一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝方法。在金霉素發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的硫酸鋅和三氯化鐵,從而達到提高金霉素產(chǎn)量的目的。本發(fā)明在常規(guī)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加500ppm硫酸鋅和1ppm三氯化鐵,發(fā)酵水平超過原工藝水平,中試效價及產(chǎn)量均有提高,并為下一階段工業(yè)放大應用奠定良好基礎。
【專利說明】一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種金霉素的發(fā)酵工藝優(yōu)化方法,特別是一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝。
【背景技術】
[0002]金霉素的發(fā)酵生產(chǎn)方法,是由金色鏈霉菌作為出發(fā)菌株,經(jīng)過純種培養(yǎng)、三級發(fā)酵生成金霉素,具體工藝步驟包括砂土孢子制備、母瓶斜面孢子制備、子瓶斜面孢子制備、一級種子制備、二級種子制備、發(fā)酵制備?,F(xiàn)有的金霉素的發(fā)酵生產(chǎn)只是一些比較常規(guī)的發(fā)酵生產(chǎn)方式,發(fā)酵單位及產(chǎn)量仍有提高空間。
[0003]金屬離子是金霉素發(fā)酵培養(yǎng)基中存在的微量元素,對微生物的生長發(fā)酵具有巨大的影響。其中鐵離子是菌體細胞、細胞色素氧化酶和過氧化酶的輔基,對菌絲體生長發(fā)育是必須的微量元素。鋅離子是所有生物體必需的微量元素之一,是多種蛋白的輔酶并參與催化生物體內(nèi)的一些重要生化反應。添加鋅離子對于一些產(chǎn)抗菌株如脫氮假單孢菌和林可鏈霉菌的發(fā)酵也有著提高產(chǎn)量的作用。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝。本發(fā)明采用以下方式來實現(xiàn):
一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝,發(fā)酵工藝為將母瓶斜面孢子接種至子瓶斜面,在溫度32 土 1°C,濕度40-65%的條件下培養(yǎng)3-5天;取子瓶孢子接種至種子培養(yǎng)基,28°C,培養(yǎng)20-26h ;按1 2%接種量接種于發(fā)酵搖瓶中,28°C,200r/min,培養(yǎng)166h。本發(fā)明在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加硫酸鋅和三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶或發(fā)酵罐中鋅離子和鐵離子的濃度分別為500ppm和lppm。
[0005]與現(xiàn)有技術比較,本發(fā)明既提高了發(fā)酵水平及產(chǎn)量,其生產(chǎn)成本又低,可大規(guī)模應用于生產(chǎn);另外,其操作簡單,在常規(guī)發(fā)酵培養(yǎng)基中添加一定量的金屬離子,滅菌即可。所以,本發(fā)明優(yōu)化了現(xiàn)有配方,提高了發(fā)酵水平,為工業(yè)放大應用奠定良好基礎。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0006]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0007]以下通過實施例對本發(fā)明進行闡述,但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此。
[0008]實施例1:將母瓶斜面孢子接種至子瓶斜面,在溫度32± I°C,濕度40-65%的條件下培養(yǎng)3-5天;取子瓶孢子接種至種子培養(yǎng)基,28°C,培養(yǎng)20-26h ;按12%接種量接種于發(fā)酵搖瓶中,28°C,200r/min,培養(yǎng)166h。在配制發(fā)酵培養(yǎng)基時,向其中添加硫酸鋅和三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶中鋅離子和鐵離子的濃度分別為500ppm和lppm。[0009]實施例2:將母瓶斜面孢子接種至子瓶斜面,在溫度32± I°C,濕度40-65%的條件下培養(yǎng)3-5天;取子瓶孢子接種至種子培養(yǎng)基,28°C,培養(yǎng)20-26h ;按12%接種量接種于發(fā)酵搖瓶中,28°C,200r/min,培養(yǎng)166h。在配制發(fā)酵培養(yǎng)基時,向其中添加硫酸鋅和三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶中鋅離子和鐵離子的濃度分別為1000ppm和0.5ppm。
[0010]實施例3:將母瓶斜面孢子接種至子瓶斜面,在溫度32± 1°C,濕度40-65%的條件下培養(yǎng)3-5天;取子瓶孢子接種至種子培養(yǎng)基,28°C,培養(yǎng)20-26h ;按12%接種量接種于發(fā)酵搖瓶中,28°C,200r/min,培養(yǎng)166h。在配制發(fā)酵培養(yǎng)基時,向其中添加硫酸鋅和三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶中鋅離子和鐵離子的濃度分別為1000ppm和lppm。
[0011]實施例4:
如實施例1的方法,將一定量的鋅離子和鐵離子添加到發(fā)酵培養(yǎng)基中,進行搖瓶發(fā)酵。
[0012]表1.鋅離子和鐵離子添加工藝在搖瓶上的實驗結(jié)果
【權利要求】
1.一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝,其特征在于:將母瓶斜面孢子接種至子瓶斜面,在溫度32±1°C,濕度40-65%的條件下培養(yǎng)3-5天;取子瓶孢子接種至種子培養(yǎng)基,28°C,培養(yǎng)20-26h ;按12%接種量接種于發(fā)酵搖瓶中,28°C,200r/min,培養(yǎng)166h ;在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加硫酸鋅和三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶或發(fā)酵罐中鋅離子和鐵離子的濃度分別為 500ppm 和 lppm。
2.一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝,其特征在于:在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加硫酸鋅,使發(fā)酵搖瓶或發(fā)酵罐中鋅離子濃度為500ppm。
3.一種添加金屬離子提高金霉素產(chǎn)量的發(fā)酵工藝,其特征在于:在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加三氯化鐵,使發(fā)酵搖瓶或發(fā)酵罐中鐵離子濃度為lppm。
【文檔編號】C12R1/49GK103614446SQ201310504063
【公開日】2014年3月5日 申請日期:2013年10月24日 優(yōu)先權日:2013年3月29日
【發(fā)明者】張雪崢, 劉世民, 孫慶峰 申請人:駐馬店華中正大有限公司