一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配置方法及其配制的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法及其配置的培養(yǎng)基，方法包括混合5重量份的K2HPO4、5重量份的KH2PO4、4重量份的MgSO4·7H2O、2重量份的NaCl，加入以重量份單位為克相比的1ml的1wt％的檸檬酸鐵溶液，和1ml的1wt％的MnSO4溶液，再加入200重量份的大豆粉，4重量份的CaCO3，然后用量筒量取1000ml的蒸餾水，并攪拌至完全溶解，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH值為6.8-7.0，將培養(yǎng)基裝入錐形瓶，簡(jiǎn)單的封口，用高壓滅菌鍋在121℃滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到0Pa，取出培養(yǎng)基自然降溫。該方法活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基。
【專利說(shuō)明】一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配置方法及其配制的培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基的配置方法及其配置的培養(yǎng)基，特別的，本發(fā)明涉及一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基配置方法及其配置的培養(yǎng)基。

【背景技術(shù)】
[0002]接種根瘤菌劑已成為世界各國(guó)豆科作物增產(chǎn)的一項(xiàng)技術(shù)措施。根瘤菌劑主要有瓊月旨、固體、顆粒、液體和動(dòng)感等5種主要?jiǎng)┬?。瓊脂劑型是最早?yīng)用的菌劑，也是應(yīng)用較為廣泛的劑型。在許多國(guó)家都有大規(guī)模的商品菌劑生產(chǎn)和出售，應(yīng)用面積也不斷擴(kuò)大。因此，如何能夠得到活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基成為現(xiàn)有技術(shù)亟需解決的技術(shù)問(wèn)題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提出一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基配置方法及其配制的培養(yǎng)基。使得能夠獲得活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基。
[0004]為達(dá)此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案:
[0005]一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，包括如下步驟:
[0006]步驟1.準(zhǔn)確稱取5重量份的K2HP04、5重量份的KH2P04、4重量份的MgSO4.7H20、2重量份的NaCl，置于大燒杯中；
[0007]步驟2.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物，單位為克,往所述大燒杯中加入Iml的Iwt %的檸檬酸鐵溶液，和Iml的Iwt %的MnSO4溶液；
[0008]步驟3.準(zhǔn)確稱取大豆粉200重量份置于大燒杯中，所述大豆粉為干大豆磨成粉狀，剔除表皮制成；
[0009]步驟4.準(zhǔn)確稱取4重量份的CaCO3置于玻璃容器中，將步驟3得到的混合物與CaCO3在玻璃容器中混合；
[0010]步驟5.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物，用量筒量取100ml的蒸餾水加入所述玻璃容器中，用玻璃棒攪拌至完全溶解并混合均勻得到培養(yǎng)基；
[0011]步驟6.調(diào)節(jié)所述培養(yǎng)基的pH值為6.8-7.0 ；
[0012]步驟7.所述培養(yǎng)基裝入錐形瓶中，簡(jiǎn)單的封口，用高壓滅菌鍋在121°C滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到OPa，取出培養(yǎng)基，置于無(wú)菌操作臺(tái)上，讓其自然降溫。
[0013]優(yōu)選地，在步驟4中，還和CaCO3 —起加入300重量份的瓊脂，同時(shí)在步驟7之后，還具有步驟8，待培養(yǎng)基溫度降到約60°C，以無(wú)菌操作將培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的有蓋培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿放置少量的培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，使所述培養(yǎng)皿的蓋子向下。
[0014]優(yōu)選地，其中，無(wú)菌操作要求為:將培養(yǎng)基從所述錐形瓶中倒入所述培養(yǎng)皿中在酒精燈的無(wú)菌區(qū)來(lái)操作，但不能離火焰太近，倒培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)皿的蓋子的開口不超過(guò)45°。
