抗酸染色液質控品制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)療【技術領域】，提供一種抗酸染色液質控品制備方法，包含以下步驟：將H37Ra結核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標為試樣1和試樣2，放在冰箱中；將試樣1的H37Ra結核桿菌從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，取H37Ra結核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進行研磨，制成分支H37Ra結核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；向試樣3中加入無菌生理鹽水；分別向試樣3中加入分支H37Ra結核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；取試樣3的菌懸液滴在玻片上；將該玻片放在室溫下自然干燥；將干燥的該玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。本發(fā)明提高工作人員的工作效率。
【專利說明】抗酸染色液質控品制備方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明屬于生物醫(yī)療【技術領域】，特別涉及抗酸染色液質控品制備方法。
【背景技術】
[0002]抗酸染色法，是1882年由埃利希首創(chuàng)并經(jīng)齊爾改進而創(chuàng)造出的細菌染色法。分枝桿菌的細胞壁內含有大量的脂質，包圍在肽聚糖的外面，所以分枝桿菌一般不易著色，要經(jīng)過加熱和延長染色時間來促使其著色。但分枝桿菌中的分枝菌酸與染料結合后，就很難被酸性脫色劑脫色，故名抗酸染色。齊-尼氏抗酸染色法是在加熱條件下使分枝菌酸與石炭酸復紅牢固結合成復合物，用鹽酸酒精處理也不脫色。當再加堿性美蘭復染后，分枝桿菌仍然為紅色，而其他細菌及背景中的物質為藍色。
[0003]抗酸染色法一般包括:初染、脫色、復染三個步驟，具體操作方法是:細菌涂片標本的制作和固定；用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現(xiàn)蒸汽即暫時離開，若染液蒸發(fā)減少，應再加染液，以免干涸，加熱3-5分鐘，待標本冷卻后用水沖洗；加入3%鹽酸酒精脫色30秒分鐘，用水沖洗；用堿性美蘭溶液復染I分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用油鏡觀察。
[0004]抗酸染色三步法效果很好，但操作比較復雜，工作人員每操作一次就要做一次細菌涂片標本，浪費時間，并且工作效率低，對染色液質量、染色時間長短、工作人員操作技術熟練程度都有很高的要求，但是目前市場沒有任何一款預先制好的細菌涂片標本，供工作人員工作時直接拿來使用。
[0005]因此，生物醫(yī)療【技術領域】急需一種節(jié)省時間、操作簡單、提高工作人員工作效率、能夠檢測染色液的質量、對工作人員起到監(jiān)督作用的抗酸染色液質控品制備方法。

【發(fā)明內容】

[0006]本發(fā)明的抗酸染色液質控品制備方法，技術方案如下:
本發(fā)明的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，包含以下步驟:
第一步，將H37Ra結核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結核桿菌，從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，并取H37Ra結核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進行研磨，制成分支H37Ra結核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；
第三步，重新拿取試管，標為試樣3 ;首先，向試樣3中加入無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入分支H37Ra結核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。
[0007]如上的抗酸染色液質控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為I種菌株。[0008]如上的抗酸染色液質控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為2種或者多種菌株的混合物。
[0009]如上的抗酸染色液質控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為球菌。
[0010]如上的抗酸染色液質控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為桿菌。
[0011]如上的抗酸染色液質控品制備方法，其中，抗酸染色陰性菌株為球菌和桿菌的混合物。
[0012]本發(fā)明的有益效果是:
通過制備好的抗酸染色質控品與新制作的涂片同時進行初染、脫色、復染的過程，可以檢測出染色液是否過期。
[0013]通過制備好的抗酸染色質控品與新制作的涂片同時進行初染、脫色、復染的過程，能夠對操作人員的操作步驟、熟練程度進行監(jiān)督和檢驗。
[0014]本發(fā)明操作簡單、節(jié)省時間。
[0015]本發(fā)明提高了操作人員的工作效率，從而提高了經(jīng)濟效益，具有更加廣泛的適用性。
【具體實施方式】
