專利名稱：：甜菊苷的多晶型物和非晶型物及其配制方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明總體上涉及甜菊苷多晶型物和非晶型物及制備甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法。尤其是，本發(fā)明涉及具有改善的溶解速率的甜菊苷多晶型物和非晶型物。
背景技術(shù)：
：甜菊苷是一種具有如下結(jié)構(gòu)式的雙萜糖苷類高效甜味劑。甜菊苷甜菊苷是與其他甜菊醇糖苷一起從甜菊(SteviarebaudianaBertoni)植物("Stevia")中分離和提取的，該植物商業(yè)化種植于日本、新加坡、臺(tái)灣地區(qū)、馬來西亞、韓國、中國、以色列、印度、巴西、澳大利亞和巴拉圭。它是一種無熱量的替代性甜味劑，其功能特性和感官特性優(yōu)于許多高效甜味劑。加工過的甜菊產(chǎn)物是糖的甜度的70400倍。然而，由于甜菊苷在室溫的溶解度低至約1.25g/L(美國專利No.4，082，858)，導(dǎo)致使用甜菊苷較為困難。因此，人們期望開發(fā)具有改善的溶解速率的甜菊苷多晶型物和非晶型物。美國專利No.5，962，678公開了用無水甲醇溶液進(jìn)行甜菊苷的重結(jié)晶獲得了91.6%的純甜菊苷。通過多次用無水甲醇溶液重復(fù)該甜菊苷的重結(jié)晶過程，甜菊苷的純度可提高至99%以上。美國專利公開No.2007/0082103公開了一種方法，從甲醇中重結(jié)晶以純化甜菊苷，然后聲稱使用90%的乙醇從粗制甜菊苷(64.6%)中以很高產(chǎn)出率經(jīng)兩步法重結(jié)晶制成純度大于99%的純甜菊苷。然而，這些現(xiàn)有技術(shù)中的方法并未提供僅使用單一重結(jié)晶步驟得到的基本上純的甜菊苷組合物。因此，人們期望開發(fā)一種使用單一步驟且更經(jīng)濟(jì)的結(jié)晶方法來純化甜菊苷的方法。發(fā)明概述本發(fā)明的示例性實(shí)施方案，通過提供甜菊苷多晶型物和非晶型物以及制備甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法以滿足上述需要。本發(fā)明的示例性實(shí)施方案，通過提供基本上純的甜菊苷、甜菊苷多晶型物和非晶型物、純化甜菊苷的方法以及制備甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法以滿足上述需要。在一特定實(shí)施方案中，純化甜菊苷的方法包括簡單的結(jié)晶步驟。在一個(gè)實(shí)施方案中，純化甜菊苷的方法包括如下步驟將粗制甜菊苷和有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑混合制成甜菊苷溶液，所述含水有機(jī)溶液包括約5%約25%重量的水，以及用單一步驟從所述粗制甜菊苷溶液中結(jié)晶獲得以干重計(jì)純度大于約95%的基本上純的甜菊苷。在其他特定實(shí)施方案中，提供了不同的甜菊苷多晶型物和非晶型物和制備不同的甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法。本發(fā)明其他目的、技術(shù)特征和優(yōu)點(diǎn)從下述詳細(xì)描述、附圖和權(quán)利要求中將顯而易見。除非另有定義，本發(fā)明所用的所有技術(shù)術(shù)語、科學(xué)術(shù)語和縮寫與本發(fā)明所涉及的本領(lǐng)域技術(shù)人員通常所理解的意思相同。盡管在實(shí)施本發(fā)明過程中可使用與本發(fā)明類似或等同的方法和組合物，所述合適的方法和組合物并非旨在以任何這類方法和組合物限制本發(fā)明。圖1為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e，比較3種甜菊苷多晶型物型式1、型式2A和型式2B的粉末x-射線衍射掃描圖；圖2為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e，一種甜菊苷多晶型物的粉末x-射線衍射掃描圖；圖3為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e，一種甜菊苷多晶型物的粉末x-射線衍射掃描圖；圖4為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e，一種甜菊苷多晶型物的粉末x-射線衍射掃描圖；圖5為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e，一種甜菊苷非晶型物的粉末x-射線衍射掃描圖；圖6為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，說明純化甜菊苷的方法的示意圖；圖7為根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方案，說明甜菊苷多晶型物和非晶型物形成以及轉(zhuǎn)變的示意圖。