專利名稱：：包含酶混合物的動物用耐熱組合物的制作方法包含酶混合物的動物用耐熱組合物本發(fā)明涉及包含酶混合物的粉末形式的組合物。酶在各種工業(yè)應用中特別是在動物的營養(yǎng)物中已經(jīng)被使用很長時間。在這種情況下，酶改善了植物源的消化性并因此使得飼養(yǎng)動物更有效地消化它們的食物。酶由很多種生物產(chǎn)生植物、動物以及特別是微生物，也就是說，特別是選自細菌、酵母和真菌的任何單細胞生物或多細胞生物。專利申請EP1007743具體描述了從繩狀青霉菌(Penicilliumfuniculosum)獲得的、以液體形式或以粉末形式配制并且目的是飼養(yǎng)動物的酶的混合物。酶通過噴射以液體形式添加至飼料，或者它們在混合器中被摻入飼料中然后使飼料在制粒機中成粒。很大一部分動物飼料基于衛(wèi)生(微生物質(zhì)量)原因或基于易為動物消耗(以碎屑或顆粒形式呈現(xiàn))的原因而經(jīng)歷熱處理。這些熱處理基于在或多或少的高溫下任選結(jié)合附聚作用(制粒機)來應用蒸汽。然而，已經(jīng)證明是這樣的情況，即酶是蛋白質(zhì)，其天生對溫度敏感。當應用高溫時觀察到酶活性的損失。本發(fā)明的目的是提供包含耐熱的酶混合物的粉末形式的組合物。發(fā)明描述本發(fā)明涉及粒狀粉末形式的動物用耐熱組合物，其包含a)至少兩種酶的液體形式的混合物，b)載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口c)包衣劑，其選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。根據(jù)一個實施方式，至少兩種酶的液體形式的混合物從僅僅一種微生物的發(fā)酵獲得。根據(jù)另一實施方式，至少兩種酶的液體形式的混合物從兩種不同微生物的發(fā)酵獲得。有利地，至少兩種酶的液體形式的混合物是從至少一種微生物獲得的過濾和濃縮發(fā)酵果汁。根據(jù)另一實施方式，所述組合物包含a)15%至50%(按重量計)所述至少兩種酶的混合物，13)25%至60%(按重量計)所述載體，c)25%至60%(按重量計)所述包衣劑。根據(jù)一個實施方式，所述至少兩種酶選自木聚糖酶、!3-葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、植酸酶和蛋白酶。有利地，所述至少兩種酶選自植酸酶、內(nèi)_1，4-|3-木聚糖酶、a-阿拉伯呋喃糖酶、P-木糖苷酶、阿魏酸酯酶、內(nèi)_1，5-0-阿拉伯糖酶(arabinanase)、內(nèi)-1，3(4)-13-葡聚糖酶、昆布多糖酶、內(nèi)-1，4-13-葡聚糖酶、纖維二糖水解酶、13-糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖(rhamnogalacturonase)、天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶、內(nèi)_1，4-|3-甘露聚糖酶、P-甘露糖苷酶和a-半乳糖苷酶。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，所述微生物是繩狀青霉菌，其于1998年3月24日以編號IMI378536保藏于IMI(國際真菌研究所(InternationalMycologicalInstitute),BakehamLane，EnglefieldGreen，Egham，Surrey,TW209TY，UK)。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，包衣劑是羧甲基纖維素或乙基纖維素。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，組合物能夠通過包括下述步驟的方法獲得a)共干燥下述化合物-載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口-至少兩種酶的液體形式的混合物，從而獲得中間基料，b)通過用包衣劑浸漬該中間基料而成粒，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，c)用包衣劑包覆所述浸漬的中間基料，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，禾口d)干燥。