本發(fā)明涉及一種組合物，該組合物中包含葛花混合提取物，用于預(yù)防、改善或治療女性更年期癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥。
背景技術(shù)：
：：女性的絕經(jīng)(menopause)是由遺傳決定的在出生約50年后，卵巢功能衰竭導(dǎo)致月經(jīng)中斷的現(xiàn)象。絕經(jīng)表示喪失生殖能力，其是生理上的變化，而不是病態(tài)現(xiàn)象。目前，韓國(guó)女性的平均壽命是81.2歲(2011年：統(tǒng)計(jì)局)，假設(shè)韓國(guó)婦產(chǎn)科學(xué)會(huì)規(guī)定的韓國(guó)女性的平均絕經(jīng)年齡是50歲，則表示女性一生中約1/3以上的時(shí)間是活在女性激素枯竭狀態(tài)下的(藥學(xué)信息院，金成哲)。絕經(jīng)引起女性激素分泌失調(diào)及減少，導(dǎo)致血管系統(tǒng)、肌肉骨骼、泌尿生殖系統(tǒng)以及腦神經(jīng)等整個(gè)身體發(fā)生變化。同時(shí)出現(xiàn)各種疾病以及癥狀，即：血管運(yùn)動(dòng)性癥狀和心理上癥狀，如臉潮紅、夜間出汗、失眠、疲勞、抑郁癥、焦慮、集中障礙、記憶力障礙；泌尿生殖系統(tǒng)萎縮引起的性交疼痛、尿頻；膠原質(zhì)減少引起的皮膚失去彈性、乳房下垂；還有心血管及肌肉骨骼癥狀；癡呆等(非專(zhuān)利文獻(xiàn)1)。經(jīng)歷了自然絕經(jīng)的女性中，有89％經(jīng)歷了絕經(jīng)癥狀中至少一種癥狀，且據(jù)報(bào)道更年期癥狀也比較廣泛。更年期癥狀雖每個(gè)人都有差異，但是，據(jù)報(bào)道經(jīng)歷的更年期癥狀越多、程度越重，且時(shí)間越長(zhǎng)，女性的生活質(zhì)量就越低(非專(zhuān)利文獻(xiàn)2)，不僅如此，更年期癥狀與身體的老化一起很可能引發(fā)慢性疾病。治療更年期癥狀有激素療法、藥物療法、運(yùn)動(dòng)療法，或飲食療法等。其中，醫(yī)學(xué)上使用最多的女性激素治療，可增加患乳房癌等的風(fēng)險(xiǎn)，長(zhǎng)時(shí)間使用時(shí)，可增加子宮癌、血栓血管疾病、膽囊疾病、高血壓的患病幾率。因此，為替代雌激素療法和其他藥物療法等，近期對(duì)被報(bào)導(dǎo)與雌激素具有類(lèi)似功能的植物雌激素(phytoestrogen)的研究在逐漸增多(非專(zhuān)利文獻(xiàn)3)。有關(guān)改善更年期癥狀的前期研究是研究含有主成分為當(dāng)歸、川芎、白芍、白術(shù)、白茯苓、紅參及大豆提取物，具有可改善更年期癥狀的功能性食品(專(zhuān)利文獻(xiàn)1)；以及，利用含有主成分為黃芪、決明子、葛、大豆提取物的食品對(duì)女性更年期癥狀有改善效果的食品(專(zhuān)利文獻(xiàn)2)。因此，本發(fā)明人不斷研究、開(kāi)發(fā)，可全面緩解更年期癥狀和有效改善因更年期導(dǎo)致的骨質(zhì)疏松癥的天然材料，最終完成本發(fā)明。技術(shù)文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)專(zhuān)利文獻(xiàn)1：韓國(guó)公開(kāi)專(zhuān)利10-2003-0048109專(zhuān)利文獻(xiàn)2：韓國(guó)公開(kāi)專(zhuān)利10-2006-0031203非專(zhuān)利文獻(xiàn)非專(zhuān)利文獻(xiàn)1：jkoreansocmenopause，2012，18:94-99非專(zhuān)利文獻(xiàn)2：womenhealthnoursing，hyunmoonsa，1997非專(zhuān)利文獻(xiàn)3：jeastasiansocdietarylife，2006，16(5)，533～541技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：發(fā)明所要解決的問(wèn)題本發(fā)明的目的在于，提供一種組合物，能夠有效預(yù)防、改善或治療女性更年期的全面癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥。解決問(wèn)題的技術(shù)方案本發(fā)明提供預(yù)防、治療或改善用組合物，其中包括：葛花提取物；以及枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物。上述組合物可以是食品組合物、藥物組合物或化妝材料組合物。另外，本發(fā)明提供包含上述提取物的保健功能食品。另外，本發(fā)明提供包含上述組合物的化妝品、醫(yī)藥品和/或醫(yī)藥輔品。發(fā)明效果本發(fā)明的組合物具有迅速預(yù)防或改善女性更年期癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥的效果，因此，可有效利用到以往預(yù)防或改善更年期癥狀的激素取代療法(hormonereplacementtherapy；hrt)。另外，本發(fā)明的組合物與以往的女性更年期癥狀和骨質(zhì)疏松癥治療劑不同，其不僅沒(méi)有細(xì)胞毒性，副作用小且安全，可作為食品食用，相比以往的女性更年期癥狀和骨質(zhì)疏松癥的治療劑，可更有效地使用。附圖說(shuō)明圖1是表示本發(fā)明一實(shí)施例的提取物對(duì)雌激素受體陽(yáng)性人乳房癌細(xì)胞株細(xì)胞活性的柱狀圖。圖2是表示本發(fā)明一實(shí)施例的本發(fā)明的混合提取物對(duì)造骨細(xì)胞增殖的促進(jìn)效果的柱狀圖。圖3是表示本發(fā)明一實(shí)施例的混合提取物對(duì)造骨細(xì)胞分化的促進(jìn)效果的柱狀圖。圖4是表示本發(fā)明一實(shí)施例的混合提取物對(duì)破骨細(xì)胞增殖的抑制效果的柱狀圖。具體實(shí)施方式本發(fā)明涉及一種組合物，用于預(yù)防、改善或治療更年期癥狀，其中包括：葛花提取物；以及枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物。另外，本發(fā)明涉及一種組合物，用于預(yù)防、改善或治療骨質(zhì)疏松癥，其中包括：葛花提取物；以及枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物。以下，將更加詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的組合物。