專利名稱：血液微生物培養(yǎng)瓶的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)裝置，具體而言，涉及一種血液微生物培養(yǎng)瓶。
背景技術(shù)：
對(duì)血液樣本進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和檢測(cè)是診斷血液感染類疾病的必須措施。由微生物侵犯血液引起的敗血癥和菌血癥是臨床上的危急病癥，對(duì)于血液感染性疾病患者，能否有效治愈，很大程度上決定于快速、及時(shí)、準(zhǔn)確的細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)報(bào)告。過去一直沿用傳統(tǒng)手工培養(yǎng)檢測(cè)方法，靜態(tài)培養(yǎng)、肉眼觀察，存在微生物培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)、準(zhǔn)確性差、污染率高等缺點(diǎn)，往往延誤冶療，已不能適應(yīng)現(xiàn)代臨床醫(yī)療的需要。使用自動(dòng)化的血液微生物培養(yǎng)則可實(shí)現(xiàn)封閉動(dòng)態(tài)恒溫培養(yǎng)，儀器檢測(cè)，陽性標(biāo)本24小時(shí)內(nèi)即可檢出結(jié)果，且靈敏度準(zhǔn)確性都大大提高。自動(dòng)化的血液微生物培養(yǎng)是替代手工法的必然趨勢(shì)?，F(xiàn)有的全自動(dòng)血培養(yǎng)儀主要由恒溫孵育器、檢測(cè)系統(tǒng)及血液微生物培養(yǎng)瓶三大部分組成。將血液標(biāo)本接種于血液微生物培養(yǎng)瓶中，血液微生物培養(yǎng)瓶在恒溫孵育器中不停震蕩以加速細(xì)菌培養(yǎng)，檢測(cè)系統(tǒng)自動(dòng)檢測(cè)出培養(yǎng)瓶感受器產(chǎn)生的相應(yīng)顏色變化，做出診斷?，F(xiàn)有血液微生物培養(yǎng)瓶大都為玻璃瓶體，不易于運(yùn)輸儲(chǔ)存。專利號(hào)為200420048077. 8的實(shí)用新型專利公開了一種血液微生物培養(yǎng)瓶，該培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)部充有混合氣體，不便于實(shí)施，且底部化學(xué)感受器為二氧化碳感受器，對(duì)于產(chǎn)氣較弱的微生物檢測(cè)不夠靈敏，血液中含有的大分子物質(zhì)也易產(chǎn)生干擾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案如下—種血液微生 物培養(yǎng)瓶，包括瓶體、瓶蓋、化學(xué)感受器、液體培養(yǎng)基；其中，所述培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)為無菌環(huán)境，瓶體為圓柱型塑料容器，瓶體底部含有一層化學(xué)感受器，所述化學(xué)感受器為高分子聚合物半透膜，牢固貼敷于瓶底。優(yōu)選的是，瓶?jī)?nèi)密閉空間為負(fù)壓。優(yōu)選的是，瓶蓋為雙層，外層為鋁塑組合蓋，內(nèi)層為丁基膠塞，以確保區(qū)分已使用培養(yǎng)瓶和未使用培養(yǎng)瓶，且便于無菌操作。優(yōu)選的是，所述化學(xué)感受器為高分子半透膜，其能有效阻擋300分子量以上的物質(zhì)通過，避免血液中大分子物質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾。優(yōu)選的是，所述化學(xué)感受器含有熒光物質(zhì)，該熒光物質(zhì)能根據(jù)瓶?jī)?nèi)微生物的生長(zhǎng)
變化產(chǎn)生顏色變化。優(yōu)選的是，所述培養(yǎng)瓶中的液體培養(yǎng)基加有吸附抗生素作用的樹脂成分，便于細(xì)菌的生長(zhǎng)和快速檢測(cè)。優(yōu)選的是，所述高分子半透膜還包括高分子聚合物材料配方、催化劑配方、固化劑配方和血液微生物培養(yǎng)瓶的生產(chǎn)工藝。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水40. 00% -50. 00%，聚乙烯醇 30. 00% -40. 00%,甲醛 15. 00% -25. 00%，亞甲藍(lán) O. 01% -O. 10%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水46. 62 %，聚乙烯醇