本發(fā)明也涉及粉末形式的動物用營養(yǎng)添加劑，其包含a)至少兩種酶的液體形式的混合物，b)載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口c)包衣劑，其選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。本發(fā)明也涉及動物飼料，其特征在于該動物飼料包含動物用營養(yǎng)基料和如權(quán)利要求10所述的營養(yǎng)添加劑。最后，本發(fā)明涉及包衣劑在制備動物用營養(yǎng)添加劑中的用途，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，所述動物用營養(yǎng)添加劑包含從僅僅一種微生物的發(fā)酵獲得的至少兩種酶的混合物。有利地，所述包衣劑是羧甲基纖維素。組合物本發(fā)明因此涉及粒狀粉末形式的動物用耐熱組合物。"耐熱組合物"被理解為指對熱有抵抗力的組合物。根據(jù)本發(fā)明的組合物的重要特性之一是耐熱性。這是因為根據(jù)本發(fā)明的組合物將經(jīng)歷預期的熱處理，以便一方面產(chǎn)生微生物品質(zhì)，而另一方面配制能夠更容易為飼養(yǎng)者所使用以及為動物所消耗的組合物。使用了術(shù)語"制粒過程(pelletizationprocess)"。制粒是小顆粒形式的飼料附聚作用。這些顆粒不易碎，不像附聚物似的。在制粒之后，獲得小球。小球是具有直徑為1.5至6mm以及長度為1.5至4cm的尺寸的顆粒。對于制粒而言，利用的是例如制粒機，其操作基于在或多或少的高溫下使用蒸汽。例如所述組合物經(jīng)得起8(TC、85t:或90°C以上的溫度。"粒狀粉末(Granularpowder)"被理解為指表現(xiàn)出一定粒度的粉末。根據(jù)本發(fā)明，獲得的組合物的粒度要求如下顆粒的大小在混合物中的百分比800um以上<或=至1%400um與160um之間>或=至40%，優(yōu)選<或=至50%4<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>有利地，產(chǎn)物顆粒的中數(shù)直徑在150與400iim之間。"中數(shù)直徑"被理解為指50%樣品具有較小尺寸以及50%樣品具有較大尺寸時產(chǎn)物顆粒的尺寸。本發(fā)明的組合物意圖用于動物。換句話說，根據(jù)本發(fā)明的組合物適合用于動物營養(yǎng)物中。"動物"更具體而言被理解為指飼養(yǎng)動物，并且特別指食草動物(特別是為了肉、奶、奶酪和皮革而飼養(yǎng)的牛；為了肉、羊毛或奶酪而飼養(yǎng)的綿羊；山羊；或豬)、家兔、家禽(小雞、母雞、火雞、鴨、鵝和其它家禽)、水生動物(例如魚、蝦、牡蠣和貝殼類)或閑暇陪伴動物(leisureandcompanionanimals)(特別是馬、狗或貓)。牛或牛亞科構(gòu)成?？啤辔阜雌c哺乳動物的亞科，多胃反芻哺乳動物包括幾種重要的飼養(yǎng)動物種類(奶用品種、肉用品種和混合品種)。"適合用于動物營養(yǎng)物中的組合物"被理解為指具有使其適于動物營養(yǎng)的特征的組合物。用于動物營養(yǎng)必要的特征特別是PH和溫度，在該pH和溫度下包含酶混合物的組合物是活性的。這是因為動物消化系統(tǒng)的pH是酸性的，因此對于酶而言在該pH下保持活性是必要的以便保留它們的活性。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，所述組合物在酸性pH下例如在pH小于7、優(yōu)選pH小于5保留期望的酶活性。本發(fā)明因此涉及粒狀粉末形式的動物用耐熱組合物，其包含a)至少兩種酶的液體形式的混合物，b)載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口c)包衣劑，其選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。酶由很多種生物產(chǎn)生植物、動物以及特別是微生物。"微生物"被理解為指特別是選自細菌、酵母和真菌的任何單細胞生物或多細胞生物。有利地，酵母選自例如巴斯德畢赤酵母(Pichiapastoris)、釀酒酵母(Saccharomycescerevisae)、耳卩氏酵母(Yarrowialipolytica)禾口西方許旺酵母(Schwanniomycesoccidentalis)。真菌例如選自曲霉(Aspergillus)種、木霉屬(Trichoderma)種和青霉菌(Penicillium)種，優(yōu)選選自繩狀青霉菌、里氏木酶(Trichodermareesei)、黑曲霉(Aspergillusniger)、泡盛曲霉(Aspergillusawamori)、白曲霉(Aspergilluskawachii)禾口康寧木酶(Trichodermakoningii)。