本發(fā)明涉及一種防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑，屬于飼料添加劑
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：水貂是一種半水棲動(dòng)物，其體形細(xì)長，雄性體長38～42厘米，尾長20厘米，體重1.6～2.2公斤，雌性較小。體毛黃褐色，頜部有白斑，頭小，眼圓，耳呈半圓形，稍高出頭部并傾向前方，不能擺動(dòng)。頸部粗短，四肢粗壯，前肢比后肢略短，指、趾間具蹼，后趾間的蹼較明顯，足底有肉墊。尾細(xì)長，毛蓬松。主要在夜間活動(dòng)，吃小型嚙齒動(dòng)物，也吃螻蛄、蛙類和魚。生活在溪流岸邊的洞中或巖石縫間，有些繁殖場(chǎng)飼養(yǎng)水貂取其毛皮。以深棕色皮毛為主。北美水貂的體型大些，現(xiàn)已被引入歐洲皮毛養(yǎng)殖場(chǎng)。水貂的主要商品部分是皮。水貂作為肉食動(dòng)物，疾病大多來源于食物，腐敗的蛋白質(zhì)飼料，近些年來養(yǎng)殖量的不斷擴(kuò)大，密度的增加也導(dǎo)致疾病泛濫，抗生素的濫用，病藥菌耐藥越來越嚴(yán)重，乳酸菌作為肉食動(dòng)物的最佳保健制劑應(yīng)用越來越廣泛。尤其是活性乳酸菌制劑的效果也得到了養(yǎng)殖業(yè)的認(rèn)可。水貂廣布于西藏東部地區(qū)，以各種嚙齒動(dòng)物為食，因而在控制鼠害方面有著積極作用。水貂皮堅(jiān)韌輕薄，毛被絨細(xì)、豐厚，張幅大，色調(diào)淡雅美觀，是毛皮中珍貴的高級(jí)制裘原料皮。長期以來深受藏族人民喜愛，是主要對(duì)外貿(mào)易品種之一。水貂大腸桿菌病為一種急性傳染病，是由大腸桿菌引起的。本病多為自發(fā)感染，即腸道內(nèi)的大腸桿菌在水貂機(jī)體抵抗力下降時(shí)會(huì)迅速繁殖，產(chǎn)生毒力，引發(fā)致病。該病在發(fā)病初期多表現(xiàn)為食欲減退，精神不佳，體溫升高，鼻鏡干燥，糞便稀軟呈黃色或灰色，繼而出現(xiàn)下痢，水樣腹瀉及血便，四肢無力，體質(zhì)虛弱，彎腰弓背，肛門周圍糞便污染嚴(yán)重。水貂尤其是幼貂食物攝入營養(yǎng)不足，衛(wèi)生欠佳，很容易患此病。采用傳統(tǒng)的口服、注射抗生素的方法防治該病，雖然可以起到一定的效果，但容易引起較強(qiáng)的抗藥性，且損害水貂自身免疫力，影響其正常生長發(fā)育。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑。該飼料添加劑采用天然中草藥和食材制成，安全無毒副作用，可以快速有效治療水貂大腸桿菌病，產(chǎn)品直接添加入飼料中方便水貂采食，在針對(duì)病因病癥治療該病的同時(shí)，可以在補(bǔ)充幼貂身體所需維生素、礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，增強(qiáng)其體質(zhì)，提高自身免疫力的，促進(jìn)水貂康復(fù)，減輕該病對(duì)貂正常生長發(fā)育的影響，降低死亡率，保障養(yǎng)殖戶的利用。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑，由以下重量份的原料制備而成：黃芩20～30份、杭白菊20～30份、連翹20～30份、十六酸異丙酯0.01～0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.001～0.01份、當(dāng)歸20～30份。優(yōu)選由以下原料及其重量份數(shù)組成：黃芩25份、杭白菊25份、連翹25份、十六酸異丙酯0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.01份、當(dāng)歸25份。優(yōu)選由以下原料及其重量份數(shù)組成：黃芩30份、杭白菊20份、連翹20份、十六酸異丙酯0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.01份、當(dāng)歸30份。上述飼料添加劑，將原料粉碎磨成粉末，采用水煎醇沉法提取，再經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取獲得。水煎醇沉法包括以下步驟：1、按重量份數(shù)稱取黃芩、杭白菊、連翹、十六酸異丙酯0.01～0.02份、聚甘油-3蓖麻醇酸酯0.001～0.01份、當(dāng)歸，按質(zhì)量體積比1:4加水浸泡0.5h，之后加熱1h水溫保持在100℃，過濾；2、濾渣再按質(zhì)量體積比1:4加水，直接加熱1h，溫度依然保持在100℃，過濾，重復(fù)兩次；3、將所獲得的濾液合并，放在3000r/min的離心機(jī)上離心1h；再取上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上提取，加入95%酒精，使混合液乙醇濃度達(dá)80%，靜置24h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收酒精至藥液濃度為1g/mL；115℃高壓滅菌20min，-20℃保存?zhèn)溆谩Ｉ鲜鲲暳咸砑觿┑氖褂梅椒?，將添加劑?0～150mL藥液/kg飼料拌入基礎(chǔ)飼料投喂。針對(duì)水貂大腸桿菌病缺乏安全有效藥物的問題，本發(fā)明采用純中藥制成，配方合理，綠色純天然，有效性高。