在本發(fā)明的一實(shí)施例，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)到利用葛花提取物與枳殼或陳皮提取物混合的提取物處理乳房癌細(xì)胞株(mcf-7cellline)后，增強(qiáng)了細(xì)胞活性，運(yùn)用庫(kù)珀曼指數(shù)服用本發(fā)明的提取物，其結(jié)果改善了更年期癥狀(實(shí)驗(yàn)例1以及5)。另外，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)到利用本發(fā)明的混合提取物處理造骨細(xì)胞類(lèi)似細(xì)胞(mg-63cell)時(shí)，促進(jìn)了造骨細(xì)胞的增殖，相反地，抑制了破骨細(xì)胞的增殖(實(shí)驗(yàn)例2～4)。因此，本發(fā)明的混合提取物，可同時(shí)治療或改善更年期癥狀和骨質(zhì)疏松癥，所以，本發(fā)明的組合物，可以是包括：葛花提取物；以及枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物的用于預(yù)防、治療或改善更年期癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥的組合物。如上所述，本發(fā)明的用于預(yù)防或改善更年期癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥的組合物包括混合提取物。上述混合提取物，包括：葛花提取物；以及枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物。更具體地，上述混合提取物，可以是葛花和枳殼的混合提取物、葛花和陳皮的混合提取物或葛花、枳殼以及陳皮的混合提取物。上述混合提取物，相對(duì)于葛花提取物10重量份，可包含由枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物1～100重量份。優(yōu)選地，對(duì)于葛花提取物10重量份，可包含由枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物5～50重量份，更優(yōu)選地，可包含由枳殼和陳皮組成的組中選擇的一種以上提取物8～20重量份。在本發(fā)明一實(shí)施例，確認(rèn)到混合提取物包含葛花及枳殼提取物或包含葛花及陳皮提取物時(shí)，相比單一提取物，具有更優(yōu)秀的改善或預(yù)防女性更年期癥狀和骨質(zhì)疏松癥的效果。本發(fā)明的“葛花(puerariaeflos，葛花)”是屬于豆科(leguminosae)的多年生蔓性草本葛(puerarialobata)的花，是廣泛應(yīng)用于中醫(yī)臨床上的中藥。也稱(chēng)作葛條花。葛花包含屬于異黃酮(isoflavone)的多樣化合物成分。上述葛花可以是未開(kāi)花的花蕾。本發(fā)明的“枳殼(citrifructusaurantii)”是屬于蕓香科(rutaceae)的植物酸橙(citrusaurantium)、夏橘(citrusnatsudaidai)或其栽培變種的果實(shí)?？蓛?yōu)選為不成熟果實(shí)。作為主成分，分離出屬于黃銅(flavanone)和類(lèi)黃酮(flavonoid)的多樣化合物，據(jù)報(bào)告，對(duì)抗氧化及抗炎癥有效。枳殼的具體例，包括：aurantiumacre，aurantiumbigarella，aurantiumcorniculatum，aurantiumcorniculatum，aurantiumcoronatum，aurantiumdistortum，aurantiumhumile，aurantiummyrtifolium，aurantiumorientale，aurantiumsilvestre，aurantiumsinense，aurantiumvariegatum，aurantiumvulgare，citrusbigaradia，citrushumilis，citrusamara，citrusaurata，citrusbenikoji，citrusbigaradia，citruscalot，citruscanaliculata，citruschangshan-huyou，citruscommunis，citrusdulcimedulla，citrusdulcis，citrusflorida，citrusfunadoko，citrusfusca，citrusglaberrima，citrushumilis，citrusintermedia，citrusiwaikan，citrusiyo，citruskarna，citruskeraji，citruskotokan，citrusmedioglobosa，citrusmitsuharu，citrusmyrtifolia，citrusnatsudaidai，citrusomikanto，citruspseudogulgul，citrusreshni，citrusrokugatsu，citrusrumphii，citrussinograndis，citrussubcompressa，citrussulcata，citrustaiwanica，citrustangelo，citrustengu，citrustosa-asahi，citrustruncate，citrusvulgaris，citrusyatsushiro，citrusyuge-hyokan，但并不限定于此。陳皮(citripericarpium)是蕓香科的橘(citrusunshiumarkovich)或者同屬近緣植物果實(shí)的果皮?；蛘?，可以是柑(citrusreticulatablanco)及其栽培變種的果實(shí)的果皮。味苦、辛，性溫。用于因脾胃虛而引起的嘔吐、惡心、消化不良等。本發(fā)明的葛花、枳殼或陳皮可使用從商業(yè)銷(xiāo)售購(gòu)買(mǎi)的，也可使用栽培或野生摘取的。另外，上述葛花、枳殼或陳皮不論形態(tài)，包括全部干燥、粉碎的形態(tài)。本發(fā)明的“提取物”可通過(guò)用提取溶劑處理植物體等提取對(duì)象提取，也可通過(guò)在作為提取溶劑制造的提取物中加入分餾容劑，分餾制造。上述提取物或者分餾物包括：上述提取物的稀釋物或濃縮物；干燥上述提取物得到的干燥物；上述提取物的部分精制物、精制物或其混合物等，包括提取物本身和利用提取物可形成的全部劑型。具體地，本發(fā)明的提取物提取后，可制成干燥粉末狀使用。另外，進(jìn)行提取或分餾過(guò)程后，可通過(guò)進(jìn)行減壓過(guò)濾過(guò)程或附加進(jìn)行濃縮及/或冷凍干燥，將溶劑濃縮或去除。上述所得的提取物可保管在速凍冰柜(deepfreezer)直至使用。本發(fā)明的提取物所使用的提取對(duì)象，包括全部天然、雜種或變種植物及利用細(xì)胞組織的培養(yǎng)體和培養(yǎng)物。上述提取溶劑的種類(lèi)沒(méi)有特殊的限定，可使用可得出具有本發(fā)明目的效果的提取物的本發(fā)明
技術(shù)領(lǐng)域：
