈芝Ganoderma Lucidum(Leysserex Fries)Karsten保存菌種。
本發(fā)明的靈芝營(yíng)養(yǎng)液是由上述靈芝菌種在所述的培養(yǎng)基濾液中培養(yǎng)而獲得的。具體地，本發(fā)明的靈芝培養(yǎng)液的制備方法如下(1)用保存菌種[靈芝Ganoderma Lucidum(Leysserex Fries)Karsten]在PDA斜面培養(yǎng)基上接種，在25—30℃下培養(yǎng)10—15天，得到斜面菌種；(2)以麥麩粉3—8％(W/V，下同)，豆餅粉2—5％，玉米粉2—5％，蔗糖4—8％，磷酸二氫鉀0.03-0.1％，硫酸鎂0.01-0.1％，硫酸鋅5—10PPM，硫酸亞鐵10—20PPM，硫酸錳10—20PPM的量進(jìn)行配制(配料罐)，升溫到90℃，保持2小時(shí)，濾去不溶物，得到不含不溶物固形物的液養(yǎng)基濾液。
(3)將(1)制得的斜面菌種接種到(2)所得的培養(yǎng)基濾液內(nèi)培養(yǎng)，溫度為25—30℃，時(shí)間為2—3天，液體培養(yǎng)菌種采用1—3級(jí)搖瓶和1—2級(jí)種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)。搖瓶培養(yǎng)基裝量40％，接種量10—20％，旋轉(zhuǎn)式搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速150—200RPM，然后于培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)罐中培養(yǎng)基裝量50—70％，接種量15—30％，溫度25—28℃，時(shí)間為2—3天，通氣量1∶0.8-1.5，攪拌速度130—2DDRPM，保持罐壓0.5KG/平方厘米。
(4)培養(yǎng)終止后，培養(yǎng)液升溫至60℃，保持1—2小時(shí)，菌絲自溶，分離去掉不溶固形物，在≤6D℃下，真空減壓蒸發(fā)濃縮20倍。
以下用具體實(shí)施例說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)施例1用2000毫升三角瓶，按下列組成配制培養(yǎng)基麥麩粉30克，豆餅粉20克，玉米粉20克，蔗糖30克，磷酸二氫鉀0.3克，硫酸鎂0.1克，硫酸亞鐵5毫克，硫酸鋅3毫克，硫酸錳2毫克，加水至1000毫升，將三角瓶放在加熱器上，升溫90℃，保持1小時(shí)，冷卻至40℃，過(guò)濾，將不溶性固形物分離，將濾液PH調(diào)至5.5，分裝在500毫升三角瓶中，每瓶100毫升。按常規(guī)高壓滅菌后，每瓶接種靈芝Gano derma Lucidum(Leysser ex Fries)karsten斜面菌種10立方厘米，置于旋轉(zhuǎn)搖瓶機(jī)上，轉(zhuǎn)速150RPM，溫度25—28℃，培養(yǎng)5天，得到一級(jí)搖瓶菌種；用2000毫升三角瓶，每瓶裝上述同樣培養(yǎng)基1000毫升，滅菌后接種一級(jí)搖瓶菌種150毫升，在同樣條件下培養(yǎng)4天，得到二級(jí)搖瓶菌種；用5000毫升三用瓶，每瓶裝上述同樣培養(yǎng)基2000毫升，滅菌后接種二級(jí)搖瓶菌種500毫升，在同樣條件下培養(yǎng)3天，得到三級(jí)搖瓶菌種。
用100立升不銹鋼配料罐，按下列組成配制培養(yǎng)基麥麩粉9公斤，豆餅粉6公斤，玉米粉6公斤，蔗糖9公斤，磷酸二氫鉀90克，硫酸鎂30克，硫酸鋅2.4克，硫酸亞鐵3克，硫酸錳2克。加水至70立升，升溫90℃，保持2小時(shí)，降溫至40℃，將物料輸入離心機(jī)，將不溶性固形物分離，將濾液輸入400立升不銹鋼攪拌式種子罐，加水至220立升，PH調(diào)至5.5，以1公斤/平方厘米壓力蒸汽滅菌30分鐘，待罐內(nèi)溫度降至30℃以下，接種三級(jí)搖瓶菌種60立升，保持罐壓0.5公斤/平方厘米，溫度25-28℃攪拌速度140RPM，通氣量1∶0.8，培養(yǎng)60小時(shí)，得到一級(jí)種子液。
用400立升不銹鋼配料罐，按下列組成配制培養(yǎng)基麥麩粉18公斤，豆餅粉12公斤，玉米粉12公斤，蔗糖18公斤，磷酸二氫鉀180克，硫酸鎂60克，硫酸鋅5克，硫酸亞鐵6克，硫酸錳4克。加水至280立升，升溫90℃，保持2小時(shí)，保持2小時(shí)，降溫至40℃，將物料輸入離心機(jī)，將不溶性固形物分離，將濾液輸入1000立升不銹鋼攪拌式種子罐，加水至450立升，PH調(diào)至5.5，以1公斤/平方厘米壓力蒸汽滅菌30分鐘，待罐內(nèi)溫度降至90℃以下，接種一級(jí)種子液260立升，保持罐壓0.5公斤/平方厘米，溫度25-28℃，攪拌速度14DRPM，通氣量1∶0.8，培養(yǎng)55小時(shí)，得到二級(jí)種子液。
