專利名稱：：一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于生物菌制劑
技術(shù)領(lǐng)域：
和農(nóng)業(yè)微生物應(yīng)用領(lǐng)域。特別涉及一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)凈化的復合微生態(tài)制劑。
背景技術(shù)：
：隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖集約化程度不斷提高，養(yǎng)殖水體的理化環(huán)境和生態(tài)環(huán)境日趨惡化；同時，人類生活污水、各種工業(yè)廢水、農(nóng)業(yè)退水等的超量排放，也加劇了養(yǎng)殖水體質(zhì)量的下降；這些問題造成養(yǎng)殖病害日趨嚴重?？股睾突瘜W藥品的濫用不僅使病原微生物的耐藥性增強，而且導致水產(chǎn)品的有害殘留超標，直接威脅人類的健康。美國和歐盟等國家和地區(qū)相繼出臺了相關(guān)法律限制抗生素在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的應(yīng)用，因此，水產(chǎn)養(yǎng)殖必須提供安全、優(yōu)質(zhì)的無公害綠色的水產(chǎn)品是大勢所趨。已有的研究結(jié)果表明微生態(tài)制劑不僅能降低水體的有機污染，凈化水體，還可抑制、殺死病原微生物，并可作為食料添加劑，從而部分替代或完全替代化學藥品和抗生素的使用。而復合微生態(tài)制劑由于同時具有改善腸道內(nèi)環(huán)境、增加進食、抑制有害菌群、改善水質(zhì)等多方面的作用，在水產(chǎn)動物養(yǎng)殖中的應(yīng)用逐漸成為研究熱點。上世紀80年代日本琉球大學的比嘉昭夫教授成功研制了復合微生態(tài)制劑EM，我國于上世紀90年代開始將微生態(tài)制劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，隨著研究工作的開展，相關(guān)產(chǎn)品也相繼問世，用于水產(chǎn)養(yǎng)殖方面的主要有CM、MCB、益生凈水復合菌、"甘菌露"、"片片綠"、免疫利生劑、保水寧[]等。雖然已有的大多數(shù)復合微生態(tài)制劑在水質(zhì)改良和預防疾病某一或某些方面取得了比較明顯的效果，但是國產(chǎn)制劑由于存在菌種性能不穩(wěn)定、功能單一和環(huán)境適應(yīng)性差等問題使其不能適應(yīng)水體復雜多變的環(huán)境，施于水體后效果不穩(wěn)定，從而限制了微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖上的推廣應(yīng)用。解淀粉芽孢桿菌為產(chǎn)內(nèi)生芽孢的革蘭氏陽性菌，本室分離到一株在20°C_45°〇的溫度范圍內(nèi)，在pH5.0-10.0的酸堿度范圍內(nèi)都能正常生長的解淀粉芽孢桿菌，該菌不僅環(huán)境適應(yīng)性強且對水中的氨氮、亞硝態(tài)氮和COD都有明顯的降解效果。光合細菌和反硝化細菌作為單一菌劑和復合菌劑已被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖，但從已有的文獻和專利分析，未見將解淀粉芽孢桿菌、光合細菌和反硝化細菌復合用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水質(zhì)凈化的研究報道。本發(fā)明中用于復配的微生物菌種功能互補、環(huán)境適應(yīng)性強，室內(nèi)模擬試驗和田間試驗證明本發(fā)明提供的復合微生態(tài)制劑不僅能有效的凈化水質(zhì)、還能提高魚蝦的成活率，促進養(yǎng)殖生物的生長。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是提供一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑，它為水產(chǎn)養(yǎng)殖的水質(zhì)凈化提供一種環(huán)境適應(yīng)性強、功能穩(wěn)定且能有效降解養(yǎng)殖水體中的氨氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和COD等污染物的新的復合微生態(tài)制劑。