具體方析如下：黃芩是唇形科植物黃芩的干燥根，是常用中草藥，其味苦，性寒，具有清熱燥濕、瀉火解毒、抗菌作用；杭白菊為菊科草本植物，也是我國的重要藥材，杭白菊味甘苦，性微寒，含有的杭白菊總黃酮具有抗菌、抗病毒、抗氧化、降血脂、抗腫瘤等功能，能提高鴨的免疫力；連翹的根(連翹根)、莖葉(連翹莖葉)亦供藥用，連翹性味苦，涼，具有清熱，解毒，散結(jié)，消腫的功效；當(dāng)歸含有揮發(fā)油和有機(jī)酸等成分，其根可入藥，是最常用的中藥之一。具有補(bǔ)血止血，調(diào)經(jīng)止痛，潤燥滑腸、抗癌、抗老防老、免疫之功效。本發(fā)明所用原料來源于純天然藥物，具有來源廣、起效快、無毒副作用、低殘留、防治效果良好等優(yōu)點(diǎn)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，在易發(fā)病的時(shí)間針對(duì)性的使用本發(fā)明的添加劑，可有效預(yù)防羅非魚鏈球菌病的發(fā)生。具體實(shí)施方式實(shí)施例1防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑的制備表1防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑配方，由以下重量份的原料制備而成：序號(hào)黃芩杭白菊連翹當(dāng)歸120302030225252525320303020425302025520253025參考表1的配方，取中草藥原料分別制備配方一至五的添加劑，先將中草藥原料粉碎磨成粉末，采用水煎醇沉法提取，再經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取獲得，具體如下：1、按重量份數(shù)稱取黃芩、杭白菊、連翹、十六酸異丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、當(dāng)歸，按質(zhì)量體積比1:4加水浸泡0.5h，之后加熱1h水溫保持在100℃，過濾；2、濾渣再按質(zhì)量體積比1:4加水，直接加熱1h，溫度依然保持在100℃，過濾，重復(fù)兩次；3、將所獲得的濾液合并，放在3000r/min的離心機(jī)上離心1h；再取上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上提取，加入95%酒精，使混合液乙醇濃度達(dá)80%，靜置24h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收酒精至藥液濃度為1g/mL；115℃高壓滅菌20min，-20℃保存?zhèn)溆?。少量的十六酸異丙酯、聚甘?3蓖麻醇酸酯混合后，能與植物原料結(jié)合，起到一定的廣譜抑菌殺菌作用，特別適合抑制大腸桿菌。上述飼料添加劑的使用方法，將添加劑按50～150mL藥液/kg飼料拌入基礎(chǔ)飼料投喂。實(shí)施例2防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑的制備表1防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑配方，由以下重量份的原料制備而成：序號(hào)黃芩杭白菊連翹當(dāng)歸125302030225252525320302520425302025520253025參考表1的配方，取中草藥原料分別制備配方一至五的添加劑，先將中草藥原料粉碎磨成粉末，采用水煎醇沉法提取，再經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取獲得，具體如下：1、按重量份數(shù)稱取黃芩、杭白菊、連翹、十六酸異丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、當(dāng)歸，按質(zhì)量體積比1:4加水浸泡0.5h，之后加熱1h水溫保持在100℃，過濾；2、濾渣再按質(zhì)量體積比1:4加水，直接加熱1h，溫度依然保持在100℃，過濾，重復(fù)兩次；3、將所獲得的濾液合并，放在3000r/min的離心機(jī)上離心1h；再取上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上提取，加入95%酒精，使混合液乙醇濃度達(dá)80%，靜置24h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收酒精至藥液濃度為1g/mL；115℃高壓滅菌20min，-20℃保存?zhèn)溆?。上述飼料添加劑的使用方法，將添加劑?0～150mL藥液/kg飼料拌入基礎(chǔ)飼料投喂。實(shí)施例3防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑的制備表1防治水貂大腸桿菌病的飼料添加劑配方，由以下重量份的原料制備而成：序號(hào)黃芩杭白菊連翹當(dāng)歸125302030225252525320303025425302525530253025參考表1的配方，取中草藥原料分別制備配方一至五的添加劑，先將中草藥原料粉碎磨成粉末，采用水煎醇沉法提取，再經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)提取獲得，具體如下：1、按重量份數(shù)稱取黃芩、杭白菊、連翹、十六酸異丙酯、聚甘油-3蓖麻醇酸酯、當(dāng)歸，按質(zhì)量體積比1:4加水浸泡0.5h，之后加熱1h水溫保持在100℃，過濾；2、濾渣再按質(zhì)量體積比1:4加水，直接加熱1h，溫度依然保持在100℃，過濾，重復(fù)兩次；3、將所獲得的濾液合并，放在3000r/min的離心機(jī)上離心1h；再取上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上提取，加入95%酒精，使混合液乙醇濃度達(dá)80%，靜置24h，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收酒精至藥液濃度為1g/mL；115℃高壓滅菌20min，-20℃保存?zhèn)溆?。