用2000立升不銹鋼配料罐，按下列組成配料麥麩粉49.5公斤，豆餅粉33公斤，玉米粉33公斤，蔗糖100公斤，磷酸二氫鉀495克，硫酸鎂165克，硫酸鋅13.2克，硫酸亞鐵16.5克，硫酸錳15克。加水至1400立升，升溫90℃，保持2小時(shí)，降溫至40℃，將物料輸入離心機(jī)，將不溶性固形物分離，將濾液輸入5000立升不銹鋼攪拌式培養(yǎng)罐，加水至2800立升，PH調(diào)至5.5，以1公斤/平方厘米壓力蒸汽滅菌40分鐘，待罐內(nèi)溫度降至30℃以下，接種二級(jí)種子液700立升，保持罐壓0.5公斤/平方厘米，溫度25—28℃，通氣量1∶1，攪拌速度130RPM，培養(yǎng)50小時(shí)，終止培養(yǎng)，罐內(nèi)升溫至60℃，保持2小時(shí)，菌絲自溶，降溫至40℃，將培養(yǎng)液輸入離心機(jī)，將菌絲分離，將純凈培養(yǎng)液輸入真空泵經(jīng)蒸發(fā)器減壓濃縮20倍，得到棕色果凍狀濃縮液。
實(shí)施例1得到的營(yíng)養(yǎng)液經(jīng)北京市理化分析測(cè)試中心以高效液相色譜法、離子色譜法、1CP—AES全測(cè)，其內(nèi)含維生素(mg/100g)Vc 0.83，Vb1 0.99，Vb6 1.05，Va 0.61，Ve 2.52，Vd3 0.642，Vpp 1.31，總糖(g/100g)41.95，其中多糖4.49％，二糖11.361，葡萄糖18.821，果糖7.278。水解氨基酸17種，總含量(mg/100g)0.6806，元素23種，離子4種。
靈芝營(yíng)養(yǎng)液中重要成分Ve、Va、Vd3含量高，多糖含量達(dá)4.49％，微量元素鉻、鍺、硒含量高。有害元素鉛、銅含量低于國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，砷、汞未檢出。
靈芝營(yíng)養(yǎng)液經(jīng)北京市衛(wèi)生防疫站衛(wèi)生檢驗(yàn)合格。
權(quán)利要求
1.新型靈芝營(yíng)養(yǎng)液，其特征是它是以保存菌種[靈芝Ganoderma Lucidum(Leysser ex Fries)Karsten]在下述培養(yǎng)基濾液中培養(yǎng)獲得的。培養(yǎng)基(W/V)麥麩粉3-8％，豆餅粉2-5％，玉米粉2-5％，蔗糖4-8％，磷酸二氫鉀0.03-0.1％，硫酸鎂0.01-0.1％，硫酸鋅5-10PPM，硫酸亞鐵10-20PPM，硫酸錳10-20PPM，余為水
2.權(quán)利要求1靈芝營(yíng)養(yǎng)液的制備方法，其特征是(1)用保存菌種[靈芝Ganoderma Lucidum(Leysser exFries)Karsten]在PDA斜面培養(yǎng)基上接種，在25-30℃下培養(yǎng)10-15天，得到斜面菌種；(2)以麥麩粉3-8％(W/V，下同)，豆餅粉2-5％，玉米粉2-5％，蔗糖4-8％，磷酸二氫鉀0.03-0.1％，硫酸鎂0.01-0.1％，硫酸鋅5-10PPM，硫酸亞鐵10-20PPM，硫酸錳10-20PPM的量進(jìn)行配制，升溫到90℃，保持2小時(shí)，濾去不溶物，得到培養(yǎng)基濾液。(3)將(1)制得的斜面菌種接種在(2)所得的培養(yǎng)基濾液內(nèi)培養(yǎng)，溫度25-30℃，時(shí)間為2-3天，液體培養(yǎng)菌種采用1-3級(jí)搖瓶和1-2級(jí)種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)。搖瓶培養(yǎng)基裝量40％，接種量10-20％，旋轉(zhuǎn)式搖瓶機(jī)轉(zhuǎn)速150-200RPM，然后于培養(yǎng)罐中培養(yǎng)，培養(yǎng)罐中培養(yǎng)基裝量50-70％，接種量15-30％，溫度25-28℃，時(shí)間為2-3天，罐壓0.5KG/平方厘米。(4)培養(yǎng)終止后，培養(yǎng)液升溫至60℃，保持1-2小時(shí)，菌絲自溶，分離去掉不溶固狀物，在≤60℃下，真空減壓蒸發(fā)濃縮20倍。
全文摘要
本發(fā)明提供一種新型靈芝營(yíng)養(yǎng)液及其制備方法，其特征是將菌種在培養(yǎng)基濾液中進(jìn)行培養(yǎng)。本發(fā)明的營(yíng)養(yǎng)液清亮呈棕色果凍狀，口感純正，靈芝多糖，維生素、氨基酸和微量元素的含量豐富，是一種優(yōu)良的增強(qiáng)體質(zhì)營(yíng)養(yǎng)液。
文檔編號(hào)A23L1/29GK1118005SQ9410502
公開(kāi)日1996年3月6日 申請(qǐng)日期1994年5月11日 優(yōu)先權(quán)日1994年5月11日
發(fā)明者蘇印, 馮云峰, 刀力 申請(qǐng)人:北京天河生物研究所