專利名稱：一種藍(lán)莓脫色多糖的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藍(lán)莓加工技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種藍(lán)莓脫色多糖的制備方法。
背景技術(shù)：
藍(lán)莓(Blueberry)，學(xué)名越桔，屬于杜鵑花科(Ericaceae)越橘屬(Vaccinium spp)植物。藍(lán)莓為小漿果，果實(shí)呈藍(lán)色，近圓形，果肉細(xì)膩，種子極小，甜酸適度，且具有香爽宜人的香氣，可鮮食，也可作為食品、飲料、醫(yī)藥等的原料。藍(lán)莓果實(shí)中富含水果中常見(jiàn)的多種營(yíng)養(yǎng)成分，以及花色素苷、類黃酮等抗氧化劑和細(xì)菌生長(zhǎng)抑制劑，屬高氨基酸、高鋅、高鐵、高銅、高維生素的果品，具有良好的營(yíng)養(yǎng)保健作用，包括增強(qiáng)視力、消除眼睛疲勞、防止腦神經(jīng)老化、抗癌、軟化血管、增強(qiáng)人體免疫等，其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值遠(yuǎn)高于蘋果、葡萄、橘子等水果， 堪稱“世界水果之王”，藍(lán)莓果汁為紫紅色，色澤較深，經(jīng)脫色后能有效地解決其污染皮膚、 口唇、牙齒等特點(diǎn)。多糖(polysaccharide)是指由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈，至少要超過(guò)10個(gè)以上的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物。由相同單糖組成的多糖稱為純多糖，如淀粉、纖維素和糖原；以不同單糖組成的多糖稱為雜多糖，如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。多糖不是一種純粹的化學(xué)物質(zhì)，而是聚合程度不同的物質(zhì)的混合物。多糖類一般不溶于水，無(wú)甜味，不能形成結(jié)晶，無(wú)還原性和變旋現(xiàn)象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解過(guò)程中，往往產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物，最終完全水解得到單糖。脫色是指脫去液體或固體物料的色素，現(xiàn)有藍(lán)莓多糖的脫色方法操作較復(fù)雜，且制得的多糖純度較低。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是操作較復(fù)雜，且制得的多糖純度較低。為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案一種藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其包括步驟Sl 將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在50-60°C條件下攪拌酶解 60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘；步驟S2 將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5-10g，上樣液為稀釋5-10倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為 400-500ml，流速為 l_3ml/min ；步驟S3 將經(jīng)步驟S2后得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。 進(jìn)一步地，所述步驟Sl中，所述預(yù)處理步驟包括取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎。進(jìn)一步地，所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 5-1 10。進(jìn)一步地，所述步驟Sl中，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為1% -5% ml/100ml。進(jìn)一步地，所述纖維素酶為Vis纖維素酶。進(jìn)一步地，所述步驟Sl中，所述Vis纖維素酶的活力單位為5.0X104U/g。本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法應(yīng)用酶法降解藍(lán)莓纖維并去除蛋白即脫色與蛋白去除相結(jié)合制成藍(lán)莓脫色多糖粉末，其操作簡(jiǎn)單，多糖純度較高，可達(dá)80%-90 %。


圖1為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法的流程示意圖；圖2為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的溫度對(duì)脫色效果的影響對(duì)比示意圖；圖3為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的加熱時(shí)間對(duì)脫色效果的影響對(duì)比示意圖；圖4為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的料液比對(duì)脫色效果的影響對(duì)比示意圖；圖5為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的上樣液濃度比對(duì)脫色效果的影響對(duì)比示意圖；圖6為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的流速比對(duì)脫色效果的影響對(duì)比示意圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例。請(qǐng)參閱圖1，圖1為本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法的流程示意圖。本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法是應(yīng)用酶法降解藍(lán)莓纖維并去除蛋白制成藍(lán)莓脫色多糖粉末。所述方法包括下述步驟步驟Sl 將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入纖維素酶，在50-60°C條件下攪拌酶解 60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘；步驟S2 將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5-10g，上樣液為稀釋5-10倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為 400-500ml，流速為 l_3ml/min ；步驟S3 將經(jīng)步驟S2后得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。所述步驟Sl中，所述預(yù)處理步驟包括取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘， 置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為 1:5-1: 10。所述步驟Sl中，所述纖維素酶為Vis纖維素酶。所述步驟Sl中，所述Vis纖維素酶的活力單位為5. OX 104U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為-5%ml/100ml。以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例1取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 5。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在50°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述Vis 纖維素酶的活力單位為5. OX 104U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為 l%ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附
4樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為450ml， 流速為lml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例2取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 10。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在60°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述 Vis纖維素酶的活力單位為5. 0萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為 5% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為10g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為500ml， 流速為3ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例3取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 7。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在55°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述Vis 纖維素酶的活力單位為5. O萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為3% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為6g，上樣液為稀釋10倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為400ml，流速為2ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥 24-48h,即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例4取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 8。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在58°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述Vis 纖維素酶的活力單位為5. O萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為3% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為6g，上樣液為稀釋6倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為460ml，流速為2ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥 24-48h,即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例5取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 6。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在58°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述Vis 纖維素酶的活力單位為5. O萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為4% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為8g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為500ml，流速為3ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥 24-48h,即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。
實(shí)施例6取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 10。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在59°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述 Vis纖維素酶的活力單位為5. 0萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為 3% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為10g，上樣液為稀釋8倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為430ml， 流速為2ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例7取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 10。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在52°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述 Vis纖維素酶的活力單位為5. O萬(wàn)U/g,酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為 4% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為10g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為500ml， 流速為3ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥對(duì)-4他，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。實(shí)施例8取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎；所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1 9。將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入Vis纖維素酶，在60°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘，所述Vis 纖維素酶的活力單位為5. O萬(wàn)U/g，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為4% ml/100ml ；將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為7g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為400ml，流速為3ml/min ；再將經(jīng)上述步驟得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥 24-48h,即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。請(qǐng)參閱圖2-圖6，本發(fā)明對(duì)于脫色所用的大孔吸附樹(shù)脂依據(jù)為脫色率的大小測(cè)定實(shí)驗(yàn)。取未脫色及脫色后的果汁anl，至于25mL容量瓶中，加去離子水，以去離子水做參比，對(duì)脫色率供試品進(jìn)行全波長(zhǎng)掃描，確定最大波長(zhǎng)為523nm，以此波長(zhǎng)為檢測(cè)波長(zhǎng)，檢測(cè)供試品溶液的吸光度，并計(jì)算脫色率。脫色率=(脫色前吸光度-脫后吸光度/脫前吸光度)X 100% (I)實(shí)驗(yàn)材料為稀釋五倍的藍(lán)莓果汁以及三種大孔吸附樹(shù)脂分別為AB-8、LKS05、 LKSO1。a)溫度對(duì)脫色效果的影響因?yàn)閷?shí)驗(yàn)材料為果汁，溫度過(guò)高會(huì)影響果汁的有效成分，故只選擇30°C、4(TC、 50°C三個(gè)溫度進(jìn)行試驗(yàn)，3g濕樹(shù)脂中加入40ml果汁，水浴1小時(shí)，帶入式⑴測(cè)脫色率。結(jié)果如圖2所示。