：公開(kāi)的任意溶劑。具體地，可以是水以及有機(jī)溶劑組成的組中選擇的一種以上。上述有機(jī)溶劑可使用由甲醇、乙醇等碳原子數(shù)為1～5的醇、乙酸乙酯、丙酮以及三氯甲烷組成的組中選擇的一種以上溶劑。上述提取溶劑可優(yōu)選地使用水。在具體實(shí)施例中，利用凈化水提取的葛花和枳殼或陳皮的混合提取物，確認(rèn)改善更年期癥狀程度，結(jié)果發(fā)現(xiàn)上述混合提取物處理的細(xì)胞活性、造骨細(xì)胞分化及增殖能力增強(qiáng)，確認(rèn)到吸收混合提取物的實(shí)驗(yàn)組的更年期癥狀得到改善。上述分劃溶劑可以是水、丁醇、乙酸乙酯、乙醚、三氯甲烷、苯、己烷、二氯甲烷或其混合物。上述分餾物是利用上述提取法制造的提取物，具體可以是經(jīng)過(guò)助提取液，經(jīng)過(guò)分餾過(guò)程得到的分餾物。作為上述分餾過(guò)程，例如，可通過(guò)在助提取液中依次加入己烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丁醇和水后，依次獲取分離出層的己烷分餾物、三氯甲烷分餾物、乙酸乙酯分餾物、丁醇分餾物和水分餾物的方法完成。本發(fā)明的提取物制造方法沒(méi)有特殊的限定，可通過(guò)本發(fā)明
技術(shù)領(lǐng)域：
：通常使用的方法提取。作為上述提取方法不限制，例如，熱水提取法、超聲波提取法、過(guò)濾法、回流提取法等，可單獨(dú)使用其中一種或同時(shí)使用兩種以上方法。另外，為得到高純度的提取物可使用同樣方法再提取一次以上。本發(fā)明的“更年期癥狀”，是指因卵巢的老化等引起的雌激素分泌減少，而導(dǎo)致的女性在絕經(jīng)前后表現(xiàn)出的癥狀及疾病的總稱(chēng)。也稱(chēng)作“更年期綜合癥”或“絕經(jīng)期癥狀”。更年期或絕經(jīng)期癥狀有，例如，臉潮紅、出汗、神經(jīng)質(zhì)、抑郁、頭暈、疲勞、關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、頭疼、心慌、蟻?zhàn)吒?formication)、睡眠中出汗、失眠、皮膚干燥、陰道干燥癥、陰道萎縮、下部尿道萎縮、性交痛、陰道炎、膀胱炎、排尿痛、尿急、集中障礙、記憶力障礙、焦慮、神經(jīng)過(guò)敏、記憶力減退、皮膚干燥、關(guān)節(jié)痛或骨質(zhì)疏松等，但并不限定于此。另外，心臟病、高血壓、腦中風(fēng)等心血管系統(tǒng)異常也可能是絕經(jīng)期癥狀中的一種。本發(fā)明的“骨質(zhì)疏松癥”，是指骨的強(qiáng)度變?nèi)?，?dǎo)致骨折的可能性變高的狀態(tài)，其原因可能是遺傳因素、早期絕經(jīng)、藥物或吸煙等。因此，也可能是因女性絕經(jīng)等激素分泌減少而引發(fā)的‘更年期骨質(zhì)疏松癥’。更年期骨質(zhì)疏松癥，是指女性在絕經(jīng)期，激素分泌減少，導(dǎo)致與骨形成相關(guān)的造骨細(xì)胞和組織的損壞以及與吸收相關(guān)的破骨細(xì)胞不均衡引發(fā)的骨質(zhì)疏松癥的癥狀。本發(fā)明的“預(yù)防”，是指注射本發(fā)明的組合物后，抑制或延遲目標(biāo)癥狀的全部行為。本發(fā)明的“治療”，是指注射本發(fā)明的組合物后，使目標(biāo)癥狀或疾病好轉(zhuǎn)或消失的全部行為。本發(fā)明的“改善”，是指注射本發(fā)明的組合物后，目標(biāo)癥狀比注射前有好轉(zhuǎn)或變得有利的全部行為。包含在本發(fā)明的組合物的提取物含量，可以以有效劑量包含。上述用語(yǔ)“有效劑量”，是指對(duì)更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥有抑制、延遲或使已出現(xiàn)的癥狀好轉(zhuǎn)，或者對(duì)促進(jìn)造骨細(xì)胞的分化及增殖有效果的提取物的量。包含在上述組合物的上述混合提取物的含量，如果對(duì)更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥有預(yù)防、改善或者治療，可包含多種含量。具體地，相對(duì)于組合物的總量可包含0.001～30重量％的葛花提取物、0.001～30重量％的枳殼提取物和0.001～30重量％的陳皮提取物。所包含的各有效成分不到最少含量時(shí)，可能對(duì)預(yù)防、治療或改善女性更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥不發(fā)揮效果；所包含的各有效成分超出最多含量時(shí)，有效成分自身的物性、顏色及特有香味可能對(duì)產(chǎn)品造成影響。另外，根據(jù)本發(fā)明的一實(shí)施例，上述組合物在1kg本發(fā)明提取物中可包含1mg～1000mg，優(yōu)選地包含5mg～500g，更優(yōu)選地包含10mg～300g。本發(fā)明的組合物，可以是用于預(yù)防或者改善更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的食品組合物。另外，本發(fā)明提供一種包含上述組合物，用于預(yù)防或者改善更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的食品。包含在本發(fā)明食品組合物中的葛花、枳殼及陳皮是天然物質(zhì)，在長(zhǎng)期使用中證明了其穩(wěn)定性，且可制成一般攝取的食品狀態(tài)攝取，因此，可期待在預(yù)防或改善更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥，發(fā)揮高效。根據(jù)具體的一實(shí)施例，通過(guò)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)到一組被實(shí)驗(yàn)者服用了一段時(shí)間，同時(shí)包含上述葛花和枳殼或陳皮提取物的軟質(zhì)膠囊后，具有改善更年期癥狀的效果。上述“食品”，是指含有一種或一種以上營(yíng)養(yǎng)素的天然物或加工品。優(yōu)選地，是指通過(guò)一定工序制成的可食用狀態(tài)。另外，通常保健功能食品、功能性食品、飲料全部包含食品添加劑及飲料添加劑。上述食品，包含一般意義上的全部食品。例如，上述食品，可以是各種食品類(lèi)、飲料、口香糖類(lèi)、茶、復(fù)合維生素、保健功能食品等。