[0015]優(yōu)選地，步驟4中所述玻璃容器為所述大燒杯，或試管。
[0016]優(yōu)選地，其中，配置檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法為:取檸檬酸鐵或MnSO4Ig放入小燒杯中，加10ml蒸餾水溶解，如果是配置檸檬酸鐵溶液，一邊加熱一邊攪拌，加熱前應(yīng)在10ml位置處做標(biāo)線，加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)水分，保證溶劑恒量。
[0017]優(yōu)選地，在步驟2中添加檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法:用移液槍移液至大燒杯中，移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度，吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2 — 3毫米，在吸液之前，先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴，并保證吸液嘴上不能懸掛有液滴。
[0018]優(yōu)選地，在步驟6中調(diào)節(jié)pH值的方法為:用pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的pH值，如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/L NaOH邊加邊攪拌，反之，用lmol/L HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)，將pH調(diào)節(jié)至6.8-7.0。
[0019]優(yōu)選地，所述培養(yǎng)基各個(gè)成分的配比為:大豆粉10g，K2HPO40.25g，KH2PO40.25g，MgSO4.7Η200.2g, NaCl0.lg, CaCO30.2g, Iwt % 的檸檬酸鐵 lml, Iwt % ^ MnSO4Iml,蒸餾水100ml0
[0020]本發(fā)明還公開了一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基，采用上述的方法制成。
[0021]因此，本發(fā)明通過(guò)不同培養(yǎng)基的比較和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得到了活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基?？梢詰?yīng)用于礦山生態(tài)治理、土壤生態(tài)修復(fù)、根瘤菌的擴(kuò)繁及研究等領(lǐng)域。

【具體實(shí)施方式】
[0022]本發(fā)明意在尋找一種最優(yōu)的培養(yǎng)基的配比，促進(jìn)根瘤菌快速生長(zhǎng)，保證培養(yǎng)基中的活菌數(shù)量高，生產(chǎn)成本低，以達(dá)到經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益的雙贏。通過(guò)不同培養(yǎng)基的比較和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得到了活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基的配置方法，包括如下步驟:
[0023]
[0024]步驟1.準(zhǔn)確稱取5重量份的K2HP04、5重量份的KH2P04、4重量份的MgSO4.7H20、2重量份的NaCl，置于大燒杯中；
[0025]步驟2.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物，單位為克,往所述大燒杯中加入Iml的Iwt %的檸檬酸鐵溶液，和Iml的Iwt %的MnSO4溶液；
[0026]步驟3.準(zhǔn)確稱取大豆粉200重量份置于大燒杯中，所述大豆粉為干大豆磨成粉狀，剔除表皮制成；
[0027]步驟4.準(zhǔn)確稱取4重量份的CaCO3置于玻璃容器中，將步驟3得到的混合物與CaCO3在玻璃容器中混合；
[0028]步驟5.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物，用量筒量取100ml的蒸餾水加入所述玻璃容器中，用玻璃棒攪拌至完全溶解并混合均勻得到培養(yǎng)基。
[0029]步驟6.調(diào)節(jié)所述培養(yǎng)基的pH值為6.8-7.0。例如，用pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的pH值。如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/L NaOH邊加邊攪拌，反之，用lmol/L HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)，將pH調(diào)節(jié)至6.8-7.0。
[0030]步驟7.將配制好的培養(yǎng)基裝入錐形瓶中，簡(jiǎn)單的封口。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)知道，簡(jiǎn)單的封口指的是封閉開口，但不做到密封。例如，棉塞塞住瓶口后用干凈的報(bào)紙和橡皮筋扎口，或者如果使用無(wú)蓋的錐形瓶滅菌，可在瓶口包上一層鋁箔紙，不能密閉，以免受熱膨脹把容器脹碎。用高壓滅菌鍋在121°C滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到OPa，取出培養(yǎng)基，置于無(wú)菌操作臺(tái)上，讓其自然降溫。