[0016]為了使本發(fā)明的技術手段、創(chuàng)作特征、達成目的與功效易于明白了解，下面結合具體示例，進一步闡述本發(fā)明。
[0017]實施例一:
本發(fā)明的具體實施步驟如下:
第一步，將H37Ra結核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結核桿菌，從培養(yǎng)基上用Iml生理鹽水洗下，并取lmlH37Ra結核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進行研磨，制成分支H37Ra結核桿菌；向試樣2中加入0.5ml生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；
第三步，重新拿取試管，標為試樣3 ;首先，向試樣3中加入Iml無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入0.1ml研磨后的分支H37Ra結核桿菌、0.05ml試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出0.1ml稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過三次，固定菌膜。
[0018]實施例二:
本發(fā)明的具體實施步驟如下:
第一步，將H37Ra結核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存；
第二步，從冰箱中取出試樣I和試樣2，將試樣I的H37Ra結核桿菌，從培養(yǎng)基上用2ml生理鹽水洗下，并取lmlH37Ra結核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進行研磨；向試樣2中加入0.4ml生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液；第三步，重新拿取試管，標為試樣3 ;首先，向試樣3中加入2ml無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入0.2ml研磨后的分支H37Ra結核桿菌、0.1ml試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻；
第四步，從試樣3中取出0.2ml稀釋后的菌懸液，滴在玻片上；
第五步，將玻片放在室溫下自然干燥；
第六步，將干燥的玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過4次，固定菌膜。
[0019]如上對本發(fā)明的描述中，具體量取試劑的體積均為一個示例，本領域技術人員可以選擇其他的體積。
[0020]抗酸染色陰性菌株為I種菌株或2種或者多種菌株的混合物。
[0021]抗酸染色陰性菌株為球菌、桿菌或球菌與桿菌的混合物。
[0022]本發(fā)明的有益效果是:通過制備好的抗酸染色液質控品與新制作的涂片同時進行初染、脫色、復染的過程，可以檢測出染色液是否過期。
[0023]通過制備好的抗酸染色液質控品與新制作的涂片同時進行初染、脫色、復染的過程，能夠對操作人員的操作步驟、熟練程度進行監(jiān)督和檢驗。
[0024]本發(fā)明操作簡單、節(jié)省時間。
[0025]本發(fā)明提高了操作人員的工作效率，從而提高了經(jīng)濟效益，具有更加廣泛的適用性。
[0026]以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術人員應該了解，本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權利要求書及其等同物界定。
【權利要求】
1.抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，包含以下步驟: 第一步，將H37Ra結核桿菌作為抗酸染色陽性菌株，與抗酸染色陰性菌株分別裝在2支試管中，標為試樣I和試樣2,放在冰箱中冷凍、干燥保存； 第二步，從冰箱中取出該試樣I和試樣2，將該試樣I的H37Ra結核桿菌，從培養(yǎng)基上用生理鹽水洗下，并取H37Ra結核桿菌菌液加入無菌組織研磨器中進行研磨，制成分支H37Ra結核桿菌；向試樣2中加入生理鹽水，將抗酸染色陰性菌株溶解，制備成菌懸液； 第三步，重新拿取試管，標為試樣3 ;首先，向試樣3中加入無菌生理鹽水；然后，分別向試樣3中加入該分支H37Ra結核桿菌、試樣2的菌懸液，放在震蕩器上混勻； 第四步，從試樣3中取出稀釋后的菌懸液，滴在玻片上； 第五步，將該玻片放在室溫下自然干燥； 第六步，將干燥的該玻片涂面朝上，放在酒精燈火焰上來回通過，固定菌膜。
2.如權利要求1所述的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為I種菌株。
3.如權利要求1所述的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為2種以上菌株的混合物。
4.如權利要求1所述的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為球菌。
5.如權利要求1所 述的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為桿菌。
6.如權利要求1所述的抗酸染色液質控品制備方法，其特征在于，該抗酸染色陰性菌株為球菌和桿菌的混合物。
【文檔編號】C12Q1/00GK103451260SQ201310403881
【公開日】2013年12月18日 申請日期:2013年9月9日 優(yōu)先權日:2013年9月9日
【發(fā)明者】婁崢 申請人:上海蘭衛(wèi)臨床檢驗有限公司