專(zhuān)利名稱(chēng)：一種促進(jìn)果樹(shù)組培苗生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種可以促進(jìn)果樹(shù)試管苗組培快繁生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，屬于現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
桃、李、杏、甜櫻桃等核果類(lèi)果樹(shù)砧木的組培快繁與工廠(chǎng)化育苗在我國(guó)研究較少，在核果類(lèi)果樹(shù)組培快繁中研究應(yīng)用液體培養(yǎng)基技術(shù)除本單位外還未見(jiàn)有報(bào)道，而關(guān)于專(zhuān)用液體培養(yǎng)基的組成成分未曾報(bào)到。國(guó)外在核果類(lèi)果樹(shù)砧木組培快繁中有應(yīng)用液體培養(yǎng)基的報(bào)道，但有關(guān)液體培養(yǎng)基的組成成分和使用方法未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本研究發(fā)明能同時(shí)在桃、李、杏、甜櫻桃等核果類(lèi)果樹(shù)砧木組培快繁階段起到重要作用，對(duì)組培快繁的矮小試管苗簇生芽在7-10天內(nèi)顯著增長(zhǎng)和增粗，提高了有效芽的比率，同時(shí)為下一步的試管苗生根起到促進(jìn)作用。桃、李、杏、甜櫻桃等核果類(lèi)果樹(shù)砧木試管苗在組培快繁中經(jīng)過(guò)繼代增殖培養(yǎng)3周左右，絕大多數(shù)增殖的叢生芽較矮小，有效芽較少，若繼續(xù)在原固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)則易于老化，繁殖力下降。若直接用于接種生根，一方面生根接種操作困難，另一方面切口面小、生根時(shí)間長(zhǎng)且生根量少，進(jìn)而影響溫室移栽成活率。由于特定的液體培養(yǎng)基能在短時(shí)間內(nèi)促進(jìn)植株吸收營(yíng)養(yǎng)，加速生長(zhǎng)。鑒于此，研究出適合核果類(lèi)果樹(shù)砧木試管苗快速生長(zhǎng)的專(zhuān)用液體培養(yǎng)基，促進(jìn)繼代增殖的叢生芽短時(shí)間內(nèi)快速生長(zhǎng)，增加有效芽，為下一步試管苗生根試驗(yàn)奠定基礎(chǔ)。具體地，本發(fā)明涉及一種可以促進(jìn)果樹(shù)砧木試管苗組培快繁生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基的組成包括(I)大量元素(mg/L) KH2P042600-3000, MgSO4. 7H20700_900，NH4NO31000-1400，KN0330 00-3 3 00, Ca(NO3)2. 4H201800_2200, CaCl2800_1200 ； (2)微量元素(mg/L) :ZnS04. 7H2016-18，MnSO4. H20230-260，H3B037-10，NaMoO4. 2H200. 4-0. 6，CuSO4. 5H200. 4-0. 6 ；(3)鐵鹽(mg/L) :Fe-Na-EDTA55_70 ；(4)有機(jī)成分(mg/L):肌醇 140-180, VB1O. 6-0. 8，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑 O. 05-0. 15 ；(5)生長(zhǎng)激素(mg/L) 6-BAl. 0-2. O, IBAO. 01-0. 03 ；(6)液體生物防腐劑(ml/L) :Proclin3J). 02-0. 10 ；(7)活性炭(g/L) :1.5-5.0 ;(8)蔗糖(g/L) :20-40 ；所述液體培養(yǎng)基的pH為酸性溶液，優(yōu)選為弱酸性液體培養(yǎng)基。更具體地，本發(fā)明所述液體培養(yǎng)基的組成配比為(I)大量元素(mg/L) KH2P042800,MgSO4. 7H20800，NH4NO31200，KN033200，Ca (NO3) 2· 4H202000,CaCl2IOOO ；(2)微量元素(mg/L) ZnSO4. 7H2017, MnSO4. Η20250, Η3Β038 · 5，NaMoO4. 2Η200· 5，CuSO4. 5Η200. 5 ；(3)鐵鹽(mg/L) :Fe-Na_EDTA66 ；(4)有機(jī)成分(mg/L):肌醇150，VB1O. 6，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑O. I ；(5)生長(zhǎng)激素(mg/L) :6_ΒΑ1· 5，IBAO. 02 ；(6)液體生物防腐劑(ml/L) :Proclin3000 · 05(7)活性炭(g/L) 3.0 ；