發(fā)明詳述甜菊苷是一種通常購買價(jià)格中等的天然高效甜味劑。但是，甜菊苷一般因溶解度相對(duì)偏低而使得它很難摻入到經(jīng)口攝入的組合物中。本發(fā)明的實(shí)施方式，通過提供具有改善的溶解速率的甜菊苷多晶型物和非晶型物，以及制備具有改善的溶解速率的甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法以滿足這些需要。簡言之，本發(fā)明示例性實(shí)施方案提供形成甜菊苷多晶型物和/或非晶型物的方法，以及由此制成的多晶型物和非晶型物。在特定的實(shí)施方案中，所述基本上純的甜菊苷組合物包括一種或一種以上的甜菊苷多晶型物。本發(fā)明其他示例性實(shí)施方案包括甜菊苷非晶型物和制備甜菊苷非晶型物的方法。在另一個(gè)實(shí)施方案中，提供了將一種多晶型型式轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N多晶型型式或非晶型型式的方法。下面詳細(xì)描述本發(fā)明示例性實(shí)施方案并以附圖15說明。如本文所用，詞語"基本上純的甜菊苷"指甜菊苷組合物包括以干重計(jì)至少約80%的甜菊苷。以另一種形式，所述基本上或基本上純的甜菊苷組合物包括以干重計(jì)至少約85%、至少約90%、至少約95%、或至少約98%的甜菊苷。如本文所用，"純度"指在粗制或純的甜菊苷組合物中存在的甜菊苷重量百分比。在一個(gè)實(shí)施方案中，甜菊苷組合物包括特別純的甜菊苷，以及該組合物中的其余物質(zhì)包括其他甜菊醇糖苷(steviolglycoside)或任何非甜菊苷成分的混合物。該組合物的純度可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法測定。一種這樣的方法包括高效液相色譜法(HPLC)。本領(lǐng)域技術(shù)人員也應(yīng)該理解樣品中的水分可影響純度測量的精確度。因此，尤其理想的是該組合物處于基本上干燥的狀態(tài)。如本文所用，基本上干燥的組合物包括最多到約10%重量的水分。如本文所用，詞語"基本上純的形式"指甜菊苷組合物包括至少約80%重量的一種特定甜菊苷多晶型物或非晶型物。以另一種形式，所述基本上純的甜菊苷組合物包括至少約85%、至少約90%、至少約95%、或至少約98%重量的特定甜菊苷多晶型物或非晶型物。鵬將,誠偶糊人們發(fā)現(xiàn)，至少兩種不同的甜菊苷多晶型物是由下述純化方法制得，包括型式1:甜菊苷水合物；和型式2:甜菊苷溶劑化物(甲醇溶劑化物2A和乙醇溶劑化物2B)。甜菊苷多晶型物第三種型式即無水甜菊苷也可由以下描述(未示出)的方法制得。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑和本文所描述的純化過程中的溫度都可影響在基本上純的甜菊苷組合物中所形成的多型體。多型性被定義為一種物質(zhì)以兩種或多種晶態(tài)存在的能力，晶態(tài)即在晶格中不同的分子排列和/或構(gòu)象。約30%的有機(jī)化合物被認(rèn)為表現(xiàn)出多型性(Zell等人，Tetrahedron56(36)6603-16(2000))。多型性在配制藥品、色素和染料、甜味劑、炸藥和農(nóng)業(yè)化學(xué)品中很重要。多型性可導(dǎo)致物理性質(zhì)如密度、熔點(diǎn)和溶解速率的變化。甜菊苷的多晶型可利用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的技術(shù)，粉末x-射線衍射(XRPD)對(duì)樣品進(jìn)行分析來識(shí)別。圖i4以散射強(qiáng)度相對(duì)于散射角2e曲線繪制了基本上純的甜菊苷多晶型物的粉末x-射線衍射掃描圖。樣品用采用CuKa輻射的ShimadzuXRD-6000型x-射線粉末衍射儀進(jìn)行XRPD分析。