專利名稱：：輔助轉(zhuǎn)育川麥42高產(chǎn)位點(diǎn)的分子標(biāo)記技術(shù)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是一種利用SSR分子標(biāo)記，輔助轉(zhuǎn)育小麥一個高產(chǎn)位點(diǎn)的技術(shù)，屬于農(nóng)業(yè)生物技術(shù)工程領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：小麥?zhǔn)俏覈诙蠹Z食作物，在我國農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)中占有重要地位，然而，我國一直面臨著小麥產(chǎn)量低的難題，為了解決這一問題，育種家通過各種手段提高小麥產(chǎn)量?？茖W(xué)家重塑小麥進(jìn)化過程，利用四倍體小麥(Triticumturgid咖，2n=28，AABB)和節(jié)節(jié)麥(Aegilopstauschii，2n=14，DD)雜交染色體加倍合成了新的人工合成六倍體小麥。人工合成小麥綜合了四倍體小麥與節(jié)節(jié)麥的優(yōu)良性狀，其遺傳變異類型豐富，蘊(yùn)藏著豐富的高產(chǎn)等基因。本申請利用從人工合成小麥基因資源，通過與四川普通小麥的雜交，育成高產(chǎn)小麥新品種川麥42。川麥42在國家區(qū)試長江上游組中比對照川麥107平均增產(chǎn)16.4%，是有史以來四川省區(qū)試中唯一一個連續(xù)兩年平均畝產(chǎn)達(dá)到400公斤以上的品種；川麥42已成為我國小麥高產(chǎn)、抗條銹育種的重要基因資源。人工合成小麥衍生品種川麥42高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、抗條銹，已經(jīng)成為小麥高產(chǎn)、抗條銹育種的重要基因源。因此，利用容易選擇的、快速有效的方法，輔助轉(zhuǎn)育川麥42高產(chǎn)基因，對于培育高產(chǎn)小麥品種是非常有意義的。分子標(biāo)記輔助選擇高產(chǎn)基因，可以在苗期的時候進(jìn)行選擇，且不受環(huán)境影響，更快速、更容易、更準(zhǔn)確。
發(fā)明內(nèi)容針對小麥的產(chǎn)量是綜合性狀，且受多個基因控制，難于選擇，本發(fā)明的目的在于利用SSR分子標(biāo)記，對川麥42遺傳背景中的高產(chǎn)人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)進(jìn)行分析，以期發(fā)掘川麥42的高產(chǎn)位點(diǎn)并為高產(chǎn)育種提供快速、有效的分子標(biāo)記技術(shù)。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案本發(fā)明利用川麥42(以下簡寫為CM42)及其親本(人工合成小麥SYN769，普通小麥SW3243，川6415)(CM42的系譜為SYN769/SW3243/川6415);以及小麥品種用農(nóng)16(以下簡稱CN16)，和已經(jīng)建立的CM42XCN16重組自交系材料126個。(1)利用分子標(biāo)記(SSR)，檢測CM42中人工合成小麥SYN769的導(dǎo)入位點(diǎn)；(2)利用已建立的CM42和CN16的重組自交系，研究CM42遺傳背景中人工合成小麥SYN769的遺傳位點(diǎn)對小麥主要農(nóng)藝性狀的貢獻(xiàn)和遺傳效應(yīng)；(3)發(fā)掘CM42遺傳背景中人工合成小麥SYN769導(dǎo)入的高產(chǎn)位點(diǎn)；(4)建立分子標(biāo)記輔助轉(zhuǎn)育小麥高產(chǎn)位點(diǎn)的技術(shù)休系。該輔助轉(zhuǎn)育川麥42高產(chǎn)位點(diǎn)的分子標(biāo)記技術(shù)具體實(shí)施步驟如下1.1提取DNA，DNA提取方法按照CTAB法提??；1.11、用于DNA提取小麥材料共131個CM42，CM42的親本3個(人工合成小麥SYN769、普通小麥SW3243和川6415)，CN16，和④CM42XCN16構(gòu)建的重組自交系126個；1.12、取以上131個材料，每個材料隨機(jī)取10粒種子，在培養(yǎng)皿中發(fā)芽，5-10天待長成幼苗后，每個材料取新鮮幼嫩葉片3-5克于液氮中迅速研磨至粉末；1.13、將上述粉末置于1.5mlEP管中，粉末占EP管體積的1/3，然后加入預(yù)熱的95。