納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，將菜籽粕微粉碎后，分別用納豆菌發(fā)酵處理和用蛋白酶水解處理，最后噴霧干燥得菜籽粉。本發(fā)明利用納豆菌發(fā)酵聯(lián)合蛋白酶法水解制備的營養(yǎng)菜籽粉富含納豆激酶和多肽，使菜籽餅的附加值產(chǎn)品大幅度提高；該菜籽粉可以常規(guī)方法制備成膠囊、片劑和顆粒劑，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護(hù)肝損傷等方面具有明顯效果。
【專利說明】納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于食品加工領(lǐng)域，涉及ー種納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]油菜是重要的油料作物之一，我國油菜產(chǎn)量居世界第一位。一般情況下，油菜籽經(jīng)加工可得約3506菜籽油和65%左右菜籽柏。菜籽柏中富含粗蛋白質(zhì)，粗脂肪，卵磷脂，多種維生素，氨基酸等，其蛋白質(zhì)中可消化蛋白質(zhì)含量可達(dá)27.8%。此外，菜籽柏中還含有較高膽堿，生物素，葉酸，煙酸及硫氨素，核黃素等B族維生素和Ca、P、Fe、Se、Cu、Zn、Mn等多種微量元素。菜籽柏的粗蛋白質(zhì)含量一般在35%-45%，為優(yōu)質(zhì)的全價植物蛋白，對其進(jìn)行開發(fā)利用具有重要的經(jīng)濟(jì)意義與社會意義。但是，目前我國對菜籽柏的利用相當(dāng)有限，僅用作肥料或按少量比例添加到反芻動物和淡水魚類的養(yǎng)殖飼料中，這造成了一定的資源浪費(fèi)。
[0003]多肽具有良好的持水力，凝膠性，表面活性等物理功能特性及抗氧化、降血脂、調(diào)節(jié)免疫力等多種生理功能；納豆菌發(fā)酵可產(chǎn)生大量的納豆激酶，具有稀血液、溶血栓、痩身美容等功效，菜籽餅營養(yǎng)豐富，目前還未應(yīng)用于納豆菌發(fā)酵，菜籽柏富含蛋白質(zhì)，利用納豆菌發(fā)酵聯(lián)合蛋白酶法水解制備的營養(yǎng)菜籽粉富含納豆激酶、多肽等營養(yǎng)成分，使菜籽餅的附加值產(chǎn)品大幅度提高，具有顯著的社會意義和經(jīng)濟(jì)意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，解決目前菜籽柏中的粗蛋白質(zhì)不能得到充分利用的問題。
[0005]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn):
納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網(wǎng)；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C條件下蒸煮30min,冷卻備用；
(3)納豆菌發(fā)酵:納豆菌采用土豆液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)24h，將擴(kuò)大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)1_5天；此步驟中土豆液體培養(yǎng)基指的是PDA液體培養(yǎng)基，為現(xiàn)有技術(shù)，不做其他嚴(yán)格限制；
(4)復(fù)合酶酶解:發(fā)酵結(jié)束后，加入去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至
6.0-8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解 0.5-6h ；
(5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養(yǎng)粉，噴霧干燥エ藝參數(shù)為:進(jìn)風(fēng)溫度>150°C，出風(fēng)溫度く 100°C。
[0006]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉的4-5倍，蒸煮溫度為115-120°C。
[0007]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉的4.5倍，蒸煮溫度為118°C。
[0008]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(3)中培養(yǎng)時間為2-4天。
[0009]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(3)中培養(yǎng)時間為3天。
[0010]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(4)中pH調(diào)整至6.5-7.5，酶解溫度為35_40°C，酶解時間為l-5h。
[0011]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(4)中pH調(diào)整至7.0，酶解溫度為38°C，酶解時間為3h。
[0012]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(5)中進(jìn)風(fēng)溫度為160_180°C，出風(fēng)溫度為60_80°C。
[0013]本發(fā)明的エ藝方法，步驟(5)中進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為60°C。
[0014]作為本發(fā)明的最佳實(shí)施方式，納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，該方法包括以下步驟:
(1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網(wǎng)；
(2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C條件下蒸煮30min,冷卻備用；
(3)納豆菌發(fā)酵:納豆菌采用土豆液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)24h，將擴(kuò)大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)3天；
(4)復(fù)合酶酶解:發(fā)酵結(jié)束后，加入去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ；
(5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養(yǎng)粉，噴霧干燥エ藝參數(shù)為:進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度60°C。
[0015]采用上述技術(shù)方案的積極效果:本發(fā)明利用納豆菌發(fā)酵聯(lián)合蛋白酶法水解制備的營養(yǎng)菜籽粉富含納豆激酶和多肽，エ藝合理、營養(yǎng)豐富、質(zhì)細(xì)、溶解性好、保存期長，使菜籽餅的附加值產(chǎn)品大幅度提高；該菜籽粉可以常規(guī)方法制備成膠囊、片劑和顆粒劑，可作為保健食品，在輔助溶解血栓、降血脂和保護(hù)肝損傷等方面具有明顯效果，具有顯著的社會意義和經(jīng)濟(jì)意義。
【具體實(shí)施方式】
[0016]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)ー步的說明，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制:
本發(fā)明中生物材料的來源:
1、納豆菌CICC N0.10459購于中國エ業(yè)微生物菌種保藏中心。
[0017]實(shí)施例1
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量4倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵3天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解2h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度170°C，出風(fēng)溫度90°C，得營養(yǎng)粉。
[0018]實(shí)施例2 稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量5倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于120°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵5天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為45°C條件下，酶解0.5h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度155°C，出風(fēng)溫度70°C，得營養(yǎng)粉。