30.00%,甲醛 23. 18%，亞甲藍(lán) O. 10%，其他 O. 10%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水50. 00%，聚乙烯醇34. 94%,甲醛 15. 00%，亞甲藍(lán) O. 05%，其他 O. 01%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水4O. O O %，聚乙烯醇34. 96%,甲醛 25. 00%，亞甲藍(lán) O. 04%，其他 4. 00%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水44. 52 %，聚乙烯醇
34.50%,甲醛 20. 00%，亞甲藍(lán) O. 08%，其他 O. 90%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水41. 73%，聚乙烯醇
35.70%,甲醛 22. 50%，亞甲藍(lán) O. 05%，其他 O. 02%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水44. O O %，聚乙烯醇
31.70%,甲醛 20. 00%，亞甲藍(lán) O. 01%，其他 4. 29%。優(yōu)選的是，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水47. 50 %，聚乙烯醇30. 10%,甲醛 17. 33%，亞甲藍(lán) O. 07%，其他 5. 00%。優(yōu)選的是，所述所述的培養(yǎng)瓶的生產(chǎn)工藝包括空瓶預(yù)處理、制備高分子聚合物、化學(xué)感受器的鋪設(shè)、催化 反應(yīng)、固化反應(yīng)、沖洗、滅菌1、制備培養(yǎng)基、滅菌2、灌裝和密封。優(yōu)選的是，所述所述的培養(yǎng)瓶的工藝中所述催化反應(yīng)中，硫酸溶液作為催化劑，所述固化反應(yīng)中，戊二醛溶液作為固化劑。優(yōu)選的是，所述所述的培養(yǎng)瓶的工藝中滅菌I為輻照滅菌。優(yōu)選的是，所述所述的培養(yǎng)瓶的工藝中滅菌2為濕熱滅菌。在示范實(shí)施例中，本發(fā)明可通過全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的檢測(cè)系統(tǒng)，自動(dòng)檢測(cè)瓶底高分子半透膜因瓶中微生物生長(zhǎng)產(chǎn)生的電位差，膜內(nèi)的熒光物質(zhì)根據(jù)電位差的變化產(chǎn)生顏色的變化，由此判斷并計(jì)算微生物的生長(zhǎng)。在檢測(cè)時(shí)會(huì)受到培養(yǎng)基中血紅素等大分子和各種顏色物質(zhì)的干擾，造成檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定甚至誤判，這是全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的一大技術(shù)難點(diǎn)，本發(fā)明的化學(xué)感受器為高分子半透膜，瓶?jī)?nèi)因培養(yǎng)基中細(xì)菌生長(zhǎng)產(chǎn)生的電位變化可使化學(xué)感受器產(chǎn)生顏色變化被全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的檢測(cè)系統(tǒng)感受到，而血紅素和各種顏色物質(zhì)由于分子量大(一般超過300)被有效隔離阻擋。這種膜隔離技術(shù)避免培養(yǎng)液和樣本中的其他物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果形成干擾，使檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。使用效果已得到大量實(shí)踐驗(yàn)證。本發(fā)明的血液微生物培養(yǎng)瓶為塑料瓶體，便于運(yùn)輸儲(chǔ)存和使用。由于微生物在生長(zhǎng)過程中的氧化還原反應(yīng)產(chǎn)生的電位差要強(qiáng)于產(chǎn)生的二氧化碳的變化，且對(duì)于一些產(chǎn)氣較弱菌，二氧化碳的含量變化很難檢測(cè)，本發(fā)明對(duì)于微生物的檢測(cè)是由微生物生長(zhǎng)過程的電位差來判斷，檢測(cè)準(zhǔn)確率聞且檢測(cè)時(shí)間短。本技術(shù)還有以下特點(diǎn)I)找到高分子聚合物材料的最佳配方和制作工藝，保證所制作的半透膜能有效阻擋300分子量以上物質(zhì)通過，而讓熒光分子順利穿透，避免干擾。