而且，在本發(fā)明中，食品還包括特殊營(yíng)養(yǎng)食品(例如，調(diào)制乳類(lèi)、嬰幼兒食品等)、肉食加工品、魚(yú)肉產(chǎn)品、豆腐類(lèi)、涼粉類(lèi)(jelliedfood)、面類(lèi)(例如，拉面類(lèi)、面條類(lèi)等)、保健輔助食品、調(diào)味食品(例如，醬油、大醬、辣椒醬、混合醬等)、沙司類(lèi)、餅干類(lèi)(例如，點(diǎn)心類(lèi))、乳加工品(例如，發(fā)酵乳、奶酪等)、其他加工食品、泡菜、腌制食品(例如，泡菜類(lèi)、醬制類(lèi)等)、飲料(例如，果實(shí)和蔬菜飲料、豆乳類(lèi)、發(fā)酵飲料類(lèi)等)、調(diào)味料(如，拉面湯等)，但并不限定于此。上述食品、功能性食品、保健功能食品、飲料、食品添加劑以及飲料添加劑，可通過(guò)常規(guī)的制造方法制造。本發(fā)明的“保健功能食品”，是指通過(guò)物理的、生物的、生物工學(xué)的方法等，對(duì)食品賦予了附加值，以使該食品的功能作用、表達(dá)于特定目的的食品群組，或者，是指通過(guò)設(shè)計(jì)加工，使食品組成所具有的與生物體防御節(jié)奏調(diào)節(jié)、疾病防止和恢復(fù)等有關(guān)的身體調(diào)節(jié)功能，充分表達(dá)于生物體的食品。相比一般食品，具有積極地維持和增進(jìn)健康的效果，且保健輔助食品(healthsupplementfood)是以輔助健康為目的的食品。功能性食品、健康食品、保健輔助食品的用語(yǔ)可根據(jù)情況混用。上述功能性食品(functionalfood)與特定保健用食品(foodforspecialhealthuse，foshu)是同一用語(yǔ)，表示不僅在營(yíng)養(yǎng)供給，在調(diào)節(jié)人體功能也有效的，具有高效醫(yī)藥、醫(yī)療效果的加工食品。本發(fā)明的“功能性”，是指對(duì)人體結(jié)構(gòu)及功能，可調(diào)節(jié)營(yíng)養(yǎng)元素和生理作用等保健作用，而獲得有效效果。本發(fā)明的功能性食品，可通過(guò)本領(lǐng)域常規(guī)使用的方法制造，通過(guò)上述方法制造時(shí)，可添加一般添加的原料及成分制造。本發(fā)明的用于食品的組合物可制成多樣形態(tài)的劑型，與一般藥物不同，使用食品為原料，因此，具有長(zhǎng)期服用無(wú)可出現(xiàn)副作用的優(yōu)點(diǎn)、攜帶性好、容易作為增進(jìn)預(yù)防或改善更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥效果的助劑吸收。具體而言，上述保健功能食品，是將本發(fā)明的提取物或其分餾物添加到飲料類(lèi)、茶類(lèi)、香料類(lèi)、口香糖類(lèi)、餅干類(lèi)等食品材料，或添加到制成膠囊、粉末、懸濁液等的食品，是指在攝取時(shí)，健康上可帶來(lái)特定效果，但其與藥品不同，因以食品為原料，具有長(zhǎng)期服用無(wú)副作用發(fā)生的優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明的保健功能食品，上述組合物可在保健功能食品總重量％中，包含0.001～70重量％，優(yōu)選地包含0.01～50重量％或0.1～30重量％。上述食品，可包含食品學(xué)中允許添加的食品輔助添加劑，更加可包含通常在保健功能食品制造中使用的合適的載體、賦形劑、稀釋劑。上述組合物，可包含通常在食品組合物中使用的提升氣味、滋味、視覺(jué)等的附加成分。例如，維生素a、c、d、e、b1、b2、b6、b12、鹽酸(niacin)、生物素(biotin)、葉酸(folate)、泛酸(panthotenicacid)等。另外，可包含鋅(zn)、鐵(fe)，鈣(ca)，鉻(cr)，鎂(mg)，錳(mn)，銅(cu)，鉻(cr)等礦物質(zhì)。另外，可包含賴(lài)氨酸、色氨酸，半胱氨酸、纈氨酸等氨基酸。上述組合物，可包含防腐劑(山梨酸鉀、苯酸鈉、水楊酸、脫氫醋酸鈉等)、殺菌劑(漂白粉和高級(jí)漂白粉、次氯酸鈉等)、抗氧化劑(丁化羥基茴香醚(bha)、丁化羥基甲苯(bht)等)、著色劑(焦油色素等)、發(fā)色劑(亞硝酸鈉、亞硝酸鈉等)、漂白劑(亞硫酸鈉)、調(diào)味料(味精(msg)谷氨酸鈉等)、甜味劑(甘素、甜蜜素、糖精、鈉等)、香料(香草、內(nèi)酯類(lèi))、膨脹劑(明礬、d-酒石酸氫鉀等)、強(qiáng)化劑、乳化劑、增稠劑(糊料)、被膜劑、膠姆糖基礎(chǔ)劑、泡沫抑制劑、溶劑、改良劑等食品添加劑(foodadditives)。上述添加劑可根據(jù)食品種類(lèi)選擇及使用適當(dāng)?shù)牧俊０景l(fā)明的提取物或其分餾物的組合物，可直接包含提取物或其分餾物，也可同時(shí)包含其他食品或食品成分，可根據(jù)常用方法，包含適量。有效成分的混合量可根據(jù)其使用目的(預(yù)防、健康或者處置治療)決定。通常，制造食品或飲料時(shí)添加本發(fā)明的食品組合物是原料的30重量份以下，優(yōu)選為原料的20重量份以下的量。但是，以健康以及衛(wèi)生為目的長(zhǎng)期攝取的情況下，可包含比上述含量低的量，因在安全上無(wú)任何問(wèn)題，有效成分的量也可使用比上述范圍更多的量。本發(fā)明的組合物，例如，也可作為健康飲料組合物使用。本發(fā)明的“飲料”，是指為解渴或品味而飲用的物質(zhì)的總稱(chēng)，包括保健功能飲料。上述飲料，除了包含作為必需成分的本發(fā)明的提取物外，對(duì)其他成分并沒(méi)有特殊的限定，可含有與通常的飲料同樣的各種香味劑或天然碳水化合物等其他成分。上述天然碳水化合物，可舉出葡萄糖、果糖等的單糖，麥芽糖、蔗糖等的二糖，糊精、環(huán)糊精等的多糖，或木糖醇、山梨糖醇、赤蘚糖醇等的糖醇等。上述香味劑，可以是如索馬甜、萊鮑迪苷a(rebaudioside-a)或甘草酸的甜葉菊提取物等天然香味劑，或者，可以是香精、阿斯巴甜等的合成香味劑。上述天然碳水化合物的添加量相對(duì)于本發(fā)明的食品組合物每100ml通常約為1g～20g，優(yōu)選為5g～12g，但不限于此。此外，本發(fā)明的組合物還可含有用于制造天然果汁、果汁飲料、蔬菜飲料的果肉。除上述之外，本發(fā)明的食品組合物可包含各種營(yíng)養(yǎng)劑、維生素、礦物(電解質(zhì))、合成風(fēng)味劑和天然風(fēng)味劑等的風(fēng)味劑、著色劑和增化劑(奶酪、巧克力等)、果膠酸及其鹽、藻酸及其鹽、有機(jī)酸、保護(hù)性膠體增稠劑、ph調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇、碳酸飲料使用的碳酸化劑等。如上所述的添加劑的比例雖不重要，但在本發(fā)明的組合物，每100重量份為0.01～0.1重量份的范圍內(nèi)選擇。上述“保健功能飲料”，是指通過(guò)物理的、生物的、生物工程學(xué)的方法等，對(duì)飲料賦予了附加值，以使該飲料的功能作用、表達(dá)于特定目的的飲料群組，或者，是指通過(guò)設(shè)計(jì)加工，使飲料組成所具有的與生物體防御節(jié)奏調(diào)節(jié)、疾病防止和恢復(fù)等有關(guān)的身體調(diào)節(jié)功能，充分表達(dá)于生物體的飲料。