本發(fā)明提供的復合微生態(tài)制劑由光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌這三種菌組成，其中光合細菌為紅螺菌科紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonassp.)的一種，解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefacien)的保藏號CGMCCNo.3261，反硝化細菌為假單胞屬(Pseudomonassp.)白勺——禾中。該菌劑由光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌三種菌的發(fā)酵液按體積比為l:2:i配比制成。室內(nèi)模擬水質(zhì)凈化試驗證明該菌劑對水體中COD的降解率為100X顯著高于EM處理的34.1%，對氨氮、亞硝酸鹽、硝酸鹽的降解率分別為70%、89%和56%，也明顯優(yōu)于商品菌EM。菌劑的安全性試驗證明該菌劑對魚苗安全無毒，且利于魚苗生長。田間試驗顯示，投菌4天后水中的氨氮、亞硝酸鹽和硝酸鹽含量分別較加菌前降低41.8%、66.7%和0.5%，溶解氧含量提高了8.5%，同時還可提高魚蝦的成活率和產(chǎn)量，在魚蝦套養(yǎng)池中，對蝦、鯉魚、白鰱和鯽魚分別增產(chǎn)54%、8%、20%和25%。本發(fā)明的特點本發(fā)明的復合微生態(tài)制劑能使養(yǎng)殖水體中的氨氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和C0D等含量明顯降低。本發(fā)明的菌種類型多、數(shù)量豐富、環(huán)境適應(yīng)性強，且所含三種菌均為活菌，菌體本身含豐富的蛋白和維生素，還能分泌多種酶類和抗菌物質(zhì)，促進養(yǎng)殖生物的生長，提高養(yǎng)殖生物的免疫力。因此，本發(fā)明不僅能有效的凈化養(yǎng)殖水體的水質(zhì)，促進有益藻類繁殖，改善水體生態(tài)環(huán)境，還能提高魚蝦的產(chǎn)量和品質(zhì)，且對人畜無害，可規(guī)?；a(chǎn)用于改善水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境。具體實施例方式下面具體說明本發(fā)明復合微生態(tài)制劑的研制過程及應(yīng)用效果實施例1:復合微生態(tài)制劑復配比例研究將光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌三種菌各設(shè)3個投放量進行正交組合，其中光合細菌3水平分別為Al(lOmL)、A2(20mL)、A3(30mL)，解淀粉芽孢桿菌3水平分別為Bl(20mL)、B2(40mL)、B3(60mL)，反硝化細菌3水平分別為Cl(10mL)、C2(30mL)、C3(50mL)，進行正交組合，得出不同復合比例的9個組合進行水質(zhì)凈化試驗。試驗結(jié)束時對各個指標進行正交分析，結(jié)果見表1。表l試驗結(jié)束時各水質(zhì)指標<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注以CK的降解率為參照，降解率(升高率)較對照高的為+，低的為_正交分析結(jié)果表明，利于水中溶解氧含量提高的組合為A1B1C2;有效降解水體中氨氮、亞硝酸鹽、C0D的最佳組合為A1B1C1，對硝酸鹽降解效果最好的組合為A3B3C3。綜合上述的幾個水質(zhì)指標，選擇A1B1C1為最佳組合(復配比例為1:2:l)，進行驗證試驗。實施例2:復合微生態(tài)制劑水質(zhì)凈化效果驗證試驗將篩選的幾個優(yōu)勢組合A1B1C1、A3B3C3、A1B1C2及購買的商品菌EM進行水質(zhì)凈化驗證試驗，試驗結(jié)束時所測各水質(zhì)指標見表2。表2試驗結(jié)束時各水質(zhì)指標<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注同一列中字母不同表示差異顯著P<0.05。從表2可知，A1B1C1組合對溶解氧的提高，對COD和亞硝酸鹽的降解效果優(yōu)于A1B1C2和A3B3C3組合。A1B1C1組合對模擬養(yǎng)殖水體中COD的降解率為100%顯著優(yōu)于EM處理的34.1%，對氨氮、亞硝酸鹽和硝酸鹽降解率分別達70%、89%和56%優(yōu)于EM菌。實施例3:復合微生態(tài)制劑安全性評價對復合微生態(tài)制劑A1B1C1進行了投喂試驗，每缸裝水40L，放養(yǎng)10條大小基本一致的鯽魚(長約68cm)，每缸投菌1L復合微生態(tài)制劑，7d投一次菌，試驗周期30d。