2)培養(yǎng)瓶采用聚酯材料制造，進(jìn)行超聲波打磨，解決了高分子聚合物材料在聚酯材料上的固化澆注技術(shù)，使膜牢固粘貼不脫落。3)根據(jù)催化和固化反應(yīng)，解決了膜的均勻固化技術(shù)，使膜均勻貼敷瓶底，厚度和密度均勻。4)血液標(biāo)本中往往有抗生素殘留，任何藥物都不能完全中和抗生素，只有通過樹脂來吸附(如先鋒霉素、青霉素、萬古霉素等)，為使細(xì)菌能快速生長(zhǎng)，培養(yǎng)瓶中的液體培養(yǎng)基加有樹脂成分。 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是1.本技術(shù)配合全自動(dòng)血培養(yǎng)儀，實(shí)現(xiàn)了對(duì)血液樣本的全自動(dòng)化培養(yǎng)和檢測(cè)，改變了依賴手工進(jìn)行血培養(yǎng)的現(xiàn)狀，克服了瓶中血液樣本和液體培養(yǎng)基中其他物質(zhì)對(duì)測(cè)量結(jié)果的干擾，使測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定、可靠，幾乎無假陽性和假陰性。2.本技術(shù)提高了對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)檢測(cè)的靈敏度，靈敏度< 10CFU。3.本技術(shù)縮短了對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的檢出時(shí)間，90%陽性標(biāo)本可在12小時(shí)內(nèi)被檢出，36小時(shí)內(nèi)可檢測(cè)出99%的陽性標(biāo)本(有些標(biāo)本最快只需2-4小時(shí))，大大縮短了患者的治療時(shí)間，靈敏度和陽性檢出時(shí)間均達(dá)到國際先進(jìn)水平。


·現(xiàn)在將描述本發(fā)明的優(yōu)選但非限制性的實(shí)施例，圖1是血液微生物培養(yǎng)瓶的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中1-瓶體；2-瓶蓋3_化學(xué)感受器；4_液體培養(yǎng)基；5_吸附樹脂。圖2為血液微生物培養(yǎng)瓶的生產(chǎn)工藝流程圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定。請(qǐng)參閱圖1，圖1為本發(fā)明的血液微生物培養(yǎng)瓶的結(jié)構(gòu)示意圖。該血液微生物培養(yǎng)瓶包括瓶體1、瓶蓋2、化學(xué)感受器3、液體培養(yǎng)基4、吸附樹脂5。該培養(yǎng)瓶的瓶?jī)?nèi)密閉空間為負(fù)壓。瓶蓋2為雙層，外層為鋁塑組合蓋，內(nèi)層為丁基膠塞，以確保區(qū)分已使用培養(yǎng)瓶和未使用培養(yǎng)瓶，且便于無菌操作。化學(xué)感受器3為高分子半透膜，能有效阻擋300分子量以上的物質(zhì)通過，避免血液中大分子物質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾?；瘜W(xué)感受器3含有熒光物質(zhì)，能根據(jù)瓶?jī)?nèi)微生物的生長(zhǎng)變化產(chǎn)生顏色變化。液體培養(yǎng)基加有能吸附抗生素的樹脂成分，便于細(xì)菌的生長(zhǎng)和快速檢測(cè)。該血液微生物培養(yǎng)瓶的化學(xué)感受器3為高分子半透膜，該高分子半透膜包括制作半透膜的高分子聚合物材料配方，催化劑配方和固化劑配方。制作血液微生物培養(yǎng)瓶的高分子半透膜的工藝可參見附圖2，共有13個(gè)步驟，具體制作工藝如下步驟S1:空瓶預(yù)處理將空瓶進(jìn)行超聲波打磨，將瓶底打磨光滑，可以使高分子聚合物的半透膜化學(xué)感受器緊吸附于瓶底，例如實(shí)施高分子電子束輻照。步驟S2 :制備高分子聚合物將高分子膜制作材料放入反應(yīng)容器內(nèi)進(jìn)行攪拌加熱，使其充分混合均勻，優(yōu)選的是加熱溫度為85-100攝氏度；高分子聚合物材料的化學(xué)配方如下，其中含量均為質(zhì)量百分比方案I
成分含量
水46.62%
聚乙烯醇30.00%
甲醛23.18%
亞甲藍(lán)0.10%
其他0.10%方案2
成分含量
水50.00%
聚乙烯醇34.94%
甲醛15.00%
亞甲藍(lán)0.05%
其他0.01%方案3
成分含量
水40.00%
聚乙烯醇34.96%
甲醛25.00%
亞甲藍(lán)0.04%
其他4.00%方案4成分含量
水44.52%
聚乙烯醇34.50%
甲醛20.00%