上述保健功能飲料，除了作為必需成分含有本發(fā)明的提取物，對(duì)其他成分并沒(méi)有特殊的限定，可包含與通常飲料相同的各種香味劑或天然碳水化合物等其他成分。上述食品，還可包含食品添加劑，作為食品添加劑是否適合沒(méi)有其他規(guī)定，需通過(guò)食品藥品安全廳認(rèn)可的食品添加物法典的總則以及一般實(shí)驗(yàn)法等判定相應(yīng)品類(lèi)的規(guī)格及標(biāo)準(zhǔn)。另外，根據(jù)本發(fā)明的組合物，可以是包含可用于預(yù)防或者治療更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的混合提取物的藥物組合物。另外，本發(fā)明涉及醫(yī)藥品或醫(yī)藥輔品，其中包含上述藥物組合物。根據(jù)一實(shí)施例，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)到，利用本發(fā)明的混合提取物處理乳房癌細(xì)胞株(mcf-7cellline)，增強(qiáng)了細(xì)胞活性，運(yùn)用庫(kù)珀曼指數(shù)直接服用本發(fā)明的提取物，其結(jié)果改善了更年期癥狀(實(shí)驗(yàn)例1以及實(shí)驗(yàn)例5)。另外，通過(guò)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)到，利用本發(fā)明的混合提取物處理造骨細(xì)胞類(lèi)似細(xì)胞(mg-63cell)時(shí)，促進(jìn)了造骨細(xì)胞的增殖，相反地，抑制破骨細(xì)胞增殖(實(shí)驗(yàn)例2～4)。上述“藥物組合物”，是指診斷、治療、減輕、處置或預(yù)防包括人類(lèi)的動(dòng)物的疾病為目的而使用的組合物。上述組合物中本發(fā)明的提取物的含量可以是對(duì)預(yù)防、改善或者治療更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥有效的量。具體地，對(duì)于整個(gè)組合物可包含0.001～30重量％的葛花提取物、0.001～30重量％的枳殼提取物和0.001～30重量％的陳皮提取物。所包含的各有效成分不到最少含量時(shí)，可能對(duì)預(yù)防、治療或改善女性更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥不發(fā)揮效果；所包含的各有效成分超出最多含量時(shí)，有效成分自身的物性、顏色以及特有香味可對(duì)產(chǎn)品造成影響。另外，本發(fā)明的藥物組合物可單獨(dú)使用或與其他對(duì)預(yù)防或治療更年期癥狀和/或骨質(zhì)疏松癥有效果的藥物活性成分共同使用。本發(fā)明的組合物，可以藥學(xué)上有效的劑量給藥到個(gè)體。上述藥學(xué)上有效的劑量，是指醫(yī)學(xué)治療上可接受的合理受益/危險(xiǎn)比例，可充分治療疾病且不會(huì)引起副作用的量，有效用量標(biāo)準(zhǔn)可根據(jù)患者的健康狀態(tài)、疾病的種類(lèi)、重癥度、藥物的活性、對(duì)藥物的敏感度、給藥方法、給藥時(shí)間、給藥途徑及釋放比例、療程、搭配或同時(shí)使用的藥物所包含的因素以及，其他周知的醫(yī)學(xué)領(lǐng)域因素決定。具體地，在給藥個(gè)體的體重每1kg，通常一天為0.01mg～5000mg，可根據(jù)醫(yī)生或藥師的判斷以一定時(shí)間間隔一日一次或多次給藥，但并不限定于此。可通過(guò)非口服、口服等多種途徑，將上述組合物給藥于包括大鼠、小鼠、家畜、人等哺乳動(dòng)物，給藥的所有方式都可以預(yù)料到，例如，可通過(guò)口服、直腸或靜脈、肌肉、皮下、子宮內(nèi)硬膜、或側(cè)腦室內(nèi)(intracerebroventricular)注射進(jìn)行給藥。本發(fā)明的藥物組合物作為有效成分可單獨(dú)包含上述提取物，此外，可根據(jù)劑型、使用方法及使用目的，還可以包含藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、稀釋劑和/或輔助成分。更加具體地，除上述有效成分外，還可以包含營(yíng)養(yǎng)劑、維生素、電解質(zhì)、風(fēng)味劑、著色劑、強(qiáng)化劑(enhancer)、果膠酸及其鹽、藻酸及其鹽、有機(jī)酸、保護(hù)性膠質(zhì)增稠劑、ph調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、甘油、醇、用于碳酸飲料的碳酸化劑等。上述“藥學(xué)上可接受”，是指在生理學(xué)上可接受，并對(duì)動(dòng)物，優(yōu)選對(duì)人給藥時(shí)，通常不會(huì)引起胃腸功能障礙、眩暈等過(guò)敏反應(yīng)或與此相似的反應(yīng)。作為上述藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑的示例，可舉出選自于乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤蘚糖醇、麥芽糖醇、淀粉、阿拉伯樹(shù)膠、藻酸鹽、明膠、磷酸鈣、硅酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、水、甲基羥基苯甲酸鹽、丙羥基苯甲酸鹽、滑石、硬脂酸鎂及礦物油、糊精、碳酸鈣、糊精、碳酸鈣、丙二醇、液體石蠟以及生理鹽水所組成的組中選擇的一種以上，但并不限定于此，通常的載體、賦形劑或者稀釋劑都可以使用。上述成分可單獨(dú)或組合后添加至上述作為有效成分的提取物中。上述藥物組合物的劑型可根據(jù)使用方法而不同，可以使用本發(fā)明所屬領(lǐng)域中公知的方法進(jìn)行劑型化，以在對(duì)哺乳動(dòng)物給藥后，能夠提供活性成分的迅速、持續(xù)或延遲的釋放。作為上述劑型的示例，可以舉出選自于由軟膏、霜?jiǎng)⑵瑒?、丸劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑、懸浮劑、口服溶液劑、乳劑、糖漿劑、水溶液、非水性溶劑、懸浮劑及乳劑所組成的組中的劑型。為了上述劑型，還可以包含賦形劑，例如，包含常規(guī)的填充劑、增量劑、粘合劑、崩解劑、表面活性劑、抗凝劑、潤(rùn)滑劑、濕潤(rùn)劑、香料、乳化劑、防腐劑、甜味劑、芳香劑或保存劑等。通常，用于口服給藥的固體制劑，包含片劑(tablets)、藥片、軟質(zhì)或硬質(zhì)膠囊劑(capsules)、丸劑(pills)、粉劑(powders)和顆粒劑(granules)等，這種制劑可以混合一種以上的賦形劑而調(diào)制，例如，混合淀粉、碳酸鈣(calciumcarbonate)、蔗糖(sucrose)或乳糖(lactose)、明膠等。