一種應用于秸稈高效速腐的復合菌劑及應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于農(nóng)作物秸稈的綜合利用領域，涉及一種應用于秸稈高效速腐的復合菌劑，它是由脫蠟菌劑和解素菌劑組成，其中：所述的脫蠟菌劑為蠟狀芽孢桿菌（Bacilluscereus）、枯草芽孢桿菌（Bacillussubtilis）、巴氏梭菌（Clostridiumpasteurianum）的復合菌劑，所述的解素菌劑為白腐真菌（P.chrysosporium）、曲霉菌（Aspergilusoryzae）、綠色木霉（Trichodermaviride）組成的復合菌劑。其可實現(xiàn)秸稈的高效速腐，并將其轉(zhuǎn)化為環(huán)保的有機肥，實現(xiàn)生物能源的循環(huán)再生。
【專利說明】一種應用于秸稈高效速腐的復合菌劑及應用

【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于農(nóng)作物秸桿的綜合利用領域，涉及一種應用于秸桿高效速腐的復合菌劑及在秸桿高效速腐中的應用。

【背景技術】
[0002]在可利用資源消耗殆盡環(huán)境污染日益嚴重的格局下，我國作為世界上人口基數(shù)最大的國家，能源戰(zhàn)略局面更加嚴重和復雜。同時中國也是一個農(nóng)業(yè)大國，每年的農(nóng)作物秸桿類剩余物(如麥秸、稻草、高粱桿、玉米桿、麻桿。棉花桿等)達到12億噸之多。由于我國的主要農(nóng)作物以小麥和水稻為主，大約占秸桿總量的70%，這是巨大的可再生資源。但是胡亂丟棄，無控焚燒，不僅造成了嚴重的環(huán)境污染還是生物資源的巨大浪費，特別是近來由于秸桿的無控焚燒帶來的惡略霧霾天氣，已經(jīng)嚴重影響到我們的正常生活。
[0003]由于秸桿的主要成分是纖維素、半纖維素、木質(zhì)素等大分子，這三者被稱為植物體的“三素”，“三素”的特點是分子量達到幾萬到幾千萬，結(jié)構緊密有序，康分解能力強非常穩(wěn)定，又因為多數(shù)作物秸桿的表面純在蠟質(zhì)層，更增加的秸桿的分解難度?？梢?，要使秸桿分解的確是一件不易之事，需要能夠產(chǎn)生纖維素酶、半纖維素酶，木質(zhì)素酶的多種微生物共同參與，進行逐步有序的接力分解過程，才能完成秸桿“三素”的分解。所以，在自然界中，秸桿的分解同城需要一個長時間的作用過程，它是依靠自然界中存在的秸桿分解的微生物所產(chǎn)生的能分解“三素”的酶，逐步作用才得以完成的多步驟過程。正是秸桿的分解十分困難，雖然秸桿速解的思想很早就有，也存在十分多的速腐劑產(chǎn)品，但都因為腐解時間長而無法得到推廣應用。如何解決分解時間問題困擾著秸桿速腐劑的發(fā)展。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的之一是為了克服傳統(tǒng)秸桿速腐劑的缺點，提供一種應用于秸桿高效速腐的復合菌劑用于秸桿的綜合利用。其可實現(xiàn)秸桿的高效速腐，并將其轉(zhuǎn)化為環(huán)保的有機肥，實現(xiàn)生物能源的循環(huán)再生。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提供上述應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑的應用方法。
[0006]為實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術方案如下:
一種應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于它是由脫蠟菌劑和解素菌劑組成，其中:所述的脫臘菌劑為臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis )、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)的復合菌劑，所述的解素菌劑為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)組成的復合菌劑。
[0007]按上述方案，所述的脫蠟菌劑是將蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis )和巴氏梭菌混合后進行液體培養(yǎng)得到的，培養(yǎng)方法:采用pH6.8?7.2的通用產(chǎn)孢培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為20?40°C，攪拌速度250?300轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量0.5?lmVlOOOL培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為1?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干燥或冷凍干燥，再打碎成粉。
[0008]按上述方案，所述臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis )和巴氏梭菌(Clostridiumpasteurianum)中各菌用量按有效菌數(shù)計分別為臘狀芽孢桿菌35-40%，枯草芽孢桿菌35-40%，巴氏梭菌20_30%。
[0009]按上述方案，所述的解素菌劑為將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)和促進劑加入容器,在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.5-8.0，培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干得到的；所述的促進劑為小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的質(zhì)量比為40-50:1,所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1。
[0010]按上述方案，所述的白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉(Trichoderma viride)中各菌用量按有效菌數(shù)計為白腐真菌25_30%，曲霉菌25-30%,綠色木霉40-50%,所述促進劑的加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉(Trichoderma viride)總質(zhì)量的 10-12%。
[0011]按上述方案，所述促進劑中Cu(N03)2的質(zhì)量百分比濃度為0.2%。