上述飼料添加劑的使用方法，將添加劑?0～150mL藥液/kg飼料拌入基礎(chǔ)飼料投喂。實(shí)施例4抑菌試驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)菌種：大腸埃希氏菌(ATCC25922)2、菌種培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基。3、抑菌實(shí)驗(yàn)分三個(gè)實(shí)驗(yàn)組和一個(gè)對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組分別使用實(shí)施例1至3的飼料添加劑浸出液，其中，實(shí)驗(yàn)組A為實(shí)施例1的浸出液，實(shí)驗(yàn)組B為實(shí)施例2的浸出液，實(shí)驗(yàn)組C為實(shí)施例3的浸出液，對(duì)照組使用生理鹽水。4、具體實(shí)驗(yàn)步驟：1）飼料添加劑浸出液的制備：將實(shí)施例1至3的飼料添加劑各10g分別放入50ml蒸餾水中浸泡2小時(shí)后過500目篩過濾，分別得到3種飼料添加劑的浸出液；2)藥敏感片制備：雙圈牌定性濾紙用打孔器制成直徑6mm的圓紙片放入清潔干燥的青霉素空瓶中，瓶口以單層牛皮紙包扎，121℃高壓滅菌30min，再經(jīng)100℃烘干，密閉保存?zhèn)溆?。在無菌條件下分別將紙片浸泡于實(shí)施例1至3的飼料添加劑浸出液和生理鹽水中2h后，取出濾紙片，室溫下晾干制成藥敏片備用，每種藥物各制備5片藥敏感片；3)制備菌液：大腸埃希氏菌置于10ml營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)18h；取培養(yǎng)液1ml加入9ml的0.9％無菌氯化鈉溶液，采用10倍遞增稀釋法，將菌液分別稀釋至105～106cfu/ml，備用；4)將上述步驟3)制得的菌液均勻接種于甘露醇氯化鈉瓊脂平板上，室溫下靜置5min,將步驟2)中制得的20片藥敏感片平鋪在大腸埃希氏菌接種的瓊脂平板上，將平板倒置放入培養(yǎng)箱中37℃培養(yǎng)24h后，測(cè)量各藥敏片的抑菌圈直徑(mm)，計(jì)算各組的抑菌圈直徑平均值，以上操作均為無菌操作。5、試驗(yàn)觀察測(cè)量：觀察：無抑菌圈以“-”表示；抑菌圈直徑＜10mm為輕度抑菌，以“+”表示；抑菌圈直徑10～14mm為中度抑菌，以“++”表示；抑菌圈直徑＞14mm為高度抑菌，以“+++”表示；對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組A實(shí)驗(yàn)組B實(shí)驗(yàn)組C大腸埃希菌-++++++++實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的飼料添加劑對(duì)水貂大腸桿菌病的致病菌具有較強(qiáng)的的抑制作用，可起到較好的殺菌抑菌，可起到防治該病的效果。實(shí)施例4應(yīng)用實(shí)施例，選擇了40只患有大腸桿菌病的水貂進(jìn)行試驗(yàn)，患貂表現(xiàn)為食欲不振，精神不佳，體溫升高，鼻鏡干燥，糞便稀軟呈黃色或灰色，多少出現(xiàn)下痢，水樣腹瀉及血便，肛門周圍糞。將患貂隨機(jī)均分為3個(gè)實(shí)驗(yàn)組和1個(gè)對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組1至3分別使用實(shí)施例1至3的飼料添加劑，在水貂日常飼料中添加本發(fā)明的飼料添加劑飼喂水貂，所述飼料添加劑在水貂飼料中的添加量為2。5wt％，對(duì)照組水貂飼喂正常飼料，飼喂5天后，統(tǒng)計(jì)幼貂死亡率，并觀察該飼料添加劑的療效，療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)如下：痊愈：臨床癥狀消失，采食和精神恢復(fù)正常；好轉(zhuǎn)：臨床癥狀減輕，食欲和精神有所恢復(fù)；無效：病癥無變化，或加重，或幼貂死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)如下：對(duì)照組實(shí)驗(yàn)1組實(shí)驗(yàn)2組實(shí)驗(yàn)3組治愈(只)0467好轉(zhuǎn)(只)0443無效(只)10200有效率(％)080100100死亡率(％)80000由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，本發(fā)明的飼料添加劑可以有效治療水貂大腸桿菌病，所有患貂在使用期間均無不良反應(yīng)，即該飼料添加劑配方安全有效。當(dāng)前第1頁1 2 3