專(zhuān)利名稱(chēng)：：一種北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明提供一種北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，涉北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)培養(yǎng)的配方優(yōu)化，有效提高液體培養(yǎng)菌絲體產(chǎn)量及部分有效成分含量，生物菌培養(yǎng)
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：隨著人們生活水平的提高及保健意識(shí)的增強(qiáng)，做為保健、藥品主要原料之一的蟲(chóng)草需求量R益增加，加之蟲(chóng)草的采集，嚴(yán)重破壞了野生植被。蟲(chóng)草屬?lài)?guó)家明令禁止野外采集并加以保護(hù)的野生物種資源。為了滿足市場(chǎng)的需求，人工培養(yǎng)北冬蟲(chóng)夏草已成為當(dāng)前的發(fā)展趨勢(shì)。而目前國(guó)家普遍采用cordycepsmiltitaris菌株為北冬蟲(chóng)夏草生產(chǎn)菌，該菌株通過(guò)液體深層發(fā)酵獲得菌絲體，其有效成分和該菌株的固體培養(yǎng)獲得的子實(shí)體以及野生冬蟲(chóng)夏草相比，沒(méi)有差異?，F(xiàn)有的培養(yǎng)基菌株生產(chǎn)較慢，發(fā)酵周期長(zhǎng)，不能滿足生產(chǎn)的需求。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，可有效提高液體培養(yǎng)菌絲體產(chǎn)量及有效成分含量，縮短發(fā)酵周期。本發(fā)明還提供了含有上述添加劑的北冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)北冬蟲(chóng)夏草。本發(fā)明的北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，其特征在于每升培養(yǎng)基中含有氯化鋅0.01-0.015g/L，橄欖油10-20ml/L;上述培養(yǎng)基中還可添加以下添加劑赤霉素0.001-0.0015g/L，氯化銨10-20g/L。本發(fā)明添加劑在使用時(shí)將北冬蟲(chóng)夏草菌種按6%重量比接種到蟲(chóng)草培養(yǎng)基中，再加入上述添加劑進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。一種含有本發(fā)明添加劑的北冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)基，其特征在于組成是蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素B10.100g/L，氯化鋅O.Ol-0.015g/L，橄欖油10-20ml/L，植物生長(zhǎng)素(赤霉素)0.001-0.0015g/L，氯化銨10-20g/L,余量為水。在現(xiàn)有廣泛應(yīng)用培養(yǎng)基基礎(chǔ)上，添加本發(fā)明添加劑，從而達(dá)到縮短液體深層發(fā)酵周期，提過(guò)菌絲體、蟲(chóng)草酸產(chǎn)量。本發(fā)明培養(yǎng)基的配制方法將蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L,酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L,維生素B!0.100g/L，氯化鋅O.Ol-0.015g/L，橄欖油10-20ml/L，植物生長(zhǎng)素(赤霉素)0.001墨0.0015g/L，氯化銨10-20g/L裝于250ml錐形瓶中，裝液量為100ml，121。C20分鐘滅菌備用。應(yīng)用本發(fā)明所制備的培養(yǎng)基分別對(duì)北冬蟲(chóng)夏草進(jìn)行培育，并與常規(guī)培養(yǎng)基進(jìn)行比較。操作步驟如下在無(wú)菌環(huán)境中取制備好的北冬蟲(chóng)夏草菌株液6ml，加入己滅過(guò)菌的本發(fā)明制備的培養(yǎng)基(實(shí)施例1、實(shí)施例2)和普通培養(yǎng)基中(各平行5組)。26°C150轉(zhuǎn)的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)3天。③將收獲菌絲體凍干，稱(chēng)重，粉碎；測(cè)定蟲(chóng)草酸含量，結(jié)果如下表。從表中可以看出，與普通沒(méi)有添加氯化鋅、橄欖油、植物生長(zhǎng)激素(赤霉素)相比，菌絲體干重提高19%以上，蟲(chóng)草酸含量提高30%以上，腺苷含量提高130%以上。見(jiàn)表l表l<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table>試驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明制備的培養(yǎng)基能有效提高北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)菌絲體產(chǎn)量提高10%，添加植物生長(zhǎng)激素(赤霉素)使其生長(zhǎng)周期由5天縮短為3-4天，氯化銨可有效提高腺苷的合成，當(dāng)液體培養(yǎng)蛹蟲(chóng)草3.5天收獲時(shí)，腺苷含量可達(dá)80mg/L以上。