[0012]上述應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑用于農(nóng)作物秸桿的綜合處理，其應用是先將脫蠟菌劑與解素菌劑分別活化，后加水攪拌配成A劑和B劑，然后先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵，待秸桿失去光澤后，再加入B劑充分混合，自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
[0013]按上述方案，所述每千克秸桿分別取A劑5— 10g和B劑10 — 20g，A劑與B劑質(zhì)量比例為1:1_2，具體比例取決于處理的秸桿種類。
[0014]按上述方案，所述脫蠟菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液100mL，加入5-10g的脫蠟菌劑A劑，加入l_5g尿素，在30_40°C下浸泡3_4h，調(diào)節(jié)pH在
6.8-7.2之間；所述A劑配制用水量為脫蠟菌劑質(zhì)量的600-1000倍；
所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液100mL，加入5-10g的解素菌劑，加入l-5g尿素，在30-40°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.5-8.0之間；所述B劑配制用水量為解素菌劑質(zhì)量的600-1000倍，
按上述方案，所述加入A劑后自然發(fā)酵3-8天，使秸桿失去光澤。
[0015]本發(fā)明的復合菌劑中使用到的菌種可以自行分離鑒定或直接由菌種保藏單位購買使用。
[0016]本發(fā)明提供的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的脫蠟菌劑中的蠟狀芽孢桿菌可產(chǎn)生抗菌物質(zhì)，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的營養(yǎng)成分，改善生態(tài)環(huán)境；產(chǎn)生細菌蛋白酶，用于秸桿類物質(zhì)表面植物蛋白的水解；枯草芽孢桿菌菌體可自身合成α -淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類，輔助蠟狀芽孢桿菌分解植物蛋白及秸桿表面的脂肪類物質(zhì)，另外可以分解部分纖維素；巴氏梭菌能大量利用秸桿中的碳水化合物，主要是一些多糖分解后的產(chǎn)物。通過這三種微生物的協(xié)同作用，可將秸桿表面的蛋白質(zhì)和脂類物質(zhì)的分解的到分解中間產(chǎn)物的進一步分解分解，大大提高脫去秸桿表面難處理的物質(zhì)，從而減輕后續(xù)秸桿“三素”的處理負擔。進而配合解素菌劑中的白腐真菌能夠分泌胞外氧化酶，降解木質(zhì)素，且降解木質(zhì)素的能力優(yōu)于降解纖維素的能力，促使木質(zhì)腐爛成為淡色的海綿狀團塊，曲霉菌可用于產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶和果膠酶的酶制劑和有機酸，有助于秸桿中的大分子糖類的將降解，從而加快秸桿的中間分解產(chǎn)物的消化速率，進一步提高秸桿分解速率；綠色木霉分解纖維素和木質(zhì)素的能力較強，能分解大部分的纖維素和半纖維素，最終達到秸桿高效速腐的目的。
[0017]本發(fā)明的特點是:
1.本發(fā)明提供的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑按照分解的難易程度，分步分解秸桿能大大縮短秸桿腐熟的時間。
[0018]2.本發(fā)明提供的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑分泌的酶能有效的分解秸桿中的“三素”。
[0019]3.本發(fā)明提供的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑能為土地提供大量的有機質(zhì)肥料和無機肥料，可適當減少化肥的使用。

【具體實施方式】
[0020]實施例1
1.脫臘囷劑制備:
按有效菌數(shù)計以臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus):枯草芽孢桿(Bacillus subtilis):巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)為35%: 35%: 30%的比例將三者加入通用產(chǎn)孢培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為pH為6.8，培養(yǎng)溫度為20°C，攪拌速度250轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量0.5m3/1000L培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為1?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干燥或冷凍干燥，再打碎成粉，得到脫蠟菌劑制劑。
[0021]2.解素菌劑制備
按有效菌數(shù)計將白腐真菌(p.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)按25%:25%:50%的比例加入容器，另外加入促進劑即小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的質(zhì)量比為50:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1，所述促進劑中Cu(N03)2的質(zhì)量百分比濃度為0.2%。所述促進劑加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉菌總質(zhì)量的10%，在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.5，培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干，得到解素菌劑。
[0022]脫蠟菌劑和解素菌劑組成應用于秸桿高效速腐的復合菌劑。
[0023]應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的使用:
A劑與B劑制備；
A劑制備:將脫蠟菌劑活化，然后加入脫蠟菌劑質(zhì)量600倍的水，配得A劑，所述脫蠟菌劑的活化方法為取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液100mL，加入5g的脫蠟菌劑，加入lg尿素，在30°C下浸泡3h，調(diào)節(jié)pH在6.8 ;