C的2XCTAB提取緩沖液約500ul，輕搖混勻；1.14、將EP管置入65"恒溫水浴1小時，期間輕輕混勻2-3次；1.15、取出EP管，冷卻至室溫，然后加入等體積的氯仿異戊醇(V/V=24:1)，輕輕上下顛倒充分混勻直至上清呈牛奶狀；1.16、靜置5-10分鐘后，放入離心機(jī)中10000rmp離心15分鐘，;1.17、取上清液，加入等體積異丙醇輕輕搖勻后，置-20°〇的冰箱中至少2小時；1.18、10000rmp離心10分鐘，棄上清液，加500ul70%乙醇清洗，靜置20分鐘到掉70%乙醇，再用無水乙醇洗20分鐘，棄無水乙醇，EP管底部白色沉淀物即為DNA;1.19、室溫風(fēng)干，加無菌水300-500ul，置4"充分溶解；1.110、用1.2%的瓊脂糖膠測定DNA的濃度，取5ulDNA樣品跑垂直板電泳；1.111、DNA樣品在4。C下保存?zhèn)溆茫?.2分子標(biāo)記SSR鑒定CM42中人工合成小麥的導(dǎo)入位點(diǎn)1.21、用SSR引物擴(kuò)增CM42以及它的親本人工合成小麥SYN769、普通小麥SW3243禾口川6415，共選用Xgwm，Xwmc，Barc，Cfa，cfd和cfe六類SSR標(biāo)記491個，引物由TAKARA公司合成；PCR擴(kuò)增按照R5der等的方法，反應(yīng)在25yL反應(yīng)體系中進(jìn)行，反應(yīng)體系含10Xbuffer,0.2mmol/LdNTP，250nmol/L隨機(jī)引物，50100ng模板DNA，1UT叫酶禾口無菌水，PCR擴(kuò)增于PCR擴(kuò)增儀PTC-100TM上完成，反應(yīng)程序?yàn)?4。C預(yù)變性3min;94。C變性lmin，60。C、55。C或5(TC復(fù)性lmin，72。C延伸2min，共44個循環(huán);72。C延伸10min，擴(kuò)增產(chǎn)物用6%的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染顯色、數(shù)碼相機(jī)照相保存；1.22、比較4者分子標(biāo)記擴(kuò)增的電泳圖譜，找出差異；1.23、分析出CM42的遺傳背景中來自于人工合成小麥SYN769的位點(diǎn)；1.3分子標(biāo)記比較CM42，CN16，找出其中有明顯差異的位點(diǎn)1.31、用已找出的CM42中人工合成小麥的導(dǎo)入位點(diǎn)SSR標(biāo)記的引物擴(kuò)增CM42和CN16;此步驟中分子標(biāo)記法同于上述步驟1.21的分子標(biāo)記法；1.32、比較2者分子標(biāo)記的電泳圖譜，找出差異；1.33、分析出CM42與CN16有明顯差異的位點(diǎn)；1.4分子標(biāo)記分析CM42XCN16的重組自交系將找到的CM42與CN16有明顯差異的位點(diǎn)SSR標(biāo)記的引物擴(kuò)增CM42，CN16和重組自交系，此步驟中分子標(biāo)記法同于上述步驟1.21的分子標(biāo)記法；1.5川麥42中人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)分析利用分子標(biāo)記和重組自交系1年2點(diǎn)的田間數(shù)據(jù)，通過Excel和SPSS進(jìn)行方差分析和差異性檢驗(yàn)，分析人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)。本發(fā)明在CM42中共檢測到70個人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)，其中有37個位點(diǎn)在CM42與CN16間有顯著多態(tài)性差異。將37個人工合成小麥導(dǎo)入遺傳位點(diǎn)的分子標(biāo)記數(shù)據(jù)與CM42XCN16的重組自交系群體2個環(huán)境(2008年廣漢和井研試驗(yàn)點(diǎn))的農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)性統(tǒng)計分析發(fā)現(xiàn)，有9個位點(diǎn)與籽粒產(chǎn)量等重要農(nóng)藝性狀存在顯著正相關(guān)或負(fù)相關(guān)，其中1個位點(diǎn)(barcll83-4D)與籽粒產(chǎn)量性狀存在顯著正相關(guān)，7個位點(diǎn)(wmc532-3A、barcl97-3AL/5AL、barc360-5A、barcl71-6AS、barcl65-5AL、barc61-lBL和xgwm314-3D)與籽粒產(chǎn)量性狀存在顯著負(fù)相關(guān)。