另外，除單純的賦形劑外，還可以使用硬脂酸鎂、滑石等潤(rùn)滑劑。另外，用于口服給藥的液狀制劑，有懸浮劑(sustesions)、口服溶液劑、乳劑(emulsions)和糖漿劑(syrups)等，除作為通常使用的單純稀釋劑的水或液體石蠟之外，還可以包含各種賦形劑，例如，濕潤(rùn)劑、甜味劑、芳香劑、保存劑等。在透皮給藥的示例中，有適合生成爽身粉、乳液、懸浮液、油、噴霧劑、軟膏、含脂軟膏(greasyointment)、霜膏劑、凝膠劑、泡沫劑或溶液，且適用于透皮給藥系統(tǒng)(tts:transdermaltherapeuticsystem)的載體和/或賦形劑。本發(fā)明的局部用藥物制劑，可以是半固體狀劑型，特別是，有軟膏(溶液軟膏、懸浮液軟膏)、霜?jiǎng)?、凝膠劑或膏劑。乳狀中主要使用的有：脂肪醇，例如，月桂醇、鯨蠟醇、硬脂醇；脂肪酸，例如，棕櫚酸或硬脂酸、液體或固體狀石蠟或地蠟、液體至固體狀蠟，例如，肉豆蔻酸異丙酯；天然脂肪或部分合成脂肪，例如，椰子脂肪酸甘油三酯；硬化油，例如，氫化花生油或蓖麻油；或者，甘油脂肪酸的一部分酯化的物質(zhì)，例如，單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。作為優(yōu)秀的乳化劑，有表面活性劑，可舉出非離子表面活性劑：多元醇或其氧化乙烯加成物的脂肪酸酯，例如，脂肪酸多甘油酯或聚氧化乙烯失水山梨醇脂肪酸酯；失水山梨醇脂肪酸酯，例如，失水山梨醇油酸酯和/或失水山梨醇異硬脂酸酯等、異硬脂酸酯、固醇，聚氧化乙烯脂肪醇醚或脂肪酸酯，陰離子表面活性劑：脂肪醇磺酸酯的堿金屬鹽，例如，月桂基硫酸鈉、鯨蠟醇硫酸酯鈉或十八烷基硫酸鈉，這些通常是在上述脂肪醇的存在下，例如，在鯨蠟醇或硬脂醇的存在下使用。其中，特別是，可將用于防止霜?jiǎng)└稍锏闹苿?，將多元醇即甘油、山梨糖醇、丙二醇?或聚乙二醇添加于水相中，或者，可將保存劑、香料等添加于水相中。本發(fā)明的藥物制劑可以是無(wú)水狀態(tài)的軟膏，適合局部用途，可包含在體溫狀態(tài)下為液體的石蠟，特別是，可包含低粘度石蠟，或者，上述藥物制劑可包含：上述天然脂肪或部分合成脂肪，例如，椰子脂肪酸甘油三酯；硬化油，例如，氫化花生油或蓖麻油；甘油的脂肪酸部分酯的物質(zhì)，例如，單硬脂酸甘油酯和二硬脂酸甘油酯；有機(jī)硅，例如，聚甲基硅氧烷，如六甲基二硅氧烷或八甲基三硅氧烷。還可含有，例如，與水性霜?jiǎng)┯嘘P(guān)聯(lián)，并可提高水分吸收量的脂肪醇，以及固醇、羊毛蠟(woolwax)、其他乳化劑和/或其他添加劑。在本發(fā)明中，當(dāng)將上述藥物組合物劑型化為醫(yī)藥品時(shí)，可參考remington'spharmaceuticalscience，mackpublishingcompany，eastonpa中公開(kāi)的內(nèi)容，并將上述文獻(xiàn)作為本說(shuō)明書(shū)的一部分。上述藥物組合物，可以是醫(yī)藥輔品組合物。本發(fā)明的用語(yǔ)“醫(yī)藥輔品”，是指作為治療、減輕或預(yù)防人或動(dòng)物的疾病為目的使用的纖維、橡膠制品或與其相似的；對(duì)人體作用小，不直接作用于人體，且不屬于器具或機(jī)器和與其相似的；作為預(yù)防感染而使用的，與以殺菌、殺蟲(chóng)及與其相似用途而使用的制劑中的一種對(duì)應(yīng)的物品，以診斷、治療、減輕、處置或預(yù)防人或動(dòng)物的疾病為目的使用的物品中，不屬于器具、機(jī)器或裝置的；以及，在以藥理學(xué)上影響人或動(dòng)物的結(jié)構(gòu)和功能為目的而使用的物品中，除了不屬于器具、機(jī)器或裝置的物品。具體可指皮膚外用劑或個(gè)人衛(wèi)生用品，但并不限定于此。將本發(fā)明的混合提取物或分餾物作為預(yù)防或治療更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的目的添加到醫(yī)藥輔品時(shí)，可直接添加上述提取物或分餾物，也可與其他醫(yī)藥輔品成分同時(shí)使用，可根據(jù)通常使用的方法適當(dāng)使用。有效成分的混合量，可根據(jù)使用目的而適當(dāng)決定。上述皮膚外用劑，不特別限定于以下形態(tài)，可制成軟膏劑、乳液劑、噴霧劑、膏劑、霜?jiǎng)?、粉劑、懸浮劑、凝膠劑或膠劑的形態(tài)使用。上述個(gè)人衛(wèi)生用品，不特別限定于以下用品，具體可以是香皂、化妝品、濕巾、手紙、洗發(fā)水、潤(rùn)膚霜、面霜、牙膏、唇膏、香水、彩妝、粉底霜、腮紅、睫毛膏、眼影、防曬乳液、毛發(fā)護(hù)理產(chǎn)品、空氣芳香凝膠或清洗凝膠。另外，本發(fā)明的醫(yī)藥輔品組合物還有，例如，消毒清潔劑、沐浴露、濕巾、肥皂、洗手液、口罩或軟膏劑。另外，為改善、緩解、治療或預(yù)防，可單獨(dú)使用本發(fā)明的藥物組合物，或?qū)⑺幬锝M合物與手術(shù)、激素治療、藥物治療和使用生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑的方法并用。本發(fā)明提供預(yù)防或治療更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的方法，包括以藥學(xué)上有效的用于預(yù)防或治療更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥的量給藥到個(gè)體的階段。本發(fā)明的用語(yǔ)“更年期癥狀”、“更年期骨質(zhì)疏松癥”、“預(yù)防”、“治療”及“給藥”如上述說(shuō)明。上述給藥的給藥量、給藥頻率以及給藥途徑如前所述。本發(fā)明的用語(yǔ)“個(gè)體”，是指上述更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥已發(fā)病或可發(fā)明的包括人在內(nèi)的猴子、牛、馬、羊、豬、雞、火雞、鵪鶉、貓、狗、鼷鼠、老鼠、兔子或豚鼠的全部動(dòng)物，本發(fā)明的組合物給藥到個(gè)體，可有效預(yù)防或治療上述疾病。另外，根據(jù)本發(fā)明的上述組合物，可以是化妝材料組合物。上述化妝材料組合物，可以用于預(yù)防或改善更年期癥狀或骨質(zhì)疏松癥。具體地，可以是改善或預(yù)防因更年期出現(xiàn)的皮膚干燥或臉紅潮等癥狀的組合物。本發(fā)明的“更年期癥狀”、“更年期骨質(zhì)疏松癥”、“改善”及“預(yù)防”如上述說(shuō)明。包含在本發(fā)明組合物的上述提取物的有效劑量，可根據(jù)組合物產(chǎn)品化的形態(tài)，以及上述提取物使用于皮膚的方法和停留在皮膚上的時(shí)間等而不同。