B劑制備:將解素菌劑活化，然后加入解素菌劑質(zhì)量600倍的水，配得B劑，所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液100mL，加入5g解素菌劑，加入lg尿素，在30°C下浸泡3h，調(diào)節(jié)pH在7.5，
每千克秸桿分別取A劑與B劑5g和10g。先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵。待秸桿失去光澤后(大約3— 8天)，再加入B劑充分混合。自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
[0024]實施例2
1.脫臘囷劑制備:
按有效菌數(shù)計以臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus):枯草芽孢桿(Bacillus subtilis):巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)為36%: 36%: 28%的比例將三者加入通用產(chǎn)孢培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為PH為6.9，培養(yǎng)溫度為25°C，攪拌速度260轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量
0.5m3/1000L培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為I?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干或冷凍干干燥，再打碎成粉，得到脫蠟菌劑制劑。。
[0025]2.解素菌劑制備
按有效菌數(shù)計將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)按26%:26%:48%的比例加入容器,另外加入促進劑即小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的質(zhì)量比為40:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1，所述促進劑中Cu(NO3)2的質(zhì)量百分比濃度為
0.2%。所述促進劑加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉菌總質(zhì)量的10.5%，在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.6，培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干，得到解素菌劑。
[0026]脫蠟菌劑和解素菌劑組成應用于秸桿高效速腐的復合菌劑。
[0027]應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的使用:
A劑與B劑制備；
A劑制備:將脫蠟菌劑活化，然后加入脫蠟菌劑質(zhì)量700倍的水，配得A劑，所述脫蠟菌劑的活化方法為取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液lOOmL，加入6g的脫蠟菌劑，加入2g尿素，在32°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在6.9 ;
B劑制備:將解素菌劑活化，然后加入解素菌劑質(zhì)量700倍的水，配得B劑，所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液lOOmL，加入6g解素菌劑，加入2g尿素，在32°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.6。
[0028]每千克秸桿分別取A劑與B劑6g和12g。先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵。待秸桿失去光澤后(大約3— 8天)，再加入B劑充分混合。自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
[0029]實施例3
1.脫臘囷劑制備:
按有效菌數(shù)計以臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus):枯草芽孢桿(Bacillus subtilis):巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)為37%:37%:26%的比例將三者加入通用產(chǎn)孢培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為PH為7.0，培養(yǎng)溫度為30°C，攪拌速度270轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量0.7mVlOOOL培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為I?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干或冷凍干干燥，再打碎成粉，制得脫蠟菌劑制劑。
[0030]2.解素菌劑制備
按有效菌數(shù)計將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)按28%:28%:44%的比例加入容器，另外加入促進劑即小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的質(zhì)量比為45:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1。所述促進劑加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉菌總質(zhì)量的11%,在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.7，培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干，得到解素菌劑。
[0031 ] 脫蠟菌劑和解素菌劑組成應用于秸桿高效速腐的復合菌劑。
[0032]應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的使用:
A劑與B劑制備；