根據(jù)一個實施方式，至少兩種酶的液體形式的混合物從僅僅一種微生物的發(fā)酵獲得。有利地，至少兩種酶的液體形式的混合物是從僅僅一種微生物獲得的過濾和濃縮發(fā)酵果汁。根據(jù)本發(fā)明的另一實施方式，所使用的微生物源自分離狀態(tài)的微生物的遺傳未修飾菌株，其產(chǎn)生至少兩種酶活性?？蛇x地，其可以是用多核苷酸、表達盒和/或載體轉(zhuǎn)化的宿主生物。在本發(fā)明的一個實施方式中，微生物是酶在其中被表達或過表達的繩狀青霉菌菌株。在另一實施方式中，宿主生物是酶在其中被表達或過表達的卡氏德巴利酵母(Debaryomycescastellii)菌株。在又一實施方式中，宿主生物是酶在其中被表達或過表達的活潑瘤胃5求菌(Ruminococcusgnavus)菌株。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，所述微生物是在1998年3月24日以編號MI378536保藏于皿(國際真菌研究所，BakehamLane，EnglefieldGreen，Egham，Surrey,TW209TY，UK)的繩狀青霉菌。根據(jù)另一實施方式，所述組合物包含15%至50%(按重量計)的所述至少兩種酶的混合物，優(yōu)選20%至40%(按重量計)。根據(jù)本發(fā)明的另一實施方式，粒狀粉末形式的動物用耐熱組合物包含至少三種酶、四種酶、八種酶或十種酶的液體形式的混合物。根據(jù)一個實施方式，所述至少兩種酶選自木聚糖酶、!3-葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、植酸酶和蛋白酶。有利地，所述至少兩種酶選自植酸酶、內(nèi)_1，4-|3-木聚糖酶、a-阿拉伯呋喃糖酶、P-木糖苷酶、阿魏酸酯酶、內(nèi)_1，5-0-阿拉伯糖酶(arabinanase)、內(nèi)-1，3(4)-13-葡聚糖酶、昆布多糖酶、內(nèi)-1，4-13-葡聚糖酶、纖維二糖水解酶、13-糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖(rhamnogalacturonase)、天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶、內(nèi)_1，4-|3-甘露聚糖酶、P-甘露糖苷酶和a-半乳糖苷酶。本發(fā)明也包含載體。所述載體選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸。所述載體以粒狀粉末形式的耐熱組合物重量的25%與60%之間的含量存在于該組合物中。最后，本組合物包含包衣劑。該包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。植物膠是植物滲出物，其通過干燥而凝固。當表示能夠用于本發(fā)明中的膠時，可以提到下述膠阿拉伯膠、剌梧桐樹膠、黃蓍膠、瓜爾膠或黃原膠。"淀粉和衍生物"被理解為指由兩種聚合物——直鏈淀粉和支鏈淀粉的組合形成的任意多糖。根據(jù)本發(fā)明，淀粉可以以粉末形式或以糊狀物形式存在。舉例來說，其可以是天然小麥淀粉、天然玉米淀粉、天然米淀粉或馬鈴薯粉。也可以包括物理處理例如預膠化的相同淀粉。根據(jù)本發(fā)明的一個實施方式，包衣劑是羧甲基纖維素或乙基纖維素。包衣劑以25與60%之間、優(yōu)選30與58%之間(按重量計)的含量存在于粒狀粉末形式的耐熱組合物中。根據(jù)本發(fā)明的另一主題，所述組合物能夠通過包括下述階段的過程獲得a)共干燥下述化合物-載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口-至少兩種酶的液體形式的混合物，從而獲得中間基料，b)通過用包衣劑浸漬該中間基料而成粒，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，c)用包衣劑包覆所述浸漬的中間基料，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，禾口d)干燥。包衣劑——其是相同或不同的，在該過程在兩個連續(xù)階段期間使用。這產(chǎn)生顯示新外觀的粉末，其中包衣劑被發(fā)現(xiàn)于粒狀粉末的內(nèi)部和外部。這賦予粉末有利的性質(zhì)。粉末形式的組合物顯示出優(yōu)良的流動性。使得能夠評價粉末流動性的測量方案的實例是測定靜止角。