本發(fā)明的積極效果是在普通培養(yǎng)基中添加氯化鋅、橄欖油，可有效促進(jìn)北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)菌絲體的生長(zhǎng)和蟲(chóng)草酸的合成；通過(guò)添加植物生長(zhǎng)激素(赤霉素)可有效縮短北冬蟲(chóng)夏草的生長(zhǎng)周期；添加氯化銨，可有效提高北冬蟲(chóng)夏草腺苷的合成；通過(guò)添加添加劑，與不添加改成分相比，液體深層發(fā)酵北冬蟲(chóng)夏草菌絲體產(chǎn)量可提高10%左右，蟲(chóng)草酸含量提高30%左右，腺苷含量提高130%以上。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素B10.100g/L，氯化鋅0.01g/L，氯化銨10g/L，裝于250ml錐形瓶中，裝液量為100ml，121°C20分鐘滅菌制成培養(yǎng)基。實(shí)施例2:蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素B10.100g/L，氯化鋅0.01g/L，橄欖油10ml/L，赤霉素0.001g/L，氯化銨10g/L，裝于250ml錐形瓶中，裝液量為100ml，121°C20分鐘滅菌制成培養(yǎng)基。實(shí)施例3:蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素B10.100g/L，氯化鋅0.012g/L，橄欖油12ml/L，赤霉素0.001lg/L，氯化銨14g/L，裝于250ml錐形瓶中，裝液量為100ml，121°C20分鐘滅菌制成培養(yǎng)基。表312345平均菌絲體干重(g/1)16.9216.7916.8516.6717.1116.87蟲(chóng)草酸含量(g/1)1.361.391.401.421.401.39腺苷含量(mg/1)80.2280.1679.6581.3282.3480.74實(shí)施例4:蔗糖20g/L,蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二:氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素B10.100g/L，氯化鋅0.015g/L，橄欖油20ml/L，赤霉素0.0015g/L，氯化銨20g/L，裝于250ml錐形瓶中，裝液量t為100ml，121°C20分鐘滅菌制成培養(yǎng)基。表412345平均菌絲體干重(g/1)17.0516.7916.8416.6916.9816.87蟲(chóng)草酸含量(g/D1.381.411.391.421.421.40腺苷含量(mg/1)80.4379.6479.6580.2381.3780.2權(quán)利要求1、一種北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，其特征在于每升培養(yǎng)基中含有氯化鋅0.01-0.015g/L、氯化銨10-20g/L。2、權(quán)利要求1所述的北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，其特征在于每升培養(yǎng)基中含有橄欖油10-20ml/L、赤霉素0.001-0.0015g/L。3、一種北冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)基，其特征在于組成是蔗糖20g/L，蛋白胨10g/L，酵母浸粉10g/L，磷酸二氫鉀3g/L，硫酸鎂3g/L，維生素Bl0.1g/L，氯化鋅0.01-0.015g/L，橄欖油10-20ml/L，赤霉素0.001-0.0015g/L，氯化銨10-20g/L，余量為水。4、權(quán)利要求1或2所述的北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑的應(yīng)用，其特征在于將北冬蟲(chóng)夏草菌種按6%重量比接種到蟲(chóng)草培養(yǎng)基中，添加權(quán)利要求1所述的添加劑進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。全文摘要本發(fā)明一種冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)基用添加劑，涉及液體培養(yǎng)北冬蟲(chóng)夏草培養(yǎng)基成分的優(yōu)化，通過(guò)添加氯化鋅、橄欖油、生長(zhǎng)激素和氯化銨使北冬蟲(chóng)夏草的菌絲體干重和次級(jí)代謝產(chǎn)物產(chǎn)量增加。其積極效果是在普通北冬蟲(chóng)夏草液體培養(yǎng)的基礎(chǔ)上，改變培養(yǎng)基成分，促進(jìn)北冬蟲(chóng)夏草的生理代謝機(jī)能，加快生長(zhǎng)速度和代謝產(chǎn)物蟲(chóng)草酸的合成，菌絲體干重可達(dá)16.8g/L左右，蟲(chóng)草酸含量可達(dá)1.375g/L以上，腺苷含量可達(dá)80mg/L以上。文檔編號(hào)C12N1/38GK101475927SQ200910066468公開(kāi)日2009年7月8日申請(qǐng)日期2009年1月21日優(yōu)先權(quán)日2009年1月21日發(fā)明者孟繁宇申請(qǐng)人:孟繁宇