遺傳位點(diǎn)對主要農(nóng)藝性狀顯著正相關(guān)，說明該位點(diǎn)對農(nóng)藝性狀有正效影B向，否則為負(fù)效影響。因此，可以通過分子標(biāo)記方法，進(jìn)一步利用與籽粒產(chǎn)量性狀存在顯著相關(guān)的位點(diǎn)標(biāo)記對重組自交系群體株系基因型(CM42基因型或CN16基因型)進(jìn)行區(qū)分，并根據(jù)區(qū)分結(jié)果將重組自交系群體株系籽粒產(chǎn)量等主要農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù)分為兩組進(jìn)行方差分析，比較分析CM42基因型和CN16基因型的效應(yīng)。由于barcl183位點(diǎn)與籽粒產(chǎn)量等重要農(nóng)藝性狀存在顯著正相關(guān)，本申請比較分析了barcl183位點(diǎn)的CM42基因型和CN16基因型的遺傳效應(yīng)。利用Barcl183標(biāo)記對CM42與CN16重組自交系群體進(jìn)行了比較分析，確定重組自交系群體每個株系在Barcl183位點(diǎn)的基因型(川麥42基因型或川農(nóng)16基因型)；將分子標(biāo)記數(shù)據(jù)與重組自交系群體2個環(huán)境(2008年廣漢和井研試驗(yàn)點(diǎn))的農(nóng)藝性狀數(shù)據(jù)結(jié)合并進(jìn)行方差分析，結(jié)果表明(表2):在Barcll83位點(diǎn)CM42基因型和川農(nóng)16基因型株系在分蘗力、成穗率、有效穗、單位面積粒數(shù)、收獲指數(shù)、生物生產(chǎn)率、籽粒生產(chǎn)率和籽粒產(chǎn)量平均值存在顯著差異(0.05差異水平)；CN16基因型株系僅在成穗率一個性狀顯著高于CM42基因型株系；而CM42基因型株系的分蘗力、有效穗、單位面積粒數(shù)、收獲指數(shù)、生物生產(chǎn)率、籽粒生產(chǎn)率和籽粒產(chǎn)量顯著高于CN16基因型株系。由此可以說明，Barc1183位點(diǎn)的CM42基因型能促進(jìn)分蘗能力、有利于提高有效穗、單位面積粒數(shù)；同時，CM42基因型的收獲指數(shù)較高、生物生產(chǎn)率和籽粒生產(chǎn)率也較高，最終CM42基因型株系籽粒產(chǎn)量平均值較CN16基因型的顯著增產(chǎn)，高達(dá)8.41%(7084.73-6535.35)+6535.35X100%。本發(fā)明使用的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增反應(yīng)體系為常規(guī)PCR體系，電泳和染色都用普通儀器和試劑，不需要任何特殊的儀器和特殊的試劑，任何公司的生產(chǎn)的PCR反應(yīng)儀、電泳槽和電泳儀，任何生物試劑公司生產(chǎn)的試劑均可使用而達(dá)到本發(fā)明的目的。本發(fā)明試驗(yàn)過程中，利用Barcl183標(biāo)記分析后，普通小麥SW3243、川6415和川農(nóng)16與中國春的擴(kuò)增產(chǎn)物大小一致，也為254bp;而川麥42和人工合成小麥親本Syn769的擴(kuò)增產(chǎn)物略大，約為270bp，很容易鑒別。利用與高產(chǎn)相關(guān)的引物Barcll83輔助選擇高產(chǎn)基因，從而更快速、準(zhǔn)確、有效的轉(zhuǎn)育川麥42的高產(chǎn)特性，加快高產(chǎn)小麥育種進(jìn)程。圖1是本發(fā)明技術(shù)路線圖。圖2是利用小麥SSR標(biāo)記位點(diǎn)Barcl183，掃描川麥42及其親本Syn769、SW3243和川6415，以及四川栽培小麥川農(nóng)16的電泳圖。圖2中M為DNA分子量標(biāo)記;1為人工合成小麥Syn769;2為川麥42;3為Sw3243;4為川6415;5為川農(nóng)16;6為中國春(對照，為254bp)。具體實(shí)施例方式(—)試驗(yàn)材料人工合成小麥衍生品種川麥42(CM42)及其親本(人工合成小麥SYN769，普通小麥SW3243，川6415)，四川小麥品種川農(nóng)16及川麥42與四川小麥品種川農(nóng)16構(gòu)建的127個重組自交系(RIL，F(xiàn)8)。