糞便樣品穩(wěn)定液及制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，公開了一種糞便樣品穩(wěn)定液，穩(wěn)定液中成分如下：0.02M-4M硫氰酸胍（Guanidinethiocyanate）、pH=5-10且濃度為2-20M的Tris-HCI、0.05-0.1mMNaCI、1-15mMEDTA。本發(fā)明可有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩(wěn)定性，使病人在家中自助樣品提取成為可能，該糞便穩(wěn)定液不會有礙下游檢測（核酸提取和檢測），糞便和穩(wěn)定液的混合物可以直接進入檢測流程，極大地方便了糞便樣品的后續(xù)處理流程靈活性，有助于消化系統(tǒng)疾病的檢測和治療。
【專利說明】糞便樣品穩(wěn)定液及制備方法與應(yīng)用

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及分子生物學(xué)領(lǐng)域，尤其涉及了一種糞便樣品穩(wěn)定液。

【背景技術(shù)】
[0002]目前，醫(yī)院或體檢中心的糞便化驗，樣品因不穩(wěn)定而不能保存，必須立即送檢。這給病人造成了一定的不便，給醫(yī)護人員增加了工作負擔(dān)，同時，也給檢測實驗室也增加了運作和及時提供結(jié)果的難度。因此病人配合提供樣品的比例下降，使后續(xù)相關(guān)的醫(yī)療手段的有效性也受到影響。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是提供一種能夠有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩(wěn)定性，無毒或腐蝕成分，不妨礙下游檢測，操作安全方便的糞便樣品穩(wěn)定液。
[0004]為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案得以解決:
一種糞便樣品穩(wěn)定液，所述的穩(wěn)定液由Tris (三羥甲基氨基甲烷)、硫氰酸胍(Guanidine th1cyanate)、乙二胺四乙酸(EDTA)、氯化鈉及水組成；所述硫氰酸胍的終濃度為0.02M-4M, Tris的終濃度為2_20mM，氯化鈉的終濃度為0.05-0.1mM、乙二胺四乙酸的終濃度為l_15mM。
[0005]上述糞便樣品穩(wěn)定液的制備方法如下:
將Tris溶于水中，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為5-10，制得Tris-HCI溶液；將乙二胺四乙酸溶于水，用鹽酸調(diào)節(jié)PH為5-10，制得EDTA溶液；將氯化鈉溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，殺菌，得到糞便樣品穩(wěn)定液。
[0006]取按照上述配比配制的糞便樣品穩(wěn)定液，加入與穩(wěn)定液等體積的糞便樣品，混勻；控制溫度在50攝氏度以內(nèi)，保存。
[0007]本發(fā)明由于采用了以上技術(shù)方案，具有顯著的技術(shù)效果:
本發(fā)明可有效保持糞便樣品中被檢測成分的穩(wěn)定性，使病人在家中自助樣品提取成為可能，該糞便穩(wěn)定液不會有礙下游檢測(核酸提取和檢測)，糞便和穩(wěn)定液的混合物可以直接進入檢測流程，極大地方便了糞便樣品的后續(xù)處理流程靈活性，有助于消化系統(tǒng)疾病的檢測和治療。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0008]圖1是實施例1糞便樣品與穩(wěn)定液混合并提取核酸后，熒光實時PCR檢測其中肌動蛋白基因(Actin)的曲線圖。

【具體實施方式】
[0009]下面結(jié)合附圖1與實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述:
實施例1配制糞便樣品穩(wěn)定液，配方如下:
0.02-4M 硫氰酸狐(Guanidine th1cyanate),2_20mM Tris-HCI(pH=5-10),0.05-0.1mMNaCI,l_15mM EDTA。
[0010]其制備方法如下:
將Tris溶于水中，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為5-10，制得Tris-HCI溶液；將乙二胺四乙酸溶于水，用鹽酸調(diào)節(jié)PH為5-10，制得EDTA溶液；將氯化鈉溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，殺菌，得到糞便樣品穩(wěn)定液。
[0011]取配制好的糞便樣品穩(wěn)定液，加入與穩(wěn)定液等體積的糞便樣品，混勻；控制溫度在50攝氏度以內(nèi)，保存。
[0012]對比實驗:不添加本發(fā)明糞便樣品穩(wěn)定液，室溫條件下，不同保存天數(shù)，檢測所提取的DNA含量,見下表:

【權(quán)利要求】
1.一種糞便樣品穩(wěn)定液，其特征在于:所述的穩(wěn)定液由Tris、硫氰酸胍、乙二胺四乙酸、氯化鈉及水組成；所述硫氰酸胍的終濃度為0.02M-4M，Tris的終濃度為2_20mM，氯化鈉的終濃度為0.05-0.1禮、乙二胺四乙酸的終濃度為1-15禮。
2.—種如權(quán)利要求1所述的糞便樣品穩(wěn)定液的制備方法，其特征在于: 將Tris溶于水中，用鹽酸調(diào)節(jié)pH為5-10，制得Tris-HCI溶液；將乙二胺四乙酸溶于水，用鹽酸調(diào)節(jié)PH為5-10，制得EDTA溶液；將氯化鈉溶于水中，并加入硫氰酸胍、Tris-HCI溶液、EDTA溶液混合后，殺菌，得到糞便樣品穩(wěn)定液。
3.—種如權(quán)利要求1所述的糞便樣品穩(wěn)定液的應(yīng)用，其特征在于:取配制好的糞便樣品穩(wěn)定液，加入與穩(wěn)定 液等體積的糞便樣品，混勻；控制溫度在50攝氏度以內(nèi)，保存。
【文檔編號】C12Q1/68GK104073564SQ201410334771
【公開日】2014年10月1日 申請日期:2014年7月15日 優(yōu)先權(quán)日:2014年7月15日
【發(fā)明者】岳漢軍, 陳一友, 呂寧 申請人:浙江諾輝生物技術(shù)有限公司