例如，當(dāng)上述組合物作為皮膚科治療的醫(yī)藥品形式產(chǎn)品化時(shí)，與以日常適用于皮膚的化妝品的形式產(chǎn)品化的情況相比，可包含更高濃度的提取物。并且，在以化妝品的形式產(chǎn)品化的情況中，當(dāng)有效成分短時(shí)間停留于皮膚的卸妝劑、清洗劑等沖洗(wash-off)類(lèi)型的化妝品的情況下，可包含較高濃度的提取物。反之，當(dāng)為有效成分長(zhǎng)時(shí)間停留于皮膚的化妝水、乳液、霜、精華素等免洗(leave-on)類(lèi)型的化妝品的情況下，與沖洗類(lèi)型的化妝品相比可包含低濃度的提取物。另外，上述組合物可用于皮膚外用劑。上述組合物能夠以適用于表皮的任何劑型使用。具體例如，可具有由溶液、懸濁液、乳液、膏劑、凝膠劑、霜?jiǎng)?rùn)膚液、粉劑、皂劑、含表面活性劑的清洗劑、油、粉底霜、化妝水類(lèi)、化妝軟膏、噴霧劑、面膜、防曬霜、隔離霜、粉劑、卸妝劑及清洗劑所組成的組中的劑型，但并不受限于上述具體例。為了便于使用及處理，本發(fā)明的含有提取物的化妝材料組合物，還可包含化妝學(xué)上可接受的載體、稀釋劑、助劑、著色劑、穩(wěn)定劑、著香劑、表面活性劑、油分、保濕劑、醇、增稠劑、抗氧化劑、ph調(diào)節(jié)劑、防曬劑等，當(dāng)作為皮膚外用組合物使用時(shí)，還能夠以液狀、乳狀、霜狀、軟膏、棒狀、面膜、糊劑、粉劑等能夠適用于表皮的任何劑型使用。另外，可包含其中的一種或兩種以上。當(dāng)上述化妝材料組合物劑型化為化妝品時(shí)，可以包含起到活性成分的載體作用的皮膚可接受的公知的賦形劑，具體可參考internationalcosmeticingredientdictionary，6thed.，thecosmetic，toiletryandfragranceassociation，inc.，washington，1995中公開(kāi)的內(nèi)容。將上述文獻(xiàn)作為本說(shuō)明書(shū)的一部分。另外，本發(fā)明涉及一種化妝品，作為其有效成分，包含混合提取物。上述化妝品，可以是具有化妝水類(lèi)、精華素類(lèi)、護(hù)膚水類(lèi)、潤(rùn)膚液類(lèi)、霜類(lèi)、面膜類(lèi)組成的組中的任意一種劑型。例如，上述化妝品可以是護(hù)膚水、柔膚水、爽膚水、收斂水、潤(rùn)膚液、乳液、保濕潤(rùn)膚液、營(yíng)養(yǎng)潤(rùn)膚液、按摩霜、營(yíng)養(yǎng)霜、保濕霜、護(hù)手霜、粉底霜、精華素、營(yíng)養(yǎng)精華素、面膜、洗面奶、潔膚露、卸妝膏、身體乳及沐浴露等，但并不限定于此。以上，除非在本說(shuō)明書(shū)中特別說(shuō)明，本說(shuō)明書(shū)中記載的數(shù)值包含與其均等的范圍。下面，為了便于理解本發(fā)明，將詳細(xì)說(shuō)明實(shí)施例等。但是，根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例可變?yōu)楦鞣N其他形式，且本發(fā)明的范圍并非限定于下述實(shí)施例。本發(fā)明的實(shí)施例是為了向本領(lǐng)域普通技術(shù)人員更完整地說(shuō)明本發(fā)明而提供的。實(shí)施例制造例1：制造試管內(nèi)(invitro)評(píng)價(jià)時(shí)的提取物下述實(shí)施例所使用的提取物是乙醇提取物，從obmrapco.，ltd購(gòu)買(mǎi)而使用，通過(guò)加入提取物原材料與100％酒精混合的原料，在常溫下提取，過(guò)濾去除不純物，使固態(tài)粉濃縮到85％的過(guò)程制造后，在試管內(nèi)(invitro)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中使用。制造例2：制造用于臨床評(píng)價(jià)庫(kù)珀曼指數(shù)的軟質(zhì)膠囊用于臨床實(shí)驗(yàn)的軟質(zhì)膠囊的制作過(guò)程主要分為制造主原料(更年期題材)的過(guò)程和制造軟質(zhì)膠囊的過(guò)程進(jìn)行。首先，在主原料葛花的干燥粉末試樣中加入10倍量的凈化水后，利用提取裝置，在80℃下，提取6小時(shí)。利用直徑為160mm的過(guò)濾紙進(jìn)行過(guò)濾，將過(guò)濾好的提取液減壓濃縮，進(jìn)行冷凍干燥后，制造出粉末狀的提取物。枳殼和陳皮也利用同樣的方法制造提取物。之后，將作為主原料的更年期原料與作為賦形劑的大豆油、蜜蠟、大豆卵磷脂、d-α-生育酚混合攪拌后，去除氣泡，制造軟質(zhì)膠囊的內(nèi)容物，用凈化水和色素、甘油、變性淀粉、角叉菜膠攪拌制造膠囊基劑后，將內(nèi)容物按重量填充及成型到膠囊基劑后，干燥制成軟質(zhì)膠囊。具體的軟質(zhì)膠囊內(nèi)容物的含量比如下表1所記載。表1原料名比較例1比較例2比較例3比較例4實(shí)施例1實(shí)施例2葛花提取物-20--1010枳殼提取物--20-10-陳皮提取物---20-10大豆油92.9572.9572.9572.9572.9572.95蜜蠟555555大豆軟磷脂222222d-α-生育酚0.050.050.050.050.050.05實(shí)驗(yàn)例1：對(duì)mcf-7cell細(xì)胞活性(cellviability)的測(cè)定對(duì)雌激素受體陽(yáng)性人乳房癌細(xì)胞株的mcf-7細(xì)胞株測(cè)定枳殼提取物的細(xì)胞活性(cellviability)。利用mcf-7細(xì)胞分析cck-8是可以確認(rèn)試樣內(nèi)天然形成的女性激素對(duì)女性的影響的實(shí)驗(yàn)法。將mcf-7細(xì)胞使用加入10％fbs的dmem培養(yǎng)基在96孔板(96wellplate)培養(yǎng)。培養(yǎng)24小時(shí)后，將陰性對(duì)照組(無(wú)處理組，control)和陽(yáng)性對(duì)照組(estradiol處理組，e2)、葛花提取物、枳殼提取物、陳皮提取物個(gè)別處理或混合處理，72小時(shí)后，利用cck-8測(cè)定了細(xì)胞活性(cellviability)。在每100μl培養(yǎng)基用10μl的cck-8試樣處理1小時(shí)后，在450nm下測(cè)定吸光度。其結(jié)果如圖1。如圖1所示，全部提取物處理組的細(xì)胞活性高于無(wú)處理組(陰性對(duì)照組)，但可確認(rèn)到，相比于各自單獨(dú)的提取物處理組，混合葛花和枳殼或陳皮提取物處理時(shí)，細(xì)胞活性(cellviability)明顯增高。實(shí)驗(yàn)例2：造骨細(xì)胞增殖促進(jìn)效果為確認(rèn)造骨細(xì)胞增殖促進(jìn)效果，在人成骨樣mg-63細(xì)胞(humanosteoblast-likemg-63cell)進(jìn)行cck-8分析。