該方法基測定降落物質(zhì)的圓錐體底部的角度，該降落物質(zhì)是通過使樣品經(jīng)過放置在完全平坦水平板上方的常規(guī)高度下的專用漏斗得到的。該方法需要下述裝備實驗室玻璃器皿和儀器、不銹鋼漏斗、直徑(d)小于6mm的底部(漏斗附著至支撐物)、刻有四條直線的不銹鋼板——該四條直線彼此之間形成45°的角并且垂直于漏斗的中心，以及附著至板、由不銹鋼制成的支撐物。該方法包括調(diào)節(jié)板與漏斗底部之間的高度(H)為40mm、證實漏斗中心與所刻直線交叉點的垂直度、將粉末倒入漏斗中、當圓錐體的頂接觸漏斗底部時停止進料、在所形成的硅石圓錐體底部在每一條所刻直線上畫標記、移走硅石并且對于每一條線測量同一線上隔開兩個標記的距離。以角度表達的降落材料的靜止角由下式給出2//之間。間。效成分:何物質(zhì)'爿r像-其中H:圓錐體的高度，以mm計(H=40)d:漏斗底部的內(nèi)徑，以mm計(d=6mm)D:4個測量的算術(shù)平均值以mm計a:靜止角，以角度計根據(jù)本發(fā)明，粉末形式的組合物顯示20。與50°之間的靜止角，優(yōu)選20。與45°使得能夠評價粉末流動性的另一測量方案實例是根據(jù)下式測量壓縮率壓縮率-％^辰實密度-堆密度)振實密度根據(jù)本發(fā)明，粉末形式的組合物顯示0與40%之間的壓縮指數(shù)，優(yōu)選0與20%之本發(fā)明的粉末形式的組合物另外可以包含除酶混合物之外的有效成分或幾種有"有效成分(Activeprinciple)"被理解為指在動物中具有確定的生理活性的任食品補充劑尤其在根據(jù)本發(fā)明的有效成分的種類內(nèi)。動物用食品補充劑是在補充每日飲食中意圖被攝取的產(chǎn)品，以便克服某些化合物不足的每日供應。例如，通常是已知的是用有效成分補充飼養(yǎng)動物的食物攝取從而增強所飼養(yǎng)動物的畜牧業(yè)性能。特別地，它們可以是維生素、礦物鹽、氨基酸、微量元素、激素或抗生素。來立體絲劃鄉(xiāng)A麵燃誠上述組合物的制備過程包括下述階段a)共干燥下述化合物-至少一種載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口-從僅僅一種微生物的發(fā)酵獲得至少兩種酶的液體形式的至少一種混合物，作為回報獲得中間基料，b)通過用包衣劑浸漬該中間基料而成粒，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，c)用包衣劑包覆所述浸漬的中間基料，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，禾口d)干燥。該過程的第一階段因此包括共干燥以液體形式存在的酶混合物以及根據(jù)本發(fā)明的載體。該階段可以在干燥塔上通過霧化連續(xù)進行。共干燥在不分解的溫度下進行。粉末應當保持在45t:以下的溫度下。該階段導致很大部分的液體形式的酶混合物被保留在載體上。得到50iim與250iim之間大小的微?；勰７勰┑暮啃∮?0%。該過程的第二階段包括通過用包衣劑浸漬中間基料而成粒，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。其是一種濕法制粒類型，其包括在裝備有液體添加系統(tǒng)的混合器——也稱為制粒機中，進行顆粒稠化并結(jié)合成粒以使顆粒內(nèi)聚。該階段可以連續(xù)或分批進行。該過程的第三階段包括沉積令人滿意的包衣劑膜，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。該包衣劑可以與成粒階段期間使用的包衣劑相同或者其可以是不同的。該階段可以在例如流化床干燥器上連續(xù)或分批進行。包衣劑的量取決于產(chǎn)物所期望的最終粒度。第四階段包括干燥終產(chǎn)物。這種干燥可以在流化床上連續(xù)進行或分批進行，使得該產(chǎn)物的含水量小于10%，優(yōu)選小于8%。在第二階段與第三階段之間增加中間階段是可能的。該階段包括連續(xù)或分批地干燥粒狀粉末。在第二階段與第三階段之間或者在干燥粒狀粉末的任選階段之后增加篩分階段也是可能的。制粒過程根據(jù)本發(fā)明，制粒過程包括下述階段a)—方面粒狀粉末形式的耐熱組合物以及另一方面營養(yǎng)基料被送入進料器，b)將混合物加熱至60°C與IO(TC之間的溫度，優(yōu)選70°C與90°C之間的溫度，c)使所述組合物在成粒機中成粒，禾口d)將得到的小球切割成期望的長度，e)干燥并冷卻在階段d)獲得的小球。