[0031]根據(jù)上述的方法，可以培養(yǎng)出培養(yǎng)基，通常為液體培養(yǎng)基。
[0032]優(yōu)選的，在步驟4中，還和CaCO3 —起加入300重量份的瓊脂，同時(shí)在步驟7之后，還具有步驟8，待培養(yǎng)基溫度降到約60°C，以無(wú)菌操作將培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的有蓋培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿放置少量的培養(yǎng)基，例如約15-20ml的培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，使所述培養(yǎng)皿的蓋子向下。這樣就能夠制造出固體培養(yǎng)基。
[0033]其中，無(wú)菌操作要求為:將培養(yǎng)基從所述錐形瓶中倒入所述培養(yǎng)皿中在酒精燈的無(wú)菌區(qū)來(lái)操作，但不能離火焰太近，倒培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)皿的蓋子的開口不宜過(guò)大，開口過(guò)大易污染培養(yǎng)基，優(yōu)選地，所述蓋子的開口不超過(guò)45°。
[0034]其中，在配置檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法為:取檸檬酸鐵或MnSO4Ig放入小燒杯中，加10ml蒸餾水溶解，如果是配置檸檬酸鐵，由于檸檬酸鐵難溶，需一邊加熱一邊攪拌，加熱前應(yīng)在10ml位置處做標(biāo)線，加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)水分，保證溶劑恒量。
[0035]進(jìn)一步的，在步驟2中添加檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法:用移液槍溶液至大燒杯中，移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2 - 3毫米，在吸液之前，先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí))，并保證吸液嘴上不能懸掛有液滴。
[0036]其中，步驟4中所述玻璃容器可以仍然為所述大燒杯，即將4重量份的CaCO3放入大燒杯中與步驟3得到的混合物混合。步驟4中的所述玻璃容器也可以為試管，以便進(jìn)行分裝，在配置固體培養(yǎng)基時(shí)，CaCO3和瓊脂在常溫下屬難溶物質(zhì)，優(yōu)選，將CaCO3和瓊脂放入試管內(nèi)，以便進(jìn)行精確的配比，以確保得到的各個(gè)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)成分相同，同時(shí)避免了過(guò)量的營(yíng)養(yǎng)元素對(duì)根瘤菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制。
[0037]實(shí)施例1:液體培養(yǎng)基
[0038]成分配比
[0039]大豆粉10g, K2HPO40.25g, KH2PO40.25g, MgSO4.7Η200.2g, NaCl0.lg, CaCO30.2g,檸檬酸鐵(I % ) lml, MnSO4 (I % ) lml 瓊脂 15g,蒸懼水 1000ml。
[0040]具體配制方法
[0041]1.按所需培養(yǎng)基比例，用天平準(zhǔn)確稱取K2HP04、KH2PO4, MgSO4.7H20、NaCl，置于大燒杯中。
[0042]2.檸檬酸鐵、MnSO4各稱取Ig放入小燒杯中，加10ml蒸餾水溶解，檸檬酸鐵難溶需一邊加熱一邊攪拌，加熱前應(yīng)在10ml位置處做標(biāo)線，加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)水分，保證溶劑恒量；用移液槍分別移取一定比例的溶液至大燒杯中。移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2 - 3_。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴，尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí)，應(yīng)保證吸液嘴上不能懸掛有液滴。
[0043]3.按一定比例稱取大豆粉置于大燒杯中，大豆粉為干大豆磨成粉狀，剔除表皮而成。
[0044]4.按比例稱取CaCO3置于大燒杯中。
[0045]5.用量筒量取一定比例的蒸餾水加入大燒杯中，用玻璃棒攪拌至完全溶解并混合均勻。
[0046]6.調(diào)節(jié)pH值。用pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的pH值。如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/L NaOH邊加邊攪拌，反之，用lmol/L HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)，將pH調(diào)節(jié)至6.8-7.0。