該儀器裝有以長細(xì)聚焦x-射線管。該管的電壓和電流分別被設(shè)定為40kV和40mA。其發(fā)射狹縫和散射狹縫被設(shè)定為1°，且接收狹縫被設(shè)定為O.15mm。使用碘化鈉閃爍探測儀進(jìn)行衍射輻射檢測。從2.5至4(T29以3°/min(0.4sec/0.02。步進(jìn)(st印))的速度進(jìn)行9_29連續(xù)掃描。分析硅標(biāo)準(zhǔn)溶液以檢查儀器對(duì)準(zhǔn)。用XRD-60000v.4.l儀器收集和分析數(shù)據(jù)。其圖樣顯示出反射的分辨率，表明這些樣品由結(jié)晶材料組成。圖1示出通過下述使用包含甲醇、乙醇或水的溶液的純化方法制備的甜菊苷多晶型物的代表性圖樣。在一個(gè)特定實(shí)施方案中，提供的甜菊苷多晶型物的x-射線衍射圖樣基本上類似于分別對(duì)應(yīng)于型式1、型式2A或型式2B的圖2、圖3或圖4的圖樣。在另一特定實(shí)施方案，提供的兩種或多種甜菊苷多晶型物混合物的x-射線衍射圖樣基本上類似于圖2、圖3或圖4的圖樣。除了所述至少3種甜菊苷多晶型物以外，本發(fā)明還提供一種x-射線衍射圖樣基本上類似于圖5的甜菊苷非晶型物。該甜菊苷非晶型物有一寬的非晶型模糊圓環(huán)以識(shí)別出該組合物為非晶型物。如本文所用，非晶型物指非晶性固體材料。由于與甜菊苷多晶型物相比，甜菊苷非晶型物溶解速率得到了改善，甜菊苷非晶型物尤其理想。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知，在配制固體和液體可甜化組合物時(shí)甜味劑組合物的溶解速率很重要，其非限制性實(shí)例包括口香糖(chewinggum)、烤制品和飲料。本發(fā)明還提供上文所鑒定的甜菊苷多晶型物和非晶型物的組合。因此，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，本發(fā)明所包含的甜菊苷組合物可根據(jù)所需甜菊苷組合物的性質(zhì)(例如溶解速率等)而被修飾以獲得所需至少一種甜菊苷多晶型物和/或非晶型物的混合物。例如，在某些實(shí)施方案中，甜菊苷組合物可包括一種特定的甜菊苷多晶型物或非晶型物，其存在量為約1%約100%重量、大于約25%重量、大于約50%重量或大于約75%重量。在另一實(shí)施方案中，提供基本上純的甜菊苷多晶型物或非晶型物，其包括的特定甜菊苷多晶型物或非晶型物存在量為大于約80%重量、大于約85%重量、大于約90%重量、大于約95%重量或大于約98%重量。本發(fā)明所提供的甜菊苷多晶型物或非晶型物也可與基本上純的萊鮑迪苷A多晶型物和/或非晶型物組合以獲得具有所需特性(例如，甜味、溶解速率等)的甜味劑組合物，所述基本上純的萊鮑迪苷A多晶型物和/或非晶型物公開于2006年6月19日提交的美國臨時(shí)申請No.60/805，216和2007年2月12日提交的美國臨時(shí)申請No.60/889，318中。例如，在一個(gè)特定的實(shí)施方案中，萊鮑迪苷A水合物可與甜菊苷水合物組合。在另一個(gè)特定的實(shí)施方案中，萊鮑迪苷A溶劑化物可與甜菊苷溶劑化物組合。因此，萊鮑迪苷A多晶型物和非晶型物的任何組合都可與本發(fā)明提供的甜菊苷多晶型物和非晶型物的任何組合進(jìn)行組合。艦舌甘嫌白勺誠本發(fā)明實(shí)施方案還提供純化甜菊苷以獲得基本上純的甜菊苷或基本上純的甜菊苷多晶型物或非晶型物的方法。按照某些實(shí)施方案，可商業(yè)購買的粗制甜菊苷產(chǎn)品所含甜菊苷純度為約40%約95%重量、約60%約85%重量或約70%約85%重量。可預(yù)見，粗制甜菊苷的原料形式是由甜菊植物中提取的，其可以與公開于2006年6月19日提交的美國臨時(shí)申請No.60/805，216和2007年2月12日提交的美國臨時(shí)申請No.60/889，318中的方法類似的方法進(jìn)行重結(jié)晶純化，所述公開在此以整體方式引入作為參考。在如圖6所示的一特定實(shí)施方案中，純化甜菊苷的方法110包括通過將粗制甜菊苷112和含水有機(jī)溶液或有機(jī)溶劑116組合114制備粗制甜菊苷溶液118。如本文所用，含水有機(jī)溶液116包括至少一種有機(jī)溶劑和任選的水的混合物。有機(jī)溶劑非限制性實(shí)例包括醇、丙酮和乙腈。