作為實(shí)驗(yàn)組用陰性對(duì)照組(無(wú)處理組，control)和陽(yáng)性對(duì)照組(estradiol處理組，e2)、各自單獨(dú)提取物處理組(葛花提取物、枳殼提取物、陳皮提取物)以及混合提取物處理組(葛花+枳殼提取物、葛花+陳皮提取物)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。首先，將均勻數(shù)量的mg-63細(xì)胞使用加入10％fbs的emem培養(yǎng)基在96孔板(96wellplate)培養(yǎng)。培養(yǎng)24小時(shí)后，換成無(wú)fbs的emem培養(yǎng)基單獨(dú)處理陰性對(duì)照組(無(wú)處理組，control)和陽(yáng)性處理組(estradiol處理，e2)、葛花提取物、枳殼提取物、陳皮提取物，將葛花和枳殼以1:1混合處理，將葛花和陳皮以1:1混合處理。處理48小時(shí)后，利用cck-8測(cè)定細(xì)胞活性。在每100μl培養(yǎng)基用10μl的cck-8試樣處理1小時(shí)后，在450nm下測(cè)定吸光度。其結(jié)果如圖2。如圖2所示，確認(rèn)到，相比于單獨(dú)處理提取物的情況，處理混合提取物時(shí)，造骨細(xì)胞增殖效果更優(yōu)秀，在混合提取物處理組的情況下，與陽(yáng)性對(duì)照組(e2)相比，造骨細(xì)胞增殖效果更優(yōu)秀。實(shí)驗(yàn)例3：造骨細(xì)胞分化促進(jìn)效果為確認(rèn)各提取物的造骨細(xì)胞分化促進(jìn)效果，用人成骨樣mg-63細(xì)胞(humanosteoblast-likemg-63cell)對(duì)alp活性進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)組設(shè)定與實(shí)驗(yàn)例3相同進(jìn)行。首先，將均勻數(shù)量的mg-63細(xì)胞使用加入10％fbs的dmem培養(yǎng)基在24孔板(24wellplate)培養(yǎng)。培養(yǎng)24小時(shí)后，將培養(yǎng)基換成10％活性炭fbs含酚紅的培養(yǎng)基，單獨(dú)處理陰性對(duì)照組(無(wú)處理組，control)和陽(yáng)性處理組(estradiol處理，e2)、葛花提取物、枳殼提取物、陳皮提取物，將葛花和枳殼以1:1混合處理，將葛花和陳皮以1:1混合處理。培養(yǎng)3天后，用同樣的培養(yǎng)基和同樣的提取物濃度再處理一次，繼續(xù)培養(yǎng)3天。為測(cè)定總alp活性，用pnppalkalinephosphataseassaykit(anaspecas-72146)進(jìn)行分析。將細(xì)胞用分析緩沖液(assaybuffer)洗滌兩遍，加入200μl含有tritonx-100的分析緩沖液(assaybuffer)后，將板(plate)放到冰上振蕩培養(yǎng)(shakingincubation)10分鐘。將細(xì)胞懸液(cellsuspension)移到微型離心機(jī)(microcentrifugetube)后，在4℃下，用2500xg離心分離，將上層清液50μl和pnpp基質(zhì)(substrate)50μl放入96孔板(96wellplate)反應(yīng)30分鐘，在450nm下測(cè)定吸光度。其結(jié)果如圖3。如圖3所示，確認(rèn)到，用混合提取物處理的細(xì)胞，相比于單獨(dú)處理組，其造骨細(xì)胞的分化具有更有效的促進(jìn)效果。實(shí)驗(yàn)例4：抑制破骨細(xì)胞增殖效果為確認(rèn)各提取物的抑制破骨細(xì)胞增殖效果，用ratprimaryprecursorosteoclastsculturekit培養(yǎng)破骨細(xì)胞后，進(jìn)行cck-8分析。首先，將均勻數(shù)量的細(xì)胞用附在試劑盒的培養(yǎng)基在96孔板(96wellplate)播種(seeding)后，立刻分濃度(10，50，100ppm)處理陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組、葛花、枳殼、陳皮的單獨(dú)提取物與葛花+枳殼、葛花+陳皮的混合提取物。試樣處理72小時(shí)后，利用cck-8測(cè)定細(xì)胞活性(cellviability)。在每100μl培養(yǎng)基用10μl的cck-8試樣處理1小時(shí)后，在450nm下測(cè)定吸光度。其結(jié)果如圖4。如圖4所示，確認(rèn)到，處理混合提取物的細(xì)胞相比于單獨(dú)提取物處理組，具有更有效地抑制了破骨細(xì)胞增殖的功效。尤其在混合提取物的情況下，確認(rèn)到依據(jù)濃度，抑制破骨細(xì)胞增殖效果有明顯提升。實(shí)驗(yàn)例5：更年期癥狀緩解效果評(píng)價(jià)將具有更年期癥狀的40歲過(guò)半到50歲的女性60名隨機(jī)分配，通過(guò)1天3粒根據(jù)比較例1～4及實(shí)驗(yàn)例1～2制造的軟質(zhì)膠囊，服用8周后，評(píng)價(jià)更年期癥狀改善程度。比較例1是未服用組，比較例2是葛花單獨(dú)提取物服用組，比較例3是枳殼單獨(dú)提取物服用組，比較例4是陳皮單獨(dú)提取物服用組，實(shí)施例1是葛花和枳殼混合提取物服用組，實(shí)施例2是葛花和陳皮混合提取物服用組。提取物處理組中，使提取物(混合提取物時(shí)是混合提取物)的含量占全部組合物的20重量％。攝取8周后的更年期癥狀改善程度用庫(kù)珀曼指數(shù)(kuppermanindex)測(cè)定，將攝取前的數(shù)值視為100時(shí)，攝取后的相對(duì)數(shù)值如表2。本發(fā)明中使用的庫(kù)珀曼指數(shù)(ki)作為在學(xué)界使用的更年期指數(shù)，是將更年期女性可產(chǎn)生的11種癥狀(臉朝紅、出汗、失眠、神經(jīng)質(zhì)、抑郁癥、頭暈、疲勞、關(guān)節(jié)痛及肌肉痛、頭痛、心慌、陰道干燥)分?jǐn)?shù)化，乘上各項(xiàng)目的分?jǐn)?shù)權(quán)重值得出分?jǐn)?shù)，并將其全部相加而得出的分?jǐn)?shù)作為更年期分?jǐn)?shù)。表2如上表2所示，確認(rèn)到，葛花和枳殼混合的實(shí)施例1與葛花和陳皮混合的實(shí)施例2的組合物相比于各自提取物單獨(dú)處理時(shí)，更年期癥狀緩解效果更優(yōu)秀。制造例3：片劑的制造表3原料名制造例3-1制造例3-2葛花提取物1010枳殼提取物10-陳皮提取物-10微晶纖維素76.576.5二氧化硅11硬脂酸鎂11羥丙基甲基纖維素0.50.5當(dāng)前第1頁(yè)12當(dāng)前第1頁(yè)12