亞甲藍(lán)0.08%
其他0.90%方案5
成分含量
水41.73%
聚乙烯醇35.70%
甲醛22.50%
亞甲藍(lán)0.05%
其他0.02%方案6
成分含量
7jC44.00%
聚乙烯醇31.70%
甲醛20.00%
亞甲藍(lán)0.01%
其他4·29%方案7成分含量
水47.50%
聚乙烯醇30.10%
甲醛17.33%
亞甲藍(lán)0.07%
其他5.00%可得到本發(fā)明中高分子聚合物材料的化學(xué)配方為
成分含量
水40_ 00%-50. 00%
聚乙烯醇30. 00%-40. 00%
甲醛15.00%-25.00%
亞甲藍(lán)0.01%-0.10%
其他0-5_ 00%其他成分可以為天青1、甲基橙、環(huán)糊精、溴甲酚綠等。其中優(yōu)選的是
成分含量
水44.00%
聚乙烯醇31.70%
甲醛20.00%
亞甲藍(lán)0.01%
其他4.29%步驟S3 :化學(xué)感受器的鋪設(shè)取制備的高分子聚合物2_4g滴入瓶底，水平靜置直至物料平鋪于瓶底。步驟S4 :催化反應(yīng)將鋪設(shè)完化學(xué)感受器的培養(yǎng)瓶加入一定量的硫酸溶液作為催化劑，優(yōu)選的是催化劑的濃度為5% -15%，催化劑的加入量為O. 5-2ml，催化40-50小時(shí)；
步驟S5:固化反應(yīng)將催化反應(yīng)后的的高分子滲透膜加入一定量的戊二醛溶液作為固化劑，優(yōu)選的是固化劑的量為O. 3-lml，反應(yīng)時(shí)間為3-6小時(shí)；步驟S6 :沖洗將固化反應(yīng)后的培養(yǎng)瓶每天裝入含量為最少能夠覆蓋化學(xué)感受器的水，靜止一天后沖洗，直至瓶?jī)?nèi)醛類試劑全部溢出后完成化學(xué)感受器的制備，優(yōu)選的是沖洗時(shí)間為5-10天。步驟S7:滅菌I將瓶底含有化學(xué)感受器的培養(yǎng)瓶進(jìn)行滅菌，優(yōu)選的是滅菌形式為輻照滅菌。步驟S8:制備培養(yǎng)基制備適合微生物生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基。步驟S9:滅菌2將瓶蓋和制備好的液體培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，優(yōu)選的滅菌形式為濕熱滅菌。步驟S10:灌裝和密封將滅菌后的液體培養(yǎng)基在無菌環(huán)境下灌裝于滅菌后的含有化學(xué)感受器的培養(yǎng)瓶體中，加蓋無菌瓶蓋進(jìn)行密封。優(yōu)選的是，為方便使用時(shí)自動(dòng)取樣，瓶?jī)?nèi)可抽真空，利用負(fù)壓使血液等標(biāo)本自動(dòng)抽入瓶中。

以上所述的實(shí)施例，只是本發(fā)明較優(yōu)選的具體實(shí)施方式
的一種，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在本技術(shù)方案范圍內(nèi)進(jìn)行的通常變化和替換都應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種血液微生物培養(yǎng)瓶，包括瓶體(I)、瓶蓋(2)、化學(xué)感受器(3)、液體培養(yǎng)基(4)； 其特征在于，所述培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)為無菌環(huán)境，瓶體為圓柱型塑料容器，瓶體底部含有一層所述化學(xué)感受器，該化學(xué)感受器為高分子聚合物半透膜，牢固貼敷于瓶底。
2.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，瓶?jī)?nèi)密閉空間為負(fù)壓。
3.如權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述瓶蓋(2)為雙層，外層為鋁塑組合蓋，內(nèi)層為丁基膠塞，以確保區(qū)分已使用培養(yǎng)瓶和未使用培養(yǎng)瓶，且便于無菌操作。
4.如權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述化學(xué)感受器(3)為高分子半透膜，其能有效阻擋300分子量以上的物質(zhì)通過，避免血液中大分子物質(zhì)對(duì)檢測(cè)的干擾。
5.如權(quán)利要求1、2或4所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述培養(yǎng)瓶中的液體培養(yǎng)基(4)加有吸附抗生素作用的吸附樹脂(5)成分，便于細(xì)菌的生長(zhǎng)和快速檢測(cè)。