動物用營養(yǎng)添加劑本發(fā)明也涉及粉末形式的營養(yǎng)添加劑，其包含a)至少兩種酶的液體形式的混合物，b)載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，禾口c)包衣劑，其選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物。動物飼料本發(fā)明也涉及動物飼料，其特征在于該動物飼料包含動物用營養(yǎng)基料和如上所定義的營養(yǎng)添加劑。所述營養(yǎng)基料包含例如小麥、豆餅、擠壓大豆種、棕櫚油、碳酸鈣、磷酸二鈣、鹽或含甲硫丁氨酸的預混物的混合物。腿本發(fā)明的主題也涉及羧甲基纖維素用于制備動物用營養(yǎng)添加劑的用途，所述營養(yǎng)添加劑包含從僅僅一種微生物發(fā)酵獲得的至少兩種酶的混合物。本發(fā)明的另一主題是羧甲基纖維素用于制備動物用營養(yǎng)添加劑的用途，所述營養(yǎng)添加劑意圖改進動物的生長性能，例如改進飼料轉(zhuǎn)化。附圖簡述圖1表示現(xiàn)有技術(shù)的粉末和根據(jù)本發(fā)明的粉末的各自粒度；在橫坐標上，以Pm計的直徑；在縱坐標上，為產(chǎn)物的百分比。實施例1根據(jù)本發(fā)明的方法制備本發(fā)明的組合物。其以粉末形式提供并且包含55%羧甲基纖維素、25%粗麥粉和20%從繩狀青霉菌IMI378536發(fā)酵得到的濃縮過濾發(fā)酵果汁，該發(fā)酵果汁包含19種酶活性。1.共干燥在165巴下噴射475kg/h的28.7%DM(干物質(zhì))酶溶液并且使其在低溫下以113kg/h的速度在粗粉上連續(xù)共干燥。在恰當例子的粗粉中(inthecaseinpointmeal)，干提取物中的分布因此如下55%純酶和45%載體。-146。C:入口氣溫-49。C:出口氣溫-40°C:固定床的氣溫-35°C:振動流化床裝置的氣溫(第一部分)_27°C:振動流化床裝置的氣溫(第二部分)在該階段獲得的微粒化粉末顯示出不存在63i！m以下細粒的粉末特征，這使得產(chǎn)品能夠以第二相進行處理。以D(v，O.5)計的平均粒度是117微米，并且含水量是7.5%。在該第一階段結(jié)束時得到的產(chǎn)品被稱為中間基料。2.通過浸漬成粒其以下述方式在混合器中進行-預混合成分也就是說0.77kgCMC干物質(zhì)/kg中間基料干物質(zhì)30秒，-在0.18kg水/kg中間基料干物質(zhì)的速度下添加水120秒，伴隨攪拌，-最后混合120秒。該階段的目的是獲得平均150iim至200Pm等級的顆粒，其中含水量為14%，同時使產(chǎn)物保持在45°C以下，以便不破壞酶活性。3.在流化床上進行中間干燥在55t:的入口溫度和25t:的出口溫度下在流化床干燥器上干燥產(chǎn)物，以便不破壞酶活性。然后在包衣之前中間基料具有7%或8%的含水量。4.包衣在噴射之前被再加熱至在6(TC與7(TC之間變化的溫度的7%與7.5%之間的CMC低粘度溶液被噴射。所沉積的溶液的量是0.25kgCMC干物質(zhì)/kg待被包衣的產(chǎn)物的干物質(zhì)。在該階段獲得的粉末具有300iim至400ym的平均粒度和10%至11%的含水量。然后在流化床上連續(xù)或分批干燥終產(chǎn)物；在這種情況中的目的是使產(chǎn)物回到小于10%且優(yōu)選小于8%的含水量。得到的終產(chǎn)物具有7.6%的含水量和450g/l的密度。5.粒度測量分別測量下述組合物的粒度第一組合物是產(chǎn)品RovabioTM艾克賽勒AP(RovabioTMExcelAP)，其以粉末形式提供。第二組合物根據(jù)上述方法制備。其因此是根據(jù)本發(fā)明的組合物，該組合物包含55%羧甲基纖維素、25%粗麥粉和20%從繩狀青霉菌MI378536發(fā)酵獲得的濃縮過濾發(fā)酵果汁。組合物的粒度列在下述表中<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>顆粒的尺寸在產(chǎn)品RovabioExcelAP中的％第二組合物產(chǎn)物中的%<200um以及>16015.1%6.4%<160um以及>lOOum40.6%4.3%<lOOum26.5%0.4%中數(shù)直徑135350分散指數(shù)0.50.4發(fā)現(xiàn)第二組合物的粒度顯示包含一定量小顆粒的優(yōu)勢，該量低于產(chǎn)品RovabioExcelAP(現(xiàn)有技術(shù)的粒狀粉末形式的組合物)的量。這種低量的小顆粒防止產(chǎn)物損失、產(chǎn)物系統(tǒng)與產(chǎn)物本身之間交叉污染、過濾和通風系統(tǒng)使用以及對健康的不良影響之類的問題。