專利名稱：一種用于篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的微生物方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一株長(zhǎng)雙歧桿菌菌株及其作為工作菌株在篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
乙酰甲胺磷，化學(xué)名稱是0，S-二甲基，N-乙?；虼柞０?，是殺蟲(chóng)劑甲胺磷 (methmaidophos)的N-乙?；苌?。國(guó)際通用英文名為Ac印hate，分子式C4HltlNO3PS,分子量183. 16，結(jié)構(gòu)式為
權(quán)利要求
1.一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002的應(yīng)用，其特征在于所述菌株的應(yīng)用為一株長(zhǎng)雙歧桿菌 (Bifidobacterium longum)LJM002 CGMCC No. 4900應(yīng)用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002的應(yīng)用，其特征在于所述的一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM-002應(yīng)用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢，包括步驟(1)篩檢培養(yǎng)基制備蛋白胨10g，牛肉膏10g，酵母膏5g，葡萄糖20g，乙酸鈉5g，K2HPO4 2g, MgSO4 ‘ 7 H2O 0. 5g，MnSO4 · 4H20 0. 2g，低聚果糖 3g，檸檬酸二銨 2g，吐溫-80 1ml，瓊脂 15g，顯色劑0. lg，蒸餾水1L，加熱溶解校正ρΗ6· 5，115°C高壓滅菌15-20分鐘；(2)菌懸液制備長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂的斜面培養(yǎng)基，35士2°C厭氧培養(yǎng) 24小時(shí)，用滅菌生理鹽水將菌苔洗下，制成懸液，置2-8°C冰箱中保存；(3)菌層平板制備取直徑約90mm、高16 17mm的平板，注入加熱融化的篩檢培養(yǎng)基 20mL，使在碟底內(nèi)均勻攤布，放置水平臺(tái)上使凝固，作為底層；在已凝固的底層培養(yǎng)基(放冷至48 50°C )上加入菌懸液0. 5mL，充分混勻，使在底層上均勻攤布，作為菌層；(4)樣品處理取待檢的食品樣品勻漿組織5g，用無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(pH6.0)20ml 稀釋，漩渦混勻，于80°C水浴加熱5min，冷卻后于5000r/min離心15min，取上清液作為供試樣品液；(5)樣品測(cè)定在菌層平板的培養(yǎng)皿中放置圓濾紙片(直徑13士1mm)，用鑷子輕壓紙片，使紙片與培養(yǎng)基緊密接觸，用微量移液器在圓濾紙片上滴加供試樣品液90μ 1。每個(gè)供試樣至少重復(fù)2個(gè)培養(yǎng)皿，35 士2°C厭氧培養(yǎng)18 M小時(shí)，抑菌圈直徑通過(guò)抑菌圈電腦測(cè)量分析儀測(cè)量；(6)結(jié)果判定當(dāng)抑菌圈>15mm，判斷食品樣品中乙酰甲胺磷殘留陽(yáng)性(+)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002應(yīng)用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢， 其特征在于，其中步驟(1)所述的顯色劑為5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷(X-Gal)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002應(yīng)用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢，其特征在于，其中步驟( 所述菌懸液在721分光光度計(jì)580nm波長(zhǎng)下光透過(guò)率控制為 0. 8。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002應(yīng)用于食品乙酰甲胺磷殘留的篩檢， 其特征在于，其中步驟(4)所述的食品樣品包括白菜、茄子、黃瓜、南瓜、冬瓜、蘋(píng)果、梨子、 桃子等蔬菜水果。
全文摘要
本發(fā)明提供了一株長(zhǎng)雙歧桿菌LJM002菌株，保藏號(hào)為CGMCC No.4900。LJM002菌株對(duì)乙酰甲胺磷超敏感，是檢測(cè)食品中乙酰甲胺磷殘留的工作菌株。本發(fā)明還提供了一種篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的微生物法，根據(jù)篩檢培養(yǎng)基上抑菌圈的大小判定待測(cè)食品樣品中乙酰甲胺磷殘留量是否超標(biāo)。本發(fā)明提供篩檢食品中乙酰甲胺磷殘留的方法具有操作簡(jiǎn)便、費(fèi)用低廉、靈敏度高、適合樣本篩檢的特點(diǎn)，更符合我國(guó)農(nóng)藥殘留檢測(cè)部門(mén)的大量樣品篩檢要求。
文檔編號(hào)C12R1/01GK102268471SQ201110187990
公開(kāi)日2011年12月7日 申請(qǐng)日期2011年6月25日 優(yōu)先權(quán)日2011年6月25日
發(fā)明者劉佳明, 方芳, 王文蔚 申請(qǐng)人:溫州醫(yī)學(xué)院