從圖2中可以看出LKSOl的脫色效果比LKS05、AB_8好，且最佳的溫度為50°C。b)加熱時(shí)間對(duì)脫色效果的影響因?yàn)閷?shí)驗(yàn)材料為果汁，長(zhǎng)時(shí)間加熱會(huì)影響果汁的有效成分，故在50°C下，3g濕樹(shù)脂中加入40ml果汁，每隔IOmin測(cè)一次吸光度。結(jié)果如圖3所示。從圖3可以看出LKSOl的脫色效果比LKS05、AB-8好，考慮到果汁不易長(zhǎng)時(shí)間加熱，因此最佳加熱時(shí)間選擇40min。c)料液比對(duì)脫色效果的影響3g濕樹(shù)脂中分別加入30、40、50、60、70ml稀釋五倍的果汁，以130r/min，在50°C下水浴40min，在523nm下測(cè)吸光度，帶入式(I)得脫色率。結(jié)果如圖4所示。從圖4可以看出樹(shù)脂LKS01、LKS05、AB_8的脫色效果相差不是很大，綜合前面兩個(gè)單因素，脫色效果最好的樹(shù)脂為L(zhǎng)KSOl。d)濃度對(duì)脫色率的影響將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5g，上樣液為稀釋1、3、5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為400ml， 收集時(shí)間為8min/管，流速為3ml/min ；從圖5可以看出，上樣液濃度為稀釋5倍的果汁時(shí)，脫色效果最好，因此上樣液最佳濃度為稀釋5倍的果汁。e)流速對(duì)脫色率的影響將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5g，上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為400ml，收集時(shí)間為8min/管，流速為l、2、3ml/min ；從圖6可以看出，在上樣液流速為lml/min時(shí)，脫色率最大，故流速選擇lml/min。綜上，藍(lán)莓多色粗多糖制備的最佳條件為上樣液為稀釋5倍的藍(lán)莓果汁，上樣液流速為lml/min，大孔吸附樹(shù)脂為5g濕LKS01，收集時(shí)間為Smin/管。在最佳條件下，5g濕樹(shù)脂(LKSOl)可吸附400ml果汁，脫色率達(dá)90. 28%。本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法應(yīng)用酶法降解藍(lán)莓纖維并去除蛋白即脫色與蛋白去除相結(jié)合制成藍(lán)莓脫色多糖粉末，其操作簡(jiǎn)單，多糖純度較高，可達(dá)80%-90 %。這里本發(fā)明的描述和應(yīng)用是說(shuō)明性的，并非想將本發(fā)明的范圍限制在上述實(shí)施例中。這里所披露的實(shí)施例的變形和改變是可能的，對(duì)于那些本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)實(shí)施例的替換和等效的各種部件是公知的。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該清楚的是，在不脫離本發(fā)明的精神或本質(zhì)特征的情況下，本發(fā)明可以以其它形式、結(jié)構(gòu)、布置、比例，以及用其它組件、 材料和部件來(lái)實(shí)現(xiàn)。在不脫離本發(fā)明范圍和精神的情況下，可以對(duì)這里所披露的實(shí)施例進(jìn)行其它變形和改變。
權(quán)利要求
1.一種藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，其包括步驟Sl 將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入纖維素酶，在50-60°C條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘；步驟S2 將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKSOl大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5-10g，上樣液為稀釋5-10倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為 400-500ml，流速為 l_3ml/min ；步驟S3 將經(jīng)步驟S2后得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥 24-48h,即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，所述步驟Sl中，所述預(yù)處理步驟包括取適量藍(lán)莓果于沸水中燙1-2分鐘，置于常溫下冷卻后用組織搗碎機(jī)搗碎。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，所述藍(lán)莓經(jīng)預(yù)處理后所得沉淀與水的重量比為1:5-1: 10。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，所述步驟Sl中，酶液體積與藍(lán)莓果漿體積的百分含量(添加量)為-5%ml/100ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，所述纖維素酶為Vis 纖維素酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，其特征在于，所述Vis纖維素酶的活力單位為5.0X104U/go
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種藍(lán)莓脫色多糖的制備方法，包括步驟S1將預(yù)處理得到的藍(lán)莓果漿加入纖維素酶，在50-60℃條件下攪拌酶解60-90分鐘，酶解后將酶解液置于沸水滅酶1-2分鐘；步驟S2將滅酶后的酶解液進(jìn)行離心，取上清液，將所述上清液通過(guò)LKS01大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行脫色，其中，大孔樹(shù)脂裝柱為5-10g，上樣液為稀釋5-10倍的藍(lán)莓果汁，上樣量為400-500ml，流速為1-3ml/min；步驟S3將經(jīng)步驟S2后得到的脫色的多糖溶液濃縮至固含值為15-20后，再冷凍干燥24-48h，即得到藍(lán)莓脫色多糖粉末。本發(fā)明藍(lán)莓脫色多糖的制備方法操作簡(jiǎn)單，多糖純度較高，可達(dá)80％-90％。
文檔編號(hào)C12P19/14GK102337315SQ20111029617
公開(kāi)日2012年2月1日 申請(qǐng)日期2011年10月8日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月8日
發(fā)明者王昌濤, 許小征 申請(qǐng)人:江蘇世東野寶植物資源開(kāi)發(fā)有限公司