如本文所用，醇指任何C1C5的直鏈、支鏈或環(huán)鏈的；取代的或未被取代的烷基、鏈烯基或炔基基團(tuán)與至少一個(gè)羥基基團(tuán)連接。醇的非限制性實(shí)例包括乙醇、甲醇、異丙醇、1_丙醇、1_丁醇、2_丁醇、叔丁醇、異丁醇和戊醇。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，可根據(jù)所需產(chǎn)量和純度來調(diào)節(jié)含水有機(jī)溶液116中的含水量。在特定實(shí)施方案中，含水有機(jī)溶液116可包括約5%約25%重量的水和至少一種有機(jī)溶劑，在另一實(shí)施方案，含水有機(jī)溶液116可包括的水為約5%約20%重量、約5%約15%重量、約5%約10%重量或約8%重量。在特定實(shí)施方案中，所述粗制甜菊苷溶液118包括的所述有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶液116和所述粗制甜菊苷112的重量比為，有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶液粗制甜菊苷=約10約4:約l。在另一示例性實(shí)施方案中，所述粗制甜菊苷溶液114包括的所述有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶液116和所述粗制甜菊苷112的重量比為，有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶液粗制甜菊苷=約5約3:約i。純化甜菊苷110的方法可進(jìn)一步包括將所述粗制甜菊苷溶液118加熱120至約720°C約80°C、約30°C約75°C、約40°C約70°C或其他位于這些溫度范圍內(nèi)的任何溫度范圍。在另一特定實(shí)施方案，粗制甜菊苷溶液118被加熱120約1分鐘約8小時(shí)。純化甜菊苷110的方法可進(jìn)一步包括將所述粗制甜菊苷溶液118冷卻122。在一特定實(shí)施方案，所述粗制甜菊苷溶液118被冷卻122至約fC約25°C。在另一特定實(shí)施方案，所述粗制甜菊苷溶液118被冷卻122約0.5約72小時(shí)。在一特定實(shí)施方案，在冷卻所述粗制甜菊苷溶液118時(shí)，在含水有機(jī)溶液或有機(jī)溶劑116中基本上純的甜菊苷組合物124被結(jié)晶126出來。所述基本上純的甜菊苷組合物124可包括的甜菊苷純度水平為以干重計(jì)大于約80%、大于約85%、大于約90%、大于約95%、大于約97%、大于約98%或大于約99%。純化甜菊苷110的方法任選地可進(jìn)一步包括用足以促進(jìn)所述甜菊苷結(jié)晶的基本上純的甜菊苷晶體130用量向所述粗制甜菊苷溶液118中加晶種128，從而形成基本上純的甜菊苷組合物124。足以促進(jìn)基本上純的甜菊苷組合物124結(jié)晶出來的甜菊苷用量包括在所述粗制甜菊苷溶液118中存在的甜菊苷約0.0001%約1%重量，且在另一實(shí)施方案中為在所述粗制甜菊苷溶液118中存在的甜菊苷約0.01%約1%重量。向所述粗制甜菊苷溶液118中加晶種128的合適溫度包括約18t:約35t:的溫度范圍。在另一實(shí)施方案中，純化甜菊苷110的方法任選地可進(jìn)一步包括分離132和沖洗134所述基本上純的甜菊苷組合物124。所述基本上純的甜菊苷組合物124可通過多種利用離心力的固液分離技術(shù)從所述含水有機(jī)溶液或有機(jī)溶劑116中分離132，所述固液分離技術(shù)包括但不限于垂直和水平多孔籃式離心機(jī)、轉(zhuǎn)鼓式離心機(jī)(Solidbowlcentrifuge)、沉降式離心機(jī)、刮刀卸料離心機(jī)、活塞推料離心機(jī)、翻袋式離心機(jī)(Heinkeltypecentrifuge)、盤式堆集離心機(jī)和旋風(fēng)分離。此外，促進(jìn)分離的方法可以是加壓、真空和重力過濾法中的任一種，其包括但不限于，使用皮帶、轉(zhuǎn)鼓、納許型(皿tschetype)、葉片、板、羅森蒙得型(Rosenm皿dtype)、Sparkler型及袋濾器和壓濾器。甜菊苷固液分離裝置的操作可為連續(xù)、半連續(xù)或分批模式。該基本上純的甜菊苷組合物124還可在分離裝置上使用各種含水有機(jī)溶劑136和其混合物洗滌134。該基本上純的甜菊苷組合物124可在分離裝置上使用任何數(shù)目的氣體，包括但不限于氮和氬，蒸發(fā)殘留的液體溶劑以達(dá)到部分或完全干燥。