見圖l。6.其它測量產(chǎn)品RovabioExcelAP的壓縮率是22.1%，而第二組合物的壓縮率是3眉。實施例2該目的是測試在成粒中添加至"生長"家禽飼料基料的四種酶制備物。在調(diào)溫器出口處3個處理溫度(8(TC、85t:和90°C)應用于每種酶制備物。材料和方法1.飼料和酶200kg生長家禽粗粉飼料被用于進行這些實驗。測試四種粉末形式的組合物。相應于或不相應于根據(jù)本發(fā)明的組合物的標準的每種組合物被稱為試驗項。第一組合物是產(chǎn)品RovabioExcelAP，其以粉末形式提供并包含19種酶活性。該產(chǎn)品由20%粗麥粉和80%從繩狀青霉菌IMI378536獲得的濃縮過濾發(fā)酵果汁組成，所述發(fā)酵果汁包含19種酶活性。第二組合物根據(jù)在實施例1中描述的方法制備。其以粉末形式提供，具有上述粒度，并包含55%羧甲基纖維素、25%粗麥粉和20%從繩狀青霉菌IMI378536獲得的濃縮過濾發(fā)酵果汁，所述發(fā)酵果汁包含19種酶活性。第三組合物根據(jù)在實施例1中描述的方法制備。11其以粉末形式提供，具有上述粒度，并包含35%羧甲基纖維素、45%粗麥粉和20%從繩狀青霉菌IMI378536獲得的濃縮過濾發(fā)酵果汁，所述發(fā)酵果汁包含19種酶活性。第四組合物根據(jù)在實施例1中描述的方法制備。其以粉末形式提供，具有上述粒度，并包含35%羧甲基纖維素、45%粗麥粉和20%從繩狀青霉菌IMI378536獲得的濃縮過濾發(fā)酵果汁，所述發(fā)酵果汁包含19種酶活性。2.混合物利用槳式混合器制備60kg生長家禽飼料的兩種混合物，其中水平軸以60rev/min旋轉(zhuǎn)。每次混合的持續(xù)期間是2分鐘。每次混合的批量被倒空進入矩形槽中，之后封起來(baggedup)。通過集合20個在矩形槽中以四分法獲得的樣品，取出代表每種混合物的大約lkg樣品。見下面表中的混合物。<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3.成粒在具有平模的實驗室制粒機(3kW的Kahl14-175制粒機)上進行成粒試驗。對于生長適于烤焙小雞的粗粉飼料(growthbroilermealfeed)，選擇進行試驗的制粒機模將具有直徑為4mm且厚度為24mm的通道(壓縮比6)。4.干燥-冷卻對于每一成粒試驗，使用實驗室干燥器_冷卻器來干燥和冷卻在模出口收集的熱顆粒樣品。對于每個冷卻器大約3.5kg的熱顆粒進料，干燥_冷卻時間是至少5分鐘。取出代表每次制造操作的大約500g樣品。5.目的是監(jiān)控成粒的測量和取樣在制粒機的穩(wěn)定操作期間進行測量和取樣(恒定的生產(chǎn)量、所耗用的穩(wěn)定電力和穩(wěn)定的溫度)。從每次試驗的穩(wěn)定階段期間取出的樣品開始進行含水量和模停留時間測量。在試驗期間記錄并標明實施碾磨制粒的特征和參數(shù)。6.分析方法6.1通過DNS方法的P_葡聚糖酶該測定基于大麥P-葡聚糖——一種P-l，3(4)-葡聚糖的酶解作用。反應產(chǎn)物通過比色法測定，還原基團的增加利用3，5-二硝基水楊酸(DNS)測量。酶解作用之后可用的還原糖的濃度利用標準葡萄糖曲線測定，葡萄糖的吸光度在540nm測量。計算的酶活性隨后以葡萄糖當量表達。將含有l(wèi)ml在0.1M、pH5.0的乙酸鈉緩沖液中的1%(w/V)等級的P-葡聚糖溶液和lml在適當稀釋下的酶溶液的溶液在5(TC溫育10分鐘。通過添加2mlDNS溶液(在蒸餾水中的1%(w/V)3，5-二硝基水楊酸、1.6X(w/V)NaOH和30%(w/V)右旋酒石酸鈉鉀)停止酶反應。均化溶液，然后在最低95t:置于回流水浴中，并且隨后在浴中冷卻至環(huán)境溫度(5分鐘之內(nèi))。向該溶液中添加10ml超純水，并在具有l(wèi)cm光程長度的玻璃比色槽中于540nm測定吸光度。該吸光度用針對參比溶液獲得的吸光度校正，DNS在酶溶液之前加入該參比溶液中。通過與一系列從O.00%(w/V)至O.04%(w/V)葡萄糖的標準溶液——如在測定的情況中用DNS處理——進行比較，將結(jié)果轉(zhuǎn)化為毫摩爾的還原糖。內(nèi)-l，3(4)-P-葡聚糖酶活性單位被定義為在測定條件(pH5.0和5(TC)下每分鐘和每克產(chǎn)物產(chǎn)生1Pmol葡萄糖當量的酶的量。6.2通過DNS方法的木聚糖酶該測定基于白樺木聚糖——一種包含13-D-l，4-橋的木糖聚合物的酶解作用。反應產(chǎn)物通過比色法測定，還原基團的增加利用3，5-二硝基水楊酸測量。