[0047]7.將配制好的培養(yǎng)基裝入錐形瓶中，棉塞塞住瓶口后用干凈的報(bào)紙和橡皮筋扎口，如用無(wú)蓋的錐形瓶滅菌，可在瓶口包上一層鋁箔紙，不能密閉，以免受熱膨脹把容器脹碎。用高壓滅菌鍋在121°C滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到OPa，取出培養(yǎng)基，置于無(wú)菌操作臺(tái)上，讓其自然降到常溫。
[0048]實(shí)施例2，配置固體培養(yǎng)基
[0049]成分配比
[0050]大豆粉10g, K2HPO40.25g, KH2PO40.25g, MgSO4.7Η200.2g, NaCl0.lg, CaCO30.2g,檸檬酸鐵(I % ) lml, MnSO4 (I % ) lml 瓊脂 15g,蒸懼水 1000ml。
[0051]配置方法
[0052]1.按所需培養(yǎng)基比例，用天平準(zhǔn)確稱取K2HP04、KH2PO4, MgSO4.7H20、NaCl，置于大燒杯中。
[0053]2.檸檬酸鐵、MnSO4各稱取Ig放入小燒杯中，加10ml蒸餾水溶解，檸檬酸鐵難溶需一邊加熱一邊攪拌，加熱前應(yīng)在10ml位置處做標(biāo)線，加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)水分，保證溶劑恒量；用移液槍分別移取一定比例的溶液至大燒杯中。移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度。吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2 — 3毫米。在吸液之前，可以先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴，尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時(shí)，應(yīng)保證吸液嘴上不能懸掛有液滴。
[0054]3.按一定比例稱取大豆粉置于大燒杯中，大豆粉為干大豆磨成粉狀，剔除表皮而成。
[0055]4.按比例稱取瓊脂、CaCO3置于試管中，將步驟3中的混合物加入試管中，以便進(jìn)行精確測(cè)量，確保各個(gè)培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)成分相同，同時(shí)避免了過(guò)量的營(yíng)養(yǎng)元素對(duì)根瘤菌的生長(zhǎng)產(chǎn)生抑制。
[0056]5.用量筒量取一定比例的蒸餾水加入試管中，用玻璃棒攪拌至完全溶解并混合均勻。
[0057]6.調(diào)節(jié)pH值。用pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的pH值。如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/L NaOH邊加邊攪拌，反之，用lmol/L HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)，將pH調(diào)節(jié)至6.8-7.0。
[0058]7.將配制好的培養(yǎng)基裝入錐形瓶中，棉塞塞住瓶口后用干凈的報(bào)紙和橡皮筋扎口，如用無(wú)蓋的錐形瓶滅菌，可在瓶口包上一層鋁箔紙，不能密閉，以免受熱膨脹把容器脹碎。用高壓滅菌鍋在121°C滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到OPa，取出培養(yǎng)基，置于無(wú)菌操作臺(tái)上，讓其自然降溫。
[0059]8倒板.待培養(yǎng)基溫度降到60°C左右，以無(wú)菌操作倒入無(wú)菌的有蓋培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿約15-20ml的培養(yǎng)基。待培養(yǎng)基冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，使所述培養(yǎng)皿的蓋子向下。其中，無(wú)菌操作要求為:將培養(yǎng)基從所述錐形瓶中倒入所述培養(yǎng)皿中在酒精燈的無(wú)菌區(qū)來(lái)操作，但不能離火焰太近，倒培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)皿的蓋子的開口不宜過(guò)大，開口過(guò)大易污染培養(yǎng)基，優(yōu)選地，所述蓋子的開口不超過(guò)45°。
[0060] 本發(fā)明還公開了一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基，采用上述的方法制的。
[0061]因此，本發(fā)明通過(guò)不同培養(yǎng)基的比較和優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，得到了活菌數(shù)高，生產(chǎn)成本低，適合大量工業(yè)發(fā)酵的培養(yǎng)基?？梢詰?yīng)用于礦山生態(tài)治理、土壤生態(tài)修復(fù)、根瘤菌的擴(kuò)繁及研究等領(lǐng)域。