6.如權(quán)利要求4所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述化學(xué)感受器(3)含有熒光物質(zhì)，該熒光物質(zhì)能根據(jù)瓶?jī)?nèi)微生物的生長(zhǎng)變化產(chǎn)生顏色變化。
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述化學(xué)感受器(3)還包括高分子聚合物材料配方、催化劑配方和固化劑配方。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水 40. 00% -50. 00%，聚乙烯醇 30. 00% -40. 00%,甲醛 15. 00% -25. 00%，亞甲藍(lán) O. 01% -O. 10%。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水46. 62%，聚乙烯醇30. 00%,甲醛23. 18%，亞甲藍(lán)O. 10%，其他O. 10%。
10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水50. 00 %，聚乙烯醇34. 94%，甲醛15. 00 %，亞甲藍(lán)O. 05 %，其他0.01%。
11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水40. 00 %，聚乙烯醇34. 96 %，甲醛25. 00 %，亞甲藍(lán)O. 04%，其他4. 00 %。
12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水44. 52 %，聚乙烯醇34. 50 %，甲醛20. 00 %，亞甲藍(lán)O. 08 %，其他O. 90 %。
13.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水41. 73%，聚乙烯醇35. 70%，甲醛22. 50%，亞甲藍(lán)O. 05%，其他O. 02%。
14.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水44. 00%，聚乙烯醇31. 70%，甲醛20. 00%，亞甲藍(lán)O. 01 %，其他4. 29%。
15.根據(jù)權(quán)利要求8所述的培養(yǎng)瓶，其特征在于，所述高分子聚合物材料的化學(xué)配方包括水47. 5 %，聚乙烯醇30. 10 %，甲醛17. 33 %，亞甲藍(lán)O. 07 %，其他5. 00 %。
16.一種制造如權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的培養(yǎng)瓶的工藝，其特征在于，還包括空瓶預(yù)處理、制備高分子聚合物、化學(xué)感受器的鋪設(shè)、催化反應(yīng)、固化反應(yīng)、沖洗、滅菌1、制備培養(yǎng)基、滅菌2、灌裝和密封。
17.如權(quán)利要求16所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，所述催化反應(yīng)中，硫酸溶液作為催化劑。
18.如權(quán)利要求16所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，滅菌I為輻照滅菌。
19.如權(quán)利要求16所述的生產(chǎn)工藝，其特征在于，滅菌2為濕熱滅菌。
全文摘要
一種血液微生物培養(yǎng)瓶，包括瓶體、瓶蓋、化學(xué)感受器、液體培養(yǎng)基、吸附樹脂；其中，所述培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)為無菌環(huán)境，瓶體為圓柱型塑料容器，瓶體底部含有一層化學(xué)感受器，該化學(xué)感受器為高分子聚合物半透膜，牢固貼敷于瓶底。本發(fā)明的培養(yǎng)瓶解決了全自動(dòng)血培養(yǎng)儀的一個(gè)技術(shù)難題，實(shí)現(xiàn)了血液微生物的全自動(dòng)培養(yǎng)和檢測(cè)，提高了檢測(cè)靈敏度縮短了陽性檢出時(shí)間。
文檔編號(hào)C12M1/24GK103045466SQ20121058342
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2012年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月31日
發(fā)明者張敏, 楊偉偉, 梅振玉 申請(qǐng)人:山東鑫科生物科技股份有限公司