2008年小麥生長季在四川廣漢和井研縣種植川麥42、川農(nóng)16及其RIL群體(一年兩點(diǎn))，試驗(yàn)按照隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)，小區(qū)面積5m2，采用免耕、撬窩點(diǎn)播、稻草覆蓋栽培方式。2008-2009年連續(xù)2個小麥生長季在四川井研縣種植上述親本及RIL群體，試驗(yàn)按照隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，3次重復(fù)，小區(qū)面積1.5m2，采取翻耕、條溝點(diǎn)播、細(xì)土蓋種栽培方式。(二)田間調(diào)查與性狀分折田間調(diào)查基本苗、分蘗、生育期和有效穗，成熟期取樣考種，測定株高、于粒重、穗粒數(shù)、穗長、小穗數(shù)、單穗重等性狀，田間測定小區(qū)產(chǎn)量。籽粒產(chǎn)量按12%水分折算，生物產(chǎn)量為整個地上部分干重，生物生產(chǎn)率=生物產(chǎn)量X100/全生育期，籽粒生產(chǎn)率=籽粒產(chǎn)量X100/抽穗至成熟天數(shù)。(詳見表1)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>—5ALbare!_65—5ALbarci71一6ASbare1806BL/5AS,':313bare197-3AL/5A113'W-144.198(*-.106-.061-.065-,096-.119-.139-.203(*114.167.014.023-.053.002.073—.004-.102-.106.097—.005-.020-.079-,173(*)—.104.086.090.107.273(*承)12'1—.168.006,041—.圖，.000.022.097I960)-.剛.008,23.1(**.079152-,078.045-,069.083-.24.042.0丄4.015-，009.000-.157、205(*■041:—.108.013088.069,039.058i.043.024!.142.127.049018.009-.036■036一.042■030.067i.170114140.008.050—,108.(〕311.122156-.005.042.031.159.124,258(林.097,042.030142.051188W.017.109—,016,022—.016■119■067157183(*.090117135107.062,225(*).183(*).049.093.048,065.070—.057-048-137-.036-.054-，m.052-.045--.L75(>-.220(*,022;.102.(U6I.044.026.012106.077,030-.018m,045-.181"163—.035.038—.173■099■041.094.077-.l貼-.182(*-.153-.123-.2〗5(*■068.055-.0'15,185(*.216(氺.017-.175(*-,L06-.239(*132:-.123,036,080i.2M"1351-.162.081085.021!..(UOI.!02;-.004..126.002.021CN101748217A眾s廿，7/12^<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>農(nóng)16，及川麥42與川農(nóng)16構(gòu)建的127個重組自交系幼嫩葉片，利用CTAB法提取DNA。選用小麥2105對SSR引物，分析川麥42中人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)，并利用重組川麥42X川農(nóng)16自交系群體，分析川麥42中人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)，找出高產(chǎn)位點(diǎn)。PCR反應(yīng)條件、擴(kuò)增體系如下(15ul體系)1XPCR緩沖液，模板1.5ul，鎂離子濃度1.5mM，dNTP濃度0.2mM，引物濃度為0.2uM，rTaq酶1U，加無菌去離子水或ddH20水至15ul。PCR程序?yàn)?)94。C預(yù)變性5min2)降落PCR程序共11個循環(huán)每一循環(huán)降低1°C94。C，45秒65。C，45秒72。C，45秒3)常規(guī)PCR程序30個循環(huán)94。