該基本上純的甜菊苷組合物124可使用液體、氣體或機(jī)械裝置通過溶解該固體或保持該固體形式自動(dòng)或手動(dòng)地從分離裝置中取出。另一示例性實(shí)施方案中，純化甜菊苷110的方法還包括干燥138該基本上純的甜菊苷組合物124。適合的干燥138該基本上純的甜菊苷組合物124的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，且包括但不限于，使用旋轉(zhuǎn)真空干燥器、流化床式干燥器、旋轉(zhuǎn)隧式干燥器、熱板式干燥器、盤式干燥器、Nauta式干燥器、噴霧干燥器、閃蒸干燥器、微米干燥器、圓盤式干燥器、高和低速槳式干燥器和微波干燥器。在一示例性實(shí)施方案中，在約4(TC約6(TC使用氮或氬沖洗氣清洗約1100小時(shí)以移除殘留溶劑136，從而干燥該基本上純的甜菊苷組合物124。若需要進(jìn)一步純化，則可重復(fù)本發(fā)明所述的純化甜菊苷110的方法或可使用替代的純化方法如柱層析(未示出)將該基本上純的甜菊苷組合物124進(jìn)一步純化。制備甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法人們發(fā)現(xiàn)，不同的甜菊苷多晶型物和非晶型物可用上述純化方法和下述的方法獲得。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，本文所描述的含水有機(jī)溶液和純化過程中的溫度都可影響可在基本上純的甜菊苷組合物中存在的最終多晶型物或非晶型物。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，可以將甜菊苷多晶型物或非晶型物的一種型式轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N不同的甜菊苷多晶型物或非晶型物型式(圖7)。例如，通過在約室溫于無水溶劑中槳化晶型1約2約16小時(shí)或在約回流溫度于無水溶劑中漿化約0.5約3小時(shí)，型式1可轉(zhuǎn)變?yōu)樾褪?。通過在約室溫于水中漿化多晶型約16小時(shí)或在約回流溫度于水中槳化約2約3小時(shí)，型式2可轉(zhuǎn)變?yōu)樾褪?。在干燥過程中型式2可轉(zhuǎn)變?yōu)樾褪?，但是，提高所述干燥溫度至高于約7(TC或延長基本上純的甜菊苷組合物的干燥時(shí)間都會(huì)導(dǎo)致該甜菊苷的分解。通過添加水，型式2可轉(zhuǎn)變?yōu)樾褪?。通過從無水有機(jī)溶液中將型式1或型式2沉淀可制成無水型型式。通過下述將產(chǎn)生非晶型物的任何方法，可將型式1和型式2轉(zhuǎn)變?yōu)樾褪?。所述非晶型物可在甜菊苷開始結(jié)晶期間得到或使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法直接從任何單獨(dú)的多晶型物或多晶型物組合中獲得。另外，所述非晶型物可從粗制甜菊苷組合物或使用本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的純化技術(shù)獲得的基本上純的甜菊苷組合物中獲得。制備甜菊苷非晶型物方法的非限制性實(shí)例包括對(duì)甜菊苷組合物使用球磨法、沉淀法、凍干法(lyophilization)、低溫研磨法(cryogrinding)和噴霧干燥法。在一特定實(shí)施方案，所述非晶型物可通過對(duì)所述甜菊苷組合物溶液實(shí)施噴霧干燥法而由甜菊苷組合物制備。簡言之，噴霧干燥法通常需要通過喂料泵將甜菊苷溶液送入噴嘴霧化器中，在恒定流速氮?dú)?空氣氣流的協(xié)助下噴嘴霧化器將該溶液霧化為小霧滴。在干燥室內(nèi)，于可控溫度和氣流條件下水分從霧滴中被蒸發(fā)，從而形成甜菊苷非晶型物的干燥顆粒。所述非晶型甜菊苷的純度取決于該甜菊苷溶液的純度。在另一特定實(shí)施方案，所述非晶型物可通過將甜菊苷非-非晶型物磨成粉而由甜菊苷組合物獲得。磨粉這一機(jī)械加工過程被認(rèn)為會(huì)產(chǎn)生局部區(qū)域能量從而將甜菊苷的晶型物轉(zhuǎn)變?yōu)樗龇蔷臀?。磨粉技術(shù)的示例性實(shí)例包括球磨法或空氣噴射磨粉法，這兩項(xiàng)技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。