用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于北極海洋放線菌Streptomyces?sp.生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物的培養(yǎng)基。本發(fā)明培養(yǎng)基適于北極放線菌的生長，且可大大提高大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物Dinactin的產(chǎn)量。
【專利說明】用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)
酯類化合物的培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，更具體地，本發(fā)明涉及用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.(更佳地是Streptomyces sp.R-527F)生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物(更佳地是Dinactin)的培養(yǎng)基及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]天然來源的放線菌能產(chǎn)生種類豐富的次級(jí)代謝產(chǎn)物，具有新穎獨(dú)特結(jié)構(gòu)和潛在生物活性的抗菌劑如鏈霉素、紅霉素、四環(huán)素等都是由放線菌產(chǎn)生的。因此，放線菌作為天然藥物資源先導(dǎo)化合物的優(yōu)良資源被廣泛研究。海洋微生物在新藥開發(fā)、新型酶制劑研制等生物【技術(shù)領(lǐng)域】具有廣闊的前景。
[0003]遠(yuǎn)洋和極地地區(qū)地域遼闊，覆蓋了地球系統(tǒng)的低溫、高鹽、高壓、寡營養(yǎng)、巨幅變化的光輻射等多種特殊環(huán)境，這些特殊環(huán)境造就了微生物在基因結(jié)構(gòu)、遺傳、適應(yīng)、代謝及產(chǎn)物等方面的獨(dú)特性和多樣性，蘊(yùn)涵著生命進(jìn)化歷程的豐富信息，是生物遺傳和功能多樣性非常豐富的資源寶藏。開展極地和極端藥源微生物資源的挖掘、儲(chǔ)備和功能研究，獲得該資源【技術(shù)領(lǐng)域】更多自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)具有重要價(jià)值。統(tǒng)計(jì)表明，新發(fā)現(xiàn)的嗜冷菌77%的新種和83%的新屬來自極地環(huán)境，因此極地地區(qū)是嗜冷菌等重要極端微生物資源的主要源地。
[0004]北極海洋放線菌Streptomyces sp.R-527F是由中國極地研究中心自北冰洋73° N以北海域沉積物中分離得到。在該菌株的發(fā)酵液對(duì)金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽抱桿菌(Bacillus subtilis)、大腸桿菌(Escherichiacoli)、白色念珠菌(Candida `albicans)等均具有抑制活性,并從中分離得到多種大環(huán)四重內(nèi)脂類化合物，其中Dinactin的生物活性較顯著。
[0005]然而，Streptomyces sp.R-527F在原始培養(yǎng)基中生長大環(huán)四重內(nèi)脂化合物的產(chǎn)量很低，成為各項(xiàng)藥物活性評(píng)價(jià)研究的瓶頸。因此，通過系統(tǒng)地培養(yǎng)基優(yōu)化及其培養(yǎng)環(huán)境、發(fā)酵工藝以期實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)發(fā)酵是亟待解決的問題。因此開發(fā)一種促進(jìn)北極海洋放線菌Streptomyces sp.R-527F合成Dinactin的新型培養(yǎng)基是實(shí)現(xiàn)大規(guī)模高效發(fā)酵生產(chǎn)的重
要基礎(chǔ)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于提供用于北極海洋放線菌Streptomyces sp.生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物的培養(yǎng)基及其制備方法。
[0007]在本發(fā)明的第一方面,提供一種北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基包括以下組分:
[0008](a)葡萄糖 5_20g/L ；
[0009](b)黃豆粉 0.5-12g/L ；
[0010](a)和(b)的組分溶于人工海水中；其中,所述的人工海水含有:
【權(quán)利要求】
1.一種北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養(yǎng)基,其特征在于,所述培養(yǎng)基包括以下組分: (a)葡萄糖5-20g/L ； (b)黃豆粉0.5-12g/L ； (a)和(b)的組分溶于人工海水中；其中，所述的人工海水含有:
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基中，葡萄糖和黃豆粉的濃度是: (a)葡萄糖4-18g/L ； (b)黃豆粉l-10g/L ； 所述的人工海水含有:
3.如權(quán)利要求2所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述培養(yǎng)基中，葡萄糖和黃豆粉的濃度是: (a)葡萄糖9-18g/L ； (b)黃豆粉l_6g/L ； 所述的人工海水含有:
4.如權(quán)利要求1-3任一所述的培養(yǎng)基，其特征在于，所述方法包括:分別稱取葡萄糖、黃豆粉，溶于所述的人工海水中，使得它們?cè)谂囵B(yǎng)基中的終濃度分別為5-20g/L、0.5-12g/L ;和/或所述培養(yǎng)基的pH值5.0-6.0。
5.權(quán)利要求1-4任一所述的培養(yǎng)基的用途,用于培養(yǎng)北極海洋放線菌Streptomycessp.,生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化 合物Dinactin。
6.一種制備權(quán)利要求1-4任一所述的北極海洋放線菌Streptomyces sp.的培養(yǎng)基的方法，其特征在于，所述方法包括: (a)將所述氯化鈉、硫酸鈉、碳酸氫鈉、溴化鉀、硼酸、六水氯化鎂、七水硫酸鎂、一水硫酸錳、無水氯化鈣逐一溶解，混合均勻； (b)將所述黃豆粉用少量溫水溶解，攪拌均勻，溶于人工海水； (C)將葡萄糖溶于(b)的混合液中； (d)將(C)混合液與(a)混合液均勻混合，獲得所述的培養(yǎng)基； 其中，各組分的用量按照權(quán)利要求1-4任一所述。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述方法還包括:將所述的培養(yǎng)基調(diào)節(jié)至pH值 5.0-6.0。
8.—種利用北極海洋放線菌Streptomyces sp.生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)脂類化合物Dinactin的方法，其特征在于，所述方法包括:利用權(quán)利要求1-4任一所述的培養(yǎng)基培養(yǎng)北極海洋放線菌Streptomyces sp.,從而生產(chǎn)大環(huán)四重內(nèi)酯類化合物Dinactin。
9.如權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,將北極海洋放線菌Streptomycessp.按照體積以3-10%的接種量接入權(quán)利要求1-4任一所述的培養(yǎng)基，發(fā)酵培養(yǎng)5-8天，獲得發(fā)酵液，其中含有大環(huán)四重內(nèi)脂類化合物Dinactin。
10.一種用于培養(yǎng)北極海洋放線菌Streptomyces sp.的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中包括:權(quán)利要求1-4任一所述的培養(yǎng)基。
【文檔編號(hào)】C12P17/08GK103555619SQ201310504941
【公開日】2014年2月5日 申請(qǐng)日期:2013年10月23日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月23日
【發(fā)明者】蔡孟浩, 周嬌, 周祥山, 張?jiān)d 申請(qǐng)人:華東理工大學(xué)