一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括20.1g/LGN增菌液、8.0g/L乳糖、2.8g/L硫代硫酸鈉、1.5g/L檸檬酸鈉、1.5g/L檸檬酸鐵銨、0.023g/L中性紅、16.5g/L瓊脂，pH值為7.1-7.3。所述的膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20.0g、葡萄糖2.0g、磷酸氫二鉀1.5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5.8g、去氧膽酸鈉0.33g、氯化鈉5.0g、磷酸氫二鉀2.0g。本發(fā)明培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；菌生長迅速，變異率低；便于觀察，分析。
【專利說明】一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明為微生物領(lǐng)域，特別涉及一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 沙門氏菌病的病原體。屬腸桿菌科，革蘭氏陰性腸道桿菌。已發(fā)現(xiàn)的近一千種（或 菌株）。按其抗原成分，可沙門氏菌分為甲、乙、丙、丁、戊等基本菌組。其中與人體疾病有關(guān) 的主要有甲組的副傷寒甲桿菌，乙組的副傷寒乙桿菌和鼠傷寒桿菌，丙組的副傷寒丙桿菌 和豬霍亂桿菌，丁組的傷寒桿菌和腸炎桿菌等。除傷寒桿菌、副傷寒甲桿菌和副傷寒乙桿菌 引起人類的疾病外，大多數(shù)僅能目引起家畜、鼠類和禽類等動物的疾病，但有時也可污染人 類的食物而引起食物中毒。沙門氏菌在水中不易繁殖，但可生存2-3周，冰箱中可生存3-4 個月，在自然環(huán)境的糞便中可存活1-2個月。沙門氏菌最適繁殖溫度為37°C，在20°C以上 即能大量繁殖，因此，低溫儲存食品是一項(xiàng)重要預(yù)防措施。
[0003] 志賀氏菌屬是一類革蘭氏陰性桿菌，是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌，通稱 痢疾桿菌。大小為0.5?0.7X2?3 iim，無芽孢，無莢膜，無鞭毛。多數(shù)有菌毛。革蘭氏陰 性桿菌。為兼性厭氧菌，能在普通培養(yǎng)基上生長，形成中等大小，半透明的光滑型菌落。在 腸道桿菌選擇性培養(yǎng)基上形成無色菌落。生化反應(yīng)分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。VP試驗(yàn)陰性， 不分解尿素，不形成硫化氫，不能利用枸櫞酸鹽作為碳源。宋內(nèi)氏志賀氏菌能遲緩發(fā)酵乳糖 (37。。3 ?4天）。
[0004] 培養(yǎng)基（Medium)是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養(yǎng)料， 一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機(jī)鹽（包括微量元素）以及維生素和水等。有的培養(yǎng) 基還含有抗菌素和色素，用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定。培養(yǎng)基由于配制的原料不同，使用要 求不同，而貯存保管方面也稍有不同。一般培養(yǎng)基在受熱、吸潮后，易被細(xì)菌污染或分解變 質(zhì)，因此一般培養(yǎng)基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴(yán)格滅菌的培養(yǎng)基（如組織培 養(yǎng)基），較長時間的貯存，必須放在3?6°C的冰箱內(nèi)。由于液體培養(yǎng)基不易長期保管，現(xiàn)在 均改制成粉末。
[0005] 培養(yǎng)基根據(jù)化學(xué)分類為天然培養(yǎng)基、組合培養(yǎng)基和半組合培養(yǎng)基；根據(jù)物理分類 為液體培養(yǎng)基、固定培養(yǎng)基和脫水培養(yǎng)基；根據(jù)微生物分類為選擇性培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
[0007] 本發(fā)明運(yùn)用生物化學(xué)，微生物學(xué)及無機(jī)、有機(jī)、分析化學(xué)和熒光技術(shù)的原理，對不 同的碳源、氮源、無機(jī)鹽類、維生素、生長促進(jìn)劑等諸類營養(yǎng)組分的組合進(jìn)行篩選，對培養(yǎng)基 的PH值、離子強(qiáng)度、氧化-還原電勢、表面張力、氣體環(huán)境等物化因子進(jìn)行了比較，研究出了 本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0008] 本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為：