C，45秒55。C，45秒72。C，45秒4)最后一部擴(kuò)增72°C，10min電泳檢測聚丙烯酰胺凝膠濃度為6%(丙烯酰胺甲叉雙丙烯酰胺=39:1)，每個點(diǎn)樣孔內(nèi)擴(kuò)增產(chǎn)物的上樣量為5-8ul。220V恒壓條件下預(yù)電泳20min后400V恒壓條件下電泳lh后O.1%硝酸銀染色10分鐘，2X的NaOH和1.5%甲醛顯影至條帶出現(xiàn)，最后照相保存。(四)遺傳距離計算和連鎖圖構(gòu)建利用重組自交系分子標(biāo)記實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和重組自交系1年2點(diǎn)的田間數(shù)據(jù)，通過Excel和SPSS進(jìn)行方差分析和差異性檢驗(yàn)，分析人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)。(五)結(jié)果1、如圖2所示，發(fā)現(xiàn)SW3243、川6415和川農(nóng)16基因型相同，都含有254bp片段，川麥42基因型與Syn769基因型相同，含有大約270bp片段。2、川麥42中有1個位點(diǎn)人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)(barcll83-4D)與籽粒產(chǎn)量性狀存在顯著正相關(guān)；3、川麥42的人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)Barcl183能促進(jìn)分蘗能力、有利于提高有效穗、單位面積粒數(shù)；且收獲指數(shù)較高、生物生產(chǎn)率和籽粒生產(chǎn)率也較高；在川麥42X川農(nóng)16重組自交系群體中含CM42人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)Barcl183的株系籽粒產(chǎn)量平均值較CN16的顯著增產(chǎn)，達(dá)8.41%。(詳見表2)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>權(quán)利要求一種輔助轉(zhuǎn)育川麥42高產(chǎn)位點(diǎn)的分子標(biāo)記技術(shù)，其特征在于包括以下步驟1.1提取DNA，DNA提取方法按照CTAB法提??；1.11、用于DNA提取小麥材料共131個川麥42(CM42)，川麥42的親本3個，分別為人工合成小麥SYN769、普通小麥SW3243和川6415，川農(nóng)16(CN16)，和川麥42×川農(nóng)16構(gòu)建的重組自交系126個；1.12、取以上131個材料，每個材料隨機(jī)取10粒種子，在培養(yǎng)皿中發(fā)芽，5-10天待長成幼苗后，每個材料取新鮮幼嫩葉片3-5克于液氮中迅速研磨至粉末；1.13、將上述粉末置于1.5mlEP管中，粉末占EP管體積的1/3，然后加入預(yù)熱的95℃的2×CTAB提取緩沖液約500ul，輕搖混勻；1.14、將EP管置入65℃恒溫水浴1小時，期間輕輕混勻2-3次；1.15、取出EP管，冷卻至室溫，然后加入等體積的氯仿∶異戊醇(V/V＝24∶1)，輕輕上下顛倒充分混勻直至上清呈牛奶狀；1.16、靜置5-10分鐘后，放入離心機(jī)中10000rmp離心15分鐘，；1.17、取上清液，加入等體積異丙醇輕輕搖勻后，置-20℃的冰箱中至少2小時；1.18、10000rmp離心10分鐘，棄上清液，加500ul70％乙醇清洗，靜置20分鐘到掉70％乙醇，再用無水乙醇洗20分鐘，棄無水乙醇，EP管底部白色沉淀物即為DNA；1.19、室溫風(fēng)干，加無菌水300-500ul，置4℃充分溶解；1.110、用1.2％的瓊脂糖膠測定DNA的濃度，取5ulDNA樣品跑垂直板電泳；1.111、DNA樣品在4℃下保存?zhèn)溆茫?.2分子標(biāo)記SSR鑒定川麥42中人工合成小麥的導(dǎo)入位點(diǎn)1.21、用SSR引物擴(kuò)增川麥42以及它的親本人工合成小麥SYN769、普通小麥SW3243和川6415，共選用Xgwm，Xwmc，Barc，Cfa，cfd和cfe六類SSR標(biāo)記491個，引物由TAKARA公司合成；PCR擴(kuò)增按照等的方法，反應(yīng)在25μL反應(yīng)體系中進(jìn)行，反應(yīng)體系含10×buffer，0.2mmol/LdNTP，250nmol/L隨機(jī)引物，