(8)蔗糖(g/L) 30 ；所述液體培養(yǎng)基的pH為弱酸性溶液，其pH值為5. 8-6. O,更優(yōu)選為pH5. 9。本發(fā)明中，所述動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑的具體組成為(mg/L) Va18000000-22000000U.I.、VD318000-21000U. I.、VE4800_5200mg、VK260_320mg、VB11400_1600mg、VB2600_800mg、VB6400-600mg、VB122_10mg、泛酸 3800_4200mg Vpp4700_5IOOmg、生物素 400_600mg、葉酸 200-400mg、Vc9800-10800mg, L-蘇氨酸 3500_4000mg、L-纈氨酸 4800_5200mg、L-谷氨酰胺 12000-13000mg、L-天冬氨酸 6200_6600mg、DL-甲硫氨酸 8000-8400mg、DL-丙氨酸 4600-5000mg、L-精氨酸 3800-4100mg、L-半胱氨酸 1000-1200mg、L-苯丙氨酸3200-3600mg、L-絲氨酸 1300-1600mg、L-亮氨酸 5700-6200mg、L-賴(lài)氨酸 5300-5600mg、L-普氨酸 3800-4200mg、L-組氨酸 1500_2000mg。更具體地，所述動(dòng)物添加劑的組成為(mg/L) Va20000000U. I.、VD320000U. I.、VE5000mg> VK300mg> VB11500mg> VB2700mg> VB6500mg> VB125mg、泛酸 4000mg Vpp5000mg、生物素500mg、葉酸 300mg、Ve10000mg、L-蘇氨酸 3900mg、L_ 纟顏氨酸 5000mg、L-谷氨酰胺 12500mg、L-天冬氨酸6500mg、DL-甲硫氨酸8250mg、DL-丙氨酸4800mg、L-精氨酸3950mg、L-半胱氨酸1125mg、L_苯丙氨酸3500mg、L_絲氨酸1500mg、L_亮氨酸6000mg、L-賴(lài)氨酸5500mg、L-普氨酸4000mg、L-組氨酸1850mg。本發(fā)明所述液體培養(yǎng)基可直接添加應(yīng)用，使繼代增殖培養(yǎng)的叢生芽在短時(shí)間內(nèi)迅速吸收液體培養(yǎng)基中的各種營(yíng)養(yǎng)成分。7-10天叢生芽高度增長(zhǎng)I. 5-2. 5cm，同比高度增長(zhǎng)200-300%,粗度增加50-100%，葉色濃綠，無(wú)玻璃化和黃化等現(xiàn)象。從而有利于下一步的生根接種操作，以及擴(kuò)大生根切口面進(jìn)而縮短生根時(shí)間、促進(jìn)生根量。說(shuō)明書(shū)附I甜櫻桃砧木CAB-6P實(shí)驗(yàn)圖，左邊為實(shí)驗(yàn)組，右邊為對(duì)照組。圖2甜櫻桃砧木Gisela-5實(shí)驗(yàn)圖，左邊為對(duì)照組，右邊為實(shí)驗(yàn)組。圖3李、杏砧木Mir. 29C實(shí)驗(yàn)圖，左邊為對(duì)照組，右邊為實(shí)驗(yàn)組。圖4桃砧木GF677實(shí)驗(yàn)圖，左邊為對(duì)照組，右邊為實(shí)驗(yàn)組。
具體實(shí)施例本發(fā)明通過(guò)下述實(shí)施例進(jìn)一步闡明，但任何實(shí)施例或其組合不應(yīng)當(dāng)理解為對(duì)本發(fā)明的范圍或?qū)嵤┓绞降南拗?。本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求書(shū)限定，結(jié)合本說(shuō)明書(shū)和本領(lǐng)域一般常識(shí)，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以清楚地明白權(quán)利要求書(shū)所限定的范圍。在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行任何修改或改變，這種修改和改變也包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。GF677桃專(zhuān)用抗性砧木無(wú)性系試管苗在固體培養(yǎng)基上繼代增殖培養(yǎng)3周左右，產(chǎn)生的絕大多數(shù)叢生芽矮小。若繼續(xù)在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，由于固體培養(yǎng)基中的養(yǎng)分幾乎被耗盡，易造成叢生芽老化，繁殖力下降；若直接用于接種生根，一方面生根接種操作困難，另一方面切口面小、生根量少、生根時(shí)間較長(zhǎng)，進(jìn)而大大影響溫室移栽成活率。應(yīng)用上述專(zhuān)用液體培養(yǎng)基在繼代增殖培養(yǎng)3周左右的固體培養(yǎng)基(100ml/瓶)上直接加入20ml/瓶，在同樣的溫度、光照條件下培養(yǎng)，原本幾乎停長(zhǎng)的叢生芽快速生長(zhǎng)(增長(zhǎng)、增粗)。7-10天增長(zhǎng)
I.5-2 . 5cm，同比增長(zhǎng)200-300%，莖粗增加50-100%，葉色濃綠，無(wú)玻璃化和黃化等現(xiàn)象。本專(zhuān)用液體培養(yǎng)基對(duì)甜櫻桃砧木(Giaela系列、CAB系列、Colt、SL64等)、桃砧木(GF677、GF305、山桃等)、李和杏砧木(Mir. 29C、櫻桃李等)的試管苗培養(yǎng)效果顯著，詳細(xì)見(jiàn)附圖
對(duì)比。
權(quán)利要求