簡言之，將甜菊苷非-非晶型物以有效的速度磨制一段時(shí)間從而形成非晶型甜菊苷。這些參數(shù)可由本領(lǐng)域技術(shù)人員確定。盡管也可使用其它的磨制時(shí)間長度，典型的磨制時(shí)間長度范圍可為約15分鐘約2小時(shí)。通過下列實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，這些實(shí)施例不應(yīng)理解為以任何方式限制本發(fā)明的范圍。相反，顯而易見的是，閱讀本文后本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)想到在不脫離本發(fā)明的實(shí)質(zhì)和/或所附權(quán)利要求保護(hù)范圍的情況下，可實(shí)施各種本發(fā)明的其他實(shí)施方案、修改方案和等同替代方案。除非另有說明，百分比(％)指重量百分比。下述獲得的所述甜菊苷組合物的純度使用高效液相色譜(HPLC)法確定。進(jìn)行HPLC分析的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。簡言之，該HPLC分析是于3(TC在ZORBAXNH2柱(150x4.6mm，5iim)上實(shí)施的。其流動(dòng)相包括20%的緩沖液溶液和80%的乙腈、流速為1.5mL/min。每個(gè)樣品以12yL注入、一式兩份，在210nm(4nm帶寬)以260nm(100nm帶寬)為參照使用紫外檢測器對(duì)樣品進(jìn)行分析。該HPLC法分析所需的運(yùn)行時(shí)間為4060min。將O.125g醋酸銨和125iiL冰醋酸溶解于1升水中，制備0.0125%醋酸和0.0125%醋酸銨的緩沖溶液。將該緩沖液和乙腈混合以制備流動(dòng)相，從而得到4.5+0.5min甜菊苷保留時(shí)間。最初為約20%的緩沖液(200mL緩沖液和800mL乙腈)。增加1%2%9的乙腈用量可增加甜菊苷保留時(shí)間約lmin。將750mL乙腈和250mL緩沖液混合以制備稀釋溶液。甜菊苷標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備為，將12.5±0.5mg(記錄到最接近0.lmg)甜菊苷標(biāo)準(zhǔn)品稀釋于5mL該稀釋溶液以制成約2500mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液(儲(chǔ)備液A)(校正水分和純度)。然后將該甜菊苷標(biāo)準(zhǔn)液稀釋，用ImL儲(chǔ)備液A稀釋為10mL稀釋液制成250mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液(儲(chǔ)備液B)，而儲(chǔ)備液被稀釋至最終濃度范圍為2.550mg/L。用卡爾-費(fèi)休(Karl-Fisher)分析法測定水分含量，每次按照其質(zhì)量分析報(bào)告根據(jù)溶劑的純度制備標(biāo)準(zhǔn)溶液并進(jìn)行校正。下表提供甜菊苷和其他甜菊醇糖苷保留時(shí)間的指導(dǎo)。但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，這些保留時(shí)間可以根據(jù)需要修正。表1:HPLC法保留時(shí)間的指導(dǎo)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>使用MettlerToledoDL39卡爾-費(fèi)休滴定器也對(duì)下述獲得的甜菊苷組合物進(jìn)行卡爾_費(fèi)休分析，測定其含水量。約1156mg樣品被溶解于約3.53.7g無水Hydranal-CoulomatAD陽極液中。約0.91.Og最終溶液被置于內(nèi)有Hydranal-CoulomatAD陽極液的KF滴定杯中混合10s(秒)以確保溶解。樣品的滴定使用發(fā)生器電極法，該電極通過電化學(xué)氧化產(chǎn)生碘21—->I2+2e。這些實(shí)驗(yàn)均重復(fù)三次以確保可再現(xiàn)性。這三種甜菊苷多晶型物和該甜菊苷非晶型物的材料特性歸納于下表中表2:甜菊苷多晶型物和非晶型物<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>具體實(shí)施例方式實(shí)施例A粗制甜菊苷源自市購。