酶解作用之后可用的還原糖的濃度利用標準木糖曲線測定，木糖的吸光度在540nm測量。計算的酶活性隨后以木糖當量表達。將含有l(wèi)ml在O.1M、pH5.0的乙酸鈉緩沖液中的1%(w/V)白樺木聚糖溶液和lml在適當稀釋下的酶溶液的溶液在5(TC溫育10分鐘。通過添加2mlDNS溶液(在蒸餾水中的1%(w/V)3，5-二硝基水楊酸、1.6X(w/V)NaOH和30X(w/V)右旋酒石酸鈉鉀)停止酶反應。均化溶液，然后在最低95t:置于回流水浴中，并且隨后在浴中冷卻至環(huán)境溫度(5分鐘之內(nèi))。向該溶液中添加10ml超純水，并在具有l(wèi)cm光程長度的玻璃比色槽中于540nm測定吸光度。該吸光度用針對參比溶液獲得的吸光度校正，DNS在酶溶液之前加入該參比溶液中。通過與一系列從O.00%(w/V)至O.04%(w/V)葡萄糖的標準溶液——如在測定的情況中用DNS處理——進行比較，將結(jié)果轉(zhuǎn)化為毫摩爾的還原糖。內(nèi)-1，4-|3-木聚糖酶活性單位被定義為在測定條件(pH5.0和50°C)下每分鐘和每克產(chǎn)物產(chǎn)生1Pmol木糖當量的酶的量。6.3通過粘度測定法的木聚糖酶該方法專用于測定飼料中的內(nèi)-1，4-|3-木聚糖酶活性。內(nèi)-l，4-P-木聚糖酶水解木聚糖的木糖苷橋。該測定基于小麥阿拉伯糖——一種用阿拉伯糖取代的P-l，4-木聚糖多糖——溶液的木糖橋的酶解作用。在待被定量測定的酶存在下，酶活性與小麥阿拉伯木聚糖溶液的粘度降低成比例。內(nèi)_1，4-|3-木聚糖酶活性單位被定義為在分析條件pH5.5和3(TC下水解底物——這降低溶液的粘度，以產(chǎn)生每分鐘1無因次單位相對流度變化的酶的量。試驗結(jié)果1.調(diào)節(jié)的設定點調(diào)節(jié)制粒機的設定點如下生產(chǎn)量大約41kg/h在調(diào)溫器出口的處理溫度80。C、85。C和90°C在模出口經(jīng)歷的溫度蒸汽壓1.6巴刀切割高度的調(diào)整10mm2.酶活性的平衡(余量)<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表酶活性(單位/g)發(fā)現(xiàn)各種配方使得保持初始酶濃縮物的主要參考酶活性是可能的。3.在不同溫度下經(jīng)過制粒機之后在飼料上通過粘度測定法測量的木聚糖酶活性恢復程度<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>發(fā)現(xiàn)標準產(chǎn)品(A)的木聚糖酶活性受到成粒條件的溫度升高的影響(在9(TC損失多達46%)。所測試的各種配方使得能夠?qū)⒒钚該p失限制在小于20%。實施例3RovabioExcelAP和根據(jù)本發(fā)明的組合物對用于12天與22天之間的小雞的小麥基詞料的AMEN(氣校正表觀代i射會g，nitrogen—corrected即parentmetabolizableenergy)值的營養(yǎng)作用的研究。材料和方法1.實驗方案所用的動物是RossPM3品系的雄性小雞。7種飲食，其中每籠1只小雞，12個重復，即總計84籠。試驗是隨機對照試驗。試驗項包括能夠潛在改善以小麥和玉米為基礎的飼料在小雞中的消化性的酶活性。飲<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>表在研究期間使用的飼料[O230]3.試驗進展下面呈現(xiàn)了主要操作的時序<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>表在試驗飼料上測量的木聚糖酶酶恢復的分析除飲食2之外，木聚糖酶粘度測定酶活性值大于飼料的飼料建議值1100U/kgc2.能量消化率<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表每種產(chǎn)品的能量消化結(jié)果總體來說，第二種分析顯示，根據(jù)本發(fā)明的T-Flex項改善了所測試飼料的能量消化率。另一方面，在ExcelAP項獲得的改善不是顯著的，盡管存在強的趨勢(p=0.06)。3.生長性能<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>表從D12至D22的生長結(jié)果*:飼料轉(zhuǎn)化與關于能量消化率所觀察到的相反，所測試的項事實上在總研究期間(12天至22天)內(nèi)都對生長性能具有顯著的影響(飼料轉(zhuǎn)化)。