[0009] -種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括20. lg/LGN增菌液、8. Og/L乳糖、 2. 8g/L硫代硫酸鈉、I. 5g/L檸檬酸鈉、I. 5g/L檸檬酸鐵銨、0. 023g/L中性紅、16. 5g/L瓊脂， pH 值為 7. 1-7. 3。
[0010] 所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氫二鉀 1. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
[0011] 本發(fā)明還公開了所述的膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，用于沙門氏菌的選擇性分離。
[0012] 蛋白胨、葡萄糖提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；乳糖為可發(fā)酵的糖類；去氧膽 酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)的大腸菌群和變形桿菌，但不影響沙門氏菌的 生長；硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中心呈黑色；中性紅為PH 指示劑，發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色，不發(fā)酵糖的菌落為無色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
[0013] 稱取本品65. 2g，加熱溶解于IOOOml蒸餾水中，待冷至60°C，傾入無菌平皿。無需 商壓滅菌。
[0014] 本發(fā)明的有益效果：
[0015] 1、培養(yǎng)基組方簡單，制備操作方便，成本低，利于推廣應(yīng)用；
[0016] 2、菌生長迅速，變異率低；
[0017] 3、便于觀察，分析。

【具體實(shí)施方式】 [0018] 實(shí)施例1 :
[0019] 一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，所述培養(yǎng)基的組分包括20. lg/LGN增菌液、8. Og/L乳糖、 2. 8g/L硫代硫酸鈉、I. 5g/L檸檬酸鈉、I. 5g/L檸檬酸鐵銨、0. 023g/L中性紅、16. 5g/L瓊脂， pH 值為 7. 1-7. 3。
[0020] 所述GN增菌液為每升GN增菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氫二鉀 I. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧膽酸鈉0. 33g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
[0021] 蛋白胨、葡萄糖提供碳源、氮源、維生素和礦物質(zhì)；乳糖為可發(fā)酵的糖類；去氧膽 酸鈉和檸檬酸鈉抑制革蘭氏陽性菌及大多數(shù)的大腸菌群和變形桿菌，但不影響沙門氏菌的 生長；硫代硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測硫化氫的產(chǎn)生，使菌落中心呈黑色；中性紅為PH 指示劑，發(fā)酵糖產(chǎn)酸的菌落呈紅色，不發(fā)酵糖的菌落為無色；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
[0022] 稱取本品65. 2g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中，待冷至60°C，傾入無菌平皿。無需 商壓滅菌。
[0023] 在 36 ±1°C 培養(yǎng) 18-24 小時
[0024]

【權(quán)利要求】
1. 一種膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基的組分包括20. lg/LGN增菌液、 8. Og/L乳糖、2. 8g/L硫代硫酸鈉、1. 5g/L檸檬酸鈉、1. 5g/L檸檬酸鐵銨、0. 023g/L中性紅、 16. 5g/L 瓊脂，pH 值為 7. 1-7. 3。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基，其特征在于所述GN增菌液為每升GN增 菌液中含有胰蛋白胨20. 0g、葡萄糖2. 0g、磷酸氫二鉀1. 5g、甘露醇3g、枸櫞酸鈉5. 8g、去氧 膽酸鈉〇· 33g、氯化鈉5. 0g、磷酸氫二鉀2. 0g。
3. -種根據(jù)權(quán)利要求1所述的膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基的應(yīng)用，其特征在于用于沙門氏菌的 選擇性分離。
【文檔編號】C12R1/42GK104293712SQ201410515008
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月29日
【發(fā)明者】高玉成, 劉永祥 申請人:青島康合偉業(yè)商貿(mào)有限公司