雜質(zhì)(76.8%甜菊苷、8.24%萊鮑迪苷八、2.38%甜菊雙糖苷、0.109%萊鮑迪苷D、4.133%其它甜菊醇糖苷、0.293%萊鮑迪苷B、2.38%甜菊雙糖苷)基于干燥(含水量為3.4%)狀態(tài)使用HPLC鑒定和定量。將粗制甜菊苷(76%，lg)懸浮于30.0mL甲醇(99%)，加溫至45°C同時(shí)連續(xù)攪拌10min。一滴一滴(2.5mL)地將水加入，直至該粗制材料被完全溶解且溶液清亮。趁熱將該清亮溶液過濾，然后冷卻至室溫過夜。將沉淀的固體過濾并用甲醇(2x34mL，99%)沖洗，在減壓(20mm)、5(TC真空爐中干燥34h(小時(shí))，從而產(chǎn)生0.588g干燥(含水量2.63%)的純化甜菊苷(HPLC測定〉95X)。XRPD結(jié)果，如圖3所示，表明該結(jié)晶甜菊苷是一種不同的晶型。實(shí)施例B將市購的粗制甜菊苷(76%，5g)懸浮于100mL乙醇(99.96%)并加溫至69。C。該甜菊苷5min內(nèi)溶解。該溶液再煮沸10min并允許其冷卻至室溫2天。將該結(jié)晶的甜菊苷過濾并在減壓(20mm)、485(TC真空爐中干燥3.5h，從而產(chǎn)生73.00%產(chǎn)量的干燥(含水量3.55%)的純甜菊苷結(jié)晶(HPLC測定〉97.0X)。XRPD結(jié)果，如圖4所示，表明該結(jié)晶甜菊苷是一種與實(shí)施例A不同的晶型。實(shí)施例C將源自實(shí)施例B甜菊苷(>97%，2g)溶解于100mL水中同時(shí)于44。C攪拌lmin。該溶液被允許冷卻至室溫并留置1天。將該沉淀過濾并在減壓(20mm)、6(TC真空爐中干燥2處，從而產(chǎn)生95%產(chǎn)量的干燥(含水量5.33%)的甜菊苷結(jié)晶(HPLC測定〉97.0%)。XRPD結(jié)果，如圖2所示，表明該結(jié)晶甜菊苷是一種與實(shí)施例A或B不同的晶型。實(shí)施例D用源自實(shí)施例B的結(jié)晶甜菊苷制備濃縮液，將該結(jié)晶甜菊苷5.Og溶解于200mL水溶液中并加熱至405(TC直至溶液清亮。用Lab-Plant噴霧干燥器SD-04型儀器(英國西約克郡Lab-Plant公司)將該熱的澄清溶液噴霧干燥。通過喂料泵將該溶液送入噴嘴霧化器，在恒定流速氮?dú)?空氣氣流的協(xié)助下該霧化器將該甜菊苷溶液霧化為小霧滴。在干燥室內(nèi)，于受控溫度(約90約97°C)和氣流條件下液滴中的水分被蒸發(fā)，從而形成干燥顆粒。這些干燥粉末不斷地從干燥室中排除并收集于干凈的干燥收集瓶中，從而得到98%產(chǎn)量的干燥(含水量3.20%)的純甜菊苷(HPLC測定>97%)。XRPD結(jié)果，如圖5所示，表明該甜菊苷是一種非晶型物。盡管本發(fā)明已對(duì)其特定實(shí)施方案作了詳細(xì)描述，應(yīng)該理解，本領(lǐng)域技術(shù)人員在理解了上述描述后可容易地想出這些實(shí)施方案的替代、改變和等同替換方案。因此，本發(fā)明的范圍應(yīng)由所附權(quán)利要求及其任何等同替代物來評(píng)定'權(quán)利要求一種純化甜菊苷的方法，其包括如下步驟將粗制甜菊苷和有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑組合以制成甜菊苷溶液，所述含水有機(jī)溶劑所含水為約5％～約25％重量；以及由所述甜菊苷溶液經(jīng)單一步驟結(jié)晶基本上純的甜菊苷組合物，該甜菊苷組合物包括以干重計(jì)純度大于約95％的甜菊苷。2.權(quán)利要求1的方法，還包括加熱所述甜菊苷溶液的步驟。3.權(quán)利要求2的方法，還包括冷卻所述甜菊苷溶液的步驟。4.權(quán)利要求1的方法，其中在所述單一結(jié)晶步驟中的甜菊苷溶液經(jīng)攪拌或未經(jīng)攪拌。5.權(quán)利要求l的方法，還包括在合適的溫度下使用足以促進(jìn)甜菊苷結(jié)晶的甜菊苷用量向所述甜菊苷溶液中加晶種(任選)的步驟。6.權(quán)利要求1的方法，還包括分離和沖洗所述基本上純的甜菊苷組合物的步驟。7.權(quán)利要求6的方法，還包括干燥所述基本上純的甜菊苷組合物的步驟。8.權(quán)利要求l的方法，還包括在有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑中漿化所述基本上純的甜菊苷組合物的步驟。9.權(quán)利要求8的方法，還包括分離和沖洗所述基本上純的甜菊苷組合物的步驟。