根據(jù)本發(fā)明的組合物(Invl、Inv2和Inv3)和RovabioTMExcelAP組合物(API、AP2和AP3)事實上貢獻了相同的轉(zhuǎn)化改進。[O253]5.結(jié)論在小麥基飼料上測試的所有項對所測試飼料的AME具有影響。得到的改進是適度的?？傮w來說，根據(jù)本發(fā)明的產(chǎn)品顯著改進飼料的AME。對于所有產(chǎn)品而言，在總期間(D12-D22)內(nèi)，生長性能并且特別是關于飼料轉(zhuǎn)化的性能得到極大且顯著地改進。權(quán)利要求一種耐熱組合物，其能夠通過包括下述步驟的方法獲得a)共干燥下述化合物-載體，其選自粗麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸，和-至少兩種酶的液體形式的混合物，從而獲得中間基料，b)通過用包衣劑浸漬所述中間基料而成粒，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，c)用包衣劑包覆所述浸漬的中間基料，所述包衣劑選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、通過發(fā)酵獲得的膠以及淀粉和衍生物，和d)干燥。2.如權(quán)利要求1所述的耐熱組合物，其中所述至少兩種酶的液體形式的混合物得自僅僅一種微生物的發(fā)酵。3.如權(quán)利要求1所述的耐熱組合物，其中所述至少兩種酶的液體形式的混合物得自兩種不同微生物的發(fā)酵。4.如權(quán)利要求l所述的耐熱組合物，其包括a)按重量計15%至50%的所述至少兩種酶的混合物，b)按重量計25%至60%的所述載體，c)按重量計25%至60%的所述包衣劑。5.如權(quán)利要求1所述的耐熱組合物，根據(jù)其所述包衣劑是羧甲基纖維素。6.如權(quán)利要求1或2所述的耐熱組合物，其中所述至少兩種酶的液體形式的混合物是得自至少一種微生物發(fā)酵的濃縮過濾發(fā)酵果汁。7.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其中所述至少兩種酶選自木聚糖酶、P-葡聚糖酶、纖維素酶、果膠酶、植酸酶和蛋白酶。8.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其中所述至少兩種酶選自植酸酶、內(nèi)-1，4-l3-木聚糖酶、a-阿拉伯呋喃糖酶、l3-木糖苷酶、阿魏酸酯酶、內(nèi)-l，5-a-阿拉伯糖酶、內(nèi)-1，3(4)-13-葡聚糖酶、昆布多糖酶、內(nèi)-1，4-13-葡聚糖酶、纖維二糖水解酶、13_糖苷酶、多聚半乳糖醛酸酶、果膠酯酶、鼠李糖半乳糖醛酸聚糖、天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶、內(nèi)_1，4-|3-甘露聚糖酶、P-甘露糖苷酶和a-半乳糖苷酶。9.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其中所述微生物是于1998年3月24日以編號IMI378536保藏于MI(國際真菌研究所，BakehamLane，EnglefieldGreen，Egham，Surrey,TW209TY，UK)的繩狀青霉菌。10.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物，其中所述包衣劑是羧甲基纖維素或乙基纖維素。11.動物飼料，其特征在于所述動物飼料包含動物用營養(yǎng)基料和如前述權(quán)利要求之一所述的組合物。12.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物在制備粒狀粉末形式的動物用營養(yǎng)添加劑中的用途。13.如前述權(quán)利要求任一項所述的組合物在制備動物飼料中的用途，其特征在于所述飼料包含動物用營養(yǎng)基料和營養(yǎng)添加劑。全文摘要本發(fā)明涉及粒狀粉末形式的用于動物的耐熱組合物，其包含a)至少兩種酶的液體混合物；b)介質(zhì)，其選自小麥粉、淀粉、石膏、麥芽糖糊精和玉米穗軸；和c)包衣劑，其選自纖維素及其衍生物、殼多糖、角叉菜聚糖、藻酸鈉、植物膠、利用發(fā)酵方法獲得的膠以及淀粉和衍生物。文檔編號C12N9/98GK101742922SQ200880024859公開日2010年6月16日申請日期2008年6月20日優(yōu)先權(quán)日2007年7月20日發(fā)明者尼古拉斯·貝斯,弗朗西斯·皮埃爾,皮埃爾·達利巴爾申請人:安迪蘇法國聯(lián)合股份有限公司