50~100ng模板DNA，1UTaq酶和無菌水，PCR擴(kuò)增于PCR擴(kuò)增儀PTC-100TM上完成，反應(yīng)程序?yàn)?4℃預(yù)變性3min；94℃變性1min，60℃、55℃或50℃復(fù)性1min，72℃延伸2min，共44個循環(huán)；72℃延伸10min，擴(kuò)增產(chǎn)物用6％的變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，銀染顯色、數(shù)碼相機(jī)照相保存；1.22、比較4者分子標(biāo)記擴(kuò)增的電泳圖譜，找出差異；1.23、分析出川麥42的遺傳背景中來自于人工合成小麥SYN769的位點(diǎn)；1.3分子標(biāo)記比較川麥42，川農(nóng)16，找出其中有明顯差異的位點(diǎn)1.31、用已找出的川麥42中人工合成小麥的導(dǎo)入位點(diǎn)SSR標(biāo)記的引物擴(kuò)增川麥42和川農(nóng)16，此步驟中分子標(biāo)記法同于上述步驟1.21的分子標(biāo)記法；1.32、比較2者分子標(biāo)記的電泳圖譜，找出差異；1.33、分析出川麥42與川農(nóng)16有明顯差異的位點(diǎn)；1.4分子標(biāo)記分析川麥42×川農(nóng)16的重組自交系將找到的川麥42與川農(nóng)16有明顯差異的位點(diǎn)SSR標(biāo)記的引物擴(kuò)增川麥42，川農(nóng)16和重組自交系，此步驟中分子標(biāo)記法同于上述步驟1.21的分子標(biāo)記法；1.5川麥42中人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)分析利用分子標(biāo)記和重組自交系1年2點(diǎn)的田間數(shù)據(jù)，通過Excel和SPSS進(jìn)行方差分析和差異性檢驗(yàn)，分析人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)。1.6結(jié)果根據(jù)川麥42×川農(nóng)16的重組自交系分子標(biāo)記和田間數(shù)據(jù)分析結(jié)果，在遺傳位點(diǎn)Barc1183上，川麥42基因型即人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)能促進(jìn)分蘗能力、有利于提高有效穗、單位面積粒數(shù)；川麥42基因型同時能提高小麥?zhǔn)斋@指數(shù)、生物生產(chǎn)率和籽粒生產(chǎn)率，并最終能顯著提高提高小麥籽粒產(chǎn)量；川麥42基因型平均值較CN16基因型的顯著增產(chǎn)，高達(dá)8.41％，因此，川麥42中的人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)Barc1183是一個高產(chǎn)的遺傳位點(diǎn)。FSA00000028198200021.tif全文摘要一種輔助轉(zhuǎn)育川麥42高產(chǎn)位點(diǎn)的分子標(biāo)記技術(shù)，利用川麥42及其親本(人工合成小麥SYN769，普通小麥SW3243，川6415)，以及小麥品種川農(nóng)16，和已經(jīng)建立的CM42×CN16重組自交系材料126個，采用SSR分子標(biāo)記，檢測CM42中人工合成小麥SYN769的導(dǎo)入位點(diǎn)；研究CM42遺傳背景中人工合成小麥SYN769的遺傳位點(diǎn)對小麥主要農(nóng)藝性狀的貢獻(xiàn)和遺傳效應(yīng)；發(fā)掘CM42遺傳背景中人工合成小麥SYN769導(dǎo)入的高產(chǎn)位點(diǎn)；建立分子標(biāo)記輔助轉(zhuǎn)育小麥高產(chǎn)位點(diǎn)的技術(shù)體系。本發(fā)明能快速準(zhǔn)確對川麥42遺傳背景中的高產(chǎn)人工合成小麥導(dǎo)入位點(diǎn)的遺傳效應(yīng)進(jìn)行分析，為高產(chǎn)育種提供了一種快速、有效的分子標(biāo)記技術(shù)。文檔編號C12Q1/68GK101748217SQ201010107850公開日2010年6月23日申請日期2010年2月10日優(yōu)先權(quán)日2010年2月10日發(fā)明者李俊,李朝書,楊武云,湯永祿,胡曉蓉申請人:四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物研究所