[0019]實(shí)施例3
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量4倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于115°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵4天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整PH至7.5，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為40°C條件下，酶解Ih ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度160°C，出風(fēng)溫度80°C，得營養(yǎng)粉。
[0020]實(shí)施例4
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于118°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵3天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整PH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度60°C，得營養(yǎng)粉。
[0021]實(shí)施例5
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于121°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵I天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整PH至6.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30°C條件下，酶解6h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度155°C，出風(fēng)溫度80°C，得營養(yǎng)粉。
[0022]實(shí)施例6
稱取500克菜籽柏，粉碎至過60目篩網(wǎng)；加入物料重量3倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g,于110°C條件下蒸煮30min,冷卻后,接入納豆菌,在溫度為30°C,搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下發(fā)酵2天，發(fā)酵結(jié)束后，加入一定量的去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整PH至6.5，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為35°C條件下，酶解5h ;將酶解液物料噴霧干燥，噴霧干燥的エ藝參數(shù)為進(jìn)風(fēng)溫度170°C，出風(fēng)溫度70°C，得營養(yǎng)粉。
[0023]對比例
中國專利CN101610689A制備高蛋白菜籽粉，粉細(xì)度為32-60目，蛋白質(zhì)達(dá)到40%，主要應(yīng)用于飼料和肥料，目前還未見利用菜籽柏制備營養(yǎng)粉作為ー種食品原料出售。
[0024]實(shí)施例3中所制得的菜籽多肽營養(yǎng)粉，采用雙縮脲法檢測營養(yǎng)粉中多肽的含量，多肽的轉(zhuǎn)化率為87.2%。[0025]轉(zhuǎn)化率的檢測方法:游離氨基酸采用甲醛滴定法；蛋白質(zhì)采用凱氏定氮法。多肽采用雙縮脲法檢測。
[0026]多肽轉(zhuǎn)化率計算公式:轉(zhuǎn)化率=(T2-T1) / (P1-P2)。
[0027]式中:T2為酶解后多肽含量；T1為酶解前多肽含量；P1為酶解前總蛋白含量；P2為酶解前酸溶性蛋白含量。
[0028]本發(fā)明生產(chǎn)得到的營養(yǎng)多肽粉的技術(shù)指標(biāo)如表1:
表I菜籽多肽營養(yǎng)粉技術(shù)指標(biāo)
【權(quán)利要求】
1.一種納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網(wǎng)； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量3-6倍的去離子水，加入淀粉酶10u/g，于110-121°C條件下蒸煮30min,冷卻備用； (3)納豆菌發(fā)酵:納豆菌采用土豆液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)24h，將擴(kuò)大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)1_5天； (4)復(fù)合酶酶解:發(fā)酵結(jié)束后，加入去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至6.0-8.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為30-45°C條件下，酶解 0.5-6h ； (5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養(yǎng)粉，噴霧干燥エ藝參數(shù)為:進(jìn)風(fēng)溫度>150°C，出風(fēng)溫度く 100°C。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉重量的4-5倍，蒸煮溫度為115-120°C。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(2)中加入的去離子水量為菜籽粉重量的4.5倍，蒸煮溫度為118°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(3)中培養(yǎng)時間為2-4天。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(3)中培養(yǎng)時間為3天。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(4)中pH調(diào)整至6.5-7.5，酶解溫度為35-40°C，酶解時間為l_5h。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(4)中pH調(diào)整至7.0，酶解溫度為38°C，酶解時間為3h。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(5)中進(jìn)風(fēng)溫度為160-180°C，出風(fēng)溫度為60-80°C。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:步驟(5)中進(jìn)風(fēng)溫度為180°C，出風(fēng)溫度為60°C。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納豆菌發(fā)酵制備菜籽多肽的方法，其特征在于:該方法包括以下步驟: (1)微粉碎:將菜籽柏粉碎至過60目篩網(wǎng)； (2)淀粉酶蒸煮:加入物料重量4.5倍的去離子水，加入淀粉酶lOu/g，于118°C條件下蒸煮30min,冷卻備用； (3)納豆菌發(fā)酵:納豆菌采用土豆液體培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)24h，將擴(kuò)大的納豆菌接種至滅菌后的物料，在溫度為30°C，搖床轉(zhuǎn)速為160rpm條件下培養(yǎng)3天； (4)復(fù)合酶酶解:發(fā)酵結(jié)束后，加入去離子水，使發(fā)酵液中料液比達(dá)到1:10，調(diào)整pH至7.0，加入纖維素酶10u/g，木瓜蛋白酶20U/g，溶菌酶20U/g，在溫度為38°C條件下，酶解3h ； (5)噴霧干燥:將酶解液物料噴霧干燥，得營養(yǎng)粉，噴霧干燥エ藝參數(shù)為:進(jìn)風(fēng)溫度180°C，出風(fēng)溫度60°C。
【文檔編號】A23J3/14GK103431154SQ201310405557
【公開日】2013年12月11日 申請日期:2013年9月9日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月9日
【發(fā)明者】莊義慶, 吳琴燕, 楊敬輝 申請人:江蘇丘陵地區(qū)鎮(zhèn)江農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所