10.權(quán)利要求9的方法，還包括干燥所述基本上純的甜菊苷組合物的步驟。11.權(quán)利要求1的方法，其中所述含水有機(jī)溶劑包括至少一種有機(jī)溶劑和水的混合物。12.權(quán)利要求ll的方法，其中至少一種有機(jī)溶劑包括醇。13.權(quán)利要求12的方法，其中所述醇包括乙醇。14.權(quán)利要求12的方法，其中所述醇包括甲醇。15.權(quán)利要求ll的方法，其中所述至少一種含水有機(jī)溶劑包括有機(jī)溶劑，該有機(jī)溶劑選自丙酮、乙腈、甲醇、乙醇、l-丙醇、異丙醇、l-丁醇、2-丁醇、叔丁醇、異丁醇、及其混合物。16.權(quán)利要求l的方法，其中所述有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑和所述粗制甜菊苷在所述甜菊苷溶液中存在的重量比為，含水有機(jī)溶劑粗制甜菊苷=約4約io份i份。17.權(quán)利要求1的方法，其中所述有機(jī)溶劑或含水有機(jī)溶劑和所述粗制甜菊苷在所述甜菊苷溶液中存在的重量比為，含水有機(jī)溶劑粗制甜菊苷=約3約5份i份。18.權(quán)利要求1的方法，其中含水有機(jī)溶劑所含水為約10%約25%重量。19.權(quán)利要求1的方法，其中所述粗制甜菊苷混合物包括純度為約40%約95%重量的甜菊苷。20.權(quán)利要求1的方法，其中所述粗制甜菊苷混合物包括純度為約60%約85%重量的甜菊苷。21.權(quán)利要求1的方法，其中所述粗制甜菊苷混合物包括純度為約70%約85%重量的甜菊苷。22.權(quán)利要求1的方法，其中所述方法是在約室溫下實(shí)施的。23.權(quán)利要求2的方法，其中所述加熱甜菊苷溶液的步驟包括將所述甜菊苷溶液加熱至約2(TC約40°C。24.權(quán)利要求2的方法，其中所述加熱甜菊苷溶液的步驟包括將所述甜菊苷溶液加熱至約4(TC約60°C。25.權(quán)利要求2的方法，其中所述加熱甜菊苷溶液的步驟包括將所述甜菊苷溶液加熱至約回流溫度。26.權(quán)利要求3的方法，其中所述冷卻甜菊苷溶液的步驟包括將所述甜菊苷溶液冷卻至約4t:約25°C。27.權(quán)利要求3的方法，其中所述冷卻甜菊苷溶液的步驟包括將所述甜菊苷溶液冷卻約0.5約24小時(shí)。28.權(quán)利要求l的方法，其中所述基本上純的甜菊苷產(chǎn)物包括以干重計(jì)純度大于約97%的甜菊苷。29.權(quán)利要求1的方法，其中所述基本上純的甜菊苷產(chǎn)物包括以干重計(jì)純度大于約98%的甜菊苷。30.權(quán)利要求l的方法，其中所述基本上純的甜菊苷產(chǎn)物包括以干重計(jì)純度大于約99%的甜菊苷。31.權(quán)利要求1的方法，還包括如下步驟加熱所述甜菊苷溶液；冷卻所述甜菊苷溶液；分離和沖洗基本上純的甜菊苷組合物；以及干燥所述基本上純的甜菊苷組合物。32.權(quán)利要求1的方法，還包括形成所述基本上純的甜菊苷組合物非晶型物的步驟。33.權(quán)利要求31的方法，其中形成所述基本上純的甜菊苷組合物非晶型物的步驟包括選自球磨法、結(jié)晶法、凍干法、低溫研磨法和噴霧干燥法的方法。34.基本上純的甜菊苷組合物，其包括具有基本上類似圖2的X射線衍射圖樣的多晶型物。35.基本上純的甜菊苷組合物，其包括具有基本上類似圖3的X射線衍射圖樣的多晶型物。36.基本上純的甜菊苷組合物，其包括具有基本上類似圖4的X射線衍射圖樣的多晶型物。37.基本上純的甜菊苷組合物，其包括具有基本上類似圖5的X射線衍射圖樣的非晶型物。38.—種包括甜菊苷多晶型物和/或非晶型物組合的組合物，所述組合包括選自具有基本上類似圖2的X射線衍射圖樣的多晶型物、具有基本上類似圖3的X射線衍射圖樣的多晶型物、具有基本上類似圖4的X射線衍射圖樣的多晶型物、以及具有基本上類似圖5的X射線衍射圖樣的非晶型物的多種甜菊苷多晶型物和/或非晶型物。39.按照權(quán)利要求1所述方法制成的基本上純的甜菊苷組合物。全文摘要本發(fā)明各示例性實(shí)施方案包括一種純化基本上為粗制甜菊苷的方法，制備甜菊苷多晶型物和非晶型物的方法以及由此制成的甜菊苷多晶型物和非晶型物。文檔編號(hào)A23L1/236GK101765605SQ200880017024公開日2010年6月30日申請日期2008年5月16日優(yōu)先權(quán)日2007年5月21日發(fā)明者英德拉·普拉卡什,馬尼·厄普雷提申請人:可口可樂公司