表3魚苗成活與增重情況<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>試驗期間魚苗進食正常，非?；钴S，無浮頭現(xiàn)象，未出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，說明復合微生態(tài)制劑對魚是安全的，且投加菌劑的處理有利于魚苗生長，復合微生態(tài)制劑處理魚的重量較對照高117g，提高了30.5%。實施例4:魚池試驗檢測復合微生態(tài)制劑使用效果試驗共2個池，一個處理，一個對照，每個池4公頃。魚池初期水源相同，處理池與對照池各投放的蝦苗和魚苗量相同。在整個養(yǎng)殖周期內(nèi)，添加復合微生態(tài)制劑的處理池，不使用任何的抗生素和殺菌劑，平均15d投菌一次，對照池平均15d用一次殺菌劑。表4對照池和處理池水質(zhì)指標<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>從表4中可知，對照池的氮源污染物含量呈現(xiàn)升高的趨勢，而處理池在加菌后污染物含量都有所降低，其中氨氮、亞硝酸鹽和硝酸鹽含量分別較加菌前降低41.8%、66.7%和0.5%。表5魚池魚!l!下產(chǎn)量產(chǎn)值<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>從表5可知，用復合微生態(tài)制劑不僅有利于水質(zhì)的改善提高魚蝦成活率，還利于個體增重，顯著提高單位面積產(chǎn)量，其中對蝦、鯉魚、白鰱和鯽魚分別較對照增產(chǎn)54%、8%、20%和25%，平均每公頃水面增收1.22萬元。權(quán)利要求一種用于水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑，其特征是以光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌為活性成分，由上述三種細菌的發(fā)酵液按照一定比例復合而成。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑，其特征是光合細菌為紅螺菌科紅假單胞菌屬(Rhodopseudomonassp.)的一種，解淀粉芽孢桿菌(Bacillusamyloliquefacien)的保藏號CGMCCNo.3261，反硝化細菌為假單胞屬(Pseudomonassp.)的一種。3.根據(jù)權(quán)利要求1至2任一所述的水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑，其特征是該菌劑由光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌三種菌的發(fā)酵液按體積比為1:2:1配比制成。全文摘要本發(fā)明公開了一種水產(chǎn)養(yǎng)殖水體凈化的復合微生態(tài)制劑，該復合微生態(tài)制劑以光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌菌體為活性成分，由光合細菌、解淀粉芽孢桿菌和反硝化細菌的發(fā)酵液按體積比為1∶2∶1配比制成。本發(fā)明的特點本發(fā)明的復合微生態(tài)制劑能使養(yǎng)殖水體中的氨氮、硝態(tài)氮、亞硝態(tài)氮和COD等含量明顯降低。本發(fā)明的菌種類型多、數(shù)量豐富、環(huán)境適應(yīng)性強，且所含三種菌均為活菌，菌體本身含豐富的蛋白和維生素，還能分泌多種酶類和抗菌物質(zhì)，促進養(yǎng)殖生物的生長，提高養(yǎng)殖生物的免疫力。因此，本發(fā)明不僅能有效的凈化養(yǎng)殖水體的水質(zhì)，促進有益藻類繁殖，改善水體生態(tài)環(huán)境，還能提高魚蝦的產(chǎn)量和品質(zhì)，且對人畜無害，可規(guī)?；a(chǎn)用于改善水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境。文檔編號C12R1/07GK101717724SQ200910244889公開日2010年6月2日申請日期2009年12月17日優(yōu)先權(quán)日2009年12月17日發(fā)明者周可,張峰峰,李亞玲,謝鳳行,趙玉潔申請人:天津市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心