[0062]以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明，不能認(rèn)定本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】?jī)H限于此，對(duì)于本發(fā)明所屬【技術(shù)領(lǐng)域】的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單的推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書確定保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，包括如下步驟: 步驟1.準(zhǔn)確稱取5重量份的K2HP04、5重量份的KH2P04、4重量份的MgSO4.7Η20、2重量份的NaCl，置于大燒杯中； 步驟2.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物，單位為克，往所述大燒杯中加入1ml的Iwt %的檸檬酸鐵溶液，和Iml的Iwt %的MnSO4溶液； 步驟3.準(zhǔn)確稱取大豆粉200重量份置于大燒杯中，所述大豆粉為干大豆磨成粉狀，剔除表皮制成； 步驟4.準(zhǔn)確稱取4重量份的CaCO3置于玻璃容器中，將步驟3得到的混合物與CaCO3在玻璃容器中混合； 步驟5.相對(duì)于步驟I中的16重量份的混合物,用量筒量取100ml的蒸懼水加入所述玻璃容器中，用玻璃棒攪拌至完全溶解并混合均勻得到培養(yǎng)基； 步驟6.調(diào)節(jié)所述培養(yǎng)基的pH值為6.8-7.0 ； 步驟7.所述培養(yǎng)基裝入錐形瓶 中，簡(jiǎn)單的封口，用高壓滅菌鍋在121°C滅菌40分鐘，待滅菌鍋壓力降到OPa，取出培養(yǎng)基，置于無(wú)菌操作臺(tái)上，讓其自然降溫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 在步驟4中，還和CaCO3 —起加入300重量份的瓊脂，同時(shí)在步驟7之后，還具有步驟8，待培養(yǎng)基溫度降到約60°C，以無(wú)菌操作將培養(yǎng)基倒入無(wú)菌的有蓋培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿放置少量的培養(yǎng)基，待培養(yǎng)基冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，使所述培養(yǎng)皿的蓋子向下。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 其中，無(wú)菌操作要求為:將培養(yǎng)基從所述錐形瓶中倒入所述培養(yǎng)皿中在酒精燈的無(wú)菌區(qū)來(lái)操作，但不能離火焰太近，倒培養(yǎng)基時(shí)培養(yǎng)皿的蓋子的開口不超過(guò)45°。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 步驟4中所述玻璃容器為所述大燒杯，或試管。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 其中，配置檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法為:取檸檬酸鐵或MnSO4Ig放入小燒杯中，加10ml蒸餾水溶解，如果是配置檸檬酸鐵溶液，一邊加熱一邊攪拌，加熱前應(yīng)在10ml位置處做標(biāo)線，加熱過(guò)程中及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)水分，保證溶劑恒量。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 在步驟2中添加檸檬酸鐵溶液，或MnSO4溶液的方法:用移液槍移液至大燒杯中，移液之前，要保證移液器、槍頭和液體處于相同溫度，吸取液體時(shí)，移液器保持豎直狀態(tài)，將槍頭插入液面下2 - 3毫米，在吸液之前，先吸放幾次液體以潤(rùn)濕吸液嘴，并保證吸液嘴上不能懸掛有液滴。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 在步驟6中調(diào)節(jié)pH值的方法為:用pH計(jì)測(cè)定培養(yǎng)基的pH值，如果偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入lmol/L NaOH邊加邊攪拌，反之，用lmol/L HCl進(jìn)行調(diào)節(jié)，將pH調(diào)節(jié)至6.8_7.0 ο
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的慢生根瘤菌培養(yǎng)基的配制方法，其特征在于: 所述培養(yǎng)基各個(gè)成分的配比為:大豆粉10g，K2HPO40.25g，KH2PO40.25g，MgSO4.7Η200.2g, NaCl0.lg, CaCO30.2g, Iwt % 的檸檬酸鐵 lml, Iwt % ^ MnSO4Iml,蒸餾水100ml0
9.一種慢生根 瘤菌培養(yǎng)基，采用權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的方法制成。
【文檔編號(hào)】C12R1/41GK104046578SQ201410181418
【公開日】2014年9月17日 申請(qǐng)日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】張姣, 張春禹, 王新民, 段高旗, 徐奧, 卜慶國(guó) 申請(qǐng)人:路域生態(tài)工程有限公司