A劑制備:將脫蠟菌劑活化，然后加入脫蠟菌劑質(zhì)量800倍的水，配得A劑，所述脫蠟菌劑的活化方法為取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液lOOmL，加入7g的脫蠟菌劑，加入3g尿素，在34°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.0 ;
B劑制備:將解素菌劑活化，然后加入解素菌劑質(zhì)量800倍的水，配得B劑，所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖lOOmL，加入7g解素菌劑，加入3g尿素，在34°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.8。
[0033]每千克秸桿分別取A劑與B劑7g和Hg。先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵。待秸桿失去光澤后(大約3— 8天)，再加入B劑充分混合。自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
[0034]實施例4
1.脫臘囷劑制備:
按有效菌數(shù)計以臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus):枯草芽孢桿(Bacillus subtilis):巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) =38%: 38%: 24%的比例將三者加入通用產(chǎn)抱培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為PH為7.1，培養(yǎng)溫度為35°C，攪拌速度280轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量0.8mVlOOOL培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為I?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干或冷凍干干燥，再打碎成粉，制得脫蠟菌劑制劑。
[0035]2.解素菌劑制備
按有效菌數(shù)計將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)按29%:29%:42%的比例加入容器，另外加入促進劑即小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的質(zhì)量比為50:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1。所述促進劑加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉菌總質(zhì)量的11.5%,在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.8，培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干，得到解素菌劑。
[0036]脫蠟菌劑和解素菌劑組成應用于秸桿高效速腐的復合菌劑。
[0037]應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的使用:
A劑與B劑制備；
A劑制備:將脫蠟菌劑活化，然后加入脫蠟菌劑質(zhì)量900倍的水，配得A劑，所述脫蠟菌劑的活化方法為取葡萄糖含量2 wt %的葡萄糖溶液lOOmL，加入8g的脫蠟菌劑，加入4g尿素，在36°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.1 ; B劑制備:將解素菌劑活化，然后加入解素菌劑質(zhì)量900倍的水，配得B劑，所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量為2 wt %的糖水lOOmL，加入8g解素菌劑，加入4g尿素，在36°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在?.9。
[0038]每千克秸桿分別取A劑與B劑8g和16g。先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵。待秸桿失去光澤后(大約3— 8天)，在加入B劑充分混合。自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
[0039]實施例5
1.脫臘囷劑制備:
按有效菌數(shù)計以臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus):枯草芽孢桿(Bacillus subtilis):巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum) =39%: 39%: 22%的比例加入通用產(chǎn)抱培養(yǎng)基中。培養(yǎng)基為pH為7.2，培養(yǎng)溫度為40°C，攪拌速度300轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量1.0mVlOOOL培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為I?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干或冷凍干干燥，再打碎成粉，制得脫蠟菌劑制劑。
[0040]2.解素菌劑制備
按有效菌數(shù)計將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)按30%:30%:40%的比例加入容器，另外加入促進劑即小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(NO3)2的質(zhì)量比為50:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1，促進劑中Cu (NO3) 2的質(zhì)量百分比濃度為0.2%。所述促進劑加入量為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉菌總質(zhì)量的12%，在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在8.0，培養(yǎng)時間為2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干，得到解素菌劑。
[0041 ] 脫蠟菌劑和解素菌劑組成應用于秸桿高效速腐的復合菌劑。
[0042]應用于秸桿高效速腐的復合菌劑的使用:
A劑與B劑制備；