1.一種促進(jìn)果樹(shù)組培苗生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，其特征在于包括以下組分(1)大量元素(mg/L):KH2P042600-3000，MgSO4. 7H20700-900，NH4N031000-1400，KN0330 00-3 3 00, Ca(NO3)2. 4H201800_2200, CaCl2800_1200 ； (2)微量元素(mg/L):ZnS04. 7H2016-18，MnSO4. H20230-260，H3B037-10，NaMoO4. 2H200. 4-0. 6，CuSO4. 5H200. 4-0. 6 ；(3)鐵鹽(mg/L)Fe-Na-EDTA55-70 ； (4)有機(jī)成分(mg/L):肌醇140-180，VB1O.6-0. 8，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑O. 05-0. 15 ；(5)生長(zhǎng)激素(mg/L)6-BAl. 0-2. O, IBAO. 01-0. 03 ；(6)液體生物防腐劑(ml/L)=Proclin300O. 02-0. 10 ；(7)活性炭(g/L)1. 5-5. O ；(8)鹿糖(g/L):20-40 ； 所述液體培養(yǎng)基的PH為酸性溶液。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的液體培養(yǎng)基，其特征在于所述培養(yǎng)基具體包括如下組分 (1)大量元素(mg/L):KH2P042800，MgSO4. 7H20800，NH4N031200，KN033200，Ca (NO3) 2. 4H202000, CaCl2IOOO ；(2)微量元素(mg/L)ZnSO4. 7H2017, MnSO4. H20250, H3B038 . 5，NaMoO4. 2H200. 5，CuSO4. 5H200. 5 ；(3)鐵鹽(mg/L)Fe-Na-EDTA66 ； (4)有機(jī)成分(mg/L):肌醇150，VB1O.6，動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑O. I ；(5)生長(zhǎng)激素(mg/L)6-ΒΑ1. 5，IBAO. 02 ； (6)液體生物防腐劑(ml/L)Proclin3000. 05(7)活性炭(g/L)3. O ；(8)蔗糖(g/L)30 ； 所述液體培養(yǎng)基的PH為酸性溶液，其pH值為5. 8-6. O。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的液體培養(yǎng)基，其中所述所述動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑具體成分包括(每千克含量)Va18000000-22000000U. I.、VD318000-21000U. I.、VE4800_5200mg、VK260-320mg、VB11400-1600mg、VB2600-800mg、VB6400-600mg、VB122_10mg、泛酸 3800-4200mgVpp4700-5IOOmg、生物素 400_600mg、葉酸 200_400mg、Vc9800_10800mg、L-蘇氨酸3500-4000mg、L-纈氨酸 4800_5200mg、L-谷氨酰胺 12000_13000mg、L-天冬氨酸6200-6600mg、DL-甲硫氨酸 8000-8400mg、DL-丙氨酸 4600-5000mg、L-精氨酸 3800-4100mg、L-半胱氨酸 1000-1200mg、L-苯丙氨酸 3200_3600mg、L-絲氨酸 1300_1600mg、L-亮氨酸5700-6200mg、L-賴(lài)氨酸 5300_5600mg、L-普氨酸 3800_4200mg、L-組氨酸 1500_2000mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的液體培養(yǎng)基，其中所述所述動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)添加劑具體成分包括(每千克含量)Va20000000U. I.、VD320000U. I.、VE5000mg、VK300mg、VB11500mg、VB2700mg、VB650Omg> VB125mg、泛酸 4000mg Vpp5000mg、生物素 500mg、葉酸 300mg、VcIOOOOmg> L-蘇氨酸3900mg、L_纟顏氨酸5000mg、L-谷氨酰胺12500mg、L_天冬氨酸6500mg、DL_甲硫氨酸8250mg、DL-丙氨酸4800mg、L-精氨酸3950mg、L_半胱氨酸1125mg、L_苯丙氨酸3500mg、L_絲氨酸1500mg、L-亮氨酸 6000mg、L-賴(lài)氨酸 5500mg、L-普氨酸 4000mg、L-組氨酸 1850mg。
全文摘要
發(fā)明涉及一種促進(jìn)果樹(shù)組培苗生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，所述液體培養(yǎng)基包括無(wú)機(jī)大量元素、無(wú)機(jī)微量元素、有機(jī)成分、生長(zhǎng)激素、液體防腐劑、蔗糖等營(yíng)養(yǎng)成分，能同時(shí)在桃、李、杏、甜櫻桃等核果類(lèi)果樹(shù)砧木組培快繁階段起到重要作用，對(duì)組培快繁的矮小試管苗簇生芽在7-10天內(nèi)顯著增長(zhǎng)和增粗，為下一步的試管苗生根起到促進(jìn)作用。
文檔編號(hào)C12N5/04GK102936579SQ201210378028
公開(kāi)日2013年2月20日 申請(qǐng)日期2012年9月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年9月23日
發(fā)明者李洪雯, 劉建軍, 陳克玲, 何建, 王建輝, 關(guān)斌 申請(qǐng)人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所