A劑制備:將脫蠟菌劑活化，然后加入脫蠟菌劑質(zhì)量1000倍的水，配得A劑，所述脫蠟菌劑的活化方法為取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液lOOmL，加入1g的脫蠟菌劑，加入5g尿素，在40°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.2;
B劑制備:將解素菌劑活化，然后加入解素菌劑質(zhì)量1000倍的水，配得B劑，所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液lOOmL，加入1g解素菌劑，加入5g尿素，在40°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在8.0。
[0043]每千克秸桿分別取A劑與B劑1g和20g。先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵。待秸桿失去光澤后(大約3— 8天)，再加入B劑充分混合。自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
【權利要求】
1.一種應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:它是由脫蠟菌劑和解素菌劑組成，其中:所述的脫臘菌劑為臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis )、巴氏梭菌(Clostridium pasteurianum)的復合菌劑，所述的解素菌劑為白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)組成的復合菌劑。
2.根據(jù)權利要求1所述的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:所述的脫蠟菌劑是將臘狀芽抱桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis )和巴氏梭菌混合后進行液體培養(yǎng)得到的，培養(yǎng)方法:采用PH6.8?7.2的通用產(chǎn)孢培養(yǎng)基，培養(yǎng)溫度為20?40°C，攪拌速度250?300轉(zhuǎn)/分鐘，無菌通氣量0.5?lm3/1000L培養(yǎng)基，培養(yǎng)時間為1?3天，培養(yǎng)后用離心、加吸附劑板框過濾方法收集芽孢和菌體，采用80°C以下的風干、噴霧干燥或冷凍干燥，再打碎成粉。
3.根據(jù)權利要求2所述的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:所述蠟狀芽抱桿菌(Bacillus cereus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis )和巴氏梭菌(Clostridiumpasteurianum)中各菌用量按有效菌數(shù)計分別為臘狀芽孢桿菌35-40%,枯草芽孢桿菌35-40%，巴氏梭菌20-30%。
4.根據(jù)權利要求1所述的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:所述的解素菌劑為將白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)、綠色木霉(Trichoderma viride)和促進劑加入容器,在常溫下攪拌均勻，調(diào)節(jié)pH在7.5-8.0,培養(yǎng)2-5天，常溫晾干或者在低于60°C烘干得到的；所述的促進劑為小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的水溶液，所述的促進劑中小分子氧化還原性的輔因子抗敗血酸與沒食子酸鹽的復合物和Cu(N03)2的質(zhì)量比為40-50:1，所述抗敗血酸與沒食子酸鹽的質(zhì)量比為1:1。
5.根據(jù)權利要求4所述的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:所述的白腐真菌(P.chrysosporium)、曲霉菌(Aspergilus oryzae)和綠色木霉(Trichoderma viride)中各菌用量按有效菌數(shù)計為白腐真菌25-30%，曲霉菌25-30%，綠色木霉40_50%，所述促進劑的加入量為白腐真菌、曲霉菌和綠色木霉總質(zhì)量的10-12%。
6.根據(jù)權利要求4所述的應用于秸桿高效速腐的復合菌劑，其特征在于:所述促進劑中Cu(N03)2的質(zhì)量百分比濃度為0.2%。
7.如權利要求1所述的應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑用于農(nóng)作物秸桿的綜合處理，其特征在于:其應用是先將脫蠟菌劑與解素菌劑分別活化，后加水攪拌配成A劑和B齊U，然后先將A劑與秸桿充分混合，自然發(fā)酵，待秸桿失去光澤后，再加入B劑充分混合，自然發(fā)酵，待秸桿呈現(xiàn)黑色粉末時即發(fā)酵完成，最終使秸桿分解還田。
8.根據(jù)權利要求7所述的應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑用于農(nóng)作物秸桿的綜合處理，其特征在于:所述每千克秸桿分別取A劑5 — 10g和B劑10 — 20g，A劑與B劑質(zhì)量比例為1:1_2，具體比例取決于處理的秸桿種類。
9.根據(jù)權利要求7所述的應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑用于農(nóng)作物秸桿的綜合處理，其特征在于:所述脫蠟菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液100mL，加入5-10g的脫蠟菌劑A劑，加入l_5g尿素，在30_40°C下浸泡3_4h，調(diào)節(jié)pH在6.8-7.2之間；所述A劑配制用水量為脫蠟菌劑質(zhì)量的600-1000倍； 所述解素菌劑的活化方法為:取葡萄糖含量2wt%的葡萄糖溶液lOOmL，加入5-10g的解素菌劑，加入l-5g尿素，在30-40°C下浸泡3-4h，調(diào)節(jié)pH在7.5-8.0之間；所述B劑配制用水量為解素菌劑質(zhì)量的600-1000倍。
10.根據(jù)權利要求7所述的應用于秸桿高效速腐的復合絲狀菌劑用于農(nóng)作物秸桿的綜合處理，其特征在于:所述加入A劑后自然發(fā)酵3-8天，使秸桿失去光澤。
【文檔編號】C12N1/14GK104293701SQ201410480655
【公開日】2015年1月21日 申請日期:2014年9月19日 優(yōu)先權日:2014年9月19日
【發(fā)明者】曾德芳, 李壯, 杜友福, 李華峰, 劉